Nghiên cứu xác định hàm lượng chất cấm dexamethason acetat trong mỹ thẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH HÀN CHÍ TÚ NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CHẤT CẤM DEXAMETHASON ACETAT TRONG MỸ PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGHỆ AN - 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH HÀN CHÍ TÚ NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CHẤT CẤM DEXAMETHASON ACETAT TRONG MỸ PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60.44.01.18 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS TS NGUYỄN KHẮC NGHĨA NGHỆ AN - 2014 i LỜI CẢM ƠN Luận văn hồn thành phịng thí nghiệm chun đề mơn Hóa phân tích - Khoa Hóa - Trường Đại học Vinh Trung tâm Kiểm nghiệm Dược phẩm - Mỹ phẩm Nghệ An Để hoàn thành luận văn này, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến: - PGS.TS Nguyễn Khắc Nghĩa giao đề tài, tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu hoàn thành luận văn - TS Nguyễn Trung Dũng TS Mai Thị Thanh Huyền đóng góp nhiều ý kiến q báu để hồn thiện luận văn - Phịng đào tạo Sau đại học, khoa Hóa học thầy giáo, cán phịng thí nghiệm khoa Hóa trường Đại học Vinh, cán kỹ thuật viên thuộc Trung tâm kiểm nghiệm Dược phẩm - Mỹ phẩm Nghệ An giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cung cấp hóa chất, thiết bị dung cụ dùng cho đề tài Xin cảm ơn tất người thân gia đình bạn bè động viên, giúp đỡ, tạo điều kiện cho tơi thực hồn thành luận văn Nghệ An, tháng 10 năm 2014 Người thực Hàn Chí Tú ii MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ CÁI VIẾT TẮT vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC SƠ ĐỒ x MỞ ĐẦU I Lý chọn đề tài II Bố cục luận văn CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu mỹ phẩm 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Phân loại mỹ phẩm 1.1.3 Thành phần mỹ phẩm 1.1.4 Tác dụng mỹ phẩm 1.1.5 Sự phát triển nấm mốc, vi khuẩn mỹ phẩm 1.1.6 Các thành phần độc hại cho da có mỹ phẩm 1.2 Giới thiệu đối tượng nghiên cứu 1.2.1 Kem rửa mặt ngăn ngừa mụn 1.2.2 Sữa rửa mặt nhờn da 1.2.3 Sữa tắm LUX 1.2.4 Kem dưỡng da - Lành mụn 10 1.2.5 Kem dưỡng da 11 1.3 Chất cấm dexamethason acetat 12 1.3.1 Cơng thức hóa học 12 1.3.2 Tác dụng dược tính dexamethason 13 1.3.3 Các đặc tính lâm sàng 14 iii 1.4 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC 16 1.4.1 Nguyên lý 16 1.4.2 Phân loại 17 1.4.3 Pha tĩnh sắc k pha đảo 18 1.4.4 Pha động sắc k pha đảo 21 1.5 Các đại lượng đặc trưng sắc k đồ 24 1.5.1 Thời gian lưu: Retenion time (Rt) 24 1.5.2 Hệ số dung lượng K’ 25 1.5.3 Độ chọn lọc (α) độ phân giải (Rs) 25 1.5.4 Số đĩa l thuyết N 26 1.5.5 Hệ số bất đối xứng T 27 1.6 Hệ thống thiết bị HPLC 27 1.6.1 Bình đựng dung môi 28 1.6.2 Bộ khử khí degasse 28 1.6.3 Bơm (pump) 29 1.6.4 Bộ phận tiêm mẫu (injection) 29 1.6.5 Cột sắc ký 29 1.6.6 Đầu dò (detector) 30 1.6.7 Bộ phận ghi tín hiệu 31 1.6.8 In kết 31 1.7 Các phương pháp định lượng 31 1.7.1 Phương pháp đường chuẩn 31 1.7.2 Phương pháp mẫu chuẩn 31 1.7.3 Phương pháp thêm 32 1.7.4 Phương pháp thêm chuẩn 32 1.8 Đánh giá phương pháp phân tích 32 1.8.1 Khảo sát giới hạn phát (LOD) (LOQ) phương pháp 32 1.8.2 Đánh giá sai số độ lặp lại phép đo 33 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an