Tr-ờng Đại học Vinh khoa hóa học ===== ===== Vũ văn nam tách xác định cấu trúc scopoletin tõ c©y bï tru (uvaria grandiflora Roxb & Hornem) ë Hà Tĩnh khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành: Hóa hữu vinh - 2009 Tr-ờng Đại học Vinh khoa hóa học ===== ===== tách xác định cấu trúc scopoletin tõ c©y bï tru (uvaria grandiflora Roxb & Hornem) Hà Tĩnh khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành: Hóa hữu Giáo viên h-ớng dẫn: PGS.TS Lê Văn Hạc Sinh viên thực : Lớp : Vũ Văn Nam 46B - Hóa vinh - 2009 Lời cảm ơn Luận văn đ-ợc hoàn thành khoa Hoá Học Tr-ờng Đại học Vinh, Viện Hoá học Trung tâm Khoa học Tự Nhiên Công nghệ Quốc gia Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: - PGS TS Lê Văn Hạc đà giao đề tài tận tình h-ớng dẫn, giúp đỡ hoàn thành luận văn - NCS Lê Đức Giang Khoa hoá học Tr-ờng Đại học vinh đà đóng góp nhiều ý kiến quý giá - NCS Trần Đăng Thạch đà tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện trình làm luận văn - TS Ngun Qc B×nh - ViƯn Sinh häc, viƯn khoa học công nghệ đà giúp định danh nghiên cứu Cuối cùng, xin cảm ơn thầy cô, cán khoa Hoá, anh chị cao học hoá hữu 15 Tr-ờng Đại học Vinh, bạn, gia đình ng-ời thân đà tạo điều kiện giúp đỡ hoàn thành luận văn Vinh, ngày tháng năm 2009 Vũ Văn Nam C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Mục lục Trang Mở đầu 1 Lý chọn đề tài Nhiệm vụ nghiên cứu Đối t-ợng nghiên cứu Ch-ơng Tổng quan 1.1 Hä Na (Annonaceae) 1.1.1 Thùc vËt häc 1.1.2 øng dông mét sè chi Na 1.2 Chi Uvaria 1.2.1 Đặc điểm thực vật phân loại 1.2.2 Thành phần hoá học số loài chi Uvaria 1.2.3 Cấu trúc hợp chất th-ờng gặp chi Uvaria 11 1.3 Cây bù tru 28 1.3.1 Thùc vËt häc 28 1.3.2 Thành phÇn hoá học 29 Ch-ơng Ph-ơng pháp nghiên cứu 32 2.1 Ph-ơng pháp lấy mẫu 32 2.2 Ph-ơng pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập 32 hợp chất 2.3 Ph-ơng pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 32 Ch-ơng Thực ngiệm 33 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.1.Thiết bị ph-ơng pháp 33 3.1.1 Hoá chất 33 3.1.2 Các ph-ơng pháp sắc ký, kết tinh phân đoạn 33 3.2 Dụng cụ thiết bị 33 3.3 Nghiên cứu hợp chất từ bù tru 34 3.3.1 Phân lập hợp chất 34 Ch-ơng Kết qủa thảo luận 36 4.1 Nguyên liệu thực vật 36 4.2 Phân lập hợp chất A 36 4.3 Xác định cấu trúc hợp chất A 36 4.3.1 Phỉ khèi l-ỵng (ESI-MS) 37 4.3.2 Phỉ céng h-ëng từ hạt nhân 1H-NMR 39 4.3.3 Phổ cộng h-ởng từ hạt nhân 13C-NMR 42 4.3.4 Phổ DEPT 45 4.3.5 Phổ HMBC 48 4.3.6 Phæ HSQC 50 4.3.7 Phæ COSYGP 52 Kết luận 54 Tài liệu tham khảo 55 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Mở đầu Lý chọn ®Ị tµi N-íc ta n»m vïng nhiƯt ®íi, giã mùa nên hệ thực vật vô phong phú đa dạng Theo số liệu thống kê nhất, thảm thực vật Việt Nam có 12000 loài, có 3000 loài đ-ợc dùng làm thuốc gần 600 loài cho tinh dầu Vì vậy, việc bảo tồn giá trị truyền thống y học dân tộc phát triển theo h-ớng đại từ nguồn tài nguyên thực vật phong phú n-ớc ta việc làm cần thiết cấp bách Điều đà thu hút nhà khoa học sâu nghiên cứu lĩnh vực hợp chất thiên nhiên Ngoài ra, tr-ớc nguy rừng bị khai thác mức, bị xói mòn làm hồ chứa n-ớc cho nhà máy thuỷ điện, vấn đề cần phải đẩy mạnh để góp phần bảo vệ tính đa dạng, bảo vệ nguồn gen bảo vệ môi tr-ờng sinh thái n-ớc ta Việc nghiên cứu thành phần hoá học, hoạt tính sinh học cỏ n-ớc ta thập kỷ qua có nhiều hạn chế, ch-a đáp ứng đ-ợc yêu cầu điều tra tài nguyên thiên nhiên nh- đóng góp vào việc định h-ớng sử dụng, bảo tồn phát triển tài nguyên thực vật cách hợp lý Họ Na (Annonaceae) hä lín nhÊt cđa bé Méc lan (Magnoliales) Chi ®iển h×nh cđa hä Annona Mét sè lồi đ-ợc trồng lm cảnh, đặc biệt l Polythia longifoliapendula (lá bó sát thân) Các loi thân gỗ dïng làm cđi Mét sè lồi cã qđa lín, nhiỊu thịt ăn đ-ợc bao gồm loi chi Annona (na, na Nam Mỹ, mÃng cầu xiêm) hay chi Asimina (đu đủ Mỹ) chi Rollinia Bên cạnh đó, sè lồi nh- hồng lan (Cananga odorata) cßn chøa tinh dầu thơm v đ-ợc sử dụng sản xuất n-ớc hoa hay đồ gia vị Vỏ cây, v rễ số loi đ-ợc sử dụng y học dân gian chữa bệnh nhiễm trùng, bệnh ho, bệnh gan, bệnh vàng da gan, bệnh tiêu chảy Các nghiên cứu d-ợc lý đà tìm thấy khả kháng nấm, kh¸ng khuÈn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an đặc biệt l khả sử dụng hóa học trị liệu số thnh phần hóa học v vỏ Mặc dù họ Na (Annonaceae) có giá trị kinh tế cao nh- có hoạt tính sinh học quý đ-ợc sử dụng rộng rÃi dân gian, song việc nghiên cứu thành phần hoá học ch-a đ-ợc tiến hành nhiều Việt Nam Chính chọn đề tài: Tách xác định cấu trúc scopoletin từ bù tru (uvaria grandiflora Roxb & Hornem) ë Hµ TÜnh” tõ góp phần xác định thành phần hoá học hợp chất đ-ợc tách tìm thêm nguồn nguyên liệu cho ngành hoá d-ợc Nhiệm vụ nghiên cứu Trong luận văn này, có nhiệm vụ: - Chiết chọn lọc với dung môi thích hợp để thu đ-ợc hỗn hợp hợp chất từ thân c©y bï tru (uvaria grandiflora Roxb & Hornem) - Ph©n lập xác định cấu trúc hợp chất tách đ-ợc từ thân bù tru Đối t-ợng nghiên cứu Đối t-ợng nghiên cứu dịch chiết từ thân bï tru (uvaria grandiflora) thuéc hä Na (Annonaceae) ë Hµ TÜnh Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Ch-¬ng Tỉng quan 1.1 Hä Na (Annonaceae) 1.1.1 Thùc vËt häc Hä Na (Annonaceae) đ-ợc gọi l họ MÃng cầu, l họ thực vật có hoa bao gồm loại thân gỗ, bụi hay dây leo Đây l hä lín nhÊt cđa bé Méc lan (Magnoliales), víi kho¶ng 2.300 đến 2.500 loi 120130 chi Chi điển hình họ ny l Annona (na, mÃng cầu xiêm) Họ sinh tr-ëng chđ u ë vïng nhiƯt ®íi, cËn nhiƯt ®íi chØ cã mét Ýt lồi sinh sèng vùng ôn đới (Asimini ) Theo Leboeuf cộng sù cã kho¶ng 900 lồi ë Trung Nam Mü, 450 loi Châu Phi Madagascar, 950 loài Châu Australia [2] Các loi thuộc họ Na (Annonaceae) có đơn, mọc so le (mọc cách), có cuống v mép nhẵn Lá mọc thnh hai hng dọc theo thân Vết sẹo nơi đính th-ờng nhìn thấy rõ mạch dẫn Cnh th-ờng dạng ziczăc Chúng bẹ Hoa đối xứng xuyên tâm (hoa đều) v th-ờng l l-ỡng tính phần lớn loi hoa nối víi ë gèc hoa Hoa cã c¸nh cã mu nâu hay vng, nhiều nhị hoa mọc thnh hình xoắn ốc Hoa có nhiều nhụy hoa, nhụy có bầu nhụy dạng ngăn chứa hay nhiều tiểu noÃn Có hoa mọc trực tiếp cnh lớn thân Việt Nam, theo Nguyễn Tiến Bân đà xác định họ Na có 29 chi, 179 loi, phân loài 20 thứ [1, 2] 1.1.2 ứng dụng số chi Na Vỏ cây, rƠ cđa mét sè lồi c©y hä Na (Annonaceae) đ-ợc sử dụng y học dân gian dùng để ®iỊu trÞ bƯnh nhiƠm trïng, bƯnh ho, bƯnh vỊ gan, bệnh tiêu chảy bệnh ung th- Các nghiên cứu d-ợc lý đà tìm thấy khả kháng nấm, kháng khuẩn v đặc biệt l khả sử dụng hóa học trị liệu số thnh phần hóa học v vỏ Nghiên cứu b-ớc đầu Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an thuốc chữa ung th- Việt Nam có l-ợng lín c©y hä Na (Annonaceae) [1, 2] øng dơng mét sè chi Na ph©n bè phỉ biÕn ë ViƯt Nam [1, 2]: ã Chi Uvaria - Bù dẻ, bù quả: Đây chi lớn họ Na, Việt Nam có khoảng 16 loài - Kỳ h-ơng (Uvaria micrantha): vỏ làm thuốc bổ, giúp tiêu hoá - Bù dẻ tr-ờn (Uvaria microcarpa ): chứa hợp chất tonkinelin có hoạt tính chống ung th- bạch huyết, chín ăn đ-ợc ã Chi Polyalthia Quần đầu: ViƯt Nam cã 26 loµi - Chïm rơm (Polyalthia intermedia ): Lá dùng để chửa bệnh ho máu - Ngấn chày (Polyalthia thorelie ): vỏ đắng dùng chũa bệnh đau dày - Quần đầu vỏ xốp (Polyalthia suberosa): chín ăn đ-ợc - Quần đầu bảo chánh (Polyalthia evecta): cành chứa hợp chất có hoạt tính chống trùng sốt rét ã Chi Desmos Hoa dẻ: Việt Nam có loài - Hoa dẻ lông đen (Desmos cochinchinensis): Lá sắc uống tăng tiết sữa - Hoa dẻ thơm (Desmos chinensis): Hoà Bình(tên nối côi) dùng n-ớc sắc hoa chữa đẻ khó Rễ phơi khô sắc uống chữa lị - Than ả mai (Desmos pedunculosus): nấu n-ớc rửa mụn nhọt, chữa sốt ã Chi Fissistigma LÃnh công, mật h-ơng, cách th-: ë ViƯt Nam cã 23 loµi - Dµ dµ (Fissistigma polyanthoides): làm thuốc bổ, chữa tiêu chảy - Phát lÃnh công (Fissistigmapeteloti): dùng làm thuốc chữa sốt rét ã Chi Annona – Na, m·ng cÇu: ë ViƯt Nam cã loài - Na (Annona squamosa): chín ăn ngon Hạt độc làm thuốc diệt côn trùng Nhân dân quần đảo Antilles dùng t-ơi nghiền nát trộn với muối chữa khối u, ung nhọt - MÃng cầu xiêm (Annona muricata): chín ăn ngon Lá dùng làm gia vị có tác dụng trấn an nhẹ, trị cúm, ho, chữa lỵ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CÊu tróc hợp chất A đ-ợc khảo sát nhờ kết hợp ph-ơng pháp phổ nh- mục 2.3 Ch-ơng kết qủa thảo luận 4.1 Nguyên liệu thực vật Mẫu bù tru đ-ợc thu H-ơng Sơn, Hà Tĩnh vào tháng 11/2008 đ-ợc TS Nguyễn Quốc Bình - ViƯn Sinh häc – viƯn khoa häc c«ng nghƯ định danh 4.2 Phân lập hợp chất A Mẫu thân bù tru cắt nhỏ, phơi, sấy khô nhiệt 400C, sau đem nghiền nhỏ (8,0 kg), ngâm với metanol nhiệt độ phòng (20 ngày) Cất thu hồi dung môi thu đ-ợc 900 gam cao metanol đặc Chiết cao metanol lần l-ợt với n- hexan, etylaxetat, cloroform cất thu hồi dung môi máy quay cất chân không thu đ-ợc cao t-ơng ứng có khối l-ợng 300; 200; 60 gam Còn lại 300 gam cao metanol Cao etylaxetat đ-ợc phân tách sắc ký cột silicagen, với hệ dung môi rửa giải n – hexan: clorofom (n- C6H14: CHCl3) tû lÖ 100: ®Õn 0: 100 (400 ml) Sau ®ã ch¹y hƯ clorofom: metanol (CHCl3: CH3OH) tû lƯ 97: ®Õn 0: 100 (400 ml) Ta thu đ-ợc 185 phân đoạn Tại hệ dung môi CHCl3: CH3OH tỷ lệ 85: 15 thu đ-ợc chất rắn màu trắng, vàng Tinh chế hợp chất ph-ơng pháp kết tinh lại, kết tinh phân đoạn, rửa dung môi khác từ phân cực đến dung môi phân cực thu đ-ợc tinh thể chất rắn A (5 mg) màu trắng 4.3 Xác định cấu trúc hợp chất A Hợp chất A chất rắn tinh thể màu trắng Kết tinh d-ới dạng tinh thĨ h×nh kim n-hexan/axeton Tan tèt dung môi metanol (CH3OH) benzen (C6H6) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Phân tích sắc ký mỏng thÊy mét vÕt Rf = 0,54 (CH2Cl2/MeOH 95: 5), Ph¸t hnh quang xanh d-íi UV 254 nm NhiƯt ®é nãng chảy 202oC 4.3.1 Phổ khối l-ợng (ESI-MS) Phổ khối l-ợng phun mï electron (ESI-MS) negtive [M+H]+ cho pic 193 H×nh 2: Phỉ khèi l-ỵng phun mï electron (ESI-MS) negative Phỉ khèi l-ỵng phun mï electron (ESI-MS) positive cho pic [M-H]+ 191 Hình 3: Phổ khối l-ợng phun mù electron (ESI-MS) positive Từ hai phổ trên, suy phân tử l-ợng A 192, ứng với công thức phân tử C10H8O4 4.3.2 Phổ cộng h-ởng từ hạt nhân 1H-NMR Phổ cộng h-ởng từ hạt nhân 1H-NMR scopoletin cho tÝn hiƯu singlet, ®ã tÝn hiƯu singlet ë = 3,808 ppm t-ơng ứng với hiđro (H-11) nhóm OCH3 Các tín hiệu singlet vùng thơm ë = 7,16 ppm vµ = 6,75 ppm t-ơng ứng với hiđro (H-5, H-8) nhân thơm vị trí C-5 C-8 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C¸c tÝn hiƯu doublet ë = 7,85 ppm (J=9,5 Hz) vµ = 6,18 ppm (J=9,5 Hz) t-ơng ứng gán cho hiđro H-4 H-3 vị trí C-4 C-3 Tín hiệu pic ứng với H-12 đ-ợc gán cho hiđro nhóm OH ë vÞ trÝ C-7 Nh- vËy phỉ céng h-ëng tõ hạt nhân 1H-NMR scopoletin tìm thấy nguyên tử hiđro Hình Phổ 1H-NMR hợp chất A Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an H×nh Phỉ 1H-NMR cđa hỵp chÊt A (phỉ d·n) 4.3.3 Phỉ céng h-ëng tõ hạt nhân 13C-NMR Phổ cộng h-ởng từ hạt nhận 13C-NMR cho thÊy tÝn hiƯu 10 cacbon B¶ng 2: Sè liƯu phổ 13C- NMR hợp chất A Cacbon Độ dịch chun ho¸ häc (ppm) C- 160,6 C- 111,6 C- 144,3 C- 109,6 C- 145,2 C- 151,1 C- 102,7 C- 149,4 C- 10 110,5 C - 11 55,9 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình Phổ 13C-NMR hợp chất A Hình Phỉ 13C-NMR cđa hỵp chÊt A (phỉ d·n) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 4.3.4 Phæ DEPT Phæ DEPT hợp chất A có giá trị cụ thể nh- sau: - Phỉ DEPT 90 cho v¹ch chøng tá cã nhãm CH ë (ppm): 102,7 (C- 8); 109,6 (C- 5); 111,6 (C- 3); 144,3 (C- 4) - Từ phổ DEPT 135 (phần trên) có vạch, cho biÕt tỉng sè nhãm CH vµ CH3 lµ nhãm KÕt hỵp víi phỉ DEP 90, suy sè nhóm CH3 phân tử nhóm, = 55,9 ppm (C - 11) - Phæ DEPT 135 (phần d-ới) không xuất vạch nào, chứng tỏ phân tử nhóm CH2 Số nguyên tử C không liên kết với hyđro 5, t-ơng ứng với vạch (ppm): 110,5 (C- 10); 145,2 (C- 6); 149,4 (C- 9); 151,1 (C- 7); 160,6 (C- 2) Trong có C vòng bezen liên kết với O dạng C-O, ứng với pic (ppm): 145,2 (C- 6); 149,4 (C- 9); 151,1 (C- 7) C liên kết dạng C=O ứng với = 160,6 (ppm) Hình Phổ DEPT hợp chất A Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Tõ ®ã ta có số liệu đ-ợc trình bày bảng sau Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất A Vị trÝ Nhãm C C (ppm) C (ppm) H (ppm) ThÝ nghiƯm tµi liƯu ThÝ nghiƯm (DEPT) [17, 8] C=O 160,6 161,5 CH 111,6 112,5 6,18 (J=9,5 Hz) CH 144,3 144,0 7,85 (J=9,5 Hz) CH 109,6 109,7 7,16 C 145,2 146,3 C 151,1 153,1 CH 102,7 104,2 C 149,4 149,7 10 C 110,5 111,1 11 OCH3 55,9 56,3 VËy hỵp chất A có công thức phân tử là: C10H8O4 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 6,76 3,80 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 4.3.5 Phæ HMBC Phổ HMBC cho thấy t-ơng tác xa C-H Cơ thĨ nh- sau: C8-H4, C8-H5, C5-H4, C10-H8, C10-H3, C4-H5, C6-H8, C6-H11, C9-H4, C9-H5, C2-H4, C7-H5, C2-H3 H×nh Phỉ HMBC hợp chất A Hình 10 Phổ HMBC hỵp chÊt A (phỉ d·n) 4.3.6 Phỉ HSQC Phỉ HSQC thể t-ơng tác gần C-H, cụ thể nh- sau: C11H11, C8-H8, C5-H5, C3-H3, C4-H4 H×nh 11 Phỉ HSQC hợp chất A Hình 12 Phổ HSQC hỵp chÊt A (phỉ d·n) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 4.3.7 Phổ COSYGP Phổ COSYGP cho biết t-ơng tác H-H: Có t-ơng tác đối xứng nhau: H4-H3, H3-H4 Hình 13 Phổ COSYGP hợp chất A Kết hợp số liệu phổ khối, phổ 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC COSY so sánh với tài liệu [17,8,3], cho thấy cấu trúc chất A scopoletin, tên IUPAC 7-Hydroxy-6-methoxycoumarin Có công thức cấu tạo là: H3CO HO 10 O O Scopoletin Scopoletin tinh thể hình kim màu trắng (trong metanol), điểm nóng chảy 203 204oC; TLC: Rf = 0,54 (CH2Cl2/MeOH 95:5); UV (EtOH) λmax (logε) = 227; 255; 259; 298; 345 nm; IR (KBr) νmax: 3285 (OH); 1703 (C=O); 1561 (aromat); 1506; 1291; 1143; 858 cm-1[3] Đây hợp chất thuộc nhóm chất coumarin có giá trị chữa bệnh, có tác dụng tăng c-ờng chuyển hoá Lần đ-ợc phân lập từ bù tru (uvaria grandiflora), tìm thấy nhiều loại nh- Morinda Citrifolia (trái nhàu), Morinda longisima (nhó đông) [6], Kydia glabrescens [3], conyza Linifolia [10], Launaea Refedifolia [12], Ipomoea cairia [23], Salsola baryosma [21] Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Do giá trị to lớn hợp chất ng-ời, mà nhà khoa học đà tiến hành nghiên cứu tổng hợp hợp chất Năm 2007, nhóm nhà khoa học Nhật Bản đà tiến hành tổng hợp scopoletin scopolin từ p- coumarin acid [12] Năm 2007, tác giả Nguyễn Vũ Phong (Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh) Alain Hehn, Frédéric Bourgaud (Pháp) đà tổng hợp hợp chất cumarin (trong có scopoletin) theo đ-ờng sinh tổng hợp xuất phát từ biÕn ®ỉi axit cinnamic [7] Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Kết luận Nghiên cứu thành phần hoá học cành bù tru (uvaria grandiflora) đà thu đ-ợc số kết nh- sau: - Bằng ph-ơng pháp ngâm chiết với dung môi chọn lọc cất thu hồi dung môi thu đ-ợc cao t-ơng øng - Tõ cao etylaxetat b»ng viƯc sư dơng c¸c ph-ơng pháp sắc ký silicagel kết tinh phân đoạn thu đ-ợc chất A - Sử dụng ph-ơng pháp phổ đại: phổ khối l-ợng phun mù electron (ESI-MS), phổ cộng h-ởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC COSYGP xác địmh đ-ợc hợp chất A scopoletin, tên IUPAC 7-Hydroxy-6-methoxycoumarin Có công thức cấu tạo lµ: H3CO 10 HO O O Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Tài liệu tham khảo Tiếng Việt Nguyễn Tiến Bân (Chủ biên) (2003) Danh lục loài thực vật Việt Nam Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Ngun TiÕn B©n (2000) Hä Na (Annonaceae), Thùc vËt chÝ Việt Nam, Flora of Vietnam Nhà xuất Khoa học vµ Kü tht, Hµ Néi Ngun Qut ChiÕn, Ngun Văn Hùng, Trần Văn Sung (2004) Nghiên cứu thành phần hoá học Kydia glabrescens Tạp chí hoá học, T.42(1), Tr.71-75 Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985) Ph-ơng pháp nghiên cứu hoá học thuốc Nhà xuất Y học, Hà Nội Nguyễn Hữu Đĩnh, Trần Thị Đà (1999) ứng dụng số ph-ơng pháp phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử Nhà xuất Giáo Dục Phạm Minh H-ng, Nguyễn Duy Thuần, Đỗ Trung Đàm (2005) Phân lập định dạng hợp chất Scopoletin rễ nhó đông (Morinda longisima Y.Z Ruan, Rubiaceae) Tạp chÝ ho¸ häc, sè 2-2005 Ngun Vị Phong, Alain Hehn, Frédéric Bourgaud (2007) Xác định số gene tham gia đ-ờng sinh tổng hợp hợp chất coumarin Arabidopsis thaliana ph-ơng pháp chọn lọc chuyển hoá Tạp chí KHKT Nông Lâm nghiệp, số Lê Văn Thành, Hoàng Văn Lựu, Trần Đình Thắng (2004) Tách xác định cấu trúc scopoletin từ cành trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) Nghệ An, Tạp chí Khoa học, Đại học Vinh, Tập XXXIII-số 14, 51-54 Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng (1985) Các ph-ơng pháp sắc ký Nhà xuất Khoa häc vµ kü thuËt Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TiÕng Anh 10 Amani S.Awaad (2004) Coumarin of Conyza Linifolia (Will) Takhcom and their anticoagulant activity Aromantic and Medinal Plant Dept, Desert Reaseach Center, Egypt 11 Ankisetty Sridevi; Ankisetty Sridevi; ElSohly Hala N; Li XingCong; Khan Shabana I; Tekwani Babu L; Smillie Troy; Walker Larry (2006).Aromatic Constituents of Uvaria grandiflora J Nat Prod., 69 (4), pp 692–694 12 Ashraf A El-Bassuony , N.M Abdel-Hamid (2006) Antibacterial coumarin isolated from Launaea Refedifolia Beni Suef University (Egypt) 13 An Liu, Zhong Mei Zou, Li Zhen Xu, Shi Lin Yang (2003) A New Cyclohexene Oxide from Uvaria tonkinensis var subglabra Chinese Chemical Letters Vol 14, No 11, pp 1144-1145 14 Bibliography J.org.Chem.282-289 15 El-Sohly, Lasswell, Hufford (1979) A new C- benzylated flavanones from Uvaria Chamae J.org.Chem 41, 1297-1298 16 Hai Li Zhang, Ruo Yun Chen (2001) A New Flavone from the Roots of Uvaria macrophylla Chinese Chemical Letters Vol 12, No 9, pp 791 – 792 17 Hiratake Jun, Mizutani Masaharu, Shinmizu Bun-ichi (2007) Biosynthetic pathway of scopoletin in Arabidopsis thaliana Icranual report 18 Hufford vµ Oguntimein (1981) New flavonoid and coumarin derivatives from Uvaria afzelii J.org.Chem 46, 3073-3078 19 Hufford, C.D.; Lasswell, W.L (1976) Uvaretin and isouvaretin Two novel cytotoxic C-benzylflavonones from Uvaria Chame J.org.Chem 46, 1297-1298 20 H.Wei, W Peng, Y Mao, B Liu, S Li Studies in chemical constituents in the fruit of canarium album Raeushch,vol,421-423 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 21 Maria Wolbis, Slawomira Now Ak and Agnieszka Kicel (2007) Polyphenolic compounds in Scopolia caucasica Kolesn ex Kreyer Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug Research, Vol 64 No pp 241 – 24 22 Momoyo Ichimaru, Noriyoshi Nakatani, Tomoko Takahashi, Yumi Nishiyama (2004) Cytotoxic C-Benzylated Dihydrochalcones from Uvaria acuminata Chem Pharm Bull 52(1) 138—141 23 .Olga O.de.A Lima and Raimundo Braz (1996) dibenzylbutyrolactone lignans and coumarin from Ipomoea cairica Chem Soc.Bazil Vol.8.No.3.235-238 24 Zhou Guang-Xiong, Chen Ruo-Yun, Zhang Yan-Jun, Yu De-Quan Two (2000) New Bis-tetrahydrofuran Ring Annonaceous Acetogenins from the Roots of Uvaria calamistrata Chinese Chemical Letters Vol 11, No 6, pp 543-544 25 Qiong Ming Xu, Zhong Mei Zou , Li Zhen Xu, Shi Lin Yang Two polyoxygenated cyclohexenes from Uvaria kweichowensis Chinese Chemical Letters Vol 13, No 9, pp 977 – 978 26 Si Wang, Pei Cheng Zhang, Ruo Yun Chen, Ying Hong Wang, Wen Yi He, De Quan Yu (2002) A Novel Dihydroflavone from the Roots of Uvaria Macrophylla Chinese Chemical Letters Vol 13, No 9, pp 857 – 858 27 Xi-Ping Pan, Ruo-Yun Chen vµ De-Quan Yu (1998) Polyoxygenated cyclohexenes from Uvaria grandiflora Union Medical College, Beijing 100050, People's Republic of China 28 Yong-Hong Liao, Li-Zhen Xu, Shi-Lin Yang, Jie Dai, Yong-Su Zhen, Min Zhu, Nan-Jun Sun Three cyclohexene oxides from Uvaria grandiflora Biochemical Systematics and Ecology, Volume 35,Issue page 45-47 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn