Bài báo cáo thực hành vật lý lý sinh giúp các bạn có nguồn tư liệu tham khảo trong quá trình học tập và thực hành tại đại học, đem lại kiến thức cơ bản về môn vật lý lý sinh , hi vọng tài liệu sẽ giúp ích được nhiều cho các bạn sinh viên học sinh
Bài thực hành Lý sinh Tổ 11 - Lớp: CTYK21015C - Nhóm: Bài 1:XÁC ĐỊNH NĂNG LƯỢNG HOẠT HĨA CỦA Q TRÌNH CO BĨP TIM ẾCH TẮCH RỜI I/ Cơ sở lý thuyết Như ta biết, để phản ứng xảy nguyên tử, phân tử tham gia phản ứng phải tiến lại gần với tạo cấu hình khơng gian Tuy nhiên tới khoảng cách xác định nguyên tử, phân tử xuất lực đẩy culông làm cản trở trình hình thành phân tử mới.Vậy cần phải cung cấp lượng cho chúng Năng lượng tối thiểu cần phải cung cấp cho nguên tử, phân tử để thắng đươc lực đẩy culông gọi lượng hoạt hóa (Ehh) Sự phụ thuộc tốc độ phản ứng vào nhiệt độ thể qua biểu thức toán học Arenius KT = P Z exp( ) (1) Trong đó: P : hệ số lập thể (biểu thị cấu hình khơng gian ngun tử, phân tử) Z : hệ số va chạm R : số khí T : nhiệt độ tuyệt đối Ngồi ra, ta biểu thức liên hệ Vanhoff: Q10 = (2) Từ (1) (2) rút phương trình Ehh Q10 = Q10 = ln Q10 = Ehh = Q Ehh = 0,46 RT(T+10) lg Q10 II/ Tiến hành Để ếch bàn mổ, dùng dao kéo mở rộng lồng ngực ếch, tiếp tục cận thận gở bỏ màng bao tim Xác định chủ động mạch trái, chủ động mạch phải tĩnh mạch màu xanh EBOOKBKMT.COM - HỖ TRỢ TÀI LIỆU HỌC TẬP Bài thực hành Lý sinh Tổ 11 - Lớp: CTYK21015C - Nhóm: phía Dùng cột chặt động mạch chủ phải, đến tĩnh mạch dùng dài cột chặt động mạch chủ trái xa tim Kéo căng sợi động mạch chủ trái, dùng dao mở đường dọc Dùng ống thông tim luồn thẳng vào động mạch chủ trái vào tâm thất trái (nếu vẩy hết máu tim tốt) Dùng dư khoảng 15cm cột chặt phía chỗ lỗ thủng có ống thơng tim Cẩn thận dỡ bỏ tim, tách rời tim khỏi thể (yêu cầu tim đập cách bình thường) Đưa tim vào bình cồn để ni Để cách bề mặt dung dịch ringer khoảng 1cm Chờ sau phút, dùng đồng hồ bấm để tính tần số co bóp tim Đưa tồn bình ẩm vào nươc đá để hạ nhiệt độ xuống 10 oC tương ứng với thời gian ngâm phút Sau đưa ngồi để tính tần số co bóp tim( lần tính thời gian cần thực lần) Kết : Sau lần đo ta bảng giá trị tần số K sau : T+ 10=296 K T = 2860K Lần 60 42 Lần 60 42 Lần 57 42 Trung bình 59 42 Áp dụng công thức (1)Q10 = = Áp dụng công thức (2)Ehh = 0,46.(T+10)T.lgQ10 = 0,46.(273+13).(273+23).lg = 14.118 (kcal/mol) Vậy lượng hoạt hố q trình co bóp tim ếch tách rời là: 14.118 (kcal/mol) BÀI 2: XÁC ĐỊNH TÍNH THẤM MỘT CHIỀU CỦA DA ẾCH Màng tế bào hệ thống mở, mà chúng có khả trao đổi EBOOKBKMT.COM - HỖ TRỢ TÀI LIỆU HỌC TẬP Bài thực hành Lý sinh Tổ 11 - Lớp: CTYK21015C - Nhóm: chất từ ngược lại, dồng thời đào thải chat cặn bã ngồi mơi trường Da ếch đối tượng kiểm tra tính thấm chiều I/ Cơ sở lí thuyết: Da ếch cấu tạo từ lớp: Lớp : tế bào biêu mô cấu tạo từ – lớp tế bào, lớp lớp màng cutin, có nguồn gốc tuyến nhầy da ếch Lớp thứ lớp tế bào sừng, lớp thứ lớp té bào hình trịn xếp thưa nhau, nhờ tạo nên khoảng gian bào Lớp thứ 4: lớp tế bào hình lăng trụ, có nhân hình ovan, xếp cách xít Lớp tế bào biểu mô uôn phát triển để thay đổi, chúng có khả hấp thụ mạnh, phản ứng axit yếu Lớp trong: lớp mô liên kết chứa sắc tố màu đen, chúng có đặc điểm hấp thụ yếu, phản ứng kiềm yếu, đặc biệt với số chất nhuộm có tính kiềm yếu metylblue, da ếch cho thấm từ II/Cách tiến hành: Tạo túi da ếch, túi lộn ngược túi để xuôi, cho xanhmetylen vào túi, đem ngâm dung dịch sinh lí, thời gian chờ khoảng tiếng Đo xác định hàm lượng metylblue thấm qua màng phương pháp đường chuẩn EBOOKBKMT.COM - HỖ TRỢ TÀI LIỆU HỌC TẬP Bài thực hành Lý sinh Tổ 11 - Lớp: CTYK21015C - Nhóm: BÀI 3:XÁC ĐỊNH ĐỘ BỀN TẾ BÀO HỒNG CẦU I.Yêu cầu: Phân biệt loại môi trường Phản ứng tế bào hồng cầu với loại môi trường Xác định thành phần tế bào hồng cầu làm cho thay đổi hình dạng Xác định nồng độ bền cách II.Lý thuyết Cấu trúc màng tế bào hồng cầu giống loại màng sinh chất khác gồm lớp kép Ngoài bề mặt bên màng tế bào hồng cầu có tồn mạng lưới spectrin có nguồn gốc protein dạng sợi có trọng lượng 200.000 – 220.000 daltol Nhờ có mạng lưới mà tế bào hồng cầu thay đổi hình dạng (co trịn hay duỗi dài) giúp chúng qua mao mạch nhỏ Đối với tế bào hồng cầu già tế bào hồng cầu bị thối hóa chức khả co bị suy giảm chúng lọt qua mao mạch kiểm soát bị tiêu hủy lách Sự thay đổi loại tế bào hồng cầu phụ thuộc vào mơi trường ngồi Có loại mơi trường ngồi: Ưu trương: Tế bào hồng cầu bị teo lại Đẳng trương: Tế bào hồng cầu bền vững Nhược trương: Tế bào hồng cầu trương lên tới nồng độ màng tế bào khơng cịn khả giữ vững bị vỡ giải phóng chất nội bào gọi tượng huyết tiêu Nhiệm vụ thực hành: Xác định nồng độ nhược trương lớn chưa đủ gây tương huyết tiêu nồng độ nồng độ bền III.Hóa chất dụng cụ Ống nghiệm, pipette, máy ly tâm Dung dịch NaCl 1%, nước cất, máu chống đông IV Cách tiến hành Pha 10 dung dịch với 10 nồng độ khác thay đổi từ 0% đến 0,9%, thể tích ống nghiệm 10 ml Ống nghiệm NaCl 1% 10 Nước cất C% 0% 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 % % % % % % % % % V(ml) 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 EBOOKBKMT.COM - HỖ TRỢ TÀI LIỆU HỌC TẬP Bài thực hành Lý sinh Tổ 11 - Lớp: CTYK21015C - Nhóm: Thả vào ống nghiệm giọt hồng cầu Đảo nhẹ ống lần cố định 30 phút Đem ly tâm với tốc độ 2500 vòng/phút phút Lấy đọc kết V Kết quả, giải thích Các ống từ đến có màu từ đỏ đậm tới nhạt dần Nguyên nhân: nồng độ NaCl môi trường nhiều so với tế bào hồng cầu làm cho nước vào làm thề tích tế bào tăng, chúng trương phồng lên bị vỡ ra, giải phóng chất ngồi mơi trường gây tượng huyết tiêu Lượng nước vào ống nghiệm giảm dần từ ống đến ống (vì nồng độ NaCl tăng dần từ ống đến ống thể tích ống nghiệm không đổi) nên tế bào ống bị vỡ nhiều làm cho dung dịch có màu đậm Ngược lại ống nước từ môi trường vào tế bào chưa đủ để gây tượng huyết tiêu tức tế bào hồng cầu trương lên tới mức tối đa chưa vỡ Nồng độ nhược trương lớn chưa đủ gây tượng huyết tiêu 0,6% Các ống 7,8 hồng cầu không bị vỡ lắng xuống đáy dung dịch suốt dần Ống 9: dung dịch thu suốt, lượng nước vào tế bào nhau, có cân nồng độ NaCl ngồi màng tế bào Dung dịch thu ống dung dịch đẳng trương EBOOKBKMT.COM - HỖ TRỢ TÀI LIỆU HỌC TẬP Bài thực hành Lý sinh Tổ 11 - Lớp: CTYK21015C - Nhóm: BÀI 6:CÁC DẪN XUẤT CỦA HEMOGLOBIN(Hb) I.Yêu cầu : - Nắm cấu trúc chức Hb - Nắm dạng HbO2 - Nắm dẫn xuất Hb II.Cơ sở lí thuyết : Thành phần hồng cầu Hb Trong tế bào hồng cầu có khoảng 200 triệu phân tử Hb Một phân tử Hb chứa 9.000 nguyên tử loại C,H,O,S,N……… trọng lượng phân tử Hb 67000 Dal Hb cấu tạo thành phần : protein globin + nhóm chức Hem Nhóm chức Hem bao gồm nguyên tử Fe++ nằm vòng pyrol Nhờ nguyên tử Fe++ nên tế bào hồng cầu có khả thu nhận giải phóng Oxi từ Phân tử Hb cho tế bào mô Cấu trúc protein globin : phức tạp, cấu tạo chuỗi polypeptit Trong có chuỗi α-polypeptit chuỗi β-polypeptit, có tính chất khác Hình dạng chuổi polypeptit kết hợp với Oxi khác Chuỗi β-polypeptit kết hợp với oxi bị cuộn trịn lại, nhả oxi ra, lại duỗi thẳng Chuỗi α-polypeptit kết hợp khơng kết hợp, hình dạng khơng thay đổi Oxyhemoglobin có dạng khác nhau: Hb4O2 Hb4O4 Hb4O6 Hb4O8 Chỉ có dạng 4(Hb4O8) dễ dàng kết hợp giải phóng oxi (dạng bão hịa oxi) Dẫn xuất : metHemoglobin (metHb) Khi Fe++ biến đổi thành Fe3+ Hb chuyển thành metHb: có khả kết hợp mà khơng có khả giải phóng oxi máu có lượng lớn MetHb q trình cung cấp Oxi cho tế bào mơ bị suy giảm gây nên tượng thiếu Oxi III Dụng cụ : máy ly tâm, ống nghiệm Hóa chất : K3[Fe(CN)6]:kaliferixyanua; Na2S2O3:Detionitnatri; dung dịch sinh lý PBS với pH=7,2; máu chống đông IVCách tiến hành kết quả: - Thu nhận HbO2 : lấy máu chống đông cho vào máy ly tâm, ly tâm tốc độ 1500vòng/phút phút để loại bỏ huyết tương để thu nhận hồng cầu (hồng cầu lắng xuống, huyết tương màu vàng nhạt lên) Lấy loại bỏ huyết tương Rửa tế bào hồng cầu dung dịch PBS lần cách đem li tâm 1500 vòng/phút thời gian phút Làm huyết tiêu hồng cầu (cho nước cất vào lắc nhẹ) Sau ly tâm với tốc độ 3000 vòng/phút phút nhằm loại bỏ màng tế bào hồng cầu Thu dịch màu đỏ tươi : HbO2 -Thu nhận metHb : lấy khoảng 3ml HbO 2, sau thêm vào vài giọt K3[Fe(CN)6] lắc nhẹ, thu dung dịch màu nâu sẫm Đó metHb -Thu nhận hemoglobin: lấy dung dịch oxyhemoglobin, thả 1-2 giọt Na 2S2O3 vào, thu dung dịch màu xanh thẫm, Hb EBOOKBKMT.COM - HỖ TRỢ TÀI LIỆU HỌC TẬP Bài thực hành Lý sinh Tổ 11 - Lớp: CTYK21015C - Nhóm: Na2S2O3 + HbO2 Hb + Na2S2O5 EBOOKBKMT.COM - HỖ TRỢ TÀI LIỆU HỌC TẬP