0792 nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học cây na biển (annona glabra l) luận văn tốt nghiệp

BỘGIÁODỤCVÀĐÀOTẠO VIỆNHÀNLÂMKHOAHỌCVÀ CÔNGNGHỆVIỆT NAM HỌCVIỆNKHOAHỌCVÀCÔNGNGHỆ - NGUYỄNTHỊTHUHIỀN NGHIÊNCỨUTHÀNH PHẦNHĨAHỌCVÀHOẠTTÍNHSINH HỌCCÂYNABIỂN(Annona glabraL.) Chuyênngành:H ó a hữucơMã số:6 4 LUẬNÁNTIẾNSỸHĨAHỌC Hà Nội -2015 Cơngtrìnhđượchồnthànhtại: ViệnHóasinhbiển ViệnHànlâmKhoahọcvàCơng nghệViệtNam Người hướngdẫnkhoahọc:1 PGS.TS PhanVănKiệm 2.TS HồngLêTuấnAnh ViệnHóasinhbiển, ViệnHànlâmKhoahọcvàCơngnghệViệtNam Phảnbiện1: Phảnbiện2: Phảnbiện3: LuậnánsẽđuợcbảovệtruớcHộiđồngchấmluậnáncấpHọcviệnhọptại: vàohồi ngày tháng Cóthểtìmhiểu Luậnántạithưviện……… năm I GIỚITHIỆULUẬNÁN Đặtvấnđề Cây nabiển (Annona glabra)làloạicây ăn quảthườngđượct r n g đ ể c h ắ n sóngởcácvùngngậpmặn.Câythườngđượcdùngđểtrịtiêuchảy,kiếtlỵvàlàmthuốc sát trùng Vỏ giã có cơng dụng tương tự Dịch dùng để trừchấy Hạt nghiền nátcó thể làm săn da, sáttrùng Thịt có vịngọtmát,g i ả i nhiệt Các nghiên cứu thành phần hóa học cơng bố giới cho thấy lồinày chứa nhiều lớp chất quý có cấu trúc độc đáo, đặc biệt lớp chất diterpenoidentkauranev a ce t o ge ni n C c ng hi ên uđ án h g i h o t t í n h si nh h ọ c c ho t h ấ y mộtsốhợpchấtđãđượcphânlậptừlồinàythểhiệnhoạttínhsinhhọcrấtđángquan tâm như: hoạt tính ức chế phát triển tế bào ung thư, tác dụng kháng viêm,giảmđauTuynhiên,h i ệ n có í t cơng trìnhkhoahọct rong n c cơng bốc ả thànhphầnhóahọcvàhoạttínhsinhhọccủacâythuốcqnày Nhằm mục đích nghiên cứu làm rõ thành phần hóa học vàh o t t í n h s i n h h ọ c na biển (Annona glabraL), lựa chọn đề tài: "Nghiên cứu thànhphầnhóa họcvà hoạttínhsinhhọccây Na biển(Annona glabraL.)" Đốitượngnghiêncứuvànộidungcủa luậnán ĐốitượngnghiêncứucủaluậnánlàlồinabiểnAnnonaglabra Nộidungchínhcủaluậnán: Phânlậpcáchợpchấttừquảlồinabiển(A.glabra)bằngcácphươngphápsắcký; Xác địnhcấutrúchốhọccáchợpchất phânlậpđượcbằngcácphươngphápvậtlývà hóahọc; Đánhgiáhoạttínhgâyđộctếbào củacáchợpchấtphânlậpđược; Đánhgiáhoạttínhkhángviêmcủacáchợpchấtphânlậpđược Nhữngđónggópmớicủa luậnán 3.1 Từquảlồinabiển(A glabra) đãphânlập được: 3.1.1 5hợpchấtmớilà:7β,16α,17-trihydroxy-ent-kauran-19-oicacid(1),7β,17dihydroxy-16α-ent-kauran-19-oic acid 19-O-β-D-glucopyranoside ester (2),7β,17dihydroxy-ent-kaur-15-en-19-oic acid 19-O-ββ-D-glucopyranoside ester (3),16αhydro-ent-kauran-17,19-dioic acid 17,19-di-O-ββ-D-glucopyranoside ester (4), (2E,4E,1′R,3′S,5′R,6′S)-dihydrophaseicacid1,3′-di-O-ββ-D-glucopyranoside(13); 3.1.2 hợp chất lần đầu phân lập từ chiAnnonalà: paniculoside IV (5), (2E,4E,1′R,3′S,5′R,6′S)-dihydrophaseicacid3′-O-ββ-Dglucopyranoside(14),cucumegastigmane I (15), icariside B1(17), icariside D2(18), icariside D26′-O-ββ-D-xylopyranoside(19),3,4-dimethoxyphenyl1-O-ββ-Dglucopyranoside(20); 3.1.3 hợp chất lần đầu phân lập từ loàiA glabralà: 16α,17-dihydroxy-entkaurane(6)và 3,4-dihydroxybenzoicacid(21) 3.2 Lần thử hoạt tính gây độc tế bàoin vitrotrên dòng tế bào ungthưL U - , M C F - , S K - M e l , H L v K B c ủ a 2 h ợ p c h ấ t p h â n l ậ p t l o i n a biển (A glabra) Kết cho thấy, hợp chất3,4,6,14, và15thể khả nănggâyđộcở4/5dịngtếbàoungthưthửnghiệm(ngoạitrừdịngHL60).Trongđó,bahợ pc hấ t khungentkaurane3,4và 6th ểhi ện hoạttínhgây độct ếbào m nh nhấtv i g i t r ị I C 50trongk h o ả n g 0,65 ÷ , µM H ợ p c h ấ t m e g a s t ig ma n e v thể khả gây độc tế bào với giá trị IC 50trong khoảng 2,79 ÷11,17 µM.Phenolic18và acetogenin22(squamocin M) thể hoạt tính dòng tếbào ung thưthửnghiệm vớig i t r I C 50trong khong 6,30 ữ10,61 àM v khụng thểhiệnđộc tínhđối vớidịngtế bàothườngHEL-299 3.3 Lần chếg â y c h ế t t ế b o u n g t h H L - c ấ p đ ộ p r o t e i n c ủ a hợp chất18và22đã nghiên cứu Kết hợp chất18và22kíchthíchqtrìnhtế bào chết theo chươngtrình(appotosis) 3.4 Lần đánh giá hoạt tính kháng viêm thơng qua việc ức chế sảnsinh NO điều kiện đại thực bào 19 hợp chất phân lập từ loài na biển (A.glabra) Kết cho thấy hợp chất phân lập từ lồi na biển (A glabra) thể hiệnhoạt tính ức chế sản sinh NO điều kiện đại thực bào hợp chất1,3,8(16β,17-dihydroxy-ent-kauran-19-al),12(19-nor-ent-kauran-4-ol-17oicacid), và13ức chế sản sinh NO mnh hn cht i chng dexamethasone, vigiỏtr IC50trongkhong0,01ữ0,42àM Bccca luậnán Luận án gồm 138 trang với 26 bảng số liệu, 62 hình, 147 tài liệu tham khảo Bốcụcc ủ a l u ậ n n : M đ ầ u ( t r a n g ) , C h n g : T ổ n g q u a n t i l i ệ u ( t r a n g ) , Chương2:Ðốitượngvàphươngphápnghiêncứu(7trang),Chương3:Thựcnghiệm (9 trang), Chương 4: Kết thảo luận (64 trang), Kết luận Kiến nghị(3trang),Cáccơngtrìnhđãcơngbố(1trang),Tàiliệu thamkhảo(17trang)vàPhụlụcphổ II NỘIDUNG LUẬNÁN ÐẶT VẤN ÐỀ:Phần đặt vấn đề nêu ý nghĩa khoa học, tính thực tiễn, đối tuợng,mụctiêuvà nhiệmvụnghiêncứucủa luậnán CHƯƠNG1: TỔNGQUANTÀILIỆU Phần tổng quan tài liệu trình bày nghiên cứu nuớc quốc tế cácvấnđề: 1.1 GiớithiệuvềchiNa(Annona) 1.2 Giớithiệuvềloàinabiển(Annonaglabra) CHƯƠNG2:ĐỐITƯỢNGVÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 2.1 Mẫuthựcvật Mẫu lá, loài na biển (Annona glabra) thu hái vào tháng 5n ă m tạiThànhphốHồChí Minh 2.2 Phươngphápphânlậpcáchợpchất Phối hợp phương pháp sắc ký bao gồm: sắc ký lớp mỏng (TLC), sắc ký lớpmỏngđiềuchế sắckýcột (CC) 2.3 Phươngphápxácđịnhcấutrúchóahọc Sử dụng kết hợp xác định thông số vật lý phương pháp phổ đạiđồng thời kết hợp phân tích, tra cứu tài liệu tham khảo Các thiết bị phương phápsửdụnggồm:đođiểmnóngchảy(Mp),độquaycực([α]α]] D), phổ khối lượng (ESI-MS, HR-ESI-MS), phổ cộng hưởng từ nhân (1D, 2D-NMR), phổ lưỡng sắc trịn(CD)vàphươngpháphóahọc 2.4 Phươngphápxácđịnhhoạttínhsinhhọc 2.4.1 Phươngpháp đánhgiáhoạttínhgâyđộctếbào Hoạt tính gây độc tế bào hoạt chất đuợc xác định theo phương phápMTT 2.4.2 Phươngphápđánhgiáhoạttínhkhángviêm Hoạttínhkhángviêm củacáchợpchấtđuợcđánhgiádựatrênkhảnăngứcchếsựsảnsinh NOtrongđiềukiệnđạithựcbàoRAW264.7đượckíchthíchvớiLPSCHƯƠNG3:THỰC NGHIỆMVÀ KẾTQUẢ 3.1 Phânlậpcáchợpchấttừquảnabiển PhầnnàytrìnhbàycụthểcáchthứcphânlậpcáchợptừquảnabiểnA.glabra Việcphântáchcácchấtđuợcnêutómtắtởcácsơđồhình3.1, 3.2, 3.3 Hình3.1.S đ chiếtcácphânđoạnmẫunabiển(A glabra) Hình3.2.Sơđồphânlậpcáchợpchấttừcặnchiếtdichloromethane Hình3.3 Sơ đồphânlập cáchợp chấttừ cặnchiếtnước 3.2 Hằngsốvậtlývàdữkiệnphổcủacáchợpchất 3.2.1 Hợpchất1:7β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicβ,16α,17β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicTrihydroxy-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicent-Trihydroxy-ent-kauran-19-oickauran-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic19-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicoicacid(mới) Chấtbộtvơđịnhhình, màutrắng 25 Độquaycực :– D 64,9(c0,1,MeOH).Nhiệtđộ nóngchảy:298-299oC H-NMR( 0 M H z , C D 3OD):δ H0 , ( H , m , H a-1),1 , ( H , m , H b-1),1 , 4 (1H,m,H a-2),1,96(1H,m,H b-2),1,08(1H,dd,J=4,5Hz,13,5Hz,H a-3),2,17 (1H,d,J=13,5Hz,Hb-3),1,17(1H,d,J=9,0Hz,H - ) , 1,98(1H,m,Ha-6),2,11 (1H,m,Hb-6),3,63(1H,brs,H-7),1,43(1H,d,J=7,5Hz,H-9),1,57(1H,m,Ha11),1,64(1H,m,H b-11),1,57(1H,m,H a-12),1,68(1H,m,H b-12),2,08(1H,m, H-13),1,70(1H,dd,J=4,0Hz,12,0Hz,Ha-14),1,83(1H,d,J=12,0Hz,H b-14), 1,56(1H,d,J=13,5Hz,Ha-15),1,74(1H,d,J=13,5Hz, H b-15),3,62(1H,d,J= 11,5Hz,H a-17),3,72(1H,d,J=11,5Hz,H b-17),1,18(3H,s,H-18),1,00(3H,s,H-20) 13 C-NMR(125MHz, CD3OD): δC41,71(C-1),20,29 (C-2),34,23 (C-3),44,25 (C4),48,09(C-5),30,48(C-6),78,05(C-7),49,00(C-8),51,08(C-9), 40,44(C-10), 19,11( C - 1 ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C 15),82,86(C16),66,71(C-17),29,27(C-18),182,00(C-19),16,14(C-20) HR-ESI-MS:m/z375,2159[α]M+Na]+ Tính tốn lý thuyết [α]C20H32O5Na]+: 375,2142.Cơngthức phântửC20H32O5, M=352 3.2.2 Hợpchất2:7β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicβ,17β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicDihydroxy-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic16α-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicent-Trihydroxy-ent-kauran-19-oickauran-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic19-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicoicacid19-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicO-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicβ-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic D-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic glucopyranosideester(mới) Chấtbộtvơđịnhhình,màutrắng 25 Độquaycực :– D 40,7(c0,1,MeOH);Nhiệtđộ nóngchảy:185-186oC H-NMR( 0 M H z , C D 3OD):δ H0 , ( H , m , H a-1),1 , 8 ( H , m , H b-1),1 , (1H,m , H a-2),1 ,9 4( 1H , m , H b-2),1,13 ( H , m , H a-3),2, 22 (1 H, m , H b-3),1,78 (1H,d,J=13,0Hz,H - ) , 1,97(1H,m,Ha-6),2,18(1H,dd,J=13,0Hz,1 , Hz, Hb-6),3,50(1H,brs,H-7),1,43(1H,m,H-9),1,57(1H,m,H a-11),1,63(1H,m, Hb-11),1,43(1H,m,Ha-12),1,63(1H,m,Hb-12),2,11(1H,m,H-13),1,08(1H,m, Ha-14),1,80(1H,d,J=11,5 Hz,Hb-14),1,12(1H,m,Ha-15),1,71(1H,dd,J=3,5 Hz,1 , Hz,H b-15),1,94(1H,m,H-16),3,35(2H,m,H-17),1,22(3H,s,H-18), 0,99(3H,s,H-20),5,42(1H,d,J=8,0Hz,H-1′),3,38(1H,m,H-2′),3,45(1H,m, H-3′),3,39(1H,m,H-4′),3,39(1H,H-5′),3,71(1H,dd,J=4,0Hz,11,5Hz,H a-6′), 3,86(1H,d,J= 11,5 Hz,Hb-6′) 13 C-NMR(125MHz, CD3OD): δC41,77(C-1),20,20 (C-2),39,09 (C-3),44,69 (C4),49,05(C-5),30,68(C-6),78,70(C-7),49,80(C-8),50,62(C-9), 40,47(C-10), 19,51( C - 1 ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C 15),44,66(C16),67,66(C-17),28,82(C-18),178,67(C-19),16,28(C-20),95,66(C-1′),74,07 (C-2′),78,67(C-3′),71,14(C-4′),78,56(C-5′)và62,42(C-6′) HR-ESI-MS:m/z521,2732[α]M+Na]+ Tính tốn lý thuyết [α]C26H42O9Na]+: 521,2721.CơngthứcphântửC26H42O9,M = 498 3.2.3 Hợpchất3:7β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicβ,17β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicDihydroxy-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicent-Trihydroxy-ent-kauran-19-oickaur-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic15-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicen-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic19-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicoicacid19-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicO-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicβ-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic D-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic glucopyranosideester(mới) Chấtbộtvơđịnhhình,màutrắng 25 Độquaycực :– D 38,5(c0,1,MeOH).Nhiệtđộ nóngchảy:280-281oC H-NMR(500MHz,CD 3OD):δ H1,03(1H,dd,J=3,5Hz,13,5Hz,H a1),1,87(1H,d,J=13,5Hz,H b-1),1,44(1H,dt,J=5,0Hz,10,0Hz,H a-2),1,96(1H,m, Hb-2),1,12(1H,dd,J=4,0Hz,13,5Hz,H a-3),2,22(1H,m,H b-3),1,78(1H,m, H-5),1,96(1H,m,Ha-6),2,23(1H,m,Hb-6),3,59(1H,brs,H-7),1,39(1H,d,J= 7,5Hz,H - ) , 1,58(1H,m,H a-11),1,64(1H,m,H b-11),1,52(2H,m,H-12),2,57 (1H,m,H-13),1,42(1H,dd,J=7,5Hz,10,5Hz,Ha-14),2,06(1H,d,J=10,5Hz, Hb-14),5,81(1H,s,H-15),4,13(2H,d,J=1,0Hz,H-17),1,22 (3H,s,H-18),1,02 (3H,s,H-20),5,42(1H,d,J=7,5Hz,H-1′),3,38 (1H, m, H-2′),3,42 (1H, m, H-3′), 3,40(1H,m,H-4′),3,39(1H,H-5′),3,71(1H,dd,J=4,0Hz,12,0Hz,Ha-6′),3,85(1H,dd,J= 2,0Hz,12,0Hz,Hb-6′) 13 C-NMR(125MHz, CD3OD): δC41,72(C-1),20,17 (C-2),39,10 (C-3),44,71 (C4),48,30(C-5),29,28(C-6),75,62(C-7),54,25(C-8),43,56(C-9), 40,88(C-10), 19,65(C-11),26,33(C-12),42,19(C-13),43,51(C-14),132,13(C-15),148,11(C16),61,21(C-17),28,79(C-18),178,58(C-19),16,10(C-20),96,64(C-1′),74,06 (C-2′),78,70(C-3′),71,13(C-4′),78,69(C-5′)và62,41(C-6′) HR-ESI-MS:m/z519,2550[α]M+Na]+ Tính tốn lý thuyết [α]C26H40O9Na]+: 519,2565.CơngthứcphântửC26H40O9,M = 496 3.2.4 Hợpchất4:16α-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicHydro-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicent-Trihydroxy-ent-kauran-19-oickauran-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic17β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic,19-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicdioicacid17β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic,19-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicdi-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicO-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicβ-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic D-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic glucopyranosideester(mới) Chấtbột, màutrắng 25 Độquaycực :– D 40(c0,1,MeOH).Nhiệtđộ nóngchảy:191192oC H-NMR( 0 M H z , C D 3OD):δ H0 , ( H , m , H a-1),1 , 8 ( H , m , H b-1),1 , (1H,m,H a-2),1,69(1H,m,H b-2),1,11(1H,m,H a-3),1,21(1H,d,J=14,0Hz, Hb-3),1,15(1H,m,H-5),1,88(1H,m,Ha-6),2,00(1H,m,H b-6),1,57(1H,m,Ha7),1,96(1H,m,H b-7),1,08(1H,m,H - ) , 1,43(1H,m,H a-11),1,94(1H,m,H b11),1,47(1H,m, H a-12),1,71(1H, m,H b-12),2,55(1H,m,H-13),1,17(1H,m, Ha-14),2,16(1H,d,J=12,0Hz,Hb-14),1,59(1H,m,Ha-15),1,97 (1H,m,Hb-15), 3,06(1H,m,H-16),1,24(3H,s,H-18),0,97(3H,s,H-20),5,53(1H,d,J=8,0Hz,H1′),3 ,3 ( H , m , H - ′ ) , , ( 1H , m , H - ′ ) , ,4 ( H , m , H - ′ ) , , ( H , H- 5′ ), 3,71(1H, dd,J=2,0 Hz,11,5Hz,H a-6′), 3,84(1H, d,11,5Hz, Hb-6′) 13 C-NMR(125MHz, CD3OD): δC41,44(C-1),19,15 (C-2),39,04 (C-3),45,11 (C4),58,61(C-5),23,19(C-6),42,91(C-7),45,62(C-8),57,59(C-9), 40,83(C-10), 20,14( C - 1 ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C 15),46,62(C16),175,32(C-17),29,04(C-18),178,43(C-19),16,36(C-20),95,61(C-1′),74,04 (C-2′),78,68(C-3′),71,11(C-4′),78,68(C-5′)và62,40(C-6′),95,61(C-1′′),74,04 (C-2′′),78,68(C-3′′),71,11(C-4′′),78,68(C-5′′)và62,34(C-6′′) HR-ESI-MS:m/z681,3095 Tínhtốnlýthuyếtchocơngthức[α]C32H50O14Na]+:681,3093.Cơngthức phântửC32H50O14,M= 658 3.2.5 Hợpchất5:PaniculosideIV Chấtbột, màutrắng 31 Độquaycực :+56(c0,1,MeOH)Nhiệ D tđộ nóngchảy: 192-193oC H-NMR( 0 M H z , C D 3OD):δ H0 , ( H , m , H a-1),1 , 8 ( H , m , H b-1),1 , (2H,m ,H- 2), 1, 12 (1H,m , H a-3),2 ,2 1( 1H , m , H b-3),1,10 ( H , dd,J =2, 0H z, 12,0Hz,H - ) , 1,87(1H,m,H a-6),2,01(1H,m,H b-6),1,52(1H,m, H a-7),1,68 (1H,m,H b-7),1,03(1H,m,H-9),1,42(1H,m,H a-11),1,97(1H,m,H b-11),1,50 (1H,m,H a-12),1,61(1H,m,H b-12),2,01(1H,brs,H-13),1,72(1H,m,H a-14), 2,02(1H,m,H b-14),1,42(1H,m,H a-15),1,58(1H,m,H b-15),3,62(1H,m,H a17),3,71(1H,m,Hb-17), 1,23(3H,s,H-18),0,99(3H,s,H-20),5,43(1H,d,J=8,0 Hz,H-1′),3,40(1H,m,H-2′),3,42(1H,m,H-3′),3,90(1H,m,H-4′),3,43(1H,H5′),3,71(1H,dd,J=6,0Hz,11,5Hz,H a-6′),3,85(1H,dd,J=2,5Hz,11,5Hz,Hb-6′) 13 C-NMR(125MHz, CD3OD): δC41,80(C-1), 19,62(C-2),39,05 (C-3),45,10 (C4),58,53(C-5),23,16(C-6),43,32(C-7),45,77(C-8),57,32(C-9), 40,88(C-10), 20,10( C - 1 ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C - ) , 3, 69 ( C 15),82,99(C16),66,87(C-17),29,02(C-18),178,38(C-19),16,35(C-20),95,60(C-1′),74,03 (C-2′),78,67(C-3′),71,11(C-4′),78,67(C-5′)và62,41(C-6′) CôngthứcphântửC26H42O9, M =498 3.2.6 Hợpchất6:16α,17β,16α,17-Trihydroxy-ent-kauran-19-oic-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicDihydroxy-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicent-Trihydroxy-ent-kauran-19-oickaurane Tinhthể hìnhkim, khơngmàu 31 Độquaycực :- D 25(c0,1,CHCl3)Nhiệtđộ nóngchảy:153-154oC H-NMR(500MHz,CDCl 3):δ H0,77( H , dd,J=2 , Hz, 12,0Hz,H5),1,12 (1H,dt,J=4 , Hz,14,0 Hz,,H-9), 1,59(2H,brd,H-14),1,43 (2H, m,H15), 3,65(1H,d,J=11,0Hz,H a-17),3,77(1H,d,J=11,0Hz,H b-17),0,84(3H,s,H18),0,80(3H, s,H-18) và1,01 (3H, s,H-18) 13 C-NMR(125MHz,CDCl 3):δC42,02(C-1),18,28(C-2),42,06(C-3),33,26(C4),56,17(C-5),20,45(C-6),37,31(C-7),44,75(C-8),56,72(C-9), 39,38(C-10), 18,59( C - 1 ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , 3 ( C - ) , 53 ,3 ( C 15),81,89(C16),66,38(C-17),33,56(C-18),21,55(C-19)và17,72(C-20) H-10),1,18(3H,s,H-11),1,41(3H,s,H-12),1,42(3H,s,H-13),4,46(1H,d,J= 7,5Hz , H-1′ ), 3, 18 (1 H, dd,J= 7,5 H z , 9,0 H z, H- 2′ ), 3,36 ( 2H ,m , H-3′ ,H- 4′ ), 3,40(1H,m,H-5′),3,71(1H,dd,J=5,0Hz,12,0Hz,H a-6′)và3,90(1H,d,J= 12,0Hz, Hb-6′) 13 C-NMR(125MHz, CD3OD): δC36,99(C-1), 48,11(C-2),72,57 (C-3),46,61 (C4),72,37(C-5),120,08(C-6),211,48(C-7),101,15(C-8),200,86(C-9),26,53(C10),32,24 (C - 11 ), 29,40 (C - 12 ), 30,79( C - 3) , 102,66 ( C - ′ ) , 75,07 (C 2′ ), 78,11 (C-3′),71,63(C-4′),77,87(C-5′)và62,72(C-6′) CôngthứcphântửC19H30O8, M =386 3.2.18 Hợpchất18:IcarisideD2 Chấtbột,màutrắng 31 Độquaycực :- D 52(c0,1,MeOH).Nhiệtđộ nóngchảy: 151-152oC H-NMR(500 MHz, CD3OD):δH7,16(2H, d,J=8,0Hz, H-2, H-6), 7,04 (2H,d,J =8,0Hz,H-3,H-5),2,78(2H,t,J=7,5Hz,H-7),3,73(2H, m,H-8),4,88(1H,d,J =7,5Hz,H-1′),3,46(3H,m,H-2′,H-3′,H-5′),3,43(1H,m,H-4′),3,72(1H,dd,J =5,0,12,0Hz, Ha-6′), 3,89 (1H, dd,J=2,0,12,0 Hz, Hb-6′), 13 C-NMR( M H z , C D 3OD):δ C1 , ( C - ) , , ( C 2),117,82(C-3), 157,64(C-4),117,82(C-5),130,85(C-6),39,41(C-7),64,36(C-8),102,56(C-1′), 74,95(C-2′),78,11(C-3′),71,42(C-4′),78,02(C-5′)và62,54(C-6′) CôngthứcphântửC14H20O7, M =300 3.2.19 Hợpchất19:IcarisideD26′-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicO-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicβ-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicD-Trihydroxy-ent-kauran-19-oicxylopyranoside Chấtbột, màutrắng 31 Độquaycực :- D 32(c0,05,MeOH).Nhiệtđộ nóngchảy:178-179oC H-NMR(500 MHz, CD3OD):δH7,08(2H, d,J=8,0Hz, H-2, H-6), 7,18 (2H,d,J =8,0Hz,H-3,H-5),2,79(2H,t,J=7,0Hz,H-7),3,74(2H,t,J=7,0Hz,H-8), 4,88(1H,d, J=7,5Hz, H-1′), 4,36(1H,d, J=7,5 Hz, H-1′′) 13 C-NMR( M H z , C D 3OD):δ C1 , 3 ( C - ) , , ( C 2),117,81(C-3), 157,45(C-4),39,36(C-7),64,32(C-8),102,32(C-1′),74,93`(C-2′),77,84(C-3′), 71,44(C-4′),77,34(C-5′),69,67(C-6′),105,23(C-1′′),74,88(C-2′′),77,56(C-3′′), 71,44(C-4′′),66,81(C-5′′) CôngthứcphântửC18H26O11, M =418