0788 nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của hai loài sâm đại hành (eleutherine bulbosa (mill) urb) và xạ can (belamcanda ch

24 A(BS- 3),i r ig en i n ( BS-4),i r i l i n D (BS-7),t e c to r i d i n (BS-9)v t ec to r i g e n in ’ - O-ββD-glucoside(BS-10);3hợpchatflavonoidlàr h a m n o c i t r i n (BS-6),kaemp f ero l- 3- O-βDglucopyranoside (BS-11) isoquercetin (BS-12); hợp chat khác acetovanillone(BS5), daucosterol (BS-8), 24E-stigmasta-5,22-dien-3-ol (BS-13), axit myristic (BS14).Trongsođó,4hợpchatlà:acetovanillone(BS-5),kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside (BS-11), isoquercetin (BS-12) axit myristic (BS-14) hợp chatlan đau phân l p từ loài Hai hợp chat tectorigenin tectoridin thành phanchínhtrongthânrethựcvt Venghiêncứuhoạttínhsinhhoc 2.1 Ket sàng loc hoạt tính kháng viêm dịch chiet cho thay có c n chietethylacetat(EB-Et)củacủsâmđạihành,cnchietethylacetat(BS-Et)vàcnnước(BS-W) thân re xạ can có hoạt tính kháng viêm theo đường uong với mức đức che khoiviêm tương ứng 52,12%, 70%, 64,26% Tat c n chiet củ sâm đại hành thân rexạ cankhơngthehin hoạttínhkhithửnghim t h e o đườngbơi 2.2 Lan đau tiên nghiên nghiên cứu tác dụng ức che sản sinh cytokine gây viêm từte bào tua DC sinh xương kích thích LPS 14 hợp chat phân l pđược từ củ sâm đại hành Ket cho thay có hợp chat: (2S) dihydroeleutherinol-8O-β-D-glucopyranoside (EB-1), hongconin (EB-4), eleutherine (EB-5), isoeleutherin(EB-6) có hoạt tính tot ức che sản sinh cytokine IL-12 p40 (với giá trị IC50từ0,1±0,08→5±0,4 µ M)và IL-6 (vớig i t r ị I C 50t , ± , →8,7±0,3 µ M)t t e b o t u a (DCs) sinh từ tủy xương Ket cho thay có the sử dụng hợp chat làcácchatkhángviêmtiemnăngtrongtương lai 2.3 Ðã đánh giá hoạt tính kháng viêm đ an tồn tectorigenin hoạt chatchínhphânlp đượctừthânre xạcan -βTácdụngkhángviêm,giảmđau: Tectorigenin có tác dụng giảm đau rõ r t nhat lieu 100 mg/kg cân n ng chu t nhat Với lieu 60 mg/kg cân nng chu t cong, tectorigenin có tác dụng chong viêm cap vàviêm mạn -β Ð c tính cap tính cúa tectorigeninđã xác định với giá trị LD 50là (1,78 ± 0,13)g/ kgP -β Ð c tính bán trường dien:tectorigenin với lieu thử 100 mg/kg cân n ng 300mg/kg cân n ng, cho chu t ong thuoc liên tục 28 ngày không làm ảnh hưởng đen cânnn g , khônglàmthayđoichứcphn tạomáuvàchứcnănggan,thn sovới lơchứng KIENNGH± Nghiên cứu thành phan hố hoc c n chietn-hexane hai loài xạ can sâm đạihành Nghiên cứu hợp chat mớiEB-1(hợp chat kháng viêm tiem năng) m t so hợpchat khácđe tạosảnphammới I GIITHIU LUN ÁN Ðtvanđe Vi t Nam nam khu vực khí h u nhi t đới gió mùa, nóng am, thiênnhiên ưu đãi nên có thảm thực v t phong phú đa dạng, với khoảng 14.000 lồithực v t b c cao Trong đó, có khoảng gan 4.000 loài sử dụng làm thuoc chữa b nhtrong y hoc co truyen Nước ta có nen y hoc co truyen het sức đa dạng đ c sac, với bedày hàng nghìn năm lịch sử, nen y hoc dân t c không ngừng phát trien qua thờikỳ Nhieu thuoc, vị thuoc có tác dụng tot lâm sàng chưa nghiêncứu sâu ve thành phan hóa hoc, tác dụng dược lý đ c tính Nghiên cứu đe khai thác, kethừa,ứngdụngvàpháttrien nguonthựcvtlàmthuocđã,đangvàsẽlàvanđecóýnghĩakhoahoc,kinh te xãhi ratlớnởnướcta Trongchươngtrìnhsàngloccáccây thuoccóhoạttínhkhángviêmtừng u o ndượcliuVit Nam,chúngtơiđãpháthinthaycáccâythuochoLadơncóhoạttínhkhángviêm tot Ngồi ra, chúng cịn có m t so hoạt tính khác như: kháng nam, khángkhuan, đ c te bào, chong oxy hố Trong đó, đáng ý nhat hai loàiBelamcandachinensis(L.) DC (xạ can) vàEleutherine bulbosa(Mill.) Urb (sâm đại hành) Ðây làhai thuoc sử dụng theo kinh nghi m dân gian, chưa có nhieu nghiêncứu ve thành phan hố hoc hoạt tính sinh hoc Vi t Nam the giới.Trongyhocdângian,câyxạcanthườngđượcsửdụngđechữa viêmhong, viêmamidan,đau co,ho khó thởdo nhieuđờm, chữa sot, tac tia sữa… Còn sâm đại hànhthường dùng đe trị thieu máu, vàng da, hoa mat, nhức đau, m t mỏi, ho máu, cammáu,ho,holao… Vì v y đe tài “Nghiên cứu thành phan hóa hoc hoạt tính sinh hoc hai lồi sâm đại hành (Eleutherine bulbosa(Mill.) Urb.) xạ can (Belamcanda chinensis(L.) DC.)(ho La dơn (Iridaceae))” với mục tiêu làm sáng tỏ thành phan hố hoc hoạt tính sinhhoc (đcbi t hoạt tính kháng viêm), nham nâng cao giá trị sử dụng khai thác có hiu nguonhoạtchat quýgiá từhai câythuocdângiannày 2.Ðoi tượngnghiêncúuvàni dungcũalunán Ðoi tượng nghiên cứu lu n án củ sâm đại hành (Eleutherine bulbosa(Mill.)Urb.)vàthânre câyxạ can(Belamcandachinensis(L.)DC.) Ni dungchínhcúalu¾nánlà: Ðieuchevàđánhgiáhoạttínhkhángviêmcáccn chietcủacủsâmđạihànhvàthânrexạcan Chiettách vàphânlp cáchợpchattừ2lồithựcvt Xácđịnhcautrúchóahoccủacáchợpchatđượcphânlp Ðánhgiáhoạttính khángviêmcủa mt sohợpchatphânlp Nhũngđóng gópmớicũalunán 3.1 Từ củ sâm đại hành phân l p xác định cau trúc hoá hoc 14 hợp chat là: (2S)dihydroeleutherinol-8-O-β-D-glucopyranoside(EB-1),eleutherinol(EB2),eleutherinoside A (EB-3), hongconin (EB-4), eleutherin (EB-5), isoeleutherin (EB6),eleuthosideC(EB-7),eleutherineosideC(EB-8),eleutherinosideB(EB-9),(R)-7-acetyl-3,6dihydroxy-8-methyltetralone (EB-10), eleuthoside A (EB-11), eleuthoside B (EB-12), eleutherinoside D (EB-13) 3,6,8-trihydroxy-1-methylanthraquinone (EB-14) từcủsâmđại hành.Trongđó,(2S)dihydroeleutherinol-8-O-β-D-glucopyranoside(EB-1)là hợp chat hợp chat 3,6,8-trihydroxy-1-methylanthraquinone (EB-14) lan đau đượcphânlp t loàinày 3.2 Từ thân re xạ can phân l p xác định cau trúc hoá hoc 14 hợp chat là:irisflorentin(BS-1),tectorigenin(BS-2),iristectorigeninA(BS-3),irigenin(BS4),acetovanillone(BS-5),rhamnocitrin(BS-6),irilinD(BS-7),daucosterol(BS8),tectoridin(BS-9),tectorigenin4’-O-ββ-D-glucoside(BS-10),kaempferol-3-O-β-Dglucopyranoside (BS-11), isoquercetin (BS-12), 24E-stigmasta-5,22-dien-3-ol (BS13)và axit myristic (BS-14) Trong hợp chat: acetovanillone (BS-5), kaempferol-3O-β-D-glucopyranoside (BS-11), isoquercetin (BS-12) axit myristic (BS-14) lan đau đượcphânlp t câyxạcan 3.3 Ðã xác định c n chiet ethyl axetat (BS-Et), c n nước (BS-W)của thân re xạ canvà c n ethyl axetat (EB-Et) củ sâm đại hành có hoạt tính kháng viêm theo đườnguongvới phantrămứcche khoiviêmtươngứnglà 52,12%,70%,64,26% 3.4 Là cơng trình đau tiên nghiên cứu tác dụng ức che sản sinh cytokine gây viêmtừ te bào tua DC sinh từ xương bị kích thích LPS 14 hợp chat phân l pđược từ củ sâm đại hành Hợp chat mớiEB-1và hợp chatEB-4,EB-5vàEB-6ứcche tot sản sinh cytokine IL-12 p40 (với giá trị IC 50từ 0,1±0,08→5±0,4µg/mL) IL-6 (với giá trị IC 50từ 1,7±0,1→8,7±0,3 µg/mL) Gợi ý cho thay có the sửdụngcác hợpchat nàynhưlà cácchat khángviêmtiemnăngtrongtươnglai 3.5 Ðã đánh giá tác dụng kháng viêm, giảm đau đan tồn hợp chat chínhtectorigieninphânlp đượctừthânrexạcan -β Tác dụng kháng viêm, giảm đau:Tectorigenin có tác dụng giảm đau rõ r t nhat lieu100 mg/kg cân n ng chut nhat Với lieu 60 mg/kg cân n ng chu t cong, tectorigenin cótác dụngchongviêmcapvàviêmmạn -β Ðc tínhcaptínhcúatectorigeninđượcxácđịnhvớigiátrịLD50là(1,78±0,13)g/kgP -β Ð c tính bán trường dien:tectorigenin với lieu thử 100 mg/kg cân n ng 300mg/kgcân n n g , c h o c h u t o n g thuoc l i ê n t ụ c n g y khôngl àm ản h h n g đ e n c â n nng,khônglàmthayđoichứcphntạomáuvàchứcnănggan,thn mô b nh hoc sovớilôchứng Bocụccũa lun án Lu n án gom 148 trang với 27 bảng so li u, 125 hình, 159 tài li u tham khảo 62 phụ lục Bo cục lu n án: Mở đau (2 trang), Chương 1: Tong quan (30 trang), Chương2: Nguyên li u phương pháp nghiên cứu (5 trang), Chương 3: Thực nghi m (26 trang),Chương 4:Ket quảvà thảolun (82trang),Ket lun ( trang),Cáccơngtrình đãcơngbo 23 Proteint N14 46,29±0,98 46,13±0,96 47,36±1,11 >0,05 oànphan N28 43,89±2,27 44,98±1,54 44,49±2,61 >0,05 (g/L) p:sovới lôchúng;Lôthủ 1:100mgtectorigenin/kgP;L ô thủ 2:300mg tectorigenin/kgP +Ketquảbảng 4.24chothay:tạibat h i emn ghiên cứu,k hô n g thaycósựk h c bi t ve thơngsoAST,ALTcholesteroltồnphanvàproteintồnphangiữacáclơchutthực nghim (p>0,05) + Ket quan sát đại the mô b nh hoc gan chut sau 28 ngày uong thuoc sau: ởcả2 lô thuoc thử lô chứng m t gan nhan, m t đbình thường, màu đỏ, khơng có sunghuyet,khơngcódauhiu t o n thương -Ðánhgiáchứcnăngthn Ket định lượng creatinin lơ chu t thí nghi m trình bày bảng4.25 Bảng4.25.Ánhhướngcúatectorigieninđenthơngsocreatininhuyetthanhcúa chutthncnghi+m Chĩso Thờiđiem Lơchúng Lơthũ1 Lơthũ2 p nghiêncúu nghiêncúu (n=10) (n=10) (n=10) Creatinin (µmol/L) N14 399,94±10,26 368,26±15,41 354,65±29,44 > 0,05 N28 417,54±12,38 419,83±5,46 431,98±7,45 > 0,05 p:sovới lôchúng;Lôthủ 1:100mgtectorigenin/kgP;L ô thủ 2:300mg tectorigenin/kgP Ket bảng 4.25 cho thay: sau tuan tuan uong thuoc liên tục, hàm lượngcreatinintrongmáuchut khơngcósựthayđoikhácbit s o với lôchứng(p>0,05) Quan sát đại the mô b nh hoc th n chu t sau 28 ngày uong thuoc cho thay th n mứcbình thường, m t đchac bình thường, màu đỏ tham, m t nhan, màu đỏ, không thay đámsunghuyetvà đámtonthương Ket nghiên cứu cho thay so creatinin khơng có khác bi t so với lô chứng, chứng tỏ tectorigienin không ảnh hưởng đen chức loc cau th n Ket quảnàyphùhợpvớihìnhảnhcautrúcvithe củathn KET LUN Vethành phanhoáhoc 1.1 Từcủsâm đạih àn hđãph ân lp v x ácđ ịn hđượccau trúccủa14 hợpchatlà: (1trang),Tàiliu thamkhảo(17trang) O N II.NI G DUNGL Q UN ÁN U Mỡđau:đecp đentínhthựctien,ýnghĩakho A ahoc,tínhthờisự,mụctiêuvànhim vụcủa N lun án Trên sở nghiên cứu tài li u, chương C đe c p đen tình hình nghiên cứu hố hocvà H hoạt tính sinh hoc lồi sâm đại hành Ư (Eleutherine bulbosa(Mill.) Urb.) loài Ơ N xạcan (Belamcanda chinensis(L.) DC.), khái G ni m ve viêm m t so hợp chat phenolicthựcvt c ó hoạttínhkhángviêm T (2S)dihydroeleutherinol-8-O-β-Dglucopyranoside(EB1),eleutherinol(EB-2),eleutherinoside A(EB-3), hongconin (EB-4), eleutherin (EB-5), isoeleutherin (EB6),eleuthosideC(EB7),EleutherineosideC(EB8),eleutherinosideB(EB-9),(R)-7-acetyl-3,6dihydroxy-8-methyltetralone (EB-10), eleuthoside A (EB-11), eleuthoside B(EB-12), eleutherinoside D (EB-13), 3,6,8trihydroxy-1-methylanthraquinone (EB14).Trong so đó, (2S) dihydroeleutherinol-8-O-β-Dglucopyranoside (EB-1) hợp chat mớivà hợp chat 3,6,8-trihydroxy-1methylanthraquinone (EB-14) lan đau phân l p từloàinày 1.2 Từ thân re loài xạ can phân l p xác định cau trúc 14 hợp chatgom:7hợpchatisoflavonoidlàiris florentin(BS-1),tectorigenin(BS2),iristectorigenin 23 22 Chu t lơ thí nghi m đeu tăng cân rõ r t sau tuan tuan uong thuoc(ptr/s 0,05) -Ảnhhưởnglênchứcnăngtạomáu Ketquảđịnhlượng cácthông sohuyethoc:so lượng hong cau (HC),nongđhemoglobin (Hb), ty lhematocrit (HCT), so lượng tieu cau (PLT) so lượng bạch cau(BC), thời điem sau cho uong thuoc 14 ngày (N14) sau uong thuoc 28ngày(N28) trình bàyởbảng4.23 Bảng 4.23 Ánh hướng cúa tectorigienin thông so huyet hoc cúa chu t thncnghi+m Chĩsonghiên cúu Thờiđiem Lôchúng Lôthũ1 Lôthũ2 p nghiêncúu (n=10) (n=10) (n=10) N14 8,16±0,21 7,92±0,33 6,87±0,57 >0,05 HC(1012/L) N28 7,99±0,27 8,38±0,22 8,51±0,21 >0,05 N14 13,35±0,36 12,14±0,49 11,34±1,00 >0,05 Hb(g N28 13,34±0,31 12,56±0,43 13,17±0,39 >0,05 /100mL) N14 37,59±1,11 35,57±1,49 32,72±2,16 >0,05 HCT N28 37,89±1,29 37,20±1,13 38,28±0,88 >0,05 (%) N14 716,56±31,88 721,00±40,46 694,60±47,05 >0,05 PLT N28 812,20±38,41 792,90±35,59 793,78±33,35 >0,05 N14 1,95±0,20 1,80±0,15 1,64±0,21 >0,05 BC(1 N28 1,58±0,19 1,99±0,22 1,48±0,11 >0,05 09/L) Tại thời điem nghiên cứu, khơng thay có bien đoi ve so lượng hong cau, hàmlượng hemoglobin, ty lhematocrit, so lượng tieu cau so lượng bạch cau lôthực nghim (p> 0,05) -Ðánhgiáchứcnănggan KetquảđịnhlượngcácthơngsoAST(aspartataminotransferase),ALT(alaninaminotransferase), cholesteroltồnphan,proteintồnphantạicácthờiđiemN14,N28đượctrìnhbàytrongbảng4.24 Bảng4.24.ÁnhhướngcúatectorigieninđencácthơngsoAST,ALT,cholesteroltồnphan vàproteintồnphan Chĩso Thờiđiem Lôchúng Lôthũ1 Lôthũ2 p nghiêncúu nghiêncúu (n=10) (n=10) (n=10) CHƯƠNG2.NGUYÊNLIU VÀ PHƯƠNGPHÁPNGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên li u thực v t: củ sâm đại hành thu Chí Linh, Hải Dương vào tháng năm2011vàthânre câyxạ canthuvàotháng1đentháng3năm2010tại LạngSơn 2.2 Phương pháp phân l p hợp chat bao gom: sac ký lớp mỏng (TLC), sac ký lớpmỏngđieuche,sac kýct (CC)pha thườngvàphađảo 2.3 Phương pháp xác định cau trúc hợp chat: ket hợp thông so v t lý với cácphương pháp hi n đại như: khoi lượng, khoi phân giải cao, c ng hưởngtừhạtnhân1D,2DNMR 2.4 Cácphươngphápnghiêncứuhoạttínhsinhhoc: Nghiêncứuhoạttínhkhángviêminvivocũacácc¾nchiet: - Theođườngbơi:theophươngphápcủaMrudulaKale(2007),JaijoyK(2010) - Theođườnguong:theophươngphápcủaMiklosGabor(2009) Nghiên cứu tác dnngức chesựsãn sinh cytokine gây viêm từtebào tua DC (dendriticcells) sinh raỡtuỹxươngđược kích thích bỡi LPS (lipopolysaccharide) cũa hợpchat phân l¾pđược từcây sâmđại hành: tien hành Vi n CN sinh hoc HànQuoc, cáchợp chatđược thửnghim c c n o n g đ , ; , ; , v , µ M , d ị c h huyen phù thu hoạch sau 16 kích thích, phát hi n nong đ murine IL-12p40, IL-6vàTNF-αbangmáyELISA Nghiên cứu tác dnng dược lí in vivo vàđan tồn cũa tectorigenin phân l¾pđược từthânrecâyxạcan - Nghiên cứu tác dụng kháng viêm, giảm đau tectorigenin thực hi n bmôn Dượclí, trườngđạihocDượcHàNi theocác phươngphápchuanthườngqui - Nghiên cứu đan tồn tectorigienin tien hành bmơn Dược lí, Vi n Kiemnghi m thuoc trung ương: đ c tính cap, đ c tính bán trường dien đánh giá theophươngphápcủaOECD CHƯƠNG3.THỰCNGHIM Chươngnàymơtảchitietcácqtrìnhchiet,phânlp cáchợpchatvàđánhgiácáchoạttínhkhán gviêmcủa mt sohợpchatphânlp Quytrìnhphân lpcáchợpchattùcũsâmđạihành C n EB/Et SKC, SiO2, gradient HX:Aceton (40:1 -1:1) ALT (U/L) N14 176,28±9,38 156,75±7,11 155,13±7,54 > 0,05 N28 194,58±17,27 173,91±18,61 209,41±22,02 > 0,05 AST (U/L) N14 59,68±4,79 64,74±3,15 64,80±5,93 > 0,05 N28 75,04±3,99 82,66±5,48 74,09±7,90 > 0,05 Cholesterol toàn phan(mmol /L) N14 1,88±0,10 2,06±0,11 2,05±0,12 > 0,05 EB-B1 N28 2,04±0,14 1,79±0,13 1,76±0,10 > 0,05 SKC, YMC RP-18, MeOH:H2O (6:1) EB-A EB-B EB-C SKC, SiO2 HX:Aceton (5:1) SKC, SiO2 CHCl3:Aceton 10:1) EB-2 (12mg) EB-B2 EB-10 (8mg) EB-B3 EB-D EB-B4 EB-14 (10mg) SKC, YMC RP-18 MeOH:H2O (3:1) EB-4 (5mg) EB-5 (9mg) EB-6 (15mg) Hình3.2Sơđophânl¾pcáchợpchattùc¾nchietetylaxetatcúacúsâmđạihành 21 C n EB-W SKC, Dianion HP-20P, MeOH (0%, 25%, 50%, 75%, 100%) EB-E EB-F EB-G EB-H SKC, SiO2 CHCl3:MeOH:H2O (5:1:0,15) EB-G1 EB-G2 EB-K SKC, LH-20 MeOH EB-G3 SKC, YMC RP-18SKC, YMC RP-18EB-1EB-3 Aceton:H2O (1:2)MeOH:H2O (1:1)(5mg)(9mg) EB-7 (12mg) EB-8 (15mg) EB-11 (19mg) EB-12 (9mg) EB-13 (14mg) EB-9 (8mg) Hình 3.3 Sơ đo phân l¾p hợp chat tù c¾n nước cúa cú sâm đại hànhHang sovtlývàdũli$uphocũacáchợpchatphânlpđượctùcũsâmđạihànhHợpchat EB-1(1) 25 Chatb t m u v n g n h t ; [ ]D –58,1(MeOH,c = , ) ; E S I - M S m / z [ M – – H] ; HR-ESI-MSm/z455,1126[M+Cl] –(C 21H24O9Cl,455,1114),m/z419,1338[M–H]– (C21H23O9,419,1348),m/z257,0818[M–Glc]–(C15H13O4,257,0819) H-NMR(500MH z, CD 3OD)(ppm):4,87( 1H ,d d q ,J =4,0;6 , ; 2, 0, H - ) ; ,5 (1H,d d ,J=4,0;1 ,8 , H b-3);2 , 2(1H,d d ,J =12,0;16,8,H a-3);6 ,8 (1H,s, H - ) ; ,6 (1H,s,H-7);6,45(1H,s,H-9);1,46(1H,d,J=6,1,2-Me);2,45(1H,s,5-Me);4,93(1H, d,J=7,2,H-1′);3,40(1H,H-2′);3,47(1H,H-3′);3,31(1H,d,J=8,5,H-4′);3,42(1H,H5′);3,62(1H,dd,J=5,6;12,2,Hb-6′);3,83(1H,dd,J=2,2;12,2, Ha-6′) 13 C-NMR(12 5MH z , CD 3OD) (ppm):1 ,4 (C-1);7 ,0 (C-2);4 , (C3);1 , (C-4);1 4, 6( C- a); , 6( C- ); , ( C - ) ; 14 ,4( C-6 a) ;1 3, (C7 );1 , 4(C- 8); 103,5(C-9);158,7(C-10);109,9(C-10a);20,7(2-Me);23,3(5-Me);101,7(C1′);74,8 (C-2′);78,0(C-3′);71,4(C-4′);78,3(C-5′);62,5(C-6′) ThuýphânhợpchatEB-1 Hoà tan hợp chatEB-1trong dung dịch HCl 0,1 N (dioxane/H 2O, 1:1, v/v, 1,0 ml) roiđun cáchthuyở800C 3h Sau đó, dung dịch axit trung hồ Ag 2CO3, vàdung mơi loại bỏ tri t đe khí N 2, sau chiet với CHCl 3được lớp CHCl3và lớpnước Lớp CHCl3đem tien hành sac ký lớp mỏng đieu che với hdung môi CHCl3MeOH(8:1,v/v)thuđượchợpchatEB-1a Lớp nước làm khơ kit khí N 2, phan c n hoà tan 0,1 ml pyridine khơroi thêm vào este L-cysteine methyl hydrochloride pyridin (0,06 M, 0,1 mL).Hon hợp phản ứng gia nhi t đen 60 0C roi bo sung thêm 0,1 ml dungdịch trimethylsilylimidazole tiep tục gia nhi t đen 60 0C 1,5 Sản pham saukhi làm khô phân bo vớin-hexan (0,1 ml) H2O (0,1 ml), lớpn-hexan đượcphân tích bang sac ký khí GC (c t SPB-1 (0,25 mm×30 m), detector FID, nhi t đc t210 0C, nhi t đt i ê m 0C, nhi t đ detector 300 0C, khí mang He (2,0 ml/phút)) Thờigianlưucủap eakđượcph át h in ở1 4,1 1phút.Vớin h ững đieuk i n trênth ìp eakcủa Lôthửuong 313,48±40,52 56,49±5,01 tectorigieninlieu p3/10,05 Ghichú:px/y:múcđt i n c¾ycúalơxsovớilơy Từ bảng 4.20 ta thay tectorigienin the hi n rõ tác dụng chong viêm mạn cân khoilượng u hạt lúc ướt lúc khô Ty lức che u hạt tectorigienin tương đoi cao, cânướtlà35,67%,khicânkhôlà43,54%.Tácdụngchongviêmcủatectorigieninlieu60mg/kg cân n ng tương đương với tác dụng chong viêm prednisolon lieu mg/kg cânnn g b.Nghiêncứuvetínhantồncũatectorigienin *Ðc t í n h cap Ðã tien hành nghiên cứu đ c tính cap tectorigenin mức lieu khác Solượngchut chet ởcáclơthửcụthe đượctrìnhbàytrongbảng4.21 Bảng4.21Ketquảtheodõiđn g v¾tthínghi+m Múc Lieuthũ Sochut chet/ Sochut chet/ %chet lieu songthụcte songkỳvQng (gmȁuthũ/kg chut) 1,0 0/10 0/21 0,00 1,5 4/6 4/11 26,67 2,0 7/3 11/5 68,75 2,5 8/2 19/2 90,48 3,0 10/0 29/0 100,00 Từ ket theo cơng thức tính Behrens xác định đ c tính cap củatectorigieninvới giátrịLD50= (1,78±0,13)gam/kgchut *Ðc tínhbántrườngdien -Vetìnhtrạngchung: Trong thời gian thử nghi m, chu t lơ hoạt đ ng bình thường, nhanh nhen, matsáng,l ô n g m ợ t , ă n u o n gb ì n h t h n g , p h â n k h ô , n c t i e u b ì n h th ờn g K h ô n g th ay bieuhinđcbitởcả3lơchuttrongsuotthờigiannghiêncứu.Tienhànhcânchuttrước, lúc ket thúc thí nghi m Mức đtăng cân chu t so với trước uongthuoc thờiđiem nghiêncứunhưsau: Bảng4.22 Ánhhướngcúatectorigieninđenmúc đt ă n g câncúachut (%) Thờiđiem Lôchúng Lôthũ1 Lôthũ2 p nghiêncúu (n=10) (n=10) (n=10) 25,98±0,63 25,94±0,29 N0 24,00±0,53 >0,05 ptr/s0,05 p3/2>0, 05 p3/2>0,05 lieu60mg/kgP Ghichú:px/y:sosánhlô xvàlôy Nhưv y , v i l i e u m g / k g c â n n n g c h u t c o n g , t e c t o r i g e n i n t h e h i n t c d ụ n g chongviêmrõ nhat sau57giờgâyviêm Bảng4.19Týl+%úcchephùchânchut cúatectorigieninsovớilôchúngtrang Lô 1giờ 2giờ 4giờ 5giờ 7giờ 24giờ Lôchứngdươnguong 61,69 68,39 50,86 46,31 44,32 43,89 indomethacinlieu10mg/kg Lôthửtectorigieninlieu 86,93 53,77 49,58 58,04 67,32 62,27 60mg/kg Từ bảng 4.19 cho thay ty l ức che phù chân chu t tectorigienin lieu 60mg/kg cân n ng cao tương đương với ty lức che phù chân chu t indomethacin lieu 10mg/kg cân n ng Ty lức che cao nhat thời điem sau gây viêm 86,93% Th mchí, ty l ức che phù chân chu t tectorigienin lieu 60 mg/kg cân n ng hau caohơn ty l ức che phù chân chu t indomethacin thời điem giờ, giờsaukhigâyviêm *Ketquảnghiêncúutácdụngchongviêmmạncúatectorigienin Ketquảnghiêncứutácdụngchongviêmmạncủatectorigienintrênmơhìnhgâyuhạtthực nghim b a n g amianđược the hin bảng4.20 Bảng4.20Tácdụngchongviêmmạncúatectorigienintrênmơhìnhgâyuhạtthncnghi+m bangviênamian MTBướt( %úcchek MTBkhơ( %úcchek Lơ mg) hicânướt mg) hicânkhô Lôchứngtranguong 487,33±65,87 100,06±12,92 NaCMC1% Lô chứng dương 280,05±24,43 55,48±5,20 42,53 44,55 p2/10,05 p2/1