iv CHƯƠNG II PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 34 2.1 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 34 2.1.1 Thiết bị 34 2.1.2 Dụng cụ 35 2.1.3 Hóa chất 35 2.2 Phương pháp lấy mẫu, bảo quản mẫu xử lý mẫu 35 2.2.1 Lấy mẫu 35 2.2.2 Các sơ đồ xử lý mẫu 36 2.3 Phương pháp phân tích 38 2.3.1 Khảo sát điều kiện tối ưu 38 2.3.2 Xây dựng đường chuẩn 38 2.3.3 Khảo sát giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) phương pháp 38 2.4 Xử lý số liệu thực nghiệm 39 CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Khảo sát tìm điều kiện tối ưu phương pháp phân tích 41 3.1.1 Khảo sát vạch phổ hấp thụ 41 3.1.2 Khảo sát tỉ lệ pha động 42 3.1.3 Khảo sát tốc độ dòng 43 3.1.4 Khảo sát xác định khoảng nồng độ tuyến tính 44 3.2 Xây dựng đường chuẩn, xác định giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) dexamethason acetat 45 3.2.1 Giới hạn phát (LOD) 47 3.2.2 Giới hạn định lượng (LOQ) 48 3.3 Đánh giá sai số độ lặp lại phép đo 48 3.4 Tổng kết điều kiện áp dụng phân tích dexamethason acetat mẫu phân tích 49 3.5 Áp dụng kết nghiên cứu để phân tích số mẫu mỹ phẩm 50 3.5.1 Xác định hàm lượng dexamethason acetat số mẫu mỹ phẩm 50 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an v 3.5.2 Xác định độ lặp lại hàm lượng dexamethason acetat có mẫu mỹ phẩm 51 3.6 Các sắc đồ phép đo HPLC 53 3.6.1 Sắc đồ mẫu trắng 53 3.6.2 Các sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ khác 53 3.6.3 Sắc đồ mẫu mỹ phẩm 57 KẾT LUẬN 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ CÁI VIẾT TẮT HPLC : Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) LOD : Giới hạn phát (Limit of detection) LOQ : Giới hạn định lượng (Limit of quantitation) MeOH : Methanol ACN : Acetonitril HPLC-MS : Sắc ký lỏng hiệu cao ghép nối đầu dò khối phổ SKPB : Sắc ký phân bố SKPT : Sắc k pha thường SKPĐ : Sắc k pha đảo TLC : Sắc ký lớp mỏng (Thin Layer Chromatography) KPH : Không phát Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an vii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1.1 Nang lơng bị bít tắc, viêm nhiễm sử dụng mỹ phẩm Hình 1.2 Kem rửa mặt ngăn ngừa mụn Acnes Hình 1.3 Sữa rửa mặt Z Hình 1.4 Sữa tắm LUX Hình 1.5 Kem dưỡng da - Lành mụn B2 10 Hình 1.6 Kem dưỡng da VITAL CARE VITAMIN E CREME 11 Hình 1.7 Hình ảnh cấu trúc khơng gian dexamethason acetat 12 Hình 1.8 Bề mặt silica thủy phân 18 Hình 1.9 Tạo nhánh bề mặt silica 19 Hình 1.10 Cấu trúc cột ODS 19 Hình 1.11 Cấu trúc cột LC-DB 20 Hình 1.12 Cấu trúc cột có gốc isopropyl 20 Hình 1.13 Độ nhớt hỗn hợp nước dung môi hữu 25oC 23 Hình 1.14 Sơ đồ hệ thống HPLC 27 Hình 1.15 Đồ thị kỹ thuật đường chuẩn thêm chuẩn 32 Hình 2.1 Hệ thống sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Agilent 1100 34 Hình 3.1 Đồ thị khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính dexamethason axetat 45 Hình 3.2 Đồ thị đường chuẩn dexamethason acetat 46 Hình 3.3 Sắc đồ mẫu trắng 53 Hình 3.4 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 0,5 ppm 53 Hình 3.5 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 1,0 ppm 54 Hình 3.6 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 2,0 ppm 54 Hình 3.7 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 3,0 ppm 55 Hình 3.8 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 5,0 ppm 55 Hình 3.9 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 6,0 ppm 56 Hình 3.10 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 6,5 ppm 56 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an viii Hình 3.11 Sắc đồ mẫu MP-KR05 - Kem rửa mặt ngăn ngừa mụn Acnes 57 Hình 3.12 Sắc đồ mẫu MP-SR01 - Sữa rửa mặt Z 57 Hình 3.13 Sắc đồ mẫu MP-ST04 - Sữa tắm LUX 58 Hình 3.14 Sắc đồ mẫu MP DK 02 - Kem dưỡng da - Lành mụn B2 58 Hình 3.15 Sắc đồ mẫu MP DK 03 - Kem dưỡng da vital care viitamin E creme 59 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 49 Nhận xét: Từ kết bảng 3.6 ta thấy rằng: Các giá trị thu có độ lặp tương đối tốt So sánh t với t(,k) = 2,45 (k=6; α= 0,95) cho thấy t < t,k phương pháp khơng mắc sai số hệ thống Khoảng tin cậy giá trị phân tích phép đo hồn tồn đánh giá thông qua giá trị x  tương ứng 3.4 Tổng kết điều kiện áp dụng phân tích dexamethason acetat mẫu phân tích Từ kết nghiên cứu trên, tổng hợp điều kiện phù hợp để đo dexamethason acetat phương pháp HPLC thể bảng 3.7 Bảng 3.7 Các điều kiện đo dexamethason acetat phương pháp HPLC Chất phân tích yếu tố Tỉ lệ pha động Dexamethason acetat Acetonitril : Nước (34 : 66) Điều Cột sắc ký Ct C18 (250 ì 4,6 nm, àm I.D) Dedecter 240 nm Thể tích tiêm mẫu 20 µl Tốc độ dòng 1,2 ml/phút kiện sắc ký Giới hạn phát LOD (ppm) 0,29 Giới hạn định lượng LOQ (ppm) 0,97 Khoảng nồng độ tuyến tính (ppm) 0,5 - 6,5 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 50 3.5 Áp dụng kết nghiên cứu để phân tích số mẫu mỹ phẩm 3.5.1 Xác định hàm lƣợng dexamethason acetat số mẫu mỹ phẩm Chúng tơi tiến hành phân tích mẫu mỹ phẩm để xác định mẫu chứa chất cấm dexamethason acetat theo quy trình xây dựng dựa vào đường chuẩn để xác định hàm lượng dexamethason acetat có mỹ phẩm Cân xác 1,000 g mẫu vào cốc thủy tinh 100 ml, thêm ml ethanol tuyệt đối, lắc siêu âm 30 phút nhiệt độ 700C làm lạnh môi trường nước đá (t< 50C), ly tâm phút Lọc, chiết Tiến hành đun cách thủy đến thu cắn Hoàn tan cắn với 10 ml methanol, chuyển vào bình định mức 25 ml, tráng cốc thêm lần, lần ml methanol, thêm methanol vừa đủ Lọc qua màng lọc G4 [22] Lượng cân mẫu mỹ phẩm nêu bảng 3.8 Bảng Lượng cân mẫu mỹ phẩm TT Ký hiệu mẫu Lƣợng mẫu (g) Thể tích pha lỗng (ml) KR05 1,0012 25 SR01 1,0017 25 ST04 1,0019 25 KD02 1,0011 25 KD03 1,0016 25 Tiến hành phân tích mẫu mỹ phẩm theo phương pháp nghiên cứu điều kiện tối ưu thiết bị đo Dựa vào phương trình đường chuẩn thiết lập xác định nồng độ dexamethason acetat có lượng mẫu phân tích Xác định hàm lượng dexamethason acetat có mẫu mỹ phẩm theo công thức: C mp = C tpm v t mt Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 51 Trong đó: - Cmp (ppm): Hàm lượng dexamethason acetat có mẫu mỹ phẩm - Ctmp (ppm): Hàm lượng dexamethason acetat có lượng mẫu mỹ phẩm đem phân tích - vt (ml): Thể tích pha lỗng mẫu - mt(g): Lượng mẫu mỹ phẩm phân tích Kết phân tích trình bày bảng 3.9 Bảng Kết đo mẫu phân tích Hàm lƣợng TT Ký hiệu Tổng diện mẫu tích píc Hàm lƣợng dexamethason acetat dexamethason acetat có mẫu phân có mẫu mỹ tích phẩm (Cxdmp -ppm) (Cmp-ppm) KR05 KPH KPH SR01 KPH KPH ST04 KPH KPH KD02 0,604 15,083 KD03 KPH KPH 21263 Nhận xét: Kết thu bảng 3.9 cho