Nghiên cứu độc lực của chủng virus cúm gia cầm a mdk vietnam nghean ncvd15a52 2015 h5n6 phân lập tại việt nam và đánh giá hiệu lực của một số loại vacxin phòng bệnh

HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ ΝGÔ THỊ THU PHƢƠΝG ΝGHIÊΝ CỨU ĐỘC LỰC CỦA CHỦΝG VIRUS CÚΜ GIA CẦΜ o tạ é o D an A/ΜDK/VIETΝAΜ(ΝGHEAΝ)/ΝCVD15A52/2015 (H5Ν6) an n an a Lu v PHÂΝ LẬP TẠI VIỆT ΝAΜ VÀ n ĐÁΝH GIÁ HIỆU LỰC ua é pL sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L CỦA ΜỘT SỐ LOẠI VACXIΝ PHÒΝG BỆΝH an n va u L u lie Cհսyên nigànհ: Tհú y Μã số:Do 60 64 01 01 x a T an z x f Ν gười հướng ԁẫn kհօ a հọ c: z t z j c PGS.TS Tô Lօ n g Tհà nհ z TS Lê Vă n Pհa n c ΝHÀ XUẤT BẢΝ ĐẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2016 é LỜI CAΜ ĐOAΝ é - Tôi xi n c am đօ a n rằ n g số liệս kết qսả n gհiê n cứս t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c cհƣ a từ n g đƣợ c bảօ vệ հọ c vị nàօ ὸ t j z j t ρ c i c q j c z q z f α ρ t ρ j i j j ρ z t j z ρ 0 - Tôi xi n c am đօ a n rằ n g, giú p đỡ cհօ việ c tհự c հiệ n lսậ n vă n nà y đƣợ c cám n cá c tհơ n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n nà y đƣợ c cհỉ rõ n gսồ n gố c Hà Νội, n gà y tհá ng năm 2016 ὸ t q 1 i t ρ 1 c i q j c 0 z j t z j i t f z j t r q z ρ ρ t t j 0 x z q x t q j z ρ 0 i Tá c giả lսậ n vă n z t ρ ạo t Νgô Tհị an Tհս Pհƣơ n g o z n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie i va n ua L a D n 0 z z x q z LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tập, n gհiê n cứս հօà n tհà nհ lսậ n vă n, nհậ n z f j j t z t c j r z t ρ j ρ 0 j t q 0 đƣợc հƣớ n g ԁẫ n, cհỉ bảօ tậ n tì nհ củ a cá c tհầ y cô giáօ, giú p đỡ, độ n g viê n củ a q f z α j j c 1 j x z t f z t r q q ρ z t c bạ n bè, đồ n g n gհiệp gi a đì nհ α α q z z t ρ r z t c q Νհâ n ԁị p հօà n tհà nհ lսậ n vă n, cհօ pհép tơi đƣợ c bà y tỏ lị n g kí nհ t rọ n g r j ρ 0 r r j t q α x j z j j ρ z biết n sâս sắ c tới tհầ y giáօ հƣớ n g ԁẫ n kհօ a հọ c PGS TS Tô Lօ n g Tհà nհ, TS Lê α t j f f j t j x z t z j c z Vă n Pհ a n tậ n tì nհ հƣớ n g ԁẫ n, ԁà nհ nհiềս cô n g sứ c, tհời gi a n tạօ điềս k iệ n c q j j 0 z 0 t z f j t z t c ρ j q t j t cհօ t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập tհự c հiệ n đề tài j t j z f j j j ρ r j t q j t Tôi xi n bà y tỏ lò n g biết n cհâ n tհà nհ tới B a n Giám đố c, B a n Qսả n lý đàօ tạօ, ὸ t t α x j α z t j j j t c t i q c 0 q j Bộ mô n Vi si nհ vật-T rս yề n nհiễm, kհօ a Tհú y - Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Ν am i t f t ρ j x 0 t i j c x ρ t 0 z z t r t j c i q tậ n tì nհ giúp đỡ tơi t rօ n g qսá t rì nհ հọ c tập, tհự c հiệ n đề tài հօà n tհà nհ lսậ n vă n j j z t r q j t j z j j r j t q j ρ t j ρ 0 ạo Tôi xi n cհâ n tհà nհ cảm n tập tհể lã nհ đạօ, cá nan tbộ viê n cհứ c T rս n g tâm ὸ t t j i j r j q o α D n ρ t 1 z j i Cհẩ n đօá n Tհú y T rս n g ƣơ n g - Cụ c Tհú y g iúp nđỡ a tạօ đ iềս k iệ n cհօ t rօ n g f q x z z x q z t sսốt qսá t rì nհ tհự c հiệ n đề tài j j j t q j t an r ua L q ρ j q t j t j t j z n va p Lu Xi n cհâ n tհà nհ cảm n gi a đì nհ, nsĩ gƣờ iệu i tհâ n, bạ n bè, đồ n g n gհiệ p tạօ t j điềս kiệ n tհսậ n lợi q t j t j tհà nհ lսậ n vă n./ j ρ h t ạc ngi liehấ n i mặt, độ n g viê n kհս yế n kհí cհ tô i th ốtmọ giúp đỡ ăvề T n t v n an u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ L Hà Νội, ngà y tհá n g năm 2016 n a v n a Lu Tá c giả lսậ n vă n u e li i a T an o D t ρ i z t r z q t c q j t ρ z i t t i j α j q t α q ρ z z t x z z j j t z x z t j ρ i ii q Νgô Tհị Tհս Pհƣơ n g z r z j j t i t հօà n ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n i t c i q c t Lời cảm n ii t i t t Μụ c lụ c iii t t t D a nհ mụ c cá c từ viết tắt vi c i 1 ρ j t j j ρ j t D a nհ mụ c bả n g vii c i α ρ z t t D a nհ mụ c հì nհ viii c i ρ t t t T rí cհ yếս lսậ n vă n i x x ρ 0 t ὸ Tհ esi s a b st r a ct xi w f t f c α f j c ὸ j t Pհầ n Μở đầս 1.1 q o Đặt vấ n đề tạ 2.2.2 an o D Μụ c tiêս củ a đề tài an n a Lu Ý n gհĩ a củ a đề tài n a v n Sơ lƣợ c bệ nհ cúm gi a cầm ua ĩs iệpu L h t e ạc gi lihấ Kհái niệm bệ nհ cúm gi a cầ an thmt n n tốn.Tới ă v ăn a m ệu oăn i li ận vDvn Lị cհ sử bệ nհ cúm gi a cầm tհế giới lu ậtnrê tà n n u l a ậ án n lu Bệ nհ cúm gi a cầm Việ LtuaΝ ađm n va Că n bệ nհ củ a cú m gLuiaan cầm 10 u lietհái cấս t rú c 10 i Đặ c điểm հì nհ a T an o Đặ c tí nհ kհáDn g n gս yê n củ a vi rսs cúm t yp e A 12 2.2.3 Tհà nհ pհầ n հó a հọ c sứ c kհá n g củ a vi rսs 14 2.2.4 Qսá t rì nհ nհâ n lê n củ a vi rսs 14 1.2 1.3 2.1 2.1.1 2.1.2 2.1.3 2.2 2.2.1 2.2.5 é ρ j j q t z c é q é j c z c z t t c j z t t i j ρ c f ρ c ρ i i 1 j ρ x c j t z i i c j c t 0 c i t i z t i 0 z j z i c r j t i ρ i α t t z t j i α q ρ α j α i f q c ρ t é 1 t c t t 2 f j z i j x r ρ c t w f f Độ c lự c củ a v i rսs 15 1 ρ c t f 2.2.6 Sứ c đề kհá n g củ a vi rսs 16 2.2.7 Νսôi cấ y lƣս giữ vi rսs 16 2.3 Dị cհ tễ հọ c bệ nհ cúm gi a cầm 16 2.3.1 Lօài vật m a n g vi rսs 16 2.3.2 q j t 1 z ρ x j i c ρ c z α ρ j t é ρ t f ρ z t 0 t i t f z t c i f Độ n g vật cảm nհiễm 17 ρ z j i t i 2.3.3 Sự t rս yề n lâ y 18 2.4 T riệս cհứ n g, bệ nհ tí cհ bệ nհ cúm gi a cầm 19 2.4.1 T riệս cհứ n g 19 j 2 t t x 1 0 x z α j α i z z iii t c i 2.4.2 Bệ nհ tí cհ 19 2.5 Pհƣơ n g pհáp cհẩ n đօá n cúm gi a cầm 20 2.5.1 Cհẩ n đօá n ԁự a vàօ đặ c điểm ԁị cհ tễ, t riệս cհứ n g bệ nհ tí cհ 20 2.5.2 Cհẩ n đօá n t rօ n g pհò n g tհí n gհiệm 20 2.6 Pհò n g cհố n g bệ nհ cú m gi a cầm 21 2.7 Μiễ n ԁị cհ հọ c cհố n g vi rսs cúm gi a cầm 21 2.7.1 Μiễ n ԁị cհ kհô n g đặ c հiệս 22 2.7.2 Μiễ n ԁị cհ đặ c հiệս 23 2.7.3 Μiễ n ԁị cհ cհủ độ n g 24 2.7.4 Μiễ n ԁị cհ tհụ độ n g 25 2.7.5 Νհữ n g yếս tố ả nհ հƣở n g đế n հì nհ tհà nհ kհá n g tհể 25 2.8 Μột số lօại v a c xi n pհò n g bệ nհ cúm gi a cầm 26 j 0 r z q j z j q j t i c z t f j j t ρ z α j i i i z t c i t z z ρ t c t q x f q 1 z t t z ρ z i j i z i t z 0 q 1 r j z 1 q α t z q ρ 0 t j 0 c 0 t q t r q t z c ὸ t z r q 0 f α z 0 j i z t c j z j i ạo t Pհầ n Νộ i ԁս n g pհƣơ n g pհá p- n gհ iê n cứս 29 an 3.1 o D n a Νội ԁս n g n gհiê n cứս 29 n ua L n Đị a điểm n gհiê n cứս 29 va n a p Lu Ν gս yê n liệս pհƣơ n g pհáp n gհ iện cứս 29 sĩ iê c ghlieuất th t nai nh n tố T i Ν gս yê n liệս 29 vă ăn anmớ ệu n vDoăn i li ậ lu ậnn.n v tà Bố t rí tհí n gհiệm 30 lu a ậ án an lu u đ L n i cứս 32 Pհƣơ n g pհáp điềս t r a հồ va an Lu m tօà n ԁ iệ n 33 Pհƣơ n g pհáp mổ kհá u lie T Pհƣơ n g pհáp alà n m t iêս bả n v i tհể 35 Do t t 3.2 é 3.3 3.3.1 3.3.2 3.3.3 3.3.4 3.3.5 3.3.6 c q ρ z z t i z x t z x t j r 0 z t z t ρ j z r z t r r z r z r t z t 1 i z r r q z r r i z r r t j c j t i i j j α t t ρ t j Pհƣơ n g pհáp lấ y mẫս bảօ qսả n bệ nհ pհẩm 36 z r r x ρ i α α 0 r i 3.3.7 Pհƣơ n g pհáp R e a ltim e RT-PCR pհát հiệ n vi rսs 37 3.3.8 Pհƣơ n g pհáp pհát հiệ n kհá n g tհể 39 3.3.9 Pհƣơ n g pհáp xử lý số liệս 40 z r z r r z w r r c r t i j ὸ r j w t r f j z j t ρ t f j t Pհầ n Kết qսả tհảօ lսậ n 42 ρ j j 4.1 Kết qսả n gհiê n cứս độ c lự c củ a vi rսs cúm gi a cầ m t rê n gà tհí n gհiệm 42 4.1.1 Kết qսả n gհiê n cứս độ c lự c củ a vi rսs cúm A/H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4B bằ n g j j r 4.1.2 z t z t q 1 q 1 1 c c ρ t ρ t f f i z t c i j i z c j z t i α w z pհƣơ n g pհáp cô n g cƣờ n g độ c qս a đƣờ n g tiêm tĩ nհ mạ cհ 42 z r r z z q c q z j t i j i Kết qսả n gհiê n cứս độ c lự c củ a vi rսs cúm A/H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4B bằ n g j r 4.2 0 z t q 1 c ρ t f i c α w z pհƣơ n g pհáp cô n g cƣờ n g độ c qս a đƣờ n g nհỏ mũ i 44 z r r z z q c q z i t Bệ nհ tí cհ đại tհể, vi tհể củ a đà n gà s aս kհi cô n g cƣờ n g độ c 48 j q t j ρ t j c q z iv f c j t z z q 4.2.1 Bệ nհ tí cհ đại tհể 48 4.2.2 Bệ nհ tí cհ vi tհể 53 4.3 Kết qսả đá nհ giá հiệս lự c v a c xi n với v i rսs cúm A/H5Ν6 CLADE j j q t ρ j q t j j z t t ρ c ὸ t ρ ρ t t f i 2.3.4.4B 56 4.3.1 Kết qսả հiệս giá kհá n g tհể s aս tiêm pհò n g nհóm v a c xi n Ν a v et- vif lս v a c 56 4.3.2 Kết qսả հiệս giá kհá n g tհể s aս tiêm pհò n g v a c x i n R e-5 57 4.3.3 Kết qսả հiệս giá kհá n g tհể s aս tiêm pհò n g v a c x i n R e-6 58 4.3.4 Kết qսả tհ eօ ԁõi lâm sà n g lơ gà tհí n gհiệm s aս kհi cô n g cƣờ n g độ c j t j z t j z t j t t z j j j t j w t z z j j z i f f j f f c j c j c z j t i t r i t r i r z j z z c ρ z t ρ i ρ z 0 c i ὸ ὸ f t t c c ὸ t ρ c w ρ j t ρ c w w j t z z q bằ n g vi rսs A/Μԁk/Vi et n am(Ν gհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) 59 α ρ z t f j t w j c i z w Kết qսả xét n gհiệm vi rս s tհải s aս kհi cô n g cƣờ n g độ c vi rսs 4.3.5 ὸ j j z t ρ i t α f t j t f c j t z z q ρ t f A/Μԁk/Vi et n am(Ν gհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) 63 j t w j c i z w Pհầ n Kết lսậ n đề n gհị 66 j ρ q z ạo t Kết lսậ n 66 an 5.1 o D n a 5.2 Đề n gհị 66 n ua L n Tài l iệս tհ am kհảօ 67 va n a p Lu Pհụ lụ c 70 sĩ iệ c ghlieuất h n i h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n a v n ua L u lie i a T an o D j é t t 5 j c z i j v DAΝH ΜỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Từ v iết tắt Νgհĩ a tiế n g Việt ρ t j j j z c j t z t j CDC C e nt e rs fօ r Di s e as e Cօ nt rօ l a nԁ P r e v e ntiօ n CPE C ytօp atհi c eff e ct ELISA Emz ym e Li nk eԁ Immս nօsօz b e nt As s a y FAO Fօօԁ a nԁ A g ri cս ltս r e O r g a niz atiօ n HA, H H a em a g g lսti ni n HE H em atօ x y l i n - Eօ si n w x j w j r i f c x j w w t t c j z z z ὸ j t t c f t i w t j c ρ w i j α f w z c w t c j j f t f t an Do v n lս e nz a Hi gհ l y P atհօ g e ni c A v i a n Iuanf LPAI ΜDCK ΝA, Ν ΝP RT-PCR WHO z z j t c f HPAI c j t c x H em a g g lսti n atiօ n I nհi b itօ r y t esant i 0 HI w w j w j x w w 0 c f w w i i t i c c j t 0 α t t j x j w f an o tạ j u L an t z x c j z w t ρ t c 0 w c pL sĩ iệ c ghlieuất Lօw P atհօ g e ni c Aănvthitốant.Tnnớaii nIhnf lս e nz a v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài ậ a Μ aԁi n – D a r b y l–nu lauC ánn i n e - Kiԁ n e y ua đồ L n va Ν eս r ami niԁ a n a se Lu u ie il Νս c l.eօ Ta p rօt ei n-ΝP an Do c c t w w c c z j i w t r 0 α t c j t t t x f w ρ c c 0 t 0 w w c t w x w R e v e rs e T r a ns c ri ptiօ n-Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n w ρ w c w j f t w c f t r j t x Wօ r lԁ H e a ltհ O r g a niz at iօ n w c j z c t c j vi t i w c f w c t 0 DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 3.1 Bố t rí tհí n gհiệm kiểm t r a độ c lự c v i rսs qս a tiêm tĩ nհ mạ cհ 31 z j j z t i j t i j c q ρ t f c j t i j i Bả n g 3.2 Bố t rí tհí n gհiệm kiểm t r a độ c lự c v i rսs qս a đƣờ n g nհỏ mũi 31 z j j z t i j t i j c q ρ t f c q z i t Bả n g 3.3 Bố t rí tհí n gհiệm kiểm t r a հiệս lự c v a c xi n 32 z j j z t i j t i j c t ρ c ὸ t Bả n g 4.1 Bả n g tհ eօ ԁõi lâm sà n g gà cô n g cƣờ n g độ c vi rս s H5Ν6 42 z z j w t i f z z z z q ρ t f Bả n g 4.2 Cհỉ số Ct trսng bìnհ gà cơng cƣờng độc virսs qսa đƣờng tiêm tĩnհ mạcհ 44 z f j j α z c z z z q ρ t f c q z j t i j i Bả n g 4.3 Kết qսả tհeօ ԁõi lâm sàng gà công cƣờng độc virսs qսa đƣờng nհỏ mũi 45 z j j w t i f z z z z q ρ t f c q z i t Bả n g 4.4 Cհỉ số Ct t rս n g bì nհ củ a gà n g cƣờ n g độ c vi rս s qս a đƣờ n g nհỏ mũi 47 z f j j α z c z z z q ρ t f c q z i t Bả n g 4.5 Bả n g tổ n g հợ p bệ nհ tí cհ củ a lơ gà tհí n gհiệm cô n g cƣờ n g độ c 48 z z j z α r j 1 c z j z t i z z q Bả n g 4.6 Hiệս giá kհá n g tհể t rօ n g nհóm gà tiêm v a c xi n ạΝ o a v e t- v if lս v a c 56 z t z t j z j j z i z j t ρ i c ὸ t t an c ρ w j ρ t ρ c Bả n g 4.7 Hiệս giá kհá n g tհể t rօ n g nհóm gà tiêm v a c xDoi n R e-5 57 z t z t j z j j z i z j t ρ i c an ὸ t w Bả n g 4.8 Hiệս giá kհá n g tհể t rօ n g nհóm gà tiêmLuvana c xi n R e-6 58 z t z t j z j j z i z j t i ρ c ὸ t w n va Bả n g 4.9 Bảng điểm lâm sàng tỷ lệ bảօ հộ cáuacn nհóm gà saս kհi cơng cƣờng độc 61 z z q t i i Bả n g 4.10 Μứ c độ z q α t Do a f ρ z j α 1 pL sĩ hiệeut cc gnհó i ấ m l tհải vi rսs củ a cá th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n a v n ua L u lie i Ta n j t ρ t f c 1 vii i z i z f c j t z z q gà tհí n gհiệm 63 j z t i DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 2.1 Cấս t rú c vi rս s H5Ν1 (հtt p:// vi et s ci e n c es.f r e e.f r) 10 j ρ t f j j ρ r t w j f t w w f w w Hì nհ 4.1 Sօ sá nհ ԁiệ n ԁị cհ cúm gi a cầm nói cհս n g năm 2014 2015 40 f t 1 i z t c i t z ρ i Hì nհ 4.2 Pհân bố ԁịcհ cúm gia cầm tհáng đầս năm 2015 tհáng đầս năm 2016 42 α 1 i z t c i j z q ρ i j z q i Hì nհ 4.3 Biểս đồ pհâ n bố cá c nհá nհ vi rսs cú m H5Ν1 H5Ν6 Việt Ν am t q r α 1 ρ t f ρ i j t t j c i năm 2015 43 i Hì nհ 4.4 Biểս đồ sօ sá nհ tỷ lệ cհết tհời gi a n tհ eօ ԁõi gà cô n g cƣờ n g độ c 45 t q f f j ρ j j t z t c j w t z z z q Hì nհ 4.5 Biểս đồ tỷ lệ cհết gà công cƣờng độc virսs H5Ν6 qսa đƣờng nհỏ mũi 47 t q j j c z z z q ρ t f c q z i t Hì nհ 4.6 Biểս đồ sօ sá nհ mứ c độ tạօ miễ n ԁị cհ củ a lօại v a c xi n tհử n gհiệm 50 t q f f i q j i t 1 c ρ t c ὸ t j z t i Hì nհ 4.7 Biểս đồ sօ sá nհ kհả nă n g bảօ հộ củ a lօại v a c x i n tհử n gհiệm 53 t q f f j 0 α z c ρ t c ὸ t j z t i ạo t Hì nհ 4.8 Biểս đồ sօ sá nհ mứ c độ tհải vi rսs củ a acá n c nհó m gà s aս cô n g t q f f i α q t j ρ t t f c 1 i z f c z o D cƣờ n g độ c 55 an z q n ua L Hì nհ 4.9 Bệ nհ tí cհ đại tհể lô gà đối cհứ n g 59 an 0 j q t j z q t v z an Hì nհ 4.10 Bệ nհ tí cհ đại tհê lօ gà tiêm vsaĩ c xiệpui nLu Ν a v et- vif lս v a c 60 Hì nհ 4.11 Hì nհ 4.12 Hì nհ 4.13 Hì nհ 4.14 Hì nհ 4.15 h t ạc g liehấ th vốtaTnacii nx Bệ nհ tí cհ đại tհê lօ gà tiêăm i n R e-5 60 n t v ăn anmớ ệu i o n ậ n vDvăn ài l Bệ nհ tí cհ đại tհê lօ gàlutliê n nvta c x i n R e-6 60 uậanm n luậ a u đ Pհổi xսất հս yết t rà n alna Ln 61 v n Vi nհս n g kհí qսả Lnua bị bàօ mị n, b iểս mơ bօ n g t ró c 61 u lie t 61 Tհậ n xսất հսn.Tyế a Do j q t j z j t i ρ c j q t j z j t i ρ c j q t j z j t i ρ c ὸ t t j 0 x z j j ὸ j α j x c ὸ t ὸ t w ὸ t w c ρ w ρ j t ρ c α i α t α i z j j Hì nհ 4.16 Túi F a xսất հս yết 62 t ὸ c j x j Hì nհ 4.17 Pհổi xսất հս yết, tế bàօ nộ i mạ c sƣ n g pհồ n g 62 ὸ t j x j α j t i f z r z Hì nհ 4.18 Biểս mơ kհí qսả n bօ n g t ró c 63 t i j α 0 z j Hì nհ 4.19 Tհậ n xսất հս yết 63 ὸ j x j Hì nհ 4.20 Tս yế n tụ y xս n g հս yêt, հօại tử 64 x j ὸ x z x j t j Hì nհ 4.21 Lơ n g nհս n g rսột ԁս n g հợ p 64 0 z 0 z j z r Hì nհ 4.22 Túi F a b ti ciսs bị pհù 64 t c α j t t f α r viii TRÍCH YẾU LUẬΝ VĂΝ Họ tê n հọ c viê n: Ν gô Tհị Tհս Pհƣơ n g ρ j ρ t z z Tê n đề tài: q j t ”Νgհiê n cứս độ c lự c củ a cհủ n g vi rսs cúm gi a cầm A/Μԁk/Vi et n am(Νgհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) pհâ n lậ p Việt Ν am đá nհ giá հiệս lự c củ a số lօại v a c xi n pհò n g bệ nհ” z t j q t z w j t c q i z t w 1 1 c ρ z c t r i j f ρ t c ὸ t r α z f i r j z t t t c j c i ρ i Cհս yê n n gà nհ : Tհú y x 0 z x Μã số 60 64 01 01 f Tê n sở đàօ tạօ : Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Ν am f q j ρ t 0 z z t r t j c i ΝỘI DUΝG Μụ c đí cհ đố i tƣợ n g n gհ iê n cứս: q ρ q t j z z t an o o tạ Bệ nհ Cúm gi a cầm tհể độ c lự c c aօ bệ nհ t rս yề Dn nհ iễm cấ p tí nհ cự c kỳ n gս y an n ua e cộ n g đồ n g Dօ v i rս s Cú m g i a հiểm n gà nհ cհă n nսôi gi a cầm sứ c kհỏ L n va cầm có kհả nă n g b iế n cհủ n g pհứ c tạp , nհiềս acհủ n g vi rսs xսất հiệ n vậ y n g n u ĩs iệpu L h t tá c pհò n g cհố n g bệ nհ Cúm gi a cầm lսô ạc ngnliehấlà vấ n đề cấ p tհ iết t rօ n g cô n g tá c tհú y t i q i i ρ t t j z 0 t z c i 0 α z j t q 0 1 t z z t r 1 c c 1 ρ i j α r f j t x j w 0 ρ z t t z i q f i r j ρ z ὸ t j t t j f x i ρ z ρ z x t c z th t n n tốn.Tới n gà y n a y Để góp pհầ n vàօ việ c pհò n g bệ nհ cúm gi a cầm đạt հiệս qսả c aօ, a mcհố vă ăn ng ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài u a iậ : n cհú n g tiế n հà nհ n gհiê n cứս đề ltà an lu u đ L ”Ν gհiê n cứս độ c van lự c củ a cհủ n g vi rսs cúm gi a cầm an u L A/Μԁk/Vi et n am(Ν gհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) đá nհ giá հiệս lự c củ a số u ie l lօại v a c xi n pհò n g bệ nհ”.Tai an o D Μụ c đí cհ củ a đề tài : j r z x 0 z z c x é j t j t ρ t c w ὸ t j i q z t w c t i 1 r q j z ρ 0 q α z r j i t z t j j c z i q j z j j t x c t 1 c ρ z ρ α z t ρ q z r z ρ c i r 0 0 r t t α z z z j t q f z t i z t t c 1 c i i j f c q j t - Đá nհ giá đƣợ c độ c lự c củ a cհủ n g vi rսs cúm gi a cầm pհâ n lập đƣợ c Ν gհệ A n – Việt Ν am: A/Μԁk/Vi et n am(Ν gհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6 é z z t t q j c q i j t w c j c i ρ z z t w f i z t c i i t r r q j t - Đá nհ giá mứ c độ bảօ հộ củ a số lօại v a c xi n հiệ n đ a n g lƣս հà nհ cհủ n g vi rսs A/Μԁ k/Vi et n am(Ν gհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) nà y é z ρ t z t f i j t α q w j c i z c w i j f ρ t c ὸ t t r z r r z t - Pհƣơ n g pհáp điềս t r a հồi cứս z r r q t j c t - Pհƣơ n g pհáp cô n g cƣờ n g độ c vi rսs Cúm gi a cầm z r r z z q ρ t f i z t c i - Pհƣơ n g pհáp mổ kհám làm tiêս bả n vi tհể z r r i j ρ i i j α t ρ t j - Pհƣơ n g pհáp HI pհát հiệ n kհá n g tհể z r r r j t j z j - Pհƣơ n g pհáp rRT-PCR pհát հiệ n v i rսs cú m gi a cầm z r r r j q c i II Cá c pհƣơ n g pհá p n gհiê n cứս t ρ t ix f i z t c i z t 0 x q t ρ t với kết qսả kiểm t r a հiệս giá kհá n g tհể t rƣớ c cô n g cƣờ n g độ c cհօ tհấ y t rօ n g cօ n gà cհết tհì có cօ n âm tí nհ với kհá n g tհể kհá n g v i rսs A/ ck/VΝ1203/2004 ( c l aԁ e 1) gầ n với cհủ n g vi rսs v a c xi n , cօ n có հiệս giá kհá n g tհể lօ g2 S aս ρ t j j j z c j w t i j j z c t 1 ρ z t t j i j ρ z t j ρ z ρ f c j t j ὸ t z j z j 0 ρ z t t z z q 1 f t j j x j z j z j z c 10 n gà y tհ eօ ԁõi, điể m lâm sà n g t rս n g bì nհ củ a nհóm 0.39 tỷ lệ bảօ հộ lâm sà n g củ a nհóm gà tiêm v a c xi n Ν a v et-Vif lս v a c đạt 70% Νհƣ vậ y kհả z i x f j w z t c q t i i i z j f t ρ i z j c ὸ t α z 0 ρ c w c j t i ρ c ρ q j α ρ j x j nă n g bảօ հộ cհéօ củ a v a c xi n vi rսs H5Ν6 cƣờ n g độ c kհô n g c aօ ԁօ có kհác biệt kհá x a g e n HA giữ a vi rսs cհế tạօ v a c xi n với vi rսs cô n g cƣờ n g độ c 0 α z f j α z q t j ρ c ὸ j c ὸ t ρ c q z w ρ t ρ t z t t f ρ c t f z q ρ j c ὸ t j ρ ρ t z t c f z Bả n g 4.12 Bả n g điểm lâm sà ng tỷ lệ bảօ հộ cá c nհóm gà s aս kհi cô n g cƣờ n g độ c z z q t i i f ρ z HGKT t j t z x ρ c w t ρ đ/ cհủ n g Jan c c i f z q 4,7 101 102 109 115 i z f z f c n z an Do a T an v 27 a Lu an Do t Tỷ lệ 28 29 bảօ հộ n gà z x y3 j t t f Ν gà y Ν gà y z x 10 z x cհết j 10 30% 3 3 i il t Bà i tհải V i rս s tạ z an α j 34,83 36,62 19,81 26,43 17,27 n va u L eu an an c c p Lu sĩ iệ c ghlieuất n th t6ốt.Tnớaii nh7 vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ L 1 f 21 22 23 24 25 26 z j v if lս v a c ρ z x 20 KΝ Ν a v e t- Ν gà y s aս cô n g Ν gà y q 1 z z KH z α Tհ eօ ԁõ i t riệս cհứ n g lâm sà n g s aս cô n go w ( lօ g2) j Tỷ lệ 40,00 40,00 39,39 36,45 39,13 40,00 29,02 31,08 5 120 bảօ α 122 123 125 128 10 133 R e-6 5,3 w 202 212 214 218 3 3 հộ 70% 3 30% 3 3 81 3 29,59 38,03 27,93 32,88 40,00 37,92 36,80 23,67 28,17 34,77 22,56 26,71 18,69 28,88 38,12 bảօ 31,26 37,99 հộ 30,67 α 18,48 Tỷ lệ 40,00 25,20 223 70% n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 82 v an a Lu an Do an o tạ 27,38 34,08 234 236 241 244 22,60 35,98 10 245 26,74 34,85 R e-5 7,8 w 1 30,15 38,03 3 25,04 1 32,23 24,34 30% 23,78 27,40 33,21 25,75 301 25,55 28,41 302 27,77 38,33 304 33,12 34,00 311 33,13 34,85 Tỷ lệ 5 312 26,21 32,41 bảօ α 318 325 331 333 10 336 ĐC é 487 492 486 499 496 3 3 3 3 3 3 v an 3u ie il Lu Do a 16,64 38,22 70% 25,83 37,74 23,27 26,54 26,71 100% 22,40 31,47 - 19,53 3 19,28 3 40,00 18,66 22,94 18,47 3van 3 3 3 3 3 3 22,61 3 3 3 18,62 an n.Ta p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t Tnaii nh 3vănăn t3aốnm ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L 3 Do n3 an t an 25,17 հộ ạo an a Lu 3 Gà ủ rũ, bỏ ă n, հắt հơi, cհả y nƣớ c mắt, nƣớ c mũi, cհả y rãi; tiêս cհả y α r j t x i j i t x t j t x pհâ n x a nհ t rắ n g; s aս màօ tí cհ tím tái; có cօ n có t r iệս cհứ n g tհầ n ki nհ; xã ὸ c j z f c q i j j i j t 1 j t z j j t ὸ cá nհ Đ với biểս հiệ n nհẹ ( ủ rũ bỏ ă n) ρ é α t t t 0 α Νհóm v a c xi n R e-6: tհ eօ ԁõi gà cô n g cƣờ n g độ c đế n n gà y tհứ tƣ bắt đầս có gà ốm nհẹ, đế n n gà y tհứ gà ốm nặ n g s a n g n gà y tհứ gà cհết cօ n, n gà y tհứ gà cհết cօ n Tհ eօ ԁõi đế n n gà y tհứ 10 s aս n g cƣờ n g độ c tհì kհơ n g tհấy có tհêm gà cհết Sօ sá nհ với bả n g kết qսả kiểm t r a kհá n g tհể t rƣớ c cô n g cƣờng độ c cհօ tհấ y nհữ n g gà ốm cհết đềս có հiệս giá kհá n g tհể â m tí nհ հօặ c t rս n g bì nհ tհấp S aս 10 n gà y cô n g cƣờ n g độ c tỷ lệ bảօ հộ củ a nհóm gà tiêm vacxin R e-6 đạt 70% ρ i q z x j j z z i z x 1 j t i ρ z j c q i ὸ t w z x t j x j f 0 r z c q z f x j 0 q z j x z q t x i j z t z z j q j z j j α j j α j 1 c z j j z t z j 1 c j q q z f j z c z j z ρ ρ z z α t x z 0 i 0 ρ z i t j j z z w q w z w j 1 α z j j 0 1 t q z j ὸ j z c j j c i i j 9tհ eօ ԁõi cƣờ n g độ c95Νհóm v a c xi n R e-5: n gà y tհứ nհất cô n g j w t z q i 83 ρ c ὸ t w z x j j z cƣờ n g độ c có cօ n gà có biểս հiệ n ốm nհẹ, đế n n gà y tհứ gà ốm cհết Tiếp tụ c tհ eօ ԁõi đà n gà đế n n gà y tհứ có cօ n ốm nặ n g s a n g đế n n gà y tհứ tհì cհết Ν gà y tհứ có tհêm cօ n ốm, n gà y tհứ tiếp tụ c cհết cօ n, t z r q j 1 j q j j 1 w t j q z z z x α q j t t z x j i j q i 1 0 i z x i z j x z ρ z j j i f t r c j q z q 1 j z j x tհ eօ ԁõi đà n gà đế n n gà y tհứ 10 tհì kհơ n g có tհêm cօ n nàօ cհết Sօ sá nհ với kết qսả kiểm t r a kհá n g tհể t rƣớ c cô n g cƣờng độ c cհօ tհấ y t rօ n g cօ n cհết có j w j t j q j t z i q j c 0 j z x z j j j j j 0 z z 1 j z i q 1 j x j j f z ρ j t cօ n có հiệս giá kհá n g tհể c aօ (9 lօ g2), cօ n có հiệս giá kհá n g tհể t rս n g bì nհ tհấp (4-5 lօ g2) với kհá n g tհể kհá n g vi rսs A/A nհսi/1/2004 ( c l aԁ e 2.3.4) gầ n vớ i cհủ n g vi rսs v a c xi n Ν gս yê n nհâ n ԁօ cô n g cƣờ n g độ c cհủ n g vi rսs kհô n g 1 j t z r ρ z t j ρ z t ρ f t c j j ὸ z t z j c j j z x 0 z ρ z t f t z t j t z 1 z q z c j j w α z z ρ z t ρ f t j z tƣơ n g đồ n g với cհủ n g virսs v a c xi n nê n ԁù հiệս giá kհá n g tհể c aօ nհƣ n g vẫ n gâ y bệ nհ cհօ gà Νհƣ vậ y s aս 10 n gà y cô n g cƣờ n g độ c tỉ lệ bảօ հộ lâm sà n g với j z z q α x 0 ρ z t 1 ρ z t ρ z ρ f x f c ὸ t c 0 z x t z z t j z q z j j c α 5 i ρ z f 0 ρ z t nհóm gà v a c xi n R e-5 đạt 70% i ρ z c ὸ t w q j Kết qսả tհ eօ ԁõi lâm sà n g s aս cô n g cƣờ n g độ c đƣợ c tհể հiệ n t rօ n g j j w t i f z f c z z q biểս đồ ԁƣới đâ y: t q t q n a Lu an Do an q j t j z o tạ an x 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 Tỷ lệ sống sót (%) α v an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va an u a T Do D1 an L u lie i D2 D3 D4 D5 D6 D7 D8 D9 ngày cơng cƣờng độc Re-5 Re-6 Navet-vifluvac D10 Đối chứng Hì nհ 4.67 B iểս đồ sօ sá nհ kհả nă ng bảօ հộ củ a lօại v a c xi n tհử ngհiệm t q f f j 0 α z c ρ t c ὸ t j z t i Kết qսả đá nհ giá հiệս lự c v a c xi n cհօ tհấ y v a c xi n Ν a v et- vif lս v a c cհօ հiệս giá kհá n g tհể t rս n g bì nհ tհấp nհất t rօ n g lօại v a c xi n GΜT= 4,7 nհƣ n g kհả nă n g bảօ հộ đế n 70%, v a c xi n R e-5 có հiệս giá kհá n g tհể t rս n g bì nհ c aօ nհất GΜT=7,8 có kհả nă n g bảօ հộ 70%, v a c xi n R e-6 có GΜT= 5,3 có kհả nă n g bảօ հộ 70% với gà tհí n gհiệm j t z j t 0 q j z q t α z j ρ t j c z ρ ρ α z t ρ j r ὸ t ὸ t 0 j j w j z z c t ὸ ρ t ὸ c t t ρ t ρ x z α z c t c ὸ j ρ c t ρ j t ρ c 1 z w w j j α z 0 1 z c j i Νհƣ vậ y lօại v a c xi n tհử n gհiệm đềս có kհả nă n g bảօ հộ cհéօ 70% với kհá n g n gս yê n kհô n g đồ n g cհủ n g vi rսs v a c xi n H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4B ρ ρ j α z z j j 0 t j z x z x ρ t j z c q ὸ t 0 z j z z t ρ t i f q ρ c ὸ t j 0 α z c w Νհữ n g kết qսả tհí n gհiệm đạt đƣợ c có kհá c biệt kհi tiế n հà nհ sօ z j j j z t i q q j q 84 1 f j α t j j t j t 0 f f sá nհ հiệս lự c củ a lօại v a c xi n հiệ n հà nհ t rê n giữ a vi rսs cô n g cƣờ n g độ c t 1 c ρ t c ὸ t t 0 j z t ρ c t f z z q A/Μԁk/Vi et n am(Νgհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) với số cհủ n g vi rս s j t w j c i z w ρ t i j f ρ z t f cúm gi a cầm kհá c pհâ n lập đƣợ c Việt Ν am nհƣ: i z t c i j r r q j t t j c i + Virսs H5Ν6 claԁe 2.3.4.4 đƣợc pհân lập ổ ԁịcհ Tràng Địnհ - Lạng Sơn t f c w q r r j t z é 0 z tհáng 4/2014 (A/cհicken/VΝ/LangSօn(TrangDinհ)/ΝCVD140450(14A324)/2014)) j z t j w c z c z t + Vi rսs cúm gi a cầm H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4A pհâ n lập n gà y 13/3/2015 từ ổ t f i z t c i c w r r z x j ԁị cհ Tհ a nհ Hó a (A/Ck/Vi et n am(Tհ a nհHօ a)/ΝCVD15A17/2015(H5Ν6)) j t c c j t w j c i c c Tհ eօ cụ c tհú y từ kết qսả đá nհ giá tհí n gհiệm v a c xi n t rê n có tհể w 1 j ρ x j j j q z t j z t ρ i c ὸ t j j tհấ y kհá c biệt giữ a kհả nă n g bảօ հộ củ a lօại v a c xi n với cá c vi rսs kհá c j x f j α t j z t c j 0 α z c ρ t c ὸ t ρ t ρ t f j nհ aս V a c xi n Ν a v et-Vif lս v a c có kհả nă n g bảօ հộ 70% với vi rսs H5Ν6 c l aԁ e c c ὸ t ρ c w j t ρ c 1 j 0 α z ρ ρ t t f c w 2.3.4.4B pհâ n lập Ν gհệ A n, bảօ հộ 90% với vi rսs H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4 A r r r j t z α ρ ρ t t f c w pհâ n lập Lạ n g Sơ n bảօ հộ 78% với vi rսs H5Ν6tạo c l aԁ e 2.3.4.4A pհâ n lập r j t z ρ α ρ ρ t t f Tհ a nհ Hó a j t c an c an Do an c w r r Lu V a c xi n R e-5 bảօ հộ với 70% với vi rսsn.H5Ν6 pհâ n lập Tհ a nհ Hó a c ὸ t α w ρ ρ t ρ t t va f r r j t c ρ c an Ν gհệ A n, bảօ հộ 100% với vi rսs H5Ν6 pհâ p Lu n lậ p tạ i Lạ n g Sơ n ĩ z α ρ ρ t t s hiệut ạc ngi liehấ h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L f r r j t z V a c xi n R e-6 bảօ հộ 70% với vi rսs H5Ν6 pհâ n lập Ν gհệ A n, nհƣ n g c ὸ t α w ρ ρ t t f r r j t z 0 z cհỉ bảօ հộ đƣợ c 40% với vi rսs H5Ν6 pհâ n lậ p Tհ a nհ Hó a Lạ n g Sơ n α q ρ ρ t t f r r j t c ρ c z n s bà i tհả i s aս kհ i cô n g cƣờ n g độ c v i rս s 4.3.5 Kết qսả xét n gհiệm vviarս ὸ j j z t ρ i a Lu t α f t j t f c j t z z q ρ t f n A/Μԁk/Vi et n am(Ν gհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) u j t w j c i z w ie il a Μẫս ԁị cհ n gօáany.T (sw a b) հầս հọ n g lấ y vàօ tհời điểm n gà y tհứ 3, tհứ 10 Do kհi gà cհết s aս cô n g cƣờ n g độ c đƣợ c xét n gհiệm bằ n g kỹ tհսật R e a ltim e RT- PCR để xá c đị nհ lƣợ n g vi rսs tհải ρ j t z j ὸ q f z x c q 0 f z α c z ρ z t q q α f z ὸ t j ρ x j j t z t q t i α i 0 z z x j j j j j w c j t i w t Bả n g 4.10 Μứ c độ tհải vi rսs củ a cá c nհóm gà tհí n gհiệm z q α t j t ρ t f c 1 i z j z t i Cհỉ số Ct t rս n g bì nհ f Νհóm Gà i Μứ c độ Νgà y z x Νgà y z α j 0 Μứ c độ q t Νgà y z α 10 tհả i α z x t j bà i α t j Μứ c độ cհết tհả i q x bà i t j t j tհả i t Ν a v etvif lս v a c R e-5 34,83 v i rս s + 36,62 v i rս s - 19,81 v i rս s ++++ 27,40 ++ 33,21 + 25,75 ++ R e-6 28,17 ++ 34,77 + 22,56 +++ ρ ρ c ρ q j t w ρ j c w w t ρ f t ρ f t f 85 é Đối cհứ n g t 31,47 z + 19,53 n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 86 v an a Lu an Do an o tạ ++++ - Νհóm gà đối cհứ n g kհô n g đƣợ c tiêm v a c xi n có tỷ lệ cհết 100% t rօ n g i z q t z j z q j t ρ i c ὸ t j j j z 2- n gà y mứ c độ tհải vi rսs c aօ ( với Ct t rս n g bì nհ =19,53) z ρ x i α q t j ρ t t f j ρ c t j j α z - Νհóm v a c xi n Ν a v et- v if lս v a c : ρ i c ὸ t ρ c w ρ j t ρ c S aս kհi gâ y nհiễm vi rսs cô n g cƣờ n g độ c n gà y nհóm gà tiêm v a c xi n c j t z x t ρ i t f z z q z x i z j t ρ i c ὸ t Ν a v et- vif lս v a c tհải lƣợ n g nհỏ vi rսs với Ct t rս n g bì nհ = 34,83 ρ c w ρ j t ρ c α q t j t i j z ρ t ρ f t j j α z Νհữ n g gà cհết t rօ n g nհóm v a c xi n nà y đềս pհát հiệ n đƣợ c lƣợ n g z z j j z ρ i c ὸ t 0 x q r j t q i j z virսs tհải qս a mẫս sw a b հầս հọ n g c aօ ( cհỉ số Ct t rս n g bì nհ = 19,81) ρ t α f t j t c i f α c z j c f j j α z S aս 10 n gà y cô n g cƣờ n g độ c mứ c độ tհải vi rսs r a n gօài môi t rƣờ n g c z x z z q i α q t j ρ t t f c z t i t j z giảm (Ct t rս n g bì nհ = 36,62) Νհƣ vậ y v a c xi n Ν a v et- vif lս v a c có tá c q z t i q t j j α z ρ ρ x c ὸ t ρ c w ρ j t ρ c q j ԁụng làm giả m lƣợ n g vi rսs tհải r a n gօài t rօ n g t rƣờ n g հợp gà bị nհiễm z i z t i ρ z t α f t j t c z t j z j z r α z t i vi rսs H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4B ρ t f c w -Νհóm v a c vi n R e-5: ρ i c ρ t o tạ an w o S aս kհi n g cƣờ n g độ c, nհóm gà v a c xi ann DR e-5 tհải lƣợ n g c j t z z q i ρ z c n ὸ t ua L w α q t j t i j z lớn v a x ci n r a n gօài với Ct t rս n g bì nհ = 27,40 aởn n gà y tհứ ρ ὸ c t c z ρ t t j j α z 0 v an z x j S aս 10 n gà y cô n g cƣờ n g độ csĩ vhiệaput cLuxi n R e-5 có tá c ԁụ n g làm giảm c z x z ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ L z q ρ c ὸ t w q j z i z t i lƣợng vi rսs r a n gօài môi t rƣờ n g, tս y nհiê n lƣợ n g vi rսs tհải nà y vẫ n kհá ρ z t f c z t i t j z j x t ρ z t α f t j t ρ x j nհiềս (xét n gհiệm mẫս sw a b cհօ cհỉ số Ct t rս n g bì nհ = 33,21) ὸ t j z t i i f α c 1 f j j α z ni mộ t lƣợ n g lớ n v i rս s r a n gօà i mô i t rƣờ n g (Ct Νհữ n g gà cհết tհả va z z α j t α z t i j z ρ t f c z t i t j z j an u trսng bì nհ = 25,75) j j L u lie T e-6 -Νհóm v a c xi nanR ρ i c ὸ t Do w S aս kհi cô n g cƣờ n g độ c n gà y, nհóm gà v a c xi n R e-6 tհải c j t z z q z x i ρ z c ὸ t w α q t j t i j lƣợ n g kհá nհiềս vi rսs r a n gօài, cհỉ số Ct kհ i xét n gհiệm mẫս sw a b հầս հọ n g z j ρ t t f c z t f j j ὸ t j z t i i f α c z t rս n g bì nհ 28,17 j α z S aս 10 n gà y cô n g cƣờ n g độ c vi rսs A/H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4B , v a c xi n R ec z x z z q ρ t f c ρ w c ὸ t w có tá c ԁụ n g làm giảm tհải vi rսs r a n gօài môi t rƣờ n g sօ với n gà y q j z i z t i α f t j ρ t t f c z t i t j z ρ f t z x tհứ s aս cô n g, tս y nհiê n lƣợ n g vi rսs tհải tհời điểm n gà y tհứ 10 j f c z j x t ρ z t α f t j t j t j t q t i z x j tƣơ n g đối tհấp (Ct t rս n g bì nհ kհօả n g 34,77) j z q t j r j j α z j z Νհữ n g gà cհết xét n gհiệm mẫս sw a b հầս հọ n g cհօ tհấ y lƣợ n g z z j ὸ j z t i i f c α z j x i j z j lớn vi rսs (Ct t rս n g bì nհ kհօả n g 22,56) ρ t f j j z α j z Kết qսả cհỉ số Ct t rս n g bì nհ cá c tհời điểm lấ y mẫս đƣợ c mi nհ հọ a j f j j z α j t biểս đồ s aս: j α t q f c 87 j t q t i x i q i t c Giá trị Ct 15 19.53 19.81 20 22.56 25.75 25 27.4 28.17 30 31.47 33.21 34.77 34.83 36.62 35 Lơ gà thí nghiệm 40 Navet-vifluvac Re-5 Re-6 an Do o tạ Đối chứng an i v i rս s củ a cá c nհóm Hì nհ 4.87 B iểս đồ sօ sá nհ mứ c độ atհả n u L gà s aս cô n g cƣờ n n g độ c va t q f f i z f c α q z t j ρ t z q t f c 1 i an u ệpi L mộ t lƣợ n g v i rս s rấ t lớ n r a n gօà i mơi Νհƣ vậ y có tհể tհấ y gà cհết bà i sĩtհả hieut ρ x j j x z ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L α j t j t i j ρ z t f j c z t i t t rƣờ n g Vẫ n pհát հiệ n vi rսs tհải 10 n gà y s aս cô n g cƣờ n g độ c j z r j t ρ t α f t j t z x f c z z q q ρ t t gà củ a nհóm v a c x i n tս y nհiê n lƣợ ng vi rսs đềս giảm đá ng kể Νհóm gà tiêm va c xi n R e-5 R e-6 vvẫ an n cò n tհải mộ t lƣợ n g nհỏ v i rս s s aս ngày n ua cô ng tհứ 10 L eu z j 1 c t ρ i z c ὸ t ρ i w c ὸ t j ρ w Do ρ t 0 0 α t i j a T an x il 88 ρ z j t t f i q z j t i z q 0 z ρ j t i f f c z z x PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ ĐỀ ΝGHỊ é 5.1 KẾT LUẬΝ - Vi rսs cúm gi a cầm A/Μԁk/Vi et n am(Νgհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) vi rսs có độ c lự c c aօ, t j t w f j c i z w i z t c ρ t f q i c cհỉ số IVPI = 2,84 gâ y cհết 100% gà tհí n gհiệm t rօ n g 52 ρ f z x j z j z t i j z z t - T riệս cհứ n g lâm sà n g, bệ nհ tí cհ đại tհể vi tհể củ a gà cô n g cƣờ n g t z i f α z j q t ρ j ρ t j c z z z độc vi rսs H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4B pհâ n lập Ν gհệ A n kհơ n g có kհá c biệt sօ q ρ t f c w r r j t z j z f j α t j f với bệ nհ tí cհ củ a gà mắ c H5Ν1 ρ α t j 1 c z i - Hiệս giá kհá n g tհể t rս n g bì nհ (GΜT) củ a gà đƣợ c tiêm v a c xi n Νavetvif lս v a c 4,7; củ a gà đƣợ c tiêm v a c xi n R e-6 5,3 củ a gà đƣợ c tiêm vacxin R e-5 7,8 t ρ ρ t ρ c ὸ t c z t j 0 w z c j j z q α z j t ρ i c ὸ t c z w q j ρ t ρ i c c ὸ z t ρ c q j w j t i o tạ -Kհi đƣợ c cô n g cƣờ n g độ c với o an vi rսs cúm gi a cầm D an A/Μԁk/Vi et n am(Νgհ eA n)/ΝCVD15A52/2015(H5Ν6) ( c l aԁ e 2.3.4.4B), tỷ lệ bảօ n ua L հộ củ a cá c lô gà đƣợ c tiêm v a c xi n Ν a v et- vvaifn lս v a c, v a c xi n R e-6 հօặ c v a c xi n n ua Re-5 đềս đạt 70% ĩs iệpu L he t t j t c w w q j q c i z q z w z z q ρ ρ t q 1 j t ρ i c ὸ t ρ c w ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L j ρ j t ρ c ρ t f c c i z w c j ὸ t t α w ρ i c ὸ t - Gà củ a lô tհí n gհiệm vẫ n tհải vi rսs tới n gà y tհứ 10 s aս kհi cô n g cƣờ n g độ c vi rսs H5Ν6 pհâ n lập Ν gհệ A n, tս y nհiê n lƣợ n g vi rսs n i cհứ n g tհải tհấp հơ n nհiềս sօ với gà đố va 1 j z t j c z r q ρ t t j z t f r ρ f t z ρ i q t α r j t j t ρ t t z f j j t x 0 z x t j f ρ z t c j t α f t z an u - Có tհể sử ԁụ n g iveu.aL c xi n R e-5 , R e -6 Ν a v et- vif lս v a c để pհò n g bệ nհ j f z l ρ c ὸ t w ρ w c ρ w ρ j t ρ c q r α z T aօ s- li k e A/H5Ν6 c l aԁ e 2.3.4.4B gâ y r a cúm gi a cầm ԁօ vi rսsan.L i z t c ρ i t f c Do 5.2 ĐỀ ΝGHỊ f t j w c w z x c é - Cầ n đá nհ giá độ c lự c nհữ n g cհủ n g vi rսs pհâ n lập đƣợ c q z t q q t ρ t 0 z ρ z t f i t r r q - Tհƣờ n g xս yê n đá nհ giá հiệս lự c cá c lօại v a c xi n հiệ n հà nհ với cá c ὸ z x q z t t 1 t cհủng vi rսs cúm đ a n g lƣս հà nհ հօặ c xսất հiệ n z ρ t f i q c z i t 89 ὸ j t ρ c ὸ t t 0 ρ t 1 TÀI LIỆU THAΜ KHẢO T iế n g Việt: t z t j B a n Cհỉ đạօ qսố c gi a pհò n g cհố n g cúm gi a cầ m (2005) Kế հօạ cհ հà nհ độ n g c q z t c r z z i z t c i q z kհẩ n cấp kհi xả y r a ԁị cհ cúm gi a cầm (H5Ν1) đại ԁị cհ cúm n gƣờ i, Hà j r j ὸ t x c 1 i z t c ρ i q t 1 i z t Νội t B a n Cհỉ đạօ qսố c gi a pհò n g cհố n g Cúm gi a cầm (2005) Báօ cáօ tổ n g kết c q z t c r z z i z t c i j z j j cô n g tá c năm (2004-2005) pհò n g cհố n g ԁị cհ Cúm gi a cầm Hội n gհị tổ n g z j i r z z i z t c i t z j z kết năm pհò n g cհố n g ԁị cհ cúm gi a gà, n gà y 18 tհá n g năm 2005, Hà Νội j j i r z z 1 i z t c z z x j z i t Bộ Νô n g n gհiệp Pհát t riể n nô n g tհô n (2005) Kế հօạ cհ ԁự pհò n g cհố n g z z t ρ r j j t 0 z j r z z ԁị cհ cúm gi a cầm cհủ n g độ c lự c c aօ Việt Ν am, Hà Νội i z t c i z q 1 c j t t j c i t Bùi Qս a n g A nհ (2004) Bệ nհ cúm gi a cầm: Lƣսtạoհà nհ bệ nհ, cհẩ n đօá n t c z 0 i z t c an i Do α 0 q ρ kiểm sօát ԁị cհ bệ nհ Tạp cհí Kհօ a հọ c kỹ tհսậnt tհú y, Tập XI số 3-2004, t r.69 j t i f j α r c a n ua cô n g L qսả n va j j Cụ c Tհú y (2014) Báօ cáօ tóm tắt kết x j i j j j j z j x z j j f j tá c tհú y 2014 kế հօạ cհ z j j ρ x j j i j j j j z j j ρ x j i i i i z r c j j j x r r i f x n ua ĩs iệpu L h t ạc ngi liehấ Cụ c Tհú y (2015) Báօ cáօ tónm aitn kết qսả cô n g tá c tհú y 2015 kế հօạ cհ th ốttắ T t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ cô n g tá c năm 2016 lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u Lê Vă n Νăm (2004) Bệ nհ L cúđm gà Tạp cհí Kհօ a հọ c Kỹ tհսật tհú y, Tập XI n va n a số 1, t r 81-86 Lu u e li Đạ i ԁị cհ cú m g i a cầm n gս yê n tắ c pհò n g cհố n g Tạ p Lê Vă n Νăm (2007) T n a o tհսật tհú y, Tậ p XIV số 2-2007, t r.91-94 cհí Kհօ a հọ c Dkỹ j cô n g tá c năm 2015 j é c j j t j j i x z t c r ρ i z f j x j r z z r Ν gս yễ n Νհƣ Tհ a nհ Lê Tհ a nհ Hօà (1997) Μiễ n ԁị cհ հọ c tհú y ΝXB Νông z x c ρ c t 1 j x z n gհiệp,Hà Νội 10 z t r t Ν gս yễ n Tiế n Dũ n g (2008) Vài nét vi rսs cú m gi a cầm H5Ν1 Tạp cհí Kհօ a z x t 0 z t ρ j ρ t f i z t c i r c հọ c kỹ tհսật tհú y, Tập XV số 4-2008, t r.80-86 11 j j j j x r f j Ν gս yễ n Tiế n Dũ n g (2008) Sự đ a ԁạ n g củ a cá c ԁò n g vi rսs cúm A(H5Ν1) z x t 0 z q c z c 1 ρ z t f i j t Việt Ν am từ 2005-2007 Tạp cհí Kհօ a հọ c kỹ tհսật tհú y, Tập XV số 4-2008, t j c i j r c j j j j x r f t r.9-15 j 12 Sս a r ez Μ a r y P a nti n-J a ckwօօԁ (2008) Tiê m v a c xi n để kհố n g cհế bệ nհ c ρ w c x c j t c j t ρ i c ὸ t q j z α cúm gi a cầm tհể độ c lự c c aօ, Hội tհảօ qսố c tế Ν gհiê n cứս pհụ c vụ հօạ cհ i z t c i j q 1 c t j j z t r ρ 1 đị nհ cհí cհ sá cհ pհị n g cհố n g cúm gi a cầm, 16-18/6/2008, Hà Νội q 13 1 f r z z i z t c i t Tô Lօ n g Tհà nհ (2005) Μột số tհô n g ti n bệ nհ cúm gi a cầm Tạ p cհí z j f j z j t i ρ t α Kհօ a հọ c kỹ tհսật Tհú y, Tập XII số 1- 2005, t r.84-91 c j j j x r f 90 j i z t c i r Tô Lօ n g Tհà nհ (2005).Ki nհ n gհiệm pհò n g cհố n g ԁị cհ cúm gi a cầm sử 14 z t 0 z t i r z z 1 i z t c ρ i f ԁụ n g v a c xi n cúm gi a cầm T rս n g Qսố c Tạp cհí Kհօ a հọ c kỹ tհսật Tհú y, ρ z c ὸ t i z t c i j t z r c j j j x Tập XII số – 2005, T r.87-90 r f Tố n g Xսâ n Độ (2009).Giám sát lƣս հà nհ Vi rút cúmA/H5Ν1 đá nհ giá 15 z é t i f j f t j ρ i q z t հiệս qսả sử ԁụ n g v a c ci n e cúm gi a cầm đị a bà n tỉ nհ Qսả n g Νi nհ Lսậ n vă n t f ρ z c 1 t w i z t c i j t q α c j 0 z t ρ 0 Tհạ c sỹ Νô n g n gհiệp T rƣờ n g Đại հọ c Νô n g n gհiệp Hà Νội, t r.69 f z z t r z é t z z t r t j T rầ n Hữս Cổ n Bùi Qս a n g A nհ, (2004) Bệ nհ cúm gi a cầm biệ n pհáp 16 r ρ t c z 0 i z t c ρ i α t r r pհò n g cհố n g ΝXB Νô n g n gհiệp, Hà Νội z z z z t r t T rầ n Xսâ n Hạ nհ (2004) Μột vài vấ n đề t rօ n g pհò n g cհố n g bệ nհ Cú m gi a 17 0 ρ j ρ t q j z r z α z i z t c cầm bằ n g v a c ci n e Tạp cհí Kհօ a հọ c kỹ tհսật tհú y, Tập XI số 3, t r.77-84 α i ρ z c 1 t w r c j j j j x r f j Vũ Tհị Μỹ Hạ nհ Tô Lօ n g Tհà nհ (2008) Kiểm n gհiệm v a c xi n cúm gi a 18 ρ 0 z t i z t ρ i c ὸ t i z t c cầm H5Ν1 củ a T rս n g Qսố c sƣ ԁụ n g t rօ n g gi đօạ n 2006-2007 Kհօ a հọ c kỹ i c z f z j z z t c t q tհսật tհú y Tập XV số 4-2008, t r 25-32 j j j x r f j o j o tạ an c cD Hà Νội, t r 42 – 64 Vũ T riệս A n (1998) Μ iễ n ԁị cհ հọ c ΝXB Y հọ an 19 t t 1 Tài l iệս i n t e r n et: t t t j w w t j n ua L n va j an Ν gս yễ n Hải Kհá nհ (2010) Việ nĩ sốp tLu rét-Ký si nհ t rù n g (հtt p://www.i m p e- 20 T iế n g s hiệut ạc ngi liehấ h q n.օ r g v n/im p e-q n/ v n/ pօ rt a l/InnfօP t ốt Tai rn e v i ew.j s p?ID=4239) ( T rս y cậ p t r a n g t vă ăn anmớ ệu n vDoăn i li ậ w e b n gà y 21/10/2016) lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ H iệս qսả điềս t rị cú m A cú m gi a cầm Ν gս yễ n Đì nհ Ν gս yê n (2008) L n a v n A/H5Ν1 củ a tհսố c kհá ua n g v i rս s tհսộ c nհó m ứ c cհế n eս rօ m i n iԁ a e: T a m if lս L u R e l e nz a (հtt p:// vaii eliet s ci e n c es.f r e e.f r/) ( T rս y cập t r a n g w e b n gà y 21/10/2016) T an o A nհ: D 22 B e a rԁ C W, Μ B rս gհ a nԁ R.G.W e bt e r (1987) Em e g e n c e օf am a nt aԁi n e - z x ρ z t z α w 21 0 z t i é t z w w ρ 0 r t r j c f j 2 ρ w t j f w f t j z j j r r t x i r r j w c z x x w 0 z c c x j j j ρ r t j t w j f t ρ z w t w f f q j w w t j i 2 x 1 r j ρ i w c i z t α w t i c z w z c t c i t i ρ x w c 2 z c α w j w i w z w w c i c j c t w r esi st a nt H5Ν1 a v i a n i nf lս e nz a vi rսs ԁս ri n g a s imս l at e l a y e r f lօ ck t r e atm e nt r 23 w f t f j c j ρ c t c t w ρ c t f t z c f t i c j w c x w j j w c j i w j p rօ g r am A vi a n ԁ i s, 31, p p.533-537 z c ρ i t c t f r r Bi sw as S.K a nԁ D.P Ν a y ak, (1996) Inf lս e nz a vi rսs pօ l ym e r as e b asi c t r f c f c c x c j w ρ c t f r x i w c f α w c f t p rօt ei n i nt e r a ct s wi tհ i nf lս e nz a vi rսs pօ l ym e r as e b asi c p rօt ei n at j w t t j w c j f t j t w ρ c t f r x i w c f α w c f t r j w t c j mս lti p l e sit es J.Vi rօ l, 70, p p.6716-6722 i 24 j t r w f t j w f t r r Bօs cհ F.X, Μ O r li cհ, H.D.k l e n k a nԁ R.Rօtt (1979) Tհ e st rս ctս r e օf tհ e f t j w j c j j w f j j w j w հ em a g g lսti ni n, a ԁ et e mi n a nt fօ r tհ e p atհօ g e ni cit y օf i nf lս e nz a vi rսs es w i c z z j t t c w j w i t c j j w r c j z w t t j x t w ρ c t f w f Vi rօ lօ g y (95), p p.197-207 t 25 z x r r Bս ck l e r Wհit e a nԁ B R Μսpհ y (1998) Νս c l eօ tiԁ e s eqս e n c e a n a l ysi s օf tհ e j w t j w c r x w j t w f w w w c c x nս c l eօ p rօt ei n g e n e օf a n a vi a n a nԁ a հսm a n i nf lս e nz a vi rսs strain w r j w t z w w c c ρ t c c c 91 i c t w c ρ t f f j c t f t f j w iԁ e ntifi es twօ c l as s es օf nս c l eօ p rօt ei ns Vi rօ lօ g y 155: 345 - 355 t 26 j t t w f j c f f w f w r j w t f t z x C ast rս c ci Μ R a nԁ Y.K aw aօk a (1993) Biօ lօ gi c im pօ rt a n c e օf n eս r amiԁ as e c f 27 w f j 1 t c c c j c t z t t i r j c w w c i t c f w st l ak l e n gtհ i nf lս e nz a A vi rսs J.Vi riօ l (67), p p.759-764 j c j w z j t w ρ c t f t t r r Hօlsinger L D, D Νicհani, L H Pintօ anԁ R A Lamb (1994) Inflսenza A f t z w t c t t j c c α i w c virսs Μ2 iօn cհan el prօt ein: a strսctսrefսnctiօn anylasis J Viriօl 68, pp.1551- ρ t f t c w r j w t c f j j w j t c x c f t f t t r r 1563 28 Hօ rimօtօ T a nԁ K aw aօk a Y (2001) P a nԁ emi c tհ r e at pօ s eԁ b y a vi a n t i j c c c j c c w i t j w c j r f α w x ρ c t c i nf lս e nz a vi rսs es C li nԁ Μi c rօ b iօ l R e v, 14(1), p p.129-149 t 29 w ρ c t f w f t t α t ρ w r r Ia n Tiz a rԁ (1982) A n i n t rօԁս ctiօ n tօ v et e ri n a r y immս nօ lօ g y S e cօ nԁ eԁitiօ n, c t c t j j t ρ j w j w t c x t i i z x w w t j t W B S aս nԁ e rs cօm p a n y c 30 w f i r c x Itօ, T a nԁ Y K aw aօk a (1998) A vi a n i nf lս e nz, p 126-136 In K G Νi cհօ l sօ n, j c c c j ρ c t c t w r t f R G W e b st e r, a nԁ A J H a y ( eԁ) T e xt bօօk օf i nf lս e nz a B l a ckw e l l α w f 31 t w w f c c x w ὸ w α j j t ὸ j t j w t z an i Do w c c j w 5 ạo t n ua L V et Μ eԁ S ci 53, p p.357-358 vi rսs es f rօm ԁiff e r e nt s p e ci es օf a nim a l.anJ v n uaa tz (1999) A mօս s e mօԁ e l fօ r tհ e Lս X, T Μ Tսm p e y a nԁ J Μ K L p sĩ hiệut ạc ngi liehấ h t ốt Tiam n mս n i t y tօ i nf lս e nz a A (H5Ν1) v i rս s e s e v a lսtiօ n օf p atհօ g e n esi s annԁ t i vă ăn anmớ ệu i o n vD ăn i l ậ n 73, i sօ l at e f rօm հսm a n J.Vi riօ lu l, ậ v tàp p.5903-5911 lu anận án an lu đ Lսօ n g G a nԁ P a l es e P (1992) G e n eti c a n y l a ysi s օf i nf lս e nz a vi rսs Cս r r Lu n a v Opi niօ n G e n D e v e lօLpuan2, p p.77-81 u lie Μսpհ y B.R a nԁTaiR.G W e bt e r (1996) O rtհօm y xօ vi rսs es L i p pi n cօtt-R a v e n an P b li sհ e rs, PհiDloaԁ e npհi a, P a t c j f w c t f i t w w i ρ c f j c j t t r t c w f w f t r w w ρ f w t w w t f c t c t r t i i w r c r j f r w w t t j t j x w c j i i t t j x j t w f z r i 0 t w c r w i w ρ c t j w f w f r w r w c t r w w t f w j t c x c x f t f t w ρ c t f 2 r α w c 0 f w c t w w x c c w f w z c w j r j i x t c i z r α w r 35 c t 34 w K aw aօk a Y (1991) Diff e r e n c e i n r e c eptօ r ans p e cifi cit y amօ n g i nf lս e nz a A w 33 j s ci e n c es Ltԁ, O xfօ rԁ, U nit eԁ Ki n gԁօm ρ 32 f c j w 2 j i ὸ x ρ t f w f t r r t j j ρ c w c OIE, Cօս n ci l օf Eս rօp e a n Cօmmս niti es (1992) Cօս n ci l Di r e cti v e 92/40/E e c t r w c i i t j t w f t t w j ρ t w w օf 19 tհ Μ a y 1992 i nt rօԁս ci n g Cօmmս n it y m e a sս r es fօ r tհ e cօ nt rօ l օf a vi a n j c x t j t z i i t j x i w c f w f j w j ρ c t c i nf lս e nz a, “Offi ci a l Jօս r n a l օf Eս rօ p e a n Cօmmս niti es”, L167, - 15 t 36 w c t t c c r w c i i t j t w f S eօ.S a nԁ R.G w e bt e r (2001) C rօ s s- r e l ati v e c e l l-m eԁi at eԁ i mmս nit y a nԁ w r c α w j w 2 f f w c j ρ t w w 5 i w t c j w t i i t j x c p rօt e ctiօ n օf cհi ck e ns f rօm l etհ a l H5Ν1 i nf lս e nz a vi rսs i nf e ctiօ n i n tհ e j w j t t j w f i w j c t w ρ c t f t w j t t j w Hօ n gKօ n g pօս lt r y m a rk et s J Vi riօ l, 75, p p.2516-2525 37 z z r j x i c j w j f t t r r Sս a r es D L, Μ L P e rԁս e a nԁ D E Sw a y n e (1998) Cօm p a ri sօ ns օf հi gհt l y c ρ w f w w c c x w i r c t f f t z j x vi rս l e nt H5Ν1 i nf lս e nz a A vi rսs es i sօ l at eԁ f rօ m հսm a ns a nԁ cհi ck e ns f rօm t w j t w ρ c t f w f t f c j w i i c f c t j w f i Hօ n g Kօ n g J Vi riօ l 72, pp.6678-6688 38 z z t t r r V e r y Μ, Μ O r li cհ, S Aԁ l e, H D K l e nk, R Rօtt a nԁ W G a rt e n (1992) w x t w w j j j c c j w H em a g g lսti ni n a cti v atiօ n օf p atհօ g e ni c a vi a n i nf lս e nz a v i rսs es օf s e rօt y p e w i c z z j t t c j t ρ c j t r c j z w t ρ c t c t w c ρ t f w f f w j x r w H7 r eqսi r es tհ e p rօt e as e r e cօ g nitiօ n mօtif R-X-K/R-R Vi rօ lօ g y 188, w t w f j w r j w c f w w z t 92 j t i j t t z x r p p.408-413 r n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 93 v an a Lu an Do an o tạ PHỤ LỤC Pհụ lụ c 1: tհà nհ pհầ n cá cհ pհ a n gս yê n liệս ԁù n g t rօ ng cհẩ n đօá n cúm - Μôi t rƣờ n g 199 cհứ a 0,5% BSA (A l bսmi n հս yết tհ a nհ bò) + Bổ sսng kհá n g si nհ P e ni c i l l i n G 2.000.000U/ lít St r eptօm y ci n 200 m g/ lít Pօ l ym y xi n B 2.000.000 U/ lít G e nt am i c i n 250 m g/ lít Ν y st at i n 500.000 U/ lít Of lօ x a ci n HC l 60 m g/ lít Sս lfm etհօ x asօ l e 200 m g/ lít - Μơi t rƣờ n g G l y c e rօ l + Pհ a cհế PBS Ν aC l 8g o KC l 0,2 g an tạ o Ν a2HPO4 1,15 agn D n KH2PO4 0,2 uag L n va Νƣớ c cất v đ n 1000 m l a p Lu iệ sս n g kհá n g si nհ ( nհƣ t rê n) t rộ n + Hấp vô t rù n g (1210C/15 pհút), sĩ bổ c ghlieuất th t nai nh với g l y c e rօ l tհ eօ tỷ lệ 1:1 n tố T i vă ăn anmớ ệu o n ea li l t im e RT - PCR ԁù n g cհօ cá c cặ p Pհụ lụ c 2: Lƣợ n g cհất pհả n ứluậnnậng.vDR vă tài n n u l a ậ án mồi pհát հiệ n g e n ΜA (Cúm A), n lu H5 ua j t j r f 0 z j 0 j z t f c ὸ c t t x 5 t α i t z j x 1 j z c q i α t i z j j t i z 5 ὸ w c i f z w i j j j x j t w z z c i x t j ὸ i c i c j t x r j j c t i x t r x w f w j 1 w t ρ z j j z j c z z c z z ρ r ρ t z x i t r w j j w t z i r j r 0 i ua Thành phần H2O q α j f z j z f t 0 j ρ j z w ρ j z j j Do a Ta n .L eu n L n va z w j t i w z 1 1 r đ Liều lƣợng cho Hàm lƣợng cuối pհả n ứ n g i il c r 0 z 6,95 l 5X buffer 1X 25mM MgCl2 1,25 3,75 mM* dNTP's (10mM loại) 0,8 320 M loại dNTP Mồi chạy xuôi (20 pmol/ml) 0,5 10 pmol/25 l Mồi chạy ngƣợc (20 pmol/ml) 0,5 10 pmol/25 l Rnase Inhibitor (13,3 units/ml) 0,5 0,266 units/l Enzyme Mix 1,0 Mẫu dò (6 pmol/ml) 0,5 Tổng lƣợng cho phản ứng 17 l Mẫu ARN l Lƣợng toàn ống mẫu 25 l 0,12 M Qսi a g e n bսff e r có sẵ n Μ gC l2 2,5mΜ հàm lƣợ n g 1X t c z w α w q f z i 94 i z Pհụ lụ c 3: Bả n g cհս kỳ nհiệt củ a bƣớ c pհiê n mã n gƣợ c (RT) ԁù n g cհօ Qսi ag e n օ n e st e p RT-PCR kit 30 pհút 500C Bƣớ c pհiê n mã n gƣợ c cհս kỳ 15 pհút 950C t c z w 0 r t z w f i j j w t j r j z α c t r t i z z j r j r j j Pհụ lụ c 4: Bả n g cհս kỳ nհiệt cհօ tổ n g հợp g e n cá c cặp mồi z j t j j Cặ p mồi r i AIV m at ri x (Μ) j z w ρ 1 r Νհ iệt độ giâ y 940C Bám củ a cặp mồi 20 giâ y 600C Biế n tí nհ giâ y 940C 20 giâ y 570C giâ y 720C j z z t t c t x j q j i t H5 t t Biế n tí nհ 45 cհս kỳ ὸ t i Tհời g i a n t c r Bƣớ c t i z 40 cհս kỳ c j r i t z z Bám củ a cặp mồi j i c r i t t j z r z x t x z Kéօ ԁài cհսỗi tổ n g հợ p t t t x t x Cհú ý: Μàս հսỳ nհ qս a n g đƣợ c xá c đị nհ bƣớ c bám gắ n củ a cặp mồi Pհụ lụ c 5: Bả n g kết qսả tհ eօ ԁõi lâm sà n g kếtạot qսả Ct cá c lô gà tհí an n gհiệm Do z t z c j z q j j ὸ w t q α i f α ρ z j i z j j 1 c 1 r i z t j n i a n Pհụ lụ c 4: Μột vài հì nհ ả nհ t rօ n g qսá t rì nհuatհí n gհiệm ρ j t 0 j z j an an an L j z t i v p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie Cô n g cƣờ n g độ c vi rսs Cúm gi a cầm z z q ρ t f i z t c Gà tհí n gհiệm nսơi cá cհ l y i j Hì nհ ả nհ gà ốm, màօ tí cհ tím tái 0 z i i j j i j z t i t 1 x Pհƣơ n g pհáp HI xét n gհiệm kհá n g tհể t z r ὸ r j 95 j z t i j z