Phân lập và nghiên cứu đặc điểm của chủng xạ khuẩn đối kháng với nấm gây bệnh thối đỏ trên cây mía

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM CỦA CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM GÂY BỆNH THỐI ĐỎ TRÊN CÂY MÍA HÀ NỘI, 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM CỦA CHỦNG XẠ KHUẨN ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM GÂY BỆNH THỐI ĐỎ TRÊN CÂY MÍA Giảng viên hƣớng dẫn : ThS TRẦN THỊ HỒNG HẠNH Sinh viên thực : NGUYỄN THỊ HUYỀN Mã SV : 637325 Lớp : K63CNSHD HÀ NỘI, 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chƣa đƣợc sử dụng công bố Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận tốt nghiệp đƣợc cảm ơn thông tin trích dẫn đựợc rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng 05 năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thị Huyền i LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn Ths Trần Thị Hồng Hạnh, ngƣời trực tiếp hƣớng dẫn tận tình giúp đỡ em học tập nhƣ q trình hồn thành khoá luận Em xin chân thành cảm ơn thầy, cô giáo, cán kỹ thuật viên giảng dạy công tác Bộ môn Công nghệ Vi sinh, khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ em q trình thực khố luận Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới thầy, cô giáo Học viện Nông nghiệp Việt Nam dạy, giúp đỡ em trình học tập trƣờng Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè quan tâm, ủng hộ giúp đỡ em suốt q trình làm khố luận Em xin chân thành cảm ơn Hà Nội, ngày tháng 05 năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thị Huyền ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH ẢNH vii DANH MỤC VIẾT TẮT viii TÓM TẮT ix CHƢƠNG MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 Yêu cầu 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Cây mía .3 2.2 Một số bệnh nấm gây mía 2.3 Tổng quan nấm Colletotrichum .8 2.4 Xạ khuẩn 10 2.5 Tình hình nghiên cứu liên quan đến đề tài 13 2.5.1 Các nghiên cứu nƣớc 13 2.5.2 Các nghiên cứu nƣớc 14 CHƢƠNG VẬT LIỆU, NỘI DUNG, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đối tƣợng nghiên cứu 16 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 16 3.3 Vật liệu nghiên cứu 16 3.3.1 Vật liệu 16 iii 3.3.2 Hóa chất, thiết bị nghiên cứu 16 3.4 Nội dung nghiên cứu 17 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 18 3.5.1 Thu thập xử lý mẫu 18 3.5.2 Phân lập nấm gây bệnh 18 3.5.3 Phƣơng pháp gây bệnh nhân tạo 18 3.5.4 Nghiên cứu đặc điểm hình thái nấm phân lập 19 3.5.5 Phƣơng pháp giữ giống 19 3.5.6 Phân lập xạ khuẩn 19 3.5.7 Sàng lọc xạ khuẩn có khả đối kháng nấm gây bệnh thối đỏ mía 20 3.5.8 Tính hiệu suất đối kháng nấm 20 3.5.9 Nghiên cứu đặc điểm hình thái xạ khuẩn môi trƣờng khác 21 3.5.10 Đánh giá khả sinh enzyme ngoại bào xạ khuẩn 21 3.5.11 Nghiên cứu ảnh hƣởng điều kiện nuôi cấy để khả sinh trƣởng xạ khuẩn 21 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Thu