thấy, 05 mẫu mỹ phẩm nghiên cứu có 01 mẫu mỹ phẩm (KD02) phát chất cấm dexamethason acetate với hàm lượng 15.083 ppm 3.5.2 Xác định độ lặp lại hàm lƣợng dexamethason acetat có mẫu mỹ phẩm Dựa vào kết khảo sát sơ bộ, xác định hàm lượng dexamethason acetate có mẫu mỹ phẩm cách tiến hành phân Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 52 tích lần lặp lại mẫu KD2 Theo quy trình khảo sát dựa vào phương trình đường chuẩn xây dựng thu kết trình bày bảng 3.10 Bảng 3.10 Kết phân tích dexamethason acetate có mẫu KD2 TT Lƣợng cân Hàm lƣợng Hàm lƣợng Tổng examethason Dexamethason diện tích acetat mẫu acetat có píc phân tích mẫu mỹ phẩm (Cxdmp -ppm) (Cmp-ppm) 1,0013 21233 0.6033 15.06 1,0016 21247 0.6038 15.07 1,0011 21296 0.6054 15.12 1,0003 21265 0.6044 15.10 1,0009 21213 0.6027 15.05 Xtb 15.08 SD 0.028 RSD% 0.185 Nhận xét: Kết thu bảng 3.10 thấy giá trị độ lệch chuẩn tương đối RSD < 5% chấp nhận Chúng tơi xác định mỹ phẩm (mẫu kí hiệu KD02) chứa chất cấm dexamethason acetate với hàm lượng 15,08 ppm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 53 3.6 Các sắc đồ củ phép đo HPLC 3.6.1 Sắc đồ mẫu trắng Hình 3.3 Sắc đồ mẫu trắng 3.6.2 Các sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ khác Hình 3.4 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 0,5 ppm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 54 Hình 3.5 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 1,0 ppm Hình 3.6 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 2,0 ppm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 55 Hình 3.7 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 3,0 ppm Hình 3.8 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 5,0 ppm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 56 Hình 3.9 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 6,0 ppm Hình 3.10 Sắc đồ mẫu chuẩn dexamethason acetat có nồng độ 6,5 ppm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 57 3.6.3 Sắc đồ mẫu mỹ phẩm Hình 3.11 Sắc đồ mẫu MP-KR05 - Kem rửa mặt ngăn ngừa mụn Acnes Hình 3.12 Sắc đồ mẫu MP-SR01 - Sữa rửa mặt Z Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 58 Hình 3.13 Sắc đồ mẫu MP-ST04 - Sữa tắm LUX Hình 3.14 Sắc đồ mẫu MP DK 02 - Kem dưỡng da - Lành mụn B2 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 59 Hình 3.15 Sắc đồ mẫu MP DK 03 - Kem dưỡng da vital care viitamin E creme Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 60 KẾT LUẬN Chúng giải nhiệm vụ đặt đề tài, vào kết nghiên cứu thu rút kết luận sau: Đã khảo sát tìm điều kiện tối ưu phương pháp phân tích Tìm điều kiện tối ưu cho phép xác định dexamethason acetat phương pháp HPLC + Vạch phổ detector 240 nm + Tỉ lệ pha động ACN: H2O = 34: 66 + Cột sắc ký: Cột C18 (250 x 4,6 mm, 5μm I.D.) + Thể tích tiêu chuẩn 20 μl tốc độ dòng 1,2 ml/phút Đã khảo sát xác định khoảng nồng độ tuyến tính Spic nồng độ dexamethason acetat 0,5 - 6,5 ppm Đã xây dựng phương trình đường chuẩn đầy đủ thể quan hệ Spic nồng độ chất dexamethason acetat Đánh giá LOD, LOQ cho thấy đủ tiêu chuẩn để xác định lượng vết chất dexamethason acetat với độ lặp lại tốt sai số cho phép Đã áp dụng kết nghiên cứu để xác định chất dexamethoxason acetat mẫu mỹ phẩm Nghiên cứu phát chất dexamethason acetat 01 mẫu mỹ phẩm (kí hiệu KD02) khơng tn theo Hiệp định hệ thống hòa hợp ASEAN quản lý mỹ phẩm Cịn mẫu khơng phát dexamethason acetat Chúng hy vọng nghiên cứu góp phần vào việc ứng dụng kỹ thuật HPLC để xác định dexamethason acetat đối tượng mỹ phẩm, nhằm phục phụ đắc lực cho ngành khoa học đặc biệt lĩnh vực mỹ phẩm bảo vệ sức khỏe người Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] ASEN (2003), Hiệp định hệ thống hòa hợp ASEAN quản lý mỹ phẩm, Bản dịch Cục quản l Dược, 2008 [2] ASEAN (2005), Determination of heavy metals (arsenic, cadmium, lead and mercury) in cosmetic products, 1- (phương pháp hịa hợp ASEAN có mã số ACM THA 05) [3] Trần Tử An (2006), M i tr ờng độc chất m i tr ờng, Trường Đại học Dược Hà Nội, tr 72-79, 138-141, 264-292, 295-297 [4] Trần Tử An (2007), Kiểm nghiệm ợc phẩm, Nhà xuất Y học, Hà Nội [5] Bộ Y tế (2002), D ợc điển Việt Nam (xuất lần thứ ba), Nhà xuất Y học, Hà Nội [6] Bộ Y tế (2006), Quyết định số 4/2006/QĐ-BYT, Bộ tr ởng Bộ Y tế việc triên khai, áp dụng h ớng dẫn thực hành nguyên tắc, tiêu chuẩn “thực hành tốt sản xuất mỹ phẩm” Hiệp hội nước Đông nam Á [7] Bộ Y tế, Cục quản l Dược (2011), h ng t 06/2011/ -BYT, phụ lục số 06-MP, 01-MP, Hà Nội [8] Bộ Y tế (2009), D ợc điển Việt Nam IV, phụ lục 5, Các kỹ thuật sắc ký [9] Vương Ngọc Chính (2005), H ng liệu mỹ phẩm, NXB Đại Học Quốc Gia TP.HCM [10] Nguyễn Xuân Dũng, Tử Vọng Nghị, Phạm Luân (1986), Các ph ng pháp tách - Sắc ký lỏng cao áp, Đại học tổng hợp Amsterdam Hà Nội [11] Nguyễn Thanh Hà, Phạm Khánh Phong Lan (2007), “Phân tích Arsen số chế phẩm em ỡng da quang phổ hấp thụ nguyên tử”, Tạp chí Kiểm nghiệm thuốc, tr 18-21 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 62 [12] Trần Đức Hậu, Nguyễn Đình Hiển, Thái Duy Thìn, Hình Kim Thoa, Nguyễn Văn Thục (2006), Hóa ợc t p 2, Bộ mơn hóa dược, Đại học Dược Hà Nội [13] Làm để có da khỏe đẹp, NXB Văn Hóa Thơng Tin [14] Nguyễn Thành Long (2006), Mỹ phẩm, Chuyên đề tự chọn, Đại học Dược Hà nội, tr.15-27 [15] Phạm Luân (1999), C sở lý thuyết phân tích sắc ký lỏng hiệu cao Đại học quốc gia Hà Nội, tr 106-105 [16] Makoto Takagi, Trần Thị Ngọc Lan (dịch) (2010), Các ph ng pháp phân tích hóa h c, Khoa Hóa, Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh, tr 184-194 [17] Thái Đại Quân (2013), Nghiên cứu xác định vitamin C thuốc, thực phẩm chức năng, hoa n ớc giải khát ph ng pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC, Luận văn Thạc sỹ Khoa hóa học, Trường Đại học Vinh, tr 23-24 [18] Hồ Viết Quý (2009), Các ph ng pháp phân tích c ng cụ hóa h c đại, NXB đại học Sư phạm, Hà Nội, tr 203-217 [19] Louis Hồ Tấn Tài (1999), Các sản phẩm tẩy rửa chăm sóc cá nhân, NXB, in công ty Liksin, TP.HCM [20] Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường, Trung tâm Thông tin (2003), Tuyển t p tiêu chuẩn Hóa mỹ phẩm [21] Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng cộng (1985), Các ph ng pháp sắc ký Nhà xuất khoa học kỹ thuật [22] Nguyễn Thị Xuyên, Hoàng Việt Dũng, Hoàng Mỹ Hạnh, Đào Văn Đôn, Nguyễn Thị Thanh Phương (2013), “Định l ợng đồng thời dexamethason acetat, betamethason, prednisolon triamcinolon mỹ phẩm sắc ký lỏng hiệu cao”, Tạp chí Y - Dược học Quân số - 2013 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn