Nghiên cứu tuyển chọn vi khuẩn chịu mặn có khả năng cố định nitơ chuyển hóa lân và sinh tổng hợp iaa

HCM BÁO CÁO NGHI M THU NGHIÊN C U TUY N CHỌ KHẢ Ă ỐĐ Ơ, Y N HÓA LÂN VÀ SINH TỔNG HỢP IAA KS Phan Thị Hồng Hải CN Trần Hải My Th nh ph Hồ Ch Minh, h ng 01/2019 BAN QU N LÝ KHU NÔNG NGHI P CÔNG NGH CAO TP.HCM TRUNG TÂM NGHIÊN C U VÀ PHÁT TRI N NÔNG NGHI P CÔNG NGH CAO BÁO CÁO NGHI M THU (Đã chỉnh sửa theo góp ý Hội đồng nghiệm thu) NGHIÊN C U TUY N CHỌ KHẢ Ă ỐĐ Ơ, Y N HÓA LÂN VÀ SINH TỔNG HỢP IAA ƠQ Ủ TRÌ (Ký tên, đóng dấu xác nhận) CHỦ NHI ĐỀ TÀI (Ký tên) Phan Thị Hồng Hải Th nh ph Hồ Ch Minh, h ng 01/2019 Trần Hải My TÓM TẮT Hiện nay, đất sử dụng cho nông nghiệp ngày bị thối hóa xuống cấp trầm trọng, đất nơng nghiệp vùng giáp biển bị ảnh hưởng mặn xâm nhập Tại thành phố Hồ Chí Minh, vùng đất nhiễm mặn chủ yếu tập trung huyện Nhà Bè Cần Giờ Đất nhiễm mặn ảnh hưởng tới suất trồng chứa nhiều vi khuẩn gây hại cho người Thực trạng sử dụng phân hóa học thuốc bảo vệ thực vật làm thối hóa đất canh tác, gây ảnh hưởng xấu tới mơi trường Vì giải pháp sử dụng chế phẩm sinh học an toàn hướng đến Kết khảo sát tình hình đất nhiễm mặn trồng canh tác khu vực nhiễm mặn xã thuộc huyện Cần Giờ Nhà Bè cho thấy, đất canh tác khu vực điều tra chủ yếu nhiễm mặn khoảng – 4‰ NaCl Việc canh tác trồng chủ yếu dựa vào thời tiết, trồng đất nhiễm mặn có khả chống chịu suất sau thu hoạch thấp Một số loại trồng phổ biến khu vực lúa loại ăn chuối, xoài, long, Đã phân lập 135 chủng vi khuẩn số mơi trường chọn lọc có bổ sung 4‰ NaCl Kết khảo sát hoạt tính có lợi cho trồng tuyển chọn 35 chủng có hoạt tính cao (khả cố định đạm chủng V36 cao đạt 5,47 mg/L; chủng V82 có số chuyển hóa lân (SI) cao đạt 4,96; chủng V32 có khả sinh IAA đạt 99,94 µg/ml,…) Những chủng vi khuẩn có hoạt tính cao định danh dựa vào phản ứng sinh hóa kỹ thuật Sinh học Phân tử thuộc 10 chi khác nhau, nhiều loài thuộc chi Bacillus sp Pseudomonas sp Từ khóa: vi khuẩn chịu mặn, đất nhiễm mặn, chuyển hóa lân, cố định đạm, sinh tổng hợp IAA BM20-QT QLKH Trang i MỤC LỤC Trang TÓM TẮT i DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iv DANH SÁCH BẢNG v DANH SÁCH HÌNH vi THÔNG TIN ĐỀ TÀI .1 MỞ ĐẦU CH NG 1: T NG QUAN NGHI N CỨU 1.1 Tổng quan vi khuẩn chịu mặn .4 1.2 Tình hình đất nhiễm mặn Việt Nam .5 1.2.1 Khái niệm đất nhiễm mặn 1.2.2 Tác hại đất nhiễm mặn 1.2.3 Tình hình đất nhiễm mặn Việt Nam 1.3 Một số hoạt tính vi khuẩn có lợi cho trồng 1.3.1 Khả cố định đạm tự đất vi khuẩn .9 1.3.2 Khả chuyển hóa lân vi khuẩn .11 1.3.3 Khả sinh IAA vi khuẩn 13 1.4 Tình hình nghiên cứu vi khuẩn chịu mặn nước giới 14 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nước 14 1.4.2 Tình hình nghiên cứu giới 15 CH NG 2: NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 19 2.1 Thời gian địa điểm thực .19 2.1.1 Thời gian thực hiện: 19 2.1.2 Địa điểm thực hiện: .19 2.2 Vật liệu thiết bị 19 2.2.1 Vật liệu 19 2.2.2 Thiết bị 19 2.3 Nội dung nghiên cứu 20 2.4 Phương pháp nghiên cứu 20 2.4.1 Nội dung 1: Điều tra thu thập thông tin tình hình đất nhiễm mặn BM20-QT QLKH Trang ii số khu vực trồng .20 2.4.2 Nội dung 2: Phân lập số d ng vi khuẩn có khả chịu mặn từ vùng rễ trồng đất nhiễm mặn .21 2.4.3 Nội dung 3: Tuyển chọn d ng vi khuẩn chịu mặn có khả cố định đạm, chuyển hóa lân sinh IAA 23 CH NG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 3.1 Nội dung 1: Điều tra thu thập thông tin tình hình đất nhiễm mặn số khu vực trồng .26 3.1.1 Phân bố số phiếu điều tra huyện Cần Giờ Nhà Bè – Tp.HCM 26 3.1.2 Tình hình đất nhiễm mặn số khu vực thuộc huyện Cần Giờ Nhà Bè – Tp.HCM 26 3.1.3 Đặc điểm số giống trồng khu vực nhiễm mặn thuộc huyện Cần Giờ Nhà Bè – Tp.HCM 29 3.2 Nội dung 2: Phân lập số d ng vi khuẩn có khả chịu mặn từ vùng rễ trồng đất nhiễm mặn 33 3.3 Nội dung 3: Tuyển chọn chủng vi khuẩn chịu mặn có khả cố định đạm, chuyển hóa lân sinh IAA 37 CH NG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 4.1 Kết luận 55 4.2 Kiến nghị 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO .56 BM20-QT QLKH Trang iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT VIẾT TẮT THUẬT NGỮ ĐC Đối chứng KL Khuẩn lạc KPH Khơng phát SI Chỉ số chuyển hóa lân TB Tế bào VK Vi khuẩn VSV Vi sinh vật BM20-QT QLKH Trang iv DANH SÁCH BẢNG Bảng Tên bảng Trang 1.1 Các loại đất nhiễm mặn (phân theo nồng độ) ảnh hưởng trồng (Nguồn: Utah State University) 1.2 Khả chịu mặn số loại trồng (Nguồn: FAO, 2012) 3.1 Phân bố số phiếu điều tra huyện Cần Giờ Nhà Bè 24 3.2 Thông tin đất nhiễm mặn số khu vực thuộc Cần Giờ Nhà Bè 24 3.3 Một số tiêu ion mẫu đất nhiễm mặn 25 3.4 Thông tin số giống trồng phổ biến khu vực nhiễm mặn 27 3.5 Thông tin, địa điểm thu thập mẫu 31 3.6 Tổng số vi khuẩn phân lập 32 3.7 Hàm lượng N-NH4+ tổng hợp chủng VK (µg/ml) 34 3.8 Chỉ số chuyển hóa lân (SI) chủng vi khuẩn phân lập 36 3.9 Hàm lượng IAA tổng hợp chủng VK phân lập (μg/mL) 38 3.10 Hình dạng KL hình dạng TB chủng vi khuẩn tuyển chọn 40 3.11 Kết test sinh hóa chủng vi khuẩn tuyển chọn 47 3.12 Danh sách tên dòng vi khuẩn tuyển chọn dựa kết giải trình tự vùng 16S rDNA dùng primer 27F/ 1552R tra NCBI/ BLAST 48 BM20-QT QLKH Trang v DANH SÁCH HÌNH Hình 3.1 Tên hình Vườn chuối trồng xen sả xã Lý Nhơn – Cần Giờ 3.2 Vườn long xã An Thới Đông – Cần Giờ 30 3.3 Cánh đồng lúa xã Long Thới – Nhà Bè 30 3.4 Vườn mãng cầu xã Phước Kiển – Nhà Bè 30 + Trang 30 3.5 Đường chuẩn hàm lượng NH4 (µgN/mL) 33 3.6 Một số hình ảnh vịng chuyển hóa lân chủng vi khuẩn 37 3.7 Đường chuẩn hàm lượng IAA 38 BM20-QT QLKH Trang vi THÔNG TIN ĐỀ TÀI Tên đề tài/dự án: Nghiên cứu tuyển chọn vi khuẩn chịu mặn có khả cố định đạm, chuyển hóa lân sinh tổng hợp IAA Chủ nhiệm đề tài/dự án: Phan Thị Hồng Hải – Trần Hải My Cơ quan chủ trì: Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nông nghiệp Công nghệ cao Thời gian thực hiện: Tháng 1/2018 đến tháng 12/2018 Kinh phí đƣợc duyệt: 172.655.510 đồng Mục tiêu: Tạo sưu tập chủng vi khuẩn có khả chống chịu mặn, giúp trồng phát triển tăng suất điều kiện đất nhiễm mặn Nội dung đề tài: Nội dung 1: Điều tra thu thập thơng tin tình hình đất nhiễm mặn số khu vực trồng Nội dung 2: Phân lập số d ng vi khuẩn có khả chịu mặn từ vùng rễ trồng đất nhiễm mặn Nội dung 3: Tuyển chọn d ng vi khuẩn chịu mặn có khả cố định đạm, chuyển hóa lân sinh IAA Sản phẩm đề tài /dự án: Bộ sưu tập chủng vi khuẩn có khả chịu mặn báo cáo khoa học BM20-QT QLKH Trang MỞ ĐẦU Nông nghiệp ngày trọng đầu tư phát triển Tuy nhiên thực trạng cho thấy, diện tích đất sử dụng cho nơng nghiệp ngày bị thối hóa xuống cấp trầm trọng Một nguyên nhân xâm nhiễm mặn Dưới tác động biến đổi khí hậu, với biểu mực nước biển dâng lên, vấn đề mặn hóa có nguy trầm trọng hơn, đặc biệt khu vực ven biển đồng sơng Cửu Long Tại thành phố Hồ Chí Minh, vùng đất nhiễm mặn chủ yếu tập trung huyện Nhà Bè, Cần Giờ xã phía Nam huyện Bình Chánh Đất nhiễm mặn từ quan điểm nơng nghiệp, đất có tồn loại muối hòa tan nồng độ cao bình thường, gây ảnh hưởng xấu đến trồng Đất nhiễm mặn hạn chế nảy mầm hạt, ức chế "hạch rễ cây" – nơi phát triển vi khuẩn có khả cố định đạm, ảnh hưởng đến q trình chuyển hóa nitơ, hấp thu nước chất dinh dưỡng thực vật Nguy hiểm hơn, đất ngập mặn cịn chứa loại vi khuẩn gây hại cho người Bên cạnh đó, việc sử dụng nhiều phân bón hóa học, thuốc bảo vệ thực vật sản xuất nông nghiệp làm giảm khả chống chịu trồng nguyên nhân dẫn đến thối hóa đất canh tác Những tồn dư sản phẩm hóa học tích lũy hệ sinh thái, trở thành mối hiểm họa nghiêm trọng đe dọa sức khỏe người môi trường sống Một giải pháp cho vấn đề mà nhà khoa học giới Việt Nam hướng đến sử dụng chế phẩm vi sinh vật Hiện nay, có số biện pháp sử dụng để làm giảm độ mặn đất áp dụng thủy lợi, lượng mưa để rửa mặn,bón vơi, cày sâu khơng lật, Tuy nhiên, biện pháp chưa thể làm tăng khả thích nghi tăng trưởng trồng vùng đất nhiễm mặn Một số nghiên cứu ngồi nước cho thấy, có nhiều chúng vi khuẩn Bacillus sp., Pseudomonas sp., Oceanobacillus sp., Virgibacillus sp., Staphylococcus sp., có khả chịu mặn, phát triển gần rễ cây, làm tăng trình thẩm thấu cho hạn chế phát triển vi khuẩn có hại xâm nhập khác Tại đó, chủng vi khuẩn sản sinh chất kháng sinh mà sử dụng để bảo vệ chống lại loại nấm gây hại, kích hoạt q trình sản sinh rễ tạo thành phần thúc đẩy hình thành hạch nhỏ rễ, BM20-QT QLKH Trang V70 Bacillus subtilis strain AB30 BM20-QT QLKH atgaggtgcgggtctataatgcagtcgagcgaatggattaagagcttgctcttatgaagttagctgcggacgggtaagtaaca cgtgggtaacctgcccataagactgggataactccgggaaaccggggcttataccggataacattttgaaccgcatggttcg aaattgaaaggcggcttcggcaatcacttatggatagacccgcgtcgcattagctagttggtgaggtaacggctgaccaagg caacgatgcgtagccgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcag cagtagggaatcttccgcaatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggctttcgggtcgtaaaact ctgttgttagggaagaacaagtgctagttgaataagctggcaccttgacggtacctaaccagaaagccacggctaactacgt gccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttatccggaattattgggcgtaaagcgcgcgcaggtggtttcttaagt ctgatgtgaaagcccacggctcaaccgtggagggtcattggaaactgggagacttgagtgcagaagaatgaagtggaattc catgtgtagcggtgaaatgcgtagagatatggaggaacaccagtggcgaaggcgactttctggtctgtaactgacactgagg cgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgttagagggtt tccgccctttagtgcccaagttaacgcattaagcactccgcctggggagtacggccgcaaggctgaaactcaaaggaattga cgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattggaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcttctgac aaccctagagatagggcttttccttcgggagcagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgg gttaagtcccgcaacgagcgcaacccttgattttagttgccatcattcagttgggcactttaaggtgactgccggtgacaaacc ggaggaaggtggggaggacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggcgacacacgtgttccaatggacggtacaaag agctgcaagaccgcgaggtggagggaatttcataaaaccgttttcagttaggattgtaggctgcaactcgcctacatgaagct ggaatcgttagttatcgcggatcagggtgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccacgag agtttgtaacacccggagtcgcaggggtaacctttttggagctagccgcctaaaggtgggacagatgattgtggtgaagtcg aacaagagctggtg Phụ lục XXXV V73 Rhizobium leguminosarum strain MRG6 BM20-QT QLKH gaataggccggcacgctacacatgcaagtcgagcgccccgcaaggggagcggcagacgggtgagtaacgcgtgggaatc gccgtttgactacggaataacgcagggaaacttgtgctaattgcgtaagtgtccttcgggagaaagatttatcggtcaaggatga gcccgcgttggattagctagttggtggggtaaaggcctaccaaggcgacgatccatagctggtctgagaggatgatcagccac attgggacttgcacacggccaaaactcctacgggaggcagcagtggggaatattggacaatgggcgcaagcctgatccagcc atgccgcgtgagtgatgaaggccctagggttgtaaagctctttcaccggagaagataatgacggtatccggagaagaagcccc ggctaacttcgtgccagcagccgcggtaatacgaagggggctagcgttgttcggaattactgggcgtaaagcgcacgtaggc ggatcgatcagtcaggggtgaaatcccagggctcaaccctggaactgcctttgatactgtcgatctggagtatggaagaggtga gtggaattccgagtgtagaggtgaaattcgtagatattcggaggaacaccagtggcgaaggcggctcactggtccattactgac gctgaggtgcgaaagcgtgtggagcaaacaggattagataccctggtagtccacaccgtaaacgatgaatgttagccgtcggg cagtatactgttcggtggcgcagctaacgcattaaacattccgcctggggagtacggtcgcaagattaaaactcaaaggaattg acgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgcagaaccttaccagcccttgacatgcccggc tacttgcagagatgcaaggttcccttcggggaccgggacacaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgg gttaagtcccgcaacgagcgcaaccctcgcccttagttgccagcattcagttgggcactctaaggggactgccggtgataagcc gagaggaaggtggggatgacgtcaagtcctcatggcccttacgggctgggctacacacgtgctacaatggtggtgacagtgtg aagcgagcacgcgagtgtgagctaatctccaaaaaacgtctcagttcggattgcactctgcaactcgagtgcatgaagttggaa tcgctagtaatcgcggatcagcatgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccatcacaccatggactttggtt ttacccgaaggtagtgcgctaaccgcaaggaggcagctaaccactgtagttacgcggcc Phụ lục XXXVI V82 Nitrobacter vulgaris strain 5NM BM20-QT QLKH agcgaacgctggcggcaggcttaacacatgcaagtcgaacgatggccgtagcgaatacgtcagtggcagacgggtgatta acgcgtgggaacgtaccttttggttcggattaacccagggaaacttgggctaataccggatacggccccacgttacgacaaa aggtttatcggcgaaagttcggcccgcgtctgattagcgtgttggtgaggtaatggctcaacaaggcgacgatcagtagctg gtctgagaggatgatcagccacactgggactgagacacggcccaaactcctacgggaggcagcagtggggaatattggac aatgggcgcaagcctgatccagccatgccgcgtgagtgatgaaggccctagggttgtaaagctcttttgtgcgggaagataa tgacggtaccgcaagaataagccccggctaacttcgtgccagcagccgcggtaatacgaagggggctagcgttgctcgga attactgggcgtaaagggtgcgtaggcgggtctttcggtcaggggtgaaatcccggagctcaactccagaactgcaggcga tactgaggatcttgagtactgcagaggtgagtggaactgcgagtgtagaggtgaaatgcgtagatattcggaagaacaccag tggcgaaggcggctcactggcccaatactgacgctgacacacgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggta gtccacgccgtaaacgatgaatgccagccgttagtgggtttactccctagtggcgcagctaacgctttaagcgccccgcctg gggagtacggtcgcaagattaaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgacg caccgcgcagaaccttaccagggtttgacatgtccatgaccggtcgcagagatgtgaccttctctggggagcatggagcac aggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgtgaga Phụ lục XXXVII V90 Serratia marcescens strain Rh2 BM20-QT QLKH aggtaatgtttgcttgctaaacatgcaaagtcgagcggtagcacaggggagcttgctccctgggtgacgagcggcggacgg gtgagtaatgtctgggaaactgcctgatggagggggataactactggctacggtagctaataccacgtaacgtcgtaagacc aaagagggggaccttcgggcctcttgccatcagatgtgcccagatgggattagctagtaggtggggtaatggctcacctagg agacgatccctagctggcttgagaggatgaccagccacactggaactgagacacggtccagactcctacgggaggcagca gtggggaatattgcacaatgggcgcaagcctgatgcagccatgccgcgtgtgtgaagaaggccttcgggttgtaaagcactt tcagcgaggaggaaggtggtgagctctatacgttcatcaattgacgttactcgcagaagaagcaccggctaactccgtgcca gcagccgcggtaatacggagggtgcaagcgttaatcggaattactgggcgtaaagttcacgcaggcggtttgttaagtcaga tgtgaaatccccgggctcaacctgggaactgcatttgaaactggcaagctagagtctcgtagaggggggtagaattccaggt gtagcggtgaaatgcgtagagatctggaggaataccggtggcgaaggcggccccctggacgaagactgacgctcaggtg cgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgctgtaaacgatgtcgatttggaggttgtgcccttga ggcgtggcttccggagctaacgcgttaaatcgaccgcctggggagtacggccgcaaggttaaaactcaatgaattgacggg ggcccgcacaagcggtggagcattgtggtttaattcgatgcaacgcgaagaaccttacctactcttgacatccagagaactta cagagatgcattggtgccttcgggaacttctgagacagtgctgcatggctgtctcagctcgtggttgtgaatgttgggttagtcc gcacgagcgcacccttatcctttgtgcagcggtcggcagtcactcaaggagatggccgtgataactggaggaaggtgggg aagacttcaagtcac Phụ lục XXXVIII V93 Pseudomonas fluorescens strain FY32 BM20-QT QLKH agtttgatcatggctcagattgaacgctggcggcaggcctaacacatgcaagtcgagcggcagcacgggtacttgtacctgg tggcgagcggacgggtgagtagtgcctaggaatctgcctggtagtgggggataacgctcggaaacggacgctaataccgc atacgtcctacgggagaaagcaggggaccttcgggccttgcgctatcagatgtaggtcggattagctagttggtgaggtaat ggctcaccaaggacgatccgtaactggtctgagaggatgatcagtcacactggaactgagacacggtccagactcctacgg gaggcagcagtggggaatattggacaatgggcgaaagcctgatccagccatgccgcgtgtgtgaagaaggtcttcggattg taaagcactttaagttgggaggaagggcagttacctaatacgtaattgtttgactgacgttaccgacagaataagcaccggcta actctgtgccagcagccgcggtaatacagagggtgcaagcgttaatcggaattactgggcgtaaagcgcgcgtaggtggtt cgtaaagttggatgtgaaatccacgggctcgacctgcgaactgcattcaaaagagtcgagctagaggatggtagatggtggt ggaatttcctgtgtagcggtgaaatgcgtagatataggaaggaacaccagtggcgaaggcgaccacctggaactgatactg acactgaggtgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgtcaactagccgt tgggagccttgagctcttagtggcgcagctaacgcatcaagttgaccgcctggggagtacggccgcaaggttaaaactcaa atgaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggccttgac atccaatgaactttccagagatggatgggtgccttcgggaacattgagacaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgt gagatgttgggttaagtcccgtaacgagcgcaacccttgtccttagttaccagcacgttatggtgggcactctaaggagactg ccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaagtcatcatggccacggcctgggctacacacgtgctacaatggt cggtacagagggttgccaagccgcgaggtggagctaatcccacaaaaccgatcgtagtccggatcgcagtctgcaactcg actgcgtgaagtcggaatcgctagtaatcgcgaatcagaatgtcgcggtgaatacgttcccgcttgtacacaccgcccgtcac accatgggcaagtgttgcaccagaagtagctagtctaaccttcgggaggacggttaccacggtgtgattcatgactggggtg aagtcgtaacaaggtagccgtaggggaacctgcggctggatcacctccttgacgaccgcagcggcttcatgagctcccaca cgaattgcttgattcattgaagaagacgattgggtctgtagctca Phụ lục XXXIX V97 Bacillus flexus strain XJU-2 BM20-QT QLKH gctatacatgcaagtcgagcgaactgattagaagcttgcttctatgacgttagcggcggactggtgagtaacaagtgggcaa cctgcctgaaagactgggataactcctggaaaccggagctaataccggataacattttccaatgcataagagaaaattgaaag atggtttcggctatcacttacagatgggcccgcggccgattagctagttggtgatttaacggctcaccaaggcaacgatgcat agccgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtagggaat cttccgcaatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggctttcgggtcgtaaaactctgttgttaggg aagaacaagtacaagagtaactgcttgtaccttgacggtacctaaccagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgc ggtaatacgtaggtggcaagcgttatccggaattattgggcgtaaagcgcgcgcaggcggtttcttaagtctgatgtgaaagc ccacggctcaaccgtggagggtcattggaaactggggaacttgagtgcagaagagaaaagcgcaattccacgtgtagcgg tgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaagtcggctttttggtctgtaactgacgctgaggcgcgaaagcgt ggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgttagagggtttccgccctttagt gctgcagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtcgcaagactgaaactcaaaggaattgacgggggcccgc acaagcggtggagcatgtggtttaattccaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcctctgacaactaaagagat agagcgttccccttcgggggacagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtccc gcaacgagcgcaacccttgatcttagttgccagcatttagttgggcactctaaggtgactgccggtgacaaaccggaggaag gtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggctacacacgtgctacaatggatggtacaaagggctgcaaga ccgcttggtcaagccaatcccataaaaccattctcagcaccaattgtaggctgcaactcgcctacatgaagctggaatcgcta gtaatcgcggatcagcatgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccacgagagcatgtaac acccgaagtcggtggggtaacctttatggagccagccgcctaaggtgggacagatgattggggtgaagttgtaaccaa Phụ lục XL V100 Rhizobium tropici strain 7G2 BM20-QT QLKH agccccgggctaacttcgtgccagcagccgcggtaatacgaagggggctagcgttgttcggaattactgggcgtaaatcac acgtaggcggatcgatcagtcaggggtgaaatactagggctcaaccctggaactgcctttgatactgtcgatctggagtatgg tcacggtgagtggaattccgagtgtagaggtgaaattcgtagatattcggaggaacaccagtggcgaaggcggctcactggt ccattactgacgctgaggtgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgaat gttagccgtcgggcagtatactgttcggtggcgcagctaacgcattaaacattccgcctggggagtacggtcgcaagattaa aactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgcagaaccttaccag cccttgacatcctgtgttaccagtagagatattgggtccacttcggtggcgcagagacaggtgctgcatggctgtcgtcagctc gtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaaccctcgcccttagttgccagcatccagttgggcactctaagg ggactgccggtgataagccgagaggaaggtggggatgacgtcaagtcctcatggcccttacgggctgggctacacacgtg ctacaatggtggtgacagtgggcagcgagcacgcgagtgtgagctaatctccaaaagccatctcagttcggattgcactctg caactcgagtgcatgaagttggaatcgctagtaatcgcggatcagcatacggcggtgaatacgttcccgggccttgtacacat aacccgtcacaccatgggagttggttttacccgaaggtagtgcgctaaccgcaaggaggcagctaaccacggtag Phụ lục XLI V110 Pseudomonas putida strain JS1014 Soil F5 BM20-QT QLKH tgcagtcgagcggatgacgggagcttgctccttgattcagcggcggacgggtgagtaatgcctaggaatctgcctggtagtg ggggacaacgtttcgaaaggaacgctaataccgcatacgtcctacgggagaaagcaggggaccttcgggtcttgcgctatc agatgagcctaggtcggattagctagtaggtggggtaatggctcaccaaggcgacgatccgtaactggtctgaaaggatgat cagttacactggaactgagacacggtccagactcctacgggaggcagcagtggggaatattggacaatgggcgaaagcct gatccagccatgccgcgtgtgtgaagaaggtcttcggattgtaaagcactttaagttgggaggaagggcagtaagttaatacc ttgctgttttgacgttaccgacagaataagcaccggctaactctgtgccagcagccgcggtaatacagagggtgcaagcgtta atcggaattactgggcgtaaagcgcgcgtaggtggttcgttaagttggatgtgaaagccccgggctcaacctgggaactgca tccaaaactggcgagctagagtacggtagagggtggtggaatttcctgtgtagcggtgaaatgcgtagatataggaaggaac accagtggcgaaggcgaccacctggactgatactgacactgaggtgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagatacc ctggtagtccacgccgtaaacgatgtcaactagccgttggaatccttgagattttagtggcgcagctaacgcattaagttgacc gcctggggagtacggccgcaaggttaaaactcaaatgaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaatt cgaagcaacgcgaagaaccttaccaggccttgacatgcagagaactttccagagatggattggtgccttcgggaactctgac acaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgtaacgagcgcaacccttgtccttagtta ccagcacgttatggtgggcactctaaggagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaagtcatcatg gcccttacggcctgggctacacacgtgctacaatggtcggtacagaggtttgccaagccgcgaggtggagctaatctcaca aaaccgatcgtagtccggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagtcggaatcgctggtaatcgcgaatcagaatgtcgc ggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccatgggagtgggttgcaccagaagtagctagtcttaccttc gggaggacggt Phụ lục XLII V117 Micrococcus luteus partial isolate 14:2 BM20-QT QLKH ttgctgggtggattattggcgaacgggtgagtatcacgtgagtaacctgcccttaactctgcaataatcttggaaaacggggtc taataccggataggagcgtccaccgcatggtgggtgttggaacgatttatcggttttggatggacttgcggcctatcagcttgtt ggtgaggtaatggctcaccaaggcgaccatgggtagccggcctgagagggtaaccggccacgctgggactgaaacacg gcccatactcctacttgacgcagcagtggggaatattgcacaatgggcgaaagcctgatgcagcgacgccgcgtgaggga tgacggccttcgggttgtaaacctctttcagtagggaagaagcgaaagtgacggtacctgcagaagaagcaccggctaact acgtgccagcagccgcggtaatacgtagggtgcgagcgttatccggaattattgggcgtaaagagctcgtaggcggtttgtc gcgtctgtcgtgaaagtccggggcttaaccccggatctgcggtgggtacgggcagactatagtgcgtagggagacggaatc tgtgtgcggtggatcgcaatatcaggaggaacaccgatggcgaaggcaggtctctgggctgtaactgacgctgacagtcgc gtgcatggggagcgaacaggattagataccctggtagtccatgccgtaaacgttgggcactcgtagtggggaccattccca ggtttccgcgccgcagctaacgcattaagtgccccgcctggggagtacccccgcaaggctaaaactcaaaggaattgacg ggggcccgcacaagcggcggagcatgcggattaattcgatgcaacgcgaagaaccttaccaaggcttgacatgttctcgat cgccgtagagatacggtttcccctttggggcgggttcacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttggg gtaagtcccgcaacgagcgcaaccctcgttccatgttgccagcacgtcgtggtggggactcatgggagactgccggggtca actcggaggaaggtgaggaggacgtcaaatcatcatggtacctatgtctttggcttcacgcatgttacgatggccggtacaat gggttgcgatactgtgaggtggagctaatccctgaaagccggtctcagtttggattggggtctgcaactcgaccccatgaagt cggagtcgctagtaatcgcagatcagcggcggtacggtgaatacgttcccgggccttgtacac Phụ lục XLIII V125 Nitrosomonas europaea strain NH7 BM20-QT QLKH cgcggcatgctttaccatgcaagtcgagcggcagcgggggcttcggcctgccggcgagtggcgaacgggtgagtaatac atcggaacgtgcccttaagtggataacgcatcgaaagatgtgctaataccgcatatctctgagaaagcaggggaccgcaag gccttgcgctaaaggagcggccgatgtctgattagctagttggtggggtaaaggcttaccaaggcaacgatcagtagttggt ctgagaggatggccaaccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtggggaatattggaca atgggcgaaagcctgatccagccatgccgcgtgtgtgaagaaggtcttcggattgtaaagctctttaagttggaaagaaaga gttgcagttaataattgtgatttttgacgttaccaacagaataagcaccggctaacttcgtgccagcagccgcggtaatacgaa gggtgcgagcgttaatcggaattactgggcgtaaagggtgcgcaggcggtcttgcaagtcagatgtgaaatccccgggctc aacctgggaactgcatttgaaactacaaggctagagtgcagcagaggggagtggaattccctgtgtagcagtgaaatgcgta gagatgtggaagaacaccgatggcgaaggcagctccctgggttgatactgacactgaggcacgaaagcgtggagcaaac aggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgtcgactagttgttggatctaattaaggatttggtaacgcagctaac gcgtgaagttgaccgcctggggtacggtcgcaagattaaaactcaaatgaattgacgggggcccgcacaagcggtggatta tgtggtttaattcgatgcaacgcgaaaaaccttacctacccttgacatgcttggaatctaatggagacataagagtacccgaaa gggagccaagacacaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaac ccttgtcactaattgctatcattttataatgagcactttagtgagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtc aagtcatcatggcccttacgggtagggctacacacgtaatacaatggcgtgtacagagggttgccaacccgcgaggagcca atctcagaacgtcgtagtccggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagtcggaatcgctagtaatcgtgaatcagaatgt cacggtgaatacgttcccgggtcttgtacacaccgcccgtcacaccatggg Phụ lục XLIV V127 Bacillus pumilus strain Xpq3 BM20-QT QLKH tgcagtcggtcggacagaagggagcttgctcccggatgttagcggcggacgggtgagtaacacgtgggtaacctgccaac aagactgggataactccgggaaaccggagctaataccggatagttccttgaacccggtggttcactgatgagacccggtttc ggctgtcacttacagatggacccgcggcgcattagctagttggtggggtaatggctcaccaaggcgacgatgcgtagccga cctgagagggtgatcggccacactgggaaggagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtagggaatcttccgc aatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcggatcgtaaagctctgttgttagggaagaaca agtgcgagagtaactgctcgcaccttgacggtacctaaccagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaata cgtaggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagggctcgcaggcggtttcttaagtctgatgtgaaagcccccgg ctcaaccggggagggtcattggaaactgggaaacttgagtgcagaagaggagagtggaattccacgtgtagcggtgaaat gcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaaggcgactcaacggtctgtaactgacgctgaggagcgaaagcgtgggg agcgaacaggattagataccctggtagtccttgacgtaaacgatgagggttaagtgttagggggtttccgccccttagtgctg cagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtcgcaagactgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaa gcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcctctgacaaccctagagatagg gctttcccttcggggacagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaac gagcgcaacccttgatcttagttgccagcatttagttgggcactctaaggtgactgccggtgacaaaccggaggaaggtggg gatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggctacacacgtgctacaatggactgaacaaagtgctgcgagaccgca aggtttagccaatcccataaatctgacatcagttcggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagctggaatcgctagtaatc gcggatcagcatgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtgcacaccgcccgtcacaccacgagagtttgcaacacccga agtcggttaggtaacctttatggagccagccgccgaaggtggggcagatga Phụ lục XLV V129 Bacillus subtilis strain U1PB1 BM20-QT QLKH ccggggaggcggggcgctataatgcagtcgagcggacagatgggagcttgctccctgagtttagcggcggacgggagag taacacgtgggtaacctgcctgtaagactgggataactccgggaaaccgggaataataccggatggttgtctgacccgcatg gttcagacataaaaggtggcttcggctacaacttacagatttacccgcggcgcatggtctagttggttaggtaacggctcacca aggcgacgatgcgtagccgacctgagagggtgatcggaagcactgggactgagacacggcccagactcctacgggagg cagcagtagggaatcttccgcaatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcggatcgtaaa gctctgttgttagggaagaacaagtgccgttcaaatagggcggcaccttgacggtacctaaccagaaagccacggctaacta cgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagggctcgcaggcggtttctta agtctgatgtgaaagcccccggctcaaccggggagggtcattggaaactggggaacttgagtgcagaagaggagagtgg aattccacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaaggcgactctctggtctgtaactgacg cccaggagcgaaagcgtggggagcgaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgtta gggggtttccgccccttagtgctgcagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtcgcaagactgaaactcaaa ggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgaca tcctctgacaatcctagagataggacgtccccttcgggggcagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtg agatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttgatcttagttgccagcattcagttgggcactctaaggtgactgccg gtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgacctacacacgtgctacaatggac agaacaaagggcagcgaaaccgcgaggttaagccaatcccacaaataatttctcagttcggatcgcagtctgcaactcgact gcgtgaagctggaatcgctagttgtcgcggatcagcaaaccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtc acaccacgagagtttgtaacacccgaagtcggtgaggtaaccttttaggagccagccgccgaaggtgggacagatgatag ggggaagtcgtaacaatgtgccttttcgg Phụ lục XLVI V130 Pseudomonas fluorescens strain P22Y05 BM20-QT QLKH cctacgggagaaagtgggggatcttcggacctcacgctattagatgagcctaggtcggattagctagttggtgtaatggctca ccaaggcgacgatgtaactggtctgagaggatgcatcacactggaactgagacacggtccagactcctacgggaggcagc agtggggaatattggacaatgggcgaaagcctgatccagccatgccgcgtgtgtgaagaaggtcttcggattgtaaagcact ttaagggaggaagggcactaatacgtgattgttttgacgttaccgacagaataagccggctaactctgtgccagcagccgcg gtacagagggtgcaagcgttaatcggaattactgggcgtaaagcgcgcgtaggtggtttgttaagttggatgtgaaagcccc gggccctgggaactgcatccaaaactggcaagctagagtatggtagagggtggtggaatttcctgtgtagcggtgaaatgc gtagatatggaacaccagtggcgaaggcgaccacctggactgatactgaggtgcgaaagcggggagcaaacaggattag ataccctggtagtccacgtaaacgatgtcaacta Phụ lục XLVII V132 Brevibacillus parabrevis strain NAP3 BM20-QT QLKH aatttgggggggccctttttgtttttttaattttttttgctcaggacgaacgctggcggcgtgcctaatacatgcaagtcgagcgag ggttttcggaccctagcggcggacgggtgagtaacacgtaggcaacctgcctctcagaccgggaatagggaaacttatgct aataccggataggtttttggattgcatgatccgaaaagaaaagatggcttcggctatcactgggagatgggcctgcggcgcat tagctagttggtggggtaacggcctaccaaggcgacgatgcgtagccgacctgagagggtgaccggccacactgggactg agacacggcccagactcctacgggaggcagcagtagggaattttccacaatggacgaaagtctgatggagcaacgccgc gtgaacgatgaaggtcttcggattgtaaagttctgttgtcagggacgaacacgtgccgttcgaatagggcggtaccttgacgg tacctgacgagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccggatttattgg gcgtaaagcgcgcgcaggcggctatgtaagtctggtgttaaagcccggagctcaactccggttcgcatcggaaactgtgta gcttgagtgcagaagaggaaagcggtattccacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaa ggcggctgtctgtaactgacgctgaggcgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgta aacgatgagtgctaggtgttgggggtttcaataccctcagtgccgcagctaacgcaataagcactccgcctggggagtacgc tcgcaagagtgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaa gaaccttaccaggtcttgacatcccgctgaccgctctggagacagagcttcccttcggggcagcggtgacaggtggtgcatg gttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttatctttagttgccagcattcagttgg gcactctagagagactgccgtcgacaagacggaggaaggcggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggct acacacgtgctacaatggttggtacaacgggatgctacctcgcgagaggacgccaatctctgaaaaccaatctcagttcgga ttgtaggctgcaactcgcctacatgaagtcggaatcgctagtaatcgcggatcagcatgccgcggtgaatacgttcccgggc cttgtacacaccgcccgtcacaccacgggagtttgcaacacccgtcggtgaggtaaccgcaaggagccagccgccgaag gtggatgactgggtgatctacaggaggagacccccacagagataaaaggagaaaggaaaaaaaaaaa Phụ lục XLVIII V134 Bacillus licheniformis strain TRTYP11 BM20-QT QLKH tcaggacgttggctggcggcgtgcctaatacatgcaagtcgagcggacagatgggagcttgctccctgatgttagcggcgg gtaggtgagtaacacgtgggtaacctgcctgtaagactgggataactccgggaaaccggggctaataccggatgcttgattg aaccgcatggttcaattataaaaggtggcttttagctccaacttacagatactgccgcggtgcattagctagttggtgaggtaac ggctcaccaaaacgacgatgcgtagccgacctgagagggggatcggccacactgggactgagacacggcccagactcct acgggaggcagcagtagggaatcttccgcaatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcg gatcgtaaaactctgttgttagggaagaacaagtaccgttcgaatagggcggtaccttgacggtacctaaccagaaagccac ggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagcgcgcgcag gcggtttcttaagtctgatgtgaaagcccccggctcaaccggggagggtcattggaaactggggaacttgagtgcagaaga ggagagtggaattccacgtgtagcgctgaaatgaatagagatgtggaggaacaccaccagcgaaggcgactctctggtctg taactgacgctgaggcgcgaaagcgtggggagcgaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgc taagtgttagagggtttccgccctttagtgctgcagcaaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtcgcaagactgaa actcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggt cttgacatcctctgacaaccctagagatagggcttccccttcgggggcagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcg tgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttgatcttagttgccagcattcagttgggcactctaaggtga ctgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgttgcacacacgtgctacaa accccagaacaaagggcagcgaagccgcgaggctaagccaatcccacaaatctgttctcagttcggatcgcagtctgcaac tcgactgcgtgaagctggaatcgctagtaatcttggatcaccatgcccgggggtaaaaaactttcccggggccttgtacacac cgcccgtcacaccacgaagagtttgtaacacccgaagtccggtgaggtaaccttttggagccagccgccgagggtgggac agatgattggggtga Phụ lục XLIX