Nghiên cứu nhân sinh khối tảo chaetoceros muelleri thu thập tại nam định, việt nam (khóa luận tốt nghiệp)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -  - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU NHÂN SINH KHỐI TẢO Chaetoceros muelleri THU THẬP TẠI NAM ĐỊNH, VIỆT NAM Họ tên : Phạm Thị Thu Hiền Mã sinh viên : 614068 Lớp : CNSHB – K61 Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Giáo viên hƣớng dẫn : PGS.TS Nguyễn Đức Bách HÀ NỘI – 2021 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan khố luận tơi thực dựa nghiên cứu, tìm hiểu kiến thức khoa học thầy PGS.TS Nguyễn Đức Bách - Bộ môn Sinh học Phân tử Công nghệ sinh học Ứng dụng - khoa Công nghệ sinh học Học viện Nông Nghiệp Việt Nam Tất số liệu, hình ảnh kết tơi trình bày khóa luận hồn tồn trung thực, khơng chép tài liệu hay cơng trình nghiên cứu người khác mà không ghi rõ nguồn tham khảo Những nội dung khóa luận có tham khảo sử dụng tài liệu, thông tin đăng tải tác phẩm, tạp chí trang web liệt kê danh mục tài liệu tham khảo khóa luận Tơi xin chịu trách nhiệm hồn tồn lời cam đoan trước Hội đồng Học viện Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên Phạm Thị Thu Hiền i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian làm khóa luận Bộ mơn Sinh học phân tử Công nghệ sinh học ứng dụng - Trung tâm nghiên cứu phát triển công nghệ sinh học vi tảo, cố gắng nỗ lực thân, bên cạnh tơi cịn nhận quan tâm, giúp đỡ, hướng dẫn tận tình thầy, cô giáo với động viên gia đình để tơi an tâm hồn thành khóa luận Lời đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy giáo PGS TS Nguyễn Đức Bách, người trực tiếp dành nhiều thời gian tâm huyết tận tình, bảo giúp đỡ suốt thời gian mà tơi thực đề tài khố luận tốt nghiệp Với lịng biết ơn sâu sắc thân, tơi xin gửi tới Thầy Cô thuộc Bộ môn Sinh học phân tử Công nghệ sinh học ứng dụng, Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam với nguồn tri thức tâm huyết để truyền đạt vốn kiến thức quý báu cho suốt thời gian học tập trường Tôi xin chân thành cảm ơn thầy giáo, cô giáo giảng viên trường Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình dạy bảo em suốt năm học vừa qua Cuối xin gửi tới gia đình, bố mẹ, bạn bè lời cảm ơn tình cảm chân thành động viên, khích lệ, giúp đỡ nhiệt tình mà người dành cho suốt thời gian qua Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên Phạm Thị Thu Hiền ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC BIỂU ĐỒ vii PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài .2 1.3 Yêu cầu đề tài PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Giới thiệu chung lớp tảo silic 2.1.1 Đặc điểm sinh học tảo silic .3 2.1.2 Tầm quan trọng tảo silic 2.1.3 Một số hình thức ni tảo silic 2.2 Giới thiệu vi tảo Chaetoceros muelleri 2.2.1 Vị trí phân loại Chaetoceros muelleri 10 2.2.2 Đặc điểm sinh học đặc điểm hình thái Chaetoceros muelleri 11 2.2.4 Hình thức sinh sản Chaetoceros muelleri .11 2.2.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển Chaetoceros muelleri 12 2.2.6 Ứng dụng tảo Chaetoceros muelleri .14 PHẦN III: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP .16 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu .16 3.1.1 Vật liệu nghiên cứu .16 3.1.2 Nguồn mẫu ban đầu .16 3.1.3 Môi trường nuôi cấy 17 3.2 Phương pháp 18 iii C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.2.1 Phương pháp nuôi giữ nhân sinh khối Chaetoceros muelleri 18 3.2.2 Lập biểu đồ tương quan giá trị quang mật độ tế bào 19 3.2.3 Khảo sát sinh trưởng Chaetoceros muelleri môi trường khác 21 3.2.4 Khảo sát khả sinh trưởng Chaetoceros muelleri mật độ tế bào ban đầu khác .21 3.2.5 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ muối lên sinh trưởng Chaetoceros muelleri 21 3.2.6 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri 22 3.2.7 Khảo sát ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri 22 3.2.8 Khảo sát ảnh hưởng độ pH đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri 22 3.3 Xử lý kết .22 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .24 4.1 Nuôi giữ nhân sinh khối Chaetoceros muelleri .24 4.2 Mối quan hệ mật độ tảo Chaetoceros muelleri độ hấp phụ quang học .26 4.3 Môi trường tối ưu cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri 27 4.4 Mật độ tế bào ban đầu tối ưu cho phát triển Chaetoceros muelleri 29 4.5 Nồng độ muối tối ưu đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri 31 4.6 Tác động nhiệt độ đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri 34 4.7 Cường độ chiếu sáng tối ưu cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri 36 4.8 Độ pH tối ưu cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri 38 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41 PHẦN 5: TÀI LIỆU THAM KHẢO .42 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn iv C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Thành phần môi trường F/2 17 Bảng 3.2 Thành phần môi trường Erdscheiber 17 Bảng 3.3 Thành phần môi trường Walne 18 Bảng 4.1 Tương quan mật độ tế bào độ hấp phụ quang học (OD) .26 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn v C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Hình thái đối xứng tâm tảo silic Hình 2.2 Hình thái đối xứng trục tảo silic Hình 2.3 Hình thái Chaetoceros muelleri 11 Hình 3.1 Chủng tảo Chaetoceros muelleri lưu giữ 16 Hình 3.2 Cấu tạo buồng đếm tế bào 20 Hình 4.1 Mẫu tảo Chaetoceros muelleri .23 Hình 4.2 Ni giữ nhân sinh khối Chaetoceros muelleri 24 Hình 4.3 Mơi trường dinh dưỡng tối ưu Chaetoceros muelleri .29 Hình 4.4 Mật độ ban đầu ảnh hưởng đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri 31 Hình 4.5 Nồng độ muối tối ưu cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri 33 Hình 4.6 Nhiệt độ tối ưu cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri 35 Hình 4.7 Cường độ chiếu sáng thích hợp cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri .37 Hình 4.8 Độ pH thích hợp cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri 39 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn vi C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 4.1 Phương trình tuyến tính mật độ quang độ hấp phụ quang học (OD) 26 Biểu đồ 4.2 Ảnh hưởng ba môi trường F/2, Erdscheiber Walne lên sinh trưởng Chaetoceros muelleri 27 Biểu đồ 4.3 Tốc độ sinh trưởng riêng Chaetoceros muelleri môi trường khác 28 Biểu đồ 4.4 Ảnh hưởng mật độ tế bào ban đầu đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri 30 Biểu đồ 4.5: Tốc độ sinh trưởng riêng Chaetoceros muelleri thay đổi mật độ tế bào .30 Biểu đồ 4.6 Ảnh hưởng nồng độ muối lên sinh trưởng Chaetoceros muelleri 32 Biểu đồ 4.7 Tốc độ sinh trưởng riêng Chaetoceros muelleri điều kiện muối khác 32 Biểu đồ 4.8 Ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng Chaetoceros muelleri 34 Biểu đồ 4.9 Tốc độ sinh trưởng riêng Chaetoceros muelleri điều kiện nhiệt độ khác .35 Biểu đồ 4.10 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng lên sinh trưởng Chaetoceros muelleri 36 Biểu đồ 4.11 Tốc độ sinh trưởng riêng Chaetoceros muelleri điều kiện chiếu sáng khác 37 Biểu đồ 4.12 Ảnh hưởng độ pH lên sinh trưởng Chaetoceros muelleri 38 Biểu đồ 4.13 Tốc độ sinh trưởng riêng Chaetoceros muelleri độ pH khác .39 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn vii C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong ngành nuôi trồng thuỷ sản, nguồn giống đóng vai trị quan trọng Hiện nay, nguồn giống Việt Nam chưa thể đáp ứng yêu cầu mặt chất lượng đặt mà nguyên nhân nguồn thức ăn cho giống chưa đủ khả để cung ứng cho trại giống Trong giai đoạn ấu trùng giống thuỷ sản, trại nuôi giống sử dụng nguồn thức ăn vi tảo Xét mặt dinh dưỡng, vi tảo nguồn thức ăn giàu dinh dưỡng với hàm lượng protein, acid béo khơng bão hồ (PUFA) acid amin thiết yếu, giàu vitamin loại khoáng chất Nhiều loại vi tảo khoa học công nhận nguồn nguyên liệu thức ăn thuỷ sản cao cấp, sử dụng làm thức ăn trực tiếp cho cá sản xuất sinh vật phù du dị dưỡng, làm thức ăn nuôi ấu trùng tôm, cá nhuyễn thể, giáp xác Hiện nay, có nhiều loại vi tảo đưa vào sử dụng làm thức ăn cho ngành nuôi trồng thuỷ sản Chaetoceros muelleri số giống tảo có tiềm ngành nuôi trồng thuỷ sản nước ta có yếu tố sinh trưởng phù hợp điều kiện khí hậu Việt Nam Dù có tiềm ngành ni trồng thuỷ sản Chaetoceros muelleri chưa thể đáp ứng khả làm nguồn cung thức ăn cho thuỷ sản suất sinh khối chưa cao Đề tài “Nghiên cứu nhân sinh khối tảo Chaetoceros muelleri thu thập Nam Định, Việt Nam” thực nhằm tìm điều kiện tối ưu cho sinh trưởng Chaetoceros muelleri để đưa vào sản xuất với quy mô lớn, đáp ứng nhu cầu nguồn thức ăn chăn nuôi thuỷ sản Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 1.2 Mục đích đề tài Xác định điều kiện sinh trưởng tối ưu để nhân sinh khối Chaetoceros muelleri bao gồm yếu tố môi trường dinh dưỡng, mật độ ban đầu, nồng độ muối, nhiệt độ, cường độ chiếu sáng độ pH 1.3 Yêu cầu đề tài Khảo sát yếu tố, điều kiện ảnh hưởng đến khả sinh trưởng tối ưu Chaetoceros muelleri để nhân sinh khối Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Số liệu từ biểu đồ 4.5 cho thấy mật độ tế bào ban đầu ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng tế bào Mật độ lớn nhu cầu dinh dưỡng nhiều thời gian hệ tốc độ sinh trưởng Con đường chuyển hóa thứ cấp tế bào tảo tạo hợp chất thứ cấp kháng sinh, protein Các chất môi trường gây ức chế sinh trưởng tế bào Hình 4.4 Mật độ ban đầu ảnh hƣởng đến sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Chú thích (1) Mật độ x 106, (2) Mật độ x 106, (3) Mật độ x 106 Nhận xét Mẫu nuôi cấy sau 10 ngày chụp thời điểm Bình có màu sắc đậm mật độ triệu tb/ml tốc độ sinh trưởng Chaetoceros muelleri tốt so với mật độ tế bào lại Mật độ cực đại tương ứng với mật độ tế bào ban đầu (6,49 ± 0,117), (6,73 ± 0,018) (7,47 ± 0,015) 4.5 Nồng độ muối tối ƣu đến sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Nồng độ muối khác tác động đến trao đổi chất tế bào tương ứng khác Với nồng độ muối cao làm ức chế khả trao đổi chất Chaetoceros muelleri Ngoài ra, nồng độ muối gây ảnh hưởng đến áp suất thẩm thấu tế bào Tìm nồng độ muối thích hợp để ni Chaetoceros muelleri điều cần thiết Thí nghiệm bố trí nhằm tìm nồng độ muối thích hợp Kết thí nghiệm trình bày biểu đồ 4.6 4.7 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 31 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Biểu đồ 4.6 Ảnh hƣởng nồng độ muối lên sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Từ biểu đồ 4.6 cho thấy ngày Chaetoceros muelleri cần có thời gian thích nghi pha lag, mật độ tế bào gần khơng có thay đổi Từ ngày thứ mật độ tế bào tăng nhanh dần Cả mức nồng độ muối đạt cực đại vào ngày thứ giảm nhanh từ ngày thứ trở Tốc độ cực đại ngày thứ nồng độ 25g/l (7,47 ± ,016) Nồng độ 20g/l (7,15 ± 0,011) nồng độ 30g/l (7,26 ± 0,008) Biểu đồ 4.7 Tốc độ sinh trƣởng riêng Chaetoceros muelleri dƣới điều kiện muối khác Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 32 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Từ biểu đồ 4.7 cho thấy, tốc độ sinh trưởng hệ tăng nhanh từ ngày thứ tất nồng độ muối khác Tại nồng độ muối 30g/l 20 g/l sau ngày thứ mật độ giảm nhanh so với nồng độ 25g/l Như với nồng độ muối 25g/l nồng độ tốt ba nồng độ thí nghiệm Hình 4.5 Nồng độ muối tối ƣu cho sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Chú thích (1) Nồng độ 20g/l, (2) Nồng độ 25g/l, (3) Nồng độ 30g/l Nhận xét Mẫu nuôi cấy sau 10 ngày chụp thời điểm Bình thứ có màu sắc đậm đặc Chaetoceros muelleri có tốc độ sinh trưởng tốt nồng độ muối 25g/l Mật độ tế bào đạt giá trị cực đại tương ứng với mức nồng độ muối 20g/l (7,15 ± 0,011), 25g/l (7,47 ± ,016) 30g/l (7,26 ± 0,008) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 33 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 4.6 Tác động nhiệt độ đến sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Nhiệt độ có tác động ảnh hưởng đến q trình hoạt hố enzyme tế bào Tìm nhiệt độ thích hợp để nuôi Chaetoceros muelleri điều vô cần thiết Thí nghiệm bố trí nhằm tìm nồng độ muối thích hợp Kết thí nghiệm trình bày biểu đồ 4.8 4.9 Biểu đồ 4.8 Ảnh hƣởng nhiệt độ lên sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Số liệu từ biểu đồ 4.8 cho thấy pha lag ngày đầu tiên, mật độ tế bào gần khơng có thay đổi đáng kể Mật độ tế bào bắt đầu tăng nhanh từ ngày thứ đạt cực đại vào ngày thứ Ở nhiệt độ 250C vào ngày thứ 8, mật độ tế bào (7,56 ± 0,008) Còn 200C mật độ tế bào (7,17 ± 0,013) 300C (6,46 ± 0,017) Từ ngày thứ mật độ tế bào vào pha suy vong bắt đầu giảm mạnh Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 34 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Biểu đồ 4.9 Tốc độ sinh trƣởng riêng Chaetoceros muelleri dƣới điều kiện nhiệt độ khác Từ biểu đồ 4.9 cho thấy, nhiệt độ khác dẫn đến sinh trưởng Chaetoceros muelleri có khác biệt lớn Nhiệt độ cao thấp khiến tốc độ sinh trưởng tế bào giảm mạnh Có thể thấy Chaetoceros muelleri phát triển tốt 250C Hình 4.6 Nhiệt độ tối ƣu cho sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Chú thích (1) 200C, (2) 250C, (3) 300C Nhận xét Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 35 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Mẫu nuôi cấy sau 10 ngày chụp thời điểm Bình có màu sắc đậm đặc so với bình cịn lại mật độ tế bào 250C dày đặc Mật độ tế bào đạt cực đại 20℃ (7,17 ± 0,013), 25℃ (7,56 ± 0,008) cuối 30℃ (6,46 ± 0,017) 4.7 Cƣờng độ chiếu sáng tối ƣu cho sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Cường độ chiếu sáng tác động trực tiếp đến ức chế quang khả quang hợp tế bào Chaetoceros muelleri Chính mà thí nghiệm thực để tìm cường độ chiếu sáng thích hợp cho phát triển Chaetoceros muelleri Kết thí nghiệm trình bày biểu đồ 4.10 4.11 Biểu đồ 4.10 Ảnh hƣởng cƣờng độ chiếu sáng lên sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Từ biểu đồ 4.10, cho thấy ngày mật độ tế bào gần thay đổi cần có thích nghi pha lag Q trình thích nghi xảy thời gian ngắn Từ ngày thứ mật độ tế bào tăng nhanh đạt cực đại vào ngày thứ Với cường độ chiếu sáng 2500 lux đạt cực đại vào ngày thứ (7,49 ± 0,004) cường độ chiếu sáng 2000 lux (7,143 ± 0,009) cuối cường độ chiếu sáng 3000 lux (6,97 ± 0,017) Từ ngày thứ mật độ tế bào bắt đầu giảm nhanh Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 36 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Biểu đồ 4.11 Tốc độ sinh trƣởng riêng Chaetoceros muelleri dƣới điều kiện chiếu sáng khác Từ biểu đồ 4.11, thấy cường độ chiếu sáng khác dẫn đến phát triển tảo có khác Ở cường độ chiếu sáng 2500 lux, Chaetoceros muelleri phát triển tốt so với cường độ chiếu sáng 2000 lux 3000 lux Hình 4.7 Cƣờng độ chiếu sáng thích hợp cho sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Chú thích (1) Cường độ 2000 lux, (2) Cường độ 2500 lux, (3) Cường độ 3000 lux Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 37 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Nhận xét Mẫu nuôi cấy sau 10 ngày chụp thời điểm Bình số cho màu sắc đậm hai bình cịn lại mật độ tế bào bình dày đặc Mật độ tế bào đạt giá trị cực đại 2000 lux (7,143 ± 0,009), 2500 lux (7,49 ± 0,004) 3000 lux (6,97 ± 0,017) 4.8 Độ pH tối ƣu cho sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Nồng độ pH cần thiết cho phát triển Chaetoceros muelleri có tác động khơng nhỏ đến mơi trường sống chúng Chính vậy, thí nghiệm thực để tìm nồng độ pH thích hợp cho mơi trường sinh trưởng Chaetoceros muelleri Kết thí nghiệm trình bày biểu đồ 4.12 4.13 Biểu đồ 4.12 Ảnh hƣởng độ pH lên sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Từ biểu đồ 4.12 cho thấy ngày mật độ tế bào gần khơng có thay đổi cần có q trình thích nghi pha lag Q trình thích nghi xảy thời gian ngắn Từ ngày thứ mật độ tế bào tăng nhanh đạt cực đại vào ngày thứ Với độ pH 8,5 đạt cực đại vào ngày thứ (7,39 ± 0,006) Độ pH 8,0 (6,91 ± 0,016) cuối độ pH 9,0 (6,74 ± 0,008) Từ ngày thứ mật độ tế bào bắt đầu giảm nhanh bắt đầu bước vào pha suy vong Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 38 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Biểu đồ 4.13 Tốc độ sinh trƣởng riêng Chaetoceros muelleri độ pH khác Từ biểu đồ 4.13, thấy ảnh hưởng nồng độ pH đến phát triển Chaetoceros muelleri không nhỏ Ở nồng độ pH khác có tốc độ sinh trưởng khác Ở nồng độ pH 8.5, sinh trưởng Chaetoceros muelleri tốt Hình 4.8 Độ pH thích hợp cho sinh trƣởng Chaetoceros muelleri Chú thích (1) nồng độ pH 8,0, (2) nồng độ pH 8,5, (3) nồng độ pH 9,0 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 39 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Nhận xét Mẫu nuôi cấy sau 10 ngày chụp thời điểm Bình có màu sắc đậm so với bình cịn lại tốc độ sinh trưởng Chaetoceros muelleri nhanh khiến mật độ tế bào dày đặc Mật độ tế bào đạt giá trị cưc đại pH 8,0 (6,91 ± 0,016), pH 8,5 (7,39 ± 0,006) cuối pH 9,0 (6,74 ± 0,008) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 40 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Chaetoceros muelleri phát triển tối ưu với môi trường dinh dưỡng Erdscheiber môi trường chứa nhiều thành phần khống chất vi lượng thích hợp cho phát triển Chaetoceros muelleri Chaetoceros muelleri phát triển tối ưu với mật độ tế bào ban đầu triệu tế bào/l Mật độ tế bào cực đại đạt vào ngày thứ (7,47 ± 0,015) Mật độ dày khiến tốc độ sinh trưởng riêng khả quang hợp Chaetoceros muelleri giảm Chaetoceros muelleri phát triển tối ưu mơi trường có nồng độ muối 25g/l Mật độ tế bào cực đại đạt (7,47 ± 0,016) Môi trường dinh dưỡng mặn khiến tốc độ phát triển Chaetoceros muelleri giảm Chaetoceros muelleri sinh trưởng tối ưu 25℃ Vượt ngưỡng nhiệt độ tối ưu khả hoạt hoá Chaetoceros muelleri giảm khiến tốc độ sinh trưởng giảm Chaetoceros muelleri phát triển tối ưu điều kiện cường độ chiếu sáng 2500 lux Cường độ chiếu sáng mạnh yếu khiến Chaetoceros muelleri gặp stress làm giảm tốc độ sinh trưởng Kiến nghị Sử dụng điều kiện môi trường dinh dưỡng, mật độ tế bào ban đầu, nồng độ muối, nhiệt độ, cường độ chiếu sáng độ pH môi trường xác định thí nghiệm nghiên cứu để tăng suất Chaetoceros muelleri Sản xuất thử nghiệm với quy mô công nghiệp để làm nguồn cung cấp thức ăn chủ lực cho ngành nuôi trồng thuỷ sản Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 41 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PHẦN 5: TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đặng Thị Sy (2005), Tảo học, Nhà xuất Đại học Quốc Gia Nguyễn Lân Dũng (2010), Vi sinh vật học, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam Phạm Thị Hồng, Võ Hồng Trung, Lê Thị Trung (2013), Ảnh hưởng Cacbon cường độ ánh sáng khác lên sinh trưởng vi tảo Chaetocerossublitis var abnormis proschkina-lavrenko, Tạp chí Khoa học Đại học sư phạm thành phố Hồ Chí Minh, 43 trang Tạ Thị Kim Oanh, Nguyễn Văn Lập (2004), Các phức hệ diatom mơi trường trầm tích Pleistocene muộn- Holocen Bến Tre- Vĩnh Long, đồng sông Cửu Long, Tạp chí Phát triển Khoa học Cơng nghệ, 7/10, 4650 Trần Vinh Phương (2017), Tạp chí Khoa học Đại học Huế; Nông ngiệp Phát triển nông thôn, tập 126, 119-129 Trương Ngọc An (1993), Phân loại tảo silic phù du biển Việt Nam, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Tài liệu tiếng Anh Armbrust, E V (2009) The life of diatoms in the world’s oceans Nature, 459(7244), 185–192 Armbrust, E V., Chisholm, S W (1990) Role of light and the cell cycle on the induction of spermatogenesis in a centric diatom Journal of Phycology, 26(3), 470–478 Barros, M U G., Coelho, A A da C., Da Silva, J W A., Bezerra, J H C., Moreira, R T., Farias, W R L (2014) Lipid content of marine microalgae Chaetoceros muelleri Lemmermann (Bacillariophyceae) grown at different salinities Biotemas, 27(2), 10 B-Béres, V., Lukács, Á., Tưrưk, P., Kókai, Z., Novák, Z., T-Krasznai, E., Bácsi, I (2016) Combined eco-morphological functional groups are reliable Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 42 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an indicators of colonisation processes of benthic diatom assemblages in a lowland stream Ecological Indicators, 64, 31–38 11 Benemann, J R (1992) Microalgae aquaculture feeds Journal of Applied Phycology, 4(3), 233–245 12 Benoiston, A.-S., Ibarbalz, F M., Bittner, L., Guidi, L., Jahn, O., Dutkiewicz, S., & Bowler, C (2017) The evolution of diatoms and their biogeochemical functions Philosophical transactions of the royal society B: Biological sciences, 372(1728), 20160397 13 Bharathiraja, B., Chakravarthy, M., Ranjith Kumar, R., Yogendran, D., Yuvaraj, D., Jayamuthunagai, J., Palani, S (2015) Aquatic biomass (algae) as a future feed stock for bio-refineries: A review on cultivation, processing and products Renewable and Sustainable energy reviews, 47, 634–653 14 Christensen, T (1991) The Diatoms Biology and Morphology of the Genera Phycologia, 30(2), 233–235 15 De Jesús-Campos, D., López-Elías, J A., Medina-Juarez, L Á., CarvalloRuiz, G., Fimbres-Olivarria, D., & Hayano-Kanashiro, C (2020) Chemical composition, fatty acid profile and molecular changes derived from nitrogen stress in the diatom Chaetoceros muelleri Aquaculture reports, 16, 100281 16 Dineshbabu, G., Goswami, G., Kumar, R., Sinha, A., & Das, D (2019) Microalgae–nutritious, sustainable aqua- and animal feed source Journal of Functional foods, 62, 103545 17 Göksan, T., Durmaz, Y., & Gökpınar, Ş (2003) Effects of light path lengths and initial culture density on the cultivation of Chaetoceros muelleri (Lemmermann, 1898) Aquaculture, 217(1-4), 431–436 18 Gross, M (2012) The mysteries of the diatoms Current Biology, 22(15), R581–R585 19 Ihnken, S., Roberts, S., & Beardall, J (2011) Differential responses of growth and photosynthesis in the marine diatom Chaetoceros muelleri to CO₂ and light availability Phycologia, 50(2), 182–193 20 Kale, A., & Karthick, B (2015) The diatoms Resonance, 20(10), 919–930 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 43 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 21 Kooistra, W H C F., Gersonde, R., Medlin., L K., & Mann, D G (2007) The Origin and Evolution of the Diatoms: Their adaptation to a planktonic existence Evolution of primary producers in the sea, 207–249 22 Lavaud, J., Strzepek, R F., & Kroth, P G (2007) Photoprotection capacity differs among diatoms: Possible consequences on the spatial distribution of diatoms related to fluctuations in the underwater light climate Limnology and Oceanography, 52(3), 1188–1194 23 Lin, C Y., & Wu, S H (2017) Comparison of lipid and biodiesel properties of Chaetoceros muelleri cultured in deep sea water and surface sea water Journal of Renewable and Sustainable Energy, 9(1), 013104 24 Lin, Q., Zhuo, W.-H., Wang, X.-W., Chen, C.-P., Gao, Y.-H., & Liang, J.-R (2018) Effects of fundamental nutrient stresses on the lipid accumulation profiles in two diatom species Thalassiosira weissflogii and Chaetoceros muelleri Bioprocess and Biosystems engineering, 41(8), 1213–1224 25 López-Elías, J A., Voltolina, D., Enríquez-Oca, F., & Gallegos-Simental, G (2005) Indoor and outdoor mass production of the diatom Chaetoceros muelleri in a mexican commercial hatchery Aquacultural engineering, 33(3), 181–191 26 Malviya, S., Scalco, E., Audic, S., Vincent, F., Veluchamy, A., Poulain, J., Bowler, C (2016) Insights into global diatom distribution and diversity in the world’s ocean Proceedings of the National academy of sciences, 113(11), E1516–E1525 27 Mann, D G., & Droop, S J M (1996) Biodiversity, biogeography and conservation of diatoms Hydrobiologia, 336(1-3), 19–32 28 McGinnis, K M., Dempster, T A., & Sommerfeld, M R (1997) Journal of applied phycology, 9(1), 19–24 29 Pal, Sumilesh W and Singh, Navneel K and Azam, Khairul (2013) Evaluation of relationship between light intensity (Lux) and growth of Chaetoceros muelleri Oceanography, (3), 1-4 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 44 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn