Nguyễn thị hồng nhung nghiên cứu bào chế pelletpill cao tam thất (panax notoginseng (burk ) f h chen) bằng phương pháp đông lạnh khóa luận tốt nghiệp dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HỒNG NHUNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ PELLET/PILL CAO TAM THẤT (PANAX NOTOGINSENG (BURK.) F H CHEN) BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐƠNG LẠNH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2023 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HỒNG NHUNG Mã sinh viên: 1801530 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ PELLET/PILL CAO TAM THẤT (PANAX NOTOGINSENG (BURK.) F H CHEN) BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐƠNG LẠNH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Vũ Thị Thu Giang NCS Nguyễn Văn Khanh Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế, Trường ĐH Dược Hà Nội Bộ môn Bào chế CNDP, Trường Đại học Y dược, ĐHQGHN HÀ NỘI – 2023 LỜI CẢM ƠN Em có kết tốt đẹp hơm thuận lợi hồn thành khóa luận tốt nghiệp nhờ giúp đỡ từ phía Thầy trường Đại học Dược Hà Nội Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn đặc biệt đến PGS TS Vũ Thị Thu Giang NCS Nguyễn Văn Khanh, giảng viên hướng dẫn nhiệt tình giúp đỡ, truyền đạt kiến thức, rèn luyện kỹ năng, góp ý chia sẻ kinh nghiệm để em sửa chữa hoàn thiện đề tài Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, Ban giám hiệu – Trường Đại học Dược Hà Nội truyền đạt cho em kiến thức quý báu suốt thời gian em học tập trường Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt trình thực đề tài môn Em xin cảm ơn đến bạn Nguyễn Thị Thu Hương đồng hành giúp đỡ trình nghiên cứu Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè ủng hộ, động viên, giúp đỡ để em hồn thành khố luận Tuy cố gắng thực đề tài nghiên cứu khó tránh khỏi thiếu sót, em mong đóng góp ý kiến Quý Thầy cô Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, Ngày 05 tháng 06 năm 2023 Sinh viên Nhung Nguyễn Thị Hồng Nhung MỤC LỤC Tổng quan Tam thất thành phần hóa học Tam thất Tên khoa học, phận dùng phân bố Thành phần hóa học Đặc điểm tính chất tác dụng sinh học saponin Tam thất Tác dụng sinh học chung saponin Đặc điểm tính chất số tác dụng sinh học riêng saponin Một số nghiên cứu bào chế nhằm cải thiện sinh khả dụng đường uống saponin Tam thất Một số chế phẩm chứa saponin Tam thất thị trường 10 Tổng quan pellet 10 Khái niệm 10 Ưu nhược điểm 11 Thành phần pellet 11 Bào chế pellet phương pháp đông lạnh 12 Khái niệm 12 Các yếu tố ảnh hưởng 12 Ưu nhược điểm 13 Ứng dụng 13 Một số nghiên cứu bào chế pellet chứa saponin Tam thất 14 Đối tượng nghiên cứu 16 Nguyên liệu, thiết bị 16 Nội dung nghiên cứu 17 Nội dung 1: Nghiên cứu tiền công thức 17 Nội dung 2: Xây dựng cơng thức quy trình bào chế pellet saponin Tam thất phương pháp đông lạnh 17 Nội dung 3: Nghiên cứu bao tan ruột đánh giá đặc tính pellet bào chế 18 Các phương pháp nghiên cứu 18 Định lượng notoginsenosid R1, ginsenosid Rg1, ginsenosid Re, ginsenosid Rb1, ginsenosid Rd phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 18 Đánh giá số đặc tính cao khơ saponin Tam thất ngun liệu 19 Đánh giá tương tác dược chất tá dược 19 Phương pháp bào chế pellet nhân 20 Phương pháp bao cách ly cho pellet 21 Phương pháp bao màng tan ruột cho pellet 22 Phương pháp đánh giá đặc tính pellet nhân 23 Phương pháp đánh giá đặc tính pellet bao 25 Phương pháp xử lý số liệu 27 Kết nghiên cứu tiền công thức 28 Định lượng notoginsenosid R1, ginsenosid Rg1, ginsenosid Re, ginsenosid Rb1, ginsenosid Rd phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 28 Định lượng saponin notoginsenosid R1, ginsenosid Rg1, ginsenosid Re, ginsenosid Rb1 ginsenosid Rd cao khô saponin Tam thất nguyên liệu 28 Đánh giá tương tác dược chất tá dược 29 Xây dựng cơng thức quy trình bào chế pellet saponin Tam thất 30 Khảo sát tỉ lệ PEG đến số đặc tính pellet 30 Khảo sát ảnh hưởng chất tăng thấm đến đặc tính pellet 31 Khảo sát nhiệt độ nhỏ giọt 32 Khảo sát nhiệt độ làm lạnh 33 Khảo sát khoảng cách nhỏ giọt 34 Khảo sát chiều cao cột làm lạnh 35 Đánh giá số đặc tính pellet nhân 37 Bao cách ly, bao tan ruột đánh giá đặc tính pellet thu 38 Khảo sát thông số kỹ thuật trình bao cách ly 38 Khảo sát thông số kỹ thuật trình bao tan ruột 39 Đánh giá chất lượng pellet bao tan ruột bào chế 40 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu viết tắt Tên đầy đủ AUC Diện tích đường cong đồ thị biểu diễn biến thiên nồng độ thuốc máu theo thời gian Cmax Nồng độ đỉnh thuốc máu C120 CT % saponin giải phóng mơi trường pH 1,2 120 phút Công thức DC DĐVN V Dược chất Dược điển Việt Nam V DSC EtOH FTIR Phân tích nhiệt quét vi sai Ethanol Quang phổ hồng ngoại biến đổi Fourier HPLC HPLC-LS-MS HPMC HS MeOH PEG Sắc ký lỏng hiệu cao Sắc ký lỏng hiệu cao ghép nối đầu dò lần khối phổ Hydroxypropyl methylcellulose Hiệu suất Methanol Polyethylen glycol PNS Q60 SD SEM Panax notoginseng saponin % saponin giải phóng mơi trường pH 6,8 60 phút Độ lệch chuẩn Kính hiển vi điện tử quét Tmax TCCS TCNSX TEC Thời gian thuốc đạt nồng độ đỉnh máu Tiêu chuẩn sở Tiêu chuẩn nhà sản xuất Triethyl citrat TLTK Tài liệu tham khảo DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Đặc điểm tính chất số tác dụng sinh học riêng saponin Bảng 1.2: Một số hướng nghiên cứu cải thiện sinh khả dụng đường uống ginsenosid saponin Tam thất Bảng 1.3: Một số chế phẩm thuốc chứa saponin từ Tam thất 10 Bảng 2.1: Nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 16 Bảng 2.2: Thiết bị nghiên cứu 17 Bảng 2.3: Thành phần dự kiến pellet chứa cao khô saponin Tam thất 20 Bảng 2.4: Công thức dịch bao cách ly 21 Bảng 2.5: Công thức dịch bao tan ruột 22 Bảng 3.1: Hàm lượng saponin Tam thất so với ban đầu sau thử tương tác với tá dược (n=3) 29 Bảng 3.2: Thành phần mẫu pellet với tỉ lệ PEG 4000/ PEG 6000 khác 30 Bảng 3.3: Đặc tính pellet saponin Tam thất bào chế với tỉ lệ PEG 4000/ PEG 6000 khác (n=3) 30 Bảng 3.4: Thành phần mẫu pellet có khơng có chất tăng thấm 31 Bảng 3.5: Đặc tính pellet saponin Tam thất có khơng có chất tăng thấm (n=3) 32 Bảng 3.6: Đặc tính pellet saponin Tam thất bào chế nhiệt độ nhỏ giọt khác (n=3) 32 Bảng 3.7: Đặc tính pellet saponin Tam thất bào chế với nhiệt độ làm lạnh khác (n=3) 33 Bảng 3.8: Đặc tính pellet saponin Tam thất bào chế với khoảng cách nhỏ giọt khác (n=3) 34 Bảng 3.9: Đặc tính pellet saponin Tam thất bào chế với chiều cao cột lạnh khác (n=3) 35 Bảng 3.10: Công thức pellet nhân lựa chọn 36 Bảng 3.11: Các thông số quy trình bào chế pellet nhân lựa chọn 36 Bảng 3.12: Một số tiêu đánh giá pellet nhân (n=3) 37 Bảng 3.13: Kết đặc tính pellet sau bao cách ly (n=3) 39 Bảng 3.14: Kết đặc tính pellet sau bao cách ly (n=3) 39 Bảng 3.15: Một số tiêu đánh giá pellet sau bao film (n=3) 40 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1: Cây củ Tam thất Panax notoginseng (Burk.) F H Chen Hình 1.2: Cấu trúc hóa học nhóm (a) protopanaxadiol (b) protopanaxatriol Hình 1.3: Cấu trúc hóa học notoginsenosid R1 Hình 1.4: Cấu trúc hóa học ginsenosid Rb1 Hình 1.5: Cấu trúc hóa học ginsenosid Rg1 Hình 1.6: Cấu trúc hóa học ginsenosid Rd Hình 1.7: Cấu trúc hóa học ginsenosid Re Hình 1.8: Sơ đồ giai đoạn bào chế pellet kỹ thuật đông lạnh [4] 12 Hình 2.1: Mơ tả thiết bị bào chế pellet tự tạo phương pháp đông lạnh 21 Hình 3.1: Mức độ hút ẩm mẫu pellet bào chế với tỉ lệ PEG 4000/ PEG 6000 khác (n=3) 31 - Độ hịa tan mơi trường pH 6,8: sau 60 phút, lượng pellet giải phóng đạt yêu cầu (>80%), dịch hịa tan có màu trắng đục vỏ bao tan - Hiệu suất: hiệu suất q trình bao cách ly cịn thấp, chủ yếu dịch bao bám nhiều vào thiết bị Kết luận: Quá trình bao cách ly thuận lợi, thơng số dự kiến trình bao cách ly cho pellet đều, đẹp đáp ứng yêu cầu Đánh giá chất lượng pellet bao tan ruột bào chế Tiến hành bào chế mẻ pellet bao tan ruột với quy mơ 10g/mẻ theo quy trình mơ tả mục 2.4.5 2.4.6 với thông số máy bao nêu mục 3.3.1 3.3.2 3.3.3.1 Đánh giá số tiêu pellet sau bao Kết đánh giá số đặc tính pellet sau bao tan ruột thể bảng 3.15 hình – PL, hình - PL Bảng 3.15: Một số tiêu đánh giá pellet sau bao film (n=3) STT Chỉ tiêu Kết Pellet cầu, đều, màu sắc đồng Hình thức Mất khối lượng làm khô (%) 1,0 ± 0,45 Độ tăng kích thước màng bao (%) 30,5 ± 1,55 Độ trơn chảy (g/s) Khối lượng riêng biểu kiến (g/ ml) Hiệu suất bao (%) 58,7 ± 7,55 Hàm lượng saponin Tam thất pellet bao film (%) 18,33 ± 0,04 Hàm lượng R1 pellet bao film (%) 2,40 ± 0,09 Hàm lượng Rg1 pellet bao film (%) 7,75 ± 0,12 Hàm lượng Re pellet bao film (%) 0,98 ± 0,04 Hàm lượng Rb1 pellet bao film (%) 5,82 ± 0,13 Hàm lượng Rd pellet bao film (%) 1,39 ± 0,28 Độ hòa tan in vitro 34 0,84 C120 (%) 8,0 ± 1,81 Q60 (%) 87,1 ± 0,52 Nhận xét: - Pellet có hình cầu, đều, bề mặt thơ ráp, màu trắng đục 40 - Hình ảnh SEM cho thấy màng bao đồng vị trí khác Màng bao bảo vệ mỏng hơn, màng bao tan ruột dày màng bao bảo vệ khoảng lần Cấu trúc pellet nhân đặc, có xuất bọt khí li ti Cấu trúc màng bao xốp hơn, polyme màng bao liên kết chặt chẽ với nhau, che phủ bảo vệ màng bao khỏi môi trường - Hiệu suất bao chưa cao dịch bao dính nhiều vào thiết bị - Độ trơn chảy tốt (34g/s) - Lựa chọn cỡ nang: Khối lượng riêng biểu kiến trung bình 0,84 g/ ml hàm lượng trung bình PNS pellet bao tan ruột bào chế 18,33 ± 0,04 Do khối lượng pellet bao tan ruột PNS cần cho viên nang PNS có hàm lượng 60mg 328 mg (100x60/18,33) chiếm thể tích 0,39 ml (328/0,84x1000) chọn nang số - Pellet đạt u cầu độ hịa tan:  Trong mơi trường pH 1,2, phần trăm dược chất giải phóng thấp Điều chứng tỏ màng bao bảo vệ dược chất, ngăn giải phóng mơi trường mơ dịch dày  Trong môi trường pH 6,8, phần trăm dược chất giải phóng lớn, đảm bảo màng bao rã, giải phóng tốt dược chất mơi trường mơ dịch ruột 41 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT  Kết luận: Sau thời gian thực nghiệm, khoá luận đạt số kết sau: Đã xây dựng công thức bào chế pellet/pill saponin Tam thất phương pháp đông lạnh Công thức pellet nhân (%) Các thông số kỹ thuật lựa chọn Saponin 30 Nhiệt độ chảy lỏng 80°C 𝛽-cyclodextrin 1,5 Nhiệt độ lạnh -5°C→0°C Natri lauryl sulfat 0,6 Khoảng cách nhỏ giọt 13cm Polyethylen glycol 4000 1,70 Chiều cao cột parafin Polyethylen glycol 6000 5,09 35cm Đã lựa chọn thông số kỹ thuật cho quy trình bao bảo vệ bao tan cho pellet saponin Tam thất Các thông số quy trình cho trình bao bảo vệ Độ rung lắc 22% Tốc độ thổi gió 100% Nhiệt độ buồng bao 45oC Các thơng số quy trình cho q trình bao tan Độ rung lắc 22% Tốc độ thổi gió 100% Nhiệt độ buồng bao 45oC Tốc độ phun dịch Áp suất khí phun Độ tăng kích thước Tốc độ phun dịch 35 ml/phút Áp suất khí phun 1-1,5 bar Độ tăng kích thước 25% màng bao 30 ml/phút 0,8 bar 5% màng bao Đã đánh giá số đặc tính pellet/pill saponin Tam thất sau bào chế - Hình thức: Pellet có hình cầu, đều, bề mặt thơ ráp, màu trắng đục - Hình ảnh SEM: màng bao đồng đều, cấu trúc màng bao xốp, pellet nhân đặc - Mất khối lượng làm khô: 1,0 ± 0,45% - Độ trơn chảy tốt (34g/s) - Khối lượng riêng biểu kiến trung bình 0,84 g/ ml, lựa chọn cỡ nang số - Hiệu suất bao: 58,7 ± 7,55% - Hàm lượng saponin Tam thất pellet bao film: 21,3 ± 0,95% - Độ hòa tan in vitro đạt yêu cầu (C120: 8,0 ± 1,81%; Q60: 87,1 ± 0,52%)  Đề xuất 42 Trên kết nghiên cứu khóa luận này, thời gian khơng cho phép nên để hồn thiện đề tài, đề xuất nội dung nghiên cứu sau: - Nghiên cứu bào chế pellet saponin Tam thất phương pháp đông lạnh quy mô lớn - Đánh giá độ ổn định pellet bào chế làm sở ứng dụng pellet bào chế vào dạng thuốc nang cứng 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO : Tiếng Việt: Bộ môn Bào chế (2005), Một số chuyên đề bào chế đại, NXB Y học Bộ Y Tế (2017), Dược điển Việt Nam, Editor^Editors, Y Học Mỵ Thị Khánh Huyền (2022), Nghiên cứu bào chế pellet saponin Tam thất, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ Nguyễn Đăng Hòa (2022), Kỹ thuật bào chế pellet, Nhà xuất Y học Nguyễn Thượng Dong (2007), Sâm Việt Nam số thuốc họ Nhân Sâm, NXB Khoa học Kỹ thuật, 26 Tiếng Anh: Amita A Ahir, et al (2015), "Pelletization technology: Methods and applications-a review", Research Journal of Pharmacy Technology 8(2), pp 131-138 Ava Rhule, et al (2006), "Panax notoginseng attenuates LPS-induced proinflammatory mediators in RAW264 cells", Journal of ethnopharmacology 106(1), pp 121-128 Baird, J A., et al (2010), "Effect of molecular weight, temperature, and additives on the moisture sorption properties of polyethylene glycol", J Pharm Sci 99(1), pp 154-68 Chen, X N., et al (2018), "Pharmacokinetics of Panax notoginseng Saponins in Adhesive and Normal Preparation of Fufang Danshen", Eur J Drug Metab Pharmacokinet 43(2), pp 215-225 10 "Chinese Pharmacopoeia" (2015) 11 Cho, J Y., et al (2001), "In vitro inhibitory effect of protopanaxadiol ginsenosides on tumor necrosis factor (TNF)-alpha production and its modulation by known TNF-alpha antagonists", Planta Med 67(3), pp 213-8 12 De Coninck, E., et al (2019), "Prilling of API/fatty acid suspensions: Processability and characterisation", International Journal of Pharmaceutics 572, p 118756 13 Deng, J., et al (2009), "Ginsenoside Rg(1) inhibits rat left ventricular hypertrophy induced by abdominal aorta coarctation: involvement of calcineurin and mitogenactivated protein kinase signalings", Eur J Pharmacol 608(1-3), pp 42-7 14 Deng, J., et al (2010), "Role of nitric oxide in ginsenoside Rg(1)-induced protection against left ventricular hypertrophy produced by abdominal aorta coarctation in rats", Biol Pharm Bull 33(4), pp 631-5 15 FDA (2011), Quality by Design for ANDAs: An Example for Modified Release Dosage Forms, Editor^Editors, pp 28-35 16 Feng, H., Chen, W., and Zhu, C (2011), "Pharmacokinetics study of bio-adhesive tablet of Panax notoginseng saponins", Int Arch Med 4(1), p 18 17 Ficarra, R., et al (2002), "Study of flavonoids/beta-cyclodextrins inclusion complexes by NMR, FT-IR, DSC, X-ray investigation", J Pharm Biomed Anal 29(6), pp 1005-14 18 Fu X., Kong W., Zhang Y., Jiang L., Wang /j., Lei J (2015), "Novel solid-solid phase change materials with biodegradable trihydroxy surfactant for thermal energy storage", RSC Advances(84) 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 Gao, H., et al (2020), "Ginsenoside Rb1 exerts anti-inflammatory effects in vitro and in vivo by modulating toll-like receptor dimerization and NF-kB/MAPKs signaling pathways", Phytomedicine 69, p 153197 Gao, S., et al (2012), "Bioavailability challenges associated with development of saponins as therapeutic and chemopreventive agents", Curr Drug Targets 13(14), pp 1885-99 Guan-ping, Liu %J Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae (2011), "Correlation Between in vivo Absorption and in vitro Release of Panax Notoginseng Saponins Enteric Pellets" Han, M and Fang, X L (2006), "Difference in oral absorption of ginsenoside Rg1 between in vitro and in vivo models", Acta Pharmacol Sin 27(4), pp 499-505 Jayaramudu T., Raghavendra G M., Varaprasad K., Reddy G V S (2016), "Preparation and characterization of poly (ethylene glycol) stabilized nano silver particles by a mechanochemical assisted ball mill process", Journal of Applied Polymer Science 133 Ji, Z N., et al (2006), "Ginsenoside Re attenuate beta-amyloid and serum-free induced neurotoxicity in PC12 cells", J Ethnopharmacol 107(1), pp 48-52 Jia Chenglin, et al (2014), "Notoginsenoside R1 attenuates atherosclerotic lesions in ApoE deficient mouse model", PLoS One 9(6), p e99849 Jiang, K Y and Qian, Z N (1995), "Effects of Panax notoginseng saponins on posthypoxic cell damage of neurons in vitro", Zhongguo Yao Li Xue Bao 16(5), pp 399-402 Jiang K Y and Qian Z N (1995), "Effects of Panax notoginseng saponins on posthypoxic cell damage of neurons in vitro", Zhongguo Yao Li Xue Bao 16(5), pp 399-402 Joh Eun-Ha, et al (2011), "Ginsenoside Rb1 and its metabolite compound K inhibit IRAK-1 activation—the key step of inflammation", Biochemical pharmacology 82(3), pp 278-286 Kim Il-Woung, et al (2011), "Characterizing a full spectrum of physico-chemical properties of ginsenosides rb1 and rg1 to be proposed as standard reference materials", Journal of ginseng research 35(4), p 487 Lai, C., et al (2009), "[Preparation and prescription of enteric coated pellets of Panax notoginseng saponins pellets]", Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 34(11), pp 1359-63 Lee Chang Ho and Kim Jong-Hoon (2014), "A review on the medicinal potentials of ginseng and ginsenosides on cardiovascular diseases", Journal of ginseng research 38(3), pp 161-166 Leung, K W and Wong, A S (2013), "Ginseng and male reproductive function", Spermatogenesis 3(3), p e26391 Li, J., et al (2022), "Biotransformation, Pharmacokinetics, and Pharmacological Activities of Ginsenoside Rd Against Multiple Diseases", Front Pharmacol 13, p 909363 Li, Y., Zhang, Y., and Zhu, C Y (2017), "Pharmacokinetics and correlation between in vitro release and in vivo absorption of bio-adhesive pellets of panax notoginseng saponins", Chin J Nat Med 15(2), pp 142-151 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 Li, Y., et al (2023), "Ginsenoside Rd Inhibited Ferroptosis to Alleviate CCl(4)Induced Acute Liver Injury in Mice via cGAS/STING Pathway", Am J Chin Med 51(1), pp 91-105 Liu, J., et al (2014), "Saponins of Panax notoginseng: chemistry, cellular targets and therapeutic opportunities in cardiovascular diseases", Expert Opin Investig Drugs 23(4), pp 523-39 Liu, Z., et al (2016), "Preparation Procedure and Pharmacokinetic Study of Waterin-Oil Nanoemulsion of Panax Notoginseng Saponins for Improving the Oral Bioavailability", Curr Drug Deliv 13(4), pp 600-10 Lopez, M V., et al (2007), "Neuroprotective effect of individual ginsenosides on astrocytes primary culture", Biochim Biophys Acta 1770(9), pp 1308-16 Lu Huixia, et al (2017), "Ginsenoside-Rb1-Mediated Anti-angiogenesis via Regulating PEDF and miR-33a through the Activation of PPAR-γ Pathway", Frontiers in pharmacology 8, p 783 Mou, Z., et al (2017), "Antidepressive effects of ginsenoside Rg1 via regulation of HPA and HPG axis", Biomed Pharmacother 92, pp 962-971 Nie, X., et al (2020), "Development and Evaluation of Controlled and Simultaneous Release of Compound Danshen Based on a Novel Colon-Specific Osmotic Pump Capsule", AAPS PharmSciTech 21(2), p 38 Pachuau, Lalduhsanga, et al (2014), "Muli bamboo (Melocanna baccifera) as a new source of microcrystalline cellulose" 4(11), pp 087-094 Park, J., et al (2017), "Effects of ginseng on two main sex steroid hormone receptors: estrogen and androgen receptors", J Ginseng Res 41(2), pp 215-221 Park, S., et al (2008), "Ginsenosides Rb1 and Rg1 suppress triglyceride accumulation in 3T3-L1 adipocytes and enhance beta-cell insulin secretion and viability in Min6 cells via PKA-dependent pathways", Biosci Biotechnol Biochem 72(11), pp 2815-23 Peng, D., et al (2012), "Ginsenoside Re: Its chemistry, metabolism and pharmacokinetics", Chin Med 7, p Radad, K., et al (2004), "Ginsenosides Rb1 and Rg1 effects on mesencephalic dopaminergic cells stressed with glutamate", Brain Res 1021(1), pp 41-53 Radad, K., et al (2004), "Ginsenosides Rb1 and Rg1 effects on survival and neurite growth of MPP+-affected mesencephalic dopaminergic cells", J Neural Transm (Vienna) 111(1), pp 37-45 Rahman, Md A, et al (2010), "Hot Melt Extrusion and Freeze Pelletization: Better Alternative for Drugs Having Stability Problem Due to Presence of Water" 1(11), p 22 Rausch, W D., et al (2006), "Neuroprotective effects of ginsenosides", Acta Neurobiol Exp (Wars) 66(4), pp 369-75 Shamma, R N., Basalious, E B., and Shoukri, R (2012), "Development of novel sustained release matrix pellets of betahistine dihydrochloride: effect of lipophilic surfactants and co-surfactants", Pharm Dev Technol 17(5), pp 583-93 Shao, L., et al (2020), "Effects of Borneol on the Release of Compound Danshen Colon-Specific Osmotic Pump Capsule In Vitro and Pharmacokinetics Study in Beagle Dogs", AAPS PharmSciTech 21(8), p 316 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 Shi Xiaowei, et al (2017), "Panax notoginseng saponins administration modulates pro-/anti-inflammatory factor expression and improves neurologic outcome following permanent MCAO in rats", Metabolic Brain Disease 32, pp 221-233 Singh, D and Chaudhuri, P K (2018), "Structural characteristics, bioavailability and cardioprotective potential of saponins", Integr Med Res 7(1), pp 33-43 Su Ping, et al (2016), "Notoginsenoside R1 inhibits oxidized low-density lipoprotein induced inflammatory cytokines production in human endothelial EA hy926 cells", European journal of pharmacology 770, pp 9-15 Tang, K., et al (2022), "Ginsenoside Rd ameliorates high glucose-induced retinal endothelial injury through AMPK-STRT1 interdependence", Pharmacol Res 179, p 106123 Tian, Z., et al (2018), "Effect of aspirin on the pharmacokinetics and absorption of panax notoginseng saponins", J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 1074-1075, pp 25-33 Waldmann, S., et al (2012), "Provisional biopharmaceutical classification of some common herbs used in Western medicine", Mol Pharm 9(4), pp 815-22 Wang Ting, et al (2016), "Traditional uses, botany, phytochemistry, pharmacology and toxicology of Panax notoginseng (Burk.) FH Chen: A review", Journal of ethnopharmacology 188, pp 234-258 Wei, J R., et al (2017), "Panax Notoginseng Saponin Controls IL-17 Expression in Helper T Cells", J Ocul Pharmacol Ther 33(4), pp 285-289 Wijaya, Y T., et al (2022), "Ginsenoside Rd ameliorates muscle wasting by suppressing the signal transducer and activator of transcription pathway", J Cachexia Sarcopenia Muscle 13(6), pp 3149-3162 Xie, J T., et al (2006), "Antioxidant effects of ginsenoside Re in cardiomyocytes", Eur J Pharmacol 532(3), pp 201-7 Xiong, J., et al (2008), "Self-micelle formation and the incorporation of lipid in the formulation affect the intestinal absorption of Panax notoginseng", Int J Pharm 360(1-2), pp 191-6 Xiong, J., et al (2008), "The use of lipid-based formulations to increase the oral bioavailability of Panax notoginseng saponins following a single oral gavage to rats", Drug Dev Ind Pharm 34(1), pp 65-72 Xu, B B., et al (2005), "Possible mechanisms of the protection of ginsenoside Re against MPTP-induced apoptosis in substantia nigra neurons of Parkinson's disease mouse model", J Asian Nat Prod Res 7(3), pp 215-24 Xu Feng-Yuan, et al (2016), "The antitumor activity study of ginsenosides and metabolites in lung cancer cell", American journal of translational research 8(4), p 1708 Yu, K., Chen, F., and Li, C (2012), "Absorption, disposition, and pharmacokinetics of saponins from Chinese medicinal herbs: what we know and what we need to know more?", Curr Drug Metab 13(5), pp 577-98 Yu Yingli, et al (2016), "Cardioprotective effects of Notoginsenoside R1 against ischemia/reperfusion injuries by regulating oxidative stress-and endoplasmic reticulum stress-related signaling pathways", Scientific reports 6(1), pp 1-14 68 69 70 71 72 73 74 75 Zhang, H., et al (2007), "Ginsenoside Re promotes human sperm capacitation through nitric oxide-dependent pathway", Mol Reprod Dev 74(4), pp 497-501 Zhang Hong-Sheng and Wang Sheng-Qi (2006), "Notoginsenoside R1 from Panax notoginseng inhibits TNF-α-induced PAI-1 production in human aortic smooth muscle cells", Vascular pharmacology 44(4), pp 224-230 Zhang Jingjing, et al (2015), "Notoginsenoside R1 attenuates experimental inflammatory bowel disease via pregnane X receptor activation", Journal of Pharmacology Experimental Therapeutics 352(2), pp 315-324 Zhang, Y., et al (2019), "Optimal Selection of Incoming Materials from the Inventory for Achieving the Target Drug Release Profile of High Drug Load Sustained-Release Matrix Tablet", AAPS PharmSciTech 20(2), p 76 Zhao Haiping, et al (2017), "Therapeutic potential and cellular mechanisms of Panax notoginseng on prevention of aging and cell senescence-associated diseases", Aging disease 8(6), p 721 Zhao, Ya-Li, et al (2021), "Preparation of Panax notoginseng flower saponins enteric-coated sustained-release pellets and its pharmacokinetics and in vitro-in vivo correlation" 62, p 102321 Zheng Ying, et al (2023), "Biosynthesis and pharmacokinetics of Panax notoginseng enteric-coated soft capsules", Annals of Translational Medicine 11(2) Zhu Dan, et al (2009), "Ginsenoside Rg1 protects rat cardiomyocyte from hypoxia/reoxygenation oxidative injury via antioxidant and intracellular calcium homeostasis", Journal of cellular biochemistry 108(1), pp 117-124 PHỤ LỤC Hình 1: Sắc ký đồ mẫu chuẩn hỗn hợp saponin (A) mẫu thử (B); 1, notoginsenosid R1; 2, ginsenosid Rg1; 3, ginsenosid Re; 4, ginsenosid Rb1; 5, ginsenosid Rd Hình 2: Hình ảnh (a) Pellet nhân saponin Tam thất (b) Pellet saponin Tam thất bao tan ruột Hỗn hợp vật lý Pellet nhân β - cyclodextrin Dòng nhiệt (mW) Natri laurylsulfat PEG 6000 PEG 4000 PEG 4000 PEG 6000 Hỗn hợp vật lý Viên nhân SLS Beta Saponin NL Saponin 50 100 150 200 250 Nhiệt độ (°C) Hình 0: Giản đồ nhiệt DSC thành phần, hỗn hợp vật lý thành phần pellet mẫu pellet nhân tiaia X Viên nhân PEG 6000 Cường độ (cps) Hỗn hợp vật lý Pellet nhân PEG 4000 Hỗn hợp vật lý SLS Beta PEG 4000 PEG 6000 Natri laurylsulfat β - cyclodextrin Saponin 20 40 Góc 2θ(°) 60 Saponin Hình 4: Phổ nhiễu xạ tia X thành phần, hỗn hợp vật lý thành phần pellet Độ truyền qua (%) mẫu pellet nhân Hỗn hợp vật lý Beta cyclodextrin Pellet nhân HHVLnhan Nhung β - cyclodextrin PEG 4000 PEG 6000 Natri laurylsulfat Pellet nhan Nhung PEG 6000 Saponin PEG 4000 SLS Saponin 4000 3000 2000 1000 Bước sóng (cm-1) Hình 5: Phổ FTIR thành phần, hỗn hợp vật lý thành phần pellet mẫu pellet nhân Hình 6: Phổ DSC (a) Mẫu pellet nhân (b) Hỗn hợp vật lý Hình 7: Phổ FTIR (a) Mẫu pellet nhân (b) Hỗn hợp vật lý Hình 8: Ảnh chụp SEM bề mặt cắt ngang pellet saponin Tam thất bao tan ruột với độ phóng đại kích thước khác Hình 9: Ảnh chụp SEM bề mặt pellet saponin Tam thất bao tan ruột Bảng 1: Kết đánh giá tính thích hợp hệ thống HPLC R1 STT Thời gian lưu (phút) Rg1 Thời gian lưu Diện tích pic (mAU*s) (phút) Re Diện tích pic (mAU*s) Thời gian lưu (phút) Rb1 Diện tích pic (mAU*s) Thời gian lưu (phút) Rd Diện tích pic (mAU*s) Thời gian lưu (phút) Diện tích pic (mAU*s) 16,684 83,4 24,165 251,8 24,048 303,6 36,526 185,8 39,845 178,4 16,698 84,5 24,060 252,3 25,051 304,9 36,245 186,2 39,788 182,7 16,756 83,5 24,102 252,4 25,050 304,6 36,365 185,7 39,823 179,3 16,845 85,2 24,062 251,8 25,047 302,9 36,351 183,7 39,709 181,5 16,906 83,4 24,112 252,0 25,057 303,6 36,501 187,4 39,742 182,0 17,003 85,1 24,063 252,3 25,042 304,0 36,042 182,2 39,785 179,8 TB 16,815 84,2 24,094 252,1 24,882 303,9 36,338 185,2 39,782 180,6 RSD (%) 0,13 0,80 0,04 0,07 0,41 0,73 0,18 1,87 0,05 1,70 Bảng 2: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp HPLC Nồng độ 10 25 50 100 200 300 R1 8,4 24,3 48,2 98,3 185,4 274,6 Diện Rg1 12,3 33,5 64,4 132,4 242,1 369,6 tích pic Re 11,8 28,6 57,3 106,1 198,3 293,5 (mAU*s) Rb1 12 28,5 56,1 112,4 216,9 331,3 Rd 10,5 28 54,7 109,2 209,6 323,8 (µg/ ml) Kết thống kê Phương trình hồi quy Hệ số tương quan R2 Hệ số r R1 y = 0,9138x + 2,2076 0,9994 0,9997 Rg1 y = 1,2179x + 3,3414 0,9991 0,9995 Re y = 0,9628x + 6,0108 0,9993 0,9997 Rb1 y = 1,095x + 1,1828 0,9998 0,9999 Rd y = 1,0691x + 0,5735 0,9995 0,9998 Bảng 0: Hàm lượng notoginsenosid R1, ginsenosid Rg1, ginsenosid Re, ginsenosid Rb1, ginsenosid Rd mẫu cao khô saponin Tam thất nguyên liệu Tổng hàm lượng saponin Hàm lượng saponin (%) cao khô (%) R1 Rg1 Re Rb1 Rd 6,34 ± 31,29 ± 3,21 ± 31,17 ± 8,45 ± 0,24 1,17 0,25 0,34 0,34 80,45 ± 1,08