Nghiên cứu mối tương quan giữa đa hình nucleotide đơn (snp) của gen card14 trên bệnh vảy nến tại việt nam

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -*** - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU MỐI TƯƠNG QUAN GIỮA ĐA HÌNH NUCLEOTIDE ĐƠN (SNP) CỦA GEN CARD14 TRÊN BỆNH NHÂN VẢY NẾN TẠI VIỆT NAM Hà Nội - 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -*** - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU MỐI TƯƠNG QUAN GIỮA ĐA HÌNH NUCLEOTIDE ĐƠN (SNP) CỦA GEN CARD14 TRÊN BỆNH NHÂN VẢY NẾN TẠI VIỆT NAM Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Xuân ThS Nguyễn Thanh Huyền Sinh viên thực : Ngô Xuân Sơn Lớp : K63CNSHD Mã sinh viên : 637354 Hà Nội, 2022 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan khóa luận cơng trình nghiên cứu khoa học riêng em hướng dẫn TS Nguyễn Thị Xuân - Trưởng phòng Hệ gen học miễn dịch, Viện Nghiên cứu hệ gen, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Các số liệu kết nêu khóa luận trung thực chưa cơng bố nghiên cứu khác Các tài liệu trích dẫn khóa luận nêu danh mục tài liệu tham khảo Em xin hoàn toàn chịu trách nhiệm số liệu khóa luận Hà Nội, Ngày 15 tháng 02 năm 2022 Sinh viên Ngô Xuân Sơn i LỜI CẢM ƠN Em xin cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện, thầy cô giáo khoa Công nghệ Sinh học giúp đỡ tạo điều kiện để em hồn thành khóa luận Với tình cảm chân thành lòng biết ơn sâu sắc em xin gửi lời cảm ơn tới TS Nguyễn Thị Xuân quan tâm, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp em q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn ThS Nguyễn Thanh Huyền, ThS Đỗ Thị Trang, ThS Nguyễn Hoàng Giang, ThS Trần Thị Phương Thảo, KS Bùi Kiều Trang giúp đỡ em trình thực nghiên cứu Cuối cùng, em muốn gửi lời cảm ơn tới bố mẹ, tới gia đình bạn bè – người ủng hộ, giúp đỡ động viên em suốt trình thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, Ngày 15 tháng 02 năm 2022 Sinh viên Ngô Xuân Sơn ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ vii PHẦN I: MỞ DẦU PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược bệnh vảy nến 2.2.1 Hệ thống miễn dịch 2.2.2 Yếu tố di truyền 2.2.3 Các nhân tố khác gây nên bệnh vảy nến 2.3 Phân loại bệnh vảy nến 2.3.1 Bệnh vảy nến thể mảng 2.3.2 Bệnh vảy nến thể giọt 2.3.3 Bệnh vảy nến thể mủ 2.3.4 Bệnh vảy nến thể đảo ngược 2.3.5 Bệnh vảy nến thể đỏ da toàn thân 2.3.6 Viêm khớp vảy nến (PsA) 2.4 Chẩn đoán điều trị bệnh vảy nến 2.4.1 Chẩn đoán bệnh vảy nến 2.4.2 Điều trị bệnh vảy nến 10 2.5 Tổng quan SNP 12 2.5.1 Định nghĩa SNPs 12 2.5.2 Phân loại SNPs 14 2.6 Các gen liên quan đến bệnh vảy nến 14 2.6.1 Gen PSORS1 14 2.6.2 Gen TLR4 15 2.6.3 Gen CARD14 15 iii 2.7 Tình hình nghiên cứu bệnh vảy nến nước giới Việt Nam 16 2.7.1 Các nước giới 16 2.7.2 Việt Nam 17 PHẦN III: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Đối tượng nghiên cứu 18 3.2 Các trang thiết bị, dụng cụ sử dụng nghiên cứu 18 3.3 Phương pháp nghiên cứu 19 3.3.1 Phương pháp thu thập mẫu 19 3.3.2 Tách chiết DNA tổng số 19 3.3.3 Phương pháp PCR 20 3.3.4 Tinh sản phẩm PCR 22 3.3.5 Giải trình tự phương pháp Sanger 23 3.3.6 Xác định điểm đa hình 24 3.3.7 Phương