(Luận văn) nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết etyl acetate của hạt muồng hoàng yến tại đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA HỌC BÙI TẤN MẾN lu an n va tn to p ie gh NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG DỊCH CHIẾT ETYL ACETATE CỦA d oa nl w HẠT MUỒNG HOÀNG YẾN TẠI ĐÀ NẴNG nf va an lu z at nh oi lm ul KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC z m co l gm @ an Lu n va Đà Nẵng- Năm 2018 ac th si ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA HỌC lu NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO an n va ETHYL ACETATE TÁCH TỪ TỔNG CAO ETHANOL CỦA p ie gh tn to HẠT MUỒNG HOÀNG YẾN TẠI ĐÀ NẴNG oa nl w d KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC nf va an lu Sinh viên thực : 14CHD z at nh oi lm ul Lớp : Bùi Tấn Mến Giáo viên hướng dẫn : TS Trần Mạnh Lục z m co l gm @ an Lu Đà Nẵng-Năm 2018 n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu kết nêu khóa luận tốt nghiệp trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả khóa luận tốt nghiệp lu Bùi Tấn Mến an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐHSP Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Bùi Tấn Mến Lớp : 14CHD lu Tên đề tài: Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học dịch chiết etyl acetate hạt Muồng hoàng yến Đà Nẵng an n va Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị tn to - Nguyên liệu: Qủa muồng hoàng yến thu hái Đà Nẵng p ie gh - Dụng cụ, thiết bị: chiết chưng ninh, bình lắc, cột sắc kí, phễu chiết, ống đong, cốc, cân phân tích, bếp cách thủy, tủ sấy,… w Nội dung nghiên cứu d oa nl - Chiết mẫu phương pháp chưng ninh với Ethanol an lu - Chiết phân bố dung môi Ethyl acetate nf va - Xác định sơ thành phần hóa học dịch chiết phương pháp định tính lm ul - Xác định thành phần hóa học dịch chiết phương pháp GC – MS z at nh oi Giáo viên hướng dẫn: TS Trần Mạnh Lục Ngày giao đề tài: 06/06/2016 z m co l gm @ Ngày hoàn thành: 21/04/2018 an Lu n va ac th si Chủ nhiệm khoa Giáo viên hướng dẫn PGS.TS Lê Tự Hải TS Trần Mạnh Lục Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày 24 tháng 04 năm 2018 Kết điểm đánh giá:…… Đà Nẵng, ngày … tháng … năm 2018 lu an CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS : Atomic Absorption Spectrophotometric GC : Gas Chromatography MS : Mass Spectrometry STT : Số thứ tự TCCS : Tiêu chuẩn sở TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Tên hóa chất sử dụng 20 Bảng 2.2 Một số dung môi chạy sắc kí mỏng 32 Bảng 3.1 Khối lượng cao chiết cao nước 44 Bảng 3.2 Thành phần hóa học phân đoạn cao etanol .45 Bảng 3.3 Thành phần nhóm chức cao chiết etyl acetate .47 Bảng 3.4 Tổng hợp kết định tính thành phần hóa học hạt Osaka .51 Bảng 3.5 Kết GCMS cao etyl acetate .52 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cassia grandis L Fl Cochinch [33] Hình 1.2 Cassa javanica L Holdridge & Poveda [35] Hình 1.3 Cassia fistulosa L K Larsen (Liên Chiểu, Đà Nẵng 6/2016) 10 Hình 1.4 Hexadecanoic acid; physcion; kaempferol 12 Hình 1.5 (-) epiafzelechin; (-) epicatechin; procyanidin B2 12 Hình 1.6 Rhamnetin-3-O-gentiobioside 13 Hình 1.7 3-formyl-1-hydroxy-8-methoxy-anthraquinone 13 Hình 1.8 1-hexacosanol; 1-octacosanol; Isovanillic acid .15 lu an Hình 1.9 Một số hợp chất phân lập từ Muồng hồng yến .16 n va Hình 1.10 Hai hợp chất phân lập từ dịch chiết EtOAc trái mai 17 tn to Hình 1.11 Công thức cấu tạo hai hợp chất Kaempferol, Liquiritigenin 17 gh Hình 2.1 Cây Muồng hồng yến Liên Chiểu, Đà Nẵng (6/2016) 19 p ie Hình 2.2 Ngun liệu hạt Muồng hồng yến tươi 20 w Hình 2.3 Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm 22 oa nl Hình 2.4 Dịch chiết ethanol hạt Muồng hoàng yến sau lần chiết .23 d Hình 2.5 Dịch chiết etyl acetate cao chiết tương ứng 24 lu an Hình 2.6 Bản mỏng silicagel 32 nf va Hình 2.7 Bình triển khai dạng hình khối trụ có nắp đậy 33 lm ul Hình 2.8 Kết chạy sắc kí mỏng với dung môi hexane; chloroform, dichlomethane, ethyl acetate (từ trái sang phải) 34 z at nh oi Hình 2.9 Kết chạy sắc kí mỏng với hệ dung hexan: ethyl acetate = 3:7, 4:6,5:5;6:4;7:3;8:2 (từ trái sang phải) 34 z Hình 2.10 Cột sắc kí cao etyl acetate .37 @ gm Hình 2.11 Sơ đồ phân lập phân đoạn từ cao chiết etyl acetate 38 l Hình 2.12 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHYC.EI1 với dung môi m co (benzene, hexan, etyl acetate, diclo metane, chloroform) 39 an Lu Hình 2.13 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHY.EI1 với hệ dung môi chloroform: benzene 40 n va ac th si Hình 2.14 Sắc kí cột phân đoạn MHY.EI1 40 Hình 2.15 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHYC.EI12 với dung môi ( hexan,benzene, etyl acetate, diclo metane, chloroform) 41 Hình 2.16 Sắc kí cột phân đoạn MHY.EI12 41 Hình 2.17 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHYC.EII11 với dung môi ( hexan,benzene, etyl acetate, diclo metane, chloroform) 42 Hình 2.18 Sắc kí cột phân đoạn MHY.EIII1 43 Hình 2.19 Sắc kí lớp mỏng với sáu dung mơi đơn (hexane:benzene:diclometan:chloroform:etyl acetate:acetone) 43 lu Hình 3.1 Chiết lỏng–lỏng với dung môi etyl acetate qua ba lần chiết 44 an Hình 3.2 Sắc ký đồ GC phân đoạn cao etanol 45 va n H nh 3.3 ết chạ sắc ký ản mỏng với hệ dung môi he an eth l acetate nm 55 tn to 3:7, 4:6 , 5:5 ,6:4, 7:3, 8:2 (từ trái qua phải ước s ng gh Hình 3.4 Các vết chất mỏng lọ LI.11 đến lọ LI.32 ( phân p ie đoạn I) .55 w Hình 3.5 Các vết chất mỏng lọ LI.33 đến LI.57( phân đoạn oa nl II ) 56 d Hình 3.6 Các vết chất mỏng lọ LI.185 đến lọ LI.200(trong phân lu an đoạn III) .56 nf va Hình 3.7 Các vết chất mỏng phân đoạn EI1(LI.1-LI.32), EI2(LI.2- lm ul LI.146), E3(LI.147-LI.200), EI4 .57 z at nh oi Hình 3.8 Cột sắc ký (d=1.5 cm, h=45 cm) 57 Hình 3.9 Các vết chất mỏng lọ phân đoạn 58 Hình 3.10 Kết chấm mỏng phân đoạn .58 z Hình 3.11 Các vết chất mỏng lọ LIII.1 đến LIII.151 thể @ gm vài phân đoạn .59 co l Hình 3.12 Chấm phân đoạn EIII1,EIII2,EIII3 59 Hình 3.13 thử dung mơi đơn c tính phân cực tang dần từ hexane, benzene, m an Lu diclometane, chloroform, etyl acetate 60 Hình 3.14 Hình thể phân đoạn lọ từ LIV.1 đến LIV.91 60 n va ac th si Hình 3.15 Sắc kí mỏng phân đoạn EIV1 với hệ dung môi khác theo thứ tự(benzene, diclometan, hexane:etyl acetate = 4:6) 61 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 61 Hình 3.16 Sắc kí mỏng phân đoạn EIV1 với hệ dung môi khác theo thứ tự(benzene, diclometan, hexane:etyl acetate = 4:6) * Nhận xét: lu an Kết hình 3.26 cho thấy phân đoạn EIV1 tinh khiết có chất va khơng bị kéo vệt , chấm trịn,sang n Sắc kí đồ GC phân đoạn EIV1 thể hình 3.17 p ie gh tn to 3.5 Kết định danh thành phần hóa học chất phân đoạn EIV1 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z gm @ co l Hình 3.17 Sắc ký đồ GC phân đoạn cao EIV1 m Thành phần hóa học phân đoạn cao EIV1 định danh trình bày an Lu bảng 3.6 n va ac th si 62 Bảng 3.6 Thành phần hóa học phân đoạn cao EIV1 Stt lu Diện Tên gọi Công thức cấu tạo gian tích lưu peak (phút) (%) 6.391 20.67 Dodecane 8.465 23.57 tetradecane 10.688 12.28 Hexadecan 12.781 11.22 1-Nonadecene an Thời n va gh tn to p ie d oa nl w an lu Từ kết bảng 3.6 cho thấy phương pháp GC-MS định danh cấu tử tetradecane (23.57%) nf va cao EIV1 Các cấu tử có hàm lượng cao > 20% Dodecane (20.67%), z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 63 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua trình nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học hạt Muồng hoàng yến thu hái Liên Chiểu-Đà Nẵng, đề tài thu kết sau: Tìm số lần chiết tối ưu cho trình chiết tách số hợp chất từ hạt Muồng hoàng yến