(Luận văn) nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học một số dịch chiết của cây cà gai leo (solanum hainanense hance)

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA  lu an va n NGUYỄN THỊ VĂN THẢO tn to p ie gh Đề tài: w NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH d oa nl THÀNH PHẦN HÓA HỌC MỘT SỐ DỊCH CHIẾT nf va an lu TRONG CÂY CÀ GAI LEO (SOLANUM HAINANENSE HANCE) z at nh oi lm ul KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM z m co l gm @ an Lu Đà Nẵng, tháng năm 2018 n va ac th si ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HĨA  lu an n va hóa học số dịch chiết cà gai leo p ie gh tn to Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần d oa nl w (Solanum hainanense hance) an lu nf va KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM z at nh oi lm ul Ngành Cử nhân Hóa dược Sinh viên thực : Nguyễn Thị Văn Thảo z @ : 14CHD Giảng viên hướng dẫn : Th.S Đỗ Thị Thúy Vân m co l gm Lớp an Lu Đà Nẵng, tháng năm 2018 n va ac th si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP lu an Họ tên sinh viên : NGUYỄN THỊ VĂN THẢO Lớp : 14 CHD Tên đề tài: “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số n va Nguyên liệu, dụng cụ, thiết bị hóa chất Nguyên liệu: Thân cà gai leo Đà Nẵng – Việt Nam p ie gh tn to dịch chiết cà gai leo (Solanum Hainanense Hance)” oa nl w Dụng cụ thiết bị: Bộ chiết Soxhlet, bình cầu, cốc thủy tinh, ống đong, bếp điện, ống nghiệm, bình tam giác,bình định mức, loại pipet, cân phân tích, lị d an lu nung, tủ sấy, chén nung, bình hút ẩm, bếp cách thủy,… nf va Hóa chất: n-hexane, chloroform, ethyl acetate, thuốc thử Wagner, dung dịch Nội dung nghiên cứu Nghiên cứu lý thuyết z at nh oi 3.1 lm ul HCl, HNO3, NaOH, nước cất,…  Tìm hiểu tư liệu, sách báo nước đặc điểm, thành phần hóa z học, cơng dụng cà gai leo @ Nghiên cứu thực nghiệm m co  Xử lí nguyên liệu l 3.2 gm  Trao đổi với giáo viên hướng dẫn đặc điểm, công dụng cà gai leo an Lu  Xác định số tiêu hóa lí: độ ẩm, hàm lượng tro, hàm lượng kim loại n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp  Khảo sát thời gian chiết  Định tính  Xác định thành phần hóa học số dịch chiết cà gai leo  Thử hoạt tính sinh học từ cao chiết cà gai leo Giáo viên hướng dẫn: ThS Đỗ Thị Thúy Vân Ngày giao đề tài: 4/2017 Ngày hoàn thành: 3/2018 lu Giáo viên hướng dẫn an Chủ nhiệm khoa va n (Kí ghi rõ họ tên) (Kí ghi rõ họ tên) p ie gh tn to nl w Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày… tháng … năm 2018 d oa Kết điểm đánh giá: nf va an lu Ngày … tháng … năm 2018 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG z at nh oi lm ul (Kí ghi rõ họ tên) z m co l gm @ an Lu n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Lời em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến giáo Th.S Đỗ Thị Thúy Vân giao đề tài, hướng dẫn tận tình ln sẵn sàng giúp đỡ em suốt trình thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn thầy cô khoa, nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian học tập thực đề tài Bên cạnh đó, em xin chân thành cảm ơn thầy Nguyễn Văn Din thầy Đoàn Văn Dương tạo điều kiện cho em sử dụng phịng thí nghiệm thiết bị cần lu an thiết để em hồn thành tốt đề tài va n Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Khoa Hóa – khu D – tn to trường ĐH Bách Khoa Đà Nẵng, đài khí tượng thủy văn khu vực Trung Trung Bộ ie gh số 660 Trưng Nữ Vương, Quận Hải Châu, TP Đà Nẵng tạo điều kiện giúp đỡ em p hoàn thành đề tài nl w Trong q trình làm khóa luận, thân có nhiều cố gắng d oa bước đầu làm quen với việc nghiên cứu khoa học nên khó tránh khỏi hạn an lu chế, thiếu sót Vì em mong nhận đóng góp ý kiến q thầy nf va giáo bạn để khóa luận hồn chỉnh Đà Nẵng, ngày … tháng … năm 2017 lm ul Sinh viên z at nh oi z m co l gm @ an Lu n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN 13 MỞ ĐẦU .1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu .1 Đối tượng nghiên cứu .2 Nội dung nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu lu an 5.1 Phương pháp nghiên cứu lí thuyết .2 5.2 Phương pháp thực nghiệm n va Bố cục đề tài 1.1 Sơ lược họ Cà Solanaceae [7], [8] 1.2 Giới thiệu cà gai leo p ie gh tn to CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 Tên gọi [9] w 1.2.1 Phân loại khoa học [9] oa nl 1.2.2 Đặc điểm thực vật học [3], [10] 1.2.4 Phân bố 1.2.5 Đặc điểm sinh thái d 1.2.3 nf va an lu Phân biệt cà gai leo cà độc dược [3], [11] 1.4 Một số nghiên cứu thành phần hóa học cà gai leo [12] .7 1.5 Công dụng cà gai leo [1], [15] 10 z at nh oi lm ul 1.3 Kinh nghiệm sử dụng cà gai leo dân gian 10 1.5.2 Các nghiên cứu tác dụng cà gai leo 11 @ Các sản phẩm thuốc làm từ cà gai leo có mặt thị trường 12 gm 1.6 z 1.5.1 Nguyên liệu, hóa chất, dụng cụ 13 m co 2.1 l CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 Nguyên liệu 13 2.1.2 Thiết bị - dụng cụ 13 an Lu 2.1.1 n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 2.1.3 Hóa chất 13 2.2 Nghiên cứu thực nghiệm .14 2.3 Các phương pháp xác định tiêu hóa lí .15 2.3.1 Độ ẩm [18] 15 2.3.2 Xác định hàm lượng tro [18], [6] 16 2.3.3 Xác định hàm lượng số kim loại nặng 17 Phương pháp khảo sát điều kiện chiết hợp chất hữu từ cà gai 17 2.4 lu an 2.4.1 Cơ sở lí thuyết chung 17 2.4.2 Phương pháp chiết cà gai leo 19 2.4.3 Khảo sát thời gian chiết thích hợp dung mơi .20 Định tính nhóm hợp chất có cà gai leo [4] 20 n va 2.5 Định tính alkaloid 20 2.5.2 Định tính flavonoid .21 gh tn to 2.5.1 Định tính coumarin .21 2.5.3 ie Định tính saponin 21 p 2.5.4 Định tính đường khử .22 lu Xác định thành phần hóa học có cà gai leo .22 nf va an 2.6 Định tính poliphenol .22 d 2.5.7 Định tính steroid 22 oa 2.5.6 nl w 2.5.5 Lí thuyết chung [19] .22 2.6.2 Phương pháp xác định thành phần hóa học có 24 Thử hoạt tính kháng sinh .24 z at nh oi 2.7 lm ul 2.6.1 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 3.1 Kết xác định số tiêu hóa lý bột cà gai leo 25 z Độ ẩm 25 3.1.2 Hàm lượng tro .25 3.1.3 Xác định hàm lượng kim loại .26 co l gm Kết khảo sát thời gian chiết phương pháp chiết Soxhlet .26 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi n-hexane 26 an Lu 3.2.1 m 3.2 @ 3.1.1 n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 3.2.2 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi chloroform .27 3.2.3 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi ethyl acetate .28 3.3 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết cà gai leo 29 3.4 Kết xác định thành phần hóa học có cà gai leo 30 3.4.1 Dung môi n-hexane .30 3.4.2 Dung môi Chloroform 32 3.4.3 Dung môi Ethyl acetate .35 3.4.4 Nhận xét 37 3.5 Kết thử hoạt tính kháng sinh 38 lu KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 an va Kết luận 39 n Kiến nghị 40 p ie gh tn to PHỤ LỤC 43 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt AAS GC-MS Tên Quang phổ hấp thụ nguyên tử Sắc kí khí ghép khối phổ DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu bảng 1.1 lu STT Tên bảng Trang an n va 1.2 Phân biệt cà gai leo cà độc dược 3.1 Kết khảo sát độ ẩm thân cà gai leo 25 3.2 Kết khảo sát hàm lượng tro thân cà gai leo 25 Kết khảo sát hàm lượng số kim loại thân cà gai leo 26 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi n-hexane 26 p ie gh tn to Phân loại khoa học họ Cà Solanaceae oa nl w 3.4 3.5 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi chloroform 27 3.6 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi ethyl acetate 28 3.7 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết thân cà gai leo 10 3.8 Thành phần hoá học dịch chiết nhexane thân cà gai leo 3.3 d nf va an lu z at nh oi lm ul z @ l gm 29 m co 30 an Lu n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 11 3.9 Thành phần hoá học dịch chiết Chloroform thân cà gai leo 32 12 3.10 Thành phần hoá học dịch chiết Ethyl acetate thân cà gai leo 35 13 3.11 Kết đo hoạt tính kháng sinh 38 lu an DANH MỤC CÁC HÌNH 1.1 Thân cà gai leo 1.2 Quả cà gai leo 1.3 Hoa cà gai leo Cao dẻo hoà tan cà gai leo 12 Giải độc gan Bảo An Khang 12 Trà túi lọc cà gai leo Thân cà gai leo sau rửa sạch, phơi khô Bột cà gai leo 12 ie gh tn to Số hiệu hình p n va STT 1.4 d oa nl w Tên hình 2.2 2.3 10 3.1 11 3.2 12 3.3 13 13 Cấu tạo chiết Soxhlet Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết n-hexane thân cà gai leo Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết chloroform thân cà gai leo Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết ethyl acetate thân cà gai leo 18 31 z 2.1 z at nh oi lm ul 1.6 nf va an 1.5 lu Trang gm @ 34 co l m 36 an Lu n va ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khối lượng cao chiết (gam) Khóa luận tốt nghiệp 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.752 0.796 0.79 0.653 Khối lượng cao chiết (gam) 0.402 10 12 Thời gian chiết (giờ) Biều đồ 3.3 Ảnh hưởng thời gian chiết dung môi ethyl acetate lu an Nhận xét: Qua kết bảng 3.5 biểu đồ 3.3 ta thấy, thời gian chiết n va tăng khối lượng cao chiết thu nhiều Tuy nhiên từ đến 10 giờ, tn to khối lượng cao chiết lại tăng chậm Nguyên nhân tăng thời gian chiết, gh cấu tử có cà gai leo hịa tan dung mơi nhiều Chiết lâu hàm p ie lượng cấu tử có cao chiết tăng dẫn đến khối lượng cao chiết tăng w lên Đến lúc đó, cấu tử hịa tan gần hết dung mơi khối oa nl lượng cao chiết tăng không đáng kể có xu hướng khơng đổi Như thời d gian chiết tối ưu dung môi ethyl acetate Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết cà gai leo an lu 3.3 nf va Sử dụng mẫu dịch chiết thu sau ngâm mẫu 24 để định lm ul tính nhóm hợp chất có với dung mơi gai leo.trình bày bảng 3.7 z at nh oi Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết thân cà Bảng 3.7 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết thân z Saponin Alkaloid Kết Tạo cột bọt bền Kết tủa trắng Kết tủa nâu Kết luận sơ + Có an Lu Hiện tượng m Thuốc thử đặc hiệu Phản ứng tạo bọt Mayer Wagner co Nhóm chất l STT gm @ cà gai leo ++ + Có n va Trang 29 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp Phản ứng đóng Tạo dung dịch đục mở vòng lacton 1% NaOH Dung dịch màu vàng /ethanol Dung dịch màu đỏ H2SO4 đậm thẫm đặc Coumarin Flavonoid lu Đường khử Fehling A Fehling B Polyphenol Dung dịch FeCl3 5% Steroid + ++ Có ++ Kết tủa đỏ gạch an Dung dịch khơng chuyển sang màu xanh thẫm Thuốc thử Dung dịch chuyển Salkowski sang màu đỏ đậm (+): Phản ứng dương tính Ghi chú: Dấu Có ++ Có - Khơng có ++ Có va n (++): Phản ứng dương tính rõ tn to ie gh (+++): Phản ứng dương tính rõ p (-): Khơng có w Sơ kết luận thân cà gai leo có chứa hoạt chất: oa nl Nhận xét: d Alkaloid, Flavonoid, saponin, đường khử , steroid lu Kết xác định thành phần hóa học có cà gai leo nf va an 3.4 3.4.1 Dung môi n-hexane lm ul Bảng 3.8 Thành phần hoá học dịch chiết n-hexane thân cà gai leo TR Base m/z Area % z at nh oi Peak Name Structure 13,78 278 0,67 14,22 220 0,34 2,4-difluorobenzene, 1benzyloxy; C13H10F2O z 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol; C20H40O m co l gm @ an Lu n va Trang 30 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 16,09 256 3,44 n-hexadecanoic acid; C16H32O2 19,32 294 1,32 19,95 284 0,98 Octadecanoic acid; C18H36O2 40,94 412 1,44 Stigmasterol; C29H48O 41,68 414 2,05 𝛽 − sitosterol; C29H50O lu 9,12-octadecadienoic acid, methyl ester; C19H40O an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z gm @ Hình 3.4 Sắc kí đồ GC-MS thành phần hố học hợp chất dịch chiết n- co l hexane thân cà gai leo m Nhận xét: Qua bảng 3.8 thấy, phương pháp GC – MS an Lu định danh chất có dịch chiết n-hexane thân cà gai leo Thành phần hóa học chủ yếu có dịch chiết rễ cà gai leo axit hữu cơ, dẫn xuất n va Trang 31 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp phenol, phytosterol Các cấu tử có hàm lượng < 5% nhexadecanoic acid (3,44%), 𝛽 − sitosterol (2,05%), stigmasterol (1,44%), 9,12octadecadienoic acid, methyl ester (1,32%), octadecanoic acid (0,98%), 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (0,67%), 2,4-difluorobenzene, 1-benzyloxy (0,34%) 3.4.2 Dung mơi Chloroform Bảng 3.9 Thành phần hố học dịch chiết Chloroform thân cà gai leo TR 4,45 144 37,08 1,4-dioxane-2,5dione-3,6-dimethyl; C6H8O4 gh Base Area% m/z 6,24 89 2,97 L(+)Milchsaeure; C3H6O3 0,51 Propanoid acid – – hydroxy butyl ester; C7H14O3 lu Peak Name Structure an n va tn to p ie nl w 10,39 146 d oa 13,78 278 nf va an lu 0,82 lm ul 3,7,11,15 – tetramethyl -2hexandecen-1-ol; C20H40O 14,22 228 2,09 16,14 256 11,82 n-hexadecanoid acid; C16H32O2 z at nh oi Benzoic acid, – hydroxy-, phenylmethyl ester; C14H12O3 z m co l gm @ an Lu n va Trang 32 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 19,37 280 8,43 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z); C18H32O2 19,98 284 6,09 Octadecanoic acid; C18H36O2 29,92 200 0,47 Butyl – – methyl heptanoate; C12H24O2 323 0,59 Propionylpromazine; C20H24N2OS lu an n va p ie gh tn to 36,74 d oa nl w 10 nf va an lu 412 1,93 12 41,68 414 3,91 Stigmasterol; C29H48O z at nh oi 40,93 lm ul 11 z m co l gm @ 𝛽 − Sitosterol; C29H50O an Lu n va Trang 33 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 13 42,76 207 5-nitro-2,3-dihydro phthalazine -1,4dione; C8H5N3O4 1,39 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w lu nf va an Hình 3.2 Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết chloroform thân cà gai leo lm ul Nhận xét: Qua bảng 3.9 thấy, phương pháp GC – MS z at nh oi định danh 13 chất có dịch chiết chloroform thân cà gai leo Thành phần hóa học chủ yếu có dịch chiết rễ cà gai leo axit hữu cơ, dẫn xuất z phenol, phytosterol Các cấu tử có hàm lượng ≥ 5% bao gồm 1,4-dioxane- @ gm 2,5-dione-3,6-dimethyl (37,08%), n – hexadecanoic acid (11,82%), 9,12 – l octadecanoic acid (z,z)- (8,43%), octadecanoic acid (6,09%) Các cấu tử cịn lại có m co hàm lượng ≤ 5% bao gồm 𝛽 − Sitosterol (3,91%), L(+)Milchsaeure (2,97%), an Lu benzoic acid, – hydroxy phenylmethyl ester (2,09%), stigmasterol (1,93%), n va Trang 34 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 3.4.3 Dung môi Ethyl acetate Bảng 3.10 Thành phần hoá học dịch chiết Ethyl acetate thân cà gai leo Peak TR Base m/z 2,66 lu 211 Area % 3,37 Name Structure 2-azido-2,4,4,6,6pentamethylheptane; C12H25N3 1,2,3-propanetriol, 1-acetate; C5H10O4 117 4,42 19,32 67 9,1215,08 octadecadienoic acid (Z,Z); C18H32O2 an 3,92 n va gh tn to p ie d oa nl w lu 19,43 234 19,94 284 18,07 nf va an Cis,cis,cis-7,10,13hexadecatrienal; C16H26O lm ul 13,51 Octadecanoic acid; C18H36O2 z at nh oi z 650 m co l gm 40,51 Cholest-5-en-3-ol,9octadeceonate, (Z); C45H78O2 @ 7,27 an Lu n va Trang 35 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 40,94 412 12,60 Stigmasterol; C29H48O 41,69 332 11,88 Adrographolide; C20H30O5 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z gm @ l Hình 3.3 Sắc kí đồ GC-MS thành phần hố học hợp chất dịch chiết m co ethyl acetate thân cà gai leo an Lu Nhận xét: Qua bảng 3.10 thấy, phương pháp GC – MS định danh chất có dịch chiết ethyl acetate thân cà gai leo Thành phần n va Trang 36 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp hóa học chủ yếu có dịch chiết rễ cà gai leo axit hữu cơ, dẫn xuất phenol, phytosterol Các cấu tử có hàm lượng ≥ 5% bao gồm cis,cis,cis7,10,13-hexadecatrienal (18,07%), 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z) (15,08%), octadecanoic acid (13,51%), stigmasterol (12,60%), adrographolide (11,88%) Các cấu tử cịn lại có hàm lượng ≤ 5% bao gồm cholest-5-en-3-ol,9-octadeceonate, (Z) (7,27%), 1,2,3-propanetriol, 1-acetate (4,42%), 2-azido-2,4,4,6,6- pentamethylheptane (3,37%) 3.4.4 Nhận xét lu Từ kết thể ba bảng trên, định danh cấu tử an dịch chiết n-hexane, cấu tử dịch chiết ethyl acetate 13 cấu tử dịch va n chiết chloroform thân cà gai leo Thành phần hoá học chủ yếu acid hữu tn to n-hexandecanoic acid, octadecanoic acid, phytosterol β − ie gh sitosterol, stigmasterol, 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (hay cịn gọi p phytol) có hoạt tính sinh học cao Có thể nhận thấy so với dịch chiết n-hexane w ethyl acetate , dịch chiết chloroform cà gai leo có nhiều cấu tử oa nl hàm lượng cấu tử có hoạt tính sinh học thấp dịch chiết ethyl acetate d Stigmasterol dịch chiết chloroform chiếm 1,93% stigmasterol lu an dịch chiết ethyl acetate chiếm 12,60% Tuy nhiên dịch chiết chloroform nf va chứa cấu tử có hoạt tính sinh học stigmasterol; β − Sitosterol; 3,7,11,15 – lm ul tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (hay cịn gọi phytol), trong dịch z at nh oi chiết ethyl acetate chứa cấu tử stigmasterol Stigmasterol, β – sitosterol phyltol phytosterol có tác dụng chống oxi hóa, giảm cholesterol máu làm tăng hàm lượng chất HDL – C (high z density lipid – cholesterol) thành phần quan trọng để bảo vệ tim mạch, phòng @ gm chống xơ vữa động mạch, tăng sức đề kháng cho thể Các nghiên cứu thư tuyến tiền liệt, ung thư vú, ung thư ruột già, m co l stigmasterol chất cịn có tác dụng phịng chống ung thư ung an Lu 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (hay gọi phyltol) có tác dụng chống oxi hố, có khả loại bỏ gốc tự nguy hiểm tất n va Trang 37 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp tế bào mơ, từ DNA đến protein chất béo Ngồi phytol cịn có hoạt tính như: tổng hợp vitamin E, K, chữa rắn cắn, chống viêm nhiễm, tăng hệ miễn dịch tác nhân làm giảm phát triển ung thư buồng trứng, có khả kháng khuẩn 3.5 Kết thử hoạt tính kháng sinh Bột cà gai leo tiến hành chiết với dung môi Chloroform thời gian Cô đuổi dung môi thu cao chiết Gửi mẫu chiết tới phịng thử hoạt tính sinh học – Viện hố học, 18 – Hồng Quốc Việt – c Cầu Giấy – Hà Nội Kết thử hoạt tính kháng sinh trình bày bảng 3.11 Bảng 3.11 Kết thử hoạt tính kháng sinh lu Giá trị IC50 chủng (µg/ml) Tên Gram (+) Gram (-) Nấm mẫu Staphylococcus Bacillus Lactocillus Salmonella Escherichia Pseudomnas Candida an va n aureus subtis fermentum enterica coli aeruginosa albican p ie gh tn to Cà gai >128 >128 >128 >128 >128 >128 >128 leo Theo kết cho thấy dịch chiết cà gai leo khơng có hoạt tính kháng chủng vi sinh vật kiểm định nồng độ < 128 µg/ml d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va Trang 38 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua q trình nghiên cứu thực nghiệm, tơi thu kết sau:  Độ ẩm trung bình bột cà gai leo 8,920%  Hàm lượng tro trung bình bột cà gai leo 5.028%  Hàm lượng kim loại nặng: Pb 7,489.10-4mg/l, Cr 0,49129mg/l, As 0,60409 mg/l, Hg 0,00696 lu  Thời gian chiết tối ưu cà gai leo: Dung môi n-hexane giờ, dung an môi chloroform giờ, dung môi ethyl acetat va n  Định tính nhóm hợp chất xác định nhóm hợp chất  Bằng phương pháp GC - MS định danh thành phần hóa học số hợp chất có dịch chiết: p ie gh tn to có như: alkaloid, đường khử, steroid, flavonoid Dung môi n-hexane: n-hexadecanoic acid (3,44%), 𝛽 − sitosterol nl w ➢ oa (2,05%), stigmasterol (1,44%), 9,12-octadecadienoic acid, methyl ester (1,32%), d octadecanoic acid (0,98%), 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (0,67%), an lu 2,4-difluorobenzene, 1-benzyloxy (0,34%) nf va ➢ Dung môi Chloroform: 1,4-dioxane-2,5-dione-3,6-dimethyl (37,08%), n – lm ul hexadecanoic acid (11,82%), 9,12 – octadecanoic acid (z,z)- (8,43%), octadecanoic z at nh oi acid (6,09%) Các cấu tử lại có hàm lượng ≤ 5% bao gồm 𝛽 − Sitosterol (3,91%), L(+)Milchsaeure (2,97%), benzoic acid, – hydroxy phenylmethyl ester @ Dung môi ethyl acetate: 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z) (18,88%), (18,07%), octadecanoic acid l cis,cis,cis-7,10,13-hexadecatrienal gm ➢ z (2,09%), stigmasterol (1,93%) (13,51%), m co stigmasterol (12,60%) Các cấu tử cịn lại có hàm lượng ≤ 5% bao gồm cholest-5- azido-2,4,4,6,6-pentamethylheptane (3,37%) an Lu en-3-ol,9-octadeceonate, (Z) (7,27%), 1,2,3-propanetriol, 1-acetate (4,42%), 2- n va Trang 39 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp Kiến nghị  Tiếp tục nghiên cứu chiết tách thành phần hóa học cà gai leo dung mơi chiết khác để tìm dung môi tối ưu  Tiếp tục nghiên cứu chiết tách phân lập cấu tử có hoạt tính sinh học cao có cà gai leo để ứng dụng vào cơng tác chăm sóc sức khỏe  Khảo sát hoạt tính sinh học cà gai leo  Tiếp tục nghiên cứu cà gai leo địa phương khác lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va Trang 40 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y Tế (2010), Dược Điển Việt Nam IV, NXB Y học, Hà Nội [2] Bộ Y tế (2011), “Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia giới hạn ô nhiễm kim loại nặng thực phẩm”, tr 4-8 Đỗ Tất Lợi (2003), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà [3] Nội, tr 546 Nguyễn Kim Phụng (2007), Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, NXB ĐH [4] lu Quốc Gia TP.HCM, tr 80-148 an Nguyễn Cẩm Hà (2014), “Nghiên cứu sàng lọc squalene từ số chủng vi [5] va n tảo biển phân lập Việt Nam”, Luận văn thạc sĩ Sinh học, tr – 11 tn to Trường Cao đẳng Nguyễn Tất Thành (2009), Giáo trình thực hành [6] ie gh trường Đại học Nguyễn Tất Thành, Khoa dược, tr 7-9 p Internet https://en.wikipedia.org/wiki/Solanaceae oa nl w [7] http://www.botanyvn.com/cnt.asp?param=edir&v=Solanaceae&list=familia [9] http://www.botanyvn.com/cnt.asp?param=edir&v=Solanum%20procumbens d [8] nf va an lu &list=s pecies http://camnangcaytrong.com/cay-ca-gai-leo-cd48.html [11] https://vi.wikipedia.org/wiki/C%C3%A0_%C4%91%E1%BB%99c_d%C6% B0%E1%BB%A3c [12] z at nh oi lm ul [10] http://thaoduocminhtam.com/cay-thuoc-vi-thuoc/ca-gai-leo- z gm @ solanumprocumbens-lour.html http://tratruongsinhthang.com/tam-quan-trong-cua-alkaloid-trong-duoc-lieu [14] https://vi.wikipedia.org/wiki/Ancaloit [15] http://www.cagaileo.vn/tac-dung-cua-cay-ca-gai-leo-1.html m co l [13] an Lu n va Trang 41 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp [16] http://thaoduoccagaileo.com/vi/2016/06/13/suu-tam-bo-xung-cong-dung- itduoc-nhac-toi-cua-ca-gai-leo/ [17] http://agarwood.org.vn/ca-gai-leo-chua-viem-gan-110.html [18] http://www.vietpaper.com.vn/cong-nghe/274-xac-nh m phng-phap-sy- khotcvn-18672001.html [19] www.impe-qn.org.vn/impe- qn/vn/portal/InfoDetail.jsp?area=58&cat=1092&ID=2115 [20] http://suckhoe.vnexpress.net/tin-tuc/khoe-dep/tham-my/tinh-chat-tu-hoa- cucgiup-bao-ve-da-2327159.html lu an n va [21] https://en.wikipedia.org/wiki/Stigmasterol [22] https://hellobacsi.com/thuoc/beta-sitosterol/ p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va Trang 42 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp PHỤ LỤC Kết đo hoạt tính kháng sinh lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va Trang 43 ac th SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo si