Đang tải... (xem toàn văn)
Microsoft Word So KHCN BC Nghiem Thu 07 02 Approved ỦY BAN NHÂN DÂN TP HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BÁO CÁO NGHIỆM THU (Đã chỉnh sửa theo góp ý của Hội đồng nghiệm thu) NGHIÊN CỨU ÁP DỤNG KỸ THUẬT SIN[.]
ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BÁO CÁO NGHIỆM THU (Đã chỉnh sửa theo góp ý Hội đồng nghiệm thu) NGHIÊN CỨU ÁP DỤNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ VÀO SÀNG LỌC VÀ CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH BỆNH DI TRUYỀN THALASSEMIA CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI (Ký tên) PHẠM VIỆT THANH CƠ QUAN QUẢN LÝ SỞ KH&CN TP.HCM (Ký tên/đóng dấu xác nhận) CƠ QUAN CHỦ TRÌ BỆNH VIỆN TỪ DŨ (Ký tên/đóng dấu xác nhận) THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 8/2010 CÁM ƠN Để thực thành cơng cơng trình nghiên cứu này, nhóm nghiên cứu ₫ã nhận ₫ược nhiều hỗ trợ, giúp ₫ỡ, ₫óng góp quý báu bệnh nhân, ₫ồng nghiệp tổ chức Chúng xin trân trọng cám ơn - Sở Khoa học Công nghệ ₫ã cung cấp phần kinh phí ₫ể thực ₫ề tài - Bệnh viện Truyền máu Huyết học ₫ã hợp tác, hỗ trợ chuyên môn - Ban giám ₫ốc ₫ồng nghiệp khoa phòng Bệnh viện Từ Dũ ₫ã tạo ₫iều kiện mặt ₫ể ₫ề tài ₫ược triển khai ₫ạt kết tốt - Cô Hương Lê Khoa Di truyền Phân tử Lâm sàng thuộc Bệnh viện Royal Prince Alfred Hospital, Sydney ₫ã giúp ₫ỡ kỹ thuật nguồn mẫu chứng - Đặc biệt cám ơn hiểu biết tham gia gia ₫ình bệnh nhân yếu tố ₫ịnh cho thành công ₫ề tài TÓM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Thalassemia nhóm bệnh di truyền lặn gây thiếu máu tan huyết Bệnh phổ biến Việt Nam tạo gánh nặng lớn cho gia đình xã hội Sàng lọc chẩn đoán trước sinh phát thai bị bệnh nặng biện pháp phòng ngừa hiệu Tổ chức y tế giới khuyên dùng Chúng tiến hành nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử vào công tác sàng lọc chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia để phát sớm, quản lý can thiệp kịp thời trường hợp thai mắc bệnh Đối tượng nghiên cứu thực thai phụ đến khám thai bệnh viện Từ Dũ đồng ý tham gia sàng lọc chẩn đoán Nghiên cứu đạt kết gồm: (1) Quy trình sàng lọc chẩn đốn trước sinh; (2) Quy trình kỹ thuật điều kiện thực chẩn đoán kiểu gen đột biến trước sinh; (3) Bảng số liệu thống kê tần suất phân bố kiểu gen gây bệnh thalassemia; (4) Báo cáo phân tích tương quan kiểu gen kiểu hình huyết học bệnh thalassemia; (5) Tài liệu hướng dẫn kỹ thuật di truyền phân tử chẩn đoán trước sinh; (6) Tài liệu giáo dục truyền thông cộng đồng; (7) Bài báo khoa học Kết thống kê cho thấy số MCH có khả phát cao từ 94,8%, đột biến α-thalassemia chiếm 68,7% (546/795) tổng số alen đột biến phát hiện, gấp đôi đột biến β-thalassemia Hiện tượng mang đồng thời đột biến αthalassemia β-thalassemia cần quan tâm để tránh bị bỏ sót SUMMARY OF RESEARCH CONTENT Thalassemia is a group of recessive genetic disorders causing hemolytic anemia It is quite frequent in Vietnam resulting in larger burden on families and society Prenatal screening and diagnosis to detect severe affected fetuses is an effective prevention method that is recommended by World Health Organisation i We conduct a study on application of biomolecular techniques into prenatal screening and diagnosis of thalassemia to early detect, manage and intervene affected fetuses The study objects are pregnant women who have pregnancy care at Tu Du Hospital agreeing to participate in screening and diagnosis The outcomes of study include: (1) Procedure of prenatal screening and diagnosis; (2) Technical procedure and conditions of prenatal diagnosis of mutations; (3) Table of distribution data of thalassemia genotypes; (4) Reports of the relationship between genotypes and hematology phenotypes of thalassemia; (5) Guidelines of molecular genetic techniques in prenatal diagnosis; (6) Profile of community education and communication; (7) Published articles The results also show that MCH has a high detection rate from 94.8%, αthalassemia alleles occupies 68.7% (546/795) detected alleles which is more than twice as many of β-thalassemia alleles There is also a situation of α-thalassemia and β-thalassemia concurrent that should be concerned ii MỤC LỤC Tóm tắt nội dung nghiên cứu i Mục lục iii Bảng ký hiệu chữ viết tắt v Bảng ký hiệu đột biến gen globin vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sinh toång hợp globin hemoglobin 1.2 Nhóm bệnh hemoglobin bất thường 1.3 Nhóm bệnh thalassemia 1.4 Chương trình phòng chống bệnh thalassemia 10 1.5 Tình hình việt nam 11 1.6 Tầm soát bệnh thalassemia 13 1.7 Chẩn đoán phân tử bệnh thalassemia 14 1.8 Chẩn đoán phân tử bệnh thalassemia việt nam 20 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯNG – VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Đối tượng nghiên cứu 23 2.2 Phương pháp nghiên cứu 23 2.3 Phương tiện nghiên cứu 25 2.4 Kỹ thuật nghiên cứu 25 2.5 Vấn đề y đức 29 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 31 3.1 Lựa chọn xác lập kỹ thuật sinh học phân tử để chẩn đoán trước sinh 31 3.2 Xây dựng quy trình sàng lọc chẩn đoán 33 3.3 Quy trình tư vấn trước sau xét nghiệm kiểu gen 34 3.4 Thống kê kết nghiên cứu 34 3.5 Xây dựng phần mềm quản lý liệu nghiên cứu 56 3.6 Tập huấn trao đổi kinh nghieäm 58 3.7 Bài báo khoa học 59 KẾT LUẬN 60 Về kết thực đề tài: 60 iii Veà đặc điểm bệnh thalassemia đối tượng nghiên cứu: 61 KIẾN NGHỊ 65 Tài liệu tham khảo Phụ lục iv BẢNG KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu -3.7 a3.7 -4.2 a4.2 MED SEA SEA HbE HbCS CS Ý nghĩa Gen alpha globin Gen beta globin Gen delta globin Gen gamma globin Gen zetta globin Đột biến 3.7 kb deletion alpha plus thalassemia Đột biến 4.2 kb deletion alpha plus thalassemia Đột biến Mediterranean deletion alpha zero thalassemia Đột biến South East Asia deletion alpha zero thalassemia Đột biến Hb E (Codon 26 GAG>AAG) Đột biến Hb Constant Spring Viết tắt ACRs A-RFLP ARMS ASA ASO BVTD BVTMHH CCA CĐTS ddNTP DGGE DHPLC Hb HBA HBB MCH MCV MLPA MS-PCR PCR RDB RFLP SLTS SSCA Thal WHO Wt Ý nghĩa amplified created restriction sites artificial-restriction fragment length polymorphism amplification refractory mutation system allele specific amplification allele specific oligonucleotide hybridization Bệnh viện Từ Dũ Bệnh viện Truyền máu Huyết học TPHCM color complementation assay chẩn đoán trước sinh dideoxynucleotide triphosphat denaturing gradient gel electrophoresis denaturing high performance liquid chromatography hemoglobin haemoglobin gen human -globin gen human -globin mean corpuscular hemoglobin mean corpuscular volume multiplex ligation-dependent probe amplification multiplexing mutagenically separated PCR polymerase chain reaction reverse dot blots restriction fragment length polymorphism analysis sàng lọc trước sinh single stranded conformation analysis thalassemia thalassaemia World Health Organisation wild type, kiểu gen bình thường v BẢNG KÝ HIỆU ĐỘT BIẾN GEN GLOBIN Đột biến gen β-globin -28 A>G Đột biến vùng promoter, vị trí -28, A đổi thành G Làm giảm phiên mã gen β-globin Loại đột biến: β+ Codon 17 AAG>TAG Đột biến codon 17 thuộc exon 1, AAG (Lysine) đổi thành TAG (Stop) Làm dừng dịch mã gen β-globin codon 17 Loại đột biến: β0 Codon 26 GAG>AAG Đột biến codon 26 thuộc exon 1, GAG (Glutamine) đổi thành AAG (Lysine) Đột biến tạo chuỗi variant βE-globin đồng thời tạo vị trí ghép nối bất thường với đầu 5’ IVS-1 Kiểu gen dị hợp tử gây thiếu máu nhẹ Kiểu gen đồng hợp tử rối loạn lành tính Dị hợp tử kép HbE đột biến β-thalassemia khác gây thiếu máu nặng Codon 26 GAG>TAG Đột biến codon 26 thuộc exon 1, GAG (Glutamin) đổi thành TAG (Stop) Làm dừng dịch mã gen β-globin codon 26 Loại đột biến: β0 Codon 41/42 TCTT Đột biến codon 41 42 thuộc exon 2, TTC.TTT (phenyl.phenyl) đổi thành TT, làm lệch khung dịch mã tạo codon 59 (Stop) Loại đột biến: β0 Codon 71/72 +A Đột biến chèn thêm A codon 71 72 thuộc exon 2, làm lệch khung dịch mã tạo codon 73 (TGA : Stop) Loại đột biến: β0 Codon 95 +A Đột biến chèn thêm A vào codon 95 thuộc exon 2, làm lệch khung dịch mã dừng dịch mã codon 101 (TGA : Stop) Loại đột biến: β0 IVS 1-1 G>T Đột biến Intron 1, vị trí 1, G đổi thành T, làm thay đổi GT vị trí ghép nối bình thường nên không tạo mRNA Loại đột biến: β0 IVS 2-654 C>T Đột biến Intron 2, vị trí 654, C đổi thành T, tạo vị trí giới hạn Loại đột biến: β+ nặng Poly A tail T>C Đột biến đuôi poly A, AATAAA đổi thành AACAAA làm q trình tách polyadenylation poly A khơng hiệu Loại đột biến: β+ Đột biến gen α-globin SEA Đột biến đoạn DNA khoảng 20kb chứa gen α-globin không tạo mRNA Loại đột biến α-thalassemia THAI Đột biến đoạn DNA khoảng 34 - 38kb chứa gen α-globin không tạo mRNA Loại đột biến α-thalassemia DUTCH Đột biến đoạn hoàn toàn ổ gen -globin có chiều dài gần 70kb khơng tạo mRNA Loại đột biến α-thalassemia -3.7 Đột biến đoạn DNA dài 3,7kb bao gồm đầu 3’ gen α-globin đầu 5’ gen α-globin Loại đột biến α-thalassemia -4.2 Đột biến đoạn DNA dài 4,2kb làm hoàn toàn gen α-globin Loại đột biến α-thalassemia HbCS Đột biến gen α-globin codon 142, TAA (Stop) đổi thành CAA, làm kéo dài thêm 31 codon tạo chuỗi variant Constant Spring Loại đột biến α-thalassemia c.*107A>G Đột biến gen α-globin vị trí +832, A đổi thành G Loại đột biến α-thalassemia vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Kiểu gen 319 bệnh nhân Hb H California, Hong Kong Toronto Bảng 1.2 Các đột biến -thalassemia phổ biến số quần thể giới Bảng 1.3 Tỉ lệ (%) mang gen -thalassemia người Việt Nam 13 Bảng 1.4 Tỉ lệ (%) mang gen HbE -thalassemia nhóm chủng tộc Việt Nam 14 Bảng 1.5 Các phương pháp sàng lọc thalassemia thể dựa số MCV MCH 15 Bảng 1.6 Các kỹ thuật phân tử khảo sát đột biến gây bệnh - -thalassemia 16 Bảng 2.1 Tỉ lệ (%) nghiên cứu trước 26 Bảng 2.2 Định nghĩa biến số nghiên cứu 33 Bảng 3.1 Tóm tắt số kết thực 39 Bảng 3.2 Phân bố loại mẫu khảo sát đột biến đối tượng nghiên cứu 40 Bảng 3.3 Đặc điểm nơi cư trú nhóm dân tộc đối tượng nghiên cứu 41 Bảng 3.4 Phân bố loại gen alen khảo sát trường hợp chẩn đoán 41 Bảng 3.5 Số lượng alen đột biến phát đối tượng nghiên cứu 42 Bảng 3.6 Phân bố loại đột biến phát 890 vợ chồng bệnh nhân 43 baung 3.7 Phân bố kiểu gen 890 cặp vợ chồng bệnh nhân 45 Bảng 3.8 Phân bố kiểu gen thai, kiểm tra sau sinh cặp vợ chồng 47 Bảng 3.9 Kết sàng lọc -thalassemia công thức sàng lọc theo kiểu gen 49 Bảng 3.10 Kết sàng lọc -thalassemia công thức sàng lọc theo kiểu gen 51 Bảng 3.11 Kết sàng lọc trường hợp mang alen đột biến - -thalassemia công thức sàng lọc theo kiểu gen 53 Bảng 3.12 Chỉ số MCV (fl) phân bố theo kiểu gen 54 Bảng 3.13 Chỉ số MCH (pg) phân bố theo kiểu gen 55 Bảng 3.14 Tỉ lệ Hb A2 (%) phân bố theo kiểu gen 56 Bảng 3.15 Tỉ lệ Hb E (%) phân bố theo kiểu gen 57 Bảng 3.16 Tỉ lệ Hb F (%) phân bố theo kiểu gen 58 Bảng 3.17 Tỉ lệ Hb H (%) phân bố theo kiểu gen 58 vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Ổ gen α β tổng hợp globin giai đoạn phát triển người Hình 1.2 Các đột biến đoạn gen alpha globin 0-thalassemia Hình 1.3 Các đột biến ñoaïn 1gen +-thalassemia Hình 1.5 Nguyên tắc Gap-PCR 16 Hình 1.6 Nguyên tắc phương pháp MLPA 17 Hình 1.7 Phương pháp giải trình tự Sanger 19 Hình 1.8 Điện di mao quản xác định trình tự DNA 20 Hình 2.1 Lưu đồ tư vấn chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia 27 Hình 2.2 Lưu đồ chẩn đoán alpha thalassemia 28 Hình 2.3 Lưu đồ chẩn ñoaùn beta thalassemia 29 Hình 3.1 Lược đồ phân bố trường hợp khảo sát đột biến gen 36 viii PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ GEN (SEQUENCING) Các trường hợp sàng lọc bỏ sót G>A A>T Bệnh nhân 1: mang gen beänh Codon 17 A > T & Codon 26 G > A người mang gen có MCH > 28pg 12 người mang gen có MCV > 80fL Đột biến gen Alpha globin -α3.7/N, -α4.2/N -α3.7/N, -α4.2/N, HbCS/N Đột biến gen Beta globin Codon 26 GAGỈTAG 3/12 HbE +A BệnhPHỊNG nhâDI n TRUYỀN 2: mang gien bệnh Codon 95 +A PHỊNG DI TRUYỀN Phân bố kiểu gen 251 đối tượng mang gen đột biến KIỂU GEN TỔNG SỐ T.số NGƯỜI LỚN Tỉ lệ (%) T.số Một trường hợp Alpha thalassaemia THAI Tỉ lệ (%) T.số Tỉ lệ (%) 119 47,4 101 51,3 18 33,3 -α3.7/N; -α4.2/N; HBCS/N; -α4.2/-α3.7 25 10,0 20 10,2 9,4 Bệnh HbH: SEA/-α3.7; SEA/-α4.2; DUTCH2/-α4.2 14 5,6 11 5,6 5,6 13 0 13 24,1 HbE/N 30 12,0 27 13,7 5,6 Beta/N 33 13,1 28 14,2 HbE/HbE 0,4 0,5 0 Βeta thalassemia nặng: HbE/Beta; Beta/Beta 3,2 3,7 SEA/N, THAI/N SEA/αCSα; Bệnh Hb Bart’s: SEA/ SEA; SEA/ DUCHT2 Beta thalassemia 9,3 Alpha vaø beta thalassemia SEA/Beta 0,4 0,5 0 SEA/HbE 2,4 1,0 7,4 -α3.7/Beta Tổng số 0,4 0 1,9 251 100 197 100 54 100 Hoa, 32t (αα/ ) Tuấn, 34t ( /αα) Alpha thalassemia Phù thai, 20 tuần Phù thai, 30 tuần Phù thai, 26 tuần (- -/- -) (- -/- -) (- -/- -) Huyết đồ mẹ khám thai có MCV & MCH giảm ỈSàng lọc vợ chồng nghi ngờ alpha thalassaemia ỈChẩn đoán xác định alpha thalassaemia Ỉ Khả phù thai lập lại 25% PHỊNG DI TRUYỀN PHỊNG DI TRUYỀN Khả phát thalassemia công thức sàng lọc Một trường hợp Alpha thalassaemia CHỈ SỐ SÀNG LỌC TẦN SỐ TỈ LỆ (%) 174 98,3 1,7 Dương tính < 80fL 163 93,1 Âm tính >= 80fL 12 6,9 Dương tính = 1530 26 14,4 Sang, 36t (- -/αα) MCH (n = 177) Dương tính < 28 pg Âm tính >= 28 pg Hiền, 40t (αα/α -) MCV (n = 175) SHINE & LAL* (n = 180) * Công thức Shine & Lal: PHỊNG DI TRUYỀN Vinh, 9t Vân, 4t (- -/αα) Thiếu máu nặng, (- -/- α) Khả bị thiếu máu nặng lập lại 25% 50% khả mang gen bệnh cha mẹ MCV2 x MCH : 100 PHỊNG DI TRUYỀN Mẫu tờ rơi Một trường hợp Beta thalassaemia Quốc, 34t (βM/β) Anh, 32t (β/βM) Chết năm tuổi Thai 18 tuần (βM/βM) (βM/β) Thai 18 tuần chẩn đoán trước sinh xác định mang gen beta thalassaemia Ỉ truyền máu Ỉ theo dõi dưỡng thai PHỊNG DI TRUYỀN PHỊNG DI TRUYỀN Mẫu kết Kết luận Bệnh alpha thalassemia phổ biến gấp lần bệnh beta thalassemia Đột biến alpha + beta thalassemia tồn cá thể Sử dụng XN huyết đồ với số MCH < 28pg MCV < 80fL có sàng lọc đến 98,3% trường hợp mang gen bệnh Phát 18 thai có kiểu gen tiên lượng thiếu máu nặng sau sinh năm 2008 Bước đầu triển khai thành công sàng lọc chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia BV Từ Dũ Tích hợp chương trình SLTS CĐTS bệnh thalassemia vào hệ thống chăm sóc sức khỏe sinh sản hiệu phòng chống thalassemia PHỊNG DI TRUYỀN PHỊNG DI TRUYỀN Mẫu tờ rơi PHỊNG DI TRUYỀN Cám ơn PHỊNG DI TRUYỀN Xây dự dựng chương trì trình tầ tầm số soát trướ trước sinh và sơ sinh bệ bệnh di truyề truyền Trương Đì Đình Kiệ Kiệt Phạ Phạm Việ Việt Thanh Sự cần thiế thiết (2): Thự ự c trạ Th tr ng củ tầ tầm soá soát Sự cần thiế thiết (1): Gánh nặ nặng củ bệ bệnh DT Bệnh di truyề truyền có có tỉ trọ trọng ngà ngày cà cao Hơn 8000 bệ bệnh Nhiề Nhiều bệ bệnh DT nặ nặng, kè kèm dị dị dạng bẩ bẩm Sự cần thiế thiết (3): Lợi ích củ tầ tầm số sốt Khó Khó điề điều trị trị, khó khó dự phịng Tầm soá ời trưở soát trướ trước sinh, sơ sinh, sinh, ngư ngườ trưởng thành và PGD Ở Anh trướ trước 1968: 1968: 1200 1200 sơ sinh bị bị Down 2003: 200 sơ sinh bị bị Down sinh và chậ chậm phá phát triể triển trí trí tuệ tuệ Kiế Kiến thứ thức di truyề truyền y họ học từ từ dự án genome ngườ người, sự phá phát triể triển công nghệ nghệ đưa đế đến kỷ kỷ nguyên về tầm soá soát bệ bệnh di truyề truyền 1961 bắ bắt đầ đầu tầ tầm soá soát sơ sinh (Guthries) Đến nà hầ hầu hế hết cá nướ nước phá phát triể triển đề có chương trì trình tầ tầm soá soát Việ Việt Nam bắ bắt đầ đầu áp dụ dụng tầ tầm soá soát sơ sinh và trướ trước sinh gầ gần 10 10 năm Phá Phát hiệ và can thiệ thiệp sớ sớm sau sinh trẻ trẻ bị PKU, ợc giá nhượ giáp bẩ bẩm sinh, thiế thiếu G6PD giú giúp trẻ trẻ phá phát triể triển bì bình thườ thường Anh và xứ Wales Năm 1900: IMR là 154/1000 154/1000 Trong đó 4.5/1000 bệ bệnh di truyề truyền Năm 1986: IMR là 9.6/1000 9.6/1000 Trong đó 4.5/1000 bệ bệnh di truyề truyền Dự phòng KHỎE BỆNH Điều trị Như vậ IMR bệ bệnh di truyề truyền tăng từ từ 3% lên 50% Quan hệ dự phòng điều trị bệnh mắc phải Thụ tinh Các ngun tắ tắc (tt) Dự phịng cấp Genotype bình thường • • • Genotype bất thường Bệnh Quan hệ dự phòng điều trị bệnh di truyền Rất cầ cần mộ chương trì trình mục tiêu quố quốc gia về: Các nguyên tắ tắc củ mộ chương trì trình tầ tầm số sốt bệ bệnh di truyề truyền • Ảnh hưở hưởng nghiêm trọ trọng đố đối vớ với sứ sức khỏ khỏe • Có biệ biện phá pháp can thiệ thiệp sớ sớm và hiệ hiệu quả Phá Phát hiệ và can thiệ thiệp sớ sớm có có hiệ hiệu quả giú giúp trẻ trẻ bị bệ bệnh di truyề truyền phá phát triể triển tốt, giả giảm tỉ tỉ lệ bệnh, tậ tật và tử vong Mục tiêu củ chương trì trình tầ tầm số sốt • Chẩ Chẩn đố đốn chí xá xác Giả Giảm thiể thiểu số số trẻ trẻ sinh bị bị bệ bệnh, dị dị dạng nặ nặng BỆNH • Có tỉ suấ suất mắ mắc đá đáng kể kể dân số số đí đích Dễ tiế tiếp cậ cận, công bằ Tham gia tự tự nguyệ nguyện Đượ Được cộ cộng đồ đồng chấ chấp nhậ nhận Đượ Được thông tin và tư vấ vấn đầ đầy đủ đủ Cost – benefit thỏ thỏa đá đáng Mục đí đích củ chương trì trình tầ tầm số sốt TẦM SỐ SỐT TRƯỚ TRƯỚC SINH VÀ VÀ TẦM SOÁ SOÁT SƠ SINH CÁ CÁC BỆ BỆNH DI TRUYỀ TRUYỀN CHƯƠNG TRÌNH • • • • • Điều trị triệu chứng Không xâm lấ lấn, dễ dễ thự thực hiệ Chí Chính xá xác, đá đáng tin (độ nhạ nhạy, độ độ đặ đặc hiệ hiệu) Chi phí phí thấ thấp/ chấ chấp nhậ nhận đượ Dự phòng cấp Gen trị liệu Khỏe TEST Hình thành hệ hệ thố thống cá trung tâm tầ tầm soá soát trướ trước sinh và sơ sinh đạ đạt chuẩ chuẩn Xác đị định và thố thống nhấ cá bệ bệnh cầ cần tầm số sốt Hình thành độ đội ngũ ngũ chuyên gia về kỹ thuậ thuật viên Thố Thống nhấ cá quy trì trình kỹ kỹ thuậ thuật tầ tầm số sốt, chẩ chẩn đoán và can thiệ thiệp sớ sớm Chương trì trình tầ tầm số sốt trướ trước sinh (1) Đang đượ triể triển khai thườ thường qui nhiề nhiều nướ nước Có khả khả tầ tầm số sốt nhiề nhiều bệ bệnh Hiệ Hiện tậ tập trung tầ tầm soá soát hộ hội chứng Down và hộ hội chứng tam thể thể (trisomies) phổ phổ biế biến Chương trì trình tầ tầm số sốt sơ sinh • • • • • • Nhiề Nhiều trung tâm nghiên cứu tăng tỉ tỉ lệ phá phát hiệ (DR) và giả giảm dương tí tính giả giả Chương trì trình tầ tầm soá soát trướ trước sinh (2) Kỹ thuậ thuật cho phé phép tầ tầm soá soát nhiề nhiều bệ bệnh Nội dung tầ tầm soá soát khác nhau, tù tùy nướ nước, tùy đị địa phương Chiế Chiến lượ lược tầ tầm soá soát khác nhau, tù tùy trung tâm Chương trì trình quố quốc gia tầ tầm soá soát trướ trước sinh Anh: Đã đượ tiế tiến hà hành BV Nhi TW, Từ Từ Dũ, BV Bà Bà mẹ trẻ trẻ em TW… TW… từ 2001 Tập trung tầ tầm số sốt cá bệ bệnh: • • • Thiế Thiếu G6PD, G6PD, Nhượ Nhược giá giáp bẩ bẩm sinh, Tăng sả sản tuyế tuyến thượ thượng thậ thận bẩ bẩm sinh Đang đượ tổ tổng cụ cục dân số số hỗ trợ trợ, mở mở rộng cho nhiề nhiều đị địa phương khác Xây dự dựng chương trì trình quố quốc gia về tầm soá soát cá bệ bệnh di truyề truyền LÀM GÌ? GÌ? Đã triể triển khai từ từ 2003 – 2004 (tạ (tại BV Từ Từ Dũ, ĐHYD Tp.HCM) Tp.HCM) Chủ Chủ yếu tầ tầm soá soát hộ hội chứng Down, thalassemia Double test, triple test thá tháng giữ giữa, thá tháng đầ đầu thai kỳ kỳ Kết hợ hợp test sinh hó hóa và siêu âm Chẩ Chẩn đoán trướ trước sinh cá trườ trường hợ hợp nguy cao Hiệ Hiệu quả, đượ Bộ Bộ y tế tế ủng hộ hộ Bắt đầ đầu đượ cộ cộng đồ đồng quan tâm PKU Congenital hypothyroidism Sickle – cell anemia Thalassemia Cystic fibroisis Hearing impairment Tầm soá soát sơ sinh Việ Việt Nam • T21 (kế (kết hợ hợp T18, T13, X, Y, NTD) • Sickle – cell anemia • thalassemia Tầm số sốt trướ trước sinh Việ Việt Nam Cho phé phép tầ tầm soá soát rấ nhiề nhiều bệ bệnh di truyề truyền chuyể chuyển hó hóa, Số bệnh đượ tầ tầm số sốt khác nhau, tù tùy trung tâm Chương trì trình quố quốc gia củ Anh: Thố Thống nhấ chủ chủ trương Ban chỉ đạ đạo Hội đồ đồng tư vấ vấn Xác đị định mạ mạng lướ lưới tầ tầm soá soát: sẵ sẵn sàng Quyế Quyết đị định cá vấ vấn đề đề chung: nộ nội dung tầ tầm soá soát, chiế chiến lượ lược, qui chế chế, đầu tư… tư… Một số số vấn đề đề đặ đặc biệ biệt Công tá tác tư vấ vấn di truyề truyền Xây dự dựng labo tham chiế chiếu Xác đị định dân số số đí đích (?) Xác đị định chiế chiến lượ lược tầ tầm soá soát trướ trước sinh thố thống nhấ Chương trì trình tầ tầm số sốt sơ sinh mở mở rộng Kết luậ luận Tầm soá soát sớ sớm cá bệ bệnh di truyề truyền/ dị dị dạng bẩm sinh là vấ vấn đề đề y tế tế thiế thiết Lãnh đạ đạo ngà ngành và nhà nhà khoa họ học cầ cần sớm xây dự dựng mộ dự dự án để để thự thực hiệ mộ chương trì trình hà hành độ động thiế thiết thự thực nhằ nhằm làm giả giảm tỉ tỉ lệ trẻ trẻ sinh bị bị bệnh, giả giảm tỉ tỉ lệ tử vong, vong, tăng chấ chất lượ lượng cuộ số sống Các giả giải phá pháp thự thực hiệ Đào tạ tạo nguồ nguồn nhân lự lực (kiế (kiến thứ thức, kỹ kỹ thuậ thuật, thá thái độ độ) Xây dự dựng cá trung tâm di truyề truyền đượ trang bị bị tốt Xây dự dựng cá chuẩ chuẩn chấ chất lượ lượng Giả Giải phá pháp tà tài chí Khí Khía cạ cạnh xã hộ hội và đạ đạo đứ đức Hướ Hướng về lợi ích củ gia đì đình, bả bảo vệ vệ quyề quyền lợ lợi Sự ưng thuậ thuận và tự nguyệ nguyện Sẵn sà sàng cá biệ biện phá pháp can thiệ thiệp Sử dụng mẫ mẫu thử thử đú luậ luật Sử dụng kế kết quả tầm soá soát Đạo đứ đức từ từ phí phía ngườ người đượ tầ tầm số sốt Chẩn đốn phân tử Phịng ngừa Thalssemia Singapore Những đoạn α-Thalassemia phổ biến IZ-HVR 3’-HVR ψζ1 μ ζ2 ψα1 α2 α1 θ1 -α3.7 -α4.2 TS.Samuel S Chong SEA -(α)20.5 Khoa Nhi, Trường Y Dược Yong Loo Lin, Đại học Quốc gia Singapore Trung tâm chẩn đốn phân tử, Khoa Thí Nghiệm Y khoa, Hệ thống sức khỏe Đại học Quốc gia Trung tâm chẩn đoán phân tử, Viện Y học Nhi , Hệ thống sức khỏe Đại học Quốc gia Thalassemia MED FIL THAI Quan hệ kiểu hình – kiểu gen • Các bệnh di truyền đơn gen phổ biến – lặn • Phổ biến nhất: α- and β- thalassemia Kiểu hình Kiểu gen • Những khiếm khuyết di truyền gây suy giảm tổng hợp chuổi globin: α- β-globin Bình thường αα/αα • Xuất phát từ từ Hy lạp (θαλασσα) - “biển”, nguồn gốc từ Địa Trung Hải • Phân bố tập trung Địa Trung Hải, Trung Đông, tiểu lục địa Ấn Độ Đông Nam Á Dị hợp α-thalassemia “silent carrier” -α/αα Dị hợp α-thalassemia “α-thal trait” /αα Đồng hợp α-thalassemia “α-thal trait” -α/-α • Liên quan đến loạt biểu lâm sàng – α-thalassemia - Hb Bart’s: Thai chết lưu – β-thalassemia – trưởng thành: truyền máu tùy mức độ thiếu máu • Khiếm khuyết phân tử từ đột biến điểm đến đoạn α-Thalassemia Hb H disease (β 4) /-α Bart’s hydrops fetalis (γ4) / Sự phân bố đột biến αThalassemia Singapore • α-thalassemia – Sai hỏng cụm gen α-globin NST 16p13.3 SEA (70.6%) Thai (0.9%) μ – Phổ biến đoạn hay tất gen α-globin (HBA2/α2 globin HBA1/α1 globin), gen HBZ (ζ globin) – Đột biến điểm không phổ biến Fil (0.4%) Unk (0.6%) Other (1.2%) αCd59α (0.6%) αCd30α (0.1%) -α3.7 (19.1%) αCSα -α4.2 (4.3%) αQSα (1.5%) (1.1%) N=3056 National Thalassemia Registry Gap-PCR: Phát đoạn lớn kb 2.5 kb kb PCR LIS1 -α3.7 α2 -α4.2 SEA THAI -(α)20.5 1.5 kb kb PCR Đoạn 1.5 kb PCR Đ0ạn kb PCR Gap-PCR: Phát đột biến SEA SEA / FIL αα/ FIL MED / MED -(α)20.5 / MED -α3.7 / THAI αα/-(α)20.5 αα/ MED αα/ THAI -α4.2 / SEA SEA / SEA -α3.7 /-α4.2 M αα/ SEA -α3.7 / SEA 3’ Mất đoạn 20kb 0.5kb 0.5kb -α3.7 /-α3.7 αα/-α4.2 5’ αα/-α3.7 Mồi ngược Mồi ngược αα/αα Mồi xuôi Multiplex Gap-PCR: Những đoạn α-Globin 75 kb MED kb FIL Giải trình tự gen α2-Globin Mất đoạn SEA SEA-F SEA-R1 ζ2 ψζ1 μ M αα/αα αα/ SEA SEA/ SEA SEA-R2 ψα1 α1 α2 θ1 CCAAT ATAAA Cap Exon Allele không bị đoạn Allele bị đoạn SEA 602 bp Multiplex Gap-PCR: Phát đồng thời đoạn α-Globin FIL-F SEA-F ζ2 ψζ1 μ Exon α2-globin gene ~850 bp 851 bp THAI-F Exon 4.2-F ψα1 α2-R 4.2-R α2/3.7-F α2 IZ-HVR 3.7-R α1 -α3.7 Giải trình tự gen: Đột biến điểm Trình tự HBA2 bình thường THAI-R FIL-R SEA-R Đột biến Constant Spring : TACAA θ1 3’-HVR -α4.2 SEA -(α)20.5 MED Đột biến Pakse : TATAT FIL THAI β-Thalassemia Giải trình tự gen β-Globin • β-thalassemia – Sai hỏng cụm gen β-globin NST 11p15.5 β-globin gene ~1700 bp CCAAT ATAAA Exon – Phổ biến đột biến điểm HBB (gen β globin) Exon Exon ~800 bp ~600 bp – Mất đoạn không phổ biến Những đột biến gen β-Globin Giải trình tự gen: cd41/42 ΔTCTT Codon 39 40 41 42 43 44 Sense sequence nl: CAG AGG TTC TTT GAG TCC mt: CAG AGG TTG AGT CC Antisense sequence nl: GGA CTC AAA GAA CCT CTG mt: GGA CTC AAC CTC TG +/Δ Thompson & Thompson Genetics in Medicine, 7th Ed., 2007 Cds41/42 (ΔTCTT) (27.3%) IVS2,654 (C→T) (22.3%) Unknown (0.6%) C/T Cds71/72 (+A) (1.2%) IVS1,5 (G→C) (6.4%) Cd17 (A→T) (4.9%) antisense HbE (20.5%) -28 (A→G) (6.6%) 42 mutations (9.1%) IVS1,1 (G→T) (1.3%) Giải trình tự gen: IVS II,654 C→T sense Sự phân bố đột biến βThalassemia Singapore G/A N=2409 National Thalassemia Registry Minisequencing / Single Base Extension (SBE) Template Primer 5’ Multiplex Minisequencing (III) 3’ CCATGACTGATTCC NNNNNNAGCCTGGTACTGACTAAGGCNNNNNNN Mutation site ddTTP + ddCTP + ddATP + ddGTP Extend and Terminate dd CCATGACTGATTCC G NNNNNNAGCCTGGTACTGACTAAGGCNNNNNNN Applied Biosystems Applied Biosystems Các primer Multiplex Minisequencing Minisequencing: IVS II,654 C→T HBA2 panel Cd30-F Cd0-F 654-F PCR: 5’ 3’ TTAAGG C/T AATAGC T A G C SD-F 654-R SBE: Wild-type allele (C) HBB panel A -29-F C SNP 654 3’ A G T AATTCC A TTATCG aa tt SNP 654 5’ 3’ A T CE: C T G C Cd41/42-F g c C G -28-R 5’ Cd17-R Ps-R carrier Cd71/72-F InII 654-F G C c g Cd26-R Cd27/28-F T A A A T T T A g c C G G C Cd43-R Cd8/9-R affected Multiplex Minisequencing (II) Δ619-F HBB panel B Cd35-F Cd0-F T InI 1-R normal T A A T InI 5-R Cd19-F C T A Cd59-R Mutant allele (T) TA G C AATTCC G TTATCG QS-F CS-F T A G C 5’ Δ619 breakpoint Sản phẩm Multiplex Minisequencing: Điện di mao quản vị trí đột biến A Normal Cd41-42 / IVSIInt654 compound heterozygote ΔTCTT InI5 Cd41/42 -29 Applied Biosystems C→T Cd26 -28 Cd17 IVSII654 Cd71/72 Sản phẩm Multiplex Minisequencing: Điện di mao quản vị trí đột biến B • Cám ơn Normal Cd43 / β heterozygote G→A InI1 Cd0 Cd43 Δ619 Cd19 Cd27/28 Cd8/9 Cd35 HBA2 Gene Multiplex Minisequencing – GeneScan™ Chromatograms αα / αα T→C αCSα / SEA T→A αPsα / αα Cd0 CS Cd30 Ps SD QS Cd59 HBB HBA2 Minisequencing Các sàng lọc đột biến HBB Bộ A • IVS1,5 G→C,T,A • Cd41 ΔC • Cd41/42 ΔTCTT • -29 A→G • Cd26 G→A • -28 A→G,C • Cd17 A→T • Cd71/72 ∇A • IVS2,654 C→T HBB Bộ B • IVS1,1 G→T,A • Cd0 T→G,C • Cd43 G→T • Cd19 A→G • Cd27/28 ∇C • Cd8/9 ∇G • Cd35 ΔC • Δ619bp Bộ HBA2 • Cd0 ΔG • Cd142 T→C (Const Sprg) • Cd30 ΔGAG • Cd142 A→T (Pakse) • Cd109 T→G (Suan Dok) • Cd125 T→C (Quong Sze) • Cd59 G→A Bệnh Thalassemia MÁU CUỐNG RỐN Thêm hội cho bệnh nhân Thalassemia Thể Thể nặng : Tuoå Tuoåi đời TB bệ bệnhThalassemia major là tuổ tuổi.i 80% cá trư trường ng hợ hợp chế chết trư trước tuổ tuổi.i Thể Thể trung gian : có có thiế thiếu má máu, u, lách ch to vừ vừa phả phải,i, nhu cầ cầu truyề truyền má máu thấ thấp, p, số sống ng trư trưởng ng thành nh đươ c Thể Thể nhẹ nhẹ : toàn trạ trạng ng gầ gần như bình thư thường ng Bệnh Thalassemia Thalassemia : Bệ Bệnh thiế thiếu má máu tá tán huyế huyết di truyề truyền bẩ bẩm sinh thiế thiếu mộ hay nhiề nhiều tiể tiểu đơn vị vị globin Phân lọ lọai và danh phá pháp β Thalassemia α Thalassemia Δ Thalassemia Phố Phối hợ hợp … Bệnh Thalassemia Điề Điều trị trị cho cá thể thể nặng ( bà tó tóan phứ phức tạp và thá thách thứ thức y khoa) Truyề Truyền má máu ké kéo dà dài thờ thời gian số sống Điề Điều trị trị ứ sắt truyề truyền má máu ké kéo dà dài Cắt lách có có cườ cường lách Sử dụng Hydrea hoặ sodium phenylbutyrate Ỉ kết quả hạ hạn chế chế Liệ Liệu phá pháp gen thành công chuộ chuột, chưa đượ thự thực hiệ ngườ người Bệnh Thalassemia Tần suấ suất bệ bệnh lý 1983, WHO “ sức khoẻ khoẻ nghiêm trọ trọng củ TG” TG” Địa trung hải, Trung đông, đông, bá bán đả đảo Ấn Độ Độ, Đông nam Á, …Ỉ vành đai Thalassemia Thalassemia 269 trị trịêu ngườ người mang gien, 160.000 trẻ trẻ em sinh bị bị Thalassemia/năm Thalassemia/năm Việ Việt nam : β Thalas : 25%, α Thalas : 1.71.7-9%, Hb E: 70% Tầ Tần suấ suất mang gien dân tộ tộc kinh lầ lần lượ lượt : β 1.5%, α Thalas 5.35%, Hb E 4.9% 4.9% Ướ Ước tí tính 5.12 triệ triệu mang gien, 1.57 triệ triệu trẻ trẻ em sinh mang bệnh /năm tử, /năm : 100.000 TE mang gien dị dị hợp tử 1700 TE đồ đồng hợ hợp tử tử … và bệnh ngà ngày cà gia tăng Bệnh Thalassemia Nhữ Những vấ vấn đề đề nan giả giải : Chưa có có lối thố điề điều trị trị, viễ viễn cảnh tăm tố tối Chi phí phí điề điều trị trị : ???, khủ khủng khiế khiếp – – – Canada : 3000 USD/ USD/năm, năm, 30 30-35 năm Iran : 5000 năm,, 15 5000 USD/ USD/năm 15 năm Việ năm Việt Nam : …???, ước tí tính 2000USD/ 2000USD/năm Nguồ Nguồn má máu để để trị trị liệ liệu : số sống nhờ nhờ máu, kháng trị trị Gánh nặ nặng cho gia đì đình & xã hộ hội nặ nặng nề nề Đau khổ ời mẹ khổ cho ngườ người vợ vợ, ngư ngườ mẹ có có bệ bệnh – Ước mong , khao khát … ??? ??? Ghé Ghép TBG bệ bệnh Thalssemia Ghé Ghép tế tế bào gố gốc tạ tạo má máu đượ chấ chấp nhậ nhận rộ rộng rãi là phương phá pháp điề điều trị trị cho cá bệ bệnh nhân Thalassemia có có anh chị chị em ruộ ruột phù phù hợp HLA Nguồ Nguồn tế tế bào gố gốc để để ghé ghép TBG tủ tủy xương cù huyế huyết thố thống ( anh chị chị em ruộ ruột HLA) hoặ không cù huyế huyết thố thống TBG từ từ máu ngọ ngọai vi cù huyế huyết thố thống hoặ không huyế huyết thố thống Bệnh Thalassemia Ghé Ghép TBG bệ bệnh Thalssemia Giả Giải phá pháp – Thế Thế giớ giới : Điề Điều trị trị : nghiên cứu ghé ghép tế tế bào gố gốc + MCR Chương trì trình tầ tầm soá soát bệ bệnh Thalassemia : – 1970 Sardinia, Ý : tiề tiền hôn nhân, mang thai… thai… – 1991 Iran : cặ cặp nam nữ nữ trướ trước hôn nhân và tư vấ vấn di truyề ề n truy – Mơ hì hình thành cơng nguồ nguồn lự lực thấ thấp – Việ Việt nam : Điề Điều trị trị đố đối phó phó, ghé ghép TBG ( tủ tủy xương + MCR) MCR) Chưa có có chương trì trình tầ tầm số sốt bệ bệnh GHÉ GHÉP TẾ TẾ BÀO GỐ GỐC TRONG BỆNH THALASSEMIA Dị ghé ghép tế tế bào gố gốc tạ tạo má máu để để điề điều trị trị bệnh thalassemia đượ thự thực hiệ lầ lần đầ cá cách 20 năm bở E Donall Thomas vào năm 1982 Từ đó Ỉ nay, gần 1,500 bệ bệnh nhân thalassemia khắ khắp thế giớ giới đượ ghé ghép tủ tủy chủ chủ yếu bở nhó nhóm ghé ghép tủ tủy Pesaro (Ý), dẫ dẫn đầ đầu là giá giáo sư Guido Lucarelli IBMTR Số lượng Thải ghép (%) Tử vong liên quan đến ghép (%) OS (%) EFS (%) 139 26 26 73 58 Italy Các kinh nghiệm ( sau năm) 102 nghiệ 30 năm) 91 Nguy thả thải ghé ghép từ từ 0% (Cagliari)Ỉ (Cagliari)Ỉ 55% (Dutch) (U.S.) Ỉ 37% 88 Hong Kong2 Tỷ 25 lệ tử vong 8ghé é p : 0% ( Stanford gh Westminster (U.K.) 50 13 94 U.S Tỷ lệ sống không bệ bệnh Thalassemia cao nhấ trung 28 33 NA 81 Malaysia tâm củ Ý là Cagliari và Pescara, kế kế đế đến là Hong Kong Thailand 26 Birmingham 19 (U.K.), vớ ng só tự với tỷ tỷ lệ số11 sót theo thứ thứ89 88%, và 82% 17 87%, 84%,18 17 82 France 87 U.K 16 37 63 56 Taiwan 12 17 42 64 50 Iran 67 11 NA 82 NA 84 82 75 70 58 Ghé Ghép TBG bệ bệnh Thalssemia Các trở trở ngạ ngại ghé ghép TBG từ từ tủy xương hoặ má máu ngọ ngọai vi Anh chị chị em phù phù hợp HLA Ỉ ít, bở – Khơng muố muốn sanh – Tỉ lệ anh chị chị em khỏ khỏe mạ mạnh hoặ dị dị hợp Ỉ Khơng liên hệ hệ huyế huyết thố thống Ỉ khó khó tìm Khả Khả tử tử vong ghé ghép cao ( > 30%) bệ bệnh nhân ghé ghép trể trể có biế biến chứng ứ sắt Khả Khả thả thải mãnh ghé ghép cao truyề truyền má máu quá nhiề nhiều Giả Giải phá pháp : Tì Tìm nguồ nguồn TBG khác Ỉ MCR MÁU CUỐ CUỐNG RỐ RỐN GHÉ GHÉP TBG MÁ MÁU CUỐ CUỐNG RỐ RỐN Ưu điể điểm : Định nghĩ nghĩa : má máu lạ lại bá bánh và dây rốn sau sinh Đặc điể điểm : Tăng tí tính có có sẵn cho ngườ người cấ cấy ghé ghép – Đa dạng – Lựa chọ chọn HLA thỏ thỏai má mái – Chi phí phí thấ thấp Chứ Chứa TBG vớ với nồ nồng độ độ cao Tính sinh miễ miễn dị dịch ké Giả Giảm tì tình trạ trạng GVHD mắ mắc phả phải cấ cấp và mạn Khơng có có nguy đố đối vớ với ngườ người cho – TB Lympho T non – Tiế Tiếp nhậ nhận CCR5 Cytokin thấ thấp – IL 10 cao -Ỉ Ít tạ tạo phả phản ứng GVHD Nhượ Nhược điể điểm: Thể Thể tích nhỏ nhỏ Ỉ TBG Ỉ mãnh ghé ghép mọ mọc chậ chậm Giả Giảm hiệ hiệu ứng GVL Các bệ bệnh lý di truyề truyền không ngờ ngờ tới TBG Thà Thành phầ phần thay thế hữu dụ dụng cho má máu và tủy xương việ việc cấ cấy ghé ghép MÁU CUỐ CUỐNG RỐ RỐN Ghé Ghép MCR bệ bệnh Thalassemia Thành phần TBG tạo máu MCR tủy xương HPC/105 tế bào đơn nhân MCR TX Myeloid 132 ± 69 160 ± 58 Mutipotent 18± 5±3 MCR TX CFU-GM 29± 9±6 Tỉ lệ liên quan TBG thuộc dòng hồng cầu (%) MCR TX CFU-E 7±8 35 ± 15 BFU-E 94± 11 62± 16 GHÉ GHÉP TBG MÁ MÁU CUỐ CUỐNG RỐ RỐN Trườ Trường hợ hợp ghé ghép MCR thành công đầ năm 1988 bệ bệnh thiế thiếu má máu Fanconi ( Gluckman và cs ) 07-2009 > 8500 cas ghép MCR Tử vong liên quan đến ghép (%) OS (%) EFS (%) 139 26 28 74 68 15 thả Hong Kong1 Nguy thải ghé ghé6p từ từ 2% Ỉ 25% 89 87 U.S Malaysia Tỉ lệ liên quan TBG thuộc dòng tủy (%) CFU-M 40± 12 32± 11 Thải ghép (%) IBMTR Eythroid 153 ± 78 155 ± 67 CFU-G 33 ± 62 ± Số lượng Thailand Các kinh nghiệ nghiệm ( sau 10 năm) năm) Tỷ 42 lệ tử vong do13 ghé (U.K.) ghép : 5% Ỉ 25 %5 Westminster 94 Tỷ lệ sống khơng bệ bệnh Thalassemia cao 82Ỉ 82Ỉ 88% Có18 thể thể ghé ghép sớ sớm tuổi 15< tuổ 12 81 Phá Phác đồ đồ : BuCy hoặ Mini ghé ghép có có Fludarabin 82 75 22 14 11 88 76 U.K 21 14 73 65 Taiwan 24 11 22 67 58 Iran 17 21 82 54 Ghé Ghép MCR bệ bệnh Thalassemia Việ Việt Nam : cas ghé ghép TBG từ từ tủy xương, xương, anh chị chị em phù phù hợp HLA ( 6/6) từ từ năm 1997 Hiệ Hiện bệ bệnh nhân số sống Cả Cả hai đề thả thải mãnh ghé ghép sau năm năm cas ghé ghép MCR ( 2004) – cas tử tử vong ghé ghép rố rối lọ lọan đông má máu suy gan – cas số sống và thả thải mãnh ghé ghép sau năm Số cas ghé ghép : – Chi phí phí cao ( 20.000 USD/ cas) – Do ngân hà hàng mẫ mẫu Ỉ tì tìm ngườ người cho phù phù hợp – CĐ ghé ghép trể trể Ỉ nhiề nhiều biế biến chứng ứ sắt và phả phản ứng lọai mãnh ghé ghép Æ nguy tử tử vong cao Cặp vợ chồng ( có bệnh Thalassemia ) Muốn có thứ hai Khơng muốn có thứ hai CĐ tiền sanh (từ tuần 12-16 thai kỳ) Đồng hợp tử Chấm dứt thai kỳ sớm Dị hợp tử Khơng có bất thừong Tìm mẫu MCR ngân hàng MCR Thu thập MCR sanh Ỉ lưu trử để ghép Phù hợp HLA Ỉ Ghép MCR SƠ ĐỒ ĐỀ NGHỊ CHẨN ĐĨAN TiỀN SANH VÀ TÌM MẪU MCR KẾT LUẬ LUẬN Thalassemia bệ bệnh lý phứ phức tạ tạp và vấn đề đề nan giả giải củ xã hộ hội Điề Điều trị trị tố tốn tiề tiền, hiệ hiệu quả khơng cao GTB gố gốc có có khả khả chữ chữa khỏ khỏi bệ bệnh ( chi phí phí cao, nhiề nhiều biế biến chứng) MCR là nguồ nguồn thay thế cho má máu và tủy xương để ghé ghép bệ bệnh Thalassemia Giả Giải phá pháp tố tối ưu nhấ là có chiế chiến lượ lược phịng ngừ ngừa: Tư vấ vấn nhân gia đì đình Chẩ Chẩn đóan tiề tiền sanh XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN SỰ LẮNG NGHE CỦA QÚY VỊ HẾT