(Luận văn) nghiên cứu ảnh hưởng của các nguồn nitơ khác nhau lên sự sinh trưởng và năng suất của vi tảo arthrospira platensis

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH – MƠI TRƢỜNG PHẠM THỊ BÍCH LUYẾN lu an n va p ie gh tn to NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA CÁC NGUỒN NITƠ KHÁC NHAU LÊN SỰ SINH TRƢỞNG VÀ NĂNG SUẤT CỦA VI TẢO ARTHROSPIRA PLATENSIS d oa nl w an lu Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC nf va Cán hƣớng dẫn: TS PHẠM THỊ MỸ z at nh oi lm ul TS TRỊNH ĐĂNG MẬU z m co l gm @ an Lu Đà Nẵng - năm 2018 n va ac th si i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu khoa học riêng tơi Các số liệu, kết khóa luận trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Tác giả khóa luận Phạm Thị Bích Luyến lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii LỜI CẢM ƠN Khóa luận tốt nghiệp cơng trình nghiên cứu khoa học tự lực mà tơi hồn thành nghiệp học tập nghiên cứu khoa học Chính q trình thực gặp khơng khó khăn Tuy nhiên, nhờ có quan tâm, giúp đỡ từ phía gia đình, thầy bạn bè mà tơi hồn thiện đƣợc khóa luận Trƣớc hết xin cảm ơn ba mẹ ngƣời thân giúp đỡ động viên tinh thần nhƣ vật chất để tơi có tập trung hồn thành tốt đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Phạm Thị Mỹ định hƣớng, lu an động viên tơi thực khóa luận, giúp đến gần với khoa học Cảm ơn n va cô theo sát, truyền đạt kiến thức giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận tn to Tôi xin chân thành cảm ơn thầy Trịnh Đăng Mậu tận tình dạy gh cho tơi kiến thức, kĩ bổ ích mặt chuyên ngành nhƣ p ie sống, tạo điều kiện hỗ trợ suốt thời gian thực đề tài w Tôi xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô khoa Sinh – Môi trƣờng giúp oa nl trang bị kiến thức tạo điều kiện trang thiết bị, dụng cụ hóa chất để d thực tốt đề tài nghiên cứu lu nf va an Sau cùng, xin gửi lời cảm ơn đến ngƣời bạn bên cạnh, chia sẻ kiến thức hỗ trợ, giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu lm ul Tơi xin chân thành cảm ơn! z at nh oi Đà Nẵng, tháng năm 2018 Sinh viên z m co l gm @ Phạm Thị Bích Luyến an Lu n va ac th si iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài lu an Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài va n 3.1 Ý nghĩa khoa học tn to 3.2 Ý nghĩa thực tiễn ie gh CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU p 1.1 Giới thiệu chung tảo Spirulina nl w 1.1.1 Nguồn gốc đặc điểm phân loại oa 1.1.2 Đặc điểm hình thái d 1.1.3 Phân bố đặc điểm sinh thái lu nf va an 1.1.4 Cách thức sinh trƣởng, sinh sản lm ul 1.2 Các yếu tố ảnh hƣởng đến khả sinh trƣởng, phát triển tảo Spirulina z at nh oi 1.3 Vai trò ảnh hƣởng nguồn nitơ đến sinh trƣởng, phát triển Spirulina 13 1.4 Các nghiên cứu vi tảo Spirulina 16 z @ 1.4.1 Một số nghiên cứu giới 16 l gm 1.4.2 Một số nghiên cứu nƣớc 17 m co CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 an Lu 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 19 n va ac th si iv 2.2 Nội dung nghiên cứu 19 2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 19 2.4 Bố trí thí nghiệm 20 2.4.1 Bố trí nghiệm thức phịng thí nghiệm 20 2.4.2 Bố trí nghiệm thức ngồi mơi trƣờng thực nghiệm 21 2.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 20 2.5.1 Phƣơng pháp làm nhân giống Spirulina 23 2.5.2 Phƣơng pháp xác định mật độ 23 2.5.3 Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng sinh khối khô 24 lu 2.5.4 Phƣơng pháp theo dõi thông số pH, ánh sáng, nhiệt độ 24 an n va 2.5.5 Phƣơng pháp xử lí số liệu 24 3.1 Sinh trƣởng vi tảo Spirulina 25 gh tn to CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 p ie 3.2 Ảnh hƣởng nguồn amoni đến sinh trƣởng, phát triển suất Spirulina 27 oa nl w 3.3 Ảnh hƣởng nguồn ure đến sinh trƣởng, phát triển suất Spirulina 29 d 3.4 Ảnh hƣởng nguồn nitrit đến sinh trƣởng, phát triển suất Spirulina 31 nf va an lu lm ul 3.5 Ảnh hƣởng nguồn nitrat đến sinh trƣởng, phát triển suất Spirulina 33 z at nh oi 3.6 Đánh giá ảnh hƣởng nguồn nitơ đến sinh trƣởng, phát triển suất Spirulina để tối ƣu hóa mơi trƣờng ni cấy 35 z 3.7 Đánh giá khả thích ứng tảo Spirulina mơi trƣờng bổ sung ure natri nitrat làm nguồn cung cấp nitơ dƣới điều kiện sinh thái Đà Nẵng 38 gm @ m co l KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC an Lu n va ac th si v DANH MỤC BẢNG BIỂU Số hiệu Tên Trang Bảng 2.1 Khối lƣợng nguồn cung cấp nitơ (g/l) cần bổ sung 20 vào môi trƣờng tƣơng ứng với nồng độ nitơ khác Bảng 3.1 Ảnh hƣởng hàm lƣợng NH4Cl NH4NO3 đến tốc 29 độ sinh trƣởng trung bình (µ), số mật độ tối đa (ODmax) lƣợng sinh khối tối đa (DWmax) tảo Spirulina lu an Bảng 3.2 Ảnh hƣởng hàm lƣợng NaNO2 đến tốc độ sinh 33 n va trƣởng trung bình (µ), số mật độ tối đa (ODmax) tn to lƣợng sinh khối tối đa (DWmax) tảo Spirulina Bảng 3.3 Ảnh hƣởng hàm lƣợng NaNO3 đến tốc độ sinh ie gh 35 p trƣởng trung bình (µ), số mật độ tối đa (ODmax) nl w lƣợng sinh khối tối đa (DWmax) tảo Spirulina Bảng 3.4 Ảnh hƣởng nguồn nitơ khác với nồng độ oa 37 d 25% lên khả sinh trƣởng, suất Spirulina an lu Bảng 3.5 Cƣờng độ ánh sáng nhiệt độ vào khoảng thời nf va 41 gian khác ngày theo dõi suốt trình nuôi z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si vi DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ Số hiệu Tên Trang Hình 1.1 Sự khử nitrat đồng hóa (Theo Prescott cs, 2005) 14 Hình 1.2 Con đƣờng đồng hóa ammonia (Theo Prescott cs, 15 2005) Cố định ammonia nhờ glutamine synthetase Hình 1.3 15 glutamate synthase (Theo Prescott cs, 2005) lu an Hình 2.1 Sơ đồ thí nghiệm 22 Hình 3.1 Đƣờng cong sinh trƣởng Spirulina 25 Hình 3.2 Phƣơng trình tƣơng quan mât độ quang (OD) 26 va n khối lƣợng khô tảo Spirulina gh tn to Đƣờng cong sinh trƣởng Spirulina ni Hình 3.3 28 p ie môi trƣờng bổ sung muối amoni với hàm lƣợng Đƣờng cong sinh trƣởng Spirulina nuôi mơi 30 nl w Hình 3.4 khác nhau: a) NH4Cl; (b) NH4NO3 d oa trƣờng bổ sung (NH2)2CO hàm lƣợng khác Đƣờng cong sinh trƣởng Spirulina ni mơi 32 an lu Hình 3.5 Đƣờng cong sinh trƣởng Spirulina nuôi môi 34 lm ul Hình 3.6 nf va trƣờng bổ sung NaNO2 hàm lƣợng khác Hình 3.7 z at nh oi trƣờng bổ sung NaNO3 hàm lƣợng khác Đƣờng cong sinh trƣởng Spirulina nuôi môi 36 trƣờng bổ sung nguồn nitơ khác hàm lƣợng gm @ Hình 3.8 z 25% Đƣờng cong sinh trƣởng Spirulina với bổ sung 39 l co nguồn cung cấp nitơ (NH2)2CO NaNO3 Năng suất sinh khối khô Spirulina với nguồn m Hình 3.9 an Lu cung cấp nitơ khác 40 n va ac th si vii Hình 3.10 Cƣờng độ ánh sáng nhiệt độ theo dõi suốt q 41 trình ni cấy lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Ngày nay, với phát triển khoa học cơng nghệ, nhu cầu chăm sóc sức khỏe ngƣời ngày đƣợc trọng Con ngƣời khơng ngừng tìm cách đa dạng hóa sản phẩm, nâng cao chất lƣợng thực phẩm theo hƣớng phát triển bền vững, thân thiện với môi trƣờng việc tìm kiếm sản phẩm có nguồn gốc từ thiên nhiên, có giá trị dinh dƣỡng giá trị sinh học cao nhằm đáp ứng yêu cầu ngƣời Vừa thức ăn, lu vừa dƣợc phẩm chữa bệnh, tảo Arthrospira platensis thức đƣợc Cục an n va quản lý Thực phẩm Dƣợc phẩm Hoa Kì (FDA) cơng nhận tn to lựa chọn hàng đầu đƣợc giới công nhận nguồn thực phẩm giá trị [28] p ie gh Arthrospira platensis đƣợc biết đến với tên gọi Spirulina, lồi w tảo lam có giá trị dinh dƣỡng cao Các sản phẩm từ tảo có chứa oa nl đầy đủ thành phần nhƣ vitamin (B12, beta - caroten, xanthophyll ), chất d khoáng, acid béo thiết yếu acid amin (lysine, methyonin, triptophan, ) lu an giúp tăng cƣờng sức khỏe cho ngƣời [39] Các nghiên cứu rằng, nf va tảo Spirulina hàm lƣợng protein đạt khoảng 56-77% trọng lƣợng khơ, lm ul cao thịt bị cá (15-25%), đậu tƣơng (35%), bột sữa (35%), đậu phộng z at nh oi (25%), trứng (12%), ngũ cốc (8-14%) [13], [20] Tỉ lệ tiêu hoá hấp thu protein Spirulina cao (85-95%) khơng chứa cellulose thành tế bào [10], [30] Nghiên cứu nhà khoa học rằng, z gm @ cần cung cấp khoảng 36 g Spirulina hàng ngày đáp ứng đầy đủ 100% nhu cầu acid amin, dinh dƣỡng thiết yếu cho ngƣời trƣởng thành [36] l co Chính vậy, Spirulina đƣợc chọn nguồn dinh dƣỡng tối ƣu việc m phòng chữa chứng bệnh suy dinh dƣỡng trẻ em nhƣ bệnh an Lu “kwashiorkor” (gây hệ tiêu hoá trẻ bị tổn thƣơng) hay đƣợc dùng n va ac th si thực phẩm đặc biệt cho ngƣời bị bệnh HIV [30] [40] Tổ chức Y tế giới (WHO/OMS) công nhận tảo Spirulina thực phẩm bảo vệ sức khỏe tốt loài ngƣời kỉ 21 [34] Chính lợi ích to lớn mà tảo Spirulina đƣợc nuôi nhiều nơi giới để thu sinh khối, tạo sản phẩm mang lại giá trị dinh dƣỡng cao phục vụ cho ngƣời [10] Tuy nhiên, để nuôi Spirulina đạt đƣợc hiệu chất lƣợng cao cần phải quan tâm, xem xét nhiều yếu tố, yếu tố dinh dƣỡng đƣợc xem quan trọng Trong nghiên cứu 25% tổng suất tảo Spirulina liên quan lu an đến môi trƣờng ni cấy, chúng đóng vai trị nguồn cung cấp chất dinh va n dƣỡng cho toàn q trình sinh lý – hóa tế bào tảo, đặc biệt tn to nitơ [19] Nitơ vừa có vai trị cấu trúc, vừa thành phần tham gia vào ie gh trình trao đổi chất lƣợng tảo [19] Trong nuôi trồng Spirulina p ngƣời ta thƣờng bổ sung thêm nitơ vào môi trƣờng dƣới dạng muối nitrate nl w (NaNO3) Tuy nhiên NaNO3 có giá thành cao làm tăng chi phí đầu tƣ nên d oa ảnh hƣởng đến hiệu kinh tế nuôi tảo Mặt khác theo nhiều nhà khoa an lu học giới Spirulina có khả hấp thụ đa dạng nguồn nitơ nf va khác [24], nghiên cứu thay muối NaNO3 hợp chất cung cấp nitơ khác vấn đề đƣợc quan tâm lm ul Xuất phát từ sở trên, thực đề tài “Nghiên cứu ảnh z at nh oi hƣởng nguồn nitơ khác lên sinh trƣởng suất vi tảo Arthrospira platensis” z Mục tiêu đề tài @ gm - Xác định đƣợc nguồn nitơ thích hợp bổ sung vào mơi trƣờng nuôi để co l tảo Spirulina sinh trƣởng, phát triển cho suất tốt an Lu sinh trƣởng suất tảo Spirulina m - Xác định đƣợc nồng độ tối ƣu nguồn nitơ cung cấp để tăng tốc độ n va ac th si 41 phần làm ảnh hƣởng đến đƣờng cong sinh trƣởng tảo làm cho mật độ tảo đột ngột giảm Nhiệt độ (oC) Ánh sáng (X100lux) 40 35 1000 30 800 Nhiệt độ (oC) lu Ánh sáng (X100) 1200 25 20 600 15 an 400 va 10 n 200 tn to gh 7h-9h 10h-12h 13h-15h 16h-18h p ie w Hình 3.10 Cường độ ánh sáng nhiệt độ theo dõi suốt oa nl trình ni cấy d Bảng 3.5 Cường độ ánh sáng nhiệt độ vào khoảng thời gian lu nf va an khác ngày theo dõi suốt q trình ni Cƣờng độ ánh sáng (X100lux) lm ul Thời Nhiệt độ (oC) Khoảng dao gian Trung bình 7h-9h 250,5 ± 28,75 10h-12h 1003,1 ± 12,91 13h-15h 994,85 ± 22,34 645 - 1003 16h-18h 532,4± 19,4 248 - 824 Khoảng dao Trung bình z at nh oi động động 29,6 ± 0,5 28 - 31 976 - 1014 32,2 ± 1,75 30 - 37 31,3 ± 1,2 30 - 36 27 ± 0,7 24 - 29 z 181 - 644 co l gm @ m (Số liệu biểu thị theo dạng mean ± SD, n = 32) an Lu n va ac th si 42 Trong suốt q trình ni, có xuất số ngày có mƣa ( ngày nuôi thứ 6, 7, 25, 26) gây tác động đến sinh trƣởng tảo, thấy qua đƣờng cong sinh trƣởng hình Hầu hết thời gian chiếu sáng dao động từ 10 – 12h/ngày với cƣờng độ nằm khoảng 22100 – 101500 lux, nhiệt độ ngày dao động từ 27 – 34oC, buổi tối nhiệt độ nằm vào khoảng 25 – 26oC nằm ngƣỡng thích ứng Spirulina platensis [41] Kết thu đƣợc sau q trình ni dƣới điều kiện thực nghiệm cho thấy sử dụng (NH2)2CO nhƣ môt nguồn cấp nitơ cho tảo nhƣ nguồn NaNO3 truyền thống Tuy nhiên hàm lƣợng (NH2)2CO cung cấp phải lu an thấp 25% (NH2)2CO với hàm lƣợng thấp cho Spirulina platensis làm va n giảm tác dụng ức chế amoniac Bên cạnh đó, lƣợng Urê cung cấp nên tn to đƣợc kiểm soát cẩn thận trình canh tác Urê đƣợc thủy phân ie gh thành Amoniac điều kiện kiềm Mặt khác, sục khí đƣợc áp dụng p nghiên cứu để tăng tốc độ dịng chảy cao khắc phục đƣợc đồng d oa nl w hóa amoniac nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ  Kết luận Trên sở kết thu đƣợc, rút đƣợc kết luận sau đây: Khảo sát ảnh hƣởng nguồn nitơ amoni, ure, nitrit, nitrat dƣới nồng độ cung cấp khác (25%, 50%, 75%, 200%) Kết cho thấykhi cung cấp nitơ vào môi trƣờng nuôi cấy nồng độ 25% tất nghiệm thức cho kết sinh trƣởng, phát triển tốt Tiến hành nghiên cứu so sánh ảnh hƣởng nguồn nitơ khác lu an để chọn nguồn cung cấp nitơ tối ƣu nhận thấy nghiệm thức n va bổ sung ure tảo có khả sinh trƣởng, phát triển thấp nhất, tn to nghiệm thức cịn lại kết chênh lệch không đáng kể Tuy nhiên, xét lớn p ie gh khía cạnh kinh tế sử dụng ure để làm cung cấp nitơ qui mơ w Bố trí nghiên cứu ni thử nghiệm tảo dƣới điều kiện sinh thái Đà oa nl Nẵng với nguồn cung cấp nitơ ure nitrat Kết nghiên cứu cho thấy d khả sử dụng nguồn ure để thay cho nguồn natri nitrat truyền thống lu nf va an ni tảo Spirulina giúp giảm chi phí cho q trình nuôi mà không gây giảm hiệu suất nuôi trồng nhiều so với cách nuôi trồng sử dụng natri Kiến nghị z at nh oi  lm ul nitrat trƣớc Ở nghiên cứu ngừng lại với việc khảo sát ảnh z hƣởng nguồn nitơ lên sinh trƣởng suất Spirulina @ gm cần tiếp tục nghiên cứu ảnh hƣởng tới chất lƣợng sản phẩm tảo sau m co l thu hoạch đƣợc đặc biệt nguồn (NH2)2CO an Lu n va ac th si 44 Để ni trồng thành công tảo Spirulina thành phố Đà Nẵng cần phải tiếp tục nghiên cứu sâu tối ƣu hóa điều kiện ni cấy, quy trình cơng nghệ nuôi cấy lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 45 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tài liệu Tiếng Việt Nguyễn Lân Dũng Bùi Việt Hà (2009), Sinh trưởng phát triển vi sinh vật, Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học, tr 1–9 Trần Thị Lê Trang (2016), “Effect of light intensity on growth, protein and lipid content of Spirulina platensis (Geitler, 1925) culture in seawater”, Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản 2, tr 124–129 Trần Thị Lê Trang Trần Văn Dũng (2013), “Ảnh hƣởng mức photpho khác lên sinh trƣởng, hàm lƣợng protein lipid lu an tảo Spirulina platensis (Geitler, 1925) nuôi nƣớc mặn”, Nghiên va n cứu trao đổi Trƣờng Đại học Nha Trang, tr 58–63 tn to Trƣơng Văn Lung (2004), Công Nghệ Sinh Học Một Số Loài Tảo Kinh Trần Thị Lê Trang (2013), "Ảnh hƣởng mức nitơ khác lên p ie gh Tế, NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, tr 141 nl w sinh trƣởng, hàm lƣợng protein lipid tảo Spirulina platensis d oa (Geitler, 1925) ni nƣớc mặn”, Tạp chí Khoa học Trường Đại an lu học Cần Thơ, Nông nghiệp, Thủy sản Công nghệ Sinh học 26 nf va (2013), tr 180-187 Nguyễn Văn Anh Hoàng Thị Kim Hoa (2015), “Phƣơng pháp phân lm ul lập giữ giống tảo Spirulina”, Viện ứng dụng Công nghệ z at nh oi  Tài liệu Tiếng Anh A Vonshak, A Abeliovich, S Boussiba, S Arad, and A Richmond z (1982), “Production of Spirulina biomass: Effects of environmental @ gm factors and population density,” Biomass 2(3), pp 175–185 Aiba S and Ogawa T (1977), “Lit: modified from Assessment of co l m growth yield of a blue-green algae”, Culture collection of Cryophilic an Lu Algae 102, p 179-182 n va ac th si 46 Aji P and Mohamad D (2012), “Drying Spirulina with Foam Mat Drying at Medium Temperature”, Internat J of Sci and Eng 3(2):1-3, pp 1–3 10 Anupama and Ravindra P (2000), "Value-added food: Single cell protein", Biotechnology Advances 18 (6), pp 459-479 Azov Y (1976), “Toxicity of Ammonia to Algae in Sewage Oxidation 11 Ponds”, Applied and environmental microbiology 31(6), pp 801–806 Azov Y and Goldman J C (1982), “Free Ammonia Inhibition of Algal 12 Photosynthesis in Intensive Culturest”, Applied and Enviromental lu an Microbiology 43(40, pp 735-739 va n 13 Belay A (2002), 27-48, "The Potential Application of Spirulina to tn (Arthrospira) Spirulina as a Nutritional and Therapeutic Supplement in pp 27-48 p ie gh Health", The Journal of the American Nutraceutical Association 5(2), Biosci I J, Saadatmand S and Zamani M (2015), “Investigating the nl w 14 d oa effect of different concentrations of nitrate and phosphate on the an lu quantity of mycosporine like amino acids production and growth in 69 lm ul 15 nf va Spirulina platensis”, International Journal of Biosciences 6(5), pp 63- Cruz-Martínez L C, Jesus C K C, Matsudo M C, Danesi E D G, z at nh oi Sato S, and Carvalho J C M (2015), “Growth and composition of Arthrospira (spirulina) platensis in a tubular photobioreactor using z ammonium nitrate as the nitrogen source in a fed-batch process,” @ Danesi E D G, Rangel-Yagui C D O, De Carcalho J C M and Sato S co l 16 gm Brazilian Journal of Chemical Engineering 32(2), pp 347–356 m (2002), “An investigation of effect of replacing nitrate by urea in the an Lu growth and production of chlorophyll by Spirulina platensisi”, Biomass n va ac th si 47 and Bioenergy 23(4), pp 261-269 17 Edis K E (2012), "Earth Food Spirulina (Arthrospira): Production and Quality Standarts", Food Additive, Prof Yehia El-Samragy (Ed.), pp.195-202 18 El-Kassas H Y, Heneash A M M and Hussein N R (2015), “Cultivation of Arthrospira (Spirulina) platensis using confectionary wastes for aquaculture feeding”, J Genet Eng Biotechnol.vol 13(2), pp 145–155 Fagiri Y M A F, Salleh A and El-Nagerabi, S A F (2013), “Impact 19 lu an of physico-chemical parameters on the physiological growth of va n Arthrospira (Spirulina) platensis exogenous strain UTEXLB2340”, to tn African Journal of Biotechnology 12(35), pp 5458–5465 Falquet J (2006), "The nutritional aspects of Spirulina", Antenna Technologies, pp.1–25 p ie gh 20 FAO (2008), FAO Fisheries and Aquaculture Circular, FAO 1034, pp 1-25 d Gershwin M E and Belay A (2008), Spirulina in Human Nutrition and an lu 22 oa nl w 21 23 nf va Health, Taylor & Francis 13, pp 1-10 Hultberg M, Lind O, Birgersson G and Asp H (2017), “Use of the lm ul effluent from biogas production for cultivation of Spirulina,” z at nh oi Bioprocess Biosyst Eng 40(4), pp 625–631 24 Kevin J F and Ian B (1986), "Nitrogen sources for the growth of z marine microalgae : role of dissolved free amino acids", Arine ecology @ Madkour F F, Kamil A E W and Nasr H S (2012), “Production and co l 25 gm - progress series 34(1958), pp 281-304 m nutritive value of Spirulina platensis in reduced cost media”, Egypt J an Lu Aquat Res 38(1), pp 51–57 n va ac th si 48 26 Marrez D A, Naguib M M, Sultan Y Y, Daw Z Y and Higazy A M (2013), “Impact of Culturing Media on Biomass Production and Pigments Content of Spirulina platensis”, International Journal of Advanced Research 1(10), pp 951–961 Matsudo M C et al (2009), “Repeated fed-batch cultivation of 27 Arthrospira (Spirulina) platensis using urea as nitrogen source”, Biochemical Engineering Journal 43 (2009), pp 52–57 28 Mike A ( 2005), "Superfoods for optimum health: chlorella & Spirulina", pp 41 lu an 29 Mohd S B Y, Mohamed A N, Ahmad I U and Hishamuddin O va n (2017), “Impact of different nitrogen sources on the growth of tn to Arthrospira sp PCC 8005 under batch and continuous cultivation – A 30 Ngo-Matip M.E et al (2015), "Impact of daily supplementation of p ie gh biochemi ”, Bioresource Technology November nl w Spirulina platensis on the immune system of naïve HIV-1 patients in d oa Cameroon : a 12-months single blind , randomized , multicenter Nguyet V T, Kim D D and Chuyen N H (2017), “Experimental nf va 31 an lu trial", Nutrition Journal 14(70), pp 1-7 cultivation of Spirulina platensis using my an mineral water , Thua lm ul Thien Hue province”, Vietnam Journal of Science and Technology 55 32 z at nh oi (5), pp 548-556 Paper C et al (2015), “Cultivation of A platensis Based on The z Optimum Concentrations of Urea and Triple Super Phosphate , @ co Parker J and Parker P (2004), Spirulina, Department de Ingenieria, pp m 33 l Ekologi Malaysia 2015 gm Ammonium S ”, Putrajaya International Convention Centre, Seminar an Lu 116 n va ac th si 49 Patrick S, Baert P and Bosteels T (2015), “Manual on the Production 34 and Use of Live Food for Aquaculture”, FAO Fisheries Technical, pp 361 Rago L et al (2017), “Influences of dissolved oxygen concentration on 35 biocathodic microbial communities in microbial fuel cells”, Bioelectrochemistry 116, pp 39–51 Remy F, Christophe L and Guy D (1997), “Melissa: Nitrogen sources 36 for growh of the cyanobacterium Spirulina”, Institut de Biotechnologie des plantes, pp 909 lu an 37 Robert Henrikson (2010), Spirulina World Food, The United States of va n American, pp 2-175 tn to Ruma A.S and Sudhakar K (2017), "Spirulina – From growth to 38 product: A review", Trends in Food Science and Technology 69(10), pp 157-171 p ie gh nutritional Santos S, Seno L, Converti A, Sato S, Carlos J and Carvalho M D nl w 39 d oa (2011), “Bioresource Technology Influence of ammonium sulphate an lu feeding time on fed-batch Arthrospira ( Spirulina ) platensis cultivation nf va and biomass composition with and without pH control”, Bioresource Technology 102(11), pp 6587–6592 lm ul 40 Shahmen M et al (2016), “Different Nitrogen Sources Effects on the z at nh oi Growth and Productivity of Spirulina Grown In Outdoor Conditions”, Acta Biologica Malaysiana 5(1), pp 16-26 Shi W et al (2016), “Investigation of main factors affecting the growth z 41 @ Torre P, Sassano C E N, Sato S, Converti A, Gioielli L A and co l 42 gm rate of Spirulina”, Opt – ScienceDirect Optik 127(16), pp 6688–6694 m Carvalho J C M (2003), “Fed-batch addition of urea for Spirulina an Lu platensis cultivation: Thermodynamics and material and energy n va ac th si 50 balances,” Enzyme Microbiology Technology 33(5), pp 698–707 43 Vonshak A (2002), Physiology, cell - biology and Biotechnology, Taylor & Francis, pp 233 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si PHỤ LỤC lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu Hình Bảng cơng thức Zarrouk (Aiba, S & Ogawa, T (1977) với bổ sung Schlosser (1994)) [8] n va ac th si lu an va n a tn to b ie gh Hình Bố trí thí nghiệm p a Trong điều kiện phịng thí nghiệm d oa nl w b Ngồi mơi trƣờng thực nghiệm nf va an lu b z at nh oi lm ul a Hình Làm nhân giống z a Làm giống môi trƣờng thạch @ m co l gm b Nhân giống tảo (trong can nhựa 5l) an Lu n va ac th si c b a lu an n va p ie gh tn to nl w e d oa d an lu Hình Các thiết bị dùng để theo dõi thông số sinh trƣởng, suất nf va a Nhiệt kế đo nhiệt độ môi trƣờng b Máy đo cƣờng độ ánh sáng LX – 101 lm ul c Máy đo pH Mettler Toledo S220-K z at nh oi d Máy quang phổ UV-Vis UVD-2950 (Labomed, Inc, Mỹ) e Hệ thống hút chân không z m co l gm @ an Lu n va ac th si a c b d lu an n va to gh tn Hình Sự thay đổi Spirulina p ie Môi trƣờng nuôi bổ sung NH4Cl: (a) Sau ngày nuôi; (b) Sau 10 ngày nuôi b d nf va an lu a oa nl w Môi trƣờng nuôi bổ sung NH4NO3: (c) Sau ngày nuôi; (d) Sau 10 ngày nuôi z at nh oi lm ul z Hình Sự thay đổi Spirulina môi trƣờng bổ sung (NH2)2CO gm @ (a) Sau ngày nuôi; (b) Sau 10 ngày nuôi m co l an Lu n va ac th si a b Hình Sự thay đổi Spirulina môi trƣờng bổ sung NaNO2 (a) Sau ngày nuôi; (b) Sau 10 ngày nuôi a b lu an n va tn to ie gh Hình Sự thay đổi Spirulina môi trƣờng nuôi bổ sung NaNO3 p (a) Sau ngày nuôi; (b) Sau 10 ngày nuôi b d oa nl w a nf va an lu z at nh oi lm ul c z l gm @ m sung với hàm lƣợng 25% co Hình Sự thay đổi Spirulina nguồn nitơ khác (khi bổ an Lu (a) Sau ngày nuôi; (b) Sau 10 ngày nuôi; (c) Sau 33 ngày nuôi n va ac th si