Xây dựng quy trình nhân nhanh giống cây khôi nhung tía từ lá non bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA NÔNG HỌC H U N T T NGHI P ĐỀ TÀI: XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN NHANH GI NG CÂY HƠI NHUNG TÍ TỪ Á NON BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC V T Sinh viên thực : ý Đàm Đại Long Lớp : K63CDL Mã sinh viên : 632245 Khoa : Nông học Giảng viên hƣớng d n : TS Phạm Phú ong Hà Nội, 10/2022 LỜI C M ĐO N Tơi xin cam đoan đề tài khóa luận cơng trình nghiên cứu thực tôi, đƣợc thực dựa sở nghiên cứu lý thuyết, kiến thức chuyên ngành dƣới hƣớng dẫn khoa học TS Phạm Phú Long Các số liệu, kết quả, hình ảnh, bảng biểu đƣa hồn tồn trung thực, chƣa đƣợc sử dụng cơng bố cơng trình nghiên cứu khoa học trƣớc Tôi xin cam đoan thông tin, tài liệu tham khảo luận văn đƣợc ghi rõ nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan trƣớc hội đồng học viện Hà Nội, ngày 10 tháng 10 năm 2022 Ngƣời thực ý Đàm Đại Long i LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực tập tốt nghiệp hồn thành luận văn, em nhận đƣợc giúp đỡ nhiều mặt cấp lãnh đạo, tập thể cá nhân Trƣớc tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến TS.Phạm Phú Long Cảm ơn thầy dành nhiều thời gian, tâm huyết để tận tình bảo, giúp đỡ em suốt q trình thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Học viện Nông nghiệp Việt Nam, đặc biệt thầy cô khoa Nông học tận tình bảo, dẫn lối truyền đạt kiến thức cho em suốt năm đại học qua Tôi xin gửi lời cảm ơn đến bạn Viện Nghiên cứu Phát triển Dƣợc liệu đồng hành giúp đỡ suốt thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới gia đình bạn bè ln bên, động viên, chăm sóc giúp đỡ tơi suốt thời gian học tập thực đề tài tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 10 tháng 10 năm 2022 Người thực Lý Đàm Đại Long ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề : 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan Khơi nhung tía 2.1.1 Phân loại thực vật 2.1.2 Đặc điểm hình thái 2.1.3 Khu vực phân bố 2.1.4 Thực trạng 2.1.5 Thành phần hóa học 2.1.6 Công dụng 2.1.7 Giá trị kinh tế 2.1.8 Điều kiện sinh thái 2.2 Những nghiên cứu Khơi nhung tía ngồi nƣớc 2.2.1 Các nghiên cứu giới 2.2.2 Các nghiên cứu nƣớc 10 2.3 Phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 iii 2.3.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.3.2 Các kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật 12 2.3.3 Các giai đoạn nuôi cấy mô tế bào thực vật 12 2.3.4 Môi trƣờng nuôi cấy 14 2.3.5 Điều kiện nuôi cấy mô tế bào thực vật 16 2.3.6 Ƣu nhƣợc điểm phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 17 III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Đối tƣợng, vật liệu 19 3.2 Thời gian, địa điểm 19 3.3 Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.3.1 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.3.2 Nội dung nghiên cứu 20 3.4 Phƣơng pháp đánh giá kết xử lí số liệu 24 3.4.1 Các tiêu theo dõi 24 3.4.2 Xử lý số liệu 26 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Tạo callus từ vật liệu ban đầu 28 4.2 Ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng đến trình nhân nhanh callus Khơi nhung tía 31 4.3 Tái sinh chồi từ callus 35 4.4 Sinh trƣởng, hình thành phát triển Khơi nhung tía điều kiện ni cấy in vitro 37 4.5 Tạo rễ cho Khơi nhung tía 41 4.6 Trồng Khôi nhung giá thể 47 V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50 5.1 Kết luận 50 5.2 Đề nghị 51 PHỤ LỤC 55 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Mơi trƣờng đánh giá hình thành callus với nồng độ chất điều tiết sinh trƣởng TDZ khác 21 Bảng 3.2 Môi trƣờng đánh giá nhân nhanh callus với nồng độ chất điều tiết sinh trƣởng TDZ khác 21 Bảng 3.3 Môi trƣờng đánh giá tái sinh chồi từ callus Khơi nhung tía với nồng độ chất điều tiết sinh trƣởng TDZ khác 22 Bảng 3.4 Môi trƣờng đánh giá sinh trƣởng phát triển Khơi nhung tía với nồng độ chất điều tiết sinh trƣởng TDZ NAA khác 23 Bảng 3.5 Mơi trƣờng đánh giá q trình tạo rễ Khơi nhung tía với nồng độ chất điều tiết sinh trƣởng TDZ NAA khác 23 Bảng 4.1 Ảnh hƣởng TDZ đến hình thành callus sau 20 ngày theo dõi 28 Bảng 4.2 Ảnh hƣởng TDZ đến hình thành callus sau 30 ngày theo dõi 30 Bảng 4.3 Ảnh hƣởng TDZ NAA đến thí nghiệm nhân nhanh callus sau tháng theo dõi 32 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng TDZ tới tái sinh chồi Khơi nhung tía sau 30 ngày theo dõi 35 Bảng 4.5 Ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng tới sinh trƣởng phát triển Khơi nhung tía 38 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng tới tạo rễ Khôi nhung tía 44 Bảng 4.7 Sinh trƣởng phát triển ngồi vƣờn ƣơm Khơi nhung tía 48 v DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2.1 Cây Khơi nhung tía (nguồn: Internet) Hình 2.2 Lá Khơi nhung tía (nguồn: Internet) Hình 2.3 Hoa Khơi nhung tía (nguồn: Internet) Hình 2.4 Quả Khơi nhung tía (nguồn: Internet) Hình 4.1 Ảnh hƣởng TDZ đến hình thành callus từ khơi nhung tía sau 30 ngày nuôi cấy mô 29 Hình 4.2 Ảnh hƣởng TDZ NAA đến q trình nhân nhanh Khơi nhung tía 33 Hình 4.3 Ảnh hƣởng TDZ tới tái sinh chồi Khơi nhung tía sau 30 ngày theo dõi 36 Hình 4.4 Ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng tới sinh trƣởng phát triển Khôi nhung tía 39 Hình 4.5 Thí nghiệm tạo rễ 45 Hình 4.6 Cây Khơi nhung tía đem trồng 48 vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT ĐẦY ĐỦ STT VIẾT TẮT CT Công thức DC Đối chứng MS Murashige & skoog medium, 1962 6-BA 6-Benzulaminopurine NAA Naphtanyl acetic acid MT Môi trƣờng TDZ Thidiazuron 2,4D 2,4- dichlorophenoxyacetic acid vii T M TẮT Mục đích: Xây dựng quy trình nhân nhanh giống Khơi nhung tía từ non phƣơng pháp ni cấy mô tế bào thực vật Phƣơng pháp nghiên cứu: sử dụng phƣơng pháp nhân giống in vitro môi trƣờng MS kết hợp với chất điều tiết sinh trƣởng khác Kết quả: Đối với thí nghiệm tạo callus từ vật liệu ban đầu: Mơi trƣờng ½ MS + Inositol 0,1g/l + sugar 30g/l + agar 6g/l + 1ppm TDZ, pH = 5,8 môi trƣờng tối ƣu cho cảm ứng tạo callus với tỉ lệ sống 97,95% tỉ lệ tạo callus 87,75±3,72a Với thí nghiệm nhân nhanh mơi trƣờng ½ MS + Inositol 0,1g/l + sugar 30g/l + agar 6g/l + 1,5ppm TDZ + 0,1ppm NAA, môi trƣờng tối ƣu cho việc nhân nhanh callus với hệ số nhân nhanh lớn nhất, đạt đƣợc trung bình 36,28 callus/lọ Với thí nghiệm tái sinh chồi mơi trƣờng tối ƣu MS + Inositol 0,1g/l + sugar 30g/l + agar 6g/l + 0,15ppm TDZ, công thức cho số lƣợng thể chồi tái sinh cao với 27,50 chồi 10 ngày, 30,66 chồi 20 ngày, 36,50 chồi 30 ngày Thí nghiệm sinh trƣởng phát triển bổ sung 0.8 ppm TDZ vào môi trƣờng MS thu đƣợc đƣờng kính thân 0.78 cm, chiều dài thân 2.78 cm, trọng lƣợng 0.64 g, chiều dài chiều rộng lần lƣợt 4.02 cm 1.26 cm Với thí nghiệm tạo rễ bổ sung 1.2 ppm α-NAA vào mơi trƣờng MS kích thích việc tạo rễ với đƣờng kính thân 0.74 cm, chiều dài thân 2.88 cm, số lƣợng rễ 5.00 rễ, số 6.20 lá, chiều dài rễ 5.88 cm Giai đoạn trồng phát triển vƣờn ƣơm: đủ rễ thân cần đƣa ngồi vƣờn ƣơm để tiếp tục phát triển Nhìn chung phát triển tốt tiêu đánh giá giá thể Peat moss viii I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề : - Trải qua nhiều năm khai thác liên tục bị tàn phá nhiều nguyên nhân, nguồn thuốc nƣớc ta bị suy giảm, loài thuốc có giá trị sử dụng phổ biến Một số lồi vốn có giá trị kinh tế cao có nguy bị tuyệt chủng bị khai thác q mức (có 144 lồi thuốc thuộc diện quý bị suy giảm nghiêm trọng cần đƣợc bảo tồn Việt Nam) Một số loài nhóm này, gần đƣợc nghiên cứu bảo tồn ngun vị chuyển vị thành cơng, chí đƣợc đƣa vào trồng thêm chỗ nhƣ sâm Ngọc Linh vùng núi Ngọc Linh; Ngũ gia bì gai (Acanthopanax trifoliatus), Ngũ gia bì hƣơng (A.gracilistylus), Sì to (Valeriana jatamansi), Dền toòng (Gynostemma pentaphylla) Lào Cai, Hà Giang Vĩnh Phúc; Ba kích (Morinda officinalis) đƣợc trồng Phú Thọ, Quảng Ninh, Hịa Bình, Quảng Nam, Thanh Hóa, … Cây Khơi nhung tía đƣợc coi loại dƣợc liệu quý dùng để chữa bệnh dày, đau bụng, dân gian sắc nƣớc ngậm bị viêm họng Thành phần tannin glycoside, giúp trung hòa giảm tăng tiết acid dày Khi dịch vị dày đƣợc ổn định, chứng ợ nóng, ợ chua giảm dần hết hẳn, giúp ngƣời bệnh có cảm giác dễ chịu, nhẹ bụng Cây Khôi nhung mọc hoang khu rừng rậm miền thƣợng du tỉnh Thanh Hóa, Nghệ An, Ninh Bình, Khơi nhung thuốc q, phân bố nhiều nơi nhƣng số lƣợng không nhiều tái sinh hạt kém, lại bị khai thác với số lƣợng lớn nên nguồn hạt Mặt khác, nơi mọc lại bị khai thác phá rừng mạnh, nên khơng cịn mơi trƣờng sống thích hợp Khơi nhung  đƣợc liệt kê Sách Đỏ Việt Nam với mức độ đe dọa bậc V - nguy cấp, đó, phƣơng pháp nhân giống chủ yếu phƣơng pháp truyền thống (nhân giống từ hạt giâm hom) Tuy cách nhân giống đơn giản, song có số hạn chế nhƣ: phát triển phụ thuộc nhiều vào yếu tố Thí nghiệm Descriptives PLB 95% Confidence Interval for Mean N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 1.00 15.2857 3.81725 1.44279 11.7553 18.8161 10.00 19.00 2.00 21.4286 6.07885 2.29759 15.8066 27.0506 11.00 30.00 3.00 27.5714 4.50397 1.70234 23.4060 31.7369 22.00 35.00 4.00 30.5714 1.90238 71903 28.8120 32.3308 28.00 33.00 5.00 32.8571 2.54484 96186 30.5036 35.2107 29.00 36.00 6.00 25.7143 1.79947 68014 24.0501 27.3785 23.00 28.00 Total 42 25.5714 6.88988 1.06313 23.4244 27.7185 10.00 36.00 59 PLB Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 2.00 6.00 25.7143 3.00 27.5714 4.00 5.00 Sig 15.2857 21.4286 27.5714 30.5714 30.5714 32.8571 1.000 1.000 363 145 264 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 7.000 Descriptives PLB 95% Confidence Interval for Mean N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 1.00 16.2857 3.81725 1.44279 12.7553 19.8161 11.00 20.00 2.00 22.1429 5.98411 2.26178 16.6085 27.6772 12.00 31.00 3.00 28.1429 4.33699 1.63923 24.1318 32.1539 23.00 35.00 4.00 31.7143 1.97605 74688 29.8867 33.5418 29.00 34.00 5.00 34.1429 2.03540 76931 32.2604 36.0253 31.00 37.00 6.00 26.8571 1.95180 73771 25.0520 28.6623 24.00 29.00 Total 42 26.5476 6.92892 1.06915 24.3884 28.7068 11.00 37.00 60 PLB Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 2.00 6.00 26.8571 3.00 28.1429 4.00 5.00 Sig 16.2857 22.1429 28.1429 31.7143 31.7143 34.1429 1.000 1.000 517 077 224 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 7.000 Descriptives PLB 95% Confidence Interval for Mean N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 1.00 17.4286 3.59894 1.36027 14.1001 20.7570 12.00 21.00 2.00 23.1429 5.98411 2.26178 17.6085 28.6772 13.00 32.00 3.00 29.2857 4.15188 1.56926 25.4459 33.1256 25.00 36.00 4.00 33.0000 1.73205 65465 31.3981 34.6019 31.00 35.00 5.00 36.2857 2.13809 80812 34.3083 38.2631 33.00 39.00 6.00 27.7143 1.88982 71429 25.9665 29.4621 25.00 30.00 Total 42 27.8095 7.11658 1.09811 25.5918 30.0272 12.00 39.00 61 PLB Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 2.00 6.00 27.7143 3.00 29.2857 4.00 5.00 Sig 17.4286 23.1429 29.2857 33.0000 33.0000 36.2857 1.000 1.000 418 061 095 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 7.000 62 Thí nghiệm Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N ngay10 ngay20 ngay30 Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 1.00 14.5000 1.87083 76376 12.5367 16.4633 12.00 17.00 2.00 18.8333 2.13698 87242 16.5907 21.0760 15.00 21.00 3.00 23.3333 2.25093 91894 20.9711 25.6955 21.00 27.00 4.00 22.0000 4.47214 1.82574 17.3068 26.6932 17.00 27.00 5.00 27.5000 4.46094 1.82117 22.8185 32.1815 22.00 34.00 6.00 22.3333 4.80278 1.96073 17.2931 27.3735 16.00 29.00 Total 36 21.4167 5.23382 87230 19.6458 23.1875 12.00 34.00 1.00 15.6667 1.75119 71492 13.8289 17.5044 13.00 18.00 2.00 19.6667 2.50333 1.02198 17.0396 22.2938 16.00 23.00 3.00 23.8333 2.13698 87242 21.5907 26.0760 22.00 27.00 4.00 23.5000 4.72229 1.92787 18.5443 28.4557 18.00 29.00 5.00 30.6667 3.44480 1.40633 27.0516 34.2818 26.00 35.00 6.00 23.1667 5.67157 2.31541 17.2147 29.1186 16.00 32.00 Total 36 22.7500 5.72401 95400 20.8133 24.6867 13.00 35.00 1.00 15.6667 1.63299 66667 13.9529 17.3804 13.00 18.00 2.00 20.1667 2.85774 1.16667 17.1677 23.1657 16.00 24.00 3.00 24.6667 2.25093 91894 22.3045 27.0289 23.00 28.00 4.00 23.6667 4.84424 1.97765 18.5829 28.7504 18.00 29.00 5.00 36.1667 3.48807 1.42400 32.5062 39.8272 32.00 42.00 6.00 25.1667 5.56477 2.27181 19.3268 31.0065 20.00 35.00 Total 36 24.2500 7.20069 1.20012 21.8136 26.6864 13.00 42.00 63 ngay10 Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 14.5000 2.00 18.8333 4.00 22.0000 6.00 22.3333 3.00 23.3333 5.00 23.3333 27.5000 Sig 1.000 053 052 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000 ngay20 Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 15.6667 2.00 19.6667 6.00 23.1667 4.00 23.5000 3.00 23.8333 5.00 Sig 19.6667 30.6667 068 080 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000 64 ngay30 Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 2.00 20.1667 4.00 23.6667 23.6667 3.00 24.6667 24.6667 6.00 5.00 Sig 15.6667 25.1667 36.1667 1.000 055 515 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000 65 Thí nghiệm Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N chieudaithan Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 1.00 1.7600 15166 06782 1.5717 1.9483 1.60 2.00 2.00 2.1200 22804 10198 1.8369 2.4031 1.90 2.40 3.00 2.3600 23022 10296 2.0741 2.6459 2.00 2.60 4.00 2.7800 19235 08602 2.5412 3.0188 2.50 3.00 5.00 2.4400 11402 05099 2.2984 2.5816 2.30 2.60 6.00 2.2200 23875 10677 1.9236 2.5164 1.90 2.50 Total 30 2.2800 36427 06651 2.1440 2.4160 1.60 3.00 duongkinhthan 1.00 3800 08367 03742 2761 4839 30 50 2.00 5200 08367 03742 4161 6239 40 60 3.00 6200 16432 07348 4160 8240 40 80 4.00 7800 13038 05831 6181 9419 60 90 5.00 6800 16432 07348 4760 8840 50 90 6.00 5600 11402 05099 4184 7016 40 70 Total 30 5900 17291 03157 5254 6546 30 90 1.00 2200 04472 02000 1645 2755 20 30 2.00 2800 08367 03742 1761 3839 20 40 3.00 6000 10000 04472 4758 7242 50 70 4.00 6400 05477 02449 5720 7080 60 70 5.00 5200 08367 03742 4161 6239 40 60 6.00 4000 12247 05477 2479 5521 30 60 Total 30 4433 17750 03241 3771 5096 20 70 1.00 1.7400 15166 06782 1.5517 1.9283 1.50 1.90 2.00 1.9400 34351 15362 1.5135 2.3665 1.60 2.40 3.00 2.4200 27749 12410 2.0755 2.7645 2.00 2.70 4.00 4.0200 40866 18276 3.5126 4.5274 3.50 4.50 5.00 2.9600 20736 09274 2.7025 3.2175 2.70 3.20 6.00 2.7000 15811 07071 2.5037 2.8963 2.50 2.90 Total 30 2.6300 80093 14623 2.3309 2.9291 1.50 4.50 trongluong chieudaila chieurongla 1.00 7400 11402 05099 5984 8816 60 90 2.00 8400 05477 02449 7720 9080 80 90 3.00 1.1000 30822 13784 7173 1.4827 80 1.60 4.00 1.2600 40373 18055 7587 1.7613 80 1.70 5.00 1.0200 25884 11576 6986 1.3414 70 1.30 6.00 9200 14832 06633 7358 1.1042 70 1.10 Total 30 9800 28333 05173 8742 1.0858 60 1.70 66 duongkinhthan Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 3800 2.00 5200 6.00 5600 3.00 6200 6200 5.00 6800 6800 4.00 5200 7800 Sig .096 081 072 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 chieudaithan Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 2.00 2.1200 6.00 2.2200 2.2200 3.00 2.3600 2.3600 5.00 4.00 Sig 1.7600 2.4400 2.7800 1.000 081 108 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 trongluong Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 2200 2.00 2800 6.00 5.00 5200 3.00 6000 4.00 Sig .4000 6000 6400 279 1.000 153 467 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 67 chieudaila Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 1.7400 2.00 1.9400 3.00 2.4200 6.00 2.7000 5.00 4.00 2.7000 2.9600 4.0200 Sig .261 120 148 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 Chieurongla Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 7400 2.00 8400 8400 6.00 9200 9200 9200 5.00 1.0200 1.0200 1.0200 3.00 1.1000 1.1000 4.00 Sig 1.2600 111 138 055 Means for groups in homogeneous subsets are displayed 68 a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 Thí nghiệm Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N Mean Std Std Lower Upper Deviation Error Bound Bound Minimum Maximum soluongchoirare 1.00 1.2000 1.64317 73485 -.8403 3.2403 00 3.00 2.00 2.6000 2.40832 1.07703 -.3903 5.5903 00 5.00 3.00 1.30384 58310 -.8189 2.4189 00 3.00 4.00 3.4000 3.13050 1.40000 -.4870 7.2870 00 6.00 5.00 5.4000 3.13050 1.40000 1.5130 9.2870 00 8.00 6.00 2.4000 2.30217 1.02956 -.4585 5.2585 00 5.00 Total 30 2.6333 2.68435 49009 1.6310 3.6357 00 8.00 1.00 1.0000 1.41421 63246 -.7560 2.7560 00 3.00 2.00 3.0000 2.82843 1.26491 -.5120 6.5120 00 6.00 3.00 1.4000 1.94936 87178 -1.0204 3.8204 00 4.00 4.00 4.0000 3.80789 1.70294 -.7281 8.7281 00 8.00 5.00 5.0000 2.91548 1.30384 1.3800 8.6200 00 7.00 6.00 2.6000 2.40832 1.07703 -.3903 5.5903 00 5.00 Total 30 2.8333 2.80496 51211 1.7859 3.8807 00 8.00 1.00 1.9200 1.75841 78638 -.2634 4.1034 00 3.40 2.00 3.0800 1.74843 78192 9090 5.2510 00 4.20 3.00 2.6800 2.44888 1.09517 -.3607 5.7207 00 4.60 4.00 4.6400 2.60826 1.16645 1.4014 7.8786 00 6.20 5.00 5.8800 3.30409 1.47763 1.7774 9.9826 00 7.80 6.00 5.0800 2.84903 1.27413 1.5425 8.6175 00 6.60 Total 30 3.8800 2.70139 49320 2.8713 4.8887 00 7.80 soluongre daire trongluong duongkinhthan 8000 1.00 6000 07071 03162 5122 6878 50 70 2.00 6800 08367 03742 5761 7839 60 80 3.00 9200 19235 08602 6812 1.1588 70 1.20 4.00 1.1400 46152 20640 5669 1.7131 50 1.70 5.00 1.6000 91104 40743 4688 2.7312 50 2.90 6.00 1.2600 28810 12884 9023 1.6177 80 1.50 Total 30 1.0333 53326 09736 8342 1.2325 50 2.90 10954 04899 2440 5160 30 50 1.00 3800 69 daithan sola 2.00 5200 08367 03742 4161 6239 40 60 3.00 5800 13038 05831 4181 7419 40 70 4.00 6600 15166 06782 4717 8483 50 90 5.00 7400 11402 05099 5984 8816 60 90 6.00 6800 16432 07348 4760 8840 50 90 Total 30 5933 16802 03068 5306 6561 30 90 1.00 1.0400 32094 14353 6415 1.4385 70 1.50 2.00 1.9400 47223 21119 1.3537 2.5263 1.50 2.70 3.00 2.1400 30496 13638 1.7613 2.5187 1.90 2.60 4.00 2.3000 15811 07071 2.1037 2.4963 2.10 2.50 5.00 2.8800 24900 11136 2.5708 3.1892 2.50 3.20 6.00 2.2600 23022 10296 1.9741 2.5459 1.90 2.50 Total 30 2.0933 62584 11426 1.8596 2.3270 70 3.20 1.00 2.4000 89443 40000 1.2894 3.5106 1.00 3.00 2.00 3.2000 1.30384 58310 1.5811 4.8189 2.00 5.00 3.00 3.8000 83666 37417 2.7611 4.8389 3.00 5.00 4.00 5.0000 70711 31623 4.1220 5.8780 4.00 6.00 5.00 6.2000 83666 37417 5.1611 7.2389 5.00 7.00 6.00 4.6000 1.14018 50990 3.1843 6.0157 3.00 6.00 Total 30 4.2000 1.54026 28121 3.6249 4.7751 1.00 7.00 soluongchoirare Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 3.00 8000 1.00 1.2000 6.00 2.4000 2.4000 2.00 2.6000 2.6000 4.00 3.4000 3.4000 5.00 Sig 5.4000 140 084 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 70 soluongre Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 1.0000 3.00 1.4000 1.4000 6.00 2.6000 2.6000 2.00 3.0000 3.0000 4.00 4.0000 4.0000 5.00 5.0000 Sig .123 066 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 trongluong Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 6000 2.00 6800 6800 3.00 9200 9200 4.00 1.1400 1.1400 1.1400 6.00 1.2600 1.2600 5.00 1.6000 Sig .089 068 132 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 duongkinhthan Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 3800 2.00 5200 3.00 5800 5800 4.00 6600 6600 6.00 6800 6800 5.00 Sig .5200 7400 098 082 082 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 71 daithan Subset for alpha = 0.05 ct a Duncan N 1.00 2.00 1.9400 3.00 2.1400 6.00 2.2600 4.00 2.3000 5.00 Sig 1.0400 2.8800 1.000 099 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 sola a Duncan ct 1.00 N Subset for alpha = 0.05 2.4000 2.00 3.2000 3.00 6.00 4.6000 4.00 5.0000 5.00 Sig 3.2000 3.8000 3.8000 5.0000 6.2000 207 340 077 063 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 72 Thí nghiệm Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N song chieucao sola daila rongla Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Maxim Upper Bound Minimum um 1.00 12 9167 28868 08333 7333 1.1001 00 1.00 3.00 12 7500 45227 13056 4626 1.0374 00 1.00 Total 24 8333 38069 07771 6726 9941 00 1.00 1.00 12 2.6833 14035 04051 2.5942 2.7725 2.50 2.90 3.00 12 3.3583 30588 08830 3.1640 3.5527 2.90 4.00 Total 24 3.0208 41596 08491 2.8452 3.1965 2.50 4.00 1.00 12 6.5833 90034 25990 6.0113 7.1554 5.00 8.00 3.00 12 9.3333 1.23091 35533 8.5512 10.1154 8.00 12.00 Total 24 7.9583 1.75646 35854 7.2166 8.7000 5.00 12.00 1.00 12 2.0417 38485 11110 1.7971 2.2862 1.40 2.60 3.00 12 3.0000 28284 08165 2.8203 3.1797 2.50 3.50 Total 24 2.5208 59049 12053 2.2715 2.7702 1.40 3.50 1.00 12 1.6333 26400 07621 1.4656 1.8011 1.00 2.00 3.00 12 2.2667 41194 11892 2.0049 2.5284 1.50 3.10 Total 24 1.9500 46811 09555 1.7523 2.1477 1.00 3.10 73