thập mẫu phân lập chủng nấm gây bệnh thối đỏ mía 23 4.2 Tái lây nhiễm tái phân lập 25 4.3 Nghiên cứu đặc điểm chủng nấm gây bệnh thối đỏ mía 27 4.3.1 Đặc điểm hình thái 27 4.3.2 Theo dõi sinh trƣởng phát triển tản nấm 31 4.4 Phân lập xạ khuẩn 32 4.5 Khả đối kháng chủng xạ khuẩn với nấm TĐ31 33 4.6 Đặc điểm sinh học chủng xạ khuẩn X6, X7 35 4.6.1 Đặc điểm hệ sợi cuống sinh bào tử 35 4.6.2 Đặc điểm hình thái môi trƣờng khác 36 iv 4.6.3 Khả sinh enzyme ngoại bào 37 4.6.4 Ảnh hƣởng số điều kiện nuôi cấy đến sinh trƣởng phát triển cúa xạ khuẩn X6, X7 38 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 Kết luận 43 Kiến nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 PHỤ LỤC 51 v DANH MỤC BẢNG Bảng Đặc điểm hình thái khuẩn lạc phân lập môi trƣờng PDA 23 Bảng Kích thƣớc tản nấm chủng nấm gây bệnh thối đỏ mía đƣợc theo dõi ngày 32 Bảng Bán kính vịng đối kháng chủng xạ khuẩn với nấm TĐ31 5, 14 ngày sau thí nghiệm (STN) 34 Bảng 4 Đặc điểm nuôi cấy chủng xạ khuẩn X6, X7 môi trƣờng ISP 37 Bảng Đánh giá khả đồng hoá Các bon chủng X6, X7 41 Bảng Đánh giá khả đồng hoá Ni tơ chủng X6, X7 41 vi DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình Các mẫu mía (thân, lá) thu thập có triệu chứng bệnh thối đỏ 23 Hình Hình chụp khuẩn lạc chủng nấm phân lập đƣợc sau ngày nuôi cấy môi trƣờng PDA 24 Hình Kết sau ngày tái lây nhiễm mía 25 Hình 4 Kết tái phân lập 26 Hình 4.5 Hệ sợi (A), Bào tử (B), Cuống sinh bào tử (C), Đĩa áp (D) chủng TĐ11 27 Hình Hệ sợi bào tử (A), Cuống sinh bào tử (B) chủng nấm TĐ12 28 Hình Hệ sợi (A), Bào tử (B), Cuống sinh bào tử (C), Đĩa áp (D) chủng TĐ22 29 Hình Hệ sợi (A), Bào tử (B), Cuống sinh bào tử đĩa áp (C, D) chủng TĐ23 30 Hình Hệ sợi (A), Bào tử (B), Cuống sinh bào tử (C), Đĩa áp (D) chủng TĐ31 31 Hình 10 Sàng lọc xạ khuẩn đối kháng chủng nấm TĐ31 33 Hình 11 Khả kháng nấm TĐ31 chủng xạ khuẩn X6 so với đối chứng sau ngày thí nghiệm 35 Hình 4.12 Sợi khí sinh Cuống sinh bào tử xạ khuẩn X6 (A,B) X7 (C,D) 36 Hình 13 Hoạt tính protease X6 (A) cellulose X7 (B) 38 Hình 14 Xạ khuẩn X6 (A), X7 (B) điều kiện nhiệt độ khác sau ngày nuôi cấy môi trƣờng ISP4 39 Hình 15 Xạ khuẩn X6, X7 điều kiện pH7, pH8, pH9 sau ngày nuôi cấy môi trƣờng ISP4 40 Hình 16 Khả chịu muối xạ khuẩn X6 X7 42 vii DANH MỤC VIẾT TẮT BKVĐK Bán kính vịng đối kháng CFU Conoly Forming Unit ĐC Đối chứng HSĐK Hiệu suất đối kháng ISP International Streptomyces Project GBIF Global Biodiversity Information Facility PDA Potato Dextrose Agar STN Sau thí nghiệm TN Thí nghiệm : viii CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận - Phân lập đƣợc chủng nấm gây bệnh chủng (TĐ22, TĐ23, TĐ31) phân loại vào nấm Colletotrichum Chủng TĐ31 đƣợc lựa chọn làm đại diện cho nấm bệnh để thực thí nghiệm - Từ mẫu đất vũng rễ mía phân lập đƣợc 18 chủng xạ khuẩn, có chủng (X6) kháng mạnh; chủng (X2, X3, X7, X10) kháng trung bình Chủng X6 có hiệu suất kháng nấm cao đạt 61,43% - Xạ khuẩn X6 sinh sắc tố melanin, có khả phân giải protein, thích hợp sinh trƣởng 30oC khoảng pH7 đến pH10, khả chịu mặn đến 3% Chủng X6 thích hợp sinh trƣởng với nguồn Các bon Lactose, Maltose; nguồn ni tơ KNO3 - Xạ khuẩn X7 có khả sinh enzyme ngoại bào cellulase, sinh trƣởng tốt 30oC khoảng pH6 đến pH12, khả chịu mặn đến 5% Xạ khuẩn X7 thích hợp sinh trƣởng với nguồn bon Maltose Sucrose; nguồn ni tơ Pepton Kiến nghị - Giải trình tự gen để định danh nấm, xạ khuẩn - Đánh giá ảnh hƣởng xạ khuẩn đối kháng tới hình thái sợi nấm nảy mầm bào tử nấm - Nghiên cứu điều kiện nuôi cấy (nhiệt độ, nồng độ muối,…) ảnh hƣởng tới hoạt tính kháng nấm chủng xạ khuẩn 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Anh Anandan R., Dharumadurai D and Manogaran G P (2016) An Introduction to Actinobacteria C Ricaud, B.T Egan, A.G Gillaspie, C.G Hughes (1989) Diseases of Sugarcane: Major Diseases Elsevier Cannon P.F., Damm U., Johnston P.R and Weir B.S (2012) Colletotrichum – current status and future directions Studies in Mycology, 73(1): 181–213 Chamikara P (2016) Actinomycetes - Advanced Study on selected taxonomic groups of Bacteria and Archaea University of Kelaniya Costa Marileide M., Bárbara A A S Silva, Gláucia M Moreira and Ludwig H Pfenning (2021) Colletotrichum falcatum and Fusarium species induce symptoms of red rot in sugarcane in Brazil Plant Pathology, 70(8), pp 1807–1818 Dean R., Van Kan J A l., Pretorius Z A., Hammond-Kosack K E., Di Pietro A., Spanu Pietro D., Rudd Jason J., Dickman M ,Kahmann R, Ellis J, Foster Gary D (2012) The Top 10 fungal pathogens in molecular plant pathology Molecular Plant Pathology 13: 414–430 Dhanasekaran D., Thajuddin N., Panneerselvam A (2012) Applications of Actinobacterial Fungicides in Agriculture and Medicine Fungicides for Plant and Animal Diseases, pp 1-27 Duttamajumder S K (2008) Red rot of Sugarcane Indian Institute of Sugarcane Research Egorov N.X (1983) Thực tập Vi sinh vật, NXB Mir, Maxcơva Nguyễn Lân Dũng dịch, NXB ĐH&THCN Hà Nội 10 E V Abbott (1938) Red rot of Sugarcane Technical Bulletin No 641 44 11 Intra B., Mungsuntisuk I., Nihira T., Igarashi Y & Panbangred, W (2011) Identification of actinomycetes from plant rhizospheric soils with inhibitory activity against Colletotrichum spp., the causative agent of anthracnose disease BMC Research Notes, 4(98) 12 Ghazanfar M U., Raza W, Gondal Sharjeel K (2017) Screening of sugarcane cultivars against Colletotrichum Falcatum causing red rot disease and its control with different fungicides under laboratory conditions Pakistan Journal of Phytopathology 29(01), 103 13 Gomes E.B., Dias L.R.L and Miranda R.C.M (2018) Actinomycetes bioactive compounds: Biological control of fungi and phytopathogenic insect African Journal of Biotechnology, 17(17):552-559 14 Kaviwala R., Dwivedi M., Prasad B D and Kumar P (2015) In vitro antifungal activity of Bacillus spp AV5 against pathogenic fungi Colletotrichum falcatum: Causal organism of Red Rot disease of Sugarcane Biotechnological Research, Vol 1(1):113-117 15 Larsen H (1986) Halophilic and halotolerant microorganism: an overview historical perspective FEMS Microbiol Biotechnol., 24: 2235-2241 16 Md Imam Hossain, Khairulmazmi Ahmad, ORCID, Yasmeen Siddiqui, Norsazilawati Saad, Ziaur Rahman, Ahmed Osumanu Haruna and Siti Khairunniza Bejo (2020) Current and Prospective Strategies on Detecting and Managing Colletotrichum falcatum Causing Red Rot of Sugarcane Agronomy 10(9), 1253 17 Md Imam Hossain, Khairulmazmi Ahmad, Ganesan Vadamalai, Yasmeen Siddiqui, Norsazilawati Saad, Osumanu Haruna Ahmed, Erneeza Mohd Hata, Fariz Adzmi, Osamah Rashed, Muhammad Ziaur Rahman and Abdulaziz Bashir Kutawa (2021) Phylogenetic Analysis and Genetic Diversity of Colletotrichum falcatum Isolates Causing Sugarcane Red Rot Disease in Bangladesh Biology, 10(9), 862 45 18 Michael Goodfellow, Peter Kämpfer, Hans-Jürgen Busse, Martha E Trujillo, Ken-ichiro Suzuki, Wolfgang Ludwig and William B Whitman (1989) Volume Five The Actinobacteria, Part A and B In Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, Second Edition Williams and Wilkins Company, Baltimore 19 Nanjwade Basavaraj K , S Chandrashekhara , Ali M Shamarez , Prakash S Goudanavar and Fakirappa V Manvi (2010) Isolation and Morphological Characterization of Antibiotic Producing Actinomycetes Tropical Journal of Pharmaceutical Research, (3): 231-236 20 Oskay M (2009) Antifungal and antibacterial compounds from Streptomyces strains African Journal of Biotechnology, Vol (13), pp 30073017 21 Patel P., Rushabh Shah, Bhrugesh Joshi, Krishnamurthy Ramar, Amaresan Natarajan (2019) Molecular identification and biocontrol activity of sugarcane rhizosphere bacteria against red rot pathogen Colletotrichum falcatum Biotechnology Reports Elsevier, 21 22 Patel P., N Amaresan, S Rushabh, R Krishnamurthy & V V Bhasker (2016) Isolation and pathogenic variability of Colletotrichum falcatumcausing red rot in sugarcane Journal of Plant Diseases and Protection New Serie 123:273–277 23 Patel P & Ramar Krishnamurthy (2017) Physiological profiling of Colletotrichum falcatum, the causal agent of Sugarcane Red rot disease Journal of Mycopathological Research 55(3):269-274 24 Prapagdee B., Kuekulvong C and Mongkolsuk S (2008) Antifungal potential of extracellular metabolites produced by Streptomyces hygroscopicus against phytopathogenic fungi International Journal Biology Science, 4: 330337 46 24 Raeder U., & Broda P (1985) Rapid preparation of DNA fromfilamentous fungi Letters in Applied Microbiology, 17–20 25 Saksena P., Vishwakarma S K., Tiwari A K., Singh A., Kumar A (2013) Pathological and molecular variation in Colletotrichum falcatum Went isolates causing red rot of sugarcane in the Northwest zone of India Journal of Plant Protection Research 53(1):37-41 26 Shirling E B., & Gottlieb D (1966) Methods for characterization of Streptomyces species International Journal of Systematic Bacteriology, 16(3), 313–340 27 Tresner H D & Backus E J (1963) System of color wheels for streptomycete taxonomy Journal of Applied Microbiology, 11(4):335-338 28 Viswanathan, R (2021) Red rot of sugarcane (Colletotrichum falcatum Went) CABI Wallingford UK 16, No 023 29 Williams ST, Goodfellow M, Alderson G, Wellington EMH, Sneath PHA, Sackin MJ (1983) Numerical classification of Streptomyces and related genera Journal of General Microbiology, 129, 1743-1813 Tài liệu tiếng Việt Đinh Xuân Đức (2009) Bài giảng Cây công nghiệp ngắn ngày Trƣờng Đại học Nông lâm Huế Đỗ Văn Sử Lê Minh Tƣờng (2016) Hiệu phòng trị bệnh thán thƣ ớt nấm Colletotrichum sp Tạp chi Khoa học trƣờng Đại học Cần Thơ, 3: 28-35 Hà Đình Tuấn (2006) Một số kết nghiên cứu bƣớc đầu bệnh nấm hại mía miền Đơng Nam Bộ Tạp chí Bảo vệ thực vật Số 2/2006, 16-20 Hoàng Thị Hồng Nguyễn Ngọc Phƣơng (2013) Phân lập tuyển chọn chủng xạ khuẩn từ rừng ngập mặn Cần Giờ kháng nấm Fusarium sp Tạp chí Khoa học Đại học Sƣ phạm TP HCM, 51:59-71 47 Lester W Burgess, Timothy E Knight, Len Tesoriero, Phan Thúy Hiền (2009) Cẩm nang chẩn đoán bệnh Việt Nam Trung tâm Nghiên cứu Nông nghiệp Quốc tế Australia (ACIAR) Lê Minh Tƣờng Trần Quốc Phú (2016) Đánh giá khả phòng trị xạ khuẩn bệnh thán thƣ hại xồi Tạp chí Khoa học trƣờng Đại học Cần Thơ, 4, 7-14 Lê Minh Tƣờng Trần Thị Thu Em (2014) Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn hại lúa Tạp chí Khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ, 4: 120-126 Lê Thị Hiền, Đinh Văn Lợi, Vũ Thị Vân, Nguyễn Văn Giang (2014) Phân lập tuyển chọn chủng xạ khuẩn (Streptomyces spp.) đối kháng nấm bệnh Tạp chí Khoa học Phát triển, tập 12, số 5: 656-664 Lƣơng Đức Phẩm (1998) Công nghệ vi sinh vật Đại học Nông nghiệp Hà Nội 10 Lƣu Trần Đông, Vũ Sơn Tùng, Nguyễn Thị Vân, Đinh Thị Ngọc Mai, Nguyễn Hồng Minh Nguyễn Kim Nữ Thảo (2019) Sàng lọc chủng kháng nấm gây bệnh thực vật mô tả chi tiết chủng Streptomyces hydrogenans VTCC 41117 có hoạt tính cao Tạp chí Khoa học Công nghệ nhiệt đới, 18, 70-81 11 Ngô Thị Tƣờng Châu, Phạm Thị Ngọc Lan, Phan Thị Thảo Ly, Lê Văn Thiện Nguyễn Ngân Hà (2016) Phân lập, tuyển chọn sử dụng vi sinh vật ƣa nhiệt phân hủy sinh khối bùn thải nhà máy tinh bột sắn FOCOCEV Thừa Thiên Huế Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, 32: 31-37 12 Nguyễn Huy Ƣớc (2001) Hỏi - Đáp Cây mía kỹ thuật trồng NXB Nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh 13 Nguyễn Lân Dũng (2010) Giáo trình Vi sinh vật học NXB Giáo dục 14 Nguyễn Phú Thạnh (2013) Điều tra tình hình diễn biến, mức độ gây hại bệnh than đen bệnh thối đỏ số giống mía triển vọng huyện Dƣơng Minh Châu tỉnh Tây Ninh Trƣờng Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh 48 15 Nguyễn Văn Hiếu, Nguyễn Phƣơng Nhuệ, Vũ Thị Hạnh Nguyên, Phan Thị Hồng Thảo, Phạm Thanh Huyền, Phí Quyết Tiến, Lê Gia Hy (2013) Nghiên cứu chủng xạ khuẩn HLD 3.16 có hoạt tính kháng khuẩn phân lập từ vùng ven bờ biển Việt Nam Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 51(1), 29-41 16 Nguyễn Thành Đạt (2000) Sinh học vi sinh vật, Nhà xuất Giáo dục 17 Nguyễn Thị Ngọc Anh, Nguyễn Thị Phƣơng Thảo, Vũ Kim Thoa, Tạ Thị Thu Thủy (2020) Nghiên cứu đặc điểm sinh học phân loại chủng xạ khuẩn TT 8.4 từ đất trồng trọt Quốc Oai, Hà Nội Hội nghị Công nghệ sinh học tồn quốc 2020 Hội nghị Cơng nghệ sinh học toàn quốc 2020 Ngày 26– 27/10/2020 402-408 18 Nguyễn Văn Bá (2005) Giáo trình mơn Nấm học Trƣờng Đại học Cần Thơ, 107 trang 19 Phạm Hồng Hiển, Đào Ngô Tú Quỳnh, Nguyễn Thị Diệu Hƣơng, Nguyễn Thị Chúc Quỳnh, Phùng Quang Tùng, Bạch Thị Điệp, Nguyễn Xuân Cảnh (2019) Tuyển chọn nghiên cứu đặc điểm chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với nấm Phytophthora gây bệnh số loại ăn Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam, 12(109), 170-174 20 Roger Shivas, Dean Beasley, John Thomas, Andrew Geering Ian Riley (2005) Phƣơng pháp quản lý mẫu bệnh thực vật Bộ Nông nghiệp, Thủy sản Lâm nghiệp Australia 21 Vũ Thị Minh Đức (2001) Thực tập vi sinh vật học NXB Đại học Quốc gia Hà Nội 22 Tổng cục Thống kê (2020) Niên giám thống kê NXB Thồng kê 23 Trần Thị Hoa, Nguyễn Thị Hồng Hà, Lƣơng Văn Hào, Phạm Bích Ngọc, Chu Hồng Hà, Đỗ Tiến Phát (2020) Nghiên cứu đặc điểm sinh học số chủng vi sinh vật có hoạt tính kháng nấm phân lập từ sâm Ngọc 49 Linh Hội nghị Cơng nghệ sinh học tồn quốc 2020 Ngày 26–27/10/2020 Huế 364-370 24 Trần Thùy (1999) Kỹ thuật trồng mía Nhà xuất Nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh 25 Trịnh Thới An (2014) Phân lập tuyển chọn chủng xạ khuẩn có khả sinh chất kháng nấm Pythium sp Tạp chí Khoa học, Trƣờng ĐHSP TP Hồ Chí Minh, 61, 113-119 Tài liệu trực tuyến Cơng ty TNHH mía đƣờng Nghệ An Bệnh đốm vàng hại mía Truy cập từ http://www.nasugar.com/Uploads/files/ToRoi/22%20Benh%20dom%20vang%2 0hai%20mia.pdf ngày 14/03/2022 Global Biodiversity Information Facility (2021) Colletotrichum falcatum Went Truy cập từ https://www.gbif.org/species/2568998 ngày 13/12/2021 50 PHỤ LỤC Phụ lục Các chủng xạ khuẩn phân lập đƣợc 51 Phụ lục Các chủng xạ khuẩn phân lập đƣợc 52 Phụ lục Đặc điểm hình thái chủng xạ khuẩn X6 sau ngày nuôi cấy môi trƣờng Gause I ISP 53 Phụ lục Đặc điểm hình thái chủng xạ khuẩn X7 sau ngày nuôi cấy môi trƣờng Gause I ISP 54 Phụ lục Khả sinh trƣởng xạ khuẩn X6 giá trị pH khác sau ngày nuôi cấy 55 Phụ lục Khả sinh trƣởng xạ khuẩn X7 pH khác sau ngày nuôi cấy 56 Phụ lục Khả đồng hoá Carbon xạ khuẩn X6, X7 sau ngày 57