Luận văn Thạc sĩ Hóa học: Nghiên cứu sử dụng điện cực cacbon biến tính bằng graphen oxit dạng khử để xác định một số hợp chất hữu cơ bằng phương pháp von-ampe hoà tan

BỘ GIÁO DỤC VẢ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC HUẾ TRU DAI HOC SU PHAM HOANG TRON! NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG ĐIỆN CỰC CACBON BIẾN TÍNH BẢNG GRAPHEN OXIT DẠNG KHỬ ĐỀ XÁC ĐỊNH MỘT SÓ HỢP CHÁT HỮU CƠ BANGPHUONG PHAP VON-AMPE HOA TAN CHUYEN NGANH: HOA PHAN TICH Mà SỐ: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYEN HAI PHONG Thira Thién Hué, nim 2018 LỜI CAM DOAN ‘Toi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, số liệu kết nghiên cứu nêu luận văn trung thực, đồng tác giả cho phép sử dụng chưa công bố bắt kì cơng trình khác Tác giả Hồng Trọng Nhân _LỜI CÁM ƠN _ Miững lời dù Liên Irong luận Văn này.„ xin bày tỏ ‘thd hod than lun vt bs ng cba minh, Xin chin thành cảm ơn thầy khoa Hóa học , mơn ợi đễ tối hồn thành tốt luận “Xin chân thàcảm nhơn thầy cô môn Hóa Phân Tich, phong thi nghiém Hoa hoe Ứng dụng tường Đại Học Khoa Học _tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận _Xin chân thành cảm ơn NCS Trần Thanh Tâm Tồn i tận tình bảo giúp đỡ tơi wong q tình làm thực nghiệm “Củối xi gửi lời cảm ơn gia đìvành bạn bè tơi động viên giúp đờ vật chắt lẫn tinh thần thời gian thực "uận văn “Thửa Thiên Huế, th10án năm 2018 g MỤC LỤC ~ Trang phụ bìa - Lời cam đoạn ~ Lời cám ơn MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ TU VIET TAT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VỀ, ĐỎ THỊ " MO DAU " 12 13 l3 1" l3 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tượng phạm vi nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Cấu trúc luận văn CHƯƠNG I TONG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ PHƯƠNG : TH HH HH HH HH Hee PHÁP VON - AMPE HÒA TAN ANOT 15 1§ 1.1.1 Nguyên tắc 15 1.1.2 Các kỹ thuật ghỉ đường von-ampe hỏa tan anot 16 1.1.3 Điện cực sử dụng phương pháp von-ampe hoà tan 18 1.2 GIGI THIEU VAT LIEU GRAPHEN 19 1.2.1 Vat liệu graphen s2 222 2222112211101 19 1.2.2 Các phương pháp tổng hợp graphen oxit dạng khử 21 1.3 SƠ LƯỢC VỀ PARACETAMOL (PA) 23 1.3.1 Giới thiệu vé Paracetamol Ẻ_ờ 23 1.3.2 Ảnh hưởng PA đến sức khỏe người 24 1.4 SƠ LƯỢC VỀ AXIT ASCORBIC (AA) 25 1.4.1 Giới thigu vé axit ascorbic 25 1.4.2 Ảnh hưởng axit ascorbic đến sức khỏe người 25 1.5 SƠ LƯỢC VỀ CAFFEIN (CA) 5221221111211 26 1.5.1 Giới thiệu Caffein 26 1.5.2 Tác động CA thể người 26 1.6 CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC BINH PARACETAMOL, AXIT ASCORBIC VÀ CAFFEIN _cosrnenensennenenen 27 1.6.1 Phương pháp phân tích quang phổ 1.6.2 Phương pháp phân tích sắc ký 21 "——.-` 1.6.3 Phương pháp phân tích điện hóa 29 'CHƯƠNG NỘI DỰNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 NOI DUNG NGHIEN CUU 31 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.2.1 Chuẩn bị điện cực làm việc 31 3.2.2 Phương pháp phân tích điện hóa 31 2.2.3 Phương pháp thống kê 33 2.3 THIẾT BỊ, DỤNG CỤ VÀ HÓA CHẤT -—-33 2.3.1 Thiết bị dụng cụ 2.3.2 Hóa chất 33 - nn CHƯƠNG KET QUÁ VÀ THẢO LUẬN 3.1 TÔNG HOP VAT LIÊU GRAPHEN OXIT 3.1.1 Pho FT-IR, wo —1 , need 36 38 3.1.2 Phé XRD 3.2 TONG HOP VAT LIEU RGO 3.3 KHAO SAT ANH HUGNG CUA MOT SO THONG SO KY THUAT SONG VUONG DEN TIN HIEU HOA TAN CUA AXIT ASCORBIC, PARACETAMOL VA CAFFEIN 39 41 3.3.1 Thế làm giàu 41 3.3.2 Thời gian làm giàu 43 3.3.3 Biên độ sóng vng — - 44 45 3.3.4 Tốc độ quét 48 3.4 KHẢO SAT ANH HUONG CUA MOT SO CHAT CAN TRO 3.4.1 Ảnh hưởng số hợp chất hữu 49 3.4.2 Ảnh hưởng số hợp chất vô 33 3.5 ĐÁNH GIÁ ĐỘ TIN CẬY CỦA PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 3.5.1 Độ lặp lại $7 37 3.5.2 Khoảng tuyến tính 58 62 3.5.3 Giới hạn phát độ nhạy (LOD, LOQ) 3.6 AP DUNG PHAN TICH MAU THYC TE 63 3.6.1 Lý lịch mẫu tién trinh phan tich _- 3.6.2 Phân tích mẫu thuốc đánh giá độ phương pháp phan tich 65 68 KẾT LUẬN TÀI LIỆU THAM KHẢO TH HH HH HH HH hờn DANH MỤC CAC KY HIEU VA TU VIET TAT STT “Tiếng Việt Axit ascorbic | Biên độ sóng vuông Caffein | Dang dinh hoa tan _ | Dung dịch đệm phosphat “Tiếng Anh Ascorbic axit Pulse amplitude Caffeine Peak current Phosphate buffersolution AA AE CA PBS | Ping dichtobinson dém Briton- | Britton-Robinson buffersolution | B-RBS | - Điêncwelàmviệc Working electrode WE | Dign cực than thủy tỉnh Glassy carbon electrode GCE Độ lệch chuẩn Standard deviation s 10 | Độ lệch chuẩn tương déi | Relative standard deviation RSD "1 Độ thu hồi 12 | - Giới hạn định lượng 13 | Gigi han pháthiện 14 | Graphene oxit dang khử 15 Paracetamol 16 | 17 Sắc kí lịng hiệu cao Sóng vng Recovery Rev Limit of quantification Limit of detection Reduced graphene oxit Paracetamol LoQ LoD RGO PA _ — HPLC Square Wave «+ SqW 18 Thể làm giàu Accumulation potential Ence 19 Thế đỉnh Peak potential E, Thờigianlàmgiàu Accumulation time thee Tốc độ quét Sweep rate V Anodic stripping voltammetry ASV Cyclic voltammetric cv 20 | 21 22 | Von-ampe héa tan anot 23 Von-ampe vong DANH MUC CAC BANG Bang 3.1.Két qua tng hợp GO từ graphite qua lần khảo sát —- Bang 3.2 Một số peak đặc trưng GO dựa phô FT-IR 37 Bang 3.3 Khoảng cách lớp mang vật liệu 38 Bang 3.4.Các thông số cố định ban đầu phương pháp von-ampe vòng dùng để khử GO thành RGO 2222222222222 — Bang 3.5 Ảnh hưởng làm giàu đến tín hiệu hòa tan AA, PA CA theo phương pháp SqW-ASV series Bảng 3.6.Ảnh hưởng thời gian làm giàu dén tin hiéu hoa tanc see.42 AA, PA CA theo phương pháp SqW-ASV' Bảng 3.7.Ảnh hưởng biên độ sóng vng đến tín hiệu dòng hòa tan AA, PA CA theo phương pháp SqW-ASV 45 Bang 3.8 Ảnh hưởng tốc độ quét đến tín hiệu ch at phân tích theo phương pháp SqW-ASV 46 Bang 3.9 Các điều kiện thí nghiệm thích hợp sử dụng phương pháp SqW-ASV dùng điện cực biến tính (ERGO/GCE) xác định đồng thời AA, PA va CA 48 Bang 3.10.Ảnh hưởng D-glueoseđến Iy AA, PA CA 50 Bang 3.11.Ảnh hưởng axit benzoic dén Ip cia AA, PA va CA 50 Bang 3.12.Ảnh hưởng axit glutamic đến Iy AA, PA va CA $1 Bang 3.13.Anh hưởng axit urie đến Ip cla AA, PA va CA sees.82 Bang 3.14.Ảnh hưởng dopamin đến I; AA, PA CA 52 Bang 3.15 Ảnh hưởng KạCO;đến lạ AA, PA CA — “4 Bang 3.16 Anh hướng ion NaNOsdén Ip cita AA, PA va CA 55 Bang 3.17 Ảnh hưởng ion CaCl;đến l; AA, PA CA 55 Bang 3.18 Ảnh hướng ion (NH,);SO; đến I; AA, PA CA 56 Bang 3.19.Các giá trị I„rp, RSD, RSD¡.khi đo lặp lại nồng độ khác AA, PA CAtheo phương phap SqW-ASV 57 Băng 3.20.Giá trị „mạ AA, PA CA nông độ thém chu an rigng lẻ khác theo phương pháp SqW-ASV 59 Băng 3.21.Giá trị l„xp AA, PA CA nông độ thêm chu ẩn đồng thời khác theo phương phápSqW-ASV 61 Bảng 3.22.LOD, LOQ phương pháp SqW-ASVsử dụng ện cực biến tinh ERGO/GCE 63 Băng 3.23.Lý lịch mẫu thuốc viên nén thị trường Thừa Thiên Huế 64 Bảng 3.24 Kết xác định hàm lượng AA, PA CA sáu mẫu thuốc viên nén 66 Bảng 3.25.Kết đánh giá độ phương pháp SqW -ASV so với phương pháp HPLC phân tích AA, PA CA mẫu thuốc viên nén 67 Bang 3.21.Gié tri I, x cla AA, PA CA nông độ thêm chuẩn đồng thời khác theo phương phápSqW-ASV AA C GM) pm (MA) RSD %) CC (MM) 04 06 022 0321 166 16 08 l0 047 0,541 14 18 02 0110 249 02 PA pm (MA) RSD 0834 230 04 06 1057 1292 105 066 08 10 0741 094 lái 109 l8 22 1098 105 22 26 30 1248 1380 234-26 067 30 38 1676 1,16 38 46 204 168 46 CA Cpe eM) (MA) RSD @9) 02 073 321 207 459 04 06 1194 1652 234 125 1485 1686 071 053 08 10 2096 2520 352 330 1860 2139 1,62 222 14 l8 2903 3225 387 293 097 22 351 248 18326 245 30 3855 4223 205 296 3014 125 38 4,735 3,78 3399 0.7746 5225 12 ĐKTN: bảng 3.9; Giả trị Ip trung bình sau lẫn lặp lại ve Waa “ 4° ae aa TP Tà Soe Ợ Hình 3.22.Các đường SqW-ASV AA, PA CA nồng độ thêm chuẩn đồng thời khác (a); Cácđường hồi quy tuyến tính biểu diễn mồi tương quan ly nồng độ AA, PA CA (b) 61 Khi tiến hành khảo sát thêm chuẩn đồng thời AA,, PA CA, kết thu phương trình hồi quy tuyến tính sau: AA: 1, = (0,07 + 0,02) +(0,45+0,01)C,, 10,996 PA: (0,63 + 0,01) +(1,06+0,01)Cp, r0999 Và 1,=(1,21 + 0,02)+(0,48+0,01)Cra — r=0999 CA (0,30 + 0,02)+(2,24 + 0,03)Cca, ‘Va 1, = (1,87+0,06)+(0,7440,02)Coa 0,999 10,996 Từ kết bảng 3.20, hình 3.21, bảng 3.21 hình 3.22 cho thấy: ~ Tất phương trình hồi quy tuyến tính biểu điển mối tương quan I; nồng độ AA, PA CA có giá trị hệ số tương quan rắt lớn (2 0.997) hai trường hợp thêm riêng lẻ thêm đồng thời chất; ~ Đối với AA trongcả hai trường hợp có phương trình hồi quy tuyến tính Nhưng PA CA có hai đường hối quy tuyến tính, với khoảng nồng độ từ 0,2 đến 1,0 uM có hệ sơ góc (độ nhạy) cao so với khoảng nồng độ từ 1,0 đến 4,6 uM 3.53 Giới phát độ nhay (LOD, LOQ) Xuất phát từ kết khảo sát khoảng tuyến tính, tiến hành xác định giới hạn phát (GHPH) độ nhạy phương pháp SqW-ASV việc thu hẹp khoảng nồng độ AA, PA CA trường hợp thêm chuẩn riêng lẻ thêm đồng thai AA, PA CA tir 0,2 1M đến 1,0 uM.Sau đó, tiến hành xây dựng phương trình hồi quy tuyến tính biểu diễn mối tương quan I„ nồng độ ba chất phân tích kết trình bày Bảng 3.22 Giá trị LOD cia AA , PA CA tương đồng tính tốn theo hai tr dng hop ‘thém chuan riêng lẻ thêm chuan đồng thời Điều chứng tỏ khơng có ảnh hưởng qua lại chất với p nhỏ 0,05 Từ kết xác định LOD LOQcó thể xác định đồng thời AA, PA CA số đối tượng mẫu nghiên cứu Bang 3.22.LOD, LOQ ciia phương pháp SqW-ASVsử dụng di én cực biến tính ERGO/GCE Cách — Chất thêm — phân chấn — tích Thêm AA chun PA ¬ ang | Them AA chiến động - PA đời - CA Thông số bes ats, -0,01+0,01 0,31 + 0,02 0,35 + 0,06 0,07 + 0,02 0,63 + 0,01 0,30 + 0,02 1,74 0,05 280,1 045001 106 #0001 224+0/03 R 0,997 0,998 0,996 0,999 0,999 0/0004 0/0002 0/0001 0/0003 0/0002 0/0002 LoD, uM 0,064 0,040 0,061 007 003 007 LOQ, pM 0,19 -0,26 0,12-1,59 0,18 0,24 0,22 -0,29 0,10~0,13 3.6 AP DUNG PHAN TICH MAU THUC TE 3.6.1 Lý lịch mẫu tiến trình phân tích Sau q trình nghiên cứu xác định điều kiện thích hợp để biến điện cực GCE thông số phương pháp SqW-ASV, tiến hành phân tích đồng thời hàm lượng AA, PA CA trên6 mẫu thuốc dạng viên nén sau: Panadol Extra (của công ty liên doanh dược phẩm Sanofi-Synthelabo); Hapacol Extra (của công ty Trách nhiệm hữu hạn thành viên thuộc công ty phẩm Hậu Giang); Tatanol (của công ty cổ phần Pymepharco); Efffe Paracetamol (của công ty trách ệm hữu hạn thành viên thuộc công ty dược phẩm Hậu Giang); Ameflu đay time C (của công ty cổ pl duge phim OPV); Efferalgan Vitamin C (ciia Laboratoires UPSA - Phap) Lý lịch mẫu trình bay Bang 3.23 Bang 3.23 Lý lịch mẫu thuốc viên nén thị trường Thừa Thiên Huế Mẫu Panadol Extra Hapacol Extra Tatanol Effe Paracetamol Ameflu daytimeC Efferalgan VitaminC Ngày sản xuất | Hạn sử dụng | Ngày lấy mẫu 16174 | 1112015 | 11/11/2018 | 25/3/2018 100715 10/7/2015 03/8/2018 25/3/2018 351708 | 11/10/2016 | 2810/2019 | 25/3/2018 040716 04/07/2016 08/07/2019 25/3/2018 | 531016 | 03/10/2016 | 22/10/2019 | 25/3/2018 100516 10/05/2016 15/05/2019 25/3/2018 Đối với mẫu thuốc dạng viên nén : tiến hành cân viên bắt kì vĩ thuốc (để tinh khối trung bình zụ), sau viên thuốc nghiền mịn cối mã não (mẫu phân tích) Dung dịch chất phân tích chuẩn bị cách cân khối lượng xác định mẫu phân tích (m) hịa tan nước cất lần, q trình hịa tan trợ giúp cách đánh siêu âm 60 phút; Sau tiến hảnh lọc bỏ chất cặn không tan dung dịch định mức đến V, mL (dung dich mẫu) Chất phân tích trong dung dịch mẫu dugc xac dinh bing cach lay V2 (mL) dung dịch mẫu vào bình điện phân chứa đệm B-RBS 0,2 M (pH = 3,2) cho tổng thể tích cuối củng 10 mL Tiến hành phân tích phương pháp SqW- ASV Khối lượng chất phân tích có viên thuốc tính theo cơng thức sau: cy, Mam CEN 10mm, Trong đó: + m: khối lượng chất phân tích có viên thuốc (mg/viên) + C: nồng độ chất phân tích bình điện phân (M) + Vic thé tich dung dịch mẫu (mL) + Vz: thé tich dung dịch mẫu bình điện phân (mL) + M: khéi lugng mol cua chat phan tich + mạ: khối trung bình viên (g) + mị: khối lượng mẫu phân tích (g) 3.6.2 Phân tích mẫu thuốc đánh giá độ phương pháp phân tích 3.6.2.1 Phân tích mẫu thuốc ~ Đối với việc xác định hàm lượng AA, PA CA mẫu thuốcviên nén: tiến hành xác định hàm lượng PA CA 03 (ba) mẫu thuốc Panadol Extra, Hapacol Extra Tatanol; xác định hàm lượng PA CA 03 (ba) mẫu thuốc làEffe Paracetamol, Ameflu day time C Efferalgan Vitamin C Mỗi mẫu tiến hành 03 (ba) lần đo lặp lại Kết trình bày Hình 3.23 Bảng 3.24 Hapacol Extra Tatanol vw Panadol Extra Efffe Paracetamol Ameflu C Efferalgan Vitamin C Hình 3.23.Các đường SqW-ASV sáu mẫu thuốc viên nén Panadol Extra, Hapacol Extra, Tatanol, Effe Paracetamol, Ameflu day time C Efferalgan Vitamin C sau lần thêm chuẩn 65 Bảng 3.24 Kết xác định hàm lượng AA, PA CA sáu mẫu thuốc viên nén Loại thuốc.5 phânChattích mai | my: | mụà»y | mịgESd(n=3) PA | 4907 | 4932 | 4958 | CA | 69 | 657 | 641 PA | 4990 | 5001 | 502.1 | 4932+26 649408 5004416 CA 63,8 64,0 64,040,7 PA 4927 4942 CA 63,8 Efe AA 1946 | Paracetamol PA Panadol Extra Hapacol Extra Tatanol 65,1 490,1 4923421 65,2 64,4407 1871 | 2012 194,347,1 1954 | 2047 | 2009 200,3+4,7 64,3 Eienlgan | AA | 1035 | 93,1 | 982 PA | 4918 | 5011 | 4959 | AA | 1984 | 1913 | 2049 | 98,3453 4963+47 1982268 Vitamin C PA | 3332 | 3290 | 321 3314+22 Ameflu C 3.6.2.2 Đánh giá độ phương pháp SqW-ASV Để đánh giá độ phương pháp SqW-ASV dùng điện cực biến tính ERGO/GCE, tiến hành so sánh với phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC) sáu mẫu thuốc chứa AA, PA CA Panadol Extra, Hapacol Extra , Tatanol, Effe Paracetamol, Ameflu day time C va Efferalgan Vitamin C Két qua trinh bay Bang 3.25 66 Bang 3.25.Két qua đánh giá độ phương pháp SqW-ASV so với phương pháp HPLC phân tích AA, PA CA mẫu thuốc viên nén Loại thuốc Panadol Extra Hapacol Extra Tatanol Effe Paracetamol AmefluC Efferalgan Vitamin C chá,_ Khối lượng chất phân átphận _ Khốilượng chất " tích (mg/vign) shỉ tên nhãn Chả phân (mg/viên) SqW-ASV HPLC PA 500 493.2426 490+1 cA 649208 65805 PA 500 5004416 4961+09 cA 6s 640+0,7 63,6=0,1 PA 300 492332] 492+2 cA 65 644+07 63,7202 AA 200 194.3 +71 18941 PA 200 2003447 201+2 AA 100 983453 961209 PA 500 496.344 494+3 AA 200 1982468 — 195+2 PA 330 3314422 32924 Bang 3.25 trinh bay ham lượng AA, PA CA có thuốc cách sử dụng hai phương pháp SqW-ASV HPLC Phương pháp thống kê ding paired test với mức ý nghĩa = 0.05 sử dụng để đánh giá sai khác kết phân tích hai phương pháp SqW-ASV HPLC Kết cho thấy khối lượng AA, PA CA phân tích phương pháp SqW-ASV không khác mặt thống kê so với phương pháp HPLC (AA: t (2) = 2,65; p = 0,12; PA: t (5) = 2,09; p= 09; CA: t (2) = 2,21; p = 0,16) giá trị ghi nhãn (AA: t (2) = 3,19; p=0,09; PA: t (5) = 2,04; p = 0,10; CA: t (2) = 0,18; p = 0,87) Điều cho thấy kết phân tích hàm lượng AA, PA va CA sáu loại thuốc phương ERGO/GCE cl nhận pháp SqW-ASV dùng điện cực biến KẾT LUẬN Từ nghiên cứu lý thuyết kết thực nghiệm thu nhải giải mục đích luận văn đặt nghiên cứu chế tạo điện cực biến tính ERGO/GCEđể xác định AA, PA CA phương pháp von-ampe hòa tan anot rút số kết luận sau: Đã tiến hành khảo sát điều kiện thực nghiệm cho phương pháp von-ampe hòa tan anot sóng vng xác định AA, PA CA gồm: ~ Thế làm giàu E„ -400 mV thời gian làm giàu tạ 45 s; ~ Tốc độ quét 20 mV.s”; ~ Biên độ xung sóng vng AE 60 mV; Đã đánh giá độ tin cậy phương pháp qua thông số thống kê sau: ~ Độ lặp lại tốt với RSD I„ dao động từ 0,90% đến 2,71%, ~ Giới hạn phát hiện: AA: 0,07 uM giới hạn định lượng từ 022 đến 0,29 AM; PA: 0,03 uM giới hạn định lượng từ 0,10 đến 0,13 uM; CA: 007 uM giới hạn định lượng từ 0,21 đến 0,27uM Tiến hành áp dụng thực tế AA, PA CA mẫu dược phim Panadol Extra, Hapacol Extra , Tatanol, Effe Paracetamol, Ameflu day time C Efferalgan Vitamin C 68 TAI LIEU THAM KHAO Tiếng việt [1] [2] Trần Thúc Bình, Nguyễn Đức Thái (2015), “Xác định paracetamol axit ascorbic dược phẩm phương pháp quang phổ đạo hàm”, 7gp chí phân tích Hóa, Lý Sinh học, 20 (3), tr 29-39 Trin Thúc Bình, Nguyễn Thị Quỳnh Trang, Châu Viết Thạch (2017), “Xác định đồng thời paracetamol cafein hỗn hợp phương pháp trắc quang kết hợp thuật toán lọc Kalman”, ?ạp chí phân tích Hóa, Lý Sinh học, 22 (3), tr 14-21 Tiếng anh [BB] Amiri-Aref M., Raoof J.B., Ojani R (2014), "A highly sensitive electrochemical sensor for simultaneous voltammetric determination of noradrenaline, acetaminophen, xanthine and caffeine based on a flavonoid nanostructured modified glassy carbon electrode", Sensors and Actuators, B: [4] Chemical, Vol.192, pp.634-641 Arvand M., Gholizadeh T.M (2013), "Simultaneous voltammetric determination of tyrosine and paracetamol using a carbon nanotube-graphene nanosheet nanocomposite modified electrode in human blood serum and pharmaceuticals", Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Vol.103, pp.84— [5] Ayala J., Simons K., Kerrigan S (2009), "Quantitative determination of caffeine and alcohol in energy drinks and the potential to produce positive transdermal alcohol concentrations in human subject "Journal of Analytical Toxicology, Vol.33, Iss.1, pp.27-33 [6] de Camargo M.N.L., Santhiago M., Maroneze CM., et al (2016), “Tuning the clectrochemical reduction of graphene oxide: structural correlations towards the electrooxidation of nicotinamide adenine dinucleotide hydride”, Electrochimica Acta, Vol.197, pp.194~199 [7] Cheemalapati S., Palanisamy S., Chen S.M (2013), “Electrochemical 69 determination of isoniazid at electrochemically reduced graphene oxide modified electrode” International Journal of Electrochemical Science, Vol, pp.3953-3962 (8| Chenghang Wang, Chunya Li, Fang Wang, and Changfa Wang, "Covalent Modification of Glassy carbon electrode with L ~ cystein for the determination of Acetaminophen", Microchim Acta 155, pp 365 - 371 I9] Clesceri L S., Greenberg A E., Eaton A D., (1998), “Standard methods ‘for the examination of water and wastewater”, 20 Ed., APHA, USA [10], [11] Dai H, Zhang S, Lin Y., et al (2014), “Amplified electrochemiluminescence of lucigenin triggered by electrochemically reduced graphene oxide and its sensitive detection of bisphenol A”, Analytical Methods, Vol.6, Iss.13, pp.4746-4753 Dang G.H., Vu Y-T-H., Dong Q.A., et al (2015), “Quinoxaline synthesis via oxidative cyclization reaction using metal-organic framework Cu(BDC) as an efficient heterogeneous catalyst”, Applied Catalysis A: General, [12] Vol491, Iss.4, pp.189-195, David V., David LG., Dumitrescu V, "Analysis of eferalgan tablets by first-order derivative uv-spectrophotometry", (n.d.) pp.79-84 [13] Deodhar M.N et al , (2009), “Reverse Phase HPLC method for Determination of Aceclofenac and Paracetamol in table Dosage Forni”, [14] Reseach Chem, Vol 68, pp 37-40 DorrajiP S., Jalali F (2015), “A Nanocomposite of Poly(melamine) and Electrochemically Reduced Graphene Oxide Decorated with Cu Nanoparticles: Application to Simultaneous Determination of Hydroquinone and Catechol”, Journal of The Electrochemical Society, Vol 162 (9), B237 — B244 [IS] Felix F.S., Ferreira L.M.C., Vieira F., et al (2015),"Amperometric determination of promethazine in tablets using an electrochemically reduced graphene oxide modified eleetrode",Vew J Chem., Vol.39, Iss.1, pp.696~ 702 70 [16] Filik H., Cetintas G., Aslihan Avan sensing of acetaminophen on electrochemically reduced graphene oxidenafion [17] A., et al (2013).“Electrochemical composite film modified electrode”/nternational Journal Electrochemical Science, Vol8, Iss.4, pp.5724-S737 Fogg A.G (1994),"Adsorptive of stripping voltammetry or cathodic stripping voltammetry Methods of accumulation and determination in stripping voltammetry", Analytical Proceedings Including Analytical Communications, Vol31, 1ss.10, pp 313 [18] Geim A K and Novoselov K S , (2007), “The rise of graphene”, [19] [20] [21] Nature Materials, Vol 6, pp 183 — 191 Gao X., Jang J., Nagase S (2010),"Hydrazine and Thermal Reduction of Graphene Oxide: Reaction Mechanisms and Design" Journal of Physical Chemistry C, Vol.114, Iss.2, pp.832-842 Horwitz W., Albert R (1997),"The concept of uncertainty as applied to chemical measurements", The Analyst, Vol.122, Iss.6, pp.615-617 Hosseini H., Ahmar H., Dehghani A., et al (2013), “Au-SH-SiO2 nanoparticles supported on metal-organic framework (Au-SH-SiO2@CuMOF) as a sensor for electrocatalytic oxidation and determination of hydrazine” Electrochimica Acta, Vol8, Iss.3, pp.301-309 [22] Huang N.M (2011).*Simple room-temperature preparation of high-yield large-area graphene oxide” International Journal of Nanomedicine, Vol.6, [23] pp.3443-3448 Ikhsan N1, Rameshkumar P., Huang N.M (2016),*Controlled synthesis of reduced graphene oxide supported silver nanoPAticles for selective and sensitive electrochemical detection of 4-nitropheno!”,Electrochimica Acta, Vol.192, pp.392-399 [24] Khan M., Tahir M.N., Adil S.F., et al (2015),"Graphene based metal and metal oxide nanocomposites: synthesis, properties and their applications", J Mater Chem A, VoL3, lss.Ä1, pp.18753~18808 [25] Khoshhesab Z.M (2015),"Simultaneous electrochemical determination of acetaminophen, caffeine and ascorbic acid using a new electrochemical sensor based on CuO-graphene nanocomposite", RSC Advances, Vol, Iss.115, pp.95140-95148 (26 Li S, Deng D-H, electrochemically reduced Pang H., et al (2012),“Preparation of graphene oxide-modified electrode and its application for determination of p-aminophenol” Journal of Solid State D7) [28] Electrochemistry, Vol.16, Iss.9, pp.28§3-2889 Li W, Li L, Wang Z, et al (2001),“12-tungstophosphoric heteropolyaxit anions encapsulated in chemically modified mesoporous silica FSM-16 and its electrocatalytic reduction for nitrite”,Materials Leuers, Vol.49, Iss.3-4, pp.228-234 Lu X of Gold Nanoparticles on Electrochemically Reduced Graphene Oxide for Sensitive Hydrazine Electrochemical [29] (2016),“Electrodeposition Determination in Agriculture Wastewater” Jnternational Journal of Electrochemical Science, Vol.11, pp.5279-5288, Luo M., Peng H., (2012), “Study on Determination of Contents of the Main Components of Tea Polyphenols”, International Journal of Bioscience, Biochemistry and Bioinformatics, Vol.2, pp 433 431 [30] Kesavan S, Raj M A John S A (2016), “Formation of electrochemically reduced graphene oxide on melamine electrografted layers and its application toward the determination of methylxanthines”, Analytical [31] Biochemistry, Vol 496, pp 14 — 24 Mutyala S., Mathiyarasu J (2016) A reagentless non-enzymatic hydrogen peroxide sensor presented using electrochemically reduced graphene oxide modified glassy carbon electrode Materials Science and [32] [33] Engineering: C, Vol.69, pp.398-406 Pang Y., Zhang Y., Li W., Ding H., Shen X (2016), “Synergetic accumulation and simultaneous determination of naphthol isomers on electrochemically reduced graphene oxide modified electrode”, Journal of Electroanalytical Chemistry, Vol 769 pp 89 — 96 Prasad B B., Singh R., Kumar A (2016), “Development of imprinted n polyneutral red/electrochemically reduced graphene oxide composite for ultra-trace sensing of 6-thioguanine”, Carbon, Vol 102, pp 86 ~ 96 [34] Qiao W., Li ¥., Wang L., Li G., Li J., Ye B(2015), “Electrochemical behavior of daphnetin and its sensitive determination based on electrochemically reduced graphene oxide modified electrode”, Journal of Electroanalytical Chemistry, Vol 749, pp 68 ~ 74 [35] Raj M.A., John S.A (2013),"Simultaneous determination of uric acid, xanthine, hypoxanthine and caffeine in human blood serum and urine samples using clectrochemically reduced graphene oxide modified electrode”, Analytica Chimica Acta, Vol.T71, pp.14-20 [36] Razmi H., Jabbari M., Mohammad-Rezaei R (2014) Electrochemically Reduced Graphene Oxide Modified Carbon Ceramic Electrode for the Determination of Pyridoxine Analytical Chemistry Letters, Vol.4, 1ss.2, pp 73-85 [37] Tautua A Martin W B., Diepreye E.R E., (2014),"Ultra-violet Spectrophotometric Determination of Caffeine in Soft and Energy Drinks Available in Yenagoa, Nigeria”, Advance Journal of Food Science and Technology, Vol.6, pp 155 ~ 158 [38] Thakur S., Karak N (2015),"Alternative methods and nature-based reagents for the reduction of graphene oxide: A review", Carbon, Vol.94, Iss June, pp.224-242 [39] Thu Ha Thi Vu, Thanh Thuy Thi Tran, Hong Ngan Thi Le, et al (2015),"A new green approach for the reduction of graphene oxide nanosheets", Bulletin of Materials Science, Vol.38, Iss.3, pp.1-S [40] Toh S.Y., Loh K.S., Kamarudin $.K., et al (2014) Graphene production via electrochemical reduction of graphene oxide: Synthesis and characterisation, Elsevier B.V., [41] Wang HL, Ren F., Wang C., et al (2014),"Simultaneous determination of dopamine, uric acid and ascorbic acid using a glassy carbon electrode modified with reduced graphene oxide", B RSC Advances, Vol4, Iss.51, pp.26895 [42] Xu Y., Gao M., Zhang G., et al (2015),“Blectrochemically reduced graphene oxide with enhanced electrocatalytic activity toward tetracycline detection” Chinese Journal of Catalysis, Vol.36, Iss.11, pp.1936-1942 [43] Yue X., Song W., Zhu W., Wang J., Wang Y (2015), “In situ surface electrochemical co-reduction route towards controllable construction of AuNPs/ERGO electrochemical sensing platform for simultaneous determination of BHA and TBHQ”, ElectrochimicaActa, Vol 182, pp [44] Yun M., Choe J E., You J M., AhmedM S., Lee K., Ustundag Z., Jeon S (2015), “High catalytic activity of electrochemically reduced graphene composite toward electrochemical sensing of Orange II”, Food Chemistry, Vol 169, pp 114 ~ 119 T4