Nghiên cứu bào chế thuốc hít phân liều chứa ciclesonide theo cách tiếp cận chất lượng theo thiết kế qbd

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRỊNH XUÂN HUY NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC HÍT PHÂN LIỀU CHỨA CICLESONIDE THEO CÁCH TIẾP CẬN CHẤT LƯỢNG THEO THIẾT KẾ - QBD LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRỊNH XUÂN HUY NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC HÍT PHÂN LIỀU CHỨA CICLESONIDE THEO CÁCH TIẾP CẬN CHẤT LƯỢNG THEO THIẾT KẾ - QBD NGÀNH: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ THUỐC MÃ SỐ: 8720202 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS PHẠM ĐÌNH DUY PGS.TS HUỲNH VĂN HĨA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn khoa học PGS.TS Phạm Đình Duy PGS.TS Huỳnh Văn Hóa Các số liệu kết luận văn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khoa học Tác giả luận văn Trịnh Xuân Huy LỜI CẢM ƠN Trong thời gian học tập làm nghiên cứu đề tài thạc sĩ, em hỗ trợ hướng dẫn tận tình Quý Thầy Cô môn Bào chế môn Công nghiệp dược phẩm thầy cô môn khác trường, giúp đỡ Anh/chị bạn khố Vì vậy, luận văn tốt nghiệp này, cho phép em gửi lời cảm ơn chân thành đến tất Quý Thầy Cơ, Anh/Chị bạn Em xin kính gửi đến Thầy PGS.TS Phạm Đình Duy Thầy PGS.TS Huỳnh Văn Hóa kính trọng lịng biết ơn chân thành Thầy tận tình hướng dẫn, truyền đạt cho em kinh nghiệm, kiến thức quý báu nghiên cứu khoa học, ln động viên, khuyến khích tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt trình thực đề tài Em xin cảm ơn Hội đồng đánh giá luận văn Quý Thầy Cô phản biện dành thời gian để đọc, nhận xét góp ý giúp cho luận văn em hoàn chỉnh Một lần em xin cảm ơn Q Thầy Cơ, Anh/Chị bạn Kính chúc Quý Thầy Cô, chúc Anh/Chị nhiều sức khoẻ thành công nghiệp cao quý TPHCM, ngày tháng năm 2022 Học viên Trịnh Xuân Huy Luận văn thạc sĩ dược học – Năm học: 2020 - 2022 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC HÍT PHÂN LIỀU CHỨA CICLESONIDE THEO CÁCH TIẾP CẬN CHẤT LƯỢNG THEO THIẾT KẾ - QBD Trịnh Xuân Huy Người hướng dẫn: PGS TS Phạm Đình Duy PGS TS Huỳnh Văn Hóa TĨM TẮT Đặt vấn đề Đề tài thực theo cách tiếp cận “ Chất lượng theo thiết kế” nhằm xây dựng tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm thuốc hít phân liều, từ xây dựng cơng thức qui trình tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide Phương pháp nghiên cứu Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng mong muốn xác định thuộc tính quan trọng sản phẩm thuốc hít phân liều theo phương pháp “ Chất lượng theo thiết kế” Nhận diện đánh giá yếu tố thuộc tính quan trọng ngun liệu thơng số quy trình quan trọng ảnh hưởng lên thuộc tính chất lượng quan trọng MDI biểu đồ Ishikawa phương pháp FMEA Các yếu tố phân tích mức độ ảnh hưởng, từ thiết lập khơng gian thiết kế để đưa vào mơ hình thực nghiệm Mơ hình thực nghiệm Mixture/Optimal I thiết kế phần mềm Design – Expert gồm 13 công thức với biến độc lập: Nồng độ Ethanol 99 % (%) nồng độ khí đẩy HFA – 134a (%) Từ kết thực nghiệm xác định khoảng khơng gian kiểm sốt xây dựng công thức tối ưu Điều chế công thức tối ưu khảo sát DDU APSD để kiểm chứng kết Kết nghiên cứu Công thức tối ưu để điều chế thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide có nồng độ Ethanol 99% 7,3 % khí đẩy HFA - 134a 93,7 % Khảo sát sản phẩm có DDU 85,51 % -87,92 %, MMAD 3,4086 ± 0,17 FPF 56,47 % ± 1,37 Kết luận Đề tài xây dựng đầy đủ tiêu chuẩn chất lượng mong muốn thuộc tính chất lượng quan trọng sản phẩm thuốc hít phân liều xác định công thức tối ưu cho sản phẩm thuốc hít phân liều chứa ciclesonide Final thesis in pharmacy – Academic year: 2020 - 2022 RESEARCH FOR PRODUCTION OF CICLESONIDE-CONTAINS DIFFERENT DOSAGE INHALATION QUALITY BY DESIGN - (QBD) Trinh Xuan Huy Supervisor: Assoc Dr Pham Dinh Duy Assoc Dr Huynh Van Hoa ABSTRACT Introductions: The study was carried out according to the "Quality by Design" approach to develop quality standards for metered dose inhaler, thereby building the optimal formula and process for the metered dose inhaler product containing Ciclesonide Methods Developing Quality Target Product Profile and Critical Quality Attributes of metered dose inhaler products according to the “Quality by Design” methodology Using Ishikawa diagrams and FMEA methods to identifed and assess of material, process factors, affecting the critical quality attributes of MDI The factors are analyzed for their influence, thereby establishing the design space and putting it into the experimental model Experimental model Mixture/Optimal I was designed using Design - Expert software including 13 formulas with independent variables: Ethanol 99% (%) and propellant gas HFA - 134a (%) From the experimental results determine the control space and build the optimal formula Modulate the optimal formula and investigate DDU and APSD to verify the results Results The final formula for preparing fractional dose inhalers containing Ciclesonide has a concentration of Ethanol: 7.3 % and HFA - 134a 93.7% % with Delivered Dose Uniformity result: 85.51% -87.92 %, and aerodynamic performance MMAD of 3.4086 ± 0.17 and FPF of 56.47 % ± 1.37 Conclusions This thesis has fully developed Quality Target Product Profile (QTPP) and Critical Quality Attributes (CQA) of a metered dose inhaler (MDI) product and determined the optimal formula for the product metered dose inhaler containing Ciclesonide MỤC LỤC MỤC LỤC ii DANH MỤC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ vii MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 BỆNH HEN SUYỄN 1.1.1 Bệnh hen suyễn (Asthma) 1.1.2 Phác đồ điều trị 1.2 HOẠT CHẤT CICLESONIDE 1.2.1 Tính chất vật lý 1.2.2 Định tính 1.2.3 Định lượng 1.2.4 Dược động học 1.3 METERES-DOSE INHALLER (MDI) .7 1.4 CHẤT LƯỢNG THEO THIẾT KẾ (QUALITY BY DESIGN) .10 1.4.1 Lịch sử “Chất lượng theo thiết kế” (QbD) .10 1.4.2 Các bước tiếp cận phát triển dược phẩm theo “chất lượng theo thiết kế’’ (QbD) 12 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 19 2.1.1 Nguyên vật liệu .19 2.1.2 Dung mơi, hóa chất 19 2.1.3 Trang thiết bị, dụng cụ 19 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.2.1 Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng thuốc hít phân liều chứa ciclesonide theo phương pháp tiếp cận “Chất lượng theo thiết kế” .20 ii 2.2.2 Xác định công thức quy trình tối ưu, xác định thuộc tính thơng số qui trình quan trọng 30 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .36 3.1 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG CỦA THUỐC HÍT PHÂN LIỀU CHỨA CICLESONIDE THEO PHƯƠNG PHÁP TIẾP CẬN “CHẤT LƯỢNG THEO THIẾT KẾ” 36 3.1.1 Xây dựng tóm tắt đặc điểm chất lượng quan trọng (QTPP) thuốc hít phân liều 36 3.1.2 Xác định thuộc tính chất lượng quan trọng (CQA) sản phẩm thuốc hít phân liều 37 3.2 XÁC ĐỊNH CƠNG THỨC VÀ QUY TRÌNH TỐI ƯU CHO THUỐC HÍT PHÂN LIỀU CHỨA CICLESONIDE 48 3.2.1 Xác định công thức quy trình tối ưu 48 3.2.2 Nhận diện CMA CPP ảnh hưởng đến CQA đánh giá rủi ro 49 3.2.3 Xây dựng không gian thiết kế 50 3.2.4 Thực nghiệm công thức thiết kế .51 3.3 BÀN LUẬN .63 3.3.1 Tóm tắt đặc điểm tiêu chuẩn chất lượng kỳ vọng (QTPP) thuộc tính chất lượng quan trọng thuốc hít phân liều 63 3.3.2 Xác định cơng thức quy trình tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide 64 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 67 4.1 KẾT LUẬN 67 4.1.1 Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide, dựa vào thuốc đối chiếu ALVESCO .67 4.1.2 Xây dựng công thức qui trình tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide 67 4.2 ĐỀ NGHỊ 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 PHỤ LỤC 71 iii DANH MỤC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt API FPD Tiếng Anh Tiếng Việt Active Pharma Ingredient Hoạt chất Aerodynamic Particle Size Phân bố kích thước hạt theo khí Distribution động học Các thuộc tính nguyên liệu quan Critical Material Attributes trọng Critical process parameters Các thông số quy trình quan trọng Chlorofluorocarbon Khí đẩy Chlorofluorocarbon Các thuộc tính chất lượng quan Critical Quality Attributes trọng Delivered Dose Uniformity Đồng điều hàm lượng phân liều Design of Experiments Thiết kế thực nghiệm Dry Powder inhaler Thuốc hít bột khô Food and Drug Cục quản lý thực phẩm dược Administration phẩm Hoa Kỳ Failure Mode and Effects Phân tích hiệu ứng chế độ lỗi Analysis Fine Particle Dose Khối lượng hạt mịn liều FPF Fine particle Fraction Tỷ lệ hạt mịn tích lũy High-Performance Liquid Chromatography Hydrofluoralkane Inhaled corticosteroid Sắc ký lỏng hiệu cao ASPD CMAs CPPs CFCs CQA DDU DoE DPI FDA FMEA HPLC HFA ICS ICH MMAD MDI PDDS QbT QbD QTPP WHO Khí đẩy Hydrofluoralkane Corticoid dạng hít Hội đồng quốc tế hài hòa International Conference on yêu cầu kỹ thuật dược Harmonization phẩm Mass Median Aerodynamic Đường kính khí động học khối Diameter lượng trung vị Meteres Dose Inhaler Thuốc hít phân liều Pulmonary drug delivery Hệ thống phân phối thuốc qua phổi systems Quality by Testing Chất lượng theo kiểm tra Quality by Design Chất lượng theo thiết kế Bản tóm tắt đặc điểm chất Quality Target Product Profile lượng kỳ vọng sản phẩm World Health Organization Tổ chức Y tế Thế giới iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Liều corticosteroid dạng hít thấp, trung bình cao hàng ngày dành cho bệnh nhân 6- 11 tuổi bệnh nhân 12 tuổi Bảng 1.2 Tóm tắt thành phần cơng thức MDI Bảng 1.3 Một số thuốc tính APIs 14 Bảng 1.4 Một số thuộc tính tá dược 14 Bảng 2.5 Danh mục hóa chất 19 Bảng 2.6 Danh mục trang thiết bị 19 Bảng 2.7 Chương trình sắc ký để định lượng ciclesonide thuốc xịt .22 Bảng 2.8 Nồng độ ciclesonide đối chiếu khảo sát tính tuyến tính 23 Bảng 2.9 Nồng độ ciclesonide thuốc đối chiếu pha loãng 24 Bảng 2.10 Độ lặp lại độ hồi phục chấp nhận nồng độ khác 24 Bảng 2.11 Bảng tính khối lượng tích lũy 28 Bảng 2.12 Bảng điểm đánh giá theo phương pháp FMEA 32 Bảng 2.13 Bảng phân loại mức độ nguy theo hướng dẫn ICH Q9 .32 Bảng 3.14 Bảng QTPP chất lượng mong muốn 36 Bảng 3.15 Bảng CQA chất lượng sản phẩm thuốc hít phân liều 37 Bảng 3.16 Chương trình pha động định lượng ciclesonide thuốc xịt .38 Bảng 3.17 Tính tương thích hệ thống quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt .39 Bảng 3.18 Tính tuyến tính quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt 41 Bảng 3.19 Kết xử lý thống kê khảo sát tính tuyến tính quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt 41 Bảng 3.20 Kết xác định nồng độ giới hạn LOD 42 Bảng 3.21 Độ lặp lại quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt 43 Bảng 3.22 Độ quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt 43 Bảng 3.23 Kết khảo sát hàm lượng ciclesonide bình Alvesco 44 Bảng 3.24 Kết khảo sát độ đồng phân liều Alvesco 45 Bảng 3.25 Bảng kết khảo sát thuốc đối chiếu 47 Bảng 3.26 Bảng tiêu chuẩn chất lượng MDI .48 Bảng 3.27 Cơng thức thuốc hít phân liều chứa ciclesonide .48 Bảng 3.28 Các yếu tố thuộc công thức ảnh hưởng đến CQA MDI 50 Bảng 3.29 Không gian thiết kế 51 Bảng 3.30 Bảng công thức thực nghiệm 51 Bảng 3.31 Kết công thức thực nghiệm 52 Bảng 3.32 Bảng kết phân tích liệu thực nghiệm 52 Bảng 3.33 Phạm vi tiêu chuẩn chất lượng mong muốn 58 Bảng 3.34 Khoảng khơng gian kiểm sốt biến 58 v Bảng 3.35 Kết dự đoán kết đầu phần mềm 58 Bảng 3.36 Công thức tối ưu .59 Bảng 3.37 Kết khảo sát sản phẩm 59 Bảng 3.38 Bảng chiến lược kiểm soát 61 vi DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo ciclesonide Hình 1.2 Sơ đồ cấu tạo thiết bị MDI Hình 1.3 Tam Giác ICH Q8, Q9, Q10 .10 Hình 1.4 Các yếu tố chi tiết QbD 11 Hình 1.5 Sơ đồ phát triển sản phẩm theo Quality By Design 13 Hình 1.6 Mối liên hệ CMAs, CPPs CQAs 15 Hình 1.7 Mối quan hệ nhân đa biến biến số X đầu vào CMAs CPPs đến biến đầu Y tức CQAs sản phẩm mà X, Y biến thiên không gian thiết kế (Design Space – DSpace ) .17 Hình 2.8 Mục tiêu nghiên cứu 20 Hình 2.9 Hệ thống lấy mẫu MDI đánh giá độ đồng hàm lượng liều phun 25 Hình 2.10 Thiết bị lấy mẫu MDI đánh giá độ đồng hàm lượng liều phun 26 Hình 2.11 Hệ thống thiết bị Aderson Cascade Impactor 27 Hình 2.12 Nguyên tắc hoạt động thiết bị Aderson cascade impactor .27 Hình 2.13 Biểu đồ minh họa phương trình tuyến tính MDI 29 Hình 2.14 Mơ hình phun 29 Hình 2.15 Hình mơ xác định hình học chùm phun .30 Hình 2.16 Quy trình sản xuất MDI theo phương pháp nạp lạnh hai giai đoạn 33 Hình 3.17 Sắc ký đồ HPLC khảo sát tính đặc hiệu quy trình định lượng Ciclesonide thuốc xịt (tR Ciclesonide khoảng 5,6 phút) 40 Hình 3.18 Độ tinh khiết peak chất đối chiếu peak mẫu thử 40 Hình 3.19 Tương quan diện tích peak nồng độ ciclesonide 42 Hình 3.20 Kết biểu đồ khảo sát hiệu suất khí động học Alvesco .45 Hình 3.21 Kết nghiên cứu Ciclesonide Ruediger Nave Helgert Mueller 46 Hình 3.22 Đường tuyến tính thuốc Alvesco 46 Hình 3.23 Khảo sát mơ hình phun 47 vii Hình 3.24 Biểu đồ xương cá CMA ảnh hưởng lên CQA 49 Hình 3.25 Biểu đồ đánh giá yếu tố nguy tác động lên CQA MDI 50 Hình 3.26 Biểu đồ xu hướng ảnh hưởng tỷ lệ Ethanol/ HFA lên MMAD, FPF 56 Hình 3.27 Biểu đồ xu hướng ảnh hưởng tỷ lệ Ethanol, HFA lên DDU 56 Hình 3.28 Kết mơ hình phun .59 viii MỞ ĐẦU Hen suyễn (Asthma) bệnh mãn tính nghiêm trọng, ảnh hưởng đến tất nhóm tuổi, tỷ lệ mắc bệnh gia tăng nhiều quốc gia, đặc biệt trẻ em Theo thống kê y tế giới (WHO) năm 2019, Bệnh hen suyễn ước tính ảnh hưởng đến 262 triệu người gây 461.000 ca tử vong1 Bệnh lý gây nên gánh nặng cho hệ thống y tế xã hội chi phí khám chữa bệnh cao, kéo dài, đó, người mắc hen suyễn hầu hết bị giảm sút sức lao động hoạt động sống thường ngày Tại Việt Nam, theo thống kê năm 2010, số lượng mắc bệnh người trưởng thành 4,1 % cao người 80 tuổi với 11,9 %2 Trong điều trị hen suyễn, corticoid sử dụng phổ biến Trong đó, Ciclesonide corticoid quốc gia phát triển sử dụng ngày nhiều Ciclesonide có đặc tính vượt trội corticoid khác như: Kích thước hạt nhỏ giúp thuốc dễ dàng sâu phần hô hấp lưu lại khoang miệng làm tăng hiệu điều trị giảm tác dụng phụ khoang miệng liên quan đến sử dụng corticoid, hoạt chất liên hợp tốt với lipid nên thời gian tác dụng kéo dài, giảm số lần sử dụng thuốc ngày có lực với thụ thể Glucocorticoid lớn so với Corticosteroid dạng hít khác3 Với ưu có được, năm 2008, Cơ quan FDA chấp thuận đưa vào sử dụng điều trị hen suyễn Mỹ4 Ciclesonide có sinh khả dụng đường uống thấp (dưới %) ciclesonide thường bào chế dạng thuốc hít phân liều (MDI) thuốc hít bột khơ (DPI), nhiên tỷ lệ lắng đọng thuốc phổi dạng MDI cao DPI nên sản phẩm thị trường bào chế dạng MDI5 Sản phẩm lưu hành thị trường ALVESCO, nhà sản xuất Astra Zeneca với dạng bào chế Thuốc hít phân liều (MDI) Dạng Thuốc hít phân liều (MDI) phát triển sử dụng điều trị bệnh lý phổi từ năm 1950 cách mạng điều trị hen suyễn ALVESCO với dạng bào chế MDI giúp đưa thuốc xuống sâu đến nơi tác động từ nâng cao hiệu điều trị Ngồi ra, MDI có dạng bào chế nhỏ gọn, tiện lợi cho bệnh nhân dễ dàng mang theo tự sử dụng đâu Ngành công nghiệp dược phẩm giới không ngừng thay đổi phát triển Từ 2002, Mỹ ban hành hướng dẫn áp dụng phương pháp tiếp cận “chất lượng theo thiết kế”, Quality by Design (QbD) phát triển dược phẩm Cách tiếp cận “chất lượng theo thiết kế”(QbD) thiết lập quy định tập trung vào quản lý rủi ro hệ thống chất lượng từ ban đầu, dựa vào hiểu biết sản phẩm sơ khoa học sau thành phẩm Phương pháp tiếp cận “Chất lượng theo thiết kế” (QbD) giúp cho nhà máy sản xuất dược phẩm nâng cao hiệu quy trình, chất lượng sản phẩm, giảm thiểu sản phẩm lỗi, chi phí, thời gian thử nghiệm sản xuất từ giảm giá thành sản phẩm Do đó, để hịa nhập phát triển ngành cơng nghiệp dược nên học hỏi áp dụng rộng rãi phương pháp Tại Việt nam, sản phẩm dạng bào chế MDI chưa có nhà máy nước sản xuất mà hầu hết phải nhập với giá cao Điều gây thiệt hại nhiều đến ngành y tế nói chung gánh nặng tài cho bệnh nhân nói riêng Do đề tài: “Nghiên cứu bào chế thuốc hít phân liều chứa ciclesonide theo cách tiếp cận Chất lượng theo thiết kế - QbD”, hy vọng giúp phần giải vấn đề nêu Nội dung nghiên cứu gồm: - Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm thuốc hít phân liều chứa ciclesonide, dựa vào thuốc đối chiếu ALVESCO - Xây dựng cơng thức qui trình tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 BỆNH HEN SUYỄN 1.1.1 Bệnh hen suyễn (Asthma) Hen suyễn bệnh viêm mạn tính niêm mạc phế quản thường xuyên làm tăng phản ứng phế quản với nhiều tác nhân kích thích, dẫn đến co thắt lan toả trơn phế quản Sự co thắt phế quản khơng cố định, thường hồi phục tự nhiên sau dùng thuốc giãn phế quản Trên lâm sàng, hen suyễn biểu với triệu chứng thở khị khè, khó thở, nặng ngực ho Bệnh biến đổi theo mùa, nặng tiếp xúc yếu tố nguy thay đổi thời tiết Các triệu chứng có liên quan với biến đổi luồng khơng khí thở tình trạng tắc nghẽn đường thở (phù nề niêm mạc, co thắt trơn, tăng tiết đờm)6 1.1.2 Phác đồ điều trị Theo ấn phẩm 2019, Tổ chức phòng chống hen toàn cầu (GINA) khuyến cáo sử dụng ICS (Inhaled Corticosteroid) cho đối tượng người lớn trẻ em 12 tuổi biện pháp kiểm soát điều trị dự phòng hen suyễn7,8 Các liều điều trị cho người lớn trẻ em theo khuyến cáo GINA thể Bảng 1.1 Ngoài ra, số nghiên cứu bệnh nhân bắt đầu điều trị sớm ICS cải thiện chức phổi tốt hơn9,10 Bảng 1.1 Liều corticosteroid dạng hít thấp, trung bình cao hàng ngày dành cho bệnh nhân 6- 11 tuổi bệnh nhân 12 tuổi8 Corticoid dạng hít Beclometasone dipropionate (CFC)* Beclometasone -HFA Budesonide (DPI) Ciclesonide (HFA) Fluticasone (HFA) Mometasone furoate Triamcinolone acetonide Thấp Người lớn Trung bình Cao 200-500 >500-1000 >1000 100-200 200-400 80-160 100-250 110-220 >200-400 >400-800 >160-320 >250-500 >220-440 >400 >800 >320 >500 >440 400-1000 >1000-2000 >2000 Corticoid dạng hít Beclometasone dipropionate (CFC)* Beclometasone dipropionate -HFA Budesonide (DPI) Budesonide (nebules) Ciclesonide (HFA) Fluticasone propionate (HFA) Mometasone furoate Triamcinolone acetonide Thấp Trẻ em Trung bình Cao 100-200 >200-400 >400 50-100 >100-200 >200 100-200 250-500 80 >200-400 >500-1000 >80-160 >400 >1000 >160 100-200 >200-500 >500 110 ≥220>440 ≥440 400-800 >800-1200 >1200 Do đó, tài liệu ‘hướng dẫn chẩn đốn điều trị hen suyễn” BYT Viêt Nam ban hành hướng dẫn: “Để đạt kết lâm sàng tốt nhất, bệnh nhân nên bắt đầu dùng thuốc kiểm sốt hen có chứa ICS sớm tốt sau hen chẩn đoán”6 1.2 HOẠT CHẤT CICLESONIDE Tên chung quốc tế: Ciclesonide Tên khoa học (UIPAC): (2′R)-2′-Cyclohexyl-11β-hydroxy-3,20-dioxo16βH-[1,3] dioxolo[4′,5′:16,17]pregna-1,4-dien-21-yl 2-methylpropanoate Công thức phân tử: C32H44O7 Khối lượng phân tử: 540,688 g/mol Nhóm Thuốc: nhóm thuốc kháng viêm Glucocorticoid Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo Ciclesonide 1.2.1 Tính chất vật lý Cảm quan: Bột tinh thể màu trắng trắng vàng Tính tan: Thực tế khơng hịa tan nước, hịa tan aceton Ethanol 99 %, dicloromethan, cloroform 1.2.2 Định tính Phương pháp sắc ký: Sắc ký lỏng Phương pháp định tính phép đo quang phổ hấp thu hồng ngoại, sử dụng máy sắc ký HPLC (theo EP 9)11 Chất đối chiếu: Ciclesonide CRS Dung dịch thử: Dung dịch thử Hòa tan 50,0 mg chế phẩm etanol 99% (TT) pha loãng thành 50,0 mL với dung mơi Dung dịch đối chiếu: hịa tan 50 mg ciclesonide Chuẩn Ethanol 99% pha loãng thành 50 ml với nước Hệ thống sắc ký: Hệ thống cột: Phenylsilyl Silicagel, 25 cm, đường kính 4,6 mm Nhiệt độ: 60 oC Pha động: Nước R, Ethanol khan (tỷ lệ 38/62 v/v) Tốc độ dòng: 1ml/ phút Đầu dò: Đầu dò quang phổ bước sóng 243 nm, thời gian lưu 7,5 phút Bơm 20µl dung dịch thử dung dịch đối chiếu Kết quả: Thời gian lưu peak sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng với thời gian lưu peak sắc ký đồ dung dịch chuẩn cilcesonide 1.2.3 Định lượng Phương pháp: Định lượng máy HPLC theo EP911 Dung dịch thử: Dung dịch thử Hòa tan 50,0 mg chế phẩm etanol 99 % pha loãng thành 50,0 mL với dung mơi Dung dịch đối chiếu: hịa tan 50 mg ciclesonide Chuẩn Ethanol 99 % pha lỗng thành 50 ml với dung mơi Hệ thống sắc ký: Hệ thống cột: Phenylsilyl Silicagel, 25cm, đường kính 4,6mm, Nhiệt độ: 60oC Pha động: Nước R, Ethanol khan (tỷ lệ 38/62 tt/tt) Tốc độ dòng: ml/ phút Đầu dị: quang phổ, bước sóng: 243 nm Bơm 20µl dung dịch thử dung dịch đối chiếu Thời gian chạy 1,6 lần thời gian lưu cilcesonide (thời gian lưu cicelsonide khoảng 7,5 phút) Hệ số đối xứng: tối đa 2,2 peak ciclesonide chuẩn Tính tốn phần trăm hàm lượng ciclesonide 1.2.4 Dược động học 1.2.4.1 Hấp thu Ciclesonid des-ciclesonide có sinh khả dụng qua đường uống khơng đáng kể (dưới %) hấp thu qua đường tiêu hóa thấp bị chuyển hóa lần đầu gan Sinh khả dụng tuyệt đối ciclesonide 22 % tỷ lệ phân bố toàn thân desciclesonide 63 % Cmax trung bình des-ciclesonide 1,02 ng/ml (thường khoảng từ 0,6-1,5 ng/ml) bệnh nhân hen sau dùng liều 1280 mcg qua đường miệng Cmax des-ciclesonide trung bình 0,369 ng /ml AUC0-∞: 2.18 ng.h.ml sau dùng ciclesonide 320 mcg (liều lần/ ngày)12 1.2.4.2 Phân bố Sau tiêm tĩnh mạch 800mcg ciclesonide, thể tích phân bố ciclesonide khoảng 2,9 l/kg Tỷ lệ ciclesonide liên kết với protein huyết tương người trung bình ≥ 99 % loại, với ≤ % thuốc không liên kết phát hệ tuần hồn Des-ciclesonide liên kết khơng đáng kể với transcortin người12 1.2.4.3 Chuyển hóa Ciclesonide thủy phân thành chất có hoạt tính des-ciclesonide esterase Des-ciclesonide chuyển hóa gan phần lớn cytochrome P450 (CYP) 3A4 isozyme, mà phần CYP 2D612 1.2.4.4 Thải trừ Sau tiêm tĩnh mạch 800 mcg ciclesonide, hệ số thải ciclesonide ces-Ciclesonide tương ứng khoảng 152 l/h 228 l/h Thời gian bán thải trung bình ciclesonide 0,71 des-ciclesonide từ -7 Thời gian đạt nồng độ tối đa (Tmax) des-ciclesonide 1,04 sau hít ciclesonide12 1.3 METERES-DOSE INHALLER (MDI) Cách khoảng 70 năm, số thiết bị thuốc hít định để điều trị số tình trạng hơ hấp Vào cuối năm 1940, máy phun sương siêu âm lần phát triển, khoảng năm sau, thiết bị phân liều điều áp thuốc hít (pMDI) phát triển Thuốc hít phân liều (MDI) dạng bào chế đưa thuốc tới phổi, dạng bào chế cách mạng điều trị hen suyễn tiện lợi bệnh nhân bác sĩ công nhận MDI chứa từ 100 - 400 liều thiết bị nhỏ, linh động tiện lợi bỏ túi bệnh nhân dễ dàng tự sử dụng Một thiết bị MDI bao gồm bình nhơm gắn truyền động nhựa Năm thành phần sản phẩm MDI là: Bình chứa, khí đẩy, cơng thức thuốc, van phân liều, phận kích hoạt (Hình 1.2)13 Trong van phân liều MDI thành phần quan trọng, định đến tính hiệu dạng bào chế, chức phân phối cách xác lượng thuốc định thuốc nạp vào sau lần kích hoạt14 Hình 1.2 Sơ đồ cấu tạo thiết bị MDI13 Các thành phần MDI: Bình chứa: Bình chứa MDI phải có khả chịu nhiệt độ, áp suất cao tạo khí đẩy (áp suất bên MDI thường 300–500 kPa, thay đổi tùy thuộc vào cơng thức thuốc tá dược) Bình làm vật liệu trơ không phản ứng với công thức thuốc Hiện nay, bình chứa chế tạo từ nhơm ưa chuộng, nhẹ nhỏ gọn so với thủy tinh thép không gỉ Lớp phủ hộp đựng bên bề mặt hữu ích để ngăn chặn bám dính hạt thuốc tác động hố học thuốc Khí đẩy: khí đẩy MDI loại khí nén hóa lỏng áp suất cao nhiệt độ thấp tạo thành pha khí áp suất khí Khí đẩy u cầu khơng độc hại, khơng cháy, tương thích với cơng thức thuốc Trên thị trường có nhiều loại khí sử dụng làm khí đẩy: CFC-11 (trichlorofluoromethane), CFC-12 (dichlorodifluoromethane), CFC-14 (dichlorotetrafluoroethane), HFA–227a (heptafluoropropane), HFA -134a (tetrafluoroethane) Trong đó, CFCs bị cấm theo quy định quốc tế , giải phóng Clo q trình suy thối, gây nguy hỏng tầng ơzơn tầng bình lưu Do HFA – 27, HFA -134 sử dụng rộng rãi bào chế MDI15 Công thức thuốc: Công thức thuốc MDI có hai dạng hỗn dịch dạng dung dịch Tuy nhiên, dạng hỗn dịch thường xảy tượng kết tụ gây nên tình trạng kẹt van, dạng dung dịch tránh tượng trên, dễ dàng bào chế, cịn bào chế với hoạt chất địi hỏi hàm lượng cao cơng thức MDI có khả kích thước tiểu phân nhỏ nên khả lắng đọng phổi tốt dạng dung dịch thường ưu tiên lựa chọn phát triển công thức bào chế thuốc hít phân liều Trước chất hoạt động bề mặt (thường sorbitan trioleat, axit oleic, đậu nành, lecithin, với nồng độ từ 0,1 % đến %) sử dụng MDI để giảm kết tụ hạt, bôi trơn cấu van gần số chất dùng để tăng khả hòa tan hoạt chất Các chất hoạt động bề mặt khơng hịa tan HFA-134a HFA-227 thường sử dụng với Ethanol làm đồng dung mơi hịa tan Van phân liều: Đây thành phần quan trọng MDI phận đảm bảo đồng hàm lượng liều phun Van phân liều kích thước từ 25 µl đến 100 µl (thường thiết kế 50µl) Van phân liều có nhiều thiết kế tất hoạt động nguyên tắc Trước phun, cổng thân bình chứa buồng phân liều thường mở thơng nhau, MDI kích hoạt, cổng đóng lại cổng khác kết nối buồng phân liều với bên ngồi mở Cơng thức thuốc nhờ áp suất đẩy khí đẩy đẩy nhanh chóng vào thân van với truyền động, chất đẩy bắt đầu hóa thành thể khí giúp đẩy cơng thức thuốc ngồi Hộp MDI hồn chỉnh: Được lắp vào truyền động nhựa để bệnh nhân sử dụng Trong phận vịi phun quan trọng kích thước hạt khí xác định phần đường kính vịi phun (đường kính thường từ 0,14 mm đến 0,6 mm) MDI tiếp cận thị trường, vào năm 1956, có ống ngậm dài, khoảng cm, MDI bán thị trường hầu hết có ống ngậm ngắn hơn, từ đến cm, để cải thiện tiện lợi tính di động Do bình MDI làm kim loại, bệnh nhân khơng xác định lượng thuốc lại nên FDA ban hành hướng dẫn thiết bị truyền động MDI phải tích hợp đếm liều, phận cho biết số lượng liều lượng lại16 Bộ phận nhằm tránh lãng phí khơng sử dụng vượt số liều khuyến cáo Tóm lại thành phần cơng thức MDI trình bày Bảng 1.217 Bảng 1.2 Tóm tắt thành phần công thức MDI17 Mục Hoạt chất, thông số, hàm lượng Hoạt chất Beclomethason, Budesonide, Ciclesonide Thể tích buồng phân liều (µl) 25,50,100 Đường kính lỗ phun (mm) 0.22; 0.3; 0.42 Loại chất đẩy, hàm lượng (µg) HFA 134A, HFA 227EA (6-1000) Tổng nồng độ Dung dịch (mg/ml) 0,4-22 % Ethanol (kl/kl) 2-15,2 1.4 CHẤT LƯỢNG THEO THIẾT KẾ (QUALITY BY DESIGN) 1.4.1 Lịch sử “Chất lượng theo thiết kế” (QbD) Năm 2002, FDA công bố sáng kiến mới: cGMP cho Thế kỷ 21 với nội dung chủ đạo phương pháp tiếp cận dựa quản lý rủi ro18 Sáng kiến nhằm đại hóa quy định FDA chất lượng dược phẩm thiết lập quy định tập trung vào quản lý rủi ro hệ thống chất lượng “Chất lượng theo thiết kế”(QbD) Sáng kiến giúp ngành cơng nghiệp dược phẩm nhìn xa cách tiếp cận truyển thống trước đây, chất lượng cách thử nghiệm (QbT) Khái niệm “Chất lượng theo thiết kế” đề cập hướng dẫn ICH Q8, nêu rõ “Chất lượng khơng thể kiểm tra sau thành sản phẩm mà chất lượng phải xây dựng thiết kế”19 Theo ICH Q8 Q8 (R2), QbD định nghĩa hệ thống tiếp cận để phát triển dược phẩm bắt đầu với việc xác định trước mục tiêu chất lượng sản phẩm nhấn mạnh hiểu biết sản phẩm, quy trình sản xuất, kiểm sốt quy trình quản lý rủi ro chất lượng dựa sở khoa học19,20 Sau đó, hướng dẫn Quản lý Rủi ro Chất lượng ICH Q9 (năm 2005) Hệ thống Chất lượng Dược phẩm ICH Q10 (năm 2008) công bố Các tài liệu hướng dẫn thực phối hợp với nhau, nhấn mạnh phương pháp khoa học cách tiếp cận dựa kiểm soát rủi ro để phát triển sản phẩm, đảm bảo nâng cao chất lượng ngành dược phẩm Ba hướng dẫn tạo thành móng vững hình tam giác cho khái niệm QbD (Hình 1.3)21 Hình 1.3 Tam Giác ICH Q8, Q9, Q1021 10 Trên thực tế, “Chất lượng theo thiết kế” cách tiếp cận toàn diện nhằm vào tất giai đoạn phát triển, sản xuất phân phối thuốc Mục đích nâng cao chất lượng giảm giá thành thuốc cho người tiêu dùng Đây cách tiếp cận có hệ thống tương tác nhân lẫn vịng trịn (Hình 1.4) Vịng trịn QbD chia thành hai lĩnh vực chung, kiến thức sản phẩm hiểu biết quy trình, hai lĩnh vực gặp không gian thiết kế Sự tương tác kiến thức sản phẩm hiểu biết quy trình cho phép cải tiến liên tục sản phẩm sau thị trường21 Hình 1.4 Các yếu tố chi tiết QbD21 Vai trò QbD: - QbD đảm bảo thiết kế sản phẩm theo cách để đáp ứng nhu cầu người bệnh yêu cầu để có hiệu tốt - Việc triển khai QbD thiết kế quy trình thực theo cách để đáp ứng CQA sản phẩm cách quán - Với việc triển khai QbD, dễ dàng đạt hiểu biết ảnh hưởng thơng số quy trình ngun liệu đến chất lượng sản phẩm - Các nguồn biến thiên quan trọng quy trình kiểm sốt xác định chiến lược kiểm soát phù hợp - QbD đảm bảo giám sát liên tục quy trình quy trình phải cập nhật liên tục để trì chất lượng cách quán theo thời gian 11 Mục tiêu QbD : - Giúp đạt tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm có ý nghĩa dựa hiệu lâm sàng - Tăng “khả quy trình”, giảm biến thiên sản phẩm bị lỗi cách tăng cường thiết kế chất lượng, hiểu biết kiểm tra sản phẩm quy trình - Tăng cường phát triển sản phẩm hiệu sản xuất - Tăng cường phân tích nguyên nhân gốc rễ quản lý thay đổi Lợi ích QbD mang lại: - Cho người bệnh: Chất lượng sản phẩm xây dựng từ bên trong, nâng cao hiệu điều trị giảm giá thành sản phẩm Trong công nghiệp dược: - Cách tiếp cận xác định dựa rủi ro nhận thức rủi ro thực tế hơn, hiểu rõ quy trình - Hiệu quy trình nâng cao nên chất lượng sản phẩm tốt hơn, hỏng hóc hàng loạt - Cách tiếp cận thẩm định quy trình sáng tạo giảm chi phí thẩm định - Chuyển giao cơng nghệ hiệu vào sản xuất 1.4.2 Các bước tiếp cận phát triển dược phẩm theo “chất lượng theo thiết kế’’ Theo ICH Q8, bước tiếp cận phát triển sản phẩm dược QbD bao gồm bước mơ tả phía dưới19: - Xây dựng tóm tắt đặc điểm chất lượng mong muốn sản phẩm (QTPP) - Xác định thuộc tính chất lượng quan trọng (CQA) sản phẩm - Xác định nguy tác động thuộc tính nguyên liệu quan trọng đầu vào (CMA) thơng số quy trình quan trọng sản xuất (CPP) tác động đến CQA sản phẩm - Xây dựng không gian thiết kế - Thiết kế thực nghiệm (DoE) xác định khơng gian kiểm sốt, chiến lược kiểm soát - Tiếp tục cải tiến sản phẩm 12 Mô tả mối liên quan bước tiếp cận phát triển dược phẩm theo QbD thể Hình 1.522 Hình 1.5 Sơ đồ phát triển sản phẩm theo Quality By Design22 1.4.2.1 Xây dựng tóm tắt đặc điểm chất lượng mong muốn sản phẩm Đây bước xác định đặc điểm chất lượng mong muốn thuốc đảm bảo hiệu quả, độ an tồn, sở để thiết kế cơng thức, quy trình sản phẩm QTPP định nghĩa là: “Bản tóm tắt đặc điểm chất lượng mong muốn sản phẩm thuốc mà lý tưởng đạt để đảm bảo chất lượng, có tính đến tính an toàn hiệu sản phẩm thuốc”20 Do đó, nội dung QTPP thường bao gồm: - Mục đích sử dụng lâm sàng, đường dùng, dạng bào chế, hệ thống phân phối - Liều lượng, hệ thống đóng gói - Sự chuyển giao giải phóng thuốc có liên quan đến điều trị thuộc tính ảnh hưởng đến đặc tính dược động học (ví dụ: phân bố kích thước theo khí động học…) - Các tiêu chí chất lượng sản phẩm thuốc độ vơ trùng, độ tinh khiết, độ ổn định giải phóng thuốc phù hợp với dạng bào chế dự định đưa thị trường - QTPP xây dựng sở kiến thức đặc tính lý hóa, ứng dụng lâm sàng, dược động học, phóng thích thuốc, tương đương sinh học, tương đương dược học dựa vào thuốc đối chiếu Orange Book 13 FDA, quan quản lý thuốc quốc gia NM(D)RA, tài liệu tham khảo WHO… 1.4.2.2 Xác định thuộc tính chất lượng quan trọng sản phẩm (CQA) Critical Quality Attributes (CQA) định nghĩa ICH Q8(R2) sau : “CQA thuộc tính đặc tính vật lý, hóa học, sinh học vi sinh sản phẩm Các thuộc tính phải nằm giới hạn, phạm vi có phân bố thích hợp để đảm bảo chất lượng sản phẩm đạt QTPP xây dựng”20 CQA thuốc generic xác định dựa nghiên cứu, tài liệu tham khảo WHO, FDA, ICH kiến thức thu từ khảo sát CQA thuốc đối chiếu (RLD), Reference List Drug (RLD) thuốc nằm danh mục Orange Book FDA quan quản lý thuốc quốc gia NM(D)RA ban hành 1.4.2.3 Xác định đánh giá nguy tiềm tàng thuộc tính nguyên liệu quan trọng (CMA) thơng số quy trình quan trọng (CPP) liên quan đến CQA Các thuộc tính nguyên liệu quan trọng đầu vào API, tá dược (CMA) trình bày Bảng 1.3, Bảng 1.4 Bảng 1.3 Một số thuốc tính APIs CMA API Chi tiết Tính chất vật lý Tính tan độ tan Dạng muối, PKa, PH Các đặc tính: kích thước hạt, hình dạng tiểu phân… Dạng đa hình Tính chất hóa học Độ ổn định hóa học: thủy phân, oxi hóa, phân hủy… Tính chất sinh học Hệ số phân bố, tính thấm qua màng… Một số đặc tính khác Độc tính, tương tác thuốc, chống định… Bảng 1.4 Một số thuộc tính tá dược CMA tá dược Tính chất vật lý Tính chất hóa học Chi tiết Độ tan, độ nhớt, kích thước hạt, tính háo ẩm Tỷ trọng Tính chảy, tính chịu nén Độ tinh khiết, tương hợp với API 14 Các thuộc tính nguyên liệu quan trọng (CMA) hoạt chất, tá dược phải nằm giới hạn khoảng phù hợp để đảm bảo chất lượng đầu sản phẩm Trong trình phát triển công thức, nhận dạng tối đa CMA nguyên liệu đầu vào xác định hiệu sản phẩm, giảm thiểu rủi ro liên quan đến chất lượng thuốc Các thông số quy trình quan trọng (CPP): thơng số khơng thể thiếu quy trình mà biến thiên ảnh hưởng đến thuộc tính chất lượng thuốc Do dó, CPP cần kiểm tra, kiểm sốt q trình sản xuất để đảm bảo tính đồng chất lượng cho sản phẩm sau Các CPP thông thường thời gian trộn, tốc độ trộn, nhiệt độ sấy, lực nén, áp suất… thông số thường nhận diện sau: - Trong giai đoạn phát triển quy trình, vẽ lưu đồ sản xuất, xác định thông số, thao tác quan trọng, đánh giá mức độ ảnh hưởng đến CQA - Xác định dãy biến thiên chấp nhận (không gian thiết kế - Design Space) CPP CQA có nguy cao - Tiến hành song song nhận dạng kiểm sốt khác kiểm sốt mơi trường, kiểm sốt quy trình tình trạng thiết bị, số lượng thành phần, thứ tự cho vào, tính ngun vẹn rây… (cịn gọi yêu cầu quy trình) - Các mối liên quan ảnh hưởng CMA CPP đến CQA minh họa theo Hình 1.6 Hình 1.6 Mối liên hệ CMA, CPP CQA 15 1.4.2.4 Xây dựng không gian thiết kế (Design Space) Theo hướng dẫn ICH Q8, kết hợp tương tác đa chiều biến đầu vào CMA thơng số quy trình CPP chứng minh có ảnh hưởng đến thuộc tính chất lượng (CQA) biến số phải nằm khoảng xác định đảm bảo chất lượng sản phẩm theo thiết kế Không gian thiết kế người nộp đơn đề xuất phải đánh giá phê duyệt theo quy định Các biến số nằm không gian thiết kế coi không thay đổi, vượt khỏi không gian thiết kế coi có thay đổi thường bắt đầu trình thay đổi sau phê duyệt theo quy định19 Các yếu tố không gian thiết kế bao gồm: - Xác định biến số: Xác định mối quan hệ nhân CMA, CPP nhận dạng phần liên quan đến CQAs tương ứng - Mô tả không gian thiết kế: Một khơng gian thiết kế mơ tả dạng phạm vi thuộc tính vật liệu thơng số q trình, thơng qua mối quan hệ tốn học phức tạp mơ tả không gian thiết kế dạng hàm phụ thuộc thời gian (ví dụ, chu kỳ nhiệt độ áp suất chu trình đơng khơ), kết hợp biến thành phần mơ hình đa biến Hệ số tỷ lệ sử dụng không gian thiết kế thiết kế để mở rộng nhiều quy mô hoạt động Phân tích liệu lịch sử góp phần thiết lập không gian thiết kế - Đơn vị không gian thiết kế: Đơn vị không gian thiết kế đa dạng thời gian, vận tộc, nhiệt độ… dùng để biểu thị cho thuộc tính hay qui trình sản xuất - Mối quan hệ không gian thiết kế với qui mô sản xuất: xây dựng không gian thiết kế cần đánh giá yếu tố rủi ro áp dụng khoảng không gian qui mơ nhỏ, qui mơ phịng thí nghiệm sang qui mô công nghiệp - Không gian thiết kế phạm vi chấp nhận: Một kết hợp phạm vi chấp nhận được chứng minh không tạo thành không gian thiết kế Tuy nhiên, phạm vi chấp nhận được chứng minh dựa thực nghiệm đơn biến cung cấp kiến thức hữu ích quy trình 16 - Khơng gian thiết kế ranh giới thất bại: Có thể hữu ích xác định mức độ thất bại thơng số quy trình thuộc tính vật liệu khơng thể đáp ứng thuộc tính chất lượng liên quan Tuy nhiên, việc xác định ranh giới thất bại phần quan trọng việc thiết lập không gian thiết kế 1.4.2.5 Thiết kế thực nghiệm (DoE) chiến lược kiểm tra Thiết kế thực nghiệm phương pháp xác định biến thiên yếu tố đầu vào chất lượng đầu hay gọi mối quan hệ nhân CMA, CPP CQA (Hình 1.7) Các bước thiết kế thực nghiêm sau: Sau xác định khoảng không gian thiết kế, tiến hành thiết kế thực nghiệm theo mơ hình cơng thức (cho CMA) hay mơ hình quy trình (cho CPP) mơ hình hỗn hợp theo sử dụng phần mềm thích hợp Khi có thiết kế tiến hành thực nghiệm thu thập liệu Từ liệu thực nghiệm tiến hành phân tích để xác định dãy biến thiên thích hợp cho CMA, CPP, CQA Ngồi ra, phân tích liệu thực nghiệm phân loại xem CMA, CPP có quan trọng hay khơng ? Hình 1.7 Mối quan hệ nhân đa biến biến số X đầu vào CMAs CPPs đến biến đầu Y tức CQAs sản phẩm mà X, Y biến thiên không gian thiết kế (Design Space – DSpace )20 Chiến lược kiểm soát: Theo ICH Q8 (R2), chiến lược kiểm soát thiết kế để đảm bảo sản phẩm có chất lượng yêu cầu sản xuất cách quán Các yếu tố chiến lược kiểm sốt mơ tả giải thích cách thức kiểm sốt ví dụ: kiểm sốt quy trình, nguyên liệu đầu vào (hoạt chất tá 17 dược), sản phẩm trung gian (nguyên liệu q trình), hệ thống đóng gói sản phẩm thuốc Các biện pháp kiểm soát phải dựa hiểu biết sản phẩm, cơng thức quy trình tối thiểu phải bao gồm việc kiểm soát thơng số quy trình quan trọng thuộc tính nguyên liệu, để đảm bảo hiệu quy trình chất lượng sản phẩm20 1.4.2.6 Liên tục cải tiến sản phẩm Cải tiến liên tục thành phần cuối q trình QbD “Khả quy trình” sử dụng để đo lường cải tiến quy trình thơng qua nỗ lực cải tiến liên tục, tập trung vào việc loại bỏ nguồn biến vốn có từ điều kiện vận hành quy trình chất lượng nguyên liệu Việc giám sát liên tục liệu quy trình biện pháp khác kiểm sốt quy trình mặt thống kê xác định xảy biến đặc biệt cần xác định thực hành động khắc phục phòng ngừa 18 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 2.1.1 Nguyên vật liệu Đối tượng nghiên cứu: Thuốc hít phân liều chứa ciclesonide Thuốc đối chiếu ALVESCO, nhà sản xuất Astra zenecca (số lô GVI0591, ngày hết hạn 08/2023) Chuẩn gốc ciclesonide (số lơ 9-SCC-175-1, hàm lượng 97,91 % tính nguyên trạng, mua từ TRC Canada) 2.1.2 Dung mơi, hóa chất Bảng 2.5 Danh mục hóa chất STT Tên nguyên liệu Mục đích sử dụng Tiêu chuẩn chất lượng Ciclesonide CRS Chất chuẩn EP10 Ciclesonide Hoạt chất EP 10 Ehanol 99 % Dung môi Dược dụng Nước cất Dung môi Dược dụng HFA 134A Khí đẩy Dược dụng 2.1.3 Trang thiết bị, dụng cụ Bảng 2.6 Danh mục trang thiết bị STT Tên thiết bị Nhà sản xuất/ xuất xứ Cân phân tích Satorius , Đức Máy sắc ký lỏng HPLC Shimadzu, Đức Cột sắc ký Phenylsilycarel Bản sắc ký lớp mỏng Đức Máy siết Vale Trung quốc Anderson Cascader Impactor Copley, Anh Thiết bị lấy mẫu Dụng cụ phịng thí nghiệm 19 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Để xây dựng công thức qui trình thuốc hít phân liều ciclesonide theo cách tiếp cận “ chất lượng theo thiết kế” (QbD), mục tiêu nghiên cứu tiến hành trình bày Hình 2.8: Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng thuốc hít phân liều chứa ciclesonide Xác định cơng thức quy trình tối ưu, xác định thuộc tính thơng số qui trình quan trọng từ xây dựng chiến lược kiểm tra/ kiểm sốt Hình 2.8 Mục tiêu nghiên cứu 2.2.1 Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng thuốc hít phân liều chứa ciclesonide theo phương pháp tiếp cận “Chất lượng theo thiết kế” Theo hướng dẫn FDA, ICH Q8, Q9 để xây dựng tiêu chuẩn cho thuốc hít phân liều (MDI) cần phải thực bước sau: - Xây dựng đặc điểm chất lượng mong muốn sản phẩm (QTPP) - Xác định thuộc tính chất lượng quan trọng sản phẩm (CQA) thông qua nghiên cứu khảo sát thuốc đối chiếu Alvesco 2.2.1.1 Xây dựng tóm tắt đặc điểm chất lượng kỳ vọng (QTPP) QTPP tóm tắt đặc tính chất lượng sản phẩm thuốc cần đạt được, có tính đến tính an tồn hiệu QTPP yếu tố quan trọng cách tiếp cận QbD sở cho việc thiết kế chất lượng cho sản phẩm thử nghiệm Các tiêu chí để lựa chọn QTPP tìm thấy hướng dẫn ICH Q8, ví dụ: đường dùng, dạng bào chế, hệ thống phân phối, tiêu chí dược động học chất lượng sản phẩm (ví dụ: độ vơ khuẩn, độ ổn định giải phóng thuốc), v.v (EMEA/CHMP, 2009)19 QTPP cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide xác định trình phát triển dựa đặc tính vật lý, hóa học dược chất ciclesonide, đặc tính sản phẩm tham chiếu (Reference List Drug - RLD) xem xét nhãn thuốc tham chiếu đối tượng bệnh nhân mục tiêu mà sản phẩm hướng đến 20 QTPP thuốc hít phân liều chứa ciclesonide dựa hướng dẫn thiết kế chất lượng cho MDI PDI, xuất 2018 FDA23, hướng dẫn ICH Q819 khảo sát thuốc đối chiếu ALVESCO, thuốc thuộc danh mục thuốc tham chiếu FDA cơng bố4 2.2.1.2 Xác định thuộc tính chất lượng quan trọng sản phẩm (CQA) Mục tiêu thứ hai phương pháp “chất lượng theo thiết kế” xác định thuộc tính chất lượng quan trọng hay gọi Critical Quality Attributes (CQA) sản phẩm Việc xác định CQA xây dựng đặc tính đầu sản phẩm, đại diện cho chất lượng sản phẩm thuộc tính nghiên cứu kiểm soát CQA thường liên quan đến dược chất, tá dược, chất trung gian sản phẩm thuốc yếu tố thường ảnh hưởng trực tiếp lên CQA sản phẩm CQA sản phẩm thuốc phải rút từ QTPP và/ kiến thức có Việc xác định lựa chọn CQA trường hợp đề tài dựa kiến thức có liệu từ tài liệu liên quan24 CQA sản phẩm MDI phải xác định kiểm soát để đáp ứng QTPP xây dựng từ ban đầu CQA thuốc hít phân liều chứa ciclesonide xác định dựa hai yếu tố : Bản hướng dẫn xây dựng chất lượng thuốc MDI, DPI FDA23và việc phân tích, khảo sát đặc tính thuốc đối chiếu ALVESCO Khảo sát thuốc đối chiếu Alvesco Các phương pháp xác định thuộc tính chất lượng quan trọng (CQAs) thuốc đối chiếu hướng dẫn thực theo dược điển Mỹ USP 25 Dược điển Châu âu EP911 2.2.1.3 Xây dựng quy trình định lượng Ciclesonide chế phẩm Theo hướng dẫn EP9, phương pháp định lượng ciclesonide sắc ký lỏng hiệu cao Chuẩn bị mẫu: - Mẫu trắng: Dung dịch Ethanol 99 % - Mẫu đối chiếu: Dung dịch chất đối chiếu nồng độ 20 μg/ml Ethanol 99 % 21 - Mẫu thử: Làm lạnh mẫu thử (bình xịt Alvesco) nitơ lỏng, gỡ nắp bẳng kìm cắt điện, rót dịch vào erlen có nút mài, để n nhiệt độ phịng phút cho khí đẩy bay hết, dùng Ethanol 99 % tráng rửa bình để thu hết lượng thuốc cịn lại bình vào bình định mức 10 ml, bổ sung Ethanol đến vạch Hút 500 µl dịch thuốc cho vào bình định mức 50 ml, bổ sung Ethanol 99% đến vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,22 µm Hệ thống sắc ký: Hệ thống Shimadzu Đầu dò: DAD Cột: Phenylsilyl Silicagel, 250 x 4,6 mm, µm Nhiệt độ cột: 60 oC Thể tích tiêm: 20 µl Tốc độ dịng: ml/phút Phát hiện: Bước sóng 243 nm Pha động: - Kênh A: Nước - Kênh B: Ethanol 99 % Bảng 2.7 Chương trình sắc ký để định lượng Ciclesonide thuốc xịt Thời gian (phút) Kênh A Kênh B 0-10 38 62 2.2.1.4 Thẩm định quy trình định lượng ciclenoside thuốc xịt Tính tương thích hệ thống Cân cột pha động 15 phút Tiêm lần liên tiếp mẫu dung dịch thử Tính tương thích hệ thống khảo sát với thông số sắc ký: Thời gian lưu (tR), diện tích peak (S), hệ số bất đối (As), độ phân giải (Rs) số đĩa lý thuyết (N) u cầu: Quy trình đạt tính tương thích hệ thống độ lệch chuẩn (% RSD) thời gian lưu (tR), diện tích peak hoạt chất (S) % 22 Tính đặc hiệu Tiến hành sắc ký mẫu trắng, mẫu đối chiếu, mẫu thử mẫu thử thêm chất đối chiếu Yêu cầu: - Sắc ký đồ mẫu trắng không xuất peak khoảng thời gian lưu tương ứng với peak chất đối chiếu - Sắc ký đồ mẫu thử cho peak có thời gian lưu tương tự với peak chất đối chiếu mẫu đối chiếu Trên sắc ký đồ xuất thêm peak khác (peak tạp), peak chất điểm phải tách hoàn toàn khỏi peak tạp - Khi thêm lượng chất đối chiếu vào mẫu thử, chiều cao diện tích peak chất điểm tăng lên so với lúc trước thêm - Phổ UV – Vis thời gian lưu peak chất điểm mẫu thử giống với phổ UV – Vis thời gian lưu tương ứng chất đối chiếu - Sử dụng chức kiểm tra độ tinh khiết peak đầu dò PDA, peak chất đối chiếu mẫu thử phải đạt yêu cầu độ tinh khiết peak Tính tuyến tính Pha dung dịch đối chiếu gốc có nồng độ chất đối chiếu 0,5189 mg/ml hỗn hợp pha động Pha loãng dung dịch chuẩn gốc bình định mức 10 ml hỗn hợp pha động thu dung dịch chuẩn theo Bảng 2.8 Bảng 2.8 Nồng độ Ciclesonide đối chiếu khảo sát tính tuyến tính Dung dịch đối chiếu V dd chuẩn gốc (μl) 200 400 700 1000 1300 1800 0,0519 0,0675 0,0934 V hỗn hợp pha động vđ (ml) Nồng độ chất đối chiếu (mg/ml) 10 0,0104 0,0208 0,0363 - Xác định tương quan nồng độ diện tích peak dung dịch chuẩn Thiết lập phương trình hồi quy vẽ đường biểu diễn tương quan nồng độ diện tích đỉnh 23 - Sử dụng trắc nghiệm t để kiểm tra ý nghĩa thông số phương trình hồi quy trắc nghiệm F để kiểm tra tính thích hợp phương trình hồi quy u cầu: R2 ≥ 0,995 Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng Pha lỗng dung dịch chuẩn với dung mơi pha mẫu trình bày Bảng 2.9 tiến hành sắc ký, ghi nhận tỷ số tín hiệu nhiễu (S/N) Tiêm lặp lại dung dịch nồng độ LOD, LOQ dung dịch lần, ghi nhận kết Yêu cầu: - Giới hạn phát nồng độ cho peak có tỷ lệ S/N  - Giới hạn định lượng nồng độ cho peak có tỷ lệ S/N  10 Bảng 2.9 Nồng độ Ciclesonide thuốc đối chiếu pha loãng Ciclesonide (µg/ml) 100 20 0,8 0,16 0,032 Độ lặp lại Tiến hành phân tích mẫu dung dịch thử điều kiện Từ diện tích peak, suy hàm lượng chất điểm mẫu thử Xử lý thống kê, xác định độ lệch chuẩn tương đối Yêu cầu: Độ lệch chuẩn (% RSD) phải nằm khoảng cho phép với nồng độ chất đối chiếu mẫu thử, trình bày Bảng 2.10 Bảng 2.10 Độ lặp lại độ hồi phục chấp nhận nồng độ khác Hàm lượng (%) 100 10 0,1 0,01 0,001 0,0001 0,00001 0,000001 0,0000001 Tỷ lệ chất 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 10-9 Đơn vị 100 % 10 % 1% 0,1 % 100 ppm 10 ppm ppm 100 ppb 10 ppb ppb 24 RSD (%) 1,3 2,8 2,7 3,5 5,3 7,3 11 15 21 30 Độ hồi phục (%) 98 – 102 98 – 102 97 – 103 95 – 105 90 – 107 80 – 110 80 – 110 80 – 110 60 – 105 40 – 102 Độ Xác định độ phương pháp cách thêm xác lượng chất đối chiếu vào mẫu thử Thêm lượng xác mẫu đối chiếu vào mẫu thử cho hàm lượng chất đối chiếu chuẩn thêm vào mức 80 %, 100 % 120 % hàm lượng chất đối chiếu mẫu thử nằm khoảng tuyến tính phương pháp Tại mức nồng độ thực mẫu độc lập Xác định độ hồi phục phương pháp theo công thức: Độ hồi phục (%) = (Lượng chất thu hồi/Lượng chất thêm vào) × 100 % Yêu cầu: Phương pháp định lượng đạt độ tỷ lệ hồi phục nằm khoảng cho phép ứng với nồng độ chất điểm mẫu thử, trình bày Bảng 2.10 2.2.1.5 Phương pháp thử độ đồng điều hàm lượng phân liều (DDU) Mục đích: xác định độ đồng hàm lượng liều phun Thiết bị lấy mẫu: Hệ thống bao gồm nguồn hút chân không kết nối điều chỉnh lưu lượng dịng khí lưu lượng kế copley thông qua van hút cuối thiết bị Hệ thống kết nối với thiết bị thu gắn vào đế đỡ lọc qua chuyển đổi ống ngậm có nút để đảm bảo kín ống thu ống ngậm, ống ngậm kết nối với bình xịt Các vật liệu sử dụng phải tương thích với thuốc dung mơi sử dụng để thuận lợi chiết thuốc khỏi phận lọc.Thiết bị, điều chỉnh lưu lượng khí dụng cụ mơ tả có cấu tạo Hình 2.9, Hình 2.10 Hình 2.9 Hệ thống lấy mẫu MDI đánh giá độ đồng hàm lượng liều phun 25 Hình 2.10 Thiết bị lấy mẫu MDI đánh giá độ đồng hàm lượng liều phun25 Quy trình lấy mẫu: Chuẩn bị sản phẩm sử dụng theo hướng dẫn nhãn Cài đặt hệ thống đảm bảo tốc độ luồng khơng khí qua thiết bị lấy mẫu 28,3 L/p (±5 %), thể tích khơng khí lấy mẫu không vượt 2,0 L Độ đồng hàm lượng liều phun thực giai đoạn đầu (B), (M), cuối (E) thời hạn sử dụng sản phẩm25 Lấy mẫu liều ban đầu sản phẩm (DDU B), lắc bình giây, nhấn xả 1-2 liều đầu để mồi thuốc vào van phân liều, sau kết nối với thiết bị lấy mẫu nhấn van giữ 5s, đủ để đảm bảo tất lượng thuốc phun vào thiết bị lấy mẫu, sau giây lấy liều tiếp theo, sau tráng lọc Ethanol 99 %, thêm Ethanol 99 % đủ 10ml Tiến hành sắc ký, ghi nhận hàm lượng ciclesonide Lấy mẫu giai đoạn (DDU M) : xả thuốc khỏi bình 31 liều (n/2 + 1, n = 60, liều ghi nhãn),lắc bình tiến hành lấy liều sau tráng lọc Ethanol 99 %, thêm Ethanol 99 % đủ 10ml Tiến hành sắc ký, ghi nhận hàm lượng cilcesonide Lấy mẫu giai đoạn cuối (DDU E): Tiếp tục xả thuốc liều cuối cùng, lấy liều cuối cùng, tiến hành Tính tốn kết quả: Xác định hàm lượng/ lần phun qua thời kỳ Yêu cầu: số 10 liều phải từ 75-125 % khơng có liều nằm ngồi khoảng 65-135 % hàm lượng liều Nếu có liều nằm khoảng 75-125 % khoảng 65-135 % làm tiếp 20 liều, khơng có nhiều liều nằm khoảng từ 75-115 % khơng có liều nằm ngồi khoảng 65-115 % 26 2.2.1.6 Phương pháp khảo sát phân bố kích thước hạt theo khí động học (APSD) Mục đích: Đánh giá hiệu suất sản phẩm Sử dụng hệ thống thiết bị bao gồm: máy hút chân không, thiết bị điều chỉnh lưu lượng dịng khí, thiết bị đa tầng Aderson cascade impactor, thể mô tả nguyên lý hoạt động theo Hình 2.11, Hình 2.12 Hình 2.11 Hệ thống thiết bị Aderson Cascade Impactor Hình 2.12 Nguyên tắc hoạt động thiết bị Aderson cascade impactor25 27 Hệ thống thiết bị Anderson cascader impactor bao gồm đĩa kim loại lọc cuối để thu giữ tất hạt phun Máy hoạt động dựa nguyên lý bậc thang, hạt có kích thước khác bị giữ lại bậc tương ứng theo nguyên tắc phân loại hạt theo đường kính hạt Nhờ hạt khí dung tách khỏi dịng chuyển động Số lượng hạt phụ thuộc vào đường kính hạt đường kính lỗ rây bậc thang Quy trình thực hiện: kết nối thiết bị tạo dịng khí chân khơng hệ thống điều chỉnh lưu lượng khí Copley, cài đặt lưu lượng dịng khí 28,3 l/ p ( ±0.5%) Gắn thuốc hít vào Anderson Cascade thơng qua phận kết nối Đảm bảo kín tầng, sử dụng máy hút chân khơng tạo dịng khí có vận tốc hướng dẫn, hiệu chỉnh luồng khơng khí để đạt vận tốc ổn định Lắc 5s xả liều đần tiên bình nhắm nạp thuốc đầy đủ vào buồng phân liều Nhấn giữ 5s đủ thời gian đảm bảo thuốc hết khỏi buồng phân liều, tiến hành lấy 10 liều liên tục Sau tháo thuốc hít, tráng lấy lượng thuốc tầng Ethanol 99 % thêm đủ 10 ml Tiến hành sắc ký xác định hàm lượng thuốc tầng Kết Quả: Xác định liệu sau: Tỷ lệ hạt mịn (FPF), Đường kính khí động học khối lượng trung vị (MMAD) Tính tốn khối lượng tích lũy tầng hoạt chất theo Bảng 2.11 Bảng 2.11 Bảng tính khối lượng tích lũy Đường kính giới hạn (µm) Khối lượng tầng (mg) d7 = 0,4 d6 = 0,7 d5 = 1,1 d4 = 2,1 d3 = 3,3 d2 = 4,7 d1= 5,8 d0 = Tầng 7, m7 Tầng 6, m6 Tầng 5, m5 Tầng 4, m4 Tầng 3, m3 Tầng 2, m2 Tầng 1, m1 Tầng 0, m0 Tầng -1, m-1 Khối lượng tích lũy (mg) c6 = m7 c5 =c6 +6 c4 = c5 + m5 c3 = c4 + m4 c2 = c3 + m3 c1 = c2 + m2 c0 = c1 + m1 c-1 = c0 + m0 c = c-1 + m-1 28 % tích lũy f6 = (c6 / c) x 100 f5 = (c5 / c) x 100 f4 = (c4 / c) x 100 f3 = (c3 / c) x 100 f2 = (c2 / c) x 100 f1 = (c1 / c) x 100 f0 = (c0 / c) x 100 f-1 = (c-1 / c) x 100 100 FPF MMAD tính sau Tỷ lệ hạt mịn (FPF): tỷ lệ hạt mịn tính cách nội suy từ đồ thị với đường kính khí động học ≤ µm Xây dựng phương trình hồi quy đường tuyến tính khối lượng hạt mịn tích lũy (Hình 2.12), từ tính giá trị đường kính khí động học trung bình (MMAD) sau26: Đường kính khí động học khối lượng hạt khối lượng trung vị (MMAD) tính vị trí hình chiếu mốc 50 % đồ thị Hình 2.13 Biểu đồ minh họa phương trình tuyến tính MDI25 2.2.1.7 Mơ hình phun Mục đích : Xác định mơ hình phun (hình minh họa trình bày Hình 2.14) (a) (b) 27 Hình 2.14 Mơ hình phun (a) Kiểu phun; (b): Góc phun Dụng cụ thiết bị : Máy ảnh, sắc ký lớp mỏng 29 Tiến hành: Xác định thời điểm hạn sử dụng sản phẩm, phun lên sắc ký lớp mỏng chụp hình học chùm phun khoảng cách từ cm (Khoảng cách từ lỗ phun đến sắc ký) Mơ hình mơ tả theo (Hình 2.15), bao gồm sắc ký lớp mỏng giá đỡ có khung bao tránh ảnh hưởng mơi trường phân tán chùm phun27 Hình 2.15 Hình mơ xác định hình học chùm phun27 Kết : Xác định thơng số sau : Dmax, góc phun khoảng cách 3cm28: Dmax: Đường kính ngồi Từ đại lượng : đường kính, khoảng cách chụp, tính tốn xác định góc phun theo cơng thức sau: 𝑑 Góc phun α = 2x tan-1 ( ) 2ℎ 2.2.2 Xác định cơng thức quy trình tối ưu, xác định thuộc tính thơng số qui trình quan trọng 2.2.2.1 Xây dựng cơng thức quy trình tối ưu Xây dựng công thức Dựa vào đặc tính hóa học ciclesonide, sáng chế cơng thức cho MDI tài liệu sản phẩm Alvesco để xây dựng công thức tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide29-31 Xây dựng quy trình điều chế thuốc hít phân liều Dựa vào nghiên cứu trước đây, có phương pháp nạp khí đẩy sử dụng để sản xuất thuốc hít phân liều : nạp áp suất nạp lạnh15 Nạp áp suất sử dụng áp suất lớn nạp khí đẩy dung dịch thuốc/ khí đẩy vào bình thông qua van phân liều 30 Nạp theo phương pháp lạnh phương pháp làm lạnh đến hóa lỏng khí đẩy dung dịch thuốc/khí đẩy nạp vào bình sau siết van phân liều Trên phương pháp chia thành hai qui trình: Một giai đoạn hai giai đoạn Một giai đoạn phương pháp trộn tất thành phần gồm: hoạt chất, dung mơi, khí đẩy thành khối thống nhất, sau thơng qua áp suất làm lạnh đến hóa lỏng đưa vào bình chứa Hai giai đoạn phương pháp tách quy trình thành hai giai đoạn : Giai đoạn thứ nhất: hoạt chất hịa tan hồn tồn vào dung mơi, sau chiết rót vào bình chứa Giai đoạn thứ hai giai đoạn nạp khí, sử dụng hai phương pháp nạp thơng qua áp suất làm lạnh đến hóa lỏng để đưa vào bình chứa 2.2.2.2 Nhận diện thuộc tính ngun liệu quan trọng đầu vào (CMA), thơng số quy trình quan trọng (CPP) tác động đến CQA MDI Đánh giá xác định rủi ro chất lượng phát triển sản phẩm nhằm mục đích xác định thuộc tính vật liệu đầu vào, biến ảnh hưởng thơng số quy trình ảnh hưởng đến thuốc CQA sản phẩm Điều giúp hiểu nguồn gốc biến đổi trình sản xuất dự đốn chiến lược kiểm sốt thích hợp thực Việc xác định thông số quy trình quan trọng (CPP) thuộc tính ngun liệu quan trọng (CMA) trình liên tục; kiến thức trước đóng vai trị sở Các công cụ đánh giá rủi ro sử dụng phương tiện để xác định CMA CPP trình xây dựng phất triển sản phẩm Các cơng cụ điển hình sử dụng bao gồm: lọc rủi ro, biểu đồ đầu vào-quá trìnhđầu ra, sơ đồ Ishikawa, từ lọc xếp hạng rủi ro32 Dựa kiến thức nghiên cứu trước liệu thực nghiệm ban đầu, phương pháp FMEA áp dụng phân tích rủi ro thông số ảnh hưởng đến CQA thuốc hít phân liều chứa ciclesonide.Theo FMEA, yếu tố cơng thức, quy trình sản xuất, thiết bị phân phối, dụng cụ, thơng số kích hoạt người vận hành xác định yếu tố đầu vào Mỗi thông số cho điểm mức độ nghiêm trọng (S), khả phát (D) xác suất (P) 31 Đối với rủi ro, điểm số S, D, P nhân với để tạo số ưu tiên rủi ro (RPN), RPN = S x D x P, đại diện cho mức độ rủi ro tổng thể S, D P có trọng số trường hợp xấu nhất, giá trị trường hợp tốt giá trị trường hợp trung bình với điều RPN tối đa 125 RPN tối thiểu Ngưỡng RPN đặt mức 60 biến có RPN 60 trở lên coi yếu tố nguy cao33 Các mức điểm xác định Bảng 2.12 Bảng 2.12 Bảng điểm đánh giá theo phương pháp FMEA Điểm Mức độ (S) Khả phát (D) Xác suất (P) Không ảnh hưởng 100 % phát Khơng xảy Ảnh hưởng Hầu hết phát Xác suất thấp Ảnh hưởng trung bình Phát mức vừa phải Xác suất trung bình Ảnh hưởng cao Khó phát Xác suất cao Ảnh hưởng nghiêm trọng Không phát Xác suất 100 % Phân tích thuộc tính CMA thơng số CPP nhằm cung cấp liệu đầu vào cho không gian thiết kế yếu tố xếp hạng nguy tương đối biến số thực theo hướng dẫn quản lý rủi ro ICH Q934, với mức cao, trung bình thấp Bảng 2.13 Bảng phân loại mức độ nguy theo hướng dẫn ICH Q9 Thấp (1-30) Các nguy phổ biến chấp nhận Khơng cần điều tra kỹ Trung bình Nguy chấp nhận Có thể cần điều tra kỹ để giảm thiểu rủi ro (31-60) Cao (61-125) Rủi ro không chấp nhận Cần điều tra, kiểm sốt kỹ 2.2.2.3 Xây dựng quy trình điều chế thuốc hít phân liều Với quy mơ điều kiện phịng nghiệm tại, quy trình điều chế nạp lạnh hai giai đoạn lựa chọn để bào chế thuốc hít phân liều MDI Qui trình điều chế theo phương pháp nạp lạnh hai giai đoạn có ưu điểm dễ thực hiện, trang thiết bị rẻ tiền, tránh lãng phí hoạt chất, sản xuất qui mơ nhỏ15: 32 Giai đoạn 1: xử lý nguyên liệu, bình chứa - Ngun liệu cân hịa tan hồn tồn vào dung mơi - Bình chứa làm dung môi làm lạnh - Bơm dung dịch hoạt chất vào bình chứa Giai đoạn 2: Nạp khí đẩy đóng van phân liều - Khí đẩy làm lạnh 00C Nitơ lỏng, sau nạp vào bình chứa có chứa sẵn dung dịch thuốc - Tiến hành siết van dụng cụ siết van - Quy trình mơ tả theo Hình 2.16 Hình 2.16 Quy trình sản xuất MDI theo phương pháp nạp lạnh hai giai đoạn15 Trong công đoạn quy trình, đánh giá tác động tiềm tàng CMA, CPP đến CQAs sản phẩm hay sản phẩm trung gian 2.2.2.4 Xây dựng không gian thiết kế Theo khái niệm Chất lượng theo thiết kế (QbD), chất lượng nên xây dựng trình phát triển phân tích ban đầu, thơng thường có nhiều yếu tố đầu vào ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm phương pháp Theo hướng dẫn ICH Q8 QbD sử dụng nhiều công cụ để xác định yếu tố này, công cụ QBD “Thiết kế thực nghiệm (DoE)”32 Thiết kế thực nghiệm sử dụng để hiểu tác động nhiều chiều tương tác 33 yếu tố đầu vào phản ứng đầu dược phẩm sản phẩm phương pháp phân tích từ xác định cơng thức tối ưu cho sản phẩm33 Quá trình thiết kế thực nghiệm thực theo bước sau: - Xác định mối liên quan nhân biến số đầu vào nhận dạng thông qua biểu đồ Ishikawa đánh giá FMEA đến CQA tương ứng - Xác đinh mức độ phạm vi (hay dãy biến thiên chấp nhận), tức không gian thiết kế - Thiết kế thực nghiệm theo mơ hình cơng thức (cho CMA) mơ hình quy trình (cho CPP) mơ hình hỗn hợp cho hai phần mềm Design-Expert 2.2.2.5 Thực nghiệm, xác định cơng thức quy trình tối ưu Thiết kế thực nghiêm Cơng thức thuốc hít phân liều ( MDI) chứa ciclesonide dựa vào phương pháp nạp lạnh hai giai đoạn Thành phần công thức bao gồm: Hoạt chất ciclesonide, dung mơi hịa tan Ethanol 99 % khí đẩy HFA - 134a Trong đó, xây dựng cơng thức cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide dựa việc đánh giá ảnh hưởng biến/ thành phần: Ethanol 99 % HFA- 134a công thức thơng số quy trình điều chế Thiết kế thực nghiệm nhằm chọn tỷ lệ tối ưu hàm lượng Ethanol 99 % khí đẩy HFA 134a quy trình điều chế chuẩn cho sản phẩm thuốc hít phân liều chứa ciclesonide Sử dụng phần mềm Design Expert đưa biến vào mơ hình phân tích Mixture/Optimal I Điều chế công thức thực nghiệm Từ không gian thiết kế xác định, quy trình trình bày mục 2.2.2.3, tiến hành điều chế lơ labo công thức thực nghiệm Xác định không gian cần kiểm sốt Sau điều chế cơng thức thực nghiệm, tiến hàng thu thập liệu DDU, APSD theo phương pháp tương tự khảo sát thuốc đối chiếu Phân tích liệu APSD, DDU thu thập phương pháp ANOVA phù hợp để xác định xu hướng tác động CMA,CPP lên CQA35 Tổng kết kết quả, sau xây dựng 34 phạm vi chất lượng mong muốn làm sở thiết lập khơng gian cần kiểm sốt (control Space) cho cơng thức tối ưu Khơng gian kiểm sốt (control Space) khoảng không gian CMA, CPP mà biến thay đổi khoảng khơng làm thay đổi kết CQA đầu Thẩm định mơ hình Sau xác định khoảng khơng gian cần kiểm soát (control Space) biến đầu vào, tiến hành xây dựng tỷ lệ biến khoảng khơng gian kiểm sốt điều chế cơng thức tối ưu theo quy trình Sau tiến hành khảo sát lại CQA: DDU, APSD so sánh kết với phạm vi chất lượng xây dựng để xác định tính xác mơ hình Xác định chiến lược kiểm tra/ kiểm sốt Việc xác định biến số công thức biến số CPPs bước chìa khố phương pháp thẩm định suốt vòng đời sản phẩm bao gồm việc xác định thay đổi cơng đoạn sản xuất Chiến lược kiểm sốt cần phải xây dựng hồ sơ tổng thể sản xuất kiểm sốt quy trình Vì giai đoạn nghiên cứu dược học quy mô phịng thí nghiệm nên biện pháp kiểm sốt giai đoạn bao gồm: - Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật MDI cilcesonide, phương pháp đo CQAs thành phẩm liên quan tần suất giám sát kiểm tra - Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật CMAs liên quan công thức - Xác định kiểm tra trình (IPC- In process control), phương pháp đo CQAs sản phẩm trung gian tần suất giám sát/ kiểm tra - Xác định giới hạn vận hành cho CPPs quy trình pha chế - Cải tiến liên tục sản phẩm: Do lô labo nên việc cải tiến liên tục khó, triển khai nội dung áp dụng qui mô công nghiệp 35 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG CỦA THUỐC HÍT PHÂN LIỀU CHỨA CICLESONIDE THEO PHƯƠNG PHÁP TIẾP CẬN “CHẤT LƯỢNG THEO THIẾT KẾ” 3.1.1 Xây dựng tóm tắt đặc điểm chất lượng quan trọng (QTPP) thuốc hít phân liều QTPP sản phẩm thuốc hít phân liều chứa cilcesonide xây dựng dựa đặc tính hóa học, vật lý hoạt chất, theo hướng dẫn FDA ICH Q8, Q9 trình bày Bảng 3.1419,23,34 Bảng 3.14 Bảng QTPP chất lượng mong muốn Tiêu chuẩn công thức (QTPP) Thông số yêu cầu Thuyết minh Dạng bào chế Thuốc hít phân liều Cơng thức Dung dịch Đường sử dụng Đường hít Liều sử dụng 80mcg/ liều Số liều 60 liều Dược động học Tmax Cmax tương tự thuốc đối chiếu Hạn sử dụng 24 Tháng Thuộc tính chất lượng sản phẩm Định tính, định lượng, APSD, DDU, mơ hình phun, giới hạn vi sinh vật, tạp chất Bao bì đóng gói Đảm bảo hạn dùng tính tồn vẹn thuốc q trình vận chuyển sử dụng 36 Tương đương thuốc đối chiếu Tương đương thuốc đối chiếu Tương đương thuốc đối chiếu Tương đương thuốc đối chiếu Tương đương thuốc đối chiếu Tương đương thuốc đối chiếu Tương đương tốt thuốc đối chiếu Tương đương thuốc đối chiếu theo tiêu chuẩn dược điển tiêu chuẩn chấp nhận khác Tương đương tốt thuốc đối chiếu 3.1.2 Xác định thuộc tính chất lượng quan trọng (CQA) sản phẩm thuốc hít phân liều 3.1.2.1 Hướng dẫn xác đinh CQA FDA Các thuộc tính quan trọng sản phẩm thuốc hít phân liều chứa cilcesonide phối hợp yếu tố: thiết bị công thức, theo hướng dẫn ICH Q8, Q9 FDA , CQA liệt kê Bảng 3.15 Bảng 3.15 Bảng CQA chất lượng sản phẩm thuốc hít phân liều CQAs Yêu cầu Biện luận tR peak sắc ký đồ dung dịch Định tính quan trọng việc đảm bảo thử phải tương ứng với Định tính* chất lượng sản phẩm Đảm bảo hoạt tR peak chất theo hồ sơ sản phẩm sắc ký đồ dung dịch chuẩn Sự thay đổi hàm lượng ảnh hưởng Định 90-110 % hàm lượng đến chất lượng sản phẩm Do yếu tố lượng nhãn cần phải kiểm tra q trình phát triển sản phẩm Tính đồng liều lượng phân phối 75-125 % liều nhãn thông số quan trọng để đạt qua thời kỳ đầu, hiệu công thức thuốc Thấp DDU cuối sản thay đổi liều lượng dẫn đến phẩm hiệu điều trị giảm sút Tương đương thuốc đối Thông số kỹ thuật APSD chi phối đến chiếu nằm lắng động thuốc phổi Đây số APSD phạm vi cho phép thể hiệu điều trị sản phẩm Mơ hình phun ảnh hưởng đến lắng Mơ hình Tương đương thuốc đối đọng thuốc phổi từ ảnh hưởng phun chiếu đến hiệu công thức thuốc Các sản phẩm không đạt giới hạn vi sinh vật ảnh hưởng đến chất lượng sản Giới hạn phẩm Tuy nhiên, MDI sử dụng dung môi Theo giới hạn Dược vi sinh hịa tan Ethnol đóng kín, áp điển suất bình ln cao, mơi vật trường khó khăn để vi sinh vật phát triển nên rủi ro vi sinh vật phát triển thấp Đánh giá có phải CQA hay khơng Có Có Có Có Có Khơng (*) Các yếu tố quy trình cơng thức khơng ảnh hưởng đến thuộc tính định tính nên không khảo sát đánh giá chi tiết thuộc tính Tuy nhiên, CQA mục tiêu chất lượng sản phẩm phải đánh giá đảm bảo đạt yêu cầu 37 3.1.2.2 Xây dựng qui trình định lượng Ciclesonide bình thuốc đối chiếu Quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt phương pháp HPLC sau: - Mẫu thử: Làm lạnh mẫu thử (bình xịt Alvesco) nitơ lỏng, gỡ nắp bẳng kìm cắt điện, rót dịch vào erlen có nút mài, để yên nhiệt độ phịng phút cho khí đẩy bay hết, dùng Ethanol 99 % tráng rửa bình để thu hết lượng thuốc cịn lại bình vào bình định mức 10 ml, bổ sung Ethanol đến vạch Hút 500 µl dịch thuốc cho vào bình định mức 50 ml, bổ sung Ethanol đến vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,22 µm - Điều kiện sắc ký: - Đầu dò: DAD - Cột : Phenylsilyl Silicagel, 250 x 4,6 mm, µm - Nhiệt độ cột: 60 oC - Thể tích tiêm: 20 µl - Tốc độ dịng: ml/phút - Phát hiện: Bước sóng 243 nm - Pha động: Kênh A: Nước Kênh B: Ethanol 99 % Chương trình pha động trình bày Bảng 3.16 Bảng 3.16 Chương trình pha động định lượng ciclesonide thuốc xịt Thời gian (phút) Kênh A (%) Kênh B (%) 0-10 38 62 Hàm lượng Ciclesonide (mg/ml) thuốc xịt tính theo cơng thức: 𝑋 (%) = 𝑆𝑡 × 𝐶 × 1000 × 100 𝑆𝑐 St, Sc : Diện tích peak Ciclesonide mẫu thử mẫu chất đối chiếu C : Nồng độ dung dịch ciclesonide đối chiếu (mg/ml) 38 3.1.2.3 Thẩm định quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt phương pháp HPLC Tính tương thích hệ thống Tiến hành sắc ký lần mẫu thử Kết khảo sát tính tương thích hệ thống phương pháp định lượng ciclesonide trình bày Bảng 3.17 Bảng 3.17 Tính tương thích hệ thống quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt Hệ số STT tR (phút) S (mAU.s) 5,662 713458 1,056 3338 5,699 709877 0,972 3556 5,674 712255 1,034 3478 5,630 712943 1,011 3392 5,646 711026 1,005 3441 5,648 705893 1,018 3507 TB 5,6598 710908,6667 SD 0,0243 2781,5550 % RSD 0,4300 0,3913 kéo đuôi N Nhận xét: RSD thời gian lưu (tR), diện tích (S) peak ciclesonide nhỏ 2% Kết luận: Quy trình định lượng Ciclesonide thuốc xịt phương pháp HPLC đạt tính tương thích hệ thống Tính đặc hiệu Tiến hành sắc ký HPLC mẫu trắng, mẫu chuẩn, mẫu thử mẫu thử thêm chuẩn, kết trình bày Hình 3.17 39 Chuẩn Trắng Thử thêm chuẩn Thử Hình 3.17 Sắc ký đồ HPLC khảo sát tính đặc hiệu quy trình định lượng Ciclesonide thuốc xịt (tR Ciclesonide khoảng 5,6 phút) (a) (b) Hình 3.18 Độ tinh khiết peak chất đối chiếu peak mẫu thử Nhận xét: - Mẫu trắng không cho peak thời gian lưu ciclesonide mẫu đối chiếu mẫu thử - Sắc ký đồ mẫu thử cho peak có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu ciclesonide mẫu đối chiếu Peak ciclesonide tách hoàn toàn mẫu đối chiếu mẫu thử 40 - Sắc ký đồ mẫu thử thêm chất đối chiếu có chiều cao diện tích peak ciclesonide tăng lên so với mẫu thử - Peak ciclesonide đạt yêu cầu kiểm tra độ tinh khiết Kết luận: Quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt phương pháp HPLC đạt tính đặc hiệu Tính tuyến tính Kết khảo sát tính tuyến tính quy trình định lượng ciclesonide trình bày Bảng 3.18 Bảng 3.18 Tính tuyến tính quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt Nồng độ (mg/ml) Diện tích đỉnh (mAU.s) 0,0104 350124 0,0208 700128 0,0363 1215377 0,0519 1675804 0,0675 2237895 0,0934 3155002 Kết khảo sát tính tuyến tính xử lý phần mềm Ms – Excel 2010 trắc nghiệm thống kê cho thấy có tương quan tuyến tính diện tích peak nồng độ ciclesonide Kết xử lý thống kê trình bày Bảng 3.19 Bảng 3.19 Kết xử lý thống kê khảo sát tính tuyến tính quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt Thơng số R2 Phương trình hồi quy ŷ = B0x + B Hệ số B0 Giá trị t hệ số B0 Hệ số B Giá trị t hệ số B Giá trị F Giá trị F0,05 Giá trị t0,05 Khoảng nồng độ khảo sát (mg/ml) ciclesonide 0,9991 33548658,3839x - 11103,6742 33548658,3839x 67,9264 - 11103,6742 - 0,4125 4613,999 7,71 2,77 0,0104-0,0934 41 4000000 y = 33548658.3839x - 11103.6742 R² = 0.9991 3000000 2000000 1000000 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 Hình 3.19 Tương quan diện tích peak nồng độ Ciclesonide Nhận xét: Kết xử lý thống kê cho thấy giá trị F thực nghiệm lớn giá trị F0,05 nên phương trình hồi quy tương thích Giá trị t hệ số B0 lớn t0,05 nên hệ số B0 có ý nghĩa Giá trị t hệ số B nhỏ t0,05 nên hệ số B khơng có ý nghĩa Vậy: Phương trình hồi quy tuyến tính ŷ = 33548658,3839x - 11103.6742 (R2 = 0,9991) Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng Bảng 3.20 Kết xác định nồng độ giới hạn LOD Ciclesonide (µg/ml) 100 20 0,8 0,16 0,032 Diện tích peak (mAU.s) 3375624 668344 133206 26788 4955 Khơng có tín hiệu Nhận xét: Nồng độ dung dịch chuẩn 0,16 µg/ml, tỷ lệ tín hiệu độ nhiễu đường S/N = (đạt khoảng từ 2-3) Như vậy, nồng độ 0,16 µg/ml giới hạn phát (LOD) phương pháp Giới hạn định lượng (LOQ) = × LOD = × 0,16 = 0,48 µg/ml Độ lặp lại Chuẩn bị mẫu thử thuốc xịt tiến hành sắc ký HPLC mẫu thu kết Bảng 3.21 42 Bảng 3.21 Độ lặp lại quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt STT Diện tích đỉnh (mAU.s) Hàm lượng ciclesonide (mg/ml) 710578 21,1805 712346 21,2332 713029 21,2536 705844 21,0394 712207 21,2291 709836 21,1584 TB 21,1824 SD 0,0786 % RSD 0,3708 Nhận xét: % RSD nhỏ % Kết luận: Quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt đạt yêu cầu độ lặp lại Độ Kết khảo sát độ quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt trình bày Bảng 3.22 Bảng 3.22 Độ quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt STT Tỷ lệ Lượng CI Lượng CI chuẩn chuẩn cho chuẩn tìm thêm vào (mg) thấy (mg) vào 1,2 2,6607 80 1,2 2,6680 1,2 2,6845 1,5 2,9585 100 1,5 2,9670 1,5 2,9752 1,7 3,1664 120 1,8 3,2558 1,7 3,1722 43 Tỷ lệ hồi Tỷ lệ hồi phục trung % RSD phục (%) bình (%) 98,3597 98,9313 99,4843 98,8940 98,1799 99,2837 99,2239 101,2065 98,8557 99,21 0,83 98,93 0,57 98,79 0,57 Nhận xét: Tham khảo Bảng 2.10 (yêu cầu độ hồi phục RSD tương ứng theo nồng độ chất phân tích), tỷ lệ phục hồi cho phép ciclesonide nằm khoảng 98 – 102 % (do hàm lượng ciclesonide thuốc xịt 21,18 mg/ml) Vậy quy trình định lượng đạt yêu cầu độ Kết luận: Quy trình định lượng ciclesonide thuốc xịt đạt yêu cầu tương thích hệ thống, độ đặc hiệu, tính tuyến tính, độ xác độ ứng dụng để định lượng ciclesonide thuốc xịt 3.1.2.4 Kết định lượng ciclesonide bình Alvesco Kết định lượng ciclesonide thuốc đối chiếu Alvesco trình bày Bảng 3.23 Bảng 3.23 Kết khảo sát hàm lượng ciclesonide bình Alvesco Khối lượng bình trước Bình cắt (g) 15,1060 15,1969 15,1303 15,1243 15,2001 15,1469 TB 15,1508 SD 0,0392 RSD 0,2590 Khối lượng bình sau cắt (g) 9,5061 9,5135 9,5032 9,5013 9,4897 9,5003 9,5024 0,0078 0,0821 Khối lượng thuốc (g) 5,5999 5,6834 5,6271 5,6230 5,7104 5,6466 5,6484 0,0413 0,7310 Diện tích Thể tích peak cồn (ml) (mAU.s) 0,7 710245 0,8 612567 0,7 711237 0,9 539011 0,8 609853 0,8 612870 0,7833 632630,5000 0,0753 66752,4369 9,6099 10,5516 Khối lượng Ciclesonide (g) 0,0148 0,0146 0,0148 0,0145 0,0145 0,0146 0,0146 0,0002 1,0380 3.1.2.5 Khảo sát độ đồng phân liều (DDU) thuốc đối chiếu Thực theo hướng dẫn, sử dụng máy hút chân không, máy điều chỉnh lưu lượng khí copley thiết bị thu hồi thuốc hướng dẫn Kết độ đồng điều hàm lượng thuốc đối chiếu Alvesco trình bày Bảng 3.24 44 Bảng 3.24 Kết khảo sát độ đồng phân liều Alvesco B M E Thời kỳ Bình Bình Bình µg 278,9608 275,6557 262,3419 % 90,3467 91,8436 88,3079 µg 549,2226 537,5085 523,1318 % 88,9380 89,5442 88,0466 µg 409,6906 399,4869 391,5799 % 88,4573 88,7346 87,8741 TB 272,3195 90,1660 536,6210 88,8429 400,2525 88,3553 Dùng Anova yếu tố cho kết P- Value :0,2134 > 0,05, chứng tỏ số liệu khác có khơng có ý nghĩa giá trị thu thập nằm khoảng cho phép QTPP 3.1.2.6 Khảo sát hiệu suất khí động học (APSD) thuốc đối chiếu Thực theo hướng dẫn, sử dụng máy hút chân không, máy điều chỉnh lưu lượng khí copley thiết bị đa tầng Andersen Cascader Kết hiệu suất khí động Alvesco (chi tiết trình bày Phụ lục 1) thể Hình 3.20 35.00% 30.00% 25.00% 20.00% 15.00% 10.00% 5.00% 0.00% M 5,8 4,7 3,3 2,1 1,1 0,7 0,4 Hình 3.20 Kết biểu đồ khảo sát hiệu suất khí động học Alvesco Theo nghiên cứu “From inhaler to lung: clinical implications of the formulations of Ciclesonide and other inhaled corticosteroids”, kết phân bố kích thước khí động học Alvesco thu có phân bố tương ứng với kết nghiên cứu Ciclesonide Ruediger Nave Helgert Mueller36(Hình 3.21) 45 Hình 3.21 Kết nghiên cứu ciclesonide Ruediger Nave Helgert Mueller36 10 y = 0.0747x - 1.0794 0 20 40 60 80 100 Hình 3.22 Đường tuyến tính thuốc Alvesco Từ đường tuyến tính thuốc Alvesco dùng phương pháp nội suy từ đồ thị với đường kính khí động học ≤ µm xác định hình chiếu trung vị tính kết thông số APSD : FPF 71,65, MMAD 2,655 3.1.2.7 Khảo sát mơ hình phun Thực theo hướng dẫn vị trí cách mặt phẳng cm, tiến hành phun đo đường kính mơ hình phun Kết trình bày Hình 3.23 46 Hình 3.23 Khảo sát mơ hình phun Kết quả: Dmax = 1,7 cm, góc phun α = 31,6 o Tóm lại, CQA thuốc đối chiếu Alvesco liệt kê Bảng 3.25 Bảng 3.25 Bảng kết khảo sát thuốc đối chiếu STT Thông số MMAD FPF DDU (B) DDU (M) DDU (E) Dmax Góc phun Kết 2,655 µm 71,65 % 90,17 % 88,84 % 88,36 % 1,7 cm 31,6 o Kết khảo sát thuốc đối chiếu ALVESCO thực nghiệm công thức nhằm xây dựng phương pháp thẩm định xác định thông số mục tiêu cho sản phẩm Từ hướng dẫn ICH Q819, hướng dẫn thiết kế chất lượng cho sản phẩm MDI PDI FDA kết khảo sát thuốc đối chiếu ALVESCO tiêu chuẩn chất lượng thuốc hít phân liều chứa ciclesonide tổng kết Bảng 3.26 47 Bảng 3.26 Bảng tiêu chuẩn chất lượng MDI QTPP Chỉ tiêu Tiêu chuẩn Tương tự dạng bào chế thuốc đối chiếu Dạng bào chế Thuốc hít phân liều Cơng thức Dung dịch Tương tự thuốc đối chiếu Đường dùng Đường hít Tương tự thuốc đối chiếu Hàm lượng 80 mcg/ liều Tương tự thuốc đối chiếu Dược động học Tmax and Cmax Tương đương thuốc đối chiếu Hạn dụng 24 tháng Tương đương tốt thuốc đối chiếu Định lượng 90-110 % MMAD: 2,655µm APSD FPF : 71,65 % UDD 75-125 % Mơ hình Tương đương thuốc phun đối chiếu Thuộc tính quan trọng thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide Bình chứa, van phân liều Bao bì Tương đương thuốc đối chiếu phạm vi đạt hiệu trị liệu Tương đương thuốc đối chiếu Đảm bảo hạn dùng tính tồn vẹn thuốc q trình vận chuyển sử dụng 3.2 XÁC ĐỊNH CƠNG THỨC VÀ QUY TRÌNH TỐI ƯU CHO THUỐC HÍT PHÂN LIỀU CHỨA CICLESONIDE 3.2.1 Xác định cơng thức quy trình tối ưu Xác định cơng thức Với đặc tính tan hồn tồn Ethanol 99 % , kiến thức từ sáng chế :” ổn định công thức dung dịch MDI” số US7018618B2, 28/3/2006 tài liệu sản phẩm Alvesco30,31 Cơng thức đề xuất cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide trình bày Bảng 3.27 Bảng 3.27 Cơng thức thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide STT Thành phần Ciclesonide Ethanol 99 % HFA 134a Vai trị Hoạt chất Dung mơi hịa tan Khí đẩy 48 Thuốc đối chiếu 0,015g - Xác định quy trình Với quy mơ điều kiện phịng nghiệm, quy trình điều chế thuốc hít phân liều chứa ciclesonide lựa chọn nạp lạnh hai giai đoạn15 3.2.2 Nhận diện CMA CPP ảnh hưởng đến CQA đánh giá rủi ro Theo hướng dẫn FDA tài liệu nghiên cứu trước đây, biểu đồ xương cá (Hình 3.24) xây dựng để xác định rủi ro tiềm ẩn ảnh hưởng đến CQA thuốc hít phân liều chứa ciclesonide37,38: Cơng thức Con Người Kỹ Trang Thiết bị Hệ thống làm lạnh Hệ thống trộn API Kinh nghiệm % Ethanol/ % HFA Máy siết van APSD DDU Thời gian trộn Đường kính lỗ phun Tiêu chuẩn bình chứa Thể tích Bình chứa, vòi phun Buồng phân liều Nhiệt độ Siết van Quy trình Hình 3.24 Biểu đồ xương cá CMA ảnh hưởng lên CQA FMEA tiếp tục áp dụng phân tích rủi ro thơng số ảnh hưởng đến CQA thuốc hít phân liều chứa ciclesonide, yếu tố liệt kê đánh giá theo Hình 3.25 sau (chi tiết bảng chấm điểm phụ lục 2)15: 49 90 80 70 60 50 40 30 20 10 Công thức Con người Trang thiết bị Bình chứa, vịi phun Buồng phân liều Cơng Con Trang Bình Buồng Quy thức người thiết bị chứa, phân trình vịi liều phun Quy trình Hình 3.25 Biểu đồ đánh giá yếu tố nguy tác động lên CQA MDI Từ đánh giá theo biểu đồ ta xác định thông số cần kiểm sốt : Cơng thức, quy trình người, nhiên quy mơ phịng thí nghiệm, phương pháp nạp khí cịn thủ cơng nên thơng số qui trình chưa chuẩn hóa, yếu tố cơng thức tập trung phân tích đánh giá Tiến hành đánh giá yếu tố cấu thành nên công thức: Tiêu chuẩn nguyên liệu đầu vào tỷ lệ % Ethanol/ HFA để xác định yếu tố cần kiểm sốt Bảng 3.28 Bảng 3.28 Các yếu tố thuộc cơng thức ảnh hưởng đến CQA MDI CMA Mức độ Tiêu chuẩn nguyên liệu Thấp Tỷ lệ Ethanol / HFA Cao Biện luận Dạng bào chế dung dịch, hoạt chất hịa tan hồn tồn dung mơi nên tiêu chuẩn nguyên liệu đầu vào không ảnh hưởng nhiều đến CQA Tỷ lệ Ethanol/ HFA ảnh hưởng đến yếu tố áp suất, kích thước hạt mịn… từ ảnh hưởng đến CQA Cần phải đánh giá phân tích kỹ 3.2.3 Xây dựng khơng gian thiết kế Một số nghiên cứu cho thấy nồng độ Ethanol thuốc hít phân liều thường chiếm từ 5-20 % w/w công thức dung dịch MDI39,40 Khí đẩy thành phần bắt buộc cơng thức MDI Khí đẩy u cầu khơng độc hại, khơng cháy, tương thích với cơng thức thuốc Khí đẩy u cầu phải tạo áp suất thích hợp để đưa thuốc khỏi hệ thống phân phối đến hệ hô hấp Nồng độ khí đẩy sản phẩm MDI từ 80-95 % 50 Từ nghiên cứu trước tham khảo tài liệu liên quan đến thuốc đối chiếu, tỷ lệ Ethanol HFA lựa chọn để xây dựng không gian thiết kế trình bày theo Bảng 3.2929: Bảng 3.29 Khơng gian thiết kế STT Biến Ethanol HFA 134a Khoảng thiết kế 6-12 % 88-94 % 3.2.4 Thực nghiệm công thức thiết kế 3.2.4.1 Thiết kế thực nghiệm Sử dụng phần mềm Design Expert, đưa khoảng không gian thiết kế biến vào phần mềm với mơ hình phân tích Mixture/Optimal I, sau phân tích phần mềm đưa 13 công thức thực nghiệm sau (Bảng 3.30) Bảng 3.30 Bảng công thức thực nghiệm Công Thức Tỷ lệ Ethanol (%) Tỷ lệ HFA (%) 10 11 12 13 10,5 12 10 12 12 9 7,5 89,5 91 94 88 90 94 88 88 91 91 92 94 92,5 51 KL Ethanol (g) 0,5903 0,5060 0,3373 0,6746 0,5622 0,3373 0,6746 0,6746 0,5060 0,5060 0,4497 0,3373 0,4216 KL HFA (g) 5,0315 5,1158 5,2845 4,9472 5,0596 5,2845 4,9472 4,9472 5,1158 5,1158 5,1721 5,2845 5,2002 3.2.4.2 Tiến hành công thức nghiệm Tiến hành bào chế công thức thực nghiệm, khảo sát số DDU APSD Kết trình bày Bảng 3.31 Bảng 3.31 Kết công thức thực nghiệm Công Thức Tỷ lệ Ethanol (%) Tỷ lệ HFA (%) 10 11 12 13 10,5 12 10 12 12 9 7,5 89,5 91 94 88 90 94 88 88 91 91 92 94 92,5 MMAD FPF DDU (B) DDU (M) DDU ( E) (µm) 4,89 3,61 3,43 4,3 4,55 3,37 4,23 4,11 3,6 3,84 3,75 4,04 4,54 (%) 36,67 59,42 58,36 42,84 37,77 60,82 41,96 45,86 53 50,88 53,08 49,29 40,71 (%) 96,33 87,55 91,04 96,33 89,22 95,01 82,45 81,5 83,74 89,94 84,86 93,68 96,09 (%) 95,09 88,59 84,55 90,22 90,48 93,08 81,02 90,16 94,59 91,05 81,26 87,14 85,82 (%) 83,4 94,41 84,73 90,04 92,79 94,54 89,99 93,95 90,54 86,45 82,98 82,21 83,5 3.2.4.3 Đánh giá ảnh hưởng biến đến thông số APSD, DDU Dữ liệu thực nghiệm sau thu thập đưa vào phần mềm Design Expert phân tích, tùy theo liệu mà phần mềm đưa vào mơ hình ANOVA thích hợp để phân tích Các kết trình bày Bảng 3.32 Bảng 3.32 Bảng kết phân tích liệu thực nghiệm Thơng số Mơ hình ANOVA R2 Adeq Precision F-value p-value Lack of Fit (F-value) Lack of Fit (P-value) Adjusted R² Predicted R² MMAD Quartic 0,9376 16,1656 26,29 0,0003 4,73 0,0704 0,9019 0,7116 FPF Cubic 0,9209 12,5032 23,28 0,0011 0,6739 0,4491 0,8813 0,7972 DDU (B) Linear 0,7835 9,4918 25,33 0,0015 1,09 0,4046 0,7526 0,6861 52 DDU (M) Cubic 0,8984 9,3369 11,79 0,0187 1,49 0,4648 0,8222 0,6060 DDU (E ) Linear 0,8169 8,9425 26,78 0,0021 0,6618 0,6286 0,7864 0,6499 Đường kính khí động học trung vị ( MMAD) Theo phương pháp phân tích ANOVA, mơ hình Quartic phần mềm design Expert đề xuất phù hợp để phân tích ảnh hưởng biến lên kết MMAD Giá trị F- Value 26,29 P- Value 0,0003 < 0,05, mơ hình có ý nghĩa có 0,03% khả xảy nhiễu Giá trị Lack of fit với F-Value 4,73, P-Value 0,0704 không ý nghĩa, điều cho thấy mơ hình lựa chọn biến thiết kế thực nghiệm phù hợp Predicted R² 0,7116 Adjusted R² 0,9019; có khác biệt nhỏ 0,2 hợp lý.Adeq Precision đo tỷ lệ tín hiệu nhiễu Tỷ lệ yêu cầu lớn Tỷ lệ 16,066 cho thấy tín hiệu thích hợp Mơ hình sử dụng để xây dựng không gian thiết kế Tỷ lệ hạt mịn ( FPF) Theo phương pháp phân tích ANOVA, mơ hình Cubic phần mềm design Expert đề xuất phù hợp để phân tích ảnh hưởng biến lên kết Giá trị F-value 23,28, P- Value = 0,0011 < 0,05 mơ hình có ý nghĩa Chỉ có 0,11 % khả xảy nhiễu Giá trị Lack of fit với FValue 0,67, coi không ý nghĩa so với sai số túy, P-Value 0,4491 lớn lý xảy nhiễu Lack of Fit khơng ý nghĩa có lợi tốt cho dự đoán Predicted R² 0,7972 Adjusted R² 0,8813; có khác biệt nhỏ 0,2 hợp lý Adeq Precision 16,066 > cho thấy mơ hình sử dụng để thông qua không gian thiết kế 53 Kết ảnh hưởng lên DDU thời kỳ đầu ( DDU B) Theo phương pháp phân tích ANOVA, mơ hình Linear phần mềm design Expert đề xuất phù hợp để phân tích ảnh hưởng biến lên kết Giá trị F-value 25,33, P- Value 0,0015 < 0,05 mơ hình có ý nghĩa Chỉ có 0,15 % khả xảy nhiễu Giá trị Lack of fit với FValue 1,09 coi không ý nghĩa so với sai số thuần, P-Value 0,4046 lớn xảy nhiễu Lack of Fit khơng ý nghĩa có lợi tốt cho dự đoán Hệ số dự đoán (Predicted R²) 0,6861 hệ số điều chỉnh (Adjusted R²) 0,7526 có khác biệt khơng lớn cho thấy tín hiệu tốt mơ hình Adeq Precision 9,4918 > cho thấy mơ hình sử dụng để thông qua không gian thiết kế Kết ảnh hưởng lên DDU thời kỳ ( DDU M) Theo phương pháp phân tích ANOVA, mơ hình Cubic phần mềm design Expert đề xuất phù hợp để phân tích ảnh hưởng biến lên kết Giá trị F-value 11,79, P- Value= 0,0018 < 0,05 mơ hình có ý nghĩa Chỉ có 1,87 % khả xảy nhiễu Giá trị Lack of fit với FValue 0,6979, coi không ý nghĩa so với sai số túy, P-Value 0,4648 lớn xảy nhiễu Lack of Fit khơng ý nghĩa có lợi tốt cho dự đoán Hệ số dự đoán (Predicted R²) 0,8222 hệ số điều chỉnh (Adjusted R²) 0,6060 có khác biệt lớn cho thấy nhiên chênh lệch không lớn nên không ảnh hưởng đến dự đoán Adeq Precision 9,4918 > 4, cho thấy mơ hình sử dụng để thơng qua không gian thiết kế 54 Kết ảnh hưởng lên DDU thời kỳ ( DDU E) Theo phương pháp phân tích ANOVA, mơ hình Linear phần mềm design Expert đề xuất phù hợp để phân tích ảnh hưởng biến lên kết DDU E Giá trị F value 26,78, P- Value= 0,0021 < 0,05 mơ hình có ý nghĩa Chỉ có 0,21% khả xảy nhiễu Giá trị Lack of fit với FValue 0,6618, coi không ý nghĩa so với sai số thuần, P-Value 0,6286 lớn xảy nhiễu Lack of Fit không ý nghĩa có lợi tốt cho dự đốn Hệ số dự đoán (Predicted R²) 0,7864 hệ số điều chỉnh (Adjusted R²) 0,6499 có khác biệt khơng lớn cho thấy tín hiệu tốt mơ hình Adeq Precision 8,9425 >4 cho thấy mơ hình sử dụng để thông qua không gian thiết kế Sau tổng hợp tất mơ hình, phần mềm đưa dự đoán tác động tỷ lệ Ethanol 99 %/ khí đẩy HFA 134a cơng thức lên thông qua biểu đồ MMAD, FPF biểu đồ DDU thể Hình 3.26, Hình 3.27 55 Hình 3.26 Biểu đồ xu hướng ảnh hưởng tỷ lệ Ethanol/ HFA lên MMAD, FPF Hình 3.27 Biểu đồ xu hướng ảnh hưởng tỷ lệ Ethanol, HFA lên DDU 56 Qua biểu đồ, nhận thấy tỷ lệ Ethanol 99 % công thức tăng dần từ 6-12 % tương ứng với tỷ lệ khí đẩy HFA 134a giảm dần tác động lên CQA thuốc hít phân liều sau: - MMAD: Khi thay đổi tỷ lệ Ethanol/HFA số MMAD có xu hướng tăng giảm theo Tuy nhiên, phần mềm dự đoán MMAD dừng lại không đổi với giá trị MMAD cao 4,2164 tỉ lệ Ethanol cao : 12 %, nồng độ Ethanol giảm đặc biệt xuống % phần mềm dự đoán cho kết khả quan - FPF: Mơ hình dự đốn số FPF giảm tăng tỉ lệ Ethanol, nhiên tỷ lệ FPF cho kết tốt với tỷ lệ % - DDU: Qua biểu đồ cho thấy số DDU nằm phạm vi xây dựng thay đổi tỷ lệ công thức Kết luận: Với kết thực nghiệm có cho thấy cơng thức xây dựng có khoảng khơng gian thiết kế phù hợp để phần mềm phân tích, xác định khoảng khơng gian kiểm sốt từ đưa mơ hình tối ưu cho sản phẩm thuốc hít phân liều chứa ciclesonide 3.2.4.4 Xác định khơng gian thiết kế Phương trình dự đốn đường kính khí động học trung vị (MMAD) : Y= 4,22 X1 + 3,42X2 - 0,5636 X1 X2 + 1,22( X1 X2) ( X1 -X2)+ 20,89 ( X1 X2) ( X1 -X2)2 Phương trình dự đốn tỷ lệ hạt mịn ( FPF) : Y= 43,60 X1 + 59,60X2 + 10,52 X1 X2 – 154,81( X1 X2) ( X1 -X2) Phương trình dự đoán DDU B,M,E : YB= 82,47X1 + 93,22X2 YM= 90,28 X1 + 85,94X2 + 8,9 X1 X2 + 37,84( X1 X2) ( X1 -X2) YE= 90,97X1 + 82,32X2 Từ kết khảo sát thuốc đối chiếu kết từ công thức thực nghiệm tiến hành xây dựng phạm vi thiết kế tiêu chuẩn chất lượng mong muốn cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide trình bày Bảng 3.33 57 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Bảng 3.33 Phạm vi tiêu chuẩn chất lượng mong muốn STT Thơng số Khoảng kiểm sốt Khoảng quy định MMAD < 3,3789 < 5µm FPF 55-60,81 % >55 % DDU (B) 81,50-100 % 80-120 % DDU (M) 84,55-100 % 80-120 % DDU (E) 82,21-100 % 80-120 % Sau đưa phạm vi thiết kế tiêu chuẩn chất lượng mong muốn vào phần mềm, phần mềm Design Expert dự đốn khoảng khơng gian kiểm sốt biến trình bày Bảng 3.34 Bảng 3.34 Khoảng khơng gian kiểm sốt biến STT Mục Khơng gian kiểm soát (%kl/kl) Ethanol 6,05-8,56 % HFA 134a 93,95-91,44 % Với khoảng khơng gian kiểm sốt biến, Phần mềm dự đóan kết mơ tả theo Bảng 3.35 Bảng 3.35 Kết dự đoán CQA đầu phần mềm Solution of Response Predicted Mean 95 % CI low for Mean 95 % CI high for Mean MMAD 3,57489 3,3306 3,81913 FPF 60,819 55,595 66,0423 DDU (B) 93,1296 90,152 96,1069 UDD (M) 85,7397 83,119 88,3597 UDD (E) 82,394 79,744 85,0438 3.2.4.5 Thẩm định mơ hình Để đánh giá độ xác độ tin cậy mơ hình thu được, thử nghiệm xác nhận thực mức trung bình, với cơng thức trình bày Bảng 3.36 58 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Bảng 3.36 Cơng thức tối ưu CICLESONIDE ETHANOL HFA 134a Kl(g) Tỷ lệ Kl(g) Tỷ lệ Kl(g) 0,015 7,3 % 0,4107 92,70 % 5,211 Tiến hành khảo sát độ đồng điều phân liều (DDU) phân bố kích thước khí động học (APSD) sản phẩm bất kỳ, kết trình bày Bảng 3.37 Bảng 3.37 Kết khảo sát sản phẩm BÌNH BÌNH BÌNH MMAD (µm) 3,2782 3,5956 3,352 FPF (%) 58,01 55,39 56,03 TB SD 3,4086 0,17 56,47 1,37 DDU B (%) DDU M (%) DDU E (%) 81,85 82,19 83,08 90,89 89,28 91,59 83,79 92,29 82,21 85,51 4,76 87,92 5,19 85,63 5,18 Sử dụng ANOVA yếu tố để đánh giá độ đồng điều phân liều (DDU) kết : P = 0,055 > 0,05 Chứng tỏ số liệu thu thập khác không ý nghĩa, sản phẩm tối ưu đạt tiêu độ đồng phân liều Kết thu nằm khoảng dự đoán phần mềm, điều cho thấy mơ hình xây dựng với tỷ lệ 95 % dự đốn Tiến hành khảo sát thuộc tính mơ hình phun, kết mơ hình phun thể Hình 3.28 Hình 3.28 Kết mơ hình phun 59 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Kết quả: Dmax = 1,7 cm, góc phun α = 31,6o Đối chiếu với kết thuốc đối chiếu cho thấy khơng có khác biệt, chứng tỏ cơng thức tối ưu có mơ hình phun tương đương thuốc đối chiếu 3.2.4.6 Chiến lược kiểm tra / kiểm soát Theo ICH Q8 (R2), chiến lược kiểm soát thiết kế để đảm bảo sản phẩm có chất lượng yêu cầu sản xuất cách quán Các yếu tố chiến lược kiểm sốt mơ tả giải thích cách thức kiểm sốt ví dụ: kiểm sốt quy trình, nguyên liệu đầu vào (hoạt chất tá dược), sản phẩm trung gian (nguyên liệu trình), hệ thống đóng gói sản phẩm thuốc20 Vì giai đoạn nghiên cứu dược học quy mô phịng thí nghiệm, quy trình cịn thủ cơng nên biện pháp kiểm soát giai đoạn bao gồm: - Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật MDI Cilcesonide, phương pháp đo CQAs thành phẩm liên quan tần suất giám sát kiểm tra - Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật CMAs liên quan công thức - Xác định kiểm tra trình (IPC- In process control) , phương pháp đo CQAs sản phẩm trung gian tần suất giám sát/ kiểm tra - Xác định giới hạn vận hành cho CPPs quy trình pha chế Các thuộc tính thơng số, giới hạn đề xuất cần kiểm sốt sản xuất quy mô công nghiệp liệt kê Bảng 3.38 : 60 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Bảng 3.38 Bảng chiến lược kiểm sốt Giai đoạn Thuộc tính thông số Giới hạn/ tiêu chuẩn nghiên cứu Tiêu chuẩn dược chất, Dược Ethanol Tiêu chuẩn khí đẩy Nguyên liệu ban đầu Hòa tan dược chất Chất liệu bình chứa Đề xuất giới hạn/ tiêu chuẩn cho lơ cơng nghiệp Mục đích việc kiểm sốt Dược Đảm bảo hiệu điều trị Dược Dược Khí đẩy tiêu chuẩn dược an toàn cho người sử dụng Bình nhơm Tương Đảm bảo an tồn, tránh đương thuốc cháy nổ đối chiếu Thể tích van phân liều 25 µl Tương Đảm bảo đồng đương thuốc hàm lượng đối chiếu Đường kính lỗ phun 0,3 mm Tương Đảm bảo hiệu điều đương thuốc trị đối chiếu Tỷ lệ công thức Ethanol: 6,05-8,56 % Ethanol: 6,05-8,56 % Đảm bảo đồng CQA đầu Môi trường (*) (*) Tránh nhiễm vi sinh vật tạp chất, độ ẩm Thời gian (*) (*) Đảm bảo dược chất hịa tan hồn tồn Tỷ lệ cơng thức HFA 134a: 93,95 %91,44 % HFA 134a: 93,95 %91,44 % Đảm bảo đồng CQA đầu Nạp khí đẩy Nhiệt độ 0 C C 61 Đảm bảo khí đẩy ln tình trạng hóa lỏng trình Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh nạp Siết van (*) Thời gian (*) (*) Sự rị rỉ Khơng Khơng Đảm bảo chất lượng sản phẩm Tạp chất (*) < 1% Đảm bảo an tồn q trình sử dụng Vi sinh vật (*) Theo quy định Đảm bảo an tồn q trình sử dụng Trong phạm vi cho phép Tương đương thuốc Đảm bảo chất lượng đối chiếu sản phẩm hiệu điều trị phạm vi cho phép (*) 24 Tháng tốt thuốc đối chiếu Nhiệt độ Kiểm tra thành phẩm Đảm bảo sản phẩm kín, khơng rị rỉ Lực siết van CQA thành phẩm Hạn sử dụng (*) Đảm bảo thời gian đủ nhanh trì nhiệt Đảm bảo Đảm bảo độ tránh thất thoát 0 nhiệt độ C nhiệt độ C thuốc Đảm bảo hạn dùng tính tồn vẹn thuốc q trình vận chuyển sử dụng (*) thông số xác định sau điều chế lô công nghiệp - Cải tiến liên tục sản phẩm: Do lơ labo nên việc cải tiến liên tục khó, triển khai nội dung áp dụng qui mô công nghiệp 62 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 3.3 BÀN LUẬN 3.3.1 Tóm tắt đặc điểm tiêu chuẩn chất lượng kỳ vọng (QTPP) thuộc tính chất lượng quan trọng thuốc hít phân liều Xây dựng mục tiêu chất lượng kỳ vọng cho sản phẩm thuốc hít phân liều (MDI) bước quan trọng nghiên cứu sản phẩm So sánh với kết tổng hợp nghiên cứu trước đây24 cho thấy bảng tóm tắt đặc điểm tiêu chuẩn chất lượng kỳ vọng (QTPP) xây dựng đầy đủ đặc điểm chất lượng sản phẩm MDI QTPP cập nhật, thay đổi q trình cải tiến sản phẩm nhiên cần phải đánh giá ảnh hưởng, đảm bảo đạt yêu cầu chất lượng điều trị an toàn cho người sử dụng Sau phân tích đánh giá nhiều thuộc tính quan trọng (CQA), nhận thấy thuộc tính chất lượng quan trọng là: định lượng, UDD, APSD, mơ hình phun, thuộc tính ảnh hưởng trực tiếp đến chất lượng sản phảm Trong đó, thuộc tính UDD, APSD quan trọng thuộc tính thể hiệu điều trị sản phẩm, thuộc tính cần phải đánh giá thay đổi yếu tố công thức, quy trình Độ đồng hàm lượng phân liều (DDU): Asthma bệnh mãn tính, thời gian sử dụng thuốc kéo dài, thuộc tính DDU giúp cho sản phẩm ln trì hiệu điều trị suốt thời hạn sử dụng sản phẩm Sự đồng hàm lượng đảm bảo cho bệnh nhân đạt nồng độ trị liệu liều sử dụng Kết thuốc đối chiều nằm phạm vi quy định dược điển bắt buộc Phân bố kích thước hạt theo khí động học (APSD): vị trí tác dụng sản phẩm điều trị phổi phụ thuộc lớn yếu tố kích thước hạt tỷ lệ hạt mịn tích lũy Kích thước hạt > µm thường khó xuống sâu xuống phổi, chủ yếu tập trung phần hô hấp Nhiều nghiên cứu cho thấy kích thước hạt MMAD 1-5µm thuốc sâu phần hô hấp 1µm, thuốc tới phế nang41-43 Kết khảo sát Alvesco MMAD: 2,665µm FPF: 71,65%, cho thấy thuốc đối chiếu đảm bảo hiệu điều trị với 71,65 % lượng thuốc sâu vào phần hô hấp 63 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 3.3.2 Xác định cơng thức quy trình tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide 3.3.2.1 Cơng thức quy trình tối ưu thuốc hít phân liều chứa ciclesonide Để đạt mục tiêu chất lượng xác định,thuốc hít phân liều chứa ciclesonide cần phải có cơng thức qui trình sản xuất tối ưu Cơng thức ban đầu cho sản phẩm thuốc hít phân liều chứa ciclesonide dựa đặc tính tan tốt Ethanol 99 % tài liệu nghiên cứu trước thuốc đối chiếu để xây dựng công thức nghiên cứu29,30 Quy trình xây dựng dựa điều kiện, trang thiết bị có thực cịn thủ cơng nên chưa đánh giá, phân tích hết yếu tố rủi ro trình sản xuất, yếu tố cần xem xét đánh giá triển khai sản xuất qui mô lớn 3.3.2.2 Đánh giá yếu tố ảnh hưởng đến thuộc tính chất lượng sản phẩm Đánh giá xác định rủi ro đến chất lượng phát triển sản phẩm nhằm mục đích xác định thuộc tính vật liệu đầu vào (CMA), biến ảnh hưởng thông số quy trình ảnh hưởng đến CQA sản phẩm từ đưa khơng gian kiểm sốt cho yếu tố Phương pháp FMEA cho thấy hai yếu tố ảnh hưởng để thuộc tính chất lượng sản phẩm thuốc hít phân liều MDI cơng thức quy trình Tuy nhiên, quy trình cịn thủ cơng nên tập trung phân tích đánh giá chủ yếu vào yếu tố công thức Các yếu tố thuộc công thức ảnh hưởng đến CQA sản phẩm đánh sau: Dung mơi hịa tan: Ethanol sử dụng cơng thức HFA để tăng khả hịa tan hoạt chất tá dược Ảnh hưởng Ethanol đến độ tan thay đổi đáng kể dựa cấu trúc chất hòa tan Theo Hoye cộng sự, nghiên cứu ảnh hưởng Ethanol đến độ tan 21 hợp chất khác nhau, có logP từ - 0,17 đến 9,85 Kết cho thấy việc bổ sung 20 % Ethanol HFA 134a làm tăng độ tan hợp chất từ 1,3 lần đến 99,4 lần, so với độ tan hợp chất HFA 134a tinh khiết Tuy nhiên, nồng độ Ethanol cao kích thước hạt lớn từ hiệu suất phân phối giảm44 Từ kết thực nghiệm, phần mềm dự đoán tăng nồng độ Ethanol MMAD tăng, tăng nồng độ Ethanol tới 12 % MMAD 4,216µm phần mềm dự đoán MMAD 64 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh mức khơng thể xuống Ngược lại, giảm nồng độ Ethanol, đặc biệt %, phần mềm dự đoán, MMAD có xu hướng giảm kích thước Khí đẩy: Khí đẩy thành phần bắt buộc cơng thức MDI Khí đẩy u cầu khơng độc hại, khơng cháy, tương thích với cơng thức thuốc Khí đẩy u cầu phải tạo áp suất thích hợp để đưa thuốc khỏi hệ thống phân phối đến hệ hô hấp Nồng độ khí đẩy sản phẩm MDI từ 80-95 % Từ kết thực nghiệm thấy rằng: ngược lại với nồng độ Ethanol, tăng nồng độ HFA, MMAD có chiều hướng giảm Từ kết dự đốn, khoảng thiết kế nồng độ Ethanol mở rộng xuống % để tiến tới kết MMAD mong muốn Tuy nhiên, mức độ hòa tan hoạt chất giảm giảm nồng độ Ethanol, tăng nguy không đạt hàm lượng tình trạng kẹt van phân liều Do đó, mở rộng khoảng thiết kế cần đánh giá lại yếu tố ảnh hưởng đến chất lượng 3.3.2.3 Thiết lập khơng gian kiểm sốt đánh giá mơ hình Khơng gian kiểm sốt khoảng khơng gian mà biến ảnh hưởng nằm khoảng không làm thay đổi chất lượng ban đầu xây dựng Từ kết thực nghiệm, khoảng khơng gian kiểm sốt xây dựng từ đề xuất cơng thức tối ưu cho sản phẩm thuốc hít phân liều chứa ciclesonide Sau thực nghiệm lại để đánh giá tính xác dự đốn mơ hình, kết thu bao gồm MMAD: 3,4086µm, FPF: 56,47 %, DDU nằm phạm vi cho phép Các kết nằm khoảng dự đoán phần mềm, điều cho thấy mơ hình thiết kế ban đầu phù hợp cho khả dự đốn xác cao Mặc dù kết APSD công thức tối ưu chênh lệch so với mục tiêu chất lượng xây dựng từ khảo sát thuốc đối chiếu, ngun nhân đến từ quy trình điều chế cịn nhiều yếu tố chưa kiểm sốt: nhiệt độ, độ ẩm kết công thức tối ưu MMAD: 3,408µm, FPF: 56,47 % mơ hình phun tương đương thối đối chiếu, điều cho thấy thuốc sâu vào phần hô hấp với tỷ lệ 56,47 % nên sản phẩm mang lại hiệu điều trị41,43 65 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Theo hướng dẫn QBD mục tiêu cải tiến sản phẩm, nhiên quy mơ phịng nghiệm hạn chế nên mục tiêu thực sau triển khai sau sản xuất thực tế 66 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN 4.1.1 Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide, dựa vào thuốc đối chiếu ALVESCO Áp dụng kiến thức QBD, nghiên cứu, tài liệu hướng dẫn với việc khảo sát thuốc đối chiếu Alvesco, đề tài xây dựng hoàn chỉnh đặc điểm chất lượng kỳ vọng (QTPP) thuộc tính chất lượng quan trọng (CQA) sản phẩm thuốc hít phân liều chứa ciclesonide 4.1.2 Xây dựng công thức qui trình tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa Ciclesonide Từ liệu thiết kế thực nghiệm, yếu tố nguy thuộc công thức (CMA) nhận diện đánh giá phân tích, từ xây dựng khoảng khơng gian kiểm sốt cho yếu tố Tuy nhiên, trang thiết bị hạn chế nên quy trình tối ưu chưa đánh giá xây dựng hồn chỉnh Từ kết có được, cơng thức tối ưu cho thuốc hít phân liều chứa ciclesonide xác định kiểm tra 4.2 ĐỀ NGHỊ - Mở rộng khoảng không gian thiết kế theo hướng giảm tỷ lệ Ethanol xuống % để đánh giá kết thu - Nâng cỡ lô theo dõi độ ổn định, xác định tuổi thọ sản phẩm 67 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh TÀI LIỆU THAM KHẢO WHO Asthma Accessed May 2021, https://www.who.int/news-room/factsheets/detail/asthma Hạnh PTTT, Đồn PTNV Dịch tễ học tình hình kiểm soát hen phế quản người trưởng thành Việt Nam 2010 https://www.benhhen.vn/tintuc/dich-te-hoc-vatinh-hinh-kiem-soat-hen-phe-quan-o-nguoi-truong-thanh-viet-nam-2010.html Gary Laustsen A, BC, PhD Ciclesonide (Alvesco) Approved to Treat Asthma The Nurse Practitioner 2008;33:11-13 Administration USFaD Approved Drug Products with Therapeutic Equivalence Evaluations U.S Food and Drug Administration https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/ob/results_product.cfm?Appl_Type=N &Appl_No=021658#21222 Boulet LP, Drollmann A Fau - Magyar P, Magyar P Fau - Timar M, et al Comparative efficacy of once-daily Ciclesonide and budesonide in the treatment of persistent asthma 2005;(0954-6111) Tài liệu chun mơn “Hướng dẫn chẩn đốn điều trị hen phế quản người lớ n trẻ em  12 tuổi” (2020) Rajan S, Gogtay NJ, Konwar M, Thatte UM The global initiative for asthma guidelines (2019): change in the recommendation for the management of mild asthma based on the SYGMA-2 trial - A critical appraisal Lung India : official organ of Indian Chest Society Mar-Apr 2020;37(2):169-173 doi:10.4103/lungindia.lungindia_308_19 Asthma GIf Asthma Management and Prevention for Adults and Children older than years 2019 Asthma GIf Global Strategy for Asthma Management and Prevention 2020 10 Busse WW, Pedersen S Fau - Pauwels RA, Pauwels Ra Fau - Tan WC, et al The Inhaled Steroid Treatment As Regular Therapy in Early Asthma (Start) study 5year follow-up: effectiveness of early intervention with budesonide in mild persistent asthma (1097-6825 (Electronic)) 11 Pharmacopoeia E Ciclesonide-EP9.0 In: 9.0 E, editor European Pharmacopoeia EP 9.0 ed The European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare (EDQM) 2017 p 2070-71 12 Rxlist Alvesco https://www.rxlist.com/alvesco-drug.htm#description 13 Newman S Principles of metered-dose inhaler design Respiratory care 10/01 2005;50:1177-90 14 Oliveira R, Teixeira S, Silva L, Teixeira J, Antunes H Study of a Pressurized Metered-dose Inhaler Spray Parameters in FluentTM Lecture Notes in Engineering and Computer Science 06/01 2010; 15 Vallorz E, Sheth P, Myrdal P Pressurized Metered Dose Inhaler Technology: Manufacturing AAPS PharmSciTech Apr 29 2019;20(5):177 doi:10.1208/s12249-019-1389-9 16 Guidance for Industry Integration of Dose-Counting Mechanisms into MDI Drug Products (2003) 68 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 17 Ivey JW, Lewis D, Church T, Finlay WH, Vehring R A correlation equation for the mass median aerodynamic diameter of the aerosol emitted by solution metered dose inhalers International Journal of Pharmaceutics 2014/04/25/ 2014;465(1):18-24 doi:https://doi.org/10.1016/j.ijpharm.2014.01.039 18 Pharmaceutical cGMPs for The 21st Century —A Rick-Based Approachn Final Report (2004) 19 Guidance for Industry Q8 Pharmaceutical Development (2006) 20 Guidance for Industry Q8(R2)Pharmaceutical Development 1-9 (2009) 21 Teixeira, Dias JF A quality by design approach on pharmaceutical development of orally disintegrating tablet of Diazepam 2014; 22 C E, L M Quality by Design in Inhalation Product Development 2014;(53):20-22 23 Metered Dose Inhaler (MDI) and Dry Powder Inhaler (DPI) Products Quality Considerations Guidance for Industry (2018) 24 Thorat S, Meshram SM Review on Quality by Designing for Metered Dose Inhaler Product Development 2015: 25 Convention TUSP The United States Pharmacopeial In: 35 USP, editor The United States Pharmacopeial Convention 35 ed U.S.A: U.S Food and Drug Administration; 2012 p 232-253 26 Thiel CG Cascade impactor data and the lognormal distribution: nonlinear regression for a better fit (0894-2684 (Print)):369-378 27 Benjamin Ej Fau - Kroeten JJ, Kroeten Jj Fau - Shek E, Shek E Characterization of spray patterns of inhalation aerosols using thin-layer chromatography (0022-3549) 28 Ravindra K, Chintan VP, Aditee CP, Avnish R, Brajesh Kumar T Determination of Spray Pattern and Plume Geometry of Combined Budesonide and Formoterol Fumarate pressurized Metered Dose Inhalation Aerosol International Journal of Pharmaceutical Sciences and Drug Research 11/30 2020;12(6)doi:10.25004/IJPSDR.2020.120605 29 Cipla ciclohale 80/160 inhaler (Ciclesonide) 30 Clinical review : alvesco (2007) 31 Stable pharmaceutical solution formulations for pressurized metered dose inhalers (2006) 32 Jain S Quality by design (QBD): A comprehensive understanding of implementation and challenges in pharmaceuticals development International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 01/01 2014;6:29-35 33 Fukuda I, Pinto C, Moreira C, Saviano A, Lourenỗo F Design of Experiments (DoE) applied to Pharmaceutical and Analytical Quality by Design (QbD) Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences 11/08 2018;54doi:10.1590/s2175-97902018000001006 34 Guidance for Industry Q9 Quality Risk Management 1-21 (2006) 35 Sallam ASAN Design of Experiments for the Development of Inhalational Products In: Beg S, ed Design of Experiments for Pharmaceutical Product Development: Volume II : Applications and Practical Case studies Springer Singapore; 2021:97-115 69 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 36 Nave R, Mueller H From inhaler to lung: Clinical implications of the formulations of Ciclesonide and other inhaled corticosteroids International journal of general medicine 03/07 2013;6:99-107 doi:10.2147/IJGM.S39134 37 Kundoor V, Dalby RN Effect of formulation- and administration-related variables on deposition pattern of nasal spray pumps evaluated using a nasal cast Pharm Res Aug 2011;28(8):1895-904 doi:10.1007/s11095-011-0417-6 38 Nasal Spray and Inhalation Solution, Suspension, and Spray Drug Products — Chemistry, Manufacturing, and Controls Documentation (2002) 39 Ivey J, Vehring R, Finlay W Understanding pressurized metered dose inhaler performance Expert opinion on drug delivery 12/13 2014;12:1-16 doi:10.1517/17425247.2015.984683 40 Gupta A, Stein SW, Myrdal PB Balancing Ethanol cosolvent concentration with product performance in 134a-based pressurized metered dose inhalers J Aerosol Med Summer 2003;16(2):167-74 doi:10.1089/089426803321919924 41 Costa-Gouveia J, Aínsa JA, Brodin P, Lucía A How can nanoparticles contribute to antituberculosis therapy? Drug Discov Today Mar 2017;22(3):600607 doi:10.1016/j.drudis.2017.01.011 42 Vanbever R, Mintzes JD, Wang J, et al Formulation and physical characterization of large porous particles for inhalation Pharm Res Nov 1999;16(11):1735-42 doi:10.1023/a:1018910200420 43 Finlay WH, Stapleton KW, Zuberbuhler P Fine particle fraction as a measure of mass depositing in the lung during inhalation of nearly isotonic nebulized aerosols Journal of Aerosol Science 1997/10/01/ 1997;28(7):1301-1309 doi:https://doi.org/10.1016/S0021-8502(97)00017-7 44 Hoye JA, Myrdal PB Measurement and correlation of solute solubility in HFA-134a/Ethanol systems Int J Pharm Oct 2008;362(1-2):184-8 doi:10.1016/j.ijpharm.2008.06.020 70 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC Phụ lục Phụ lục Phụ lục Kết khảo sát phân bố kích thước hạt theo khí động học Alvesco Phụ lục COA chất chuẩn Ciclesonide Phụ lục COA nguyên liệu Ciclesonide Phụ lục COA khí đẩy HFA- 134a Phụ lục COA Ethanol 99% .7 Phụ lục COA Bình xịt, van phân liều, vòi xịt Phụ lục Sắc ký đồ thẩm định quy trình định lượng Ciclesonide thuốc xịt phân liều Alvesco Phụ lục 10 Sắc ký đồ định lượng bình thuốc xịt phân liều Alvesco .10 Phụ lục 11 Sắc ký đồ khảo sát DDU bình thuốc xịt phân liều Alvesco 11 Phụ lục 12 Kết khảo sát APSD thuốc xịt phân liều Alvesco 12 Phụ lục 13 Kết khảo sát DDU 13 công thức bào chế thuốc xịt phân liều 13 Phụ lục 14 Kết khảo sát APSD 13 công thức bào chế thuốc xịt phân liều 14 Phụ lục 15 Kết DDU công thức bào chế tối ưu 15 Phụ lục 16 Kết APSD công thức tối ưu 16 71 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục Công Thức 10 11 12 13 Tỷ lệ Ethanol (%) 10,5 12 10 12 12 9 7,5 Tỷ lệ HFA (%) 89,5 91 94 88 90 94 88 88 91 91 92 94 92,5 Ciclesonide (g) Ethanol (g) 0,0154 0,0157 0,0157 0,0155 0,0163 0,0158 0,0159 0,0151 0,0155 0,0156 0,0156 0,015 0,015 0,5214 0,5106 0,3392 0,6876 0,5682 0,3401 0,6869 0,6889 0,5214 0,5120 0,4520 0,3377 0,4233 HFA (g) 5,2358 5,1206 5,3945 5,0210 5,1506 5,4254 5,0210 5,0706 5,2358 5,1568 5,2013 5,3228 5,3202 KL TỔNG 5,7726 5,6469 5,7494 5,7241 5,7351 5,7813 5,7238 5,7746 5,7727 5,6844 5,6689 5,6755 5,7585 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục Các quy trình Mức độ bào chế (S) Khả Sác xuất Điểm phát (D) (P) (S x D x P) Mức độ Cao Công thức 5 75 Con người 3 36 bình Trang thiết bị 24 Thấp 1 Thấp 2 12 Thấp 4 80 Cao Trung Bình chứa, vịi phun Buồng liều Quy trình phân Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục Kết khảo sát phân bố kích thước hạt theo khí động học Alvesco Tầng Kích thước lỗ tầng (µm) Khối lượng bột lưu giữ tầng (mg) (n=2) Khối lượng bột tích lũy (mg)(n=2) Phần trăm bột tích lũy (%)(n=2) Tầng Tầng Tầng Tầng Tầng Tầng Tầng Tầng 0,4 0,7 1,1 2,1 3,3 4,7 5,8 14,51 ± 0,00014 14,51 ± 0,0006 27,28 ±0,0007 44,31 ± 0,0002 9,07 ± 0,00004 0,92 ± 0,00001 0,37 ± 0,00002 0,48 ± 0,00004 14,51 ± 0,0001 41,79 ± 0,0007 86,10 ± 0,00002 95,17 ± 0,0002 96,09 ± 0,0002 96,46 ± 0,0002 96,94 ± 0,0003 134,10 ± 0,0003 10,82 ± 0,01 31,16 ± 0,05 64,20 ± 0,01 70,97 ± 0,03 71,65 ± 0,04 71,93 ± 0,04 72,28 ± 0,04 100,00 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục COA chất chuẩn Ciclesonide Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục COA nguyên liệu Ciclesonide Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC COA KHÍ ĐẨY HFA- 134A Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh XIAMEN JUDA CHEMICAL & EQUIPMENT CO.,LTD CERTIFICATE OF ANALYSIS PHARMA-AEROSOL HFA-134A Product: HFA-134A Pharma Inspection Date: 15/07/2022 Batch No: 2022071502 Standard: Q/JHGF:01J 20 209-2013 Tank No TLU1020111 Shelf Life: years Quantity:18000KGS 项目 Items 指标 Index 检验结果 Results 0.0005 N/D 0.0005 N/D 0.009 N/D 0.0005 N/D 0.0005 N/D 0.0003 N/D 四氟一氯乙烷 （HCFC-124）ω/% ≤ 0.0003 N/D 二氟二氯乙烯 （CFC-1112a）ω/% ≤ 0.0005 N/D 0.0005 N/D 0.0005 N/D 0.0005 N/D 0.0005 N/D 0.0003 N/D 五氟丙烷 (HFC-245cb）ω/% ≤ 0.0005 N/D 二氯甲烷 （HCC-30）ω/% ≤ 0.0005 N/D 0.0005 N/D 0.0003 N/D 0.0003 N/D 0.0005 N/D 其他有机杂质 Other Organic Impurities ω/% ≤ 0.001 N/D 总不饱和物杂质 Total Unsaturated Impurities ω/% ≤ 0.0005 0.0002 四氟乙烯 （HFO-1234yf）ω/% ≤ 二氟一氯乙烯 （HCFC-1122）ω/% ≤ 1,1,2,2- 四 氟 乙 烷 （HFC-134）ω/% ≤ 二氟一氯一溴甲烷 （CFC-12B1）ω/% ≤ 1,1-二氟乙烷 （HFC-152a）ω/% ≤ 四氟二氯乙烷 （CFC-114a/CFC-114）ω/% ≤ 一氟二氯甲烷 （CFC-11）ω/% ≤ 1,1,1,3,3,3- 六 氟 丙 烷 （HFC-236fa）ω/% ≤ 一氟二氯甲烷 （HCFC-21）ω/% ≤ 相关物质 Related Material Date Date: 15/07/2022 六氟丁烯 （FC-1336mzz）ω/% ≤ 三氟一氯乙烷 （HCFC-133a）ω/% ≤ 三氟二氯乙烷 （HCFC-123）ω/% ≤ 三氟三氯乙烷（CFC-113a） ω/% ≤ 三氟三氯乙烷 （CFC-113）ω/% ≤ 二氟二氯乙烷 （HCFC-132b）ω/% ≤ Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh XIAMEN JUDA CHEMICAL & EQUIPMENT CO.,LTD CERTIFICATE OF ANALYSIS PHARMA-AEROSOL HFA-134A Product: HFA-134A Pharma Inspection Date: 15/07/2022 Batch No: 2022071502 Standard: Q/JHGF:01J 20 209-2013 Tank No TLU1020111 Shelf Life: years Date Date: 15/07/2022 Quantity:18000KGS 项目 Items 指标 Index 检验结果 Results 总未知杂质 Total Unknown Impurities ω/% ≤ 0.0005 N/D 有机杂质总量 Total Organic Impurities ω/% ≤ 0.01 0.0004 结论 Conclusion Qualified 备注 Remark 检验: DaiMeng Inspector 复核: Fu Jihong Review Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 审核:Wei Wei Check Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục COA Ethanol 99% Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC COA BÌNH XỊT, VAN PHÂN LIỀU, VỊI XỊT Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn AEROsOL Cθ 。 ”LTD C飞 RTIFⅡ CAT嚣 oF ANALΥ Sls s ANG A1 UARLlI ă ă NamC Q`丑 Λctu贫 tor 0PCS 迁 廴 n`i汐 θθ 1θ 。 stand鼠 rd Ⅴ猊1v刂 l 1mspectiom Itetu No bur,no di∶ ;Dtrect廴 TQ歇 l∶ I1∶ OK ,F `io le$any m1氵 `1￠ 念e ⅡV兮 riⅡ 筏0,r:「】 spr变 yJ【 仑 CQmoluδ i◆ n TGst lue i/dl { ă ; o 30ă er Diam Del ertng )"fBct lu 0.3 spny Len h Inmer1,iamotÔ r VVhere xed stcm of V e 3.06o3^14:nm 9Ô ;*1ll【 tlFn :。 12ynFtl tnm 41,63Fnn1 29,00-31。 00mFn 29.95rnⅡ R 43‘ 2θ 41,2θ ˉ △θngfh m∷ … -。 。 -— 63,1511tm sp￠ cif【 ′ r)Κ ()Κ — -卜 — catioo§ InⅡ or LeⅡ 芽h【at IⅡ ner Mouth WV∶ dth⒏ t pdIout 21 00ă 23.0 F ll 21 79Fn 14.00 16.00yrttm 14攵 81mm ^ ⒈Ⅰ 万 卜 W蜕 ght oftLe Adopt伫 r ap Alomg With the((∶ ∶ 8.0ˉ 10.0g 亠 EXpedi狂 e,R,ob1ock J t)K ⊥ Rh h吵 q啖渐 ” actuato阝 svgge吼 ion∶ 0ur(冷 mpa【 y低 dcv° ting tt,providc Gu$tomer$诫 ofthe dif犰 mn1per协 FFllancG$ofaσ ◇sol GustORuers tIeed to ot,nd∝ t奄 hc comp⒏ Ⅱ硬破1iψ te斌 b锌 cau犍 Cθ nte众 t.】 n Case◇ f changing the c◇ nqeB1】 should be reapeated￡ 灬0cw, vent of thC , 袄弘拙磊 畦 The actuator“ quaIi违 cd a仓 ￠r Tc蓝 per$on tc锨 is ed `Jnquali妫 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC SẮC KÝ ĐỒ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG CICLESONIDE TRONG THUỐC XỊT PHÂN LIỀU ALVESCO Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:16:41 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ttht1 : : ttht1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-1 : 20 uL : 4/24/2022 2:18:51 PM : 5/15/2022 12:45:35 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.662 PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.662 5.662 Total Area 713458 713458 Number of Theoretical Plate(USP) 3338 3338 Tailing Factor 1.056 1.056 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\ttht1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:28:09 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : mau trang : : mau trang.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-7 : 20 uL : 4/24/2022 3:19:39 PM : 5/15/2022 12:53:44 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time Total Area D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\mau trang.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:33:08 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : mau chuan : : mau chuan.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-9 : 20 uL : 4/24/2022 3:40:15 PM : 5/15/2022 12:58:23 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.670 PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.670 5.670 Total Area 712355 712355 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\mau chuan.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:30:05 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : mau thu : : mau thu.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-8 : 20 uL : 4/24/2022 3:29:57 PM : 5/15/2022 12:55:47 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.678 PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.678 5.678 Total Area 709352 709352 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\mau thu.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:36:01 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : mau thu them chuan : : mau thu them chuan.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-10 : 20 uL : 4/24/2022 3:50:33 PM : 5/15/2022 1:02:25 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.655 PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.655 5.655 Total Area 841256 841256 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\mau thu them chuan.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Chuẩn acid ga 0.50 Purity Curve Zero Line Peak mAU 70.0 0.45 60.0 0.40 0.35 50.0 0.30 40.0 0.25 0.20 30.0 0.15 20.0 0.10 0.05 10.0 0.00 5.4 5.5 5.6 5.7 Mẫu thử btlc Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5.8 5.9 0.0 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Chuẩn acid ga 0.50 Purity Curve Zero Line Peak mAU 70.0 0.45 60.0 0.40 0.35 50.0 0.30 40.0 0.25 0.20 30.0 0.15 20.0 0.10 0.05 10.0 0.00 5.4 5.5 5.6 5.7 Mẫu thử btlc Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5.8 5.9 0.0 5/18/2022 9:37:26 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ttt : : ttt 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 2-1 : 20 uL : 4/24/2022 4:00:51 PM : 5/15/2022 1:03:44 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 80 5.677 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.677 5.677 Total Area 350124 350124 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\ttt 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:39:28 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ttt : : ttt 2.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 2-2 : 20 uL : 4/24/2022 4:11:09 PM : 5/15/2022 1:05:03 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.660 PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.660 5.660 Total Area 700128 700128 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\ttt 2.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:41:30 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ttt : : ttt 3.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 2-3 : 20 uL : 4/24/2022 4:21:27 PM : 5/15/2022 1:06:52 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.668 PDA Multi 243nm,4nm 120 90 60 30 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.668 5.668 Total Area 1215377 1215377 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\ttt 3.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:42:55 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ttt : : ttt 4.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 2-4 : 20 uL : 4/24/2022 4:31:45 PM : 5/15/2022 1:07:39 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 5.673 200 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.673 5.673 Total Area 1675804 1675804 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\ttt 4.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:44:46 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ttt : : ttt 5.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 2-5 : 20 uL : 4/24/2022 4:41:03 PM : 5/15/2022 1:09:33 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.703 PDA Multi 243nm,4nm 240 180 120 60 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.703 5.703 Total Area 2237895 2237895 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\ttt 5.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:47:02 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ttt : : ttt 6.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 2-6 : 20 uL : 4/24/2022 4:51:21 PM : 5/15/2022 1:10:22 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 5.711 400 320 240 80 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.711 5.711 Total Area 3155002 3155002 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\ttt 6.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 3:23:48 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : chuan : : chuan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 5-1 : 20 uL : 4/25/2022 10:35:53 AM : 5/16/2022 2:40:03 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 5.654 400 300 200 100 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.654 5.654 Total Area 3375624 3375624 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\chuan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 9:49:17 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : lap lai : : lap lai 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 3-1 : 20 uL : 4/24/2022 5:01:39 PM : 5/15/2022 1:13:44 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.599 PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.599 5.599 Total Area 710578 710578 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\do lap lai 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 3:03:11 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : dung 80 lan : : dung 80 lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 4-1 : 20 uL : 4/25/2022 9:03:11 AM : 5/16/2022 2:24:12 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.623 PDA Multi 243nm,4nm 200 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.623 5.623 Total Area 1785256 1785256 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\do dung 80 lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 3:08:10 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : dung 100 lan : : dung 100 lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 4-4 : 20 uL : 4/25/2022 9:34:05 AM : 5/16/2022 2:29:03 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.587 PDA Multi 243nm,4nm 200 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.587 5.587 Total Area 1985059 1985059 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\do dung 100 lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/18/2022 3:14:28 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : dung 120 lan : : dung 120 lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 4-7 : 20 uL : 4/25/2022 10:04:59 AM : 5/16/2022 2:35:05 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.603 PDA Multi 243nm,4nm 200 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.603 5.603 Total Area 2124570 2124570 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\do dung 120 lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC 10 SẮC KÝ ĐỒ ĐỊNH LƯỢNG BÌNH THUỐC XỊT PHÂN LIỀU ALVESCO Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/19/2022 1:34:12 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : dl alvesco lan : : dl alvesco lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-1 : 20 uL : 4/26/2022 1:30:05 PM : 5/17/2022 4:41:52 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.766 PDA Multi 243nm,4nm 80 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.766 5.766 Total Area 710245 710245 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\dl alvesco lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC 11 SẮC KÝ ĐỒ KHẢO SÁT DDU CỦA BÌNH THUỐC XỊT PHÂN LIỀU ALVESCO Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/19/2022 7:21:05 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : UDD binh : : UDD binh 2.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-9 : 20 uL : 4/27/2022 6:01:06 PM : 5/17/2022 5:02:37 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 5.584 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.584 5.584 Total Area 935876 935876 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\UDD binh 2.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/19/2022 7:27:48 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : UDD binh : : UDD binh 4.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-12 : 20 uL : 4/27/2022 6:32:00 PM : 5/17/2022 5:17:14 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU 5.677 PDA Multi 243nm,4nm 200 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.677 5.677 Total Area 1842568 1842568 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\UDD binh 4.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5/19/2022 7:35:17 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : UDD binh : : UDD binh 3.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : tham dinh.lcb : 1-15 : 20 uL : 4/27/2022 7:02:54 PM : 5/17/2022 5:29:30 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 5.620 200 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.620 5.620 Total Area 1374457 1374457 D:\LuudulieuHPLC\tham dinh\UDD binh 3.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC 12 KẾT QUẢ KHẢO SÁT APSD CỦA THUỐC XỊT PHÂN LIỀU ALVESCO Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 6/20/2022 1:56:08 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : alvesco tang M lan : : alvesco tang M lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 1-1 : 20 uL : 5/12/2022 7:21:34 AM : 6/18/2022 1:05:12 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 5.589 200 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.589 5.589 Total Area 1207876 1207876 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\alvesco tang M lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 6/20/2022 2:00:17 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : alvesco tang lan : : alvesco tang lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 1-3 : 20 uL : 5/12/2022 7:42:10 AM : 6/18/2022 1:09:12 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 5.615 4.0 3.0 2.0 1.0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.615 5.615 Total Area 24710 24710 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\alvesco tang lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 6/20/2022 2:05:16 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : alvesco tang lan : : alvesco tang lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 1-5 : 20 uL : 5/12/2022 8:02:46 AM : 6/18/2022 1:13:55 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 4.0 3.0 5.633 2.0 1.0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.633 5.633 Total Area 11889 11889 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\alvesco tang lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 6/20/2022 2:10:15 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : alvesco tang lan : : alvesco tang lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 1-7 : 20 uL : 5/12/2022 8:23:22 AM : 6/18/2022 1:17:09 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 4.0 5.641 3.0 2.0 1.0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.641 5.641 Total Area 15909 15909 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\alvesco tang lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC 13 KẾT QUẢ KHẢO SÁT DDU CỦA 13 CÔNG THỨC BÀO CHẾ THUỐC XỊT PHÂN LIỀU Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/11/2022 8:20:44 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : DDU ct1 : : DDU ct1 2.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 2-1 : 20 uL : 5/25/2022 8:12:03 AM : 6/28/2022 3:28:12 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 150 5.608 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.608 5.608 Total Area 518531 518531 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\DDU ct1 2.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/11/2022 8:21:33 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : DDU ct1 : : DDU ct1 4.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 2-2 : 20 uL : 5/25/2022 8:22:21 AM : 6/28/2022 3:30:47 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 5.629 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.629 5.629 Total Area 1023674 1023674 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\DDU ct1 4.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/11/2022 8:22:53 AM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : DDU ct1 : : DDU ct1 3.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 2-3 : 20 uL : 5/25/2022 8:32:39 AM : 6/28/2022 3:32:56 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 5.670 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.670 5.670 Total Area 673345 673345 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\DDU ct1 3.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC 14 KẾT QUẢ KHẢO SÁT APSD CỦA 13 CÔNG THỨC BÀO CHẾ THUỐC XỊT PHÂN LIỀU Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 6/20/2022 2:40:11 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ct1 tang M lan : : ct1 tang M lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 2-1 : 20 uL : 5/13/2022 7:20:36 AM : 6/18/2022 1:45:09 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 150 5.617 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.617 5.617 Total Area 436551 436551 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\ct1 tang M lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 6/20/2022 2:45:19 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ct1 tang lan : : ct1 tang lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 2-3 : 20 uL : 5/13/2022 7:41:12 AM : 6/18/2022 1:48:00 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 8.0 6.0 5.639 4.0 2.0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.639 5.639 Total Area 20666 20666 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\ct1 tang lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 6/20/2022 2:50:02 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : ct1 tang lan : : ct1 tang lan 1.lcd : dieu kien chay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 2-5 : 20 uL : 5/13/2022 8:01:48 AM : 6/18/2022 1:50:17 PM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 8.0 5.655 6.0 4.0 2.0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.655 5.655 Total Area 47029 47029 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\ct1 tang lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC 15 KẾT QUẢ DDU CỦA CÔNG THỨC BÀO CHẾ TỐI ƯU Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/12/2022 3:07:15 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : cttu DDU binh : : cttu DDU binh 2.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 3-4 : 20 uL : 6/15/2022 8:18:16 AM : 6/29/2022 8:03:55 AM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 80 5.590 60 40 20 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.590 5.590 Total Area 400128 400128 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\cttu DDU binh 2.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/12/2022 3:12:56 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : cttu DDU binh : : cttu DDU binh 4.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 3-7 : 20 uL : 6/15/2022 8:49:10 AM : 6/29/2022 8:07:23 AM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 5.645 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.645 5.645 Total Area 803644 803644 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\cttu DDU binh 4.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/12/2022 3:18:05 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : cttu DDU binh : : cttu DDU binh 3.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 3-10 : 20 uL : 6/15/2022 9:20:04 AM : 6/29/2022 8:24:37 AM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 5.679 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.679 5.679 Total Area 609209 609209 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\cttu DDU binh 3.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC 16 KẾT QUẢ APSD CỦA CÔNG THỨC TỐI ƯU Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/13/2022 3:20:56 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : APSD binh tang M lan : : APSD binh tang M lan 1.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 4-1 : 20 uL : 6/16/2022 9:15:08 AM : 6/30/2022 8:30:56 AM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 200 5.650 150 100 50 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.650 5.650 Total Area 636822 636822 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\APSD binh tang M lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/13/2022 3:30:58 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : APSD binh tang lan : : APSD binh tang lan 1.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 4-7 : 20 uL : 6/16/2022 10:16:56 AM : 6/30/2022 8:42:48 AM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 8.0 5.509 6.0 4.0 2.0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.509 5.509 Total Area 45551 45551 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\APSD binh tang lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 7/13/2022 3:39:02 PM Page / Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Analysis Report Sample Name Sample ID Data Filename Method Filename Batch Filename Vial # Injection Volume Date Acquired Date Processed : APSD binh tang lan : : APSD binh tang lan 1.lcd : dieu kien hay ciclesonide.lcm : khao sat.lcb : 4-13 : 20 uL : 6/16/2022 11:18:44 AM : 6/30/2022 8:58:23 AM Sample Type : Unknown Acquired by Processed by : System Administrator : System Administrator mAU PDA Multi 243nm,4nm 4.0 3.0 5.570 2.0 1.0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 PDA Ch1 243nm Peak# Ret Time 5.570 5.570 Total Area 9150 9150 D:\LuudulieuHPLC\khao sat\APSD binh tang lan 1.lcd Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn