Thử nghiệm sản xuất stroma nhộng trùng thảo cordycep militaris

BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP HCM TRUNG TÂM NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU THỬ NGHIỆM SẢN XUẤT STROMA NHỘNG TRÙNG THẢO (Cordycep militaris) KS Nguyễn Thị Ngọc Sương CN Mai Thị Hạnh Phúc Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 01/2018 BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP HCM TRUNG TÂM NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU (Đã chỉnh sửa theo góp ý Hội đờng nghiệm thu) THỬ NGHIỆM SẢN XUẤT STROMA NHỘNG TRÙNG THẢO (Cordycep militaris) CƠ QUAN CHỦ TRÌ (Ký tên, đóng dấu xác nhận) CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI (Ký tên) Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 01/2018 Nh ng trùng th o (Cordycep militaris) m t loài n c li u quý Nh ng trùng th o t nhiên có s nghiên c u nuôi tr ng in vitro ng th t o ngu n cung c D a k t qu nghiên c u công th c môi trùng th d o sát iv t loài n m c c li u d i ng nuôi tr ng stroma Nh ng ng c a lo i d ch chi t khoai tây, b c t stroma Nh ng trùng th o Qua theo dõi ghi nh n k t qu cho th y công th ng M2 có thành ph n: g o l c 30 g, yeast extract 0,3771 g, 5,5816 g dung d ng 45 ml có thành ph n CaCl2 0,1 g/l c d a 7,5%, d ch chi t khoai tây 7,5% tr nh ng khô, ng cordycepin, adenosine, polysaccharide, ergosterol l 75,7 g/ t; mg/g K t qu t stroma, t t; 6,286 mg/g; 4,280 mg/g; 34,25%; 2,184 cho th y nuôi tr ng cordycepin, adenosine c a stroma Nh ng trùng th o không chênh l ch nhi u so v i k t qu c c a nghiên c su t 126,31% Ti n hành s n xu t th nghi m công th c ng M2 công th 2015 cho th n 30 tri t ng k t qu c a nghiên c c 30 kg stroma Nh ng trùng th o tháng c n chi phí t u hao tài s n) Trang i BM20-QT.QLKH M Trang TÓM T T .i M C L C .ii DANH SÁCH CÁC CH VI T T T iv DA v DANH SÁCH HÌNH vi TÀI M U NG QUAN .3 1.1 Gi i thi u v Cordyceps militaris 1.1.1 Phân lo i n m Cordyceps militaris 1.1.2 m sinh h c n m Cordyceps militaris 1.2 M t s ho t ch t sinh h c c a Cordyceps 1.2.1 Nucleotides 1.2.2 Sterol 1.2.3 Protein amino acid 1.2.4 Acid béo 1.2.5 Polysaccharide 1.3 M t s tác d c lý c a n m Cordyceps 1.3.1 Hi u qu ch 1.3.2 u hòa mi n d ch 1.3.3 ng b o v gan 1.3.4 ng b o v th n 1.4 Các y u t 1.4.1 Nhu c n s t o thành stroma C militaris ng cho s hình thành phát tri n stroma 1.4.2 ng c a y u t ng .9 1.5 Nuôi tr ng Cordyceps militaris nguyên li u khác 10 1.6 K t qu nghiên c Error! Bookmark not defined 1.7 K t qu nghiên c Error! Bookmark not defined I DUNG NGHIÊN C U 14 Trang ii BM20-QT.QLKH 2.1 Th m nghiên c u 14 2.1.1 Th i gian th c hi n: 14 2.1.2 m 14 2.2 V t li u hóa ch t 14 2.2.1 V t li u 14 2.2.2 Hóa ch t 14 2.3 N i dung nghiên c u 14 2.4 c hi n x lý th ng kê 14 2.4.1 th N i dung 1: Hoàn thi n công th ng nuôi tr ng stroma Nh ng trùng nghiên c 14 2.4.1.1 Thí nghi m 1: Kh o sát lo i d ch chi t phù h p cho vi c nuôi tr ng Nh ng trùng th o 14 2.4.1.2 Thí nghi ng d ch chi t t n công th c ng 16 2.4.2 N i dung 2:Th nghi m s n xu t Nh ng trùng th o 18 K T QU TH O LU N 22 3.1 th N i dung 1: Hồn thi n cơng th ng ni tr ng stroma Nh ng trùng nghiên c 22 3.1.1 th o Thí nghi m 1: Kh o sát lo i d ch chi t phù h p cho vi c ni tr ng Nh ng trùng 22 3.1.2 Thí nghi ng 24 3.2 Ch ng d ch chi t t n công th c môi N i dung 2: Th nghi m s n xu t Nh ng trùng th o 32 T LU N VÀ KI N NGH 49 4.1 K t lu n 49 4.2 Ki n ngh 49 TÀI LI U THAM KH O 50 PH L C 56 Trang iii BM20-QT.QLKH Vi t t t Thu t ng ctv PGA Potato glucose agar PGB Potato glucose broth Trang iv BM20-QT.QLKH Trang 3.1 3.2 Tr t stroma c a Nh ng trùng th o hi u su t sinh h c 22 ng stroma khô c a Nh ng trùng th o 23 3.3 ng c a stroma Nh ng trùng th o môi ng khác 3.4 3.5 Tr 3.6 25 t stroma hi u su t sinh h c c a Nh ng trùng th o 29 ng stroma khô c a Nh ng trùng th o 29 ng m t s ho t ch t sinh h c có stroma Nh ng trùng th o 3.7 t, tr s 3.8 30 ng stroma khô, thành ph ng m t c ch t stroma Nh ng trùng th o 32 T ng chi phí cho s n xu t 30 kg stroma Nh ng trùng th o tháng (1600 bình) 40 Trang v BM20-QT.QLKH DANH SÁCH HÌNH Trang 3.1 Stroma Nh ng trùng th 43 3.2 Stroma Nh ng trùng th o khô 43 3.3 Mơ hình Nh ng trùng th o ni tr ng bình th y tinh 43 3.4 Mơ hình Nh ng trùng th o ni tr ng h p nh a Error! Bookmark not defined 3.5 Quy trình s n xu t Nh ng trùng th o 21 Trang vi BM20-QT.QLKH tài/d án: Th nghi m s n xu t stroma Nh ng trùng th o (Cordycep militaris) Ch nhi tài/d án: Nguy n Th Ng - Mai Th H nh Phúc trì: Trung tâm Nghiên c u Phát tri n Nông nghi p Công ngh cao Th i gian th c hi n: 01/2017 - 12/2017 c t: 213.949 ng M c tiêu: Hồn thi n cơng th ng d ng vào s n xu t th c t N tài: N i dung 1: Hồn thi n cơng th th ng nuôi tr ng stroma Nh ng trùng nghiên c N i dung 2: Th nghi m s n xu t Nh ng trùng th o S n ph m c tài/d án: Stroma Nh ng trùng th o v i ch tiêu phù h p v i quy nh s -BYT ngày 19/12/2007 c a B quy trình s n xu t Nh ng trùng th o v i thông s v nhi th i gian nuôi c y ng B Y t , m, ánh sáng, M Nh ng trùng th o (Cordyceps militaris) thu c chi Cordyceps loài n li u quý hi m Nh ng trùng th c bi t lo i thu ng s c kh e, h tr h mi n d ch, ch o v tim, gan, th c, m t m i, phòng ch ng ung Hi n nay, Nh ng trùng th c u s n xu t in vitro t o ngu c c quan tâm nghiên c li u cho vi c s n xu t thu c, h tr u tr b nh, th c ph m ch C c hi n th o (Cordyceps militaris ng t o stroma Nh ng trùng n Cordyceps militaris nhu c u v Nh ng trùng th cung c p Nh ng trùng th o s ng l n v i ch c i thi n s c kh e c xu (Cordycep militaris) ng l n, tài Th nghi m s n xu t stroma Nh ng trùng th o m ng d ng quy trình s n xu t Nh ng trùng th o vào th c t , ng l n stroma Nh ng trùng th ng nhu c u th ph c v cho nhu c u ng yêu c u c n có mơ hình cơng ngh s n xu t qu th in vitro giá thành th p, s t o s y c n có m t ngu n ng hi n [53] Sung J M., Shrestha B., Kim H K., Sung G H., Spatafora J W (2004b), Cordyceps militaris in vitro Biotechnology and Bioprocess Engineering, 9, pp 440 446 [54] plant growth promoters on the growth of Cordyceps militaris Lishizhen Med Mater Med Res, 21, pp 541 542 [55] Cordyceps militaris Acta Edulis Fungi, 3(2), pp 59 61 [56] Xing L.W., Xing X.F., You J., Li Y.C (2016), Technological method for cultivating cordyceps militaris by means of corncobs, CN 105900691 A Cordyceps militaris [57] Food Ind 2, pp 60 61 [58] Yun Y.H., Han S.H., Lee S.J., Ko S.K., Lee C.K., Ha N.J., Kim K.J (2003), -diabetic effects of CCCA, CMESS and cordycepin from C militaris and the immune responses in streptozotocin- Nat Prod Sci, 9, pp 291 298 [59] growth of Guangdong Agric Sci, 4, pp 45 47 Cordyceps [60] militaris Edible Fungi China, 16(2)m pp 21 22 [61] artificial cultivation of Cordyceps militaris J Shenyang Agric Univ, 37, pp 209 212 [62] Zha Ann Acad Med Singap , 35, pp 764 769 [63] Zhoua X., Gonga Z., Sua, Y., Linb J., and Tang K Cordyceps fungi: natural products, pharmacological functions and developmental productv of Pharmacy and Pharmacology, 61(3), pp 279 Journal Ph l c 1: N i dung 1: Hoàn thi n công th th o thu ng nuôi tr ng stroma Nh ng trùng nghiên c Thí nghi m 1: Kh o sát lo i d ch chi t phù h p cho vi c nuôi tr ng Nh ng trùng th o th Thí nghi ng ng d ch chi t t n cơng phân tích M1 M2 M3 M4 M5 M1 M2 M3 M4 ng cordycepin (mg/g) HPLC - DAD ng adenosine (mg/g) HPLC - DAD 6,242 5,603 6,232 6,223 6,399 5,806 4,282 3,506 4,406 4,029 4,883 6,522 5,992 6,632 6,401 5,808 6,086 4,523 4,593 4,905 4,735 3,836 6,005 6,132 5,993 5,833 5,939 6,345 3,261 4,608 3,529 3,701 4,467 M5 M1 M2 M3 M4 M5 ng polysaccharide (%) HPLC - DAD M1 M2 M3 M4 M5 ng ergosterol (mg/g) HPLC - DAD 4,273 27,470 32,130 35,960 34,600 32,060 33,620 1,908 2,179 2,190 1,903 1,723 1,816 5,013 22,360 35,110 33,620 31,560 35,220 35,230 1,603 1,972 1,932 2,103 2,201 2,386 3,902 22,360 35,110 33,620 31,560 35,220 35,230 1,896 1,801 2,430 2,233 2,138 1,920