phương pháp chiết kiệt với loại dung môi sau: lu Ethanol ( lần thứ 3), etyl acetate (lần thứ 3) an Bằng phương pháp sắc ký khí kết hợp khối phổ xác định số thành va n phần hóa học dịch chiết từ hạt Muồng hoàng yến Từ dịch chiết: etyl tn to acetate định danh tổng số 10 cấu tử, bao gồm acid hữu cơ, ester, ie gh steroid, dẫn xuất phenol, flavonoid Trong dịch chiết có chung số cấu tử p hàm lượng cao gồm β-sitosterol; n-Hexadecanoic acid; Hexadecanoic acid, ethyl nl w ester chúng có hoạt tính sinh học cao d oa Phân lập số phân đoạn phương pháp sắc kí cột silicagel an lu Kiến nghị nf va - Tiếp tục nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học hạt lm ul Muồng hồng yến dung mơi khác thổ nhưỡng khác khác z at nh oi - Xác định hết thành phần chưa định danh phương pháp - Tiếp tục nghiên cứu chiết tách chất tinh khiết chất có hoạt tính z khỏe m co l gm @ sinh học cao có cơm Muồng hồng n để ứng dụng vào chăm sóc sức an Lu n va ac th si 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y tế (1998), Quyết định số 867/1998/QĐ-BYT việc ban hành Danh mục Tiêu chuẩn vệ sinh lương thực, thực phẩm, Hà Nội [2] Đái Duy Ban, Nguyễn Tiến Bân, Đoàn Cảnh, Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Lân Dung, Đặng Huy Huỳnh, Nguyễn Đăng Khôi, Nguyễn Thị Lê, Phân Kế Lộc, Nguyễn Tài Lương, Lê Thị Muội, Phân Cự Nhân, Hoàng Đức Nhuận, Nguyễn Hữu Phụng, Ngô Kế Sương, Đặng Ngọc Thanh, Lê Xuân T , Nguyễn Văn Uyển (12-1997),“Các chi Cassia L., Chamaecrista moench Senna mill lu an (Caesalpinioideae-Leguminosae) hệ thực vật Việt Nam”, Tạp chí Sinh học, n va 19 (4), tr 8-9 tn to [3] Ngô Quốc Luân, Lê Đỗ Huy, Đỗ Hồng Linh, Ngơ Khắc Khơng Minh gh Nguyễn Ngọc Hạnh (2013), “Phân lập nhận danh hai hợp chất từ dịch chiết etyl p ie axetatcủa trái ô mơi ( Cassia grandis L.F)”, Tạp chí khoa học, Đại học Cần Thơ, 26(4), tr 30-34 w oa nl [4] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Các phương pháp cô lập hợp chất tự d nhiên, NXB Đại học Quốc gia TP HCM, tr – 73; 151 – 206; 323 an lu [5] Phạm Thị Nhật Trinh , Lê Tiến Nhung, Đặng Thị Cẩm Nhung (2014), nf va “Thành phần hóa học từ dịch chiết etyl axetat Muồng hồng yến”, Tạp chí Khoa lm ul học cơng nghệ, Đại học Cần Thơ, 4(31) z at nh oi [6] Viện dược liệu (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập I, II, Nhà xuất khoa hoc kỹ thuật z [7] Võ Thị Mai Hương (2009), “Thành phần hóa sinh khả kháng @ co l (52) gm khuẩn dịch chiết Muồng trâu (Cassia alata L.)”, Tạp chí khoa học, Đại học Huế, m [8] Võ Thị Cham Pa (2014), “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa an Lu học số dịch chiết Muồng hoàng yến ĐàNẵng”, luận văn n va ac th si 65 Thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng [9] Anonymous (2007), The Wealth of India, First Supplement Series (Raw Materials), National Institute of Science Communication and Information Resources, CSIR, (1), pp 223-224 [10] Anonymous (2007), The Wealth of India, First Supplement Series (Raw Materials), National Institute of Science Communication and Information Resources, CSIR, (1), pp 158 [11] Lee Ching-Kuo, Lee Ping Hung, Yueh Kuo Hsiung (2001), Journal of the Chinese Chemical Society, 48(6A), pp 1053-1058 lu an [12] M A Ali, M A Sayeed, Nurul (2004), Journal of the Chinese Chemical va Society, 51(3), pp 647-654 n of Scientific and Industrial Research, 34(1), pp 144-148 p ie gh tn to [13] M A Sayeed, M A Ali, G R Khan, M S Rahman (1999), Bangladesh Journal [14] Meena Rani, SB Kalidhar (1998), Indian Journal of Chemistry Section B, oa nl w Organic including Medicinal, 37 (12), pp 1314-1315 [15] N.N Barthakur, NP Arnold, I Alli (1995), Plant Foods for Human Nutrition, d nf va an lu 47 (1), pp 55-62 [16] O Tzakou, A Loukis, A Said (2007), Journal of Essential Oil Research, lm ul 19(4), pp 360-361 z at nh oi [17] P Sartorelli, C S Carvalho, J Q Reimao, M J P Ferreira, A G Tempone (2009), Parasitology Research, 104(2), pp 311-314 [18] RK Gupta (2010), Medicinal & Aromatic plants CBS publishers & z gm @ distributors, 1st edition, pp 116-117 m co Research, 5(1), pp 57-61 l [19] RN Yadava, Vikash Verma (2003 ), Journal of Asian Natural Products pp 375-376 an Lu [20] T N Misra, R.S Singh, H S Pandey, B K Singh (1997), Fitoterapia, 68 (4), n va ac th si 66 [21] T N Misra, R S Singh, HS Pandey, Pandey R P (1996), Fitoterapia, 67 (2), pp 173-174 [22] V.k Mahesh, Rashmi Sharma, R.S Singh (1984), Journal of Natural Products, 47 (4), pp 733-751 [23] Yueh-Hsiung Kuo, Ping-Hung Lee, Yung-Shun Wein (2002), J Nat Prod, 65, pp 1165-1167 [24] Ramalakshmi S and Muthuchelian K (2009), International Journal of ChemTech 3(3), pp 1054-1059 lu [25] RN Chopra, SL Nayar, IC Chpora (2006), Glossary of Indian Medicinal an Plants, National Institute of Science Communication and Information va Rsource, pp 54 n India Publication, pp 8-9.Internet ie gh tn to [26] The Ayurvedic Pharmacopoeia of India (2001), New Delhi, Government of p [27] http://en.wikipedia.org/wiki/Fabaceae (truy cập ngày 20 tháng năm 2016) oa nl w [28] http://en.wikipedia.org/wiki/Phytosterol (truy cập ngày 20 tháng năm 2016) d [29] http://en.wikipedia.org/wiki/Stigmasterol (truy cập ngày 20 tháng năm nf va an lu 2016) [30] http://vi.wikipedia.org/wiki/Muồng hoàng yến (truy cập ngày 21 tháng năm lm ul 2016) 2016) z at nh oi [31] http://vi.wikipedia.org/wiki/Muồng_hoa_đào (truy cập ngày 21 tháng năm z [32] http://vi.wikipedia.org/wiki/Ơ_mơi (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) @ co l năm 2016) gm [33] http://webbook.nist.gov/cgi/cbook.cgi?ID=57-10-3 (truy cập ngày 21 tháng m [34] http://i.ebayimg.com/images/g/6LoAAOSwBLlVXP7G/s-l300.jpg (truy cập an Lu ngày 21 tháng năm 2016) n va ac th si 67 [35]https://vi.wikipedia.org/wiki/Mu%E1%BB%93ng_hoa_%C4%91%C3%A0o#/ media/File:Muonghoadao1.JPG (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [36] http://thanhnien.vn/thoi-su/cay-gi-cung-ngam-ruou-gi-cung-uong-449700.html (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [37] http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma(truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [38] http://www.vuonhoalan.net/default.asp?tab=detailnews&tin=434&title=kieulan-lan-bau-ruou-calanthe-va duoc-tinh (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va PHỤ LỤC p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si Khối phổ thành phần hóa học 2(3h)-furanone,5 methyl- lu an n va N-nitrosoazacyclononane p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu 2-n-propylphenol z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 2-amino-9-(3,4-dihydroxy-5-hydroxymethyl-tetrahydrofuran-2-yl)-3,9dihydro-puri lu an n va p ie gh tn to Mome inositol d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul Hexadecanoic acid z m co l gm @ an Lu n va ac th si 9-octadecenoic acid lu 1,8-Dihydroxy-3-methylanthraquinone an n va p ie gh tn to d oa nl w lu nf va an Cholest-5-en-3-ol(3b)-, (9Z)-9-octadecenoate (9CI) z at nh oi lm ul z m co l gm @ 10 Cholic acid an Lu n va ac th si lu an 11 2-heptenal (z)- n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul 12 trans-2-decenal z m co l gm @ an Lu n va ac th si 13 ,4-decadienal lu an 14 Coumarin n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu 15 cinnamyl acetate z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 16 n-docosane lu 17 1-chlorooctadecane an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu 18 1-tetradecanol z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu 19 n-nonadecane n va ac th si 20 heptacosane lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si