Khảo sát thành phần hóa học phân đoạn a cao ethyl acetate của lá và thân dây leo cây hà thủ ô trắng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HOÁ HỌC PHÂN ĐOẠN A CAO CHLOROFORM CỦA LÁ VÀ THÂN DÂY LEO CÂY HÀ THỦ Ô TRẮNG Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HOÁ HỌC PHÂN ĐOẠN A CAO ETHYL ACETATE CỦA LÁ VÀ THÂN DÂY LEO CÂY HÀ THỦ Ô TRẮNG Nhóm ngành khoa học: HĨA HỌC HỮU CƠ Giảng viên hƣớng dẫn: TS BÙI XUÂN HÀO Sinh viên thực hiện: BÙI MAI TIẾN THỊNH Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 LỜI CẢM ƠN Với lòng trân trọng biết ơn, em xin gửi lời tri ân sâu sắc đến thầy TS Bùi Xuân Hào – ngƣời thầy tận tình hƣớng dẫn, cung cấp cho em nhiều tri thức tạo điều kiện tốt cho em thực đề tài Trong suốt khoảng thời gian đó, Thầy nhiệt tình hỗ trợ nhiều vật chất, công sức nhƣ động viên tinh thần em Thầy truyền cho em nhiều kiến thức khoa học nhiều kinh nghiệm nghiên cứu quý báu Đặc biệt, với lòng đam mê nghiên cứu Thầy mang đến cho hành trang cần thiết lòng nhiệt huyết đƣờng học tập nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn quý thầy, cô Ban Chủ nhiệm Khoa Hố, thầy Tổ mơn Hố Hữu tạo điều kiện giúp đỡ em trang thiết bị tốt Phịng thí nghiệm Ngồi ra, kiến thức mà quý thầy cô giảng dạy suốt q trình học tập giúp ích em nhiều trình thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô thuộc chun ngành Hợp chất tự nhiên – Bộ mơn Hố Hữu cơ, anh chị bạn Phòng thí nghiệm nhiệt tình giúp đỡ động viên suốt trình thực đề tài Em xin bày t lòng biết ơn sâu sắc đến cha m , anh chị, ngƣời ln bên em khích lệ, ủng hộ em mặt vật chất tinh thần để em yên tâm hoàn thành đề tài Em xin gửi lời cảm ơn đến đến tất bạn b giúp đỡ động viên chúng em hoàn thành khóa luận Xin chân thành cảm ơn gửi lời chúc tốt đ p đến tất ngƣời Tp Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng 04 năm 2022 Bùi Mai Tiến Thịnh DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Ti ng Anh H-NMR Ti ng Vi t Proton Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton 13 C-NMR Carbon Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân carbon DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer COSY Correlation Spectroscopy HSQC Heteronuclear Single Quantum qua liên kết Correlation HMBC Heteronuclear Phổ tƣơng tác dị hạt nhân Multiple Bond Phổ tƣơng tác dị hạt nhân Coherence qua nhiều liên kết s Singlet Mũi đơn d Doublet Mũi đôi t Triplet Mũi ba dd Double of doublet Mũi đôi đôi m Multiplet Mũi đa  Chemical shift Độ dịch chuyển hoá học j Coupling constant Hằng số ghép spin ppm Par per million Một phần triệu DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Kết sắc ký cột silica gel cao cloroform 11 Bảng 2.2 Kết sắc ký cột silica gel phân đoạn A 12 Bảng 2.3 Kết sắc ký cột silica gel phân đoạn A4 12 Bảng 3.1 Dữ liệu phổ hợp chất L5 14 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ hợp chất L7 17 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hinh Lá hà thủ ô trắng Hình 3.1 Cấu trúc L5 số tƣơng quan HMBC quan trọng 14 Hình 3.2 Cấu trúc L7 số tƣơng quan HMBC quan trọng 16 LỜI MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Đặc trƣng khí hậu nhiệt đới gió mùa, nóng ẩm cho Việt Nam nguồn thực vật vô dồi phong phú Từ xa xƣa, nguồn dƣợc liệu thiên nhiên đƣợc ngƣời Việt sử dụng y học, phịng ngừa điều trị bệnh Cây Hà thủ trắng, họ với lồi Hà thủ đ , thuốc quý đƣợc nhận nhiều quan tâm từ nhà nghiên cứu Cây sinh trƣởng vùng đồi núi phía Bắc nhƣ Vĩnh Phúc, Tuyên Quang, vùng đồi trọc tỉnh miền Nam Việt Nam nhƣ An Giang, đƣợc đồng bào dân tộc tận dụng để chữa bệnh nhƣ sốt rét rừng, lợi sữa cho phụ nữ sau sinh Theo GS TS Đỗ Tất Lợi, hà thủ ô trắng có công dụng giống nhƣ hà thủ ô đ giúp kh e gân cốt, điều trị suy nhƣợc thần kinh, bổ máu Nghiên cứu hóa thực vật lồi hà thủ trắng cho thấy thành phần rễ lồi hợp chất triterpene, cardenolide glycoside, đa phần có hoạt tính chống ức chế phát triển nhiều dòng tế bào ung thƣ Thêm vào đó, dây leo hà thủ trắng cịn đƣợc sử dụng tromg thuốc trị cảm sốt, sốt rét đồng bào dân tộc Thái, Khơ me Đã có nhiều nghiên cứu tác dụng dƣợc lý hóa thực vật rễ hà thủ ô trắng nhƣng chƣa có nghiên cứu thân dây leo Nên chọn đề tài “Khảo sát thành phần hoá học phân đoạn A cao chloroform thân dây leo hà thủ ô trắng (streptocaulon juventas)” để đóng góp thêm vào hiểu biết hóa thực vật nhƣ tìm hiểu tác dụng dƣợc lý lồi hà thủ trắng Hy vọng với đóng góp đề tài hệ thống liệu hóa thực vật, kiến thức mối quan hệ giữ hoạt tính cấu trúc phần mở hƣớng nghiên cứu ứng dụng, chế biến chế phẩm sinh học từ hà thủ ô trắng MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT .4 DANH MỤC BẢNG BIỂU .5 DANH MỤC HÌNH ẢNH .6 LỜI MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài MỤC LỤC .8 CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.1 Tên gọi .1 1.1.2 Nguồn gốc phân bố: 1.1.3 Mô tả thực vật Tính chất dƣợc lý 1.2 1.2.1 Dƣợc tính theo y học cổ truyền .2 1.3 Nghiên cứu thành phần hóa học 1.3.1 Các nghiên cứu giới .3 1.3.2 Các nghiên cứu nƣớc CHƢƠNG THỰC NGHIỆM .9 Hóa chất, thiết bị, phƣơng pháp 1.1 Hóa chất .9 1.2 Thiết bị 1.3 Phƣơng pháp tiến hành 1.3.1 Nguyên liệu 1.3.2 Điều chế loại cao 1.3.3 Cô lập hợp chất từ phân đoạn A cao Chloroform 10 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 13 3.1 Khảo sát cấu trúc hợp chất L5 13 2.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất L7 15 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .18 TÀI LIỆU THAM KHẢO .19 CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.1 Tên gọi Tên khoa học: Streptocaulon juventas (Lour) Merr Họ: Thiên lý Asclepiadaceae [1] Tên thƣờng gọi: Hà thủ ô trắng, hà thủ ô nam, dây sữa bị, bạch hà thủ ơ, dây sữa bò, dây mốc, sừng bò, khâu cần cà (Thổ), khâu nƣớc (Lạng Sơn), mã liên an, mã lìn ón (Lào) [2] 1.1.2 Nguồn gốc phân bố: Cây hà thủ ô trắng mọc hoang vùng Vĩnh Phúc, Hà Giang, Tuyên Quang, Cao Bằng Lạng Sơn số vùng núi tình miền Nam Việt Nam Ngồi ra, phân bố số vùng núi Châu Á (Trung Quốc, Lào) [1, 2] Cây mọc nhiều tỉnh miền núi trung du vùng Vĩnh Phúc, Bắc Giang, Hịa Bình, Thái Ngun, Quảng Ninh, Nghệ An, An Giang, Lâm Đồng [1] Lồi hà thủ trắng phân bố chủ yếu nƣớc Việt Nam, Lào, Campuchia số vùng phía nam Trung Quốc Ở Việt Nam hà thủ ô trắng phân bố rải rác khắp tỉnh miền núi, trung du đồng Thƣờng ƣa nơi đất đồi cứng vùng Vĩnh Phúc, Hà Giang, Tuyên Quang, Cao Bằng, Lạng Sơn [2] 1.1.3 Mô tả thực vật Hà thủ là lồi dây leo sống lâu năm Thân dây dài từ 2-5 m ,v thân màu nâu đ nâu sậm, có nhiều lơng mịn , già lông rụng dần Lá mọc đối, phiến ngun, đầu nhọn, đáy có hình bầu dục, dài từ 4-14cm, rộng từ 2-9cm, cuống dài 5-8cm Hoa nh có màu nâu nhạt lục vàng nhạt, nhiều lông, mọc thành xim nách Tràng hình chng dài gấp lần đài, tràng phụ có phận sít Nhị đính vào phận tràng phụ.Quả đại tách ngang sang bên nhƣ hình sừng bị, hình thoi, màu xám, nhiều lông, dài 7-11cm, rộng 8mm Hạt d t, lƣng hạt phồng, có mào lơng mịn Hình Lá hà thủ trắng 1.2 Tính chất dƣợc lý 1.2.1 Dƣợc tính theo y học cổ truyền Dựa nghiên cứu dƣợc tính theo y học cổ truyền hà thủ trắng có vị đắng, tính mát, có tác dụng bổ máu, bổ gan thận hà thủ ô đƣợc dùng làm thuốc bổ, trị thần kinh suy nhƣợc, bệnh thần kinh, kh e gân cốt, sống lâu, làm đen râu tóc Rễ hà thủ trắng dùng sống nhiệt, giải độc, chữa cảm sốt, sốt nóng, sốt rét lâu ngày, nhiều mồ hôi, đau vùng tâm vị, táo bón, nhuận tràng, thơng tiện, bị thƣơng, sƣng đau Ngày dùng 12-20g, dạng thuốc sắc, cao rƣợu uống Đối với phụ nữ, hà thủ ô đƣợc dùng chữa bệnh sau sinh, bệnh xích bạch đới, lị lâu ngày khơng kh i, sữa Rễ hà thủ ô trắng nhai nuốt nƣớc, bã đắp chữa rắn cắn Còn dùng cành đun nƣớc tắm rửa để chữa lở ngứa Củ than chữa cảm sốt, cảm nắng, sốt rét [2] 1.2.2 Dƣợc tính theo y học hi n đại Hà thủ ô trắng có tác dụng nâng cao tỷ lệ sống sót kéo dài thời gian cầm cự động vật nhiễm nọc độc rắn hổ mang có tác dụng ức chế co thắt trơn ruột gây histamine acetylcholine [2] Hà thủ ô trắng có độc tính thấp, có tác dụng kích thích nh co bóp trơn, làm co mạch ngoại vi, kích thích hơ hấp, nhƣng khơng làm thay đổi huyết áp, kích thích nh nhƣ lợi tiểu, kích thích tiêu hóa giúp tăng cảm giác th m ăn, tăng sức lực, hạ thân nhiệt, tiêu viêm an thần nh [2] Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất L7 36 Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất L7 37 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất L7 38 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất L7 39 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất L7 40 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất L7 41 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất L7 42 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất L7 43 Phụ lục Phổ HSQC hợp chất L7 44 Phụ lục Phổ HSQC hợp chất L7 45 Phụ lục Phổ HSQC hợp chất L7 46 Phụ lục Phổ HMQC hợp chất L7 47 Phụ lục Phổ HMQC hợp chất L7 48 Phụ lục Phổ HMQC hợp chất L7 49 Phụ lục Phổ HMQC hợp chất L7 50