Vương thị ngân hà nghiên cứu tối ưu hóa quy trìvương thị ngân hà nghiên cứu tối ưu hóa quy trình chiết xuất và tinh chế cao giàu geniposid từ quả dành dành (gardenia jasminoides j ellis) khóa luận tốt nghiệp dược sĩnh c

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VƯƠNG THỊ NGÂN HÀ NGHIÊN CỨU TỐI ƯU HĨA QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ TINH CHẾ CAO GIÀU GENIPOSID TỪ QUẢ DÀNH DÀNH (Gardenia jasminoides J Ellis) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2023 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VƯƠNG THỊ NGÂN HÀ Mã sinh viên: 1801175 NGHIÊN CỨU TỐI ƯU HĨA QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ TINH CHẾ CAO GIÀU GENIPOSID TỪ QUẢ DÀNH DÀNH (Gardenia jasminoides J Ellis) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS Phạm Thị Linh Giang HVCH Lê Thị Diễm Nơi thực hiện: Bộ môn Thực Vật HÀ NỘI – 2023 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, tơi xin bày tỏ kính trọng lòng biết ơn sâu sắc đến ThS Phạm Thị Linh Giang – Giảng viên môn Thực vật, khoa Dược liệu – Dược học cổ truyền Trường Đại học Dược Hà Nội, người thầy trực tiếp hướng dẫn tận tình bảo, giúp đỡ tơi q trình thực khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn HVCH Lê Thị Diễm, người thầy, người chị hướng dẫn từ ngày thực đồng hành suốt trình thực đề tài Tơi xin chân thành cảm ơn ThS Trần Trọng Biên – Giảng viên khoa Kỹ thuật Hóa dược Chiết xuất – Trường Đại học Dược Hà Nội TS Phạm Hà Thanh Tùng – Trường Đại học Phenikaa, người thầy định hướng cho nhận xét quý báu thực đề tài Tiếp theo, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới TS Hoàng Quỳnh Hoa, ThS Nghiêm Đức Trọng chị kỹ thuật viên Bộ mơn Thực vật, ln nhiệt tình giúp đỡ, hỗ trợ, tạo điều kiện tốt cho tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu thầy cô trường Đại học Dược Hà Nội, người dạy dỗ bảo tơi tận tình suốt q trình học tập tích lũy kiến thức Cuối cùng, cho phép tơi bày tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới gia đình, người thân, bạn bè hết lịng yêu thương, giúp đỡ điểm tựa tinh thần vững cho học tập sống Do thời gian trình độ thân cịn hạn chế nên khóa luận khơng thể tránh khỏi thiếu sót Vì vậy, tơi mong nhận bảo tận tình thầy góp ý chân thành bạn bè Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nôi, tháng năm 2023 Sinh viên Vương Thị Ngân Hà MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Dành dành 1.1.1 1.1.2 1.1.3 Đặc điểm thực vật Thành phần hóa học Công dụng, tác dụng, chế biến 1.1.4 1.1.5 Một số đặc điểm dược liệu ảnh hưởng đến trình chiết xuất Các tiêu chuẩn chất lượng 1.2 Geniposid Dành dành 1.2.1 Nhóm iridoid glycosid 1.2.2 Geniposid 1.3 Một số nghiên cứu chiết xuất bào chế thuốc từ Dành dành 1.4 Cao dược liệu 1.4.1 Định nghĩa phân loại 1.4.2 Quy trình sản xuất cao dược liệu 1.5 Tối ưu hóa yếu tố thơng qua phương pháp thay đổi yếu tố CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Nguyên liệu thiết bị 11 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 11 2.1.2 Nguyên vật liệu nghiên cứu 11 2.2 Nội dung nghiên cứu 12 2.2.1 Nội dung 1: Xây dựng quy trình định lượng geniposid dược liệu Dành dành phương pháp sắc ký lớp mỏng hiệu cao kết hợp quét phổ (HPTLC – Scanning) 12 2.2.2 Nội dung 2: Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết xuất cao giàu geniposid từ Dành dành 12 2.2.3 Nội dung 3: Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình tinh chế dịch chiết giàu geniposid từ Dành dành 13 2.2.4 Nội dung 3: Xây dựng quy trình chiết xuất tinh chế cao giàu geniposid từ Dành dành quy mô 50 g/mẻ 13 2.3 Phương pháp nghiên cứu 13 2.3.1 Phương pháp định lượng geniposid mẫu Dành dành 13 2.3.2 Thẩm định phương pháp định lượng geniposid Dành dành 15 2.3.3 Phương pháp chiết xuất Dành dành 16 2.3.4 Phương pháp khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết xuất geniposid từ Dành dành 16 2.3.5 2.3.6 Phương pháp loại tạp sơ 17 Phương pháp khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình tinh chế dịch chiết giàu geniposid từ Dành dành 18 2.3.7 Phương pháp điều chế cao đặc giàu geniposid từ dịch chiết tinh chế Dành dành 21 2.3.8 Đánh giá số tiêu liên quan đến cao 21 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1 Thực nghiệm kết 23 3.1.1 Xử lý mẫu 23 3.1.2 Thẩm định quy trình định lượng geniposid Dành dành phương pháp sắc ký lớp mỏng hiệu cao kết hợp quét phổ (HPTLC – Scanning) 23 3.1.3 Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng tới trình chiết xuất geniposid từ Dành dành 26 3.1.4 Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng tới trình tinh chế geniposid từ Dành dành 28 3.1.5 3.2 Quy trình bào chế cao đặc giàu geniposid từ Dành dành 32 Bàn luận 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 37 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu/Viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt BV Bed volume Đơn vị thể tích sở DC EtOH Dịch chiết Ethanol Hấp phụ tĩnh HPT HPTLC LD50 Ethanol High performance thin layer chromatography Lethal dose, 50% Sắc ký lớp mỏng hiệu cao Liều gây chết 50% Loại tạp sơ LTSB MeOH Methanol Methanol RH Relative humidity Độ ẩm tương đối Rf Retention factor Hệ số lưu giữ RSD Relative standard deviation Độ lệch chuẩn tương đối TC TLC Tinh chế Thin layer chromatography TT Sắc ký lớp mỏng hiệu cao Thuốc thử v Volume Thể tích UV Ultraviolet Tia tử ngoại w Weight Khối lượng DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các tiêu chí đánh giá cao thu 21 Bảng 3.1 Kết thẩm định tính phù hợp hệ thống phương pháp định lượng geniposid Dành dành 24 Bảng 3.2 Kết thẩm định độ tuyến tính đường chuẩn phương pháp định lượng geniposid Dành dành 25 Bảng 3.3 Kết thẩm định độ lặp lại phương pháp định lượng geniposid Dành dành 25 Bảng 3.7 Kết định lượng dịch chiết xác định dung lượng hấp phụ tĩnh 29 Bảng 3.8 Kết định lượng dịch chiết khảo sát nồng độ cồn giải hấp phụ tĩnh 29 Bảng 3.9 Kết khảo sát ảnh hưởng tốc độ rửa giải giải hấp phụ động 31 Bảng 3.10 Kết đánh giá số tiêu cao 33 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Sơ đồ chung bước sản xuất cao dược liệu Hình 1.2 Sơ đồ thiết kế thí nghiệm phương pháp thay đổi yếu tố 10 Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu tối ưu hóa chiết xuất cao đặc Dành dành giàu geniposid 12 Hình 3.1 Sắc ký đồ mẫu thẩm định độ đặc hiệu 24 Hình 3.2 Kết định lượng dịch chiết khảo sát ảnh hưởng nồng độ cồn 26 Hình 3.3 Kết định lượng dịch chiết khảo sát ảnh hưởng thời gian ngâm 27 Hình 3.4 Kết định lượng dịch chiết khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ dung môi – dược liệu 28 Hình 3.5 Sắc ký đồ vết phân đoạn hấp phụ động 30 Hình 3.6 Sắc ký đồ dịch chiết 32 ĐẶT VẤN ĐỀ Chi tử - Quả Dành dành (Gardenia jasminoides J Ellis) vị thuốc sử dụng phổ biến lâu đời Việt Nam, Trung Quốc… với nhiều tác dụng dược lý quan trọng tim mạch, tiêu hóa, tác dụng kháng khuẩn chống viêm Trong dó, geniposid thành phần hoạt chất Dành dành, có nhiều tác dụng dược lý tiêu đánh giá chất lượng dược liệu quy định Dược điển Việt Nam Trung Quốc [3, 12] Phát triển dược liệu trình song song xây dựng vùng trồng tiêu chuẩn cao (GACP, Organic) nghiên cứu sản phẩm mang giá trị kinh tế cao cho doanh nghiệp, thân thiện với mơi trường chăm sóc tốt sức khỏe người tiêu dùng Như vậy, việc nghiên cứu lựa chọn giống, xây dựng quy trình trồng trọt, sơ chế dược liệu phù hợp, nghiên cứu điều kiện chiết xuất phương pháp tinh chế dịch chiết hợp lý cần tiến hành đầy đủ Hoạt động nghiên cứu điều chế cao dược liệu giàu hoạt chất nhằm tạo nguồn nguyên liệu bán thành phẩm đảm bảo đồng chất lượng mắt xích quan trọng q trình đồng thời xu hướng phát triển tất yếu dược phẩm tác dụng sản phẩm có nguồn gốc từ thảo dược.Trong phương pháp tinh chế dịch chiết nay, phương pháp hấp phụ sử dụng nhựa macroporous nghiên cứu nhiều năm gần có khả hấp phụ chọn lọc nhiều nhóm hoạt chất hầu hết sử dụng dung mơi xanh nước ethanol [18] Đã có nhiều nghiên cứu geniposid Dành dành, chủ yếu hướng đến nâng cao hiệu chiết xuất hay phân lập hoạt chất tinh khiết phương pháp phức tạp sắc ký lỏng pha đảo đẳng dòng, sắc ký phân bố ly tâm,…[16, 31, 32] chưa có nhiều ứng dụng điều kiện thực tế Từ lý trên, đề tài Nghiên cứu tối ưu hóa quy trình chiết xuất tinh chế cao giàu geniposid từ Dành dành (Gardenia jasminoides J Ellis) thực với 03 mục tiêu sau: - Lựa chọn số yếu tố ảnh hưởng đến quy trình chiết xuất cao giàu geniposid từ Dành dành thu hái Hịa Bình - Tối ưu hóa số yếu tố ảnh hưởng đến quy trình tinh chế cao giàu geniposid từ Dành dành thu hái Hịa Bình - Xây dựng quy trình bào chế cao giàu geniposid từ Dành dành quy mơ phịng thí nghiệm CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Dành dành Dược liệu Dành dành (Chi tử) phơi hay sấy khô Dành dành, tên khoa học Gardenia jasminoides J Ellis, họ Cà phê (Rubiaceae) [3] 1.1.1 Đặc điểm thực vật Dành dành cỏ, cao 1-2m, xanh tốt quanh năm, phân nhánh nhiều Cành màu nâu, nhẵn, có khía rãnh dọc Lá mọc đối hay mọc vịng 3, dày, hình thn – trái xoan, gốc thót lại, đầu tù nhọn, mặt màu lục sẫm đến nâu đen, nhẵn bóng, mặt nhạt có gân rõ, cuống ngắn, kèm to, nhọn, bao quanh lấy thân cành Hoa to, mọc đơn độc đầu cành, màu trắng trắng ngà, thơm, cuống hoa có cạnh, đài gồm thùy, ống đài có cánh dọc, tràng có cánh, trịn đầu, ống tràng nhẵn, nhị 6, nhị ngắn, bao phấn tù, bầu ô, nỗn nhiều Quả mọng hình trứng, có đài tồn đỉnh cạnh lồi có cánh, chín có màu vàng, thịt màu vàng cam Hạt dẹt, nhiều, màu vàng cam, nâu đỏ nâu đen nhạt, mặt vỏ hạt có nhiều hạt mịn Mùi nhẹ Vị chua đắng [3] Về mùa vụ, Dành dành có mùa hoa từ tháng đến tháng 5, mùa từ tháng đến tháng 11 Quả thu hái thấy chín chuyển màu vàng đỏ, ngắt bỏ cuống loại tạp, đồ luộc đến hạt phồng lên, lấy bỏ vỏ lấy hạt đem phơi sấy khô [3, 12] Chi tử hình trứng hay hình thoi, dài - 4,5 cm, đường kính - 2cm Mặt ngồi màu vàng cam đến nâu đỏ, có xám nâu đến đỏ xám, bóng, có 5-8 đường gờ chạy dọc theo quả, gờ đường rãnh rõ rệt Đỉnh lõm có đến đài tồn tại, thường bị gãy cụt Gốc hẹp, có vết cuống Vỏ mỏng giịn bóng Vỏ màu vàng đục, dày Vỏ màu vàng ngà, bóng, mỏng, có đến vách ngăn giả Hạt nhỏ, màu vàng cam, nâu đỏ nâu đen nhạt, mặt vỏ hạt có nhiều hạt mịn Mùi nhẹ Vị chua đắng [3, 12] Quả Dành dành thu hái chín già vào tháng 8-10, ngắt bỏ cuống, phơi hay sấy nhẹ đến khô Theo Dược điển đông y Trung Quốc 1963, phải nhúng qua nước suối đem đồ chừng nửa giờ, lấy phơi khơ Nếu bóc vỏ trước phơi thu Chi tử nhân Đối với chế biến, tùy theo cách dùng phơi khơ dùng sống để nhiệt, qua dùng chín để tả hỏa đen để cầm máu [2] 1.1.2 Thành phần hóa học Cho đến nay, Dành dành phân lập xác định khoảng 162 hoạt chất thành phần [11, 14] Bao gồm: - Các iridoid glycosid: gardenosid, geniposid, gardosid, shanzhisid, … winCATS Planar Chromatography Manager Detection - CAMAG TLC Scanner Information Application position 12.0 mm Solvent front position 60.0 mm Instrument CAMAG TLC Scanner "Scanner_210984" S/N 210984 (2.01.02) Executed by Number of tracks Position of first track X Distance between tracks Scan start pos Y Scan end pos Y Slit dimensions Optimize optical system Scanning speed: Data resolution: Bo Mon Hoa phan tich 12 25.0 mm 13.6 mm 5.0 mm 65.0 mm 4.00 x 0.30 mm, Micro Resolution 20 mm/s 100 µm/step Measurement Table Wavelength Lamp Measurement Type Measurement Mode Optical filter Detector mode PM high voltage 240 D2 & W Remission Absorption Second order Automatic 356 V Detector properties Y-position for adjust Track # for adjust Analog Offset Sensitivity 5.0 mm 10% Automatic (44) Integration Properties Data filtering Baseline correction Peak threshold slope Peak threshold height Peak threshold area Peak threshold max height Track start position Track end position Display scaling User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM Savitsky-Golay Lowest Slope 10 AU 50 990 AU 30.9 mm 38.8 mm Automatic Approved : Report ID : 07E7060502060F0C Thursday, 25 May, 2023 8:20:27 AM winCATS Planar Chromatography Manager All tracks at WavelengthSc4 900 [ AU ] 700 600 500 400 300 200 200 100 [ mm ] 0.38 0.40 0.42 0.44 100 0.46 0.48 0.50 50 [ Rf ] 0.54 Track 2, ID: 50 600 600 500 500 400 400 300 300 200 200 100 100 geni @ 240 nm -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.40 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 Start Height 0.2 0.40 Max Rf 0.46 0.60 Max Height 363.3 0.80 Max % 100.00 1.00 End Rf 0.50 1.20 End Height 0.4 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C -0.20 Area 5461.6 0.00 Area % 100.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Assigned substance geni 1.00 1.20 winCATS Planar Chromatography Manager Track 3, ID: 60 500 500 450 450 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 geni @ 240 nm 50 -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.41 0.20 0.40 0.60 0.80 Start Max Max Max Height Rf Height % 0.5 0.46 310.8 100.00 1.00 End Rf 0.51 1.20 End Height 0.3 -0.20 0.00 0.20 Area Area % 5390.8 100.00 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.00 1.20 1.00 1.20 Assigned substance geni Track 4, ID: 70 500 500 450 450 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 geni @ 240 nm 50 50 -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.41 0.20 0.40 0.60 0.80 Start Max Max Max Height Rf Height % 0.0 0.46 322.9 100.00 1.00 End Rf 0.51 1.20 End Height 0.3 -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area 5664.4 % 100.00 Assigned substance geni Track 5, ID:80 500 500 450 450 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 geni @ 240 nm 50 50 -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.41 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 0.40 0.60 0.80 Start Max Max Max Height Rf Height % 1.9 0.46 328.8 100.00 1.00 End Rf 0.50 1.20 End Height 1.7 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area 5682.6 % 100.00 Assigned substance geni winCATS Planar Chromatography Manager Track 6, ID: 90 500 500 450 450 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 -0.20 0.20 0.00 Start Peak Rf 0.41 Start Height 0.2 0.40 Max Rf 0.46 0.60 0.80 Max Max Height % 314.5 100.00 1.00 End Rf 0.51 geni @ 240 nm 1.20 End Height 1.0 -0.20 0.00 0.20 Area % 100.00 Area 5682 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.00 1.20 1.00 1.20 Assigned substance geni Track 7, ID: Standard1 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 -0.20 Peak 0.00 Start Rf 0.40 0.20 Start Height 0.2 0.40 0.60 Max Max Rf Height 0.47 214.6 0.80 Max % 100.00 1.00 End Rf 1.20 geni @ 240 nm -0.20 End Height 0.51 0.2 0.00 0.20 Area % Area 3844.4 0.40 0.60 0.80 Assigned substance 100.00 geni Track 8, ID: Standard2 600 600 500 500 400 400 300 300 200 200 100 100 geni @ 240 nm -0.20 Peak 0.00 Start Rf 0.40 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 Start Height 0.2 0.40 0.60 Max Max Rf Height 0.47 373.2 100.00 0.80 Max % 1.00 End Rf 0.51 1.20 End Height 0.3 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C Area 6670.4 -0.20 0.00 Area % 100.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Assigned substance geni winCATS Planar Chromatography Manager Track 9, ID: Standard3 700 700 600 600 500 500 400 400 300 300 200 200 100 100 -0.20 Peak 0.00 Start Rf 0.40 0.20 Start Height 0.8 0.40 0.60 Max Max Rf Height 0.47 539.0 0.80 Max % 100.00 1.00 End Rf 1.20 geni @ 240 nm -0.20 End Height 0.52 0.1 0.00 0.20 Area % Area 9904 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.00 1.20 1.00 1.20 Assigned substance 100.00 geni Track 10, ID: Standard4 800 800 700 700 600 600 500 500 400 400 300 300 200 200 100 100 -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.40 0.20 Start Height 0.5 0.40 0.60 Max Max Rf Height 0.48 616.3 0.80 Max % 100.00 1.00 End Rf 1.20 geni @ 240 nm -0.20 End Height 0.54 0.4 0.00 0.20 Area % Area 12452 0.40 0.60 0.80 Assigned substance 100.00 geni Track 11, ID: Standard5 900 900 800 800 700 700 600 600 500 500 400 400 300 300 200 200 100 100 geni @ 240 nm -0.20 Peak 0.00 Start Rf 0.40 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 Start Height 0.6 0.40 0.60 Max Max Rf Height 0.49 674.6 100.00 0.80 Max % 1.00 End Rf 0.53 1.20 End Height 0.1 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C Area 14869 -0.20 0.00 Area % 100.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Assigned substance geni winCATS Planar Chromatography Manager 800 800 700 700 600 600 500 500 400 400 300 300 200 200 100 100 -0.20 Peak 0.00 Start Rf 0.40 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 Start Height 2.0 0.40 0.60 Max Max Rf Height 0.49 703.5 100.00 0.80 Max % 1.00 End Rf 0.55 1.20 End Height 0.7 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C Area 17522 geni @ 240 nm -0.20 0.00 Area % 100.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Assigned substance geni 1.00 1.20 PHỤ LỤC 2.8 PHỔ HPTLC – SCANNING ĐỊNH LƯỢNG CAO GIÀU GENIPOSID winCATS Planar Chromatography Manager Detection - CAMAG TLC Scanner Information Application position Solvent front position 12.0 mm 60.0 mm Instrument CAMAG TLC Scanner "Scanner_210984" S/N 210984 (2.01.02) Bo mon Hoa phan tich Monday, 22 May, 2023 5:05:43 PM 12 25.0 mm 13.6 mm 5.0 mm 65.0 mm 6.00 x 0.10 mm, Micro Resolution 20 mm/s 100 µm/step Executed by Number of tracks Position of first track X Distance between tracks Scan start pos Y Scan end pos Y Slit dimensions Optimize optical system Scanning speed: Data resolution: Measurement Table Wavelength Lamp Measurement Type Measurement Mode Optical filter Detector mode PM high voltage 240 D2 & W Remission Absorption Second order Automatic 396 V Detector properties Y-position for adjust Track # for adjust Analog Offset Sensitivity 5.0 mm 10% Automatic (43) Integration Properties Data filtering Baseline correction Peak threshold slope Peak threshold height Peak threshold area Peak threshold max height Track start position Track end position Display scaling User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM Savitsky-Golay Lowest Slope 10 AU 50 990 AU 5.1 mm 53.9 mm Automatic Approved : Report ID : 07E7060502060F0C winCATS Planar Chromatography Manager All tracks at WavelengthSc4 600 [ AU ] 400 300 200 200 100 [ mm ] -0.20 0.00 100 0.20 0.40 50 0.60 [ Rf ] 1.00 Track 1, ID: User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM Approved : Report ID : 07E7060502060F0C winCATS Planar Chromatography Manager Track 2, ID: 01 500 500 450 450 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.52 0.20 Start Height 5.7 0.40 Max Rf 0.55 0.60 0.80 Max Max % Height 168.4 100.00 1.00 End Rf 0.58 1.20 End Height 12.7 geni @ 240 nm -0.20 0.00 0.20 Area % 100.00 Area 3068.9 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.00 1.20 1.00 1.20 Assigned substance geni Track 3, ID: 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 geni @ 240 nm -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.51 0.20 Start Height 2.4 0.40 Max Rf 0.56 0.60 0.80 Max Max % Height 150.6 100.00 1.00 End Rf 0.59 1.20 End Height 6.7 -0.20 0.00 0.20 Area % 100.00 Area 2923.5 0.40 0.60 0.80 Assigned substance geni Track 4, ID: 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 -0.20 0.00 Peak Start Rf 0.51 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 Start Height 1.0 0.40 0.60 0.80 1.00 Max Rf Max Height Max % End Rf 0.56 134.0 100.00 0.61 1.20 End Height 0.5 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C Area 2866.5 -0.20 0.00 Area % 100.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Assigned substance geni winCATS Planar Chromatography Manager Track 5, ID: 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 geni @ 240 nm -0.20 Peak 0.00 Start Rf -0.13 0.26 0.37 0.61 0.20 0.40 Start Max Height Rf 1.5 -0.10 1.8 0.31 0.2 0.41 6.9 0.66 0.60 Max Height 43.2 10.8 35.2 162.2 0.80 Max % 17.18 4.29 14.02 64.51 1.00 End Rf -0.06 0.36 0.45 0.72 1.20 End Height 7.8 0.1 4.5 2.2 -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area % Assigned substance 599.6 210.9 648.4 3773.6 11.46 4.03 12.39 72.12 unknown * unknown * unknown * geni 1.00 1.20 1.00 1.20 1.00 1.20 Track 6, ID: 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 geni @ 240 nm -0.20 0.00 Start Peak Rf 0.51 0.20 Start Height 0.2 0.40 Max Rf 0.57 0.60 0.80 Max Max % Height 139.5 100.00 1.00 End Rf 0.61 1.20 End Height 0.2 -0.20 0.00 0.20 Area % 100.00 Area 2970.6 0.40 0.60 0.80 Assigned substance geni Track 7, ID: Standard1 500 500 450 450 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 -0.20 0.00 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 winCATS Planar Chromatography Manager Peak Start Rf 0.51 Start Max Max Max End End Height Rf Height % Rf Height 1.5 0.56 134.5 100.00 0.61 0.9 Area % 100.00 Area 2899.1 Assigned substance geni Track 8, ID: Standard2 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 g -0.20 Peak 0.00 Start Rf -0.14 -0.07 0.52 0.76 0.20 0.40 Start Max Height Rf 4.5 -0.09 19.9 -0.05 3.8 0.57 19.1 0.86 0.60 Max Height 118.1 28.0 19.5 232.7 0.80 Max % 29.65 7.02 4.90 58.43 1.00 End Rf -0.08 -0.01 0.60 0.89 1.20 End Height 19.5 6.6 5.8 8.3 -0.20 geni @ 240 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area % Assigned substance 1324.2 555.6 446.8 4366.0 19.79 8.30 6.68 65.24 unknown * unknown * geni unknown * 1.00 1.20 1.00 1.20 Track 9, ID: Standard3 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 geni @ 240 50 50 -0.20 Peak 0.00 Start Rf -0.14 -0.06 0.51 0.74 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 0.40 Start Max Height Rf 2.1 -0.09 19.7 -0.05 4.8 0.57 12.3 0.86 0.60 Max Height 113.9 25.4 51.4 246.5 0.80 Max % 26.05 5.81 11.75 56.39 1.00 End Rf -0.07 -0.01 0.63 0.92 1.20 End Height 19.5 7.6 4.3 6.0 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area % Assigned substance 1291.8 513.6 1241.4 5209.0 15.65 6.22 15.04 63.10 unknown * unknown * geni unknown * winCATS Planar Chromatography Manager Track 10, ID: Standard4 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 geni @ 240 -0.20 Peak 0.00 Start Rf -0.14 -0.07 0.49 0.73 0.83 0.20 0.40 Start Max Height Rf 2.6 -0.09 16.5 -0.05 6.5 0.57 13.9 0.81 89.0 0.86 0.60 Max Height 113.7 27.2 116.9 97.5 248.3 0.80 Max % 18.83 4.51 19.36 16.15 41.14 1.00 End Rf -0.07 0.00 0.62 0.83 0.92 1.20 End Height 16.4 5.3 8.5 88.5 7.3 -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area % Assigned substance 1264.6 565.2 2749.6 2418.1 3487.6 12.06 5.39 26.22 23.06 33.26 unknown * unknown * geni unknown * unknown * 1.00 1.20 1.00 1.20 Track 11, ID: Standard5 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 geni @ 240 -0.20 Peak 0.00 Start Rf -0.13 -0.06 0.13 0.50 0.72 0.84 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 0.40 Start Max Height Rf 0.4 -0.08 13.8 -0.05 2.5 0.16 11.8 0.58 19.0 0.81 97.0 0.87 0.60 Max Height 114.7 24.8 11.6 215.7 137.5 233.1 0.80 Max % 15.56 3.37 1.57 29.25 18.65 31.61 1.00 End Rf -0.07 -0.00 0.22 0.64 0.84 0.92 1.20 End Height 12.7 3.4 2.2 12.1 95.8 9.5 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area % Assigned substance 1176.3 492.6 251.7 5203.8 3817.5 2969.0 8.46 3.54 1.81 37.41 27.44 21.34 unknown * unknown * unknown * geni unknown * unknown * winCATS Planar Chromatography Manager Track 12, ID: Standard6 450 450 400 400 350 350 300 300 250 250 200 200 150 150 100 100 50 50 geni @ 240 nm -0.20 Peak 0.00 Start Rf -0.14 -0.07 0.52 0.75 0.85 User : Bo Mon Hoa phan tich Thursday, 25 May, 2023 8:15:15 AM 0.20 0.40 Start Max Height Rf 1.0 -0.08 26.9 -0.05 14.5 0.59 24.1 0.82 123.8 0.88 0.60 Max Height 118.7 42.0 283.5 209.7 251.4 0.80 Max % 13.12 4.64 31.31 23.16 27.77 1.00 End Rf -0.07 0.02 0.65 0.85 0.94 1.20 End Height 26.8 5.5 13.5 121.6 8.0 Approved : Report ID : 07E7060502060F0C -0.20 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 Area Area % Assigned substance 1436.5 1022.1 6661.4 5023.6 3082.4 8.34 5.93 38.67 29.16 17.89 unknown * unknown * geni unknown * unknown * 1.00 1.20 PHỤ LỤC HÌNH ẢNH HẠT NHỰA MACROPOROUS D101 SỬ DỤNG mm