"Nghiên cứu phương pháp sản xuất và kiểm nghiệm nguyên liệu cho chế phẩm Probiotics có chứa Lactobacillus acidophilus " ThS Nguyễn Thị Thu Hường Khoa Vi sinh Viện Kiểm nghiệm Thuốc TW NỘI DUNG Giới th[.]
ThS Nguyễn Thị Thu Hường Khoa Vi sinh - Viện Kiểm nghiệm Thuốc TW NỘI DUNG Giới thiệu nguyên tắc chung thiết kế phòng Hướng dẫn IQ, OQ, PQ hệ thống HVAC Phương pháp thẩm định tiêu kỹ thuật phòng TÀI LIỆU THAM KHẢO WHO Expert Committee on Specification for Pharmaceutical Preparations - 45th Report (WHO TRS 961) (2011) WHO Expert Committee on Specification for Pharmaceutical Preparations - 45th Report (WHO TRS 961) (2011) - Annex “WHO Good Practices for Pharmaceutical Microbiology Laboratories” WHO Expert Committee on Specification for Pharmaceutical Preparations - 45th Report (WHO TRS 961) (2011) – Annex “WHO Good Manufacturing Practices for Sterile Pharmaceutical Products” WHO Expert Committee on Specification for Pharmaceutical Preparations - 56th Report (WHO TRS 1044) (2022) – Annex “WHO Good Manufacturing Practices for Sterile Pharmaceutical Products” WHO Expert Committee on Specification for Pharmaceutical Preparations - 48th Report (TRS 986) (2014) Annex 2: WHO good manufacturing practices for pharmaceutical products: Main principles Part 1: Classification of air cleanliness by particle concentration Part 3: Test methods Part 4: Design, construction and start-up 10 USP 2023, Microbiolical control and monitoring of aseptic processing environments 11 USP 2023, Microbiological best laboratory practices ĐỊNH NGHĨA KHU VỰC SẠCH Glossary “Clean area: An area with defined environmental control of particulate and microbial contamination, constructed and used in such a way as to reduce the introduction, generation, and retention of contaminants within the area.” Khu vực sạch: khu vực có kiểm sốt mức độ nhiễm tiểu phân vi sinh vật, xây dựng sử dụng cho giảm việc tạo nên lưu giữ tạp nhiễm khu vực ĐỊNH NGHĨA KHU VỰC SẠCH Glossary “cleanroom • room within which the number concentration of airborne particles is controlled and classified, and which is designed, constructed and operated in a manner to control the introduction, generation and retention of particles inside the room” • PHỊNG SẠCH LÀ PHỊNG ĐƯỢC KIỂM SOÁT VÀ PHÂN LOẠI SỐ LƯỢNG HẠT TRONG KHƠNG KHÍ, ĐỒNG THỜI ĐƯỢC THIẾT KẾ, XÂY DỰNG VÀ VẬN HÀNH SAO CHO KIỂM SOÁT ĐƯỢC SỐ LƯỢNG HẠT ĐƯA VÀO, TẠO RA VÀ GIỮ LẠI BÊN TRONG PHÒNG” CÁC NGUYÊN TẮC THIẾT KẾ PHÒNG SẠCH (ISO 14644-4:2022) * Các vấn đề cần xem xét cân nhắc thiết kế phịng sạnh: a) Mục đích sử dụng dự kiến của hệ thống hoạt động khu vực b) Các yêu cầu pháp luật c) Các yêu cầu cấp độ cần đạt d) Các yêu cầu nhiệt độ, độ ẩm, quy trình thuận tiện nhân viên e) Các thơng số kỹ thuật tiêu chí chấp nhận giới hạn hành động giới hạn cảnh báo việc quản lý chúng f) Việc vào nhân viên, thiết bị nguyên nhiên vật liệu, xem xét số lượng, di chuyển biện pháp kiểm soát cần áp dụng, ví dụ quy trình khử nhiễm mặc quần áo bảo hộ CÁC NGUYÊN TẮC THIẾT KẾ PHÒNG SẠCH (ISO 14644-4:2022) g) Các nguồn ô nhiễm cường độ chúng; h) Các phương pháp thử nghiệm, đo lường theo dõi để đáp ứng tiêu chí chấp nhận i) Kiểm sốt mơi trường phịng hệ thống độc lập tích hợp vào hệ thống quản lý tòa nhà j) Yêu cầu theo dõi điều kiện mơi trường thơng số khác; k) Vịng đời dự kiến phịng l) Mục đích chu kỳ bật tắt hệ thống m) Dự kiến thay đổi lắp đặt theo thời gian o) Vị trí lắp đặt dự kiến yêu cầu ràng buộc địa điểm p) Cần xác định ảnh hưởng mơi trường bên ngồi đến hệ thống CÁC NGUYÊN TẮC THIẾT KẾ PHÒNG SẠCH (ISO 14644-4:2022) q) Các giới hạn trọng lượng kích thước liên quan đến giới hạn khơng gian có sẵn r) Các u cầu quy trình sản xuất sản phẩm ảnh hưởng đến việc lắp đặt, bao gồm việc vệ sinh khử trùng; s) Các quy trình kiểm sốt ô nhiễm ưu tiên chiến lược kiểm soát ô nhiễm tổng thể t) Các mục tiêu hiệu môi trường lượng u) Các yếu tố độc hại quy trình v) Các yêu cầu bề mặt bên phòng (bao gồm: độ trơn nhẵn, không thấm nước, khả chịu chất tẩy rửa bao gồm việc khơng có khoảng trống lối đến khu vực khơng kiểm sốt w) Các yêu cầu chấp nhận thời gian ngừng hệ thống chiến lược phục hồi sau cố CÁC NGUYÊN TẮC THIẾT KẾ PHÒNG SẠCH (ISO 14644-4:2022) x) Các yêu cầu chấp nhận thời gian ngừng hệ thống chiến lược phục hồi sau cố y) Chiến lược bảo dưỡng hệ thống phòng sạch, thời gian không gian cần thiết để hệ thống trì lắp đặt ban đầu trình vận hành z) Bất yêu cầu khác không liệt kê trên, đặt yêu cầu quy trình vận hành suốt tuổi đời phòng aa) Các yêu cầu riêng ngành dược PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT * Số lượng VSV 1M3 khơng khí - Chọn vị trí lấy mẫu vùng có nguy cao: vị trí gió quẩn, đường khí ra, vị trí sa lắng bụi, vùng khó vệ sinh… - Cỡ mẫu: 1m3, tùy vào mức độ nhiễm vi sinh vật khu vực lấy mẫu mà định việc sử dụng hay nhiều đĩa mơi trường cho vi trí lấy mẫu - Số lượng mẫu lấy: theo đánh giá nguy phòng thử nghiệm PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT * Số lượng VSV 1M3 khơng khí - Tốc độ lấy mẫu: 25 lít/ phút đến 100 lít/ phút - Lựa chọn mơi trường dinh dưỡng để lấy mẫu: Môi trường Casein soyabean agar môi trường phù hợp với hệ vi sinh vật cần kiểm soát khu vực lấy mẫu MỘT SỐ THIẾT BỊ LẤY MẪU KHƠNG KHÍ PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT - Số lượng VSV 1M3 khơng khí: - Cần quan tâm đến khả thu hồi mẫu thiết bị lấy mẫu khơng khí BẢNG GIÁ TRỊ ĐIỀU CHỈNH CỦA THIẾT BỊ LẤY MẪU KHƠNG KHÍ MAS 100 NT PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT * Số lượng VSV 1M3 khơng khí: Lấy mẫu khơng khí cấp A Lấy mẫu vi sinh vật tong không khí cấp A Đĩa mơi trường dùng lần để kiểm tra vi sinh vật khơng khí PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRONG KHÔNG KHÍ VÀ BỀ MẶT • Số lượng VSV 1M3 khơng khí: - Tần suất lấy mẫu: ( - Điều kiện nuôi cấy: 20 - 250C/5-7 ngày, tiếp tục 30 - 350C/3-5 ngày PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH * Số lượng vi sinh vật bề mặt - Bề mặt nhẵn (sàn, bàn, thiết bị): dùng đĩa Rodac đường kính 5,5 cm - Bề mặt khơng nhẵn (góc cạnh): dùng phương pháp phết, dung dịch NaCl 0,9% + Tween 80 (0,7%) + Lecithin 0,1% - Chú ý: phải loại bỏ dư lượng chất khử trùng trước kiểm tra - Môi trường: Thạch casein đậu tương - ĐK ủ: 20 - 250C/5-7 ngày, 30 - 350C/3-5 ngày - Tần suất (VKN): + Định kì khu vực sạch: tháng/lần + Tủ ATSH, tủ nuôi cấy VSV: tuần/lần, PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH * Số lượng VSV phương pháp đặt đĩa thạch: - Môi trường: Thạch casein đậu tương - Thời gian đặt: 4h - Số lượng mẫu lấy theo phân tích nguy (tham khảo ISO14644 Part 1) - ĐK ủ: 20 - 250C/5-7 ngày, tiếp tục 30 - 350C/3-5 ngày * Kiểm tra găng tay: - Môi trường, điều kiện ủ: Như - Sử dụng đĩa thạch, in ngón tay vào đĩa vào đĩa, kiểm tra găng - Tần suất: tiến hành phép thử vô khuẩn PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH CHÊNH LỆCH ÁP SUẤT CÁC PHÒNG (ISO 14644-3: 2019, ANNEX B.1) - Sử dụng áp kế hiệu chuẩn - Hàng ngày: đồng hồ đo chênh áp gắn tường (9 h 14 h) - Chênh áp khu vực B với khu vực khác cần theo dõi thường xuyên Đồng hồ đo áp suất học Máy đo vi khí hậu đo áp suất PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH KIỂM TRA HƯỚNG DỊNG KHÍ (Smoke test) (ISO 14644-3: 2019, ANNEX B.3) - Sử dụng thiết bị tạo khói phun vào khu vực cần kiểm tra Quan sát mô tả vào biểu mẫu báo cáo đồng thời quay camera lưu lại q trình kiểm tra Khơng sử dụng khói có trọng lượng lớn - Chú ý: Vật liệu tạo khói phải khơng gây nhiễm cho khu vực kiểm tra Smoke test sử dụng máy tạo hạt PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH 8+9 ĐO NHIỆT ĐỘ, ĐỘ ẨM - Sử dụng nhiệt ẩm kế hiệu chuẩn - Hàng ngày: SD nhiệt ẩm kế (9 h 14 h) Nhiệt ẩm kế hiệu chuẩn Máy đo vi khí hậu đo nhiệt độ, độ ẩm PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH 10 SỐ LẦN TRAO ĐỔI KHÍ * Sử dụng máy đo tốc độ gió - Đo tốc độ gió nguồn cấp N vị trí: a (m/h) (N = SQRT(10 xA); A: diện tích màng tính theo m2): - Đo diện tích màng lọc: b (m2) - Tính lưu lượng khí trao đổi h: c=ab (m3/h) - Tính thể tích khu vực thí nghiệm: d (m3) - Tính số lần trao đổi khí 1h: c/d (lần/h) - Tần suất: tháng/lần cấp B, năm với cấp C,D - Số lần trao đổi khí theo USP 2023 : + Cấp B: 100 lần/h + Cấp C: 50 lần/h + Cấp D: 20 lần/h Máy đo vi khí hậu đo tốc độ gió PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHỊNG SẠCH 10 SỐ LẦN TRAO ĐỔI KHÍ (ISO 14644-3: 2019, ANNEX B.2) * Sử dụng máy đo lưu lượng gió - Đo lưu lượng khí họng cấp khí: c (m3/h) - Tính thể tích khu vực thí nghiệm: d (m3) Máy đo lưu lượng gió - Tính số lần trao đổi khí 1h: c/d (lần/h) - Số lần trao đổi khí Class B, C, D trạng thái làm việc phù hợp với thể tích phòng, số lượng thiết bị nhân viên đó, đảm bảo chất lượng khơng khí cấp PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH * 11 ĐO TỐC ĐỘ GIÓ Sử dụng máy đo tốc độ gió hiệu chuẩn - Chia diên tích bề mặt màng lọc thành chia thành hàng hàng điểm mơ hình - Giá trị tốc độ gió ngang tầm làm việc cấp A đạt 0,36 m/s đến 0,54 m/s (Annex WHO TRS 1044) PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH CÁC CHỈ TIÊU KỸ THUẬT PHÒNG SẠCH 12 CÁC CHỈ TIÊU KHÁC * Cường độ ánh sáng: - Sử dụng máy đo cường độ ánh sáng hiệu chuẩn - Đo vị trí/khu vực - Khu vực làm việc: ≥ 400 Lux - Khu vực phụ trợ (airlock): ≥ 200 Lux - Tần suất: 12 tháng/lần (VKN) * Độ ồn: ≤ 65 dB - Sử dụng máy đo độ ồn hiệu chuẩn - Đo vị trí/khu vực - Tần suất: 12 tháng/lần