Thông tin tài liệu
ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CƠ QUAN CHỦ QUẢN CƠ QUAN CHỦ TRÌ NHIỆM VỤ CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THỬ NGHIỆM CHẾ PHẨM LIMO NI TRÍCH TỪ HẠT NEEM AZADIRACHTA INDICA QUY MÔ 20 KG/NGÀY ĐỂ BỌC URÊ NHẰM GIẢM THẤT THỐT ĐẠM Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Viện Cơng nghệ Hóa Sinh ứng dụng Chủ nhiệm nhiệm vụ: GSTS Trần Kim Qui Thành phố Hồ Chí Minh - 2019 ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CƠ QUAN CHỦ QUẢN CƠ QUAN CHỦ TRÌ NHIỆM VỤ CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THỬ NGHIỆM CHẾ PHẨM LIMO NI TRÍCH TỪ HẠT NEEM AZADIRACHTA INDICA QUY MƠ 20 KG/NGÀY ĐỂ BỌC URÊ NHẰM GIẢM THẤT THỐT ĐẠM (Đã chỉnh sửa theo kết luận Hội đồng nghiệm thu ngày ) Chủ nhiệm nhiệm vụ: Trần Kim Qui Cơ quan chủ trì nhiệm vụ Lê Thị Cúc Thành phố Hồ Chí Minh- 2019 VIỆN CƠNG NGHỆ HÓA SINH ỨNG DỤNG CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc TP Hồ Chí Minh, ngày 01 tháng 04 năm 2019 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KH&CN I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Sản xuất thử nghiệm chế phẩm Limo NI trích từ hạt neem Azadirachta indica A Juss quy mô 20 kg/ngày để bọc urê nhằm giảm thất thoát đạm Thuộc: Chương trình/lĩnh vực: Bảo vệ mơi trường tài ngun biến đổi khí hậu Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Trần Kim Qui Ngày, tháng, năm sinh: 01/08/1936 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Tiến sĩ Chức danh khoa học: Giáo sư Chức vụ: Điện thoại: Tổ chức: 38354421 Nhà riêng: 38354421 Fax: 38351124 E-mail: viencnhs03@gmail.com Mobile: 0918458592 Tên tổ chức công tác: Viện Công nghệ Hóa Sinh ứng dụng Địa tổ chức: 55D Trần Phú Phường Quận TP Hồ Chí Minh Địa nhà riêng: 55D Trần Phú Phường Quận TP Hồ Chí Minh Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Viện Cơng nghệ Hóa Sinh ứng dụng Điện thoại: 38354421 Fax: 38351124 E-mail: viencnhs03@gmail.com Website: Địa chỉ: 55D Trần Phú Phường Quận Họ tên thủ trưởng tổ chức: Trần Kim Qui Số tài khoản: 3711.2.9057574.00000 Cấp Kho bạc: Kho bạc Nhà nước Quận Tên quan chủ quản đề tài: Sở Khoa học Công nghệ TP Hồ Chí Minh II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết: từ tháng 10/ năm 2016 đến tháng 10/ năm 2018 - Thực tế thực hiện: từ tháng 10/ năm 2016 đến tháng 04/ năm 2019 - Được gia hạn (nếu có): - Lần từ tháng 11 năm 2018 đến tháng 04 năm 2019 - Lần … Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 3.562 tr.đ, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 950 tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: 2.612 tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Số TT Theo kế hoạch Thời gian Kinh phí (Tháng, năm) (Tr.đ) 11/2016 475 12/2017 285 Thực tế đạt Thời gian Kinh phí (Tháng, năm) (Tr.đ) 11/2016 475 12/2017 285 Ghi (Số đề nghị toán) 475 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đối với dự án: Đơn vị tính: Triệu đồng Theo kế hoạch Số TT Nội dung khoản chi Thiết bị, máy móc mua Nhà xưởng xây dựng mới, cải tạo Kinh phí hỗ trợ cơng nghệ Chi phí lao động Nguyên vật liệu, lượng Thuê thiết bị, nhà xưởng Khác Tổng cộng Tổng NSKH 2.230 878,95 382 878,95 71,05 3.562 71,05 950,0 Thực tế đạt Nguồn khác 2.230 Tổng 2.230 878,95 382 878,95 382 2.612 71,05 3.562 71,05 950,0 NSKH Nguồn khác 2.230 382 2.612 - Lý thay đổi (nếu có) Các văn hành q trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ công đoạn xét duyệt, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì nhiệm vụ (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) Số TT Số, thời gian ban hành văn Ngày 08/08/2016 Số 59/2018/PLHĐ Sở KHCN ngày 30/10/2019 Tên văn Ghi Đơn xin gia hạn thời gian nghiệm thu dự án Phụ lục Hợp đồng thực nhiệm vụ nghiên cứu khoa học công nghệ Do Viện Công nghệ Hóa sinh ứng dụng ban hành Do Sở Khoa học Công nghệ ban hành 4 Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo Thuyết minh Tên tổ chức tham gia thực Nội dung tham gia chủ yếu Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, không 10 người kể chủ nhiệm) Số TT Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh Trần Kim Qui Trần Lê Quan Nguyễn Thị Ý Nhi Bùi Xuân Hào Phan Bích Thủy Nguyễn Thị Kiều Vân Bùi Hoài Nam Nguyễn Quốc Hiệp Tên cá nhân tham gia thực Trần Kim Qui Trần Lê Quan Nguyễn Thị Ý Nhi Bùi Xuân Hào Phan Bích Thủy Nguyễn Thị Kiều Vân Bùi Hoài Nam Nguyễn Quốc Hiệp Nội dung tham gia (ND) ND1: Hồn thiện cơng nghệ ép dầu neem chiết xuất chiết phẩm salannin, nimbin, azadirachtin ND2: Hồn thiện cơng nghệ sản xuất chất phụ trợ gồm chất gây nhũ chất làm bền ND3: Hồn thiện cơng nghệ điều chế chế phẩm Limo NI bao phân đạm ND4: Thử nghiệm tác dụng phân đạm bao Limo Ni Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi * Dầu neem, 03 chiết phẩm salannin, nimbin, azadirachtin Chất gây nhũ sorbitan ester chất làm bền paminobenzoic acid Chế phẩm Limo NI dùng để bao phân đạm Limo Ni bao phân đạm làm giảm lượng NO3 nước trồng đồng thời tăng suất trồng - Lý thay đổi ( có): Tình hình hợp tác quốc tế: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) - Lý thay đổi (nếu có): Ghi chú* Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Theo kế hoạch Số (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa TT điểm ) Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tóm tắt nội dung, cơng việc chủ yếu: (Nêu mục 15 thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát nước nước ngoài) Số TT Các nội dung, công việc chủ yếu (Các mốc đánh giá chủ yếu) Hồn thiện cơng nghệ ép dầu neem chiết xuất chiết phẩm salannin, nimbin, azadirachtin Hồn thiện cơng nghệ sản xuất chất phụ trợ gồn chất gây nhũ chất làm bền Hồn thiện cơng nghệ điều chế chế phẩm Limo NI bao phân đạm Thử nghiệm tác dụng phân đạm bao Limo NI Tổng kết đánh giá Thời gian (Bắt đầu, kết thúc - tháng … năm) Theo kế Thực tế đạt hoạch Từ 10/2016 Từ 10/2016 đến 6/2017 đến 6/2017 Từ 7/2017 đến 9/2017 Từ 10/2017 đến 12/2017 Từ 01/2018 đến 07/2018 Từ 08/2018 đến 10/2018 Từ 7/2017 đến 9/2017 Từ 10/2017 đến 12/2017 Từ 01/2018 đến 01/2019 Từ 02/2019 đến 04/2019 Người, quan thực người gồm: chủ nhiệm dự án, thành viên, kỹ thuật viên thuộc Viện Cơng nghệ Hóa Sinh ứng dụng - Lý chậm trễ nghiệm thu dự án: Viện Cơng nghệ Hóa Sinh ứng dụng có lắp đặt dây chuyền sản xuất chế phẩm Limo NI trích từ hạt neem Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp Nông nghiệp Công nghệ cao, huyện Củ Chi nhằm sản xuất thử nghiệm dự án nói Tuy nhiên lợi dụng dịp nghỉ Tết âm lịch tháng 02/2018 vừa qua kẻ gian vào lấy trộm tất thiết bị dây chuyền sản xuất thử nghiệm Limo NI Chúng làm đơn tố giác tội phạm với công an địa phương, cơng an TP Hồ Chí Minh (PC45) thụ lý giải vụ án Không thể chờ đợi lâu kết giải công an, phải sử dụng vốn tự có chế tạo lại dây chuyền thiết bị để tiếp tục sản xuất thử nghiệm dự án Tuy nhiên bị thời gian lâu Sở Khoa học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh chấp thuận cho gia hạn thời gian nghiệm thu dự án đến tháng 04/2019 III SẢN PHẨM KH&CN CỦA NHIỆM VỤ Sản phẩm KH&CN tạo ra: a) Sản phẩm Dạng 1: Sản phẩm (là hàng hóa), dây chuyền cơng nghệ (i) Sản phẩm: Số TT Tên sản phẩm tiêu chất lượng chủ yếu Chế phẩm Limo NI 30 - Tỷ trọng d - Hàm lượng limonoid SNA - Hàm lượng hữu tổng số Phân bón neem - Ẩm độ - Hàm lượng chất hữu - Hàm lượng Nts - Hàm lượng azadirachtin - Hàm lượng S - pH Dầu neem - Tỷ trọng - Chiết suất - Chỉ số xà phòng Si - Chỉ số iod Ii - Thành phần khơng xà phịng hóa Đơn vị đo kg/ngày g/ml % % kg/ngày % % % % % kg/ngày - Theo kế hoạch 20 0,90-0,95 ≥ 0,2 ≥ 35 ≤ 30 ≥ 20 ≥ 50 15 0,9087-0,9189 1,4617-1,4657 193-204 68,0-75,8 0,4-2,4 Thực tế đạt 100 0,93 1,02 51,2 65 17,9 75,6 4,79 0,035 1,64 7,0 18,2 0,9098 1,4643 195 72 0,5 Ghi Trang 86-89 Trang 68-69 Trang 53-56 Ghi chú: Hiện chế phẩm làm tăng hiệu suất sử dụng phân đạm Limo NI chưa có tiêu chuẩn chất lượng nước Theo Nghị định 108/2017/NĐ-CP V/v quản lý phân bón, chế phẩm Limo NI sở sản xuất cần công bố tiêu chuẩn chất lượng sở đăng ký với quan có thẩm quyền cơng nhận phép kinh doanh thị trường Giá thành Limo NI 54.000 đ/kg giá bán chất N-Guard (Nitrification inhibitor) Ấn Độ có chất lượng tương đương với Limo NI có giá bán 3,95 USD/lit FOB India tức khoảng 90.000 đ/kg Phân bón neem sản phẩm thu tận dụng chất thải vỏ bả hạt neem (khơng có ghi thuyết minh dự án) Phân bón neem đạt tiêu chất lượng theo Nghị định 108/2017/NĐ-CP có giá thành phẩm 11.000 đ/kg giá bán phân neem Ấn Độ 180 USD/bao 50 kg FOB Calcutta tức khoảng 82.000 đ/kg Dầu neem đạt tiêu chất lượng theo tiêu chuẩn IS 4765:1998 Ấn Độ Ở Việt Nam chưa có tiêu chuẩn dầu neem (ii) Dây chuyền công nghệ sản xuất dầu neem, phân bón neem chế phẩm Limo NI Hạt neem (100kg) Ép dầu neem Dầu neem Bánh dầu neem Chiết xuất salannin Chiết phẩm salannin Bả chiết lần Chiết xuất nimbin Chiết phẩm nimbin - Sorbitan ester - PABA - Dung môi Limo NI (100 kg) Bả chiết lần Bao urê Chiết xuất azadirachtin Chiết phẩm azadirachtin Bả chiết lần Phân bón neem (62 kg) - Lý