Thông tin tài liệu
ĐẠI HỌC HUE TRUONG DAI HQC SƯ PHẠM els VO MINH KHUE PHAN LAP VA THU HOAT TINH GAY DOC TE BAO UNG THU CUA MOT SO HOP CHAT TU’ CAY TOI DA LE TRE (ASPIDISTRA LETREAE) LUAN VAN THAC SI HOA HQC THEO DINH HUONG NGHIEN CUU Thừa Thiên Huế, năm 2019 ĐẠI HỌC HUE TRUONG DAI HQC SU PHAM els VO MINH KHUE PHAN LAP VA THU HOAT TINH GAY DOC TE BAO UNG THU CUA MOT SO HOP CHAT TU" CAY TOI DA LE TRE (ASPIDISTRA LETREAE) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC THEO ĐỊNH HƯỚNG NGHIÊN CỨU NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS HÒ VIỆT ĐỨC Thừa Thiên Huế, năm 2019 LỜI CAM DOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, số liệu kết nghiên cứu ghỉ luận văn trung thực, đồng tác giả cho phép sử dụng chưa cơng bó cơng trình khác Hộ tên tác giả Võ Minh Khuê ii LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập, nghiên cứu thực luận văn, nhận giúp đỡ quý báu, nhiệt tình nhiều thầy giáo, chun gia nhiều lĩnh vực, anh chị, bạn bẻ gia đình Trước hết, tơi xin cl ân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu, phòng Đào tạo sau Đại học Trường Đại học Sư phạm Huế Trường Đại học Y Dược Huế, cảm ơn giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi thầy cô, anh chị cơng tác Phịng Nghiên cứu Hop chat thiên nhiên - Khoa Dược - Trường Đại học Y Dược Huế quãng thời gian học tập thực luận văn Tôi xin chân thành cám ơn tập thể cán phịng Thử nghiệm hoạt tính sinh học - Viện Công nghệ Sinh học - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam giúp tơi thử nghiệm hoạt tính sinh học 'Với lịng kính trọng biết sâu sắc, xin gởi lời cảm ơn chân thành đến TS Hồ Việt Đức, người tân tình hướng dẫn, hết long chi bảo, quan tâm tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu, Cuối lời cảm ơn sâu sắc nhất, tơi muốn gởi đến gia đình, anh chị, bạn bè, người đồng hành, động viên suốt trình học tập nghiên cứu, công việc sống Một nữa, xin chân thành cảm ơn! Huế, thắng 1] năm 2019 Võ Minh Khuê li MỤC LỤC LOI CAM DOAN LỚI CẢM ƠN oo ii cước iii MUC LUC _ DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TÁT s: DANH MỤC CÁC BẢNG - DANH MỤC CÁC HÌNH VỀ - MO BAU (CHUONG — reseed TONG QUAN 1.1 VAL TRO CUA HOP CHAT THIEN NHIEN TRONG NGHIEN CUU VA PHAT TRIEN THUOC 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CHI ASPIDISTRA G6 TRONG NƯỚC VÀ TREN THE GIỚI 1.2.1 Các nghiên cứu v Aspidistra & Vigt Nam 9 1.2.2 Các nghiên cứu thành phần hóa học 4spi4istra thể giới 1.2.3 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học 4spiđiszd 1? 1.3 GIỚI THIỆU SƠ LƯỢC VỀ CÂY TỎI ĐÁ LÊ TRẺ, 19 CHƯƠNG ĐÔI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU —.: 2.1 ĐÔI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 21 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Phương pháp thu thập, xử lý mẫu, xác định tên khoa học mẫu thu thập 22 2.2.2 Phương pháp nghiên cứu chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất 22 2.2.3 Phuong pháp đánh giá hoạt tính kháng ung thư dịch chiết chất phân lập 'CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KÉT QUÁ NGHIÊN CỨU 3.1 XỬ LÝ MẪU VÀ CHUẨN BỊ CÁC CAO CHIET 3.2 QUÁ TRÌNH PHÂN LẬP CÁC HỢP CHÁT seo 22 2ổ 25 25 3.3 THỨ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BAO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ HỢP CHAT DA PHAN LẬP 27 (CHUONG BAN LUAN 29 4.1 XAC DINH CAU TRUC HOA HOC CUA CAC CHAT DA PHAN LẬP 29 4.1.1 Hợp chất ALI: 2H-chromen-2-one 29 4.1.2 Hợp chất AL2: ø-tocopherol .2222 122222022211 32 4.1.3 Hợp chất ALE4: (255)-Spirost-1/,3ø,5/-triolL „34 4.2 DANH GIA HOAT TINH GAY DOC TE BAO UNG THU CUA CAC "HỢP CHAT DA PHAN LAP Al KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ 42 1.KẾT LUẬN Về thành phần hóa học 42 Về hoạt tính sinh học 1L KIÊN NGHỊ TÀI LIÊU THAM KHAO — PHỤ LỤC Phụ lục 1: CÁC PHÔ CỦA HỢP CHÁT ALI Phụ lục 2: CÁC PHÔ CỦA HỢP CHÁT AL2 Phu luc 3: CAC PHO CUA HOP CHAT ALE4 42 DANH MỤC CÁC KY HIEU VA CHU VIET TAT CNMR Carbon-13 Nuclear Magnetic | Resonance Spectroscopy Pho cOng hudng từ hạt nhân carbon 13 TENMR | Proton Nuclear Magnetic Resonance | Pho cong hugng tir hat ahan Spectroscop proton CH:CI:——[Diehloromethane ; ae cosy Correlation Spectroscopy me tương tác hai chiêu TH DMSO——[Dimahyhulfoxidk EtOAc | Ethyl acetate Hela Human cervix carcinoma HepG2 — [Humanhepatoceliulareareimoma TMB C Heteronuclear Multiple Bond , Correlation HMQC | Heteronuclear Multiple Quantum — Coherence n QC Heteronuelear Single Quantum Coherence TEs Tnhibitory Concentration 50% J (Hz) J coupling constant MBC Minimum Bactericidal Concentration | MDAMB- | ruman breast carcinoma MeOH — [Melhanol MIC Minimum Inhibitory Concentration Human stomach gastric MKN-7 | adenocarcinoma NHH2T3 — | Tếbào lành Norsy | Nur Overnuser Eee pectroscop oD Optical Density SK-LU-T | Human lung carcinoma’ SRB Sulforhodamine B Š (ppm) (ppm = part per million) Ung thư cổ từ cung người |Ungthưganởngười Phổ tươngme táctic didị hạt nhân qua nhiều liên kết [Phôtươngtiedihatnhin qua nhiều liên kết Pho twong tic dj hat ahan qua mộtrong liêntae kếtd "Nông độ ức chế 50% Hing số th tinh bồng NOR8 49 di6t Khuan 101 Ung thu vú người |Nöng độ ức chế thiếu , Ung thu dày người Nguyên bào sợi phôi chuột Phé NOESY Mat dd quang Ung thư phối người Độ dịch chuyển hóa học tính phân triệu Ghhỉ chú: Tên phương pháp phổ, dòng tế bào, hợp chát, lớp chất, nhóm thế, chức hóa học viết theo nguyên Tiếng Anh để đảm bảo tính thống xác DANH MUC CAC BANG Bảng 1.1 Thành phần hóa học Aspidisira sichuanensis (được xác định bằng, UPLC/Q-TOF MS) - ¬ Bang 1.2 Hoat tinh khang vi sinh vat cua Aspidistra elatior 17 Bang 3.1 Két qua thir nghiém kha nang gay déc té bao cita cdc mau nghién ciru 28 Bang 4.1 Số ligu phé NMR cua hop chit ALI va hop chit tham khao _ Bang 4.2 Số liệu phô NMR hợp chất AL2 hợp chất tham khảo Bang 4.3 Số liệu phổ NMR hợp chất ALE4 hợp chất tham khảo 34 38 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hình 2.1 Cây Tỏi đá lê trễ Hình 2.2 Hoa thân rễ Tỏi đá lê trễ Hình 3.1 Sơ đồ chiết phân đoạn từ bột Toi đá lê trễ Hình 3.2 Sơ đồ phân lập chất từ phân đoạn a-hexane Tỏi đá lê trễ Hình 3.3 Sơ đồ phân lập chất từ phân đoạn EIOAc Tỏi đá lê trễ Hình 4.1 Phổ 'H-NMR hợp chất ALI Hình 4.2 Phổ '*C-NMR hợp chất ALI Hinh 4.3 Phd HSQC ciia hop chat ALI Hình 4.4 Phổ HMBC hợp chat ALI Hình 4.5 Cấu trúc hóa học hợp chất AL1 phân lập từ Tỏi đá lê trễ Hình 4.6 Phổ 'H-NMR hợp chất AL⁄2 Hình 4.7 Phổ '*C-NMR hợp chất AL2 Hình 4.8 Cấu trúc hóa học hợp chất AL2 phân lập từ Tỏi đá lê trễ Hình 4.9 Phổ 'H-NMR hợp chất ALE4 Hình 4.10 Phơ 'C-NMR hợp chất ALE4 22s Hình 4.11 Phổ COSY hợp chất ALE4 Hình Hình Hình Hình 4.12 4.13 4.14 4.15 Phổ Phổ Các Phổ HMBC hợp chất ALE4 HSQC hợp chất AL.E4 tương tác NOESY hợp chất AI.E4 NOESY hợp chất ALE4 Hình 4.16 Cấu trúc hóa học hợp chất ALE4 phân lập từ Tỏi đá lê trễ 21 21 25 26 27 29 30 30 31 32 33 33 34 35 36 37 37 39 39 40 MỞ ĐẦU 'Bệnh ung thư ngày gia tăng nhanh chóng, khủng hoảng thực cho sức khỏe cộng đồng thách thức lớn cho hệ thống y tế toàn giới Tại nước phát triển, ung thư nguyên nhân gây tử vong thứ hai sau tim mạch Theo thông báo WHO ung thư công bố năm 2012, năm tồn giới có khoảng 14,1 triệu ca mắc có đến 8,2 triệu ca tử vong bệnh ung thư Trong số đó, trường hợp tử vong nước phát triển chiếm khoảng 70% Dự báo hai thập kỷ tới số ca tử vong bệnh lên đến 13 triệu số ca mắc tăng thêm khoảng 22 triệu [15] Riêng Việt Nam, có khoảng 125.000 trường hợp mắc khoảng 94.700 người chết ung thư năm [2],[14] Hiện có nhiều phương pháp điều trị ung thư bao gồm phương pháp truyền thống (phẫu thuật, hóa trị, xạ trị) phương pháp (ding thuốc điều trị thử nghiệm lâm sàng) phương pháp thường gây nhí tác dụng phụ, ảnh hưởng đến thé Vì năm gần đây, nhà nghiên cứu có xu hướng tìm kiếm loại thảo dược có nguồn gốc tự nhiên để điều trị ung thư an toàn với thê Chi Toi rimg (Aspidistra) duge phat lần vào năm 1822 Nhưng năm 1911 có 11 lồi mơ tả giới Ở Việt Nam, bị quên lãng thời gian dài Đến cuối kỉ 20, có loài 4spidistrz ghi nhận lãnh thổ nước ta Tuy nhiên, thập niên qua số loài 4spidistra hệ thực vật Việt Nam phát thêm, với 43 lồi phát mơ tả (chiếm 1⁄3 tổng số loài 4spidistra giới) [1][34] Do vậy, Việt Nam xem trung tâm đa dạng bậc 4spidisra Nhiều loài 4spiđis:ra sử dụng y học cổ truyền để làm thuốc bổ, chữa long đờm, lợi tiểu, chữa gãy xương, tắc nghẽn động mạch, giải độc rắn cắn Các nghiên cứu dược lý đại chứng minh nhiều nhóm hợp chất tách tir chi (lectin, homoisoflavone, steroidal saponin) sở hữu nhiều hoạt tính quý kháng virus, kháng u, kháng viêm, kháng nắm, kháng khuẩn Đặc biệt số steroidal saponin thể tác dụng ức chế gần hồn tồn với q trình chép virus HIV, hứa hẹn phát triển thành thuốc chữa HIV tương
Ngày đăng: 02/08/2023, 05:44
Xem thêm:
