Bước đầu xây dựng quy trình nhân nhanh in vitro cây kim tiền (zamioculcaszamifollia) (khóa luận tốt nghiệp)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ~~~~~***~~~~~ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN NHANH IN VITRO CÂY KIM TIỀN (ZAMIOCULCAS ZAMIFOLIA)” Người thực hiện: NGUYỄN THỊ MINH NGỌC Khóa: 62 Ngành: Cơng nghệ sinh học Người hướng dẫn: TS NGUYỄN THỊ LÂM HẢI HÀ NỘI - 2021 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan kết nghiên cứu em thực Các số liệu kết đạt trung thực hướng dẫn TS Nguyễn Thị Lâm Hải Em xin cam đoan thơng tin trính dẫn ghi rõ nguồn gốc giúp đỡ cảm ơn Hà Nội, ngày 22 tháng 02 năm 2021 Sinh viên thực Nguyễn Thị Minh Ngọc i LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực hồn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp này, ngồi cố gắng nỗ lực thân em nhận giúp đỡ nhiều mặt thầy cô giáo, tập thể cá nhân Trước hết, em xin chân thành cảm ơn đến thầy cô, cán nhân viên Bộ môn Công nghệ sinh học thực vật – Khoa Công nghệ sinh học – Học viện Nông nghiệp Việt Nam giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em trình thực tập Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Thị Lâm Hải, cô tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em trình thực hoàn thành đề tài Cuối em xin chân thành cảm ơn đến gia đình, bạn bè cổ vũ, động viên giúp đỡ em suốt trình học tập thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 22 tháng 02 năm 2021 Sinh viên thực Nguyễn Thị Minh Ngọc ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC CÁC CỤM TỪ - KÍ HIỆU VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Nguồn gốc phân loại thực vật 2.2 Đặc điểm thực vật học 2.2.1 Thân, 2.2.2 Rễ 2.2.3 Hoa 2.2.4 Yêu cầu ngoại cảnh 2.2.5 Kĩ thuật trồng chăm sóc 10 2.2.6 Một số sâu, bệnh gây hại cho 11 Tình hình nghiên cứu Kim Tiền giới nước 17 2.3.1 Tình hình nghiên cứu Kim Tiền giới 17 2.3.2 Tình hình nghiên cứu Kim Tiền nước 22 III ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Đối tượng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 26 iii 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 26 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu 26 3.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 26 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 26 3.2.1 Tạo mẫu nuôi cấy khởi động 26 3.2.2 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh callus thành chồi 28 3.3 Điều kiện thí nghiệm 29 3.4 Phương pháp bố trí thí nghiệm 29 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 29 3.6 Các tiêu theo dõi 30 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 4.1 Tạo vật liệu khởi đầu 31 4.2 Ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng đến nhân nhanh Kim Tiền in vitro 34 4.2.1 Ảnh hưởng BAP α-NAA đến khả tạo callus Kim Tiền in vitro 35 4.2.2 Ảnh hưởng BAP 2.4-D đến tạo callus Kim Tiền in vitro 39 4.3 Ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng đến khả tái sinh callus thành chồi 43 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 5.1 Kết luận 47 5.2 Kiến nghị 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 PHỤ LỤC 51 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1: Kết giai đoạn khử trùng để nuôi cấy khởi động tạo vật liệu ban đầu (sau tuần nuôi cấy) 32 Bảng 4.2: Ảnh hưởng BAP α-NAA đến tỉ lệ tạo callus chồi Kim Tiền in vitro (sau tuần nuôi cấy) 36 Bảng 4.3: Ảnh hưởng BAP 2.4-D đến khả tạo callus Kim Tiền in vitro (Sau tuần nuôi cấy) 40 Bảng 4.4: Ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh callus thành chồi (Sau 11 tuần nuôi cấy) 44 v DANH MỤC HÌNH Hình 1: Cây Kim Tiền Hình 2.1: Thân Kim Tiền Hình 2.2: Rễ Kim Tiền Hình 2.3: Hoa Kim Tiền Hình 2.4: Cây Kim Tiền bị vàng thừa nước 12 Hình 2.5: Cây Kim Tiền bị cháy nắng 13 Hình 2.6:Cây Kim Tiền bị thiếu nước nên vàng 14 Hình 2.7: Cây Kim Tiền bị thối rễ 15 Hình 2.8: Cây Kim Tiền bị rệp công 16 Hình 2.9: Rệp trắng bám mặt Kim Tiền 17 Hình 4.1: Lá Kim Tiền nuôi cấy khởi động sau tuần 32 Hình 4.2: Callus hình thành mơi trường bổ sung BAP α-NAA (sau tuần nuôi cấy) 37 Hình 4.3: Callus Kim Tiền in vitro hình thành môi trường bổ sung BAP 2,4-D (Sau tuần nuôi cấy) 41 Hình 4.4: Chồi Kim Tiền in vitro mơi trường có bổ sung BAP (sau 11 tuần ni cấy) 45 vi DANH MỤC CÁC CỤM TỪ - KÍ HIỆU VIẾT TẮT STT Viết tắt Viết đầy đủ CT Công thức ĐC Đối chứng MS Môi trường Murashige Skoog - 1962 BAP Benzyl amino purine IBA 3-Indolebutyric acid IAA 3-Indoleacetic acid 2,4-D α-NAA α- Napthalene aceticacid CV% Sai số thí nghiệm 10 LSD (5%) Độ lệch tiêu chuẩn mức nghĩa 5% 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid vii TÓM TẮT Cây Kim Tiền (Zamioculcas zamiifolia) loài cảnh dễ trồng nhà, có bụi xanh mướt, phát triển tốt nơi ánh sáng thấp, không cần tưới nước thường xuyên có khả lọc khơng khí, loại bỏ khói bụi, khí độc Cây khỏe mạnh, bị sâu bệnh hại, có giá trị kinh tế cao cịn có ý nghĩa thủy Đề tài thực nhằm tìm mơi trường tạo callus tạo chồi tối ưu cho Kim Tiền Môi trường tốt để tạo callus là: ½ MS + 0,2 mg/L BAP + 5,0 mg/L 2,4-D + 7,0 g/L agar + 20 g/L đường, pH=5,8 Mơi trường thích hợp để tái sinh callus thành chồi Kim Tiền là: ½ MS + 2,0 mg/L BAP + 7,0 g/L agar + 40 g/L đường, pH=5,8 cho hệ số nhân chồi là: 1,56 (chồi/mẫu), chồi to, khỏe viii I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Cây Kim Tiền loài cảnh dễ trồng nhà, có bụi xanh mướt, phát triển tốt nơi ánh sáng thấp, không cần tưới nước thường xun có khả lọc khơng khí, loại bỏ khói bụi, khí độc Nghiên cứu chuyên gia thực vật, môi trường học đại học Copenhagen năm 2014 cho thấy, Z zamiifolia loại bỏ 0,01 mol/m2 hợp chất hữu dễ bay benzene, toluene, ethylbenzene xylen ngày Trong môi trường sống tự nhiên Z zamiifolia quen với mùa khơ dài, cần tưới nước vừa phải Z zamiifolia chứa lượng nước cao bất thường 91% 95% cuống nên chúng hồn tồn khơng cần tưới nước tháng Trong cuống Kim Tiền có chứa nhiều tinh thể canxi oxalat Chất gây kích thích phần da nhạy cảm, niêm mạc môi, lưỡi, màng nhầy họng kết mạc mắt ăn nhầm chạm phải phải dịch tiết bơi lên mắt Một thí nghiệm độc tính Z zamiifolia tiến hành vào năm 2015 nhà khoa học thuộc Đại học Bergen (Na Uy) Theo đó, chuyên gia thử nghiệm chất chiết suất từ Z zamiifolia tôm với liều lượng mg/ml khiến tôm bị chết Các chuyên gia cho rằng, loài mối nguy hiểm tiềm tàng với gia đình có trẻ nhỏ Cây Kim Tiền cịn có ý nghĩa lớn phong thủy Cây Kim Tiền giúp mang đến tài lộc, may mắn, tiền tài, phú quý, giàu sang, sung túc, thịnh vượng cho gia chủ Khi Kim Tiền hoa báo hiệu may mắn thành công đến Màu hoa trắng tinh khôi tượng trưng cho nghiệp đến ngày đơm hoa, kết trái, sống ngày sung túc đủ đầy, giúp cho nhà nơi làm việc trở nên tươi sáng, sang trọng xanh mát Từ trước tới nay, Kim Tiền thường nhân giống vơ tính cách giâm cành giâm Tuy nhiên, phương pháp có hệ số nhân thấp, 4.3 Ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng đến khả tái sinh callus thành chồi Nhân nhanh giai đoạn khơng thể thiếu quy trình sản xuất giống in vitro Đây trình sản xuất lượng lớn hoàn chỉnh, từ phận, quan chồi, mắt ngủ, vảy củ, đoạn thân, lá, mẹ ban đầu thông qua kỹ thuật ni cấy in vitro Nhằm trì nhân nhanh kiểu gen quí làm vật liệu cho cơng tác giống, nhân nhanh lồi hoa, cảnh khó trồng hạt, trì nhân nhanh dòng bố mẹ dòng lai để tạo hạt giống rau, hoa trồng khác nhân nhanh kết hợp với làm virus, bảo quản nguồn gen in vitro Phương pháp có hệ số nhân cao cho cá thể tương đối đồng mặt di truyền Để tăng hiệu cho trình cần bổ sung thêm chất điều tiết sinh trưởng q trình ni cấy Với loại trồng bổ sung chất điều tiết sinh trưởng khác để tăng hiệu giống cho hệ số nhân cao với chất lượng chồi tốt Nhóm chất điều tiết sinh trưởng sử phổ biến cho giai đoạn cytokinin, bật nhóm BAP BAP chất điều tiết sinh trưởng thuộc nhóm cytokinin có tác dụng hoạt hóa phân chia tế bào, kích thích tổng hợp axit nucleic, protein có mặt tARN Bên cạnh đó, BAP giúp hình thành chồi, thúc đẩy q trình phân hóa chồi kìm hãm già hóa tăng tuổi thọ Ức chế trình phân hủy, tăng trình tổng hợp protein chất diệp lục Ngồi ra, BAP cịn thúc đẩy hình thành mầm, hạn chế phát sinh bệnh gây hại, dùng để nâng cao chất lượng sản lượng nhiều loại trồng, giữ cho hoa tươi lâu Sau q trình ni cấy khởi động mẫu callus đạt tiêu chuẩn hình thái kích thước bắt đầu cấy chuyển sang môi trường nhân nhanh có bổ sung BAP với nồng độ 1,0 mg/L, 2,0 mg/L, 3,0 43 mg/L môi trường ½ MS+ 40g/L đường sucrose + 7g/L agar, pH=5,8 Kết thu sau: Bảng 4.4: Ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh callus thành chồi (Sau 11 tuần nuôi cấy) CT Nồng độ BAP (mg/l) Tỷ lệ tạo chồi(%) Số chồi (chồi/mẫu) Chất lượng chồi CT1 (ĐC) 33.33 1.30 + CT2 53,33 1.56 +++ CT3 46,67 1.50 ++ CV (%) 7,5 12,5 LSD (5%) 0,07 0,41 +: xanh,ngắn,nhỏ ++: xanh,ngắn,to +++: xanh,vừa,to 44 ½ MS + mg/L BAP ½ MS + mg/L BAP ½ MS + mg/L BAP Hình 4.4: Chồi Kim Tiền in vitro mơi trường có bổ sung BAP (sau 11 tuần nuôi cấy) 45 Kết trình bày Bảng 4.4 Hình 4.4 cho thấy: BAP có tác dụng lớn việc tái sinh callus thành chồi Tỷ lệ tái sinh từ callus thành chồi dao động từ 33,33% đến 53,33% Công thức cho tỷ lệ tạo chồi cao đạt 53,33% gấp 1,6 lần công thức Tuy nhiên, số chồi khơng có khác nhiều cơng thức Nồng độ 2,0 mg/L BAP cho số chồi cao 1,56 (chồi/mẫu) Ở nồng độ 1,0 mg/L BAP cho số chồi thấp 1,3 (chồi/mẫu) Tăng nồng độ BAP lên 3,0 mg/L tỷ lệ giảm không đáng kể 1so với nồng độ 2,0 mg/L xuống 1,5 (chồi/mẫu) Màu sắc cuả chồi khơng có thay đổi cơng thức có màu xanh Về kích thước chiều cao chồi có thay đổi Kích thước chiều cao chồi thấp cơng thức đạt kích thước chiều cao tốt công thức Từ kết đánh giá cho thấy, mơi trường ni cấy ½ MS + 2,0 mg/L BAP + 40 g/L đường sucrose +7 g/L agar, pH= 5,8 hiệu cao cho trình tái sinh callus thành chồi Nghiên cứu Vanzie-Canton (2007) cho thấy mơi trường ½ MS + 1,0 mg/L BAP + 40g/L đường sucrose môi trường thích hợp để tạo tái sinh callus thành chồi Kết nghiên cứu để tạo chồi cao từ Kim Tiền môi trường 1/2MS +2,0 mg/L BAP + 40g/L đường sucrose Nghiên cứu cho thấy nồng độ BAP 2,0 mg/L cho tỷ lệ tạo chồi cao Kết luận, môi trường tái sinh callus thành chồi tốt từ mẫu Kim Tiền là: 1/2MS + 2,0 mg/L BAP +40g/L đường sucrose + 7g/L agar, pH=5,8 46 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Chế độ khử trùng thích hợp cho Kim Tiền là: Ngâm dung dịch preset 20 phút Sau đó,chuyển sang ngâm dung dịch HgCl2 0.1% phút Môi trường nuôi cấy khởi động thích hợp là: ½ MS+ mg/L 2.4-D +30g/L đường sucrose + 7g/L agar, pH=5,8 Môi trường thích hợp để tạo callus Kim Tiền là: ½ MS + 0,2 mg/L BAP + 5,0 mg/L 2,4-D + 7,0 g/L agar + 20 g/L đường, pH=5,8 Mơi trường thích hợp để tái sinh callus thành chồi Kim Tiền là: ½ MS + 2,0 mg/L BAP + 7,0 g/L agar + 40 g/L đường, pH=5,8 5.2 Kiến nghị Dựa kết nghiên cứu đạt xin đề nghị số vấn đề sau: Nghiên cứu thêm ảnh hưởng đơn chất tổ hợp chất điều tiết sinh trưởng khác lên khả nhân nhanh mẫu Kim Tiền ( kinetin, kinetin α-NAA, IBA, IAA…) để tìm quy trình nhân nhanh tối ưu Tiến hành thí nghiệm rễ Bố trí thí nghiệm vườn ươm 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo nước ngoài: Toabaita, M., Vangnai, A S., & Thiravetyan, P (2016) Removal of ethylbenzene from contaminated air by Zamioculcas Zamiifolia and microorganisms associated on Z Zamiifolia leaves Water, Air, & Soil Pollution, 227(4), 115 Holtum, J A., Winter, K., Weeks, M A., & Sexton, T R (2007) Crassulacean acid metabolism in the ZZ plant, Zamioculcas zamiifolia (Araceae) American Journal of Botany, 94(10), 1670-1676 Heping, S., & Peng, L (2003) Plantlet regeneration from leaf explants of Zamioculcas zamiifolia Acta Horticulturae Sinica,30(5), 621-622 Zhou, j H., zhou, y., liu, x M., zhu, z P., deng, b G., & luo, n S (2005) In vitro Culture and Rapid Propagation of Zamioculcas zamifolia [J] Acta Agriculturae Jiangxi, Papafotiou, M., & Martini, A N (2009) Effect of position and orientation of leaflet explants with respect to plant growth regulators on micropropagation of Zamioculcas zamiifolia Engl.(ZZ) Scientia Horticulturae, 120(1), 115-120 Nirmala, K S., Ancy, D., & Anitha, P (2018) Influence of growth regulators on propagation of Zamioculcas zamiifolia Engl.-an indoor ornamental plant In IX International Scientific Agriculture Symposium" AGROSYM 2018", Jahorina, Bosnia and Herzegovina, 4-7 October 2018 Book of Proceedings (pp 602-606) University of East Sarajevo, Faculty of Agriculture 48 Seneviratne, K A C N., Arachchi, K K., Seneviratne, G., & Premarathna, M (2020) Zamioculcas zamiifolia novel plants with dwarf features and variegated leaves induced by colchicine Ceylon Journal of Science, 49(2), 203-207 Vanzie-Canton, S D., & Leonhardt, K W (2007, June) In vitro callus induction and plantlet regeneration protocol developed for the oryzalin treatment of Zamioculcas zamiifolia (Lodd.) Engl.(Araceae) In VI International Symposium on New Floricultural Crops 813 (pp 201-208) Lin, m., wang, h X., tang, q M., yang, s T., gong, j Y., & sun, l N (2012) Research advances on tissue culture of Zamioculcas zamiifolia [J] Guangdong Agricultural Sciences,24 10.Shuzhen, G L Y B Z., & Xue, Y A N G (2006) Tissue Culture of Zamioculcas zamiifolia (Loddiges) Engler [J] Chinese Journal of Tropical Agriculture, 11.Pan, X F., Wang, J H., & Fu, Q M (2007) Study on Rapid Vitro Propagation of Zamioculcas Zamiifolia Natural Science Journal of Hainan University, 23, 105-113 Tài liệu tham khảo nước: Lê Văn Tường Huân, Lê Thị Trang (2011) Nghiên cứu tái sinh từ mẫu cuống điều kiện in vitro kim phát tài Hội nghị khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ Trường Đại học khoa học, Đại học Huế Trang 1412-1416 Website tham khảo: http://cayxanhhanoi.com.vn/chi-tiet/57-728-cach-cham-soc-cay-kim-tien-vachua-tri-mot-so-benh-thuong-gap-o-cay-kim-phat-tai.html https://organicfood.vn/diem-danh-9-loai-con-trung-co-hai-cho-cay-trongthuong-thay.html 49 https://vuoncayviet.com/tin-tuc/nen-mua-cay-kim-tien-o-dau.html 50 PHỤ LỤC TN1: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE TN1N 29/ 1/21 21:51 :PAGE Thi nghiem VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 333333E-02 166667E-02 1.00 0.404 CT 600000E-01 120000E-01 7.20 0.004 * RESIDUAL 10 166667E-01 166667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 800000E-01 470588E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN1N 29/ 1/21 21:51 :PAGE Thi nghiem VARIATE V004 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 777778E-02 388889E-02 0.54 0.604 CT 216111 5.98 0.008 * RESIDUAL 432222E-01 10 722222E-01 722222E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 296111 174183E-01 - 51 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1N 29/ 1/21 21:51 :PAGE Thi nghiem MEANS FOR EFFECT NL - NL NOS TLMS TLTC 0.916667 0.266667 0.950000 0.250000 0.933333 0.300000 SE(N= 6) 5%LSD 10DF 0.166667E-01 0.346944E-01 0.525173E-01 0.109323 - MEANS FOR EFFECT CT - CT NOS TLMS TLTC 0.900000 0.166667 1.00000 0.400000 3 1.00000 0.400000 0.933333 0.333333 0.933333 0.200000 0.833333 0.133333 SE(N= 3) 5%LSD 10DF 0.235702E-01 0.490653E-01 0.742706E-01 0.154607 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1N 29/ 1/21 21:51 :PAGE 52 Thi nghiem F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 18) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |NL % TLMS 18 0.93333 0.68599E-010.40825E-01 TLTC 18 0.27222 0.13198 |CT | | | | | | | | | 4.4 0.4038 0.0045 0.84984E-01 31.2 0.6039 0.0084 53 TN2: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE TN2N 29/ 1/21 21:43 :PAGE Thi nghiem VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 116667E-01 583333E-02 4.20 0.072 CT 691667E-01 230556E-01 16.60 0.003 * RESIDUAL 833334E-02 138889E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 891667E-01 810606E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN2N 29/ 1/21 21:43 :PAGE Thi nghiem VARIATE V004 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 316667E-01 158333E-01 2.71 0.144 CT 142500 475000E-01 8.14 0.016 * RESIDUAL 350000E-01 583333E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 209167 190151E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN2N 29/ 1/21 21:43 :PAGE Thi nghiem MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 4 TLMS 0.800000 0.850000 0.875000 TLTC 0.700000 0.750000 0.825000 SE(N= 4) 0.186339E-01 0.381881E-01 5%LSD 6DF 0.644576E-01 0.132099 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLMS 0.833333 0.966667 0.800000 0.766667 TLTC 0.733333 0.933333 0.733333 0.633333 SE(N= 3) 0.215166E-01 0.440959E-01 5%LSD 6DF 0.744293E-01 0.152535 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN2N 29/ 1/21 21:43 :PAGE Thi nghiem F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 12) NO OBS STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 54 |CT | | | | | | | TLMS TLTC 12 0.84167 12 0.75833 0.90034E-010.37268E-01 4.4 0.0722 0.13790 0.76376E-01 10.1 0.1442 0.0032 0.0163 TN3: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE TN3N 29/ 1/21 9:58 :PAGE Thi nghiem VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 155556E-01 777778E-02 7.00 0.051 CT 622222E-01 311111E-01 28.00 0.006 * RESIDUAL 444445E-02 111111E-02 * TOTAL (CORRECTED) 822222E-01 102778E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN3N 29/ 1/21 9:58 :PAGE Thi nghiem VARIATE V004 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 123756 618778E-01 1.87 0.267 CT 109422 547111E-01 1.66 0.300 * RESIDUAL 132178 330444E-01 * TOTAL (CORRECTED) 365356 456694E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3N 29/ 1/21 9:58 :PAGE Thi nghiem MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 3 TLMS 0.433333 0.400000 0.500000 TLTC 1.62333 1.36667 1.38333 SE(N= 3) 0.192450E-01 0.104951 5%LSD 4DF 0.754363E-01 0.411387 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 TLMS 0.333333 0.533333 0.466667 TLTC 1.30667 1.56667 1.50000 SE(N= 3) 0.192450E-01 0.104951 5%LSD 4DF 0.754363E-01 0.411387 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3N 29/ 1/21 9:58 :PAGE Thi nghiem F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 55 VARIATE TLMS TLTC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 0.44444 1.4578 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.10138 0.33333E-01 7.5 0.0508 0.21370 0.18178 12.5 0.2668 56 |CT | | | 0.0061 0.2996 | | | | HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc BẢN NHẬN XÉT SINH VIÊN LÀM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Nguyễn Thị Minh Ngọc Lớp: K62CNSHB Mã sinh viên: 620518 Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Thực vật khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tên đề tài Khóa luận tốt nghiệp: BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN NHANH IN VITRO CÂY KIM TIỀN (ZAMIOCULCAS ZAMIFOLIA) Thời gian địa điểm thực tập: Từ 09/2020 đến 02/2021 Phịng thí nghiệm mơn Cơng nghệ sinh học thực vật –Khoa công nghệ sinh học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Thời gian thực tập: Từ 09/2020 đến 02/2021 Địa điểm thực tập: Phịng thí nghiệm môn Công nghệ sinh học thực vật –Khoa công nghệ sinh học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Ý KIẾN NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Tinh thần, thái độ học tập thực Khóa luận tốt nghiệp: Thái độ học tập nghiêm túc, hoàn thành tốt nội dung khoá luận …………………………………………………………………………………………….…… …………………………………………………………………………… …………………… ……………………………………………………………………… ………………… Mức độ hồn thành Khóa luận tốt nghiệp giao:  Hoàn thành tốt: X  Hoàn thành:  Chưa hoàn thành: Năng lực sáng tạo nghiên cứu viết Khóa luận tốt nghiệp: Có lực sáng tạo nghiên cứu viết Khoá luận tốt nghiệp ………………………………………………………………………………………… ……… …………………………………………………………………………………… …………… ……………………………………………………………………………… ………… Kết luận:  Sinh viên đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: X  Sinh viên không đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: Hà Nội, ngày 23 tháng năm 2021 Giáo viên hướng dẫn TS Nguyễn Thị Lâm Hải 57