thay đổi (nếu có): b) Sản phẩm Dạng II: Phương pháp, quy trình cơng nghệ, tiêu chuẩn Số TT Tên sản phẩm Sơ đồ khối quy trình ép lạnh dầu neem 100 kg hạt neem Phương pháp đo hàm lượng azadirachtin (AZ) dầu neem Yêu cầu khoa học cần đạt Theo kế hoạch Thực tế đạt Hàm lượng dầu neem Hàm lượng dầu neem ép lạnh thu 15% ép lạnh thu 18,2% Sơ đồ 3.1 Trang 47 Đo với máy HPLC-UV λ=217 nm dựa vào đường chuẩn Hình 3.1, 3.3 Trang 48, 49, 50 Hàm lượng AZ dầu neem đo 0,11% Ghi 10 11 Sơ đồ khối quy trình chiết xuất salannin (SA) 100 kg hạt neem, xác định cấu trúc, phương pháp đo hàm lượng SA Sơ đồ khối quy trình chiết xuất nimbin (NI) 100 kg hạt neem, xác định cấu trúc, phương pháp đo hàm lượng NI Sơ đồ khối quy trình chiết xuất azadirachtin (AZ) 100 kg hạt neem, xác định cấu trúc, phương pháp đo hàm lượng AZ Quy trình cơng nghệ điều chế chất làm bền paminobenzoic acid (PABA) phương pháp định lượng PABA Quy trình cơng nghệ điều chế chất hoạt diện sorbitan ester phương pháp đo cân háo nước háo dầu HLB Khả khống chế chủng VSV nitrit hóa phân đạm Nitrosomonas sp Nitrobacber sp chế phẩm Limo NI Tác dụng chế phẩm Limo NI chủng VSV có ích đất Bacillus sp, Azotobacter sp, Azospirillum sp Tác dụng Limo NI bao phân đạm làm giảm lượng nitrat phân đạm sinh sau bón phân đạm vào đất tưới nước Tác dụng Limo NI bao phân đạm làm tăng suất cải trái dưa chuột, sau Dùng dung môi ether dầu để chiết xuất, đo hàm lượng SA với máy UV λ=577 nm Thu 6,1 kg chiết phẩm SA có hàm lượng 5,58% SA tinh khiết Sơ đồ 3.2 Hình 3.7 Trang 52-57 Dùng dung môi toluene để chiết xuất, đo hàm lượng NI với máy UV λ=577 nm Thu 5,1 kg chiết phẩm NI có hàm lượng 6,04% NI tinh khiết Sơ đồ 3.3 Hình 3.8 Trang 58-61 Dùng dung mơi ethanol để chiết xuất, đo hàm lượng AZ với máy UV λ=577 nm Thu 5,4 kg chiết phẩm AZ có hàm lượng 7,11% AZ tinh khiết Sơ đồ 3.4 Hình 3.9 Trang 61-65 Điều chế PABA từ toluene, định lượng PABA với máy HPLCUV dựa vào đường chuẩn Điều chế sorbitan ester từ glucose, đo HLB theo công thức Davies Thu chế phẩm PABA hiệu suất 69,92% độ tinh khiết 92,25% có giá 172.400 đ/kg Thu sorbitan ester hiệu suất 62,14%, HLB = 4,3-8,6 có giá 59.900 đ/kg Xem 3.2.1.1 Bảng 3.7 Trang 68-72 Đường kính vịng vơ khuẩn Limo NI chủng VSV nitrit hóa phân đạm cao 60-100% so với đối chứng Đường kính vịng vơ khuẩn Limo NI chủng VSV có ích đất với đối chứng Định lượng nitrat theo TCVN 7323-1:2004 kết là: hàm lượng nitrat thấp Limo NI/ urê = 0,6 cao tỷ lệ 0, tức urê không bao Limo NI (đối chứng) Thay đổi tỷ lệ bao Limo Năng suất cải NI/urê = 0; 0,2; 0,4; trái dưa chuột bón 0,6; 0,8; 1,0% sau phân urê bao Limo NI bón urê có bao Limo NI tỷ lệ bao 0,6% cao Bảng 3.11 Trang 86-90 Làm kháng sinh đồ theo phương pháp khuếch tán thạch, vịng vơ khuẩn Limo NI phải cao so với đối chứng Làm kháng sinh đồ theo phương pháp khuếch tán thạch, đo vịng vơ khuẩn Limo NI so với đối chứng Thay đổi tỷ lệ bao Limo NI/urê = 0; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0% sau bón urê vào đất tưới nước, định lượng nitrat sinh nước Bảng 3.8, 3.9, 3.10 Trang 72-79 Bảng 3.12 Trang 91 Bảng 3.14 Trang 93-96 Bảng 3.17 Trang 99-102 Bảng 3.19 Trang 102 12 bón phân đạm có bao cho cải trái Limo NI cho cải dưa chuột, tính trái dưa chuột suất cải trái dưa chuột Tác dụng Limo NI Thay đổi tỷ lệ bao Limo bao phân đạm làm tăng NI/urê = 0; 0,2; 0,4; suất lúa, sau 0,6; 0,8; 1,0% sau bón phân đạm có bao bón urê có bao Limo NI Limo NI cho lúa cho lúa, tính suất lúa cải trái dưa chuột bón phân urê không bao Limo NI 47,02% 41,37% Năng suất thu hoạch Bảng 3.21 lúa bón phân urê Trang 105bao Limo NI tỷ lệ bao 108 0,6% cao lúa bón phân urê khơng bao Limo NI 31,8-32,1% - Lý thay đổi (nếu có): c) Sản phẩm Dạng III: Bài báo, sách chuyên khảo Số TT Bài báo khoa học Yêu cầu khoa học cần đạt Theo Thực tế kế hoạch đạt Kết nghiên Định danh hoạt chất cứu dự án, salannin, nimbin, phương pháp azadirachtin nghiên cứu neem với máy HPLCđại, có trình độ UV λ = 217 nm giới máy UV λ = 577 nm Số lượng, nơi cơng bố (Tạp chí, nhà xuất bản) báo khoa học đăng Kỷ yếu Khoa học Trường Đại học Nguyễn Tất Thành, tập 1, tr 116-118, 2014 Trần Thị Tửu, Nguyễn Thị Kiều Vân, Trần Kim Qui, Định lượng hoạt chất limonoid neem Azadirachta indica A.Juss Trần Thị Tửu, Trần Kết nghiên Tổng hợp sorbitan báo khoa học Văn Khang, Trần cứu dự án, stearate với xúc tác đăng Kỷ yếu Kim Qui, Tổng hợp phương pháp enzyme lypase Khoa học Trường sorbitan stearate với nghiên cứu Thermomyces Đại học Nguyễn xúc tác enzyme đại, có trình