Nghiên cứu mức độ kháng thể dịch thể kháng mycobacterium tuberculosis ở cộng đồng người việt nam và một số yếu tố liên quan

BÁO CÁO KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU MỨC ĐỘ KHÁNG THỂ DỊCH THỂ KHÁNG Mycobacterium tuberculosis ỡ CỘNG ĐỒNG NGƯỜI VIỆT NAM VÀ MỘT SỐ YẾU TỐ LIÊN QUAN Chủ nhiệm đề tài: PGS TS Hồ Minh Lý Cơ quan chủ trì đẻ tài: Viên Vệ sinh dịch tế trung ương 6686 04/12/2007 HÀ NỘI, 2005 BÁO CÁO KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU MỨC ĐỘ KHÁNG THỂ DỊCH THỂ KHÁNG Mycobacterium tuberculosis ỡ CỘNG ĐỒNG NGƯỜI VIỆT NAM VÀ MỘT SỐ YẾU TỐ LIÊN QUAN Chủ nhiệm đề tài: PGS TS Hỏ Minh Lý Co quan chi tri dé tai: Vien Ve sinh dịch tế trung ương Cap quan Iy: Bo Y té Ma so dé tai (nếu có) : Thời gian thực : tir thang 1/2002 đến tháng 12/2004 Tổng kinh phí thực để tài: 141 triệu đồng Trong đó, kinh phíSNKH : I4l triệu đồng HÀ NỘI, 2005 BÁO CÁO KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ Tên để tà: “Nghiên cứu mức độ kháng thể dịch thể kháng Mycobacterium tuberculosis cong déng người Việt nam số yếu tố liên quan” a ee ee Chủ nhiệm đẻ tài: PGS.TS Hồ Minh Lý Cơ quan chủ trì đề tài: Viện Vệ sinh dịch tế trung ương Cơ quan quản lý đề tài: Bộ Y tế Thư ký đề tài : Phó chủ nhiệm để tài Danh sách người thực : TT Ho va ten Hồng Thuỷ Long Phạm Ngọc Đính HồMinhlý Đặng Đức Phú _ Đặng Đức Anh Khương AnhTuấn 10 11 12 13 14 Nguyễn Vân Anh NguyénKimTrioh Trần Thanh Hoa Phạm KimLiên Khổng Thế Hạnh Văn Bầu NguyễnNgọclan Lê Ánh Thị Chức danh GSTS PGS.TS PGS.TS GS.TS TS.CN ThsBS Ths.CN KTV CN BS BS BS TS KTV Nơi công tác Viện Vệ Viện Vệ Viện Vệ Viện Vệ Viện Vệ Viện CL sinh Dịchtế sinh Dịch tế sinh Dịchtế sinh Dịchtế sinh Dịchtế & CS, Bộ Y TW TW TW TW TW tế 'Viện Vệ sinh Dịch tế TW Viện Vệ sinh Dịch tế TW Viện Vệ sinh Dịch tế TW Viện Vệ sinh Dịch tế TW Phòng QY, Bo TLBF Cục Quân Y TT Lao PNT, TP HCM Viện Vệ sinh Dịch tế TW Thời gian thực để tài : từ tháng 1/2002 đến 12/2004 BCKQNC-C-BYT BANG CHU CAI VIET TAT CDC Acid Fast Bacilus (Trực khuẩn kháng côn, axit) Acquired Immunodeficiency Syndrome (Hi chimg thiểu hụt miễn địch mắc phải) Bệnh nhân lao phổi Centre for Diseasc Control (Trung tâm kiểm soát bệnh) DOTS Direct Observe Treatmenfs (Điều trị có giám sát trực AIDS BNLP tiếp) HIV Enzyme Linked Immuno- Sorbent Assay (K¥ thuat miéa địch gắn men) Human Immuoodeficiency Virus (Virut gây thiếu hụt miễn dịch người) Kháng nguyên LAM Lipoarabinomannan LP Lao phổi MS Mã số oD Optical Density (Mật độ quang học) PCR Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuối polymeraza) ELISA PPD Purified Derivative Protein (Protein chiết xuất tinh khiết) TCYTTG Tổ chức Y tế Thế giới XQ XK —quang BCKQNC-C-BYT MỤC LỤC Trang PHAN A TOM TAT CAC KET QUA NOIBAT CUA DE TAL PHANB NOL DUNG BAO CÁO CHI TIẾT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ ĐẶT VẤN ĐỀ TONG QUAN 1.1 Tinh hình bệnh lao 1.1.1 Tình hình bệnh lao giới 9 1.1.2 Tình hình bệnh lao Việt nam 10 1.2 Yếu tố nguy tình hình nhiễm, mắc bệnh lao 12.1 ut Yếutốnguy 1.2.2 Tình hình nhiễm mắc lao 15 1.3 Vikhuda Mycobacterium 15 14 — Miễn địch học bệnh lao 16 1.4.1 Miễn dịch qua trung gian tế bào 16 1.4.2 Miễn dịch dịch thể bệnh lao 17 1.4.3 Kỹ thuật huyết học chẩn đoán bệnh lao 1.5 Khéng aguyén M tuberculosis siêu nghiên sử dụng chẩn đoáu huyết học sàng lọc bệnh lao 19 16 _ Chuẩn hoá kỹ thugt ELISA sir dyog khang aguyéa M tuberculosis siêu nghiễn chẩn đốn bệnh lao 61 Nơng độ kháng nguyên tối ưu 1.6.2 Độ pha loãng huyết tối ưu 21 2L 2L BCKQNC-C-BYT 1.63 Tính ổn định ELISA sử dụng kháng nguyên siêu nghiền 2 VAT LIEU VA PHUGNG PHAP 23 2.1 — Đốitượng nghiên cứu 2.1.1 Nhémegng déng khoé maah 23 ”% 2.1.2 Nhóm bệnh nhân lao 2.2 Vật liệu nghiên cứu 23 2.3 — Phương pháp nghiên cứu 25 2.3.1 Phương pháp chế kháng nguyêu siêu nghiễn tir M.tuberculasis 25 2.32 25 2.3.3 Quy trình thực ELISA sử dụng kháng nguyên |Z‡ubercdosis siêu nghiễn Quy trình thực ELISA sử dụng KIT hãng Lionex (Aah) — 2.3.4 Phương pháp tiêm da (Phản ứng Mantoux) % 2.3.5 26 Phương pháp PCR xác định trực tiếp ADN M tuberculosis bệnh phẩm đờm 2.4 — Phương pháp xử lý số liệu 26 28 KET QUA NGHIENCUU 27 3.1 — Mức độ kháng thể dịchthể kháng đạc hiệu M tuberculosis tong — 28 huyết nhóm cộng đồng nghiên cứu 3.1.1 Mức độ kháng thể IgG IgM huyết đặc hiệu nhóm 28 cộng đồng đâu cư khoẻ mạnh bình thường, 3.1.2 Mức độ kháng thể IgG IgM huyết đặc hiệu nhóm — 29 đội 3.1.3 Mức độ kháng thể IgG IgM huyết đặc hiệu với + M tuberculosis cia bab abaa lao phổi 3.1.4 - So sánh mức độ kháng thể IgG đặc hiệu nhóm cộng — 33 nghiên cứu 3.1.5 Kháng thể IgA huyết kháng kháng nguyêu M/¿brcrd2sisð 36 nhóm đội bệnh nhân lao BCKQNC-C-BYT 3.2 Mốiliên quan mức độ kháng thể IgG IgM đặc hiệu M tuberculosis với số yếu tố địch tễ học 38 3.2.1 Yếu tố địa lý 38 3.2.2 Yếu tố tuổi: Mức độ kháng thể IgG IgM huyết đạc hiệu — đối tượng nghiên cứu theo tuổi 3⁄2 _ Điều kiện sinh hoạt xã hội mức độ kháng thể IgG JgM huyết — đặc hiệu nhóm cộng đồng 3.2.4 Phâu tích mức độ kháng thể IgG IgM huyết đặc hiệu — nhóm đội học viêu theo kết phẫu ứng Manioux 3.3 Bước đầu xác định theo đối nhóm đối tượng khoẻ mạnh có đấp — (tag ELISA đương tính với IgG hoac IgM 41 BÀN LUẬN 49 4.1 Mức lu banh cita IgG, IgM va IgA khdng M tuberculosis huyết nhóm cộng đồng nghiên cứu Mối liên quan mức độ kháng thể IgG, [gM huyết đặc hiệu khéag M tuberculosis siêu nghiên với số yếu tố dịch tế 50 Bước đầu xác định theo dõi nhóm đối tượng khoẻ mạnh có đáp ứng ELISA dương tính với IgG và/hoặc IgM nhằm phát sớm quản lý nguồn lây 60 KẾT LUẬN a TALLIBU THAM KHAO 66 4.2 42 44 46 56 học 4.3 BCKQNC-C-BYT PHAN A TÓM TẮT CÁC KẾT QUẢ NỔI BẬT CỦA ĐỀ TÀI BCKQNC-C-BYT KẾT QUẢ NỔI BẬT CỦA ĐỀ TÀI 1.1 Đóng góp đẻ tài + - Để tài nghiên cứu cơng trình đâu tiên đánh giá mức độ kháng thể IgG, IgM IgA huyết kháng dic higu khéag aguyéa Mtubercwosis cla mot sO nhóm cộng đồng người khoẻ mạnh bệnh nhân lao phổi méi phương pháp miễn địch gắn men (ELISA) sử dụng kháng nguyên siêu nghiển chiết xuất từ Maubercslasis bước đầu xác định mối liên quan số yếu tố địch tế học mức độ kháng thể IgG huyết đặc hiệu #Z‡zberczlasis cộng đồng - Thông qua kết thu được, đề tài để xuất phương pháp có tính khả th, góp phân đánh giá tình hình nhiễm lao cộng đồng dàn cư số globulin miễn dịch đặc hiệu với kháng nguyên lao chẩn đoán sàng lọc bệnh nhận lao a, Hiệu đào tạo, - Để tài nghiên cứu cung cấp tài liệu số liệu dùng để tham khảo đo tạo nghiên cứu vẻ tình hình mắc, nhiễm lao cộng đồng, yếu tố nguy liên quan đến mức độ nhiễm lao cộng đồng - Để tài nghiên cứu kết đạt nội dung 01 luận vã tốt nghiệp đại học bảo vệ thành công nội dung cho 01 luận ẩn tiến sỹ b, Hiệu kinh tế xã hội - Để tài đánh giá mức độ kháng thể IgG, IgM IgA huyết đặc higu Mruberculosis & cong đồng người khoẻ mạnh bình thường bệnh nhân lao, xác định mối liên quan với số yếu tố dịch tễ học, đóng góp cho việc hoạch định chiến lược phịng ngừa kiểm sốt tình hình nhiễm, rắc lao cộng đồng, có phát sớm, kiểm sốt hiệu trường hợp bệnh BCKQNC-C-BYT 1.2 Kết cụ thể - 90% cộng đồng người khoẻ mạnh bình thường có mức độ kháng thể dịch thể ngưỡng bình thường (giá trị OD trung bình < 0,45, giá trị ngưỡng xác định cho cộng đồng Việt nam sử dụng hệ thống ELISA kháng nguyên siêu nghiên chiết xuất từ jZ#uberculosiz), thấp có Ý nghĩa thống kê (p