Xác định hàm lượng vitamin c trong một số loại nấm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

664 TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA HÓA HỌC ===  === ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Đề tài: XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG VITAMIN C TRONG MỘT SỐ LOẠI NẤM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Giáo viên hƣớng dẫn: TH.S HOÀNG VĂN TRUNG Sinh viên thực : NGUYỄN THỊ HỒNG Lớp : 50K- Công nghệ thực phẩm Mssv : 0952043578 VINH, THÁNG 12/2013 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP- TỰ DO- HẠNH PHÚC - NHIỆM VỤ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Nguyễn Thị Hồng Số hiệu sinh viên: 0952043578 Khóa: 50 Ngành: Cơng nghệ hóa thực phẩm 1.Tên đề tài Nội dung nghiên cứu: Họ tên cán hƣớng dẫn: Ngày giao nhiệm vụ đồ án : Ngày tháng năm Ngày hoàn thành đồ án Ngày tháng năm Ngày tháng năm : Chủ nhiệm môn Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ, tên) (Ký, ghi rõ họ, tên) Sinh viên hoàn thành nộp đề tài tốt nghiệp trƣớc ngày tháng Ngƣời duyệt (ký, ghi rõ họ, tên) năm BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP - TỰ DO - HẠNH - PHÚC BẢN NHẬN XÉT ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Nguyễn Thị Hồng Khóa: 50 Số hiệu sinh viên: 0952043578 Ngành: Công nghệ thực Phẩm Cán hƣớng dẫn: Cán duyệt: Nội dung nghiên cứu, thiết kế: Nhận xét cán hƣớng dẫn: Ngày tháng năm Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ, tên) BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP - TỰ DO - HẠNH – PHÚC BẢN NHẬN XÉT ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Nguyễn Thị Hồng Số hiệu sinh viên: 0952043578 Khóa: Ngành:Cơng nghệ thực Phẩm 50 Cán hƣớng dẫn: Cán duyệt: Nội dung nghiên cứu, thiết kế: Nhận xét cán duyệt : Ngày tháng năm Cán duyệt (Ký, ghi rõ họ, tên) C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung LỜI CẢM ƠN Khóa luận đƣợc thực phịng thí nghiệm Trung tâm Kiểm định An toàn Thực phẩm Mơi trƣờng, Trƣờng Đại Học Vinh Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn đến thầy giáo Th.s Hoàng Văn Trung – Khoa Hóa, Trƣờng Đại Học Vinh giao đề tài, tận tình hƣớng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi suốt q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Trần Đình Thắng – Khoa Hóa, Trƣờng Đại Học Vinh hỗ trợ kinh phí tạo điều kiện tốt để hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn Th.s Chu Thị Thanh Lâm -Khoa Hóa, Trƣờng Đại Học Vinh tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi q trình làm thí nghiệm, hƣớng dẫn cách sử dụng máy HPLC đo mẫu Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy cơ, cán khoa Hóa, cán hƣớng dẫn phịng thí nghiệm phịng chuẩn bị, phịng Hóa thực phẩm, Trung tâm Phân tích - Chuyển giao Cơng nghệ thực phẩm Môi trƣờng, Trƣờng Đại Học Vinh tạo điều kiện cho đƣợc học tập nghiên cứu môi trƣờng học tập khoa học, giúp cho tơi có kiến thức vững vàng trƣớc bƣớc vào đời Cuối tơi xin tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới gia đình, bạn bè, ngƣời thân động viên giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Vinh, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực Nguyễn Thị Hồng SVTH: Nguyễn Thị Hồng i Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tƣợng nghiên cứu CHƢƠNG I: TỔNG QUAN I Tổng quan nấm 1.1 Giới thiệu giới nấm 1.2 Phân loại nấm 1.3 Tổng quan vitamin Nấm 1.3.2 Nấm dƣợc liệu 1.3.2.1 Nấm linh chi 1.3.2.2 Nấm hƣơng 1.3.2.3 Mộc nhĩ 1.3.2.4 Đông trùng hạ thảo 10 1.4.Tầm quan trọng Nấm 11 II Tổng quan vitamin 11 2.1 Khái niệm 11 2.2 Lịch sử vitamin 12 2.3.Vai trò đặc điểm chung 12 2.4 Nguồn vitamin 13 2.5 Các yếu tố ảnh hƣởng đến vitamin 13 2.6 Phân loại 13 2.7 Vitamin C 14 2.7.1 Cấu tạo hóa học 14 2.7.2 Tính chất 14 2.7.3 Vai trò vitamin C 15 SVTH: Nguyễn Thị Hồng ii Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung 2.7.4 Nguồn vitamin C 15 2.7.5 Nhu cầu 15 2.7.6 Rối loạn liên quan đến vitamin C 15 III.Phƣơng pháp HPLC 16 3.1 Đặc điểm 16 3.2 Nguyên tắc trình sắc ký cột 17 3.3.Phân loại sắc ký ứng dụng 18 3.4.Các đại lƣợng đặc trƣng sắc ký đồ 18 3.5 Hệ thống HPLC 21 3.5.1 Bình đựng dung môi 21 3.5.2 Bộ khử khí Degasse 22 3.5.3 Bơm (Pump) 22 3.5.4 Bộ phận tiêm mẫu (Injection) 22 3.5.5 Cột sắc ký 23 3.5.6 Đầu dò (Detector) 23 3.5.7 Bộ phận ghi tín hiệu 24 3.5.8.In kết 24 3.6 Chọn điều kiện sắc ký Error! Bookmark not defined 3.6.1 Lựa chon pha tĩnh Error! Bookmark not defined 3.6.2 Lựa chọn pha động Error! Bookmark not defined 3.7 Tiến hành sắc ký Error! Bookmark not defined 3.7.1 Chuẩn bị dụng cụ máy móc Error! Bookmark not defined 3.7.2 Chuẩn bị dung môi pha động Error! Bookmark not defined 3.7.3 Chuẩn bị mẫu đo HPLC Error! Bookmark not defined 3.7.4 Cách đo HPLC Error! Bookmark not defined CHƢƠNG II : THỰC NGHIỆM 25 2.1 Dụng cụ, thiết bị 25 2.2 Hóa chất, thuốc thử 25 2.3 Các bƣớc tiến hành 25 SVTH: Nguyễn Thị Hồng iii Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung 2.4 Khảo sát đánh giá phƣơng pháp 27 Chƣơng III : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 3.1 Xác định khoảng tuyến tính đƣờng chuẩn Vitamin C 28 3.2.Đánh giá phƣơng pháp 30 3.6 Xác định hiệu suất thu hồi mẫu nấm kim châm 34 3.2 Sắc đồ 36 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 4.1 Kết luận 43 4.2 Kiến nghị : 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 SVTH: Nguyễn Thị Hồng iv Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hồng Văn Trung DANH MỤC BẢNG, HÌNH Bảng 1.1: Thành phần nguyên tố vi lƣợng có Nấm ăn Bảng 3.1: Diện tích peak vitamin C tƣơng ứng với nồng độ chuẩn 31 Bảng 3.2 Giá trị LOD LOQ 32 Bảng 3.3 Kết phân tích hàm lƣợng vitamin C nấm 33 Bảng 3.4: Kết trung bình, độ lệch chuẩn, hệ số biến thiên mẫu nấm tƣơi 34 Bảng 5: Kết trung bình, độ lệch chuẩn, hệ số biến thiên mẫu nấm nuôi cấy 36 Bảng 3.6 Hiệu suất thu hồi mẫu nấm kim châm 37 HÌNH Hình1:Nấm linh chi trắng Hình 2: Nấm đơng Hình 3:Nấm kim châm Hình4: Nấm linh chi nâu Hình 5:Nấm bạch tuyết Hình 6:Nấm đùi gà Hình 7: Nấm TH04 Hình 8: Nấm 02 Hình9:Nấm 01 Hình 10: Nấm HKG406 Hình 11:Nấm lỗ ME Hình 1.1: Nấm linh chi đỏ(có màu đỏ) ……………………………………………………….14 Hình1.2: Nấm hắc chi (có màu đen)………………………………………………… Hình1.3: Nấm bạch chi (có màu trắng)……………………………….…………….……… 14 Hình1.4:Nấm hồng chi (có màu vàng)……………………… …………………….8 SVTH: Nguyễn Thị Hồng v Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hồng Văn Trung Hình 1.5:Nấm hƣơng Hình1 6: Mao mộc nhĩ (Vân nhĩ) Hình 1.7.Đơng trùng hạ thảo 10 Hình 3.1 Đƣờng chuẩn biểu thị mối quan hệ diện tích peak thu đƣợc 32 Hình 3.3 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 2ppm 38 Hình 3.2.Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 2ppm 38 Hình 3.3 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 5ppm 38 Hình 3.4 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 10ppm 39 Hình 3.5 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 20ppm 39 Hình 3.6 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 50ppm 40 Hình 3.7 Sắc đồ mẫu nấm linh chi trắng 40 Hình 3.8 Sắc đồ mẫu nấm bạch tuyết 41 Hình 3.9 Sắc đồ mẫu nấm linh chi nâu 41 Hình 3.10 Sắc đồ mẫu nấm đùi gà 42 Hình 3.11 Sắc đồ mẫu nấm kim châm không thêm chuẩn 42 Hình 3.12 Sắc đồ mẫu nấm kim châm thêm chuẩn 43 Hình 13 Sắc đồ mẫu nấm đơng 43 Hình 3.14 Sắc đồ mẫu nấm 01KH 44 Hình 3.15 Sắc đồ mẫu nấm TH04 44 Hình 3.16 Sắc đồ mẫu nấm lỗ 45 Hình 3.17 Sắc đồ mẫu nấm HKG406 45 Hình 3.18 Sắc đồ mẫu nấm 02 46 SVTH: Nguyễn Thị Hồng vi Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,032 = *100 = 0,795% xtb 40,227 - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm Bạch tuyết là: Xtb = n  x = 8,4492 n i 1 n Độ lệch chuẩn: s   (x i 1 i  xtb ) = 0,0318 n 1 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,00269 = *100 = 0,376% xtb 8,4492 - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm Linh chi trắng là: Xtb = n  x = 10,6564 n i 1 n Độ lệch chuẩn: s   ( xi  xtb ) i 1 = 0,0324 n 1 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,000324 = *100 = 0,304% xtb 10,6564 - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm Đông cô là: Xtb = n  x = 20,9025 n i 1 n Độ lệch chuẩn: s   ( xi  xtb ) i 1 n 1 = 0,067 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,000324 = *100 = 0,324% xtb 20,9025 Bảng Kết trung bình, độ lệch chuẩn, hệ số biến thiên mẫu nấm nuôi cấy Tên nấm Mẫu nấm02 Khối TT lƣợng Nồng độ 10 2,227 10 2,2273 10 2,2274 SVTH: Nguyễn Thị Hồng 32 Xtb S CV% 2,2274 0,29 1,3 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung Mẫu 10 3,3802 nấm 10 3,3807 HKG406 10 3,381 10 13,7776 10 13,777 10 13,7775 10 4,5396 10 4,5392 10 4,5393 Mẫu 10 10,6563 Nấm 10 10,6568 01KH 10 10,6562 Mẫu Nấm Lỗ Mẫu Nấm TH04 3,3809 0,052 1,53 13,7774 0,032 0,23 4,5393 0,022 0,48 30,2305 0,02 0,91 - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm 02 là: Xtb = n  x = 2,2274 n i 1 n Độ lệch chuẩn: s   ( xi  xtb ) i 1 = 0,29 n 1 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,00029 = *100 = 1,3% xtb 2,2274 - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm HKG 406 là: Xtb = n  x = 3,3809 n i 1 n Độ lệch chuẩn: s   (x i 1 i  xtb ) n 1 = 0,052 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,00052 = *100= 1,53% 3,3809 xtb - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm lỗ ME là: Xtb = n  x = 13,7774 n i 1 SVTH: Nguyễn Thị Hồng 33 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung n  (x Độ lệch chuẩn: s  i 1 i  xtb ) = 0,032 n 1 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,00032 = *100 = 0,23% 13,7774 xtb - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm TH04 là: Xtb = n  x = 4,5393 n i 1 n Độ lệch chuẩn: s   (x i 1 i  xtb ) = 0,022 n 1 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,00022 = *100 = 0,48% xtb 4,5393 - Giá trị trung bình hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm 01KH là: Xtb = n  x = 30,2305 n i 1 n Độ lệch chuẩn: s   ( xi  xtb ) i 1 = 0,02 n 1 Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV(%) = S  100 0,00016 = *100 = 0,91% xtb 30,2305 3.3 Đánh giá hiệu suất thu hồi phƣơng pháp Để đánh giá hiệu suất thu hồi phƣơng pháp ta tiến hành phân tích mẫu theo quy trình với phƣơng pháp thêm chuẩn Hiệu suất thu hồi đƣợc xác định theo công thức sau: %H = Csm  Cm C so  100% Trong đó: %H hiệu suất thu hồi Cs+m nồng độ tổng chuẩn thêm vào mẫu thực có đo đƣợc Cm nồng độ mẫu thực đo đƣợc Cso nồng độ chuẩn biết trƣớc Bảng 3.6 Hiệu suất thu hồi mẫu nấm kim châm SVTH: Nguyễn Thị Hồng 34 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung TT m(g) Cs+m – Cm Cso %H 10 48,71 47,6 102,33 10 48,73 47,6 102,37 10 48,75 47,6 10,41 Từ kết ta có giá trị trung bình H% mẫu nấm kim châm Htb (%) = n  X  102,37% n i 1 n Độ lệch chuẩn: s =  (x i 1 i  xtb ) n 1 =0,04 Trong đó: xi : nồng độ α-tocopherol lần chạy thứ i x : nồng độ n lần chạy n : số lần chạy lặp lại Độ lệch chuẩn tƣơng đối: CV (%)= s 100  0,039% x Qua kết phân tích cho thấy: phƣơng pháp có độ cao, hiệu suất thu hồi cao Đáp ứng yêu cầu phân tích SVTH: Nguyễn Thị Hồng 35 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung 3.4 Sắc đồ Hình 3.2 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 5ppm Hình 3.3 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 10ppm SVTH: Nguyễn Thị Hồng 36 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hồng Văn Trung Hình 3.4 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 20ppm Hình 3.5 Sắc đồ mẫu chuẩn có nồng độ 50ppm SVTH: Nguyễn Thị Hồng 37 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hồng Văn Trung Hình 3.6 Sắc đồ mẫu nấm linh chi trắng Hình 3.7 Sắc đồ mẫu nấm bạch tuyết SVTH: Nguyễn Thị Hồng 38 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hồng Văn Trung Hình 3.8 Sắc đồ mẫu nấm đùi gà Hình 3.9 Sắc đồ mẫu nấm kim châm thêm chuẩn SVTH: Nguyễn Thị Hồng 39 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung Hình 3.10 Sắc đồ mẫu nấm kim châm khơng thêm chuẩn Hình 11 Sắc đồ mẫu nấm đông cô SVTH: Nguyễn Thị Hồng 40 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hồng Văn Trung Hình 3.12 Sắc đồ mẫu nấm 01KH Hình 3.13 Sắc đồ mẫu nấm TH04 SVTH: Nguyễn Thị Hồng 41 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hồng Văn Trung Hình 3.14 Sắc đồ mẫu nấm lỗ SVTH: Nguyễn Thị Hồng 42 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Luận văn hoàn thành nhiệm vụ đề ra, tìm hiểu trình bày vấn đề nhƣ sau: - Đã tổng quan nấm, tổng quan vitamin C tổng quan phƣơng pháp HPLC - Đã kiểm tra, đánh giá phƣơng pháp điều kiện phân tích với q trình thực kết thu đƣợc - Đã xác định đƣợc hàm lƣợng vitamin C số mẫu nấm tƣơi nấm tự nuôi cấy: + mẫu nấm linh chi nâu tƣơi là: 14,05(mg/100g) + mẫu nấm đùi gà tƣơi (tên khoa học : Pleurotus eryngii)là: 35,6 (mg/100g) + mẫu nấm kim châm tƣơi là: 40,227 (mg/100g) + mẫu nấm bạch tuyết tƣơi là: 8,4492 (mg/100g) + mẫu nấm linh chi trắng tƣơi là: 10,6564 (mg/100g) + nấm đông cô tƣơi ( tên khoa học: Lentinula Edodes) là: 20,9025 (mg/100g) + mẫu nấm 02 ( tên khoa học : Amauroderma niger) là: 2,2274 (mg/100g) + mẫu nấm HKG406(tên khoa học : Amauroderma schmburgkii) là: 3,3809 (mg/100g) + mẫu nấm lỗ ME (tên khoa học : Hexagonia apiaria ) là:13,7774 (mg/100g) + mẫu nấm TH04(tên khoa học :ganoderma nigrolucidum) là: 4,5393 (mg/100g) + mẫu nấm 01KH ( tên khoa học : ganoderma lucidum) là: 30,2305 (mg/100g) - Đã xác định đƣợc giới hạn phát phƣơng pháp LOD: 0,0102ppm - Đã xác định giới hạn xác định phƣơng pháp LOQ: 0,034ppm - Đã xác định đƣợc hiệu suất thu hồi: 102,37% 4.2 Kiến nghị Kết cho thấy hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm tƣơi thƣờng cao nấm ni cấy để có kết xác nên tiến hành lúc mẫu cịn tƣơi sau chiết đem mẫu đo ngay, không nên để lâu Trong trƣờng hợp bảo quản nấm cần ý để qúa trình rửa làm khơ tránh làm hao hụt chất dinh dƣỡng có nấm Do thời gian không cho phép nên tiến hành phân tích hàm lƣợng vitamin C sử dụng phƣơng pháp phân tích khác nhƣ tiến hành phân tích nhiều mẫu nấm khác nhau, Nếu có thêm thời gian, tơi mong muốn phân tích đƣợc hàm lƣợng SVTH: Nguyễn Thị Hồng 43 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung vitamin C nhiều đối tƣợng khác để có nhìn tổng quan vitamin C đối tƣợng thực phẩm Tơi hy vọng quy trình phân tích đƣợc áp dụng để phân tích hàm lƣợng vitamin thực phẩm khác thị trƣờng SVTH: Nguyễn Thị Hồng 44 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: ThS Hoàng Văn Trung TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Hồng Kim Anh, Hóa học thực phẩm, NXB Khoa học Kỹ thuật [2] PGS.TS Trần Thị Xơ, Hóa sinh1, Khoa Hóa Trƣờng Đại Học Bách Khoa Đà Nẵng [3] Nguyễn Hữu Nhân, Dinh dưỡng học, NXB Nông nghiệp [4] Phạm Luân (1999), Cơ sở lý thuyết phân tích sắc ký lỏng hiệu suất cao, Đại học quốc gia Hà Nội [5] Đào Hữu vinh, Nguyễn Xuân Dũng cộng (1985), Các phương pháp sắc ký, NXB Khoa học kỹ thuật [6] Hoàng Minh Châu, Từ Vọng Nghi, Từ Văn Mặc, Cơ sở hóa học phân tích, NXB Khoa học Kỹ Thuật [7] Dược điển Việt Nam [8] Phạm Văn Sổ, Bùi Thị Nhƣ Thuận, Kiểm nghiệm Lương thực - Thực phẩm, Khoa Hóa học thực phẩm, Trƣờng ĐH Bách khoa Hà Nội, 1991 [9] Hoàng Văn Lựu, Các phương pháp sắc ký, Đại Học Vinh [10] PGS.TS Nguyễn Khắc Nghĩa, Xử lí số liệu thống , ĐH Vinh [11] Viện kiểm nghiệm, Định lượng Vitamin, NXB Y học [12] Mai Tất Tố, Vũ Thị Trâm, Đào Thị Vui, Lê Phan Tuấn., Dược lý học, tập 1, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Tiếng Anh [13] Lakshanasomia N (1998), “Determination of Vitamin C in some kinds of food by high performance liquid chromatography”, Bull Dept Med Sci., 40(3), 347-357 [14] Litwack, Gerald (2007), Vitamin Hormones 75 San Diego, CA: Elsevie [15] Vitamin analysis for the health and food sciences Ronald R Eitnmiller Lin Ye W.O.Landen,Jr [16] Unitat de Nutricio'i Bromatologia, Facultat de Farmacia, ĐH de Barcelona,Av Joan XXIII, Spain [17] Chinese Journal of Chromatography 1995/01 [18] Celluar and Molecular Life Sciences [19] Updated by: Alison Evert, MS, RD, CDE, Nutritionist, University of Washington SVTH: Nguyễn Thị Hồng 45 Lớp: 50k – Hóa Thực Phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn