Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma túy tổng hợp (ma, mdma) bằng phương pháp sắc ký khí khối phổ và ứng dụng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI o0o - ĐẶNG ĐỨC KHANH NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÂN TÍCH CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP (MA, MDMA) BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ VÀ ỨNG DỤNG Chuyên ngành: Hóa học LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1: TS TRẦN THỊ THÚY 2: TS TRẦN VIỆT HÙNG Hà Nội, 2012 Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn “Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma túy tổng hợp (MA, MDMA) phương pháp sắc ký khí khối phổ ứng dụng” cơng trình nghiên cứu thân Tất thông tin tham khảo dùng luận văn lấy từ cơng trình nghiên cứu có liên quan nêu rõ nguồn gốc danh mục tài liệu tham khảo Các kết nghiên cứu đưa luận văn hoàn toàn trung thực chưa công bố cơng trình khoa học khác Ngày 30 tháng 10 năm 2012 Tác giả Đặng Đức Khanh Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN LỜI CẢM ƠN Luận văn thực Phịng thí nghiệm, Khoa Hóa pháp, Viện Pháp y Qn đội Bộ mơn Hóa Phân tích, Viện Kỹ thuật Hóa học, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn TS Trần Thị Thúy TS Trần Việt Hùng tin tưởng, giao đề tài, tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ suốt thời gian thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn Lãnh đạo huy Viện Pháp y Quân đội, cán khoa Hóa pháp tạo điều kiện cho tơi học nhiệt tình giúp đỡ thời gian thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô môn Hóa Phân tích, Viện Kỹ thuật Hóa học, ĐHBKHN tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè động viên giúp đỡ suốt thời gian thực luận văn Hà Nội, ngày 26 tháng 10 năm 2012 Học viên Đặng Đức Khanh Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN MỤC LỤC trang DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan ma túy 1.1.1 Định nghĩa phân loại 1.1.2 Tổng quan MA, MDMA 1.1.2.1 Cơng thức cấu tạo tính chất hóa lý MA 1.1.2.2 Cơng thức cấu tạo tính chất hóa lý MDMA 1.1.3 Tác dụng dược lý dược động học MA, MDMA 1.1.3.1 Tác dụng dược lý 1.1.3.2 Dược động học 1.2 Tổng quan kỹ thuật xử lý mẫu thường dùng phân tích 10 ma túy 1.2.1 Kỹ thuật chiết lỏng lỏng 11 1.2.2 Kỹ thuật chiết pha rắn 11 1.2.3 Kỹ thuật vi chiết pha rắn 13 1.2.4 Kỹ thuật dẫn xuất hóa tác nhân acyl 14 1.3 Tổng quan sắc ký khí khối phổ 15 1.3.1 Cấu tạo hệ thống sắc ký khí khối phổ 16 1.3.2 Kỹ thuật phân tích ưu nhược điểm sắc ký khí khối phổ 18 1.4 Các phương pháp phân tích ma túy tổng hợp mẫu dịch sinh 19 học CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Đối tượng nghiên cứu 21 2.2 Hóa chất, dụng cụ thiết bị nghiên cứu 21 2.2.1 Hóa chất, chất chuẩn 21 2.2.2 Dụng cụ thiết bị 22 2.3 Phương pháp nghiên cứu 22 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN 2.3.1 Lấy mẫu bảo quản mẫu 23 2.3.2 Chuẩn bị mẫu nghiên cứu 23 2.3.3 Quy trình xử lý mẫu 24 2.3.4 Định tính định lượng MA, MDMA 27 2.3.5 Đánh giá quy trình phân tích 29 2.3.6 Áp dụng quy trình phân tích mẫu thực tế 30 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 32 Kết khảo sát điều kiện phân tích GC/MS, phản ứng tạo dẫn xuất đánh giá quy trình phân tích 32 3.1.1 Kết khảo sát điều kiện phân tích GC/MS 32 3.1.2 Kết khảo sát độ ổn định thiết bị phân tích GC/MS 38 3.1.3 Kết so sánh độ nhạy GC/MS mẫu có dẫn xuất không dẫn xuất TFAA 41 3.1.4 Kết khảo sát độ lặp lại phản ứng tạo dẫn xuất 41 3.1.5 Kết khảo sát khoảng tuyến tính LOD, LOQ 43 3.1.6 Kết khảo sát độ đặc hiệu phương pháp 48 3.1.7 Kết khảo sát độ xác quy trình phân tích 49 3.1.8 Kết khảo sát độ thu hồi quy trình phân tích 52 3.2 Kết phân tích mẫu thực tế giám định 53 3.3 Thảo luận 56 3.3.1 Quy trình chiết mẫu 56 3.3.2 Phản ứng tạo dẫn xuất 56 3.3.3 Phương pháp phân tích GC/MS 56 3.3.4 Phân tích mẫu thực tế 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 PHỤ LỤC Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT AM : Amphetamin EI : Electric ionization - Ion hóa điện tử FID Flame ionization detector – Detector ion hóa lửa GC : Gas chromatography - Sắc ký khí GC/MS : Gas chromatography/ mass spectrometry - Sắc ký khí khối phổ HFBA : Heptafluorobutyric anhydride IS : Internal standard - Chuẩn nội LC/MS : Liquid chromatography/ mass spectrometry - Sắc ký lỏng khối phổ LOD : Limit of detection - Giới hạn phát LOQ : Limit of quantification - Giới hạn định lượng MA : Methamphetamin MA-TFA : Dẫn xuất Trifluoro acetyl MA MDA : 3,4- methylenedioxyamphetamin MDMA : 3,4- methylenedioxymethamphetamin MDMA-TFA : Dẫn xuất Trifluoro acetyl MDMA MS MSD Mass spectrometry – khối phổ : Mass spectrometry detector - Detector khối phổ NPD Nitor phospho detector – Detector NPD RSD Relative standard Deviation – Độ lệch chuẩn tương đối SPE : Solid phase extraction - Chiết pha rắn TCD TFAA Thermal conductivity detector – detector dẫn nhiệt : Trifluoroacetic anhydride tR Đặng Đức Khanh Retention time - Thời gian lưu Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 : Chuẩn bị mẫu hỗn hợp chất chuẩn mẫu máu nước 24 tiểu Bảng 3.1 : Mảnh phổ m/z MA, MDA-d5, MDMA sau dẫn xuất 38 TFA dùng để định tính, định lượng MA, MDMA Bảng 3.2 : Bảng 3.2.Kết khảo sát độ ổn định thiết bị thông qua thời 39 gian lưu Bảng 3.3 : Kết khảo sát độ ổn định thiết bị thông qua diện tích píc 40 Bảng 3.4 : Kết so sánh độ nhạy GC/MS mẫu có khơng 41 dẫn xuất TFAA Bảng 3.5 : Kết khảo sát độ lặp lại kỹ thuật tạo dẫn xuất 42 Bảng 3.6 : Kết khảo sát khoảng tuyến tính MA mẫu máu 43 Bảng 3.7 : Kết khảo sát khoảng tuyến tính MDMA mẫu 44 máu Bảng 3.8 : Kết khảo sát khoảng tuyến tính MA mẫu nước 45 tiểu Bảng 3.9 : Kết khảo sát khoảng tuyến tính MDMA mẫu 46 nước tiểu Bảng 3.10 : Kết khảo sát độ xác quy trình phân tích 50 mẫu máu Bảng 3.11 : Kết khảo sát độ xác quy trình phân tích 51 mẫu nước tiểu Bảng 3.12 : Kết khảo sát độ quy trình phân tích MA, 52 MDMA mẫu máu nước tiểu Bảng 3.13 : Kết phân tích MA, MDMA mẫu má nước tiểu 53 giám định Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 : Các dạng khác ma túy tổng hợp Hình 1.2 : Sơ đồ chuyển hóa Methamphetamin Hình 1.3 : Sơ đồ chuyển hóa MDMA 10 Hình 1.4 : Các bước tiến hành SPE 12 Hình 1.5 : Sơ đồ cấu tạo hình ảnh thiết bị vi chiết pha rắn 13 Hình 1.6 : Sơ đồ cấu tạo thiết bị sắc ký khí khối phổ 16 Hình 1.7 : Hình ảnh cột mao quản, cấu tạo cắt ngang cột mao quản 17 Hình 3.1 : Đồ thị chương trình nhiệt độ cột tách sắc ký 32 Hình 3.2 : (A) Sắc ký đồ MA; (B) Phổ khối scan MA; (C) Sắc 34 ký đồ MA-TFA; (D) Phổ khối scan MA-TFA; (E) Sắc ký đồ m/z 154, 110, 118 Hình 3.3 : (A) Sắc ký đồ MDMA; (B) Phổ khối scan MDMA; 35 (C) Sắc ký đồ MDMA-TFA; (D) Phổ khối scan MDMA-TFA; (E) Sắc ký đồ m/z 154, 162, 135 Hình 3.4 : (A) Sắc ký đồ MDA-d5; (B) Phổ khối scan MDA- 36 d5; (C) Sắc ký đồ MDA-d5-TFA; (D) Phổ khối scan MDA-d5-TFA; (E) Sắc ký đồ m/z 136, 166, 167 Hình 3.5 : (A) Sắc ký đồ MA-HFB; (B) Phổ khối scan MA- 37 HFB; (C) Sắc ký đồ MDMA-HFB; (D) Phổ khối scan MDMA-HFB Hình 3.6 : Đồ thị tương quan tuyến tính tỷ lệ diện tích pic tỷ lệ 44 lượng chất MA/MDA-d5 mẫu máu Hình 3.7 : Đồ thị tương quan tuyến tính tỷ lệ diện tích pic tỷ lệ Đặng Đức Khanh 45 Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN lượng chất MDMA/MDA-d5 mẫu máu Hình 3.8 : Đồ thị tương quan tuyến tính tỷ lệ diện tích pic tỷ lệ 46 lượng chất MA/MDA-d5 mẫu nước tiểu Hình 3.9 : Đồ thị tương quan tuyến tính tỷ lệ diện tích pic tỷ lệ 47 lượng chất MDMA/MDA-d5 mẫu nước tiểu Hình 3.10 : Sắc ký đồ phân tích mẫu mẫu máu khơng có chất ma túy 48 Hình 3.11 : Sắc ký đồ phân tích mẫu máu có thêm chuẩn MA, MDMA, 49 MDA-d5 Hình 3.12 : Sắc ký đồ phân tích mẫu máu Nguyễn Hải N có MDMA 54 (14,87 phút) Hình 3.13 : Săc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu Trần Thị P khơng có 55 MA, MDMA Hình 3.14 : Sắc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu Trịnh Bá N có MA 55 (9,96 phút) DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Phụ lục : Sơ đồ phân mảnh MA-TFA Phụ lục : Sơ đồ phân mảnh MDMA-TFA Phụ lục : Thiết bị GC 6890N/ MS 59731 Agilent Viện Pháp y Quân đội Phụ lục : Phụ lục 4: Sắc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu Blank Phụ lục : Phụ lục 5: Sắc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu thêm chuẩn MA, MDMA, MDA-d5 Phụ lục : Phụ lục 6: Sắc ký đồ phân tích mẫu máu Vũ Thị H có MDMA Phụ lục : Kết xét nghiệm mẫu máu nước tiểu đối chứng LC/MS Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN MỞ ĐẦU Hàng năm, chất ma túy tổng hợp vận chuyển trái phép vào Việt Nam với số lượng lớn, chất sử dụng nhiều vũ trường, quán bar… Các chất ma túy tổng hợp phổ biến phải kể đến amphetamin (AM), methamphetamin (MA), 3,4-methylenedioxyamphetamine (MDA), 3,4- methylenedioxymethamphetamine (MDMA) Những loại ma túy lưu thông thị trường cách bất hợp pháp dạng viên, bột tinh thể với tên gọi Yinyang, Adam, Eva, Love, VW, Ice, Mọi da đỏ, Mè đen, Tên lửa, Thiên thần, viên lắc, thuốc lắc, viên chúa, viên hoàng hậu, ecstasy, mecsydes, đá … Đối tượng sử dụng chất ma tuý tổng hợp tập trung chủ yếu tầng lớp niên, trung niên sống Thành phố, thị xã Số người sử dụng ma tuý tăng cao có ảnh hưởng xấu tới trật tự an ninh xã hội Sử dụng ma túy tổng hợp thường tụ tập theo nhóm đông người vũ trường, quán bar hay nhà nghỉ, nhà riêng Có nhiều kỹ thuật xử lý mẫu phương pháp để định tính, định lượng chất ma túy tổng hợp Hiện Việt Nam xét nghiệm ma túy thường sử dụng phương pháp sắc ký lỏng, sắc ký khí khối phổ, kỹ thuật xử lý mẫu chiết lỏng lỏng, chiết pha rắn, vi chiết pha rắn Một số hạn chế công tác xét nghiệm chất ma túy tổng hợp Việt Nam thiết bị phân tích sử dụng chồng chéo, chưa chuyên dụng, độ nhạy chưa cao, kỹ thuật xử lý mẫu chưa nghiên cứu đầy đủ toàn diện, hệ thống chất chuẩn nội chuẩn chưa đáp ứng yêu cầu Từ lý dẫn đến chất lượng kết xét nghiệm chất ma túy chưa cao Các chất ma túy mẫu dịch sinh học thường có nồng độ thấp, lượng mẫu lấy phân tích thường xun khơng nhiều Do cần có kết hợp tốt kỹ thuật xử lý mẫu phương pháp phân tích Sự kết hợp chặt chẽ kỹ thuật xử lý Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN Bảng 3.11: Kết khảo sát độ xác quy trình phân tích mẫu nước tiểu Diện tích pic Tỷ lệ diện tích pic Tên mẫu MATFA MDMATFA MDAd5TFA MATFA/IS MDMATFA/IS Mẫu NT 90418 46647 503179 0,179694 0,092705 Mẫu NT 92068 44890 519357 0,177273 0,086434 Mẫu NT 84297 44664 522943 0,161197 0,085409 Mẫu NT 99602 49303 528499 0,188462 0,093289 Mẫu NT 83542 48939 515930 0,161925 0,094856 Mẫu NT 87391 49529 502458 0,173927 0,098573 TB 0,173746 0,091878 SD 0,010598 0,005057 RSD (%) 6,01 5,50 Số liệu thống kê Mẫu NT 539414 370316 470281 1,147004 0,787436 Mẫu NT 538612 391431 477242 1,128593 0,820194 Mẫu Nt 569014 373540 468392 1,214824 0,797494 Mẫu NT 536766 385395 466927 1,149572 0,825386 Mẫu NT 479827 400764 470295 1,020268 0,852154 Mẫu NT 580177 421154 481938 1,203842 0,873876 TB 1,144017 0,826090 SD 0,069547 0,032588 RSD (%) 6,08 3,94 Số liệu thống kê Mẫu NT 7368103 3508246 501374 14,695822 6,997264 Mẫu NT 6944878 3531889 505735 13,732247 6,983675 Mẫu NT 6782723 3400508 498261 13,612791 6,824752 Mẫu NT 6758689 3501513 488044 13,848524 7,174585 Mẫu NT 7587092 3655817 508264 14,927463 7,192752 Mẫu NT 7554119 3239553 503854 14,992674 6,429547 TB 14,301587 6,933763 SD 0,636961 0,282032 RSD (%) 4,45 4,07 Số liệu thống kê 51 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN Nhận xét: Bảng 3.10 3.11 cho thấy độ lặp lại quy trình phân tích MA, MDMA mẫu máu nước tiểu tốt, kết có RSD < 8%, kết RSD nhỏ chứng tỏ quy trình có độ lặp lại cao lần phân tích, kết có độ chụm tốt Ngồi lý thao tác tiến hành phải tuân thủ theo điều kiện quy trình, có lặp lại tốt cịn có lý đề tài sử dụng MDA-d5 chất nội chuẩn cho vào mẫu máu, nước tiểu từ đầu trước xử lý, việc làm loại sai số mẫu qúa trình xử lý, lượng chất bao nhiều tỷ lệ chất phân tích MA, MDMA chia cho MDA-d5 tiệm cần số ban đầu cho vào mẫu máu 3.1.8 Kết khảo sát độ thu hồi quy trình phân tích Độ thu hồi (R %) quy trình phân tích thực cách thêm mẫu chuẩn hỗn hợp MA, MDMA, MDA-d5 vào mẫu máu, nước tiểu trắng Độ thu hồi thực điểm nồng độ khoảng nghiên cứu Mỗi điểm nồng độ tiến hành thực nghiệm lặp lại lần phân tích theo quy trình điều kiện GC/MS, lấy giá trị trung bình Lượng MA MDMA thêm vào mẫu máu nước tiểu điểm 25ng; 200ng; 2000ng (ở điểm lượng MA, MDMA nhau) Lượng nội chuẩn mẫu 200ng Bảng 3.12 Kết khảo sát độ thu hồi quy trình phân tích MA, MDMA mẫu máu nước tiểu Lượng thêm vào (ng) 25 200 Thống kê kết Mẫu nước tiểu MA MDMA MA MDMA Lượng tìm thấy (ng) 21.9 22.2 22.5 22.6 Độ thu hồi (%) 87,6 88,8 90,0 90,4 RSD (%) 7,32 6,84 7,04 6,55 Lượng tìm thấy (ng) 181.2 183.4 187 191.8 Độ thu hồi (%) 90,6 91,7 93,5 95,9 RSD 6,07 6,22 5,18 4,80 1874.3 1902.5 1916.4 1908.3 Độ thu hồi (%) 93,7 95,1 95,8 95,4 RSD 5,02 4,77 5,14 4,92 Lượng tìm thấy (ng) 2000 Mẫu máu 52 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN Nhận xét: Qua kết thống kê bảng 3.12 cho thấy độ thu hồi MA, MDMA mẫu máu nước tiểu nằm khoảng sai số < 15% Độ thu hồi nhỏ 87,6% Độ thu hồi lớn 95,8% Kết cho thấy độ thu hồi mẫu máu nước tiều cao, đáp ứng yêu cầu phân tích lượng vết 3.2 Kết phân tích mẫu thực tế giám định Đề tài xây dựng quy trình phân tích MA, MDMA mẫu máu nước tiểu có phản ứng tạo dẫn xuất với TFAA (mục 2.3.3) điều kiện phân tích GC/MS (mục 3.1.1) Áp dụng quy trình tiến hành phân tích 20 ca gồm 28 mẫu máu nước tiểu gửi giám định Viện Pháp y Quân đội từ Bệnh viện Việt Đức, Hòe nhai tổ chức giám định pháp y Trung tâm Pháp y Hải Phòng, Lạng Sơn, Vĩnh Phúc Bảng 3.13 Kết phân tích MA, MDMA mẫu máu nwocs tiểu giám định Mẫu máu (ng/ml) TT Họ tên Mẫu nước tiểu (ng/ml) Địa MA MDMA MA MDMA Trần Văn A Hà Nội KPH KPH Nguyễn Hải B Hà Nội 149,2 KPH Nguyễn Tiến T Hà Nội 102,5 KPH 43,7 KPH Vũ Thị H Hà Nội KPH 238,9 KPH 33,5 Hoàng Anh T Hà Nội KPH KPH KPH KPH Trần Thị P Hà Nội KPH KPH KPH KPH Nguyễn Bá P Hà Nội 308,5 KPH 35,0 KPH Vũ Thanh H Lạng Sơn KPH KPH Trịnh Bá N Lạng Sơn 392,9 KPH 10 Phùng Thị X Lạng Sơn KPH KPH 53 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN 11 Trần Văn H Lạng Sơn KPH KPH 12 Nguyễn Văn Đ Lạng Sơn 353,3 KPH 13 Giang Văn H Hải Phòng KPH KPH 14 Nguyễn Huyền T Hải Phòng KPH 228,4 15 Nguyễn Hải N Hải Phòng KPH 390,5 KPH KPH 16 Trần Đức T Hải Phịng 189,3 KPH 55,2 KPH 17 Hồng Văn H Hải Phòng KPH 32,5 KPH 341,6 18 Nguyễn Thanh T Hải Phịng 88,6 KPH 19 Phùng Chí T Vĩnh phúc KPH KPH 20 Nguyễn Văn H Vĩnh phúc KPH KPH Ghi chú: - (KPH) Không phát thấy (< LOD) -( [ ) Khơng có mẫu (máu nước tiểu) - Sai số kết ±8% Hình 3.12 Sắc ký đồ phân tích mẫu máu Nguyễn Hải N có MDMA (tR = 14,87 phút) 54 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN Hình 3.13 Sắc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu Trần Thị P khơng có MA, MDMA Hình 3.1.4 Sắc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu Trịnh Bá N có MA (tR = 9,96 phút) 55 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN 3.3 Thảo luận 3.3.1 Quy trình chiết mẫu MA MDMA chất hữu có nhóm amin, đề tài sử dụng cột chiết pha rắn C8 để chiết làm MA, MDMA mẫu máu, nước tiểu có mẫu phức tạp Quy trình sử dụng SPE lượng dung mơi dùng ít, không tốn kém, độc hại phương pháp chiết lỏng lỏng hay dùng trước Quy trình sử dụng chất nội chuẩn MDA-d5 đưa vào mẫu máu nước tiểu trước tiến hành xử lý mẫu cho độ xác cao, dễ kiểm sốt tồn q trình xử lý mẫu thiết bị phân tích Và thể tích hịa tan mẫu cuối trước phân tích khơng cần xác, dễ điều chỉnh thể tích Lượng mẫu máu nước tiểu lấy phân tích (5ml), phù hợp cho đối tượng khác khám bệnh, giám định pháp y 3.2 Phản ứng tạo dẫn xuất MA, MDMA chất hữu có nhóm amin, khả bay kém, phù hợp với sắc ký khí phân tích trực tiếp GC cho độ nhạy thấp Trong thực phản ứng acyl hóa MA, MDMA với tác nhân dẫn xuất TFAA xảy nhanh hoàn toàn, nhiệt độ phản ứng thấp Sau phản ứng tạo dẫn xuất nhóm amin MA, MDMA tạo thành amide làm tăng khả bay chất phân tích, tăng phù hợp hệ thống GC, làm tăng độ nhạy lên nhiều Đề tài tiến hành so sánh cho thấy mẫu có tạo dẫn xuất có tín hiệu lớn mẫu không tạo dẫn xuất 3.3.3 Phương pháp phân tích GC/MS Phương pháp phân tích sắc ký khí detector khối phổ (GC/MS) phương pháp phân tích đại, có độ xác cao dựa vào detector MS cho thông tin dạng sắc ký đồ phổ khối Chế độ phân tích SIM cho độ nhạy cao Sắc ký khí sử dụng cột mao quản có chiều dài lớn từ 30 đến 100m, đường kính nhỏ từ 0,1mm đến 0,32mm khả tách hỗn hợp nhiều chất mẫu, thích hợp cho phân tích đồng thời nhiều chất mẫu mẫu có 56 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN phức tạp GC/MS cho kết phân tích có độ lặp lại cao thiết bị ổn định Đề tài sử dụng chất nội chuẩn MDA-d5 thể tích tiêm mẫu khơng cần xác, điều làm triệt tiêu sai số thể tích tiêm mẫu khơng Đề tài tiến hành xác định khoảng tuyến tính giới hạn LOD, LOQ 3.3.4 Phân tích mẫu thực tế Kết phân tích bảng 3.13 cho thấy có ca giám định không phát thấy MA, MDMA mẫu máu nước tiểu Còn lại 11 ca giám định phát thấy MA MDMA , nồng độ MA, MDMA mẫu máu nước tiểu phát thấy nằm khoảng tuyến tính khảo sát Khơng có ca giám định phát thấy có MA MDMA mẫu máu hay nước tiểu Trong tổng số ca gửi giám định có mẫu máu nước tiểu có ca giám định phát thấy có ma túy mẫu máu nước tiểu, có ca âm tính ca phát thấy MDMA mẫu máu cịn mẫu nước tiểu khơng phát thấy Kết phân tích mẫu thực tế tính dựa vào phương trình đưa (mục 2.3.4) Do mẫu máu nước tiểu thực tế giám định không lúc có đủ 5ml, lượng chất nội chuẩn đưa vào mẫu thay đổi nên phương trình hồi quy thể tương quan tuyến tính tỷ lệ lượng chất chia cho nội chuẩn Nếu lượng nội chuẩn đưa vào mẫu giám định 200ng lượng xây dựng đường nội chuẩn tỷ số nội chuẩn mẫu đường chuẩn Tác giả gửi 02 mẫu máu 02 mẫu nước tiểu xét nghiệm đối chứng Viện Pháp y Quốc gia phương pháp LC/MS Kết (phụ lục 7) cho thấy có sai số nằm khoảng cho phép < 8% 57 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đề tài nghiên cứu thực theo mục tiêu đưa với kết đạt sau: Khảo sát hồn thiện điều kiện phân tích định tính định lượng MA, MDMA sử dụng chất nội chuẩn MDA-d5 mẫu máu nước tiểu GC/MS có tạo dẫn xuất với TFAA Khảo sát khoảng tuyến tính MA, MDMA giới hạn LOD, LOQ quy trình Phương pháp GC/MS có độ xác cao độ lặp lại tốt, có tính đặc hiệu Khảo sát độ lặp lại phản ứng tạo dẫn xuất Xây dựng quy trình xử lý mẫu chiết pha rắn, có khảo sát độ xác độ thu hồi quy trình phân tích Đánh giá độ đặc hiệu phương pháp phân tích MA, MDMA mẫu máu, nước tiểu Đề tài áp dụng quy trình xây dựng điều kiện GC/MS thực phân tích 20 ca giám định ma túy (tổng số 28 mẫu máu nước tiểu) 11 ca phát thấy MA MDMA, cịn ca khơng phát thấy MA MDMA Kết phân tích có ý nghĩa thực tiễn cao cho quan điều tra, giám định pháp y, cho tổ chức xã hội KIẾN NGHỊ Ứng dụng quy trình phân tích vào xét nghiệm MA, MDMA mẫu máu, nước tiểu giám định pháp y Các kết kết luận dương tính với ma túy MA, MDMA mẫu máu, nước tiểu phải sử dụng phương pháp phân tích có detector MS LC/MS GC/MS Cần tiếp tục nghiên cứu quy trình phân tích đồng thời nhiều chất ma túy tổng hợp mẫu máu nước tiểu, quy trình nên sử dụng chất nội chuẩn đồng vị để có độ xác cao 58 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Trần Tử An (1997), Độc chất học, Bộ môn phân tích, độc chất Trường Đại học Dược Hà Nội, (tr 125-130) Phạm Quốc Chinh (2009), Xây dựng quy trình xác định MA, AM mẫu dịch sinh học sắc ký lỏng khối phổ Luận văn Thạc sỹ dược học Tô Minh Hùng (2005), “Thẩm định phương pháp phân tích nghiên cứu kiểm nghiệm thuốc”, Tạp chí Kiểm nghiệm thuốc, tập 1, tr 66-69 Đặng Đức Khanh (2007), “Ngiên cứu quy trình phân tích đồng thời số chất gây nghiên mẫu nước tiểu phương pháp sắc ký khí khổi phổ”, Tạp chí Y học Quân sự, (1), pp 116-119 Đặng Đức Khanh, Nguyễn Thị Ngọc Minh, Trần Thị Thúy, Trần Việt Hùng (2012), “Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma túy tổng hợp phương pháp sắc ký khí khối phổ”, Tạp chí Y học Quân sự, 4(280), tr 4549 Phan Quốc Kinh (1995), Các chất ma túy Việt Nam, Nxb KHKT, tr 120-136 Nguyễn Xuân Trường (2007), “Truy nguyên nguồn gốc Heroin Việt Nam sở tính chất có mặt tạp chất mẫu”, Luận án tiến sỹ dược học Phạm Hùng Việt (2005), Sắc ký khí sở lý thuyết khả ứng dụng, Nxb Đại học QGHN Văn phòng Tuyên truyền phòng chống ma túy (2009), Những vấn đề cơng tác phịng chống ma túy Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN Tiếng Anh 10 Anthony C Moffat, M David Osselton, Brian Widdop (2004), Clarke's Analysis of Drugs and Poisons Third edition, volume II, pages 12261228 11 Barry K Logan (2002), Methamphetamine-effects on human performance and behavior, Pages 134-145 12 Cody J.T (1993), “Metabolic precursors to amphetamine and methamphetamine”, For Sci Rev.,5(2), 109-127 13 Daniel C Harris, Quantitative Chemical Analysis, Seventh Edition, pp 474-494 14 Fulton G Kitson(1996), Gas chromatography and mass spectrometry, Academic press 15 Gan BK, Baugh D, Liu RH, Walia AS (1991) , “Simultaneous analysis of amphetamine, methamphetamine, and 3, 4- methylenedioxymethamphetamine (MDMA) in urine samples by solidphase extraction, derivatization, and gas chromatography/mass spectrometry”, J Forensic Sci.,36(5):1331-41 16 Hendrickson H, Laurenzana E, Owens SM (2006), “Quantitative Determination of Total Methamphetamine and Active Metabolites in Rat Tissue by Liquid Chromatography With Tandem Mass Spectrometric Detection” AAPS Journal.; 8(4): E709-E717 DOI 17 Hans-joachim(2008), Handbook of GC/MS, Second Edition, Wiley-VCH press 18 Jeff Wise Terry Danielson(2008), “Analysis of amphetamine, methylamphetamine, MDA, MDMA in whole blood using in-matrix ethyl Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học Viện Kỹ thuật Hóa học –Trường ĐHBKHN chloroformate derivatization and automated headspace solid-phase microextraction followed by GC-MS ” Forensic Toxicol,(26) pp 66-70 19 Jehuda Yinon(1995), Forensic application of mass spectrometry, CRC press 20 L.A King (2009) Forensic Chemistry of Substance Misuse: A Guide to Drug Control 21 Major R.E(1997), Sample preparation in analytical Chemistry, Academic press, pp 17-54 22 Michael J.Telepchak, Thomas F August(2004), Forensic and Clinnical Applications of Solid Phase Extraction, Humana Press 23 Seng-Meng Wang, Chih-Che Lin(2006), “Distribution characteristics of methamphetamine and amphetamine in urine and hair specimens collected from alleged methamphetamine users in northern Taiwan”, Science Direct, (576), pp.140-146 24 Smith, M.A (2003), Principles of Forensic Toxicology, Vol-1,2 d ed Washing ton, DC; American Association of Clinical Chemistry 25 Suzanne Bell (2006) Forensic chemistry 2006 by Pearson education, Inc Pearson Prentice Hall Pearson Education,Inc Upper Saddle River, newJersey 07458 26 Takeshi Kumazawa, Kenji hara(2011), “Fragmentation Pathways of trifluoroacetyl Derivatives of Methamphetamine, Amphetamine, MDA, MDMA by GC/MS”, International Journal of Spectroscopy, (254), pp 40-48 Đặng Đức Khanh Luận văn Thạc sỹ Khoa học Hóa học PHỤ LỤC Phụ lục 1: Sơ đồ phân mảnh MA-TFA Phục lục 2: Sơ đồ phân mảnh MDMA-TFA Phụ lục 3: Thiết bị GC 6890N/ MS 59731 Agilent Viện Pháp y Quân đội Phụ lục 4: Sắc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu Blank Phụ lục 5: Sắc ký đồ phân tích mẫu nước tiểu thêm chuẩn MA, MDMA, MDA-d5 Phụ lục 6: Sắc ký đồ phân tích mẫu máu Vũ Thị H có MDMA ... ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn ? ?Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma túy tổng hợp (MA, MDMA) phương pháp sắc ký khí khối phổ ứng dụng? ?? cơng trình nghiên cứu thân Tất thông tin tham khảo... phân tích cho phép phát chất ma túy tổng hợp có nồng độ thấp Xuất phát từ lý tiến hành đề tài “ Nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích chất ma túy tổng hợp (MA, MDMA) phương pháp sắc ký khí khối. .. 1.3 Tổng quan sắc ký khí khối phổ 15 1.3.1 Cấu tạo hệ thống sắc ký khí khối phổ 16 1.3.2 Kỹ thuật phân tích ưu nhược điểm sắc ký khí khối phổ 18 1.4 Các phương pháp phân tích ma túy tổng hợp