pháp phân tích thống kê 25 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 4.1 Tổng hợp danh sách mẫu máu đánh giá, chọn lọc bệnh nhân mắc bệnh vảy nến người khỏe mạnh 26 4.2 Kết tách chiết DNA tổng số từ mẫu máu bệnh nhân vảy nến người khỏe mạnh 26 4.3 Kết tần suất SNP gen CARD14 liên quan đến bệnh vảy nến 27 4.3.1 Kết nhân trình tự nucleotide đoạn gen CARD14 27 4.3.2 Xác định kiểu gen đa hình rs11652075 CARD14 28 4.3.3 Phân tích mối tương quan CARD14 rs11652075 bệnh vảy nến 31 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 34 5.1 KẾT LUẬN 34 5.2 KIẾN NGHỊ 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 PHỤ LỤC 41 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Ý nghĩa ASLO Antistreptolysin O CARD14 Caspase recruitment domain family member 14 DNA Deoxyribonucleic Acid EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid GoF Gain-of-function GWAS Genome-Wide Association Studies IL Interleukin IL36RN Interleukin 36 receptor antagonist MHC Major Histocompatibility Complex NPF National Psoriasis Foundation OD Optical density PRP Pityriasis rubra pilaris PSORS1 Psoriasis susceptibility gene SNP Single-nucleotide polymorphism TLR4 Toll Like Receptor UV Ultraviolet v DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Trình tự mồi khuếch đại đoạn gen CARD14 20 Bảng 2: Thành phần phản ứng PCR 21 Bảng 3: Thành phần phản ứng PCR giải trình tự 23 Bảng 1: Tỷ lệ phân bố kiểu gen SNP rs11652075 gen CARD14 bệnh nhân vảy nến người khỏe mạnh 28 Bảng 2: Mối tương quan tỉ lệ kiểu gen allele CARD14 32 vi DANH MỤC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ Hình 1: Hiện tượng đa hình nucleotide đơn 13 Hình 1: Chu trình nhiệt phản ứng PCR gen CARD14 với cặp mồi CARD14_F CARD14_R 21 Hình 1: Ảnh điện di đồ sản phẩm DNA tổng số gel agarose 0,8% 27 Hình 2: Điện di đồ sản phầm PCR nhân gen CARD14 gel agarose 0,8% Chú thích M: Marker 1kb (Thermo) 28 vii PHẦN I: MỞ DẦU Bệnh vảy nến bệnh viêm da mãn tính phổ biến Bệnh vảy nến có mặt hầu hết độ tuổi thường phát triển người trưởng thành 35 tuổi Theo thống kê có khoảng 2% - 3% dân số giới mắc phải bệnh (Gupta et al., 2014) Mức độ nghiệm trọng bệnh vảy nến khác người Có trường hợp bị kích ứng nhẹ, nhiên có chuyển biến nặng gây ảnh hưởng lớn đến chất lượng sống người bệnh Ở người khỏe mạnh, tế bào da cũ sau chết bong thay tế bào da Tuy nhiên bệnh nhân vảy nến, tăng sinh tế bào da diễn nhanh gấp 10 lần, tế bào da cũ không kịp bị thay dẫn đến tích tụ tế bào da vị trí dẫn tới hình thành nên vùng da dày màu đỏ, có vảy màu trắng sáp nến Đã có nhiều nghiên cứu thực bệnh vảy nến, nay, nguyên nhân sinh lý bệnh bệnh vảy nến chưa sáng tỏ Số liệu thống kê cho thấy, với số lượng bệnh nhân vảy nến ngày tăng cao chưa tìm phương pháp điều trị dứt điểm việc nghiên cứu bệnh vảy nến cấp thiết Hiện giới tiến hành nghiên cứu nguyên nhân cách điều trị bệnh vảy nến theo nhiều hướng khác Nguyên nhân bệnh vảy nến chưa chứng minh rõ ràng, chắn bệnh có liên quan đến rối loạn đáp ứng hệ miễn dịch Vì vậy, hướng nghiên cứu bệnh vảy nến theo cấp độ phân tử trọng việc nghiên cứu ảnh hưởng đột biến gen đến chức tế bào miễn dịch cấp thiết Từ đó, em thực đề tài: “Nghiên cứu mối tương quan đa hình nucleotide đơn (SNP) gen CARD14 bệnh nhân vảy nến Việt Nam” Mục đích nghiên cứu xác định tần suất xuất allele rs11652075 (C>T) nhóm bệnh nhân vảy nến nhóm người TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt BỆNH VẢY NẾN (Psoriasis) Truy cập từ https://healthvietnam.vn/thu-vien/tai-lieu-tieng-viet/da-lieu/benh-vaynen#:~:text=Th%C6%B0%C6%A1ng%20t%E1%BB%95n%20da%3 A%20%C4%91i%E1%BB%83n%20h%C3%ACnh,kh%C3%B4ng%2 0th%C3%A2m%20nhi%E1%BB%85m%2C%20kh%C3%B4ng%20 %C4%91au ngày 01.02.2022 Nguyễn Thị Kim Liên & al e (2017) Xác định biến đổi di truyền gen PSORSC3 bệnh nhân mắc bệnh vảy nến Việt Nam Tạp chí Công nghệ sinh học 15: 231-236 Bệnh vảy nến thể đảo ngược: Nguyên nhân, triệu chứng cách điều trị an tồn, hiệu Tìm hiểu ngay! Truy cập từ https://vaynen.co/baiviet/thong-tin-benh/benh-vay-nen-the-dao-nguoc-nguyen-nhan-trieuchung-va-cach-dieu-tri-an-toan-hieu-qua-tim-hieu-ngay.htmlngày 01.02.2022 Tiếng Anh What are single nucleotide polymorphisms (SNPs)?Truy cập từ https://medlineplus.gov/genetics/understanding/genomicresearch/snp/ ngày 27.01.2022 The International Psoriasis Genetics Study: assessing linkage to 14 candidate susceptibility loci in a cohort of 942 affected sib pairs Am J Hum Genet 73(2): 430-7 Allen M H., Ameen H., Veal C., Evans J., Ramrakha-Jones V S., Marsland A M., Burden A D., Griffiths C E., Trembath R C & Barker J N (2005) The major psoriasis susceptibility locus PSORS1 is not a risk factor for late-onset psoriasis J Invest Dermatol 124(1): 103-6 35 Arbour N C., Lorenz E., Schutte B C., Zabner J., Kline J N., Jones M., Frees K., Watt J L & Schwartz D A (2000) TLR4 mutations are associated with endotoxin hyporesponsiveness in humans Nat Genet 25(2): 187-91 Bielinski S J., Hall J L., Pankow J S., Boerwinkle E., MatijevicAleksic N., He M., Chambless L & Folsom A R (2011) Genetic variants in TLR2 and TLR4 are associated with markers of monocyte activation: the Atherosclerosis Risk in Communities MRI Study Hum Genet 129(6): 655-62 Chen L & Tsai T.-F (2018) HLA-Cw6 and psoriasis British Journal of Dermatology 178(4): 854-862 10 de Korte J., Sprangers M A., Mombers F M & Bos J D (2004) Quality of life in patients with psoriasis: a systematic literature review J Investig Dermatol Symp Proc 9(2): 140-7 11 Elder J T., Nair R P., Henseler T., Jenisch S., Stuart P., Chia N., Christophers E & Voorhees J J (2001) The genetics of psoriasis 2001: the odyssey continues Arch Dermatol 137(11): 1447-54 12 Fan X., Yang S., Huang W., Wang Z M., Sun L D., Liang Y H., Gao M., Ren Y Q., Zhang K Y., Du W H., Shen Y J., Liu J J & Zhang X J (2008) Fine mapping of the psoriasis susceptibility locus PSORS1 supports HLA-C as the susceptibility gene in the Han Chinese population PLoS Genet 4(3): e1000038 13 Fuchs-Telem D., Sarig O., van Steensel M A., Isakov O., Israeli S., Nousbeck J., Richard K., Winnepenninckx V., Vernooij M., Shomron N., Uitto J., Fleckman P., Richard G & Sprecher E (2012) Familial pityriasis rubra pilaris is caused by mutations in CARD14 Am J Hum Genet 91(1): 163-70 14 Garcia-Rodriguez S., Arias-Santiago S., Perandrés-López R., Castellote L., Zumaquero E., Navarro P., Buendía-Eisman A., Ruiz J C., Orgaz36 Molina J., Sancho J & Zubiaur M (2013) Increased gene expression of Toll-like receptor on peripheral blood mononuclear cells in patients with psoriasis J Eur Acad Dermatol Venereol 27(2): 242-50 15 González-Lara L., Coto-Segura P., Penedo A., Eiris N., Díaz M., Santos-Juanes J., Queiro R & Coto E (2013) SNP rs11652075 in the CARD14 gene as a risk factor for psoriasis (PSORS2) in a Spanish cohort DNA Cell Biol 32(10): 601-4 16 Gupta R., Debbaneh M G & Liao W (2014) Genetic Epidemiology of Psoriasis Current dermatology reports 3(1): 61-78 17 Holland K 2020 Everything You Need to Know About Psoriasis Truy cập từ https://www.healthline.com/health/psoriasis ngày 27.01.2022 18 Horie Y., Meguro A., Ota M., Kitaichi N., Katsuyama Y., Takemoto Y., Namba K., Yoshida K., Song Y W., Park K S., Lee E B., Inoko H., Mizuki N & Ohno S (2009) Association of TLR4 polymorphisms with Behcet's disease in a Korean population Rheumatology (Oxford) 48(6): 638-42 19 Israel L & Mellett M (2018) Clinical and Genetic Heterogeneity of CARD14 Mutations in Psoriatic Skin Disease Front Immunol 9: 2239 20 K S (1999) Basic Neurochemistry: Molecular, Cellular and Medical Aspects Philadelphia: Lippincott-Raven pages pages 21 Karaca N., Ozturk G., Gerceker B T., Turkmen M & Berdeli A (2013) TLR2 and TLR4 gene polymorphisms in Turkish vitiligo patients J Eur Acad Dermatol Venereol 27(1): e85-90 22 Karki R., Pandya D., Elston R C & Ferlini C (2015) Defining "mutation" and "polymorphism" in the era of personal genomics BMC Med Genomics 8: 37 23 Li G., Pan T., Guo D & Li L C (2014) Regulatory Variants and Disease: The E-Cadherin -160C/A SNP as an Example Mol Biol Int 2014: 967565 37 24 Michalek I M., Loring B & John S M (2017) A systematic review of worldwide epidemiology of psoriasis J Eur Acad Dermatol Venereol 31(2): 205-212 25 Nair P A & Badri T (2022) Psoriasis In: StatPearls StatPearls Publishing Copyright © 2022, StatPearls Publishing LLC Treasure Island (FL): pages 26 Nair R P., Stuart P E., Nistor I., Hiremagalore R., Chia N V C., Jenisch S., Weichenthal M., Abecasis G R., Lim H W., Christophers E., Voorhees J J & Elder J T (2006) Sequence and haplotype analysis supports HLA-C as the psoriasis susceptibility gene Am J Hum Genet 78(5): 827-851 27 Nestle F O., Kaplan D H & Barker J (2009) Psoriasis N Engl J Med 361(5): 496-509 28 Parisi R., Symmons D P., Griffiths C E & Ashcroft D M (2013a) Global epidemiology of psoriasis: a systematic review of incidence and prevalence J Invest Dermatol 133(2): 377-85 29 Parisi R., Symmons D P., Griffiths C E., Ashcroft D M., Identification, Management of P & Associated ComorbidiTy project t (2013b) Global epidemiology of psoriasis: a systematic review of incidence and prevalence J Invest Dermatol 133(2): 377-85 30 Patel U R., Gautam S & Chatterji D (2019) Unraveling the Role of Silent Mutation in the ω-Subunit of Escherichia coli RNA Polymerase: Structure Transition Inhibits Transcription ACS Omega 4(18): 1771417725 31 Qin P., Zhang Q., Chen M., Fu X., Wang C., Wang Z., Yu G., Yu Y., Li X., Sun Y., Wu W., Yang B., Liu H & Zhang F (2014) Variant analysis of CARD14 in a Chinese Han population with psoriasis 38 vulgaris and generalized pustular psoriasis J Invest Dermatol 134(12): 2994-2996 32 Rachakonda T D., Schupp C W & Armstrong A W (2014) Psoriasis prevalence among adults in the United States J Am Acad Dermatol 70(3): 512-6 33 Roth E 2019 What Does Inverse Psoriasis Look Like? truy cập từ https://www.healthline.com/health/inverse-psoriasis ngày 01.2.2022 34 Shen X., Shi R., Zhang H., Li K., Zhao Y & Zhang R (2010) The Tolllike receptor D299G and T399I polymorphisms are associated with Crohn's disease and ulcerative colitis: a meta-analysis Digestion 81(2): 69-77 35 Singh R K., Lee K M., Ucmak D., Brodsky M., Atanelov Z., Farahnik B., Abrouk M., Nakamura M., Zhu T H & Liao W (2016) Erythrodermic psoriasis: pathophysiology and current treatment perspectives Psoriasis (Auckl) 6: 93-104 36 Smith R L., Hébert H L., Massey J., Bowes J., Marzo-Ortega H., Ho P., McHugh N J., Worthington J., Barton A., Griffiths C E & Warren R B (2016) Association of Toll-like receptor (TLR4) with chronic plaque type psoriasis and psoriatic arthritis Arch Dermatol Res 308(3): 201-5 37 Stuart A 2020 Types of Psoriasis Truy cập từ https://www.webmd.com/skin-problems-andtreatments/psoriasis/psoriasis-types ngày 01.02.2022 38 Syed Z U & Khachemoune A (2011) Inverse psoriasis: case presentation and review Am J Clin Dermatol 12(2): 143-6 39 Tiwari V & Brent L H (2022) Psoriatic Arthritis In: StatPearls StatPearls Publishing 39 Copyright © 2022, StatPearls Publishing LLC Treasure Island (FL): pages 40 Tsai T F., Wang T S., Hung S T., Tsai P I., Schenkel B., Zhang M & Tang C H (2011) Epidemiology and comorbidities of psoriasis patients in a national database in Taiwan J Dermatol Sci 63(1): 40-6 41 Twelves S., Mostafa A., Dand N., Burri E., Farkas K., Wilson R., Cooper H L., Irvine A D., Oon H H., Kingo K., Koks S., Mrowietz U., Puig L., Reynolds N., Tan E S., Tanew A., Torz K., Trattner H., Valentine M., Wahie S., Warren R B., Wright A., Bata-Csorgo Z., Szell M., Griffiths C E M., Burden A D., Choon S E., Smith C H., Barker J N., Navarini A A & Capon F (2019) Clinical and genetic differences between pustular psoriasis subtypes J Allergy Clin Immunol 143(3): 1021-1026 40 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Danh sách điểm đa hình bệnh nhân vảy nến người khỏe Mẫu rs11652075 Mẫu rs11652075 VN1 C/T Control T/T VN2 C/T Control T/T VN3 C/C Control C/C VN4 C/C Control C/T VN5 C/T Control C/C VN6 C/T Control T/T VN7 C/T Control T/T VN8 C/C Control T/T VN9 C/T Control C/C VN10 C/T Control 10 C/T VN11 C/T Control 11 C/C VN12 C/T Control 12 T/T VN13 C/C Control 13 C/T VN14 C/C Control 14 T/T VN15 C/C Control 15 C/T VN16 T/T Control 16 T/T VN17 T/T Control 17 C/T VN18 C/T Control 18 C/C VN19 T/T Control 19 T/T VN20 C/C Control 20 C/T VN21 C/T Control 21 C/C VN22 C/T Control 22 C/C VN23 C/T Control 23 C/T VN24 T/T Control 24 C/T 41 VN25 C/C Control 25 T/T VN26 C/T Control 26 C/C VN27 C/T Control 27 C/C VN28 C/T Control 28 C/T VN29 C/C Control 29 T/T VN30 C/T Control 30 C/T VN31 C/T Control 31 C/C VN32 T/T Control 32 C/T VN33 C/T Control 33 C/T VN34 C/T Control 34 C/C VN35 T/T Control 35 C/T VN36 T/T Control 36 C/C VN37 C/T Control 37 C/C VN38 C/T Control 38 C/T VN39 T/T Control 39 C/T VN40 C/T Control 40 T/T VN41 C/T Control 41 T/T VN42 C/T Control 42 C/C VN43 C/T Control 43 C/T VN44 C/T Control 44 C/T VN45 C/T Control 45 C/T VN46 C/C Control 46 T/T 42 Phụ lục 2: Danh sách kết đo quang phổ mẫu DNA bệnh nhân vảy nến người khỏe Nồng độ STT Mẫu VN1 61.8 1.89 VN2 59.7 1.78 VN3 63.2 1.95 VN4 20 1.85 VN5 61.4 1.88 VN6 63.7 1.87 VN7 65.2 1.91 VN8 60.4 1.83 VN9 63.3 1.9 10 VN10 68.3 1.88 11 VN11 55.1 1.91 12 VN12 79.3 1.85 13 VN13 83.9 1.89 14 VN14 40.8 1.8 15 VN15 61.8 1.86 16 VN16 25.5 2.0 17 VN17 42.7 2.0 18 VN18 42.5 2.0 19 VN19 68 1.85 20 VN20 49 2.0 21 VN21 44.3 1.79 22 VN22 33.5 1.74 23 VN23 35.9 2.0 24 VN24 37.3 1.95 (ng/ul) A260/A280 43 25 VN25 83.2 1.73 26 VN26 34.3 1.97 27 VN27 21.5 1.96 28 VN28 33.3 1.81 29 VN29 68.5 1.89 30 VN30 48.9 1.96 31 VN31 28.3 1.82 32 VN32 23.5 1.78 33 VN33 105.5 1.86 34 VN34 83.3 1.94 35 VN35 47.3 1.76 36 VN36 66 1.82 37 VN37 78.2 1.71 38 VN38 49.2 1.92 39 VN39 58.9 1.7 40 VN40 49.9 1.84 41 VN41 61.5 1.97 42 VN42 50.7 1.88 43 VN43 68.5 1.81 44 VN44 89 1.96 45 VN45 82.6 1.9 46 VN46 63.4 1.98 47 Control 75.2 1.75 48 Control 46.9 2.0 49 Control 68.5 1.89 50 Control 65.2 1.91 51 Control 53.7 1.98 52 Control 42.8 1.87 44 53 Control 45.1 1.91 54 Control 55.8 1.83 55 Control 79.6 1.91 56 Control 10 53.7 1.84 57 Control 11 67.7 1.97 58 Control 12 34 1.99 59 Control 13 48.9 1.96 60 Control 14 57.4 1.95 61 Control 15 52.3 1.91 62 Control 16 82.7 1.86 63 Control 17 59.6 1.7 64 Control 18 27.7 1.73 65 Control 19 71.1 1.91 66 Control 20 56.4 1.96 67 Control 21 43.5 1.9 68 Control 22 46.5 1.91 69 Control 23 19.5 1.85 70 Control 24 24.4 1.89 71 Control 25 25.5 1.8 72 Control 26 51.8 1.81 73 Control 27 34.4 1.96 74 Control 28 49.2 1.87 75 Control 29 34.1 1.96 76 Control 30 60.4 2.0 77 Control 31 42.7 1.74 78 Control 32 42.5 1.77 79 Control 33 68 1.86 80 Control 34 148.5 1.95 45 81 Control 35 75.4 1.84 82 Control 36 62.7 1.97 83 Control 37 53.7 1.88 84 Control 38 67.7 1.81 85 Control 39 105.5 1.86 86 Control 40 48.9 1.96 87 Control 41 59.6 1.73 88 Control 42 34.1 2.0 89 Control 43 60.4 1.73 90 Control 44 35.7 1.98 91 Control 45 27.7 1.71 92 Control 46 49.2 2.0 46 Phụ lục 3: Ảnh điện di đồ sản phẩm DNA tổng số gel agarose 0,8% Chú thích: Từ đến 46: mẫu người bệnh nhân vảy nến Từ 47 đến 92: Mẫu người khoẻ Phụ lục 4: Điện di đồ sản phầm PCR nhân gen CARD14 gel agarose 0,8% 47 48 Chú thích: Từ đến 46: mẫu người bệnh nhân vảy nến Từ 47 đến 92: Mẫu người khoẻ Phụ lục 4: Trình tự mồi khuếch đại gen CARD14 5’CTGCAGTGAGCAAAGCAGACCCAGTCCCTCCCGGGGCAGGGTA GGCTGGCTGGGGGCTGCCGCAGCCTCACCCACCCTCAGGATCCTC TCCTCCACAGGCTCCAGCACGTGCTTCTGGGCCGAGAGCTGCCTC ACCCTGGTGCCCTATACCCTGGTGCGGCCCCATCGACCCGCCCGG CCCCGGCCTGTGCTCCTCGTGCCCAGGGCGGTTGGGAAGATCCTG AGCGAGAAACTGTGCCTCCTCCAAGGGTTTAAGAAGTGCCTGGCA GGTATGCTGTTGCCTGGGAATCCCTCTACCCCTTCCACCTTCCCTC CCTCCCTCCTCCCCTTCCTCCCTCCTTCCTCCCCTTCCTCCCTCCTC CTTCCCTCCCCCACCACGCACATTCCCACACTCACCTG 3’ 49