Nghiên cứu nhân nhanh in vitro cây trầu bà đốm đột biến

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ~~~~~***~~~~~ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH IN VITRO CÂY TRẦU BÀ ĐỐM ĐỘT BIẾN ” Người thực : NGUYỄN THỊ LÂM Lớp : K62 - CNSHB Khóa : 62 Chun ngành : Cơng Nghệ Sinh Học Người hướng dẫn : TS NGUYỄN THỊ LÂM HẢI HÀ NỘI – 2020 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nội dung báo cáo kết đề tài “Nghiên cứu nhân nhanh in vitro Trầu bà đốm đột biến” riêng Các số liệu, kết thực trung thực hướng dẫn TS Nguyễn Thị Lâm Hải Mọi nội dung tham khảo báo cáo trích dẫn rõ ràng tên tác giả, tên cơng trình, thời gian, địa điểm nguồn gốc Ngày tháng năm 2020 Sinh viên thực Nguyễn Thị Lâm i LỜI CẢM ƠN Để thực đề tài lời em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến đến TS Nguyễn Thị Lâm Hải, cô tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em suốt trình thực hồn thành luận văn Đặc biệt em xin chân thàmh cảm ơn thầy cô giáo Học viện Nông Nghiệp Việt Nam, thầy cô khoa Công nghệ Sinh học cán môn CNSH Thực vật, Học viện Nông Nghiệp Việt Nam nhiệt tình giúp đỡ, chia sẻ kinh nghiệm quý báu đưa lời khuyên chân thành để em hoàn thành tốt đề tài Cuối em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến gia đình, người thân bạn bè cổ vũ, động viên, giúp đỡ chúng em suốt trình học tập thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn Ngày 22 tháng năm 2020 Sinh viên thực Lâm Nguyễn Thị Lâm ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC CÁC CỤM TỪ - KÍ HIỆU VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu 1.4 Ý nghĩa 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Trầu bà đốm đột biến 2.1.1 Nguồn gốc- vị trí phân bố 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm thực vật 2.1.4 Đặc điểm sinh thái 2.2 Tổng quan tình hình nghiên cứu ngồi nước thuộc lĩnh vực đề tài 10 2.2.1 Tình hình nghiên cứu nước ngồi 10 2.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 13 PHẦN III: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 3.1 Đối tượng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 15 iii 3.1.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 15 3.1.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 16 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 16 3.2.1 Nội dung nghiên cứu 16 3.2.2 Phương pháp nghiên cứu 20 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .22 4.1.Tạo vật liệu khởi đầu 22 4.2 Giai đoạn nhân nhanh in vitro Trầu bà đốm đột biến 24 4.2.1 Ảnh hưởng BAP đến nhân chồi Trầu bà đốm đột biến 25 4.2.2 Ảnh hưởng Kinetin đến nhân nhanh in vitro chồi Trầu bà đốm đột biến 28 4.2.3 So sánh hiệu nhân chồi môi trường bổ sung BAP môi trường bổ sung Kinetin tác động vào Trầu bà đốm đột biến 30 4.2.4 Ảnh hưởng tổ hợp BAP Kinetin đến nhân nhanh in vitro Trầu bà đốm đột biến 31 4.2.5 Ảnh hưởng tổ hợp BAP α-NAA đến nhân nhanh in vitro Trầu bà đốm đột biến 34 4.2.6 Ảnh hưởng tổ hợp BAP IBA đến nhân nhanh in vitro chồi Trầu bà đốm đột biến 36 4.2.7 Ảnh hưởng tổ hợp BAP+ IAA đến nhân chồi Trầu bà đốm đột biến 39 4.2.8 Ảnh hưởng tổ hợp BAP nước dừa đến nhân nhanh in vitro chồi Trầu bà đốm đột biến 41 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .44 5.1 Kết luận 44 5.2 Đề nghị 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC 48 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1: Ảnh hưởng chất khử trùng đến giai đoạn tạo vật liệu khởi đầu 23 Bảng 4.2 Ảnh hưởng BAP đến nhân chồi trầu bà đốm đột biến in vitro (sau tuần nuôi cấy) .25 Bảng 4.3 Ảnh hưởng Kinetin đến hệ số nhân chồi (sau tuần) 28 Bảng 4.4 Ảnh hưởng tổ hợp BAP Kinetin đến hệ số nhân chồi Trầu bà đốm đột biến (sau tuần) .31 Bảng 4.5 Ảnh hưởng tổ hợp BAP α-NAA đến hệ số nhân nhanh in vitro chồi Trầu bà đốm đột biến (sau tuần nuôi cấy) 34 Bảng 4.6 Ảnh hưởng tổ hợp BAP+ IBA đến nhân nhanh in vitro Trầu bà đốm đột biến (sau tuần nuôi cấy) 37 Bảng 4.7 Ảnh hưởng tổ hợp BAP IAA đến nhân nhanh in vitro chồi Trầu bà đốm đột biến (sau tuần) .39 Bảng 4.8 Ảnh hưởng tổ hợp BAP nước dừa đến nhân nhanh in vitro chồi Trầu bà đốm đột biến (sau tuần nuôi cấy) 42 v DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Cây Trầu bà đốm đột biến Hình 2.2 Đột biến đốm Hình 2.3 Đột biến nửa .6 Hình 2.4 Lá đột biến nửa Hình 2.5 Đột biến Hình 2.6 Hoa trầu bà đốm .7 Hình 2.7 Quả Trầu bà đốm đột biến Hình 2.8 Rễ Trầu bà đốm đột biến .8 Hình 3.1 Cây trầu bà đốm đột biến 15 Hình 4.1 Trầu bà đốm nuôi cấy hai môi trường khác (sau tuần nuôi cấy) 23 Hình 4.2 Chồi môi trường bổ sung BAP sau tuần ni cấy .27 Hình 4.3 Chồi Trầu bà đốm môi trường bổ sung Kinetin sau tuần nuôi cấy .29 Hình 4.4 Chồi Trầu bà đốm môi trường bổ sung Kinetin BAP .31 Hình 4.5 Chồi Trầu bà đốm đột biến môi trường bổ sung BAP +Kinetin sau tuần nuôi cấy .33 Hình 4.6 Cây Trầu bà đốm đột biến môi trường bổ sung BAP α-NAA sau tuần nuôi cấy .36 Hình 4.7 Cây Trầu bà đốm đột biến môi trường bổ sung BAP + IBA sau tuần nuôi cấy nuôi cấy 38 Hình 4.8 Cây Trầu bà đốm đột biến môi trường bổ sung BAP IAA sau tuần nuôi cấy 41 Hình 4.9 Cây Trầu bà đốm đột biến môi trường bổ sung BAP + nước dừa sau tuần nuôi cấy .43 vi DANH MỤC CÁC CỤM TỪ - KÍ HIỆU VIẾT TẮT Viết đầy đủ STT Viết tắt CT Công thức BA Benzyl adenin MS Môi trường Murashige Skoog - 1962 BAP Benzyl amino purine IBA Indolebutyric acid α-NAA IAA Indole-3-actic acid CV% Sai số thí nghiệm LSD (5%) 10 GA3 11 2ip α- Napthalene aceticacid Độ lệch tiêu chuẩn mức nghĩa 5% Gibberellic acid Di-methyl-allyl-amino vii TÓM TẮT Cây Trầu bà đốm đột biến (Monstera deliciosa variegated Thai Constellation) loại cảnh kích thước đa dạng dùng để trang trí khơng gian sống làm việc Cây khỏe mạnh, bị sâu bệnh hại, có giá trị kinh tế cao có cịn ý nghĩa phong thủy Đề tài thực nhằm tìm mơi trường nhân nhanh in vitro tối ưu cho Trầu bà đốm đột biến Kết thu được: Môi trường tốt cho giai đoạn vào mẫu phát sinh chồi MS + mg/L BAP + 30 g/L sucrose, 6,5 g/L agar Môi trường nhân nhanh chồi phù hợp để nhân nhanh chồi Trầu bà đốm đột biến là: MS + 30 g/L sucrose +1 mg/L BAP+ 0,4 mg/L IAA + 6,5 g/L agar, pH=5,8 cho hệ số nhân chồi 3,77 chồi/mẫu, chồi to, khỏe viii PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Ngày nay, với phát triển kinh tế – xã hội, nhu cầu thẩm mỹ người tăng cao, việc sử dụng cảnh trang trí cho khơng gian sống văn phịng làm việc trở nên phổ biến Khơng giúp tô điểm ban công, tạo điểm nhấn cho góc học tập ngồi cịn giúp cho khơng khí trở nên lành mang lại không gian sống hài hịa, tươi mát,…do mà sản phẩm chậu ưu chuộng phải kể đến Trầu bà đốm đột biến Cây vừa có kích thước đa dạng vừa có nhiều kiểu dang màu sắc đẹp đáp ứng đa dạng nhu cầu người tiêu dùng Trầu bà đốm đột biến (Monstera deliciosa variegated Thai Constellation) loại thực vật thuộc họ ráy (Araceae) có nguồn gốc Trầu bà Nam mỹ (Monstera deliciosa) bị đột biến phần Trên thị trường cảnh loại dột biến thường u thích khơng mang đặc tính tối ưu của gốc mà cịn có đặc điểm trội màu sắc Cây đẹp phù hợp với thị yếu đa số người tiêu dùng Điểm khác biệt so với gốc Trầu bà Nam Mỹ (MonsteradDeliciosa) mang lại độc đáo tạo từ phần đột biến với kết hợp hai màu trắng xanh tạo nên điểm nhấn lạ khác biệt cho người chơi cảnh Ngồi có kích thước đa dạng, tỉ lệ sống cao nên chiếm nhiều tình cảm từ người tiêu dùng Do thời điểm Trầu bà đốm đột biến bán với giá cao dao động từ 4.200.000 đồng đến 4.500.000 đồng chậu gấp khoảng mười ba lần giá gốc mà mang lại giá trị kinh tế cho người trồng Trước thường nhân giống phương pháp nhân giống vơ tính tách chồi từ mẹ Tuy nhiên thực tế phương pháp truyền thống chưa đáp ứng nhu cầu cung ứng cao từ thị trường hệ số nhân thấp chế khác Nhiều kết nghiên cứu cho thấy vai trị nước dừa đến kích thích nhân nhanh chồi loại lan Dendrobium anosmum (Thúy cs., 2015), D nobile Lindl (Lan Anh, 2013) Thí nghiệm tiến hành nhằm khảo sát ảnh hưởng nước dừa đến chiều cao hệ số nhân nhanh in vitro chồi Thí nghiệm bố trí môi trường nền: MS + 1,0 mg/L BAP + 30 g/L sucrose + 6,5 g/L agar, pH = 5,8 Bảng 4.8 Ảnh hưởng tổ hợp BAP nước dừa đến nhân nhanh in vitro chồi Trầu bà đốm đột biến (sau tuần nuôi cấy) Công thức Nồng độ nước dừa (ml/L) Hệ số nhân Chiều cao (cm) Hình thái chồi 2,73 1,85 + 50 2,93 1,70 + 100 3,00 1,65 + 200 3,23 2,19 + 5% LSD CV% 0,19 3,2% 0,15 4,0% Ghi chú: Môi trường :MS +1mg/L BAP+ 30g/L sucrose + 6,5g agar (+) Chất lượng chồi to khỏe mập Kết thu sau tuần nuôi cấy trình bày Bảng 4.8 Hình 4.9, tỷ lệ hình thành chồi cao cơng thức cho hệ số nhân chồi/mẫu 3,23 chiều cao trung bình chồi 2,19 cm Có thể thấy tất công thức bổ sung nước dừa cho chiều cao trung bình tốt từ 1,65cm đến 2,19 cm, hệ số nhân chồi tăng so với công thức đối chứng Van Overbeek cộng (Van Overbeek cs,1941, 1942) có cơng bố sử dụng nước dừa nuôi cấy mô Tác dụng nước dừa môi trường kích thích phân hóa nhân nhanh chồi Năm 1993 1996 George xác định nước dừa giàu hợp chất hữu cơ, chất khống chất kích thích sinh trưởng Bên cạnh đó, nước dừa cịn chứa loại axit amin 42 hợp chất vô quan trọng nuôi cấy in vitro myo – insitol (thuộc cytokinin) có tác dụng tạo chồi Nồng độ thường sử dụng nuôi cấy mô từ 5-20% (v/v) Như kết hợp BAP với nước dừa có phản ứng tích cực kích thích hình thành tăng chiều cao chồi mơi trường tốt để nhân nhanh chồi môi trường MS bổ sung 1mg/L BAP, 200ml nước dừa, 30 g/L sucrose, 6,5g/L agar, nhiên cần bổ sung số chất kích thích sinh trưởng để cải thiện chất lượng chồi tốt CT1 CT2 CT3 CT4 CT1: MS+ 1mg/L BAP + 30 g/L sucrose, 6,5 g/L agar CT2: MS+ 1mg/L BAP + 50 mg/L nước dừa + 30 g/L sucrose, 6,5 g/L agar CT3: MS+ 1mg/L BAP +100 mg/L nước dừa + 30 g/L sucrose, 6,5 g/L agar CT4: MS+ 1mg/L BAP +100 mg/L nước dừa + 30 g/L sucrose, 6,5 g/L agar Hình 4.9 Cây Trầu bà đốm đột biến môi trường bổ sung BAP nước dừa sau tuần nuôi cấy 43 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Vật liệu thích hợp vào mẫu cho Trầu bà đốm đột biến đoạn đốt thân chứa mắt ngủ, môi trường phù hợp để nuôi cấy khởi động giúp phát sinh chồi Trầu bà đốm đột biến là: MS + 30 g/L sucrose + 4,0 mg/L BAP + 6,5 g/L agar, pH=5,8 Môi trường nhân nhanh chồi phù hợp để nhân nhanh chồi Trầu bà đốm đột biến là: MS + 30 g/L sucrose +1,0 mg/L BAP+ 0.4 mg/L IAA + 6,5 g/L agar, pH=5,8 5.2 Đề nghị Tiếp tục khảo sát nghiên cứu nhân nhanh in vitro Trầu bà đốm dột biến Ứng dụng nhân nhanh in vitro vào sản xuất số lượng lớn Trầu bà đốm đột biến 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Ngơ Xn Bình (2009) Ni cấy mô tế bào thực vật – Cơ sở lý luận ứng dụng, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, 294 tr Nguyễn Thu Hằng, Nguyễn Thanh Hải, Nguyễn Thị Thùy Linh, Nguyễn Thị Thủy, Đặng Thị Thanh Tâm, Nguyễn Thị Phương Thảo Nhân nhanh invitro Trầu Bà Cánh Phượng (Philodendron xanadu) Tạp chí Tạp chí Khoa học Phát triển 2013, tập 11, số 6: 826-832 II Tiếng Anh Asma Alhussein Alawaadh, Yaser Hassan Dewir, Mona S Alwihibi, Abdulhakim A Aldubai, Salah El-Hendawy, and Yougasphree Naidoo (2020) “Micropropagation of Lacy Tree Philodendron (Philodendron bipinnatifidum Schott ex Endl.)” HortScience, Page Count: 294–299 F.C.Chena, C.Y.Wang, J.Y.Fang,(2012) “Micropropagation of selfheading Philodendron via direct shoot regeneration”, Scientia Horticulturae, https://doi.org/10.1016/j.scienta.2012.04.011 Malki Al., A.A.H.S., Elmeer K.M.S (2009) Effect of medium strength and charcoal combined with IBA and NAA on root initiation of Ficus anastasia Acad.J.Plant.Sci., 2(3): 169-172 Jambor B.E and Marta R.A (1990) In vitropropagation of Philodendron tuxtlanum Bunting with benzylaminopurine Acta Agron Hung., 39: 341348 Ali, A., Munawar, A., Naz, S., 2007 “An in vitro study on micropropagation of Caladiumbicolor.” Int J Agri Biol 9, 731–735 Jausoro V (2008) Germinación y proliferación in vitro de lapacho rosado Tabebuia impetiginosa (Mart ex DC) Standl (Bignoniaceae) Thesis Biological Science Degree, National University of Luján 45 Dewir, Y.H., Chakrabarty, D., Hahn, E.J., Paek, K.Y., 2006 ‘A simple method for mass propagation of Spathiphyllum cannifolium using an airlift bioreactor.’ InVitro Cell Dev Biol -Plant 42, 291–297 Sreekumar, S., Mukunthakumar, S., Seeni, S., 2001 Morphogenetic responses of six Philodendron cultivars in vitro Indian J Exp Biol 39, 1280–1287 Koriesh E.M and Al-Manie F.A (2000) Growth and root formation of Philodendron oxycardiumgrown in vitro as affected by benzyladenine and indole acetic acid Egypt J Hort., 27: 1-11 10 Kumar D., Tiwari J.P and Singh R (1998) In vitroclonal propagation of Philodendron pertusum Indian J Hort., 55: 340-343 11 Vardja, R., Vardja, T., 2001 The effect of cytokinin type and concentration and the number of subcultures on the multiplication rate of some decorative plants Proc Est Acad Sci Biol Ecol 50, 22–32 12 Sreekumar S., Mukunthakumar S., Seeni S (2001); Morphogenetic responses of six Philodendron cultivars in vitro Indian J Exp Biol., 39(12):1280-1287 13 Murashige T., Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiol Plant, 15: 473-497 14 Larraburu E.E., Apóstolo N.M., and Llorente B.E (2012) In vitro propagation of pink lapacho: responese surface methodology and factorial analysis for optimisation of medium components Int J Fores Res., 1-9 15 Murashige T., Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiol Plant, 15: 473-497 16 Parida R., Mohanty S., Kuanar A., Nayak S (2010) Rapid multiplication and in vitro production of leaf biomass in Kaempferia galanga through tissue culture Electron J Biotechnol., 13(4) 46 17 Parida R., Mohanty S., Kuanar A., Nayak S (2010) Rapid multiplication and in vitro production of leaf biomass in Kaempferia galanga through tissue culture Electron J Biotechnol., 13(4) 18 Kritzinger, E.M., Vuuren, R.J.V., Woodward, B., Rong, I.H., Spreeth, M.H., Slabbert, M.M., 1998 Elimination of external and internal contaminants in rhizomes of Zantedeschia aethiopica with commercial fungicides and antibiotics Plant Cell Tissue Org Cult 52, 61–65 19 Murashige, T., Skoog, F., 1962 A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiol Plant 15, 473–497 20 Zhang P., Huang X., Xu X and Ling D (1997) Plant regeneration from in vitro culture of Philodendron erubescens J Trop Subtrop Bot., 5: 7880 III Các trang web https://kienthuc.net.vn https://noth.garden/quai-vat-rung-xanh-monstera https://www.pinterest.com https://theabsurdword.com https://vuoncayviet.com 47 PHỤ LỤC BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua BAP den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 6.34400 1.58600 396.49 0.000 NL 133333E-02 666665E-03 0.17 0.850 * RESIDUAL 320006E-01 400007E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 6.37733 455524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua BAP den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.29211 323027 95.52 0.000 NL 220133E-01 110067E-01 3.25 0.092 * RESIDUAL 270534E-01 338167E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.34117 957981E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua BAP den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOCHOI 1.26667 3.13333 2.86667 2.73333 2.56667 CHIEUCAO 2.57333 1.72333 1.83000 2.06333 2.00333 SE(N= 3) 0.365152E-01 0.335741E-01 5%LSD 8DF 0.119072 0.109482 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 SOCHOI 2.52000 2.50000 2.52000 CHIEUCAO 2.05400 1.98600 2.07600 SE(N= 5) 0.282845E-01 0.260064E-01 5%LSD 8DF 0.922329E-01 0.848043E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua BAP den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien 48 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOCHOI CHIEUCAO GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.5133 15 2.0387 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.67493 0.63246E-01 2.5 0.0000 0.30951 0.58152E-01 2.9 0.0000 |NL | | | 0.8496 0.0917 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.73067 432667 42.56 0.000 NL 253333E-01 126667E-01 1.25 0.339 * RESIDUAL 813332E-01 101667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.83733 131238 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 604507 151127 247.07 0.000 NL 577333E-02 288667E-02 4.72 0.044 * RESIDUAL 489339E-02 611673E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 615173 439409E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOCHOI 1.16667 1.96667 2.13333 1.70000 1.96667 CHIEUCAO 2.57333 2.12000 2.07333 2.00333 2.15333 SE(N= 3) 0.582141E-01 0.142790E-01 5%LSD 8DF 0.189830 0.465625E-01 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 SOCHOI 1.78000 1.84000 1.74000 CHIEUCAO 2.20800 2.16000 2.18600 SE(N= 5) 0.450925E-01 0.110605E-01 5%LSD 8DF 0.147042 0.360672E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE 49 Anh huong cua Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOCHOI CHIEUCAO GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.7867 15 2.1847 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.36227 0.10083 5.6 0.0000 0.20962 0.24732E-01 1.1 0.0000 |NL | | | 0.3389 0.0441 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua to hop BAP va Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 230667 576667E-01 3.80 0.051 NL 253334E-01 126667E-01 0.84 0.471 * RESIDUAL 121333 151667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 377333 269524E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua to hop BAP va Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 121440 303600E-01 15.22 0.001 NL 617333E-02 308666E-02 1.55 0.270 * RESIDUAL 159600E-01 199500E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 143573 102552E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua to hop BAP va Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOCHOI 3.06667 3.16667 3.06667 2.96667 2.80000 CHIEUCAO 1.67667 1.45333 1.56667 1.70667 1.57333 SE(N= 3) 0.711024E-01 0.257876E-01 5%LSD 8DF 0.231858 0.840908E-01 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 SOCHOI 2.96000 3.06000 3.02000 CHIEUCAO 1.58000 1.62400 1.58200 SE(N= 5) 0.550757E-01 0.199750E-01 5%LSD 8DF 0.179596 0.651365E-01 - 50 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20: :PAGE Anh huong cua to hop BAP va Kinetin den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.0133 15 1.5953 SOCHOI CHIEUCAO STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.16417 0.12315 4.1 0.0513 0.10127 0.44665E-01 2.8 0.0010 |NL | | | 0.4711 0.2703 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20:10 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va alpha NAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 456667 152222 7.12 0.022 NL 450000E-01 225000E-01 1.05 0.407 * RESIDUAL 128333 213889E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 630000 572727E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20:10 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va alpha NAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 150625 502083E-01 6.04 0.031 NL 160167E-01 800833E-02 0.96 0.435 * RESIDUAL 498500E-01 830833E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 216492 196811E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20:10 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va alpha NAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOCHOI 2.96667 3.10000 2.73333 2.60000 CHIEUCAO 1.97000 1.99000 2.01000 1.73333 SE(N= 3) 0.844371E-01 0.526255E-01 5%LSD 6DF 0.292082 0.182040 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 4 SE(N= 4) SOCHOI 2.77500 2.92500 2.85000 CHIEUCAO 1.91500 1.97500 1.88750 0.731247E-01 0.455750E-01 51 5%LSD 6DF 0.252950 0.157651 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20:10 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va alpha NAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOCHOI CHIEUCAO GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 2.8500 12 1.9258 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.23932 0.14625 5.1 0.0219 0.14029 0.91150E-01 4.7 0.0310 |NL | | | 0.4075 0.4355 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20:12 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IBA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 250000 833333E-01 5.26 0.041 NL 500001E-02 250001E-02 0.16 0.857 * RESIDUAL 950000E-01 158333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 350000 318182E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20:12 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IBA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 802092 267364 41.90 0.000 NL 183167E-01 915834E-02 1.44 0.310 * RESIDUAL 382834E-01 638056E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 858692 780629E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20:12 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IBA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOCHOI 3.00000 3.26667 3.06667 2.86667 CHIEUCAO 1.77333 1.25333 1.70000 1.95667 SE(N= 3) 0.726483E-01 0.461178E-01 5%LSD 6DF 0.251302 0.159529 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 4 SOCHOI 3.05000 3.02500 3.07500 CHIEUCAO 1.71500 1.67750 1.62000 52 SE(N= 4) 0.629153E-01 0.399392E-01 5%LSD 6DF 0.217634 0.138156 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20:12 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IBA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOCHOI CHIEUCAO GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 3.0500 12 1.6708 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.17838 0.12583 4.1 0.0413 0.27940 0.79878E-01 4.8 0.0004 |NL | | | 0.8573 0.3099 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20:17 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 829167 276389 16.86 0.003 NL 350000E-01 175000E-01 1.07 0.403 * RESIDUAL 983333E-01 163889E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 962500 875000E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20:17 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 534917E-01 178306E-01 3.51 0.089 NL 431667E-02 215833E-02 0.42 0.675 * RESIDUAL 304834E-01 508056E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 882917E-01 802652E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20:17 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOCHOI 3.03333 3.40000 3.76667 3.30000 CHIEUCAO 1.67333 1.52000 1.65667 1.54667 SE(N= 3) 0.739119E-01 0.411524E-01 5%LSD 6DF 0.255673 0.142353 MEANS FOR EFFECT NL - 53 NL NOS 4 SOCHOI 3.35000 3.45000 3.32500 CHIEUCAO 1.61500 1.61000 1.57250 SE(N= 4) 0.640095E-01 0.356390E-01 5%LSD 6DF 0.221419 0.123281 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20:17 :PAGE Anh huong cua to hop BAP va IAA den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOCHOI CHIEUCAO GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 3.3750 12 1.5992 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.29580 0.12802 3.8 0.0031 0.89591E-010.71278E-01 4.5 0.0893 |NL | | | 0.4027 0.6752 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20:19 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 829167 276389 16.86 0.003 NL 350000E-01 175000E-01 1.07 0.403 * RESIDUAL 983333E-01 163889E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 962500 875000E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20:19 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 534917E-01 178306E-01 3.51 0.089 NL 431667E-02 215833E-02 0.42 0.675 * RESIDUAL 304834E-01 508056E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 882917E-01 802652E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20:19 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOCHOI 3.03333 3.40000 3.76667 3.30000 CHIEUCAO 1.67333 1.52000 1.65667 1.54667 SE(N= 3) 0.739119E-01 0.411524E-01 5%LSD 6DF 0.255673 0.142353 MEANS FOR EFFECT NL 54 NL NOS 4 SOCHOI 3.35000 3.45000 3.32500 CHIEUCAO 1.61500 1.61000 1.57250 SE(N= 4) 0.640095E-01 0.356390E-01 5%LSD 6DF 0.221419 0.123281 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20:19 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den su nhan nhanh choi in vitro cay Trau ba dom dot bien F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOCHOI CHIEUCAO GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 3.3750 12 1.5992 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.29580 0.12802 3.8 0.0031 0.89591E-010.71278E-01 4.5 0.0893 55 |NL | | | 0.4027 0.6752 | | | | CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC BẢN NHẬN XÉT SINH VIÊN LÀM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Nguyễn Thị Lâm Lớp: K62CNSHB Mã sinh viên: 620505 Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Thực vật khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tên đề tài Khóa luận tốt nghiệp: NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH IN VITRO CÂY TRẦU BÀ ĐỐM ĐỘT BIẾN Thời gian thực tập: Từ 09/2020 đến 2/2021 Địa điểm thực tập: Phịng thí nghiệm mơn Cơng nghệ sinh học thực vật –Khoa công nghệ sinh học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Ý KIẾN NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Tinh thần, thái độ học tập thực Khóa luận tốt nghiệp: Thái độ nghiêm túc, cầu thị Mức độ hồn thành Khóa luận tốt nghiệp giao:  Hoàn thành tốt: X  Hoàn thành:   Chưa hoàn thành:  Năng lực sáng tạo nghiên cứu viết Khóa luận tốt nghiệp: Có lực sáng tạo nghiên cứu viết khoá luận tốt nghiệp Kết luận:   Sinh viên đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: Sinh viên khơng đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: X  Hà Nội, ngày 23 tháng năm 2021 Giáo viên hướng dẫn TS Nguyễn Thị Lâm Hải 56