báo cáo thực hành hóa sinh, hóa học chuyển hóa glucid và ứng dụng, thí nghiệm 1, thí nghiệm 2 thí nghiệm 3,tìm glucid trong nước tiểu, định lượng glucid trong huyết thanh, các phản ứng xác định glucid
TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH KHOA Y – DƯỢC LỚP: DA21DC NHÓM: 01 BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA SINH BÀI: HÓA HỌC CHUYỂN HÓA GLUCID VÀ ỨNG DỤNG SINH VIÊN: Trần Thị Ngọc Trân MSSV: 115621211 Nguyễn Thảo Vy MSSV: 115621011 Nguyễn Thị Thùy Trang MSSV: 115621097 Trần Ngọc Phương Trang MSSV: 115621111 GVHD: Huỳnh Tấn Thành BÀI: HÓA HỌC CHUYỂN HÓA GLUCID VÀ ỨNG DỤNG I Khảo sát monosacaride disacaride TN1: Phản ứng Fehling *Nguyên tắc: Trong môi trường kiềm mạnh, đun nóng, MS co nhóm aldehyde có tính khử , dễ dàng khử muối kim loại nặng Cu2+, Pb2+, Ag+,… Các nối đôi bị cắt đứt tạo hỗn hợp đường – acid *Tiến hành: - Lấy ống nghiệm cho vào ống: Ống nghiệm Thuốc thử Fehling Ống 1ml Ống 1ml Ống 1ml Ống 1ml Ống 1ml Ống 1ml - Đun sôi cách thủy phút Đường MS 0,5 ml Glucose 1% 0,5 ml Fructose 1% 0,5 ml Lactose 1% 0,5 ml Saccarose 1% 0,5 ml Hồ tinh bột 1% 0,5 ml nước tiểu *Hiện tượng: + Ống 1: xuất kết tủa đỏ gạch lắng xuống đáy ống nghiệm + Ống 2: xuất kết tủa đỏ gạch lắng xuống đáy ống nghiệm + Ống 3: xuất kết tủa đỏ gạch lắng xuống đáy ống nghiệm, kết tủa chậm Ống Ống + Ống 4: xuất kết tủa đỏ gạch đáy ống nghiệm + Ống 5: không tượng + Ống 6: không tượng *Giải thích: + Ống 1: Glucose monosaccaride chứa nhóm –CHO có tính khử, mơi trường kiềm mạnh đun nóng, Glucose bị oxi hóa Cu2+ tạo thành axit D-Gluconic khử Cu2+ thành Cu+ (Cu2O màu đỏ gạch) PTHH: CH2OH – (CHOH)4 – CHO + Thuốc thử Fehling -> CH2OH – (CHOH)4 – COOH + Cu2O + Ống 2: Trong mơi trường kiềm Fructose chuyển hóa thành Glucose, Fructose phản ứng với thuốc thử Fehling cho kết tủa Cu2O màu đỏ gạch PTHH: CH2OH – (CHOH)4 – CHO + Thuốc thử Fehling -> CH2OH – (CHOH)4 – COOH + Cu2O + Ống 3: Kết tủa đỏ gạch xuất chậm ống ống 2, Lactose bị thủy phân tạo phân tử β-D-Galactose D-glucose có tính khử có nhóm –OH bán acetan tự C1 Lactose + H2O β-D-Galactose + D-glucose PTHH: CH2OH – (CHOH)4 – CHO + Thuốc thử Fehling -> CH2OH – (CHOH)4 – COOH + Cu2O + Ống 4: Saccarose không phản ứng với Cu2+ mơi trường kiềm mạnh khơng có nhóm –OH bán acetan để chuyển thành –CHO Nhưng có lẫn tạp chất có tính khử nên khử Cu2+ thành Cu+ màu đỏ gạch + Ống 5: Tinh bột polysaccharide khơng có tính khử, nên khơng bị oxi hóa Cu2+ môi trường kiềm mạnh + Ống 6: Ứng dụng để tìm Glucose nước tiểu Phản ứng âm tính thuốc thử trong, màu xanh lam, khơng xuất kết tủa đỏ gạch => nước tiểu khơng có Glucose TN2: Phản ứng Molish *Ngun tắc: Các loại glucid cho phức màu tím với dung dịch Naphtol acid sulfuric đậm đặc Thuốc thử Molish: dung dịch Naphtol 1% alcol 900 *Tiến hành: - Lấy ống nghiệm cho vào ống: Ống nghiệm Đường MS Thuốc thử H2SO4 đậm đăc Molish Ống 1 ml Glucose 1% giọt ml Ống ml Fructose 1% giọt ml Ống ml Hồ tinh bột 1% giọt ml - Khi cho acid sulfuric đậm đặc vào ống nghiệm phải nghiêng ống nghiệm, cho từ từ dọc theo thành ống không làm xáo trộn lớp dung dịch *Hiện tượng: - Cả ống nghiệm có phức màu tím - Cường độ màu ống: Fructose > Glucose > Hồ tinh bột *Giải thích: - Do Glucose, Fructose Hồ tinh bột tác dụng acid sulfuric đậm đặc chúng bị khử nước cho 5-hydroxymethyl furfural chất môi trường acid phản ứng thân điện tử α-naphtol cho phức màu tím - Do Fructose có cấu trúc vịng cạnh nên môi trường acid đậm đjăc dễ bị phá vỡ tạo thành furfural, Glucose có cấu trúc vịng cạnh nên bền hơn, cịn Hồ tinh bột bền có liên kết α-1,4 glycozit II Phản ứng màu polisacharide TN3: Khảo sát tinh bột *Nguyên tắc: Tinh bột không tan khơng nước lạnh, nước nóng tạo thành dụng dịch keo gọi hồ tinh bột Tinh bột kết hợp với iod tạo dụng dịch màu xanh tím *Tiến hành: - Cho vào ống nghiệm ml Hồ tinh bột 1%, thêm vào giọt thuốc thử iod Quan sát thấy xuất màu xanh - Đem đun sôi vài phút đèn cồn đến màu xanh, làm lạnh cốc nước lạnh đến xuất lại màu xanh *Hiện tượng: - Khi vừa cho thêm giọt thuốc thử iod vào Hồ tinh bột 1%, dung dịch chuyển sang màu xanh - Sau đun sôi hôn hợp đèn cồn khoảng phút dung dịch màu xanh - Sau làm lạnh, dung dịch màu xanh xuất trở lại Trước đun sôi Sau đun sôi Sau làm lạnh *Giải thích: - Mạch phân tử amylose khơng phân nhánh xoắn thành dạng hình trụ Các phân tử iod len vào, nằm phía lịng xoắn tạo thành chất bọc có màu xanh - Liên kiết iod amylose hợp chất bọc liên kết yếu - Ngoài ra, amylopectin cịn có khả hấp thụ iod bề mặt mạch nhánh Hợp chất bọc không bền nhiệt độ cao Khi đun nóng mạch xoắn duỗi thẳng giải phóng phân tử iod nên dung dịch bị màu, để nguội lại tạo thành dạng ống, iod lại bị nhốt ống Vì xuất màu xanh trở lại