độ lanuginosus có hiệu Tất Thành, tập 1, tr lypase giới suất cao giá thành hạ 19-21, 2014 Hai báo viết sau đề tài nghiên cứu giai đoạn “Nghiên cứu sản xuất Limo NI trích từ neem Azadirachta indica dùng để giảm thiểu ô nhiễm môi trường, đồng thời nâng cao hiệu sử dụng phân đạm thương mại hóa sản phẩm” Hội đồng khoa học nghiệm thu ngày 04/06/2014 thời gian xin Sở Khoa học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh triển khai đề tài thành dự án sản xuất thử nghiệm - Lý thay đổi (nếu có): d) Kết đào tạo: Kết tham gia đào tạo đại học Số TT Cấp đào tạo, Chuyên ngành đào tạo Thạc sỹ, Hóa học Nguyễn Thị Kiều Vân Theo kế hoạch Số lượng Thực tế đạt Tên luận văn: Chiết xuất hoạt chất azadirachtin limonoid từ 01 Thạc sĩ hạt neem (Azadirachta Kết nghiên indica) trồng Ninh Thuận cứu dự án để điều chế chế phẩm trộn vào phân đạm nhằm ngăn chặn nitrit hóa phân đạm 10 Ghi (Thời gian kết thúc) 05/01/2017 Limo NI/urê (0%, đối chứng) Limo NI/urê (0,6%) Hình 3.18: Hình lúa chín bón phân Limo NI/urê 0%, đối chứng Limo NI/urê 0,6% 121 IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Trong dự án sản xuất thử nghiệm thực nghiên cứu đầy đủ nội dung theo hợp đồng thực nhiệm vụ nghiên cứu Khoa học Công nghệ ký với Sở Khoa học Công nghệ TP Hồ Chí Minh Sau mơt số kết thu nhận được: Hồn thiện cơng nghệ ép dầu neem, chiết xuất hoạt chất salannin, nimbin, azadirachtin từ hạt neem xử lý chất thải vỏ, bả hạt neem làm phân bón 1.1 Ép lạnh với máy ép thủy lực trục đứng 100 kg/ngày hạt neem khô, thu 18,2 kg dầu neem đạt Tiêu chuẩn IS 4765-1988 Ấn Độ 25,7 kg bánh dầu neem; định lượng hàm lượng azadirachtin dầu với máy HPLC-UV độ dài sóng λ = 217 nm cho thấy dầu neem có chứa 0,11% azadirachtin 1.2 Chiết xuất 25,7 kg bánh dầu neem với ether dầu (60-80oC) 50oC 24 giờ, sau thu hồi dung mơi cho 6,1 kg chiết phẩm, lại 19,2 kg bả bánh dầu neem; định danh chiết phẩm phương pháp phổ nghiệm có so sánh với số liệu công bố trước định lượng hoạt chất limonid chiết phẩm phương pháp so màu với quang phổ kế tử ngoại UV λ = 577 nm, kết cho thấy limonoid chiết phẩm salannin có hàm lượng 5,88% Chiết xuất tiếp 19,2 kg bả bánh dầu neem với toluene 50oC 24 giờ, sau thu hồi dung mơi cho 5,1 kg chiết phẩm, lại 13,5 kg bả bánh dầu neem; định danh chiết phẩm phương pháp phổ nghiệm định lượng hoạt chất limonid chiết phẩm giống trên, kết cho thấy limonoid chiết phẩm nimbin có hàm lượng 6,04% Chiết xuất tiếp 13,5 kg bả bánh dầu neem với ethanol 50oC 24 giờ, sau thu hồi dung mơi cho 5,4 kg chiết phẩm, lại 7,1 kg bả bánh dầu neem; định danh chiết phẩm phương pháp phổ nghiệm định lượng hoạt chất limonid giống trên, kết cho thấy limonoid chiết phẩm azadirachtin có hàm lượng 7,11% 122 Trộn chất thải vỏ hạt neem (56 kg), bả bánh dầu neem (7,1 kg) sau nghiền nhỏ, điều chỉnh pH, ẩm độ bổ sung chế phẩm vi sinh vật phân giải cellulose CDM Ủ hỗn hợp 20 ngày cho phân bón neem (62 kg) đạt tiêu chất lượng theo Nghị định số 108/2017/NĐ-CP; định lượng limonoid phân bón neem cho thấy phân bón neem có chứa 250 mg/kg azadirachtin Nghiên cứu cơng nghệ sản xuất chất phụ trợ gồm chất làm bền chất gây nhũ 2.1 Chất làm bền p-aminobenzoic acid (PABA) có tác dụng hấp thu tia tử ngoại UV bảo vệ hoạt chất limonoid chế phẩm từ hạt neem, điều chế từ toluene qua bước: nitro hóa toluene, oxid hóa p-nitrotoluene hydrogen hóa p-nitrobenzoic acid, hiệu suất 85,1% Sản phẩm có tính chất đặc trưng giống với chất chuẩn p-aminobenzoic acid số CAS [150-13-0] The Merck Index, 30th ed Copyright ©2001 2.2 Chất gây nhũ sorbitan ester có tác dụng tạo nhũ tương bền nước dung dịch limonoid chế phẩm từ hạt neem, điều chế từ glucose qua bước: đóng vịng glucose tạo sorbitan, ester hóa sorbitan với ester ethyl acid béo, hiệu suất 77-80% Sản phẩm có tính chất đặc trưng giống với chất chuẩn sorbitan ester số CAS [1338-43-8] The Merck Index, 30th ed Copyright ©2001 Hồn thiện cơng nghệ điều chế chế phẩm Limo NI bao phân đạm: 3.1 Dùng EtOH pha loãng chiết phẩm limonoid chiết xuất từ hạt neem 3% trộn chung chiết phẩm này, salannin (11 kg), nimbin (10 kg) azadirachtin (13 kg) cho 34 kg chế phẩm limonoid SNA (salannin, nimbin, azadirachtin) Thành phần Limo NI theo tỷ lệ lượng (%) sau: Chế phẩm chứa 3% limonoid SNA Dầu neem chứa 0,11% azadirachtin Chất làm bền PABA Chất tạo nhũ, Sorbitan ester Chất kết dính, dầu nhựa thơng Dung mơi EtOH 123 : 34,0 : 16,0 : 1,0 : 3,0 : 5,0 : 41,0 100,0 Như với 100 kg/ngày hạt neem, sản phẩm Limo NI thu 100 kg/ngày Chế phẩm Limo NI có tiêu chất lượng sau: Tỷ trọng 𝑑430 (g/ml) = 0,93 Độ ẩm (%) theo Karl Fischer = 5,0 Hàm lượng limonoid SNA (%) = 1,1 Hàm lượng hữu tổng số (%) = 51,2 Ngoài chế phẩm Limo NI đạt tiêu độ bền nhiệt độ bền nhũ theo tiêu chuẩn CIPAC có tác dụng khống chế vi sinh vật nitrit hóa phân đạm chủng Nitrosomonas sp Nitrobacter sp đất Giá thành Limo NI 54.000 đ/kg so với giá bán N-Guard chế phẩm có tác dụng chất lượng tương đương với Limo NI 90.000 đ/kg giá FOB Calcutta, Ấn Độ Nếu dùng để bao urê theo tỷ lệ Limo NI/urê = 0,6% 0,6 kg Limo NI giá 32.400 đ bao 100 kg phân urê Thử nghiệm tác dụng phân đạm bao Limo NI 4.1 Thử nghiệm tác dụng Limo NI bao phân đạm urê làm giảm lượng nitrat hòa tan nước Thử nghiệm thực thùng thép không rỉ hình trụ đường kính 1,2m x cao 1,5m đáy hình nón có máy khuấy trộn van xả nước, chứa đầy đất trồng pH=7 Cho urê bao Limo NI với nhiều tỷ lệ khác vào thùng thử nghiệm trộn với lớp đất mặt Sau 20 ngày tưới với nước bề mặt đất thùng, xả van đáy thùng lấy nước thoát trộn để định lượng nitrat Kết cho thấy: Hàm lượng nitrat hòa tan nước thoát thấp tỷ lệ bảo urê: Limo NI/urê = 0,6% Hàm lượng nitrat thoát thấp 51,82% so với đối chứng tức urê không bao Limo NI (Limo NI/urê = 0) 124 4.2 Thử nghiệm tác dụng Limo NI bao phân đạm làm giảm lượng nitrat trồng hấp thu làm tăng suất trồng (cây cải dưa chuột) Kết cho thấy: Cây cải bón phân urê khơng bao Limo NI (đối chứng) có hàm lượng nitrat cao 152,56% suất thấp 47,02% so với cải bón phân urê có bao 0,6% Limo NI Cây dưa chuột bón phân urê khơng bao Limo NI (đối chứng) có hàm lượng nitrat cao 234,82% suất thấp 41,37% so với dưa chuột bón phân urê có bao 0,6% Limo NI 4.3 Thử nghiệm tác dụng Limo NI bao phân đạm làm tăng suất lúa Kết cho thấy: Cây lúa bón phân urê khơng bao Limo NI (đối chứng) có suất thấp 32,05% so với lúa bón phân urê có bao 0,6% Limo NI Như chúng tơi thực đầy đủ nội dung nghiên cứu trình bày Thuyết minh dự án sản xuất thử nghiệm Hợp đồng thực nhiệm vụ nghiên cứu Khoa học công nghệ số 132/2016/HĐ-SKHCN ký với Sở Khoa học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh ngày 17/10/2016 Một số kết khác 5.1 Bài báo Có báo khoa học cơng bố kết nghiên cứu khoa học đề tài, dự án sản xuất thử nghiệm a) Trần Thị Tửu, Nguyễn Thị Kiều Vân, Trần Kim Qui, Định lượng hoạt chất limonoid neem (Azadirachta indica A Juss), Trường ĐH Nguyễn Tất Thành, Kỷ yếu khoa học – Đào tạo, tập 1, trang 116-118, 2014 (Phụ lục 12) b) Trần Thị Tửu, Trần Văn Khang, Trần Kim Qui, Tổng hợp sorbitan stearate với xúc tác enzyme lypase, Trường ĐH Nguyễn Tất Thành, Kỷ yếu khoa học – Đào tạo, tập 1, trang 19-21, 2014 (Phụ lục 13) Hai báo viết sau đề tài nghiên cứu giai đoạn “Nghiên cứu sản xuất Limo NI trích từ neem Azadirachta indica dùng để giảm thiểu ô nhiễm 125 môi trường, đồng thời nâng cao hiệu sử dụng phân đạm thương mại hóa sản phẩm” Hội đồng khoa học nghiệm thu ngày 04/06/2014, thời gian xin Sở Khoa học Công nghệ TP Hồ Chí Minh triển khai đề tài thành dự án sản xuất thử nghiệm 5.2 Sản phẩm đào tạo Ban chủ nhiệm dự án sản xuất thử nghiệm hướng dẫn thành viên dự án Nguyễn Thị Kiều Vân bảo vệ thành công luận án Thạc sĩ ngày 05/01/2017 Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh, tên luận án: “Chiết xuất hoạt chất azadirachtin limonoid từ hạt neem (Azadirachta indica A Juss) trồng Ninh Thuận để điều chế chế phẩm trộn vào phân đạm nhằm ngăn chặn nitrit hóa phân đạm” (Phụ lục 14) 5.3 Đăng ký sở hữu trí tuệ Sau đề tài nghiên cứu giai đoạn “Nghiên cứu sản xuất Limo NI trích từ neem Azadirachta indica dùng để giảm thiểu ô nhiễm môi trường, đồng thời nâng cao hiệu sử dụng phân đạm thương mại hóa sản phẩm” Hội đồng khoa học nghiệm thu ngày 04/06/2014, chủ nhiệm dự án nộp đơn ngày 27/04/2015 đến Cục sở hữu trí tuệ xin cấp độc quyền sáng chế Cục Trưởng Cục Sở hữu trí tuệ Quyết định chấp nhận đơn hợp lệ số 49486/QĐ-SHTT ngày 18/08/2015 thẩm định nội dung để cấp sáng chế Tên sáng chế: Quy trình sản xuất chế phẩm làm tăng hiệu sử dụng phân đạm từ hạt sầu đâu Azadirachta indica A Juss chế phẩm thu từ quy trình (Phụ lục 15) Ngày 24/04/2019, chúng tơi có trực tiếp đến Cục Sở hữu trí tuệ Hà Nội để hỏi tình trạng đơn đăng ký sáng chế chúng tơi Phịng quản lý sáng chế cho biết đơn đăng ký sáng chế chúng tơi cịn q trình thẩm định Kiến nghị: Dự án có ý nghĩa khoa học hiệu kinh tế cao, làm tăng hiệu suất sử dụng phân đạm, làm tăng suất trồng làm giảm lượng nitrat, chất độc gây bệnh ung thư trồng hấp thu người dân sử dụng làm nguồn lương thực 126 thực phẩm Chúng dự kiến kết hợp với Cơng ty Cổ phần Khoa học Cơng nghệ Hóa Sinh, doanh nghiệp khoa học công nghệ, xây dựng sở sản xuất để triển khai sản xuất lớn chế phẩm Limo NI dùng để bao phân đạm Do kinh phí cịn hạn chế chúng tơi kiến nghị Sở Khoa học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh hỗ trợ thêm kinh phí cách cho vay với lãi suất ưu đãi chấp tài sản chúng tơi để chúng tơi sớm thương mại hóa sản phẩm Limo NI thị trường nhằm giảm thiểu ô nhiễm môi trường, bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng, đồng thời làm tăng hiệu kinh tế nông nghiệp 127 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bremner, J.M 1995 Recent research on problems in the use of urea as a nitrogen fertilizer Fertiliser Research 42: 321-329 Bremner, J.M.; Mulvaney, R.L 1978 Urease activity in soils [ln] Burns, R.G 9ed Soild Enzymes.pp 149-196.Academic Press, London Banerjee, M.R.; Burton, D.J.; Grant, C.A 1999 Influence of urea fertilization and urease inhibitor on the size and activity of soil microbial biomas under conventional and zero tillage at two site Canadian Journal of Soil Science 79:255-263 Gould, W.D.; Hagedorn, C.; McCready, R.G.L 1986 Urea tranformations and fertiliser efficience in soil Advances in Agronomy 40:209-237 Harrison, R.; Webb, J 2001 A review of the effect of N fertiliser type on gaseous emissions Advances in Agronomy 73:65-108 Granli T and BecKman O.Chr (1994) Nitrous oxide from agriculture Norwegrian Journal of Agricultural Sciences Supplement No.12,1-28 Nitrosomonas, Wikipedia, the free encyclopedia, modified on 30 March 2010 Ruiko OKANO et al, Nitrosomonas europaea ATCC 25978, Is the right amonia oxidizing bacterium for screening Nitrification inhibitors, J.Pestic Sci.29, 50-52 (2004) Sun-Jip Kim, Estimation of active Nitrosomonas and Nitrobacter concentration in activate sludge using nitrogenous oxygen uptake rate, Environ.Eng.Res.Vol.9 No.3 pp.130-142,2004 10 L.O.Odokuma and E.Akponah, Response of Nitrosomonas, Nitrobacter and E.Coli to drilling fluids, Jounal of Cell and Animal Biology Vol 2(2), pp 043054, Feb.2008 11 Klein, C.A.M.de.; Logtestijin, R.S.P.van.; Meer, H.G.van.; Geurink, J.H 1996 Nitrogen losses due to denitrification from cattle slurry injected into 128 grassland soil with and without a nitrification inhibitor Plant and Soil 183: 161-170 12 Merino, P.; Estavillo, J.M.; Besga, G.: Pinto, M.; Gonzalez-Murua, C 2001 Nitrification and denitrification derive N2O production from a grassland soil under application of DCD and Actilith F2 Nutrien Cycling in Agroecosytems 60: 9-14 13 Merino, P.; Estavillo, J.M.; Graciolli, L.A.: Pinto, M.; Lacuesta, M.; MunozRueda, A.; Gonzalez-Murua, C 2002 Mitigation of N2O emissions from grassland by nitrification inhibitor and Actilith F2 applied with fertilizer and cattle slurry Soil use and management 18: 135-141 14 Velthof, G.L.; Oenema, O.; Postma, R.; Beusichem, M.L van 1997 Effect of type and amount of applied nitrogen fertiliser on nitrous oxide fluxes from intensively managed grassland Nutrient Cycling in Agroecosystems 46: 257-268 15 McTaggart, I.; Clayton, H.; Smith, K 1994 Nitrous oxide from fertilised grassland: strategies for reducing emissions Non-CO2 greenhouse gases: Why and how to control? Proceeding of an international symposium Maastricht, Netherlands, 13-15 December 1993; Non-CO2 greenhouse gases: Why and how to control? Proceeding of an international symposium Maastricht, Netherlands, 13-15 December 1993; pp 421-426 Kluwer Academic Publishers, Dordrecht; Netherlands 16 Di, H J.; Cameron, K C.; 2002 Nitrate leaching and pasture production from different nitrogen sources on a shllow stoney sil under flood–irrigate dairy pasture Australian journal of soil research 40: 317-334 17 Kartik Laijawala, Neem as a nitrification inhibitor, International Conference on Enhanced Effiency Fertilizers, 23–24, March 2010 Miami, FL, USA 18 Ledgard, S F.; Findlayson, J.D.; Gavin, J.; Blackwell, M.B.; Carran, R.A.; Wedderburn, M.E Jollands, N.A 2003 Resource use effciency and environmental emissions from an everage Waikato dairy farm, and impacts 129 intensification using nitrogen fertilizer or maize silage Proceeding of the New Zealand Grasslands Association.65: 185–189 19 Watson, C J.; Stevens, R J.; Garrett, M.K.; McMurray, C.H 1990 Efficiency and future of urea for temperate grasslands Fetiliser Research 26: 341–357 20 Prasad, R and Power, J 1995, Nitrification inhibitors for agriculture, health and the environment Advances in Aronomy, 54: 233–2281 21 Di, H J.; Cameron, K C.; 2004 Effects of the nitrification inhibitors dicyandiamide on potassium, magnesium and calcium leaching in grazed grassland Soil use and management 20, 2-7 22 Cookson, R.W.; Cornforth, I.S.; 2002 Dicyandiamide slows nitrification in dairy cattle urine patches; effects on soil solution composition, soil pH and pasture yield Soil biology & biochemistry 34: 1461–1465 23 Cavanagh, J E.; O'Halloran, K 2003 Rewiew of the Potential Environmental and Human Health Effects Arising from Land Application of Dicyandiamide Confidential Report to ravensdown Fertiliser Co-operative Ltd 24 Watson, C.J 2000 Urease activity and inhibition principles and practice The international Fetiliser Society Proceeding No 454-2000 25 Wang, X.B.; Xin, J.F.; Grant, C.A.; Bailey, L.D 1995 Effect of placement or urea with the urease inhibitor on seedling emergence, N uptake and dry matter yield of wheat Canadian journal of plant science 75: 449-452 26 Hendrickson, L.L 1992 Corn yield response to the urease inhibitor NBPT: five year summary Journal of production agriculture 5: 131-137 27 Krogmeier, M.J.; McCarty, G W.; Bremner, J M 1989 Potential phytotoxicity associated with the use of soil urease inhibitors (phenylphosphorodiamdate/N-(n-butyl) thiophosphoric triamide Proceeding of the National Academy of Science of the United States of America 86: 1110-1112 28 B.N Vgas–GM, Neem coated urea: Astep in right direction more needs to be done http://www.neemfoundation.org/neem–articles 130 29 Nguyễn Cửu Khoa, Trần Đức Phương, Nguyễn Công Trực; Điều chế phân bón nhả chậm ure formaldehyd (UF), Tạp chí Hóa học, T.47(4A), Tr.592– 596, 2009 30 Mai Văn Quyền; Năm canh dần nói chuyện đạm vàng; Bản tin Bình Điền, Cơng ty Phân bón Bình Điền; http://www.binhdien.com 31 Trần Kim Qui, Báo cáo nghiệm thu đề tài “Nghiên cứu sản xuất Limo NI trích từ hạt neem Azadirachta indica dùng để giảm thiểu ô nhiễm môi trường, đồng thời nâng cao hiệu phân đạm thương mại hóa sản phẩm”, Sở Khoa học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh, tháng 06/2014 32 C.R Narayanan et al., Crystal structure of dihydronimbin, Acta Crystallogr B36, 486, 1980 33 Shaun John, E David Morgan, Comparison of chromatographic system for triterpenoids from neem seeds, Journal of Chromatography A, 761, 53-63, 1997 34 Charles J Pocher, Jacqlynn Behnke, The Aldrich library of 13C and 1H-MNR Spectra, Aldrich Chemical Company, Inc, 1993 35 R Bryan Yamasaki, Thomas G Ritland, Mark A Bamby and James A Klocke, Isolation and purification of salannin from neem seeds and its quantification in neem and chinaberry seeds and leaves, Journal of Chromatography, 447, 277-283, 1988 36 National Research Council, A neem tree for solving global problems, National Academy Press, Washington D.C, USA, (1992) 37 H Schutteree, Properties and potential of natural pesticides from the Neem tree, Azadirachta indica, Ann Rev Entomol 35, 71-279, (1990) 38 S Ahmed, Potential of using neem tree Azadirachta indica for pest control and rural development, Neem Newsl, 5(4), 49-55, 1988 39 B.A Napasampagi et al, Triterpene dirivatives of Azadirachta having insect antifeedand and growth inhibitory activity and process for extracting such compounds from neem plant, US Patent No.5, 663, 374 Sep.2, 1997 131 40 Dương Anh Tuấn, Nguyễn Minh Phương, Dương Ngọc Tú, Lưu Tham Mưu, Nguyễn Văn Giáp, Nguyễn Duy Trung, Azadirachtin chất gây ngán ăn mạnh sâu khoang phân lập từ hạt neem Azadirachta indica di thực vào Việt Nam, Hội nghị Khoa học Công nghệ Hóa hữu tồn quốc lần thứ 2, 2003 41 Nguyễn Thương Dong, Nguyễn Kim Phương, Phạm Thị Nguyệt Hằng, Nguyễn Trang Thúy, Nguyễn Quang Khuân, Nguyễn Thế Hùng, Nguyễn Văn Khang, Nghiên cứu sơ thành phần hóa học tác dụng dược lý neem, Tạp chí Dược liệu, tập số 1/2004 42 Vũ Văn Độ, “Thử nghiệm tạo số dạng chế phẩm diệt muỗi truyền bệnh sốt xuất huyết từ dịch chiết nhân hạt neem Azadirachta indica A Juss trồng Việt Nam”, Đề tài nghiên cứu cấp Tp Hồ Chí Minh nghiệm thu đạt loại Sở Khoa học Cơng nghệ Tp Hồ Chí Minh, tháng 12/2011 43 Nguyễn Thị Ý Nhi, “Nghiên cứu thành phần limonoid neem Azadirachta indica trồng Ninh Thuận”, Luận án Tiến sĩ bảo vệ trường Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh tháng 8/2012 44 Trần Kim Qui, Trần Lê Quan; Ly trích hoạt chất từ cành, neem cóc hành làm thuốc trị bệnh cho người gia súc gia cầm; Đề tài nghiên cứu khoa học cấp Tỉnh nghiệm thu Sở Khoa học Công nghệ tỉnh Ninh Thuận tháng 10/2007, kết đạt loại 45 Trần Kim Qui, Trần Lê Quan; Hoàn thiện quy trình trích ly hoạt chất limonoid quy mơ pilot từ neem điều chế phụ gia thích hợp để làm nguyên liệu pha chế thuốc bảo vệ thực vật; Đề tài nghiên cứu khoa học cấp Thành phố nghiệm thu Sở Khoa học Cơng nghệ Tp Hồ Chí Minh tháng 9/2006, kết đạt loại 46 Trần Kim Qui, Lê Thị Cúc; Ly trích hoạt chất azadirachtin ≥ 3% hạt neem để làm thuốc bảo vệ thực vật; Dự án sản xuất thử nghiệm cấp Thành phố nghiệm thu Sở Khoa học Cơng nghệ Tp Hồ Chí Minh tháng 12/2011, kết đạt loại 132 47 Trần Kim Qui, Trần Văn Khang; Xây dựng mơ hình ứng dụng công nghệ chiết xuất hoạt chất azadirachtin limonoid từ neem (Azadirachta indica) làm nguyên liệu để sản xuất chế biến số sản phẩm khác; Dự án chuyển giao công nghệ cấp Nhà nước, nghiệm thu Bộ Khoa học Công nghệ tháng 04/2013, kết đạt loại 48 Yakkundi, S.Kumar, Ch.S.S.R and Ravindranath, R.Paper presented in 5th World Neem Conference, Gratton College, University of Queensland, Australia, Abstract, 4-9 February 1996, p.21 49 Yamasaki, R.B.Klocke, J.A.Lee, S.M.Stone, G.A and Darlington, M.V.J Chromatogr, 1986, 356, 220-226 50 P Dureja and Sapna Johnson, Photodegradation of azadirachtin-A: a neembased pesticide, current science, Vol.79, No 12, 25 December 2000 51 European Commission, Health & Consumer protection directorate general, Scientific Committee on consumer products (SCCP), Opinion on 4Aminobenzoic acid (PABA), Adopted by the SCCP during the 8th plenary meeting on August, 2006 52 Kim Seung Hwan, Hwang Sung Fu, Park Sung Sam, Park Jung Ho, Method for preparing p-aminobenzoic acid, Patent number AU2003208633, Publication date: 09/09/2003 53 Zengel: Hans-Georg, Bergfeld; Manfred, Production of p-aminobenzoic acid, United States Patent 3,931,210, January 6, 1976 54 AKZO NV, Process for preparing p-aminobenzoic acid, Patent number: GB 1462472, date: 26/1/1977 55 K.Smith, Solid supports and catalysts in organic synthesis, Ellis Horwood Ltd, first published in 1992 56 Bahulayan, D; Narayyan, G.; Sreekumar, V.; Lalithambika, M.Synth Commun, 2002, 32, 3565-3574 57 The Merck Index of Chemicals, Drugs and Biologicals, the 30th ed Copyright ©2001, by Merck & CO Inc 133 58 George J.Stockburger, Wilmington, Del, Process for preparing sorbitan esters, United States Patent 4, 297,290 Oct.27,1981 59 Sharon M.Beshori, Robert P.Adamski, Sorbitan ester purification process, United States Patent 5, 306,831 Apr.26,1994 60 J.M.Hunter, Ellis, J.J Lewis and R.J.Beattle, Manufacture of fatty acid esters of sorbitan as surfactants, United States Patent , US 6,362,353 B1, Mar.26,2002 61 J.A.Barnhorst and D.A Oester, Process for removing polysorbitols from sorbitan esters, United States Patent, US 6,680,392 B1, Jan.20,2004 62 N.Shinya, K.Eyi, Process for producing sorbitan fatty acid ester, European Patent Publication, E.P 1770082 A1, 04.04.2007 63 Trần Kim Qui, Tổng hợp chất hoạt động bề mặt, Nhà xuất Tp Hồ Chí Minh, 1988 64 L V Cocks and C van Rede, Laboratory handbook for Oil and Fat Analysis, Academic press, London and New York 1966, revised April 1992 65 Sol Soltzberg cộng sự, Sorbitol anhydrides, Synthesis and Structure of Sorbitan, the 1,4-Monoanhydride of Sorbitol, Journal of the American Chemical Society, Jun 18, 1986 66 The HLB system, 1976, ICI Americas Inc (All Rights Reserved), Revised March 1980 67 Kartik Laijawala, N-Guard (Kartik@orgoneem.com) 68 Manoj Sharma, Neem cake powder, Application as Pesticides, Universal Impex Corporation, Block 5, Flat 26, Kankurgachi C.I.T Building, Calcutta 700054, West Bengal, India 700054 69 P.P Jain, R Singh, S Bradula, Neem oil extraction and uses, Forest Research Institute, India, 34-39, 2001 70 M.Y Liau and al, Extraction of neem oil (Azadiracta indica A Juss) using n-hexane and ethanol Studies of oil quality, kinetic and themodynamic, Journal of Engineering and Applied Sciences, 3(3), 34-41, 2008 134 71 B Yamasaki and al, Isolation and purification of salannin from neem seeds and its quantification in neem and chinaberry seeds and leaves, Univ of Utah Research Park, Journal of Choromatography, 447, 227-283, 1988 72 C R Narayanan et al., Crystal structure of dihydronimbin, Acta Crystallogr B36, 486, 1980 73 Charles J Pocher, Jacqlynn Behnke, The Aldrich library of 13C and 1HRMN Spectra, Aldrich Chemical Company, Inc, 1993 135
Ngày đăng: 05/10/2023, 20:12
Xem thêm:
