Khóa luận tốt nghiệp nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ, thời gian đến hiệu suất cố định và khả năng phân giải histamine của chủng virgibacillus campisalis tt8 5

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM  - ĐẬU TRẦN LINH ĐAN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ, THỜI GIAN ĐẾN HIỆU SUẤT CỐ ĐỊNH VÀ KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI HISTAMINE CỦA CHỦNG Virgibacillus campisalis TT8.5 Hà Nội - Tháng 09/2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM  - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ, THỜI GIAN ĐẾN HIỆU SUẤT CỐ ĐỊNH VÀ KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI HISTAMINE CỦA CHỦNG Virgibacillus campisalis TT8.5 Người thực : Đậu Trần Linh Đan MSV : 621034 Khóa : 62 Ngành : Cơng nghệ thực phẩm Giảng viên hướng dẫn : PGS TS Nguyễn Hồng Anh Bộ mơn : Hóa sinh - Cơng nghệ sinh học thực phẩm Hà Nội - Tháng 09/2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa sử dụng; giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn thơng tin trích dẫn chuyên đề ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày … tháng … năm 2021 Sinh viên thực Đậu Trần Lınh Đan LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, bên cạnh nỗ lực thân, nhận động viên giúp đỡ lớn từ nhiều cá nhân tập thể Lời xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô cán Học viện Nông nghiệp Việt Nam dạy bảo tận tình ln tạo điều kiện thuận lợi để học tập suốt năm học vừa qua Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Hoàng Anh, ThS Phạm Thị Dịu, ThS Nguyễn Thị Hồng, Nguyễn Thị Huyền phịng thí nghiệm Trung tâm Khoa học Cơng nghệ thực phẩm - người nhiệt tình hướng dẫn, bảo, giúp đỡ tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Và cuối cùng, với tất lịng kính trọng biết ơn vơ hạn, xin gửi lời cảm ơn tới bố mẹ, người thân động viên tạo động lực cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên thực Đậu Trần Linh Đan MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU 1.2 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan nước mắm 2.1.1 Giới thiệu nước mắm 2.1.2 Quy trình sản xuất nước mắm .4 2.2 Giới thiệu Histamine 2.2.1 Tổng quan histamine .5 2.2.2 Tác hại histamine thể người 2.2.3 Sự hình thành histamine nước mắm 2.3 Tổng quan vi chủng vi khuẩn Virgibacillus campisalis 2.3.1 Giới thiệu chung 2.3.2 Giới thiệu Virgibacillus campisalis 2.4 Tổng quan chất mang 2.4.1 Khái niệm chất mang vi sinh vật 2.4.2 Đặc điểm chất mang vi sinh vật 2.4.3 Lựa chọn chất mang 2.5 Tổng quan phương pháp cố định 12 2.5.1 Phương pháp hấp phụ 12 2.5.2 Phương pháp liên kết chéo 13 PHẦN III ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 Đối tượng nghiên cứu 14 3.1.1 Đối tượng .14 3.1.2 Thiết bị, dụng cụ hóa chất .14 3.1.3 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 16 3.2 Nội dung nghiên cứu 16 3.3 Phương pháp nghiên cứu: .16 3.3.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 17 3.3.2 Phương pháp phân tích 17 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Mơ tả hình thái chế phẩm cố định đồ thị đường chuẩn .23 4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine chủng Virgibacillus campisalis TT8.5 24 4.3 Ảnh hưởng thời gian đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine chủng Virgibacillus campisalis TT8.5 27 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 31 5.1 Kết luận 31 5.2 Kiến nghị 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 PHỤ LỤC 36 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Tác hại histamine thể người Bảng 3.1 Thiết bị sử dụng nghiên cứu 14 Bảng 3.2 Danh sách hóa chất sử dụng nghiên cứu .15 Bảng 3.3 Thành phần môi trường halophilic bổ sung 21% muối 15 Bảng 3.4 Chương trình dẫn xuất hóa tự động hệ thống HPLC 20 DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Sơ đồ cơng nghệ sản suất nước mắm (Lương Đức Phẩm, 2010) Hình 2.2 Cơng thức cấu tạo Hình 2.3 Cấu trúc không gian .5 Hình 2.4 Sự chuyển hóa từ histidine thành histamine histidine decarboxylase .6 Hình 2.5 Nguồn gốc hình thành histamine quy trình sản xuất nước mắm Hình 2.6 Cấu trúc celite qua kính hiển vi 10 Hình 2.7 Cấu trúc pigbone qua kính hiển vi 10 Hình 2.8 Cấu trúc chitosan qua kính hiển vi 11 Hình 2.9 Cấu trúc eggshell qua kính hiển vi 11 Hình 2.10 Phương pháp hấp phụ tế bào .13 Hình 2.11 Phương pháp liên kết chéo 13 Hình 3.1 Sơ đồ phương pháp nghiên cứu .16 Hình 4.1 Mẫu chưa sấy đông khô 23 Hình 4.2 Mẫu sau sấy đông khô 23 Hình 4.3 Mẫu chế phẩm eggshell 23 Hình 4.4 Đồ thị đường chuẩn histamine (mM) 24 Hình 4.5 Đồ thị ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang celite 24 Hình 4.6 Đồ thị ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang pigbone 25 Hình 4.7 Đồ thị ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang chitosan flakes 26 Hình 4.8 Đồ thị ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang eggshell 26 Hình 4.9 Đồ thị ảnh hưởng thời gian đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang celite 27 Hình 4.10 Đồ thị ảnh hưởng thời gian đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang pigbone 28 Hình 4.11 Đồ thị ảnh hưởng thời gian đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang chitosan flakes 29 Hình 4.12 Đồ thị ảnh hưởng thời gian đến hiệu suất cố định khả phân giải histamine TT8.5 chất mang eggshell 30 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU Chữ viết tắt BME Cs EDTA Chữ viết đầy đủ β-mercaptoethanol Cộng Ethylene Diamine Tetracetic Acid FAO Food and Agricuture Organization of the United Nation HA Halophilic HPLC High-performance liquid chromatography OPA o-Phthalaldehyde STT Số thứ tự TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam PHẦN MỞ ĐẦU 1.2 Đặt vấn đề Nước mắm loại gia vị mang lại hương vị đặc trưng thơm ngon cho ăn bổ sung chất dinh dưỡng quan trọng acid amin tự tổng hợp, omega số vitamin khác Ở Việt Nam, nước mắm truyền thống thiếu bữa ăn gia đình ngày Nước ta sản xuất nhiều loại nước mắm ngon, có thương hiệu nước nước mắm xem mặt hàng ngành thủy sản Tuy nhiên, nước mắm truyền thống Việt Nam lại chưa xuất nhiều thị trường quốc tế Lý khó xuất nước mắm Việt Nam chứa lượng histamine cao (một amin sinh học có mối nguy hại cho sức khỏe người) tùy theo vùng miền biến động từ 1000 – 3000mg/lít (Báo cáo Hiệp hội nước mắm Phan Thiết, 2013), theo Codex (Ủy ban Tiêu chuẩn thực phẩm quốc tế) quy định “hàm lượng histamine nước mắm không 400mg/l” Nên nguy cao gây ngộ độc, biểu ngứa, phát ban, mề đay, nhức đầu, đau bụng, tiêu chảy, mạch nhanh, khó thở, co thắt khí quản, hạ huyết áp giãn mạch…cho người tiêu dùng (Nguyễn Trần Thị Giáng Hương, 2007) Vì cần tìm giải pháp tối ưu nhằm làm giảm hàm lượng histamine có nước mắm Trên thực tế, việc sử dụng phương pháp vật lý hóa học để phân giải histamine vừa tốn vừa gây ảnh hưởng đến sức khỏe người Vì vậy, phương pháp sinh học nói phương pháp hữu hiệu tính an tồn đặc biệt việc ứng dụng vi khuẩn có khả phân giải histamine mang lại hiệu cao Tuy nhiên, thay việc sử dụng phương pháp bổ sung vi khuẩn tự vào nước mắm thành phẩm vừa tốn thời gian, tốn chi phí, vừa khó kiểm sốt quy trình cơng nghệ, màu sắc, độ lên men nhóm nghiên cứu trước hướng đến phương pháp cố định tế bào Phương pháp giúp vi khuẩn phân giải histamine đạt hiệu tốt mà không ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học chủng vi khuẩn Đặc biệt, tế bào cố định sử dụng nhiều lần ngừng ứng dụng theo ý muốn người nghiên cứu nên không ảnh hưởng đến chất lượng nước mắm Phụ lục B: Kết xử lý thống kê phần mềm Minitab 16 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố nhiệt độ chất mang celite Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 0,8390 Level CL 37°C CL 4°C CL t°phong DF SS 256,596 2,112 258,708 R-Sq = 99,18% N 2 Mean 28,945 41,555 26,695 MS 128,298 0,704 F 182,26 P 0,001 R-Sq(adj) = 98,64% StDev 1,294 0,276 0,601 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* -) ( * -) + -+ -+ -+ 25,0 30,0 35,0 40,0 Pooled StDev = 0,839 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố nhiệt độ CL 4°C CL 37°C CL t°phong N 2 Mean 41,555 28,945 26,695 Grouping A B B Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = CL 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CL 4°C CL t°phong Lower 9,104 -5,756 Center 12,610 -2,250 Upper 16,116 1,256 + -+ -+ -+( -* ) ( -* ) + -+ -+ -+-10 10 20 yếu tố nhiệt độ = CL 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CL t°phong Lower -18,366 Center -14,860 Upper -11,354 + -+ -+ -+( * -) + -+ -+ -+-10 10 20 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố nhiệt độ chất mang celite Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 3,478 Level CL 37°C CL 4°C CL t°phong DF R-Sq = 82,57% N 2 Mean 24,880 36,145 24,705 SS 171,9 36,3 208,2 MS 85,9 12,1 F 7,10 P 0,073 R-Sq(adj) = 70,94% StDev 5,233 1,987 2,227 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( -* ) ( -* ) ( * ) + -+ -+ -+ 21,0 28,0 35,0 42,0 37 Pooled StDev = 3,478 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố nhiệt độ CL 4°C CL 37°C CL t°phong N 2 Mean 36,145 24,880 24,705 Grouping A B B Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = CL 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CL 4°C CL t°phong Lower -3,270 -14,710 Center 11,265 -0,175 Upper 25,800 14,360 -+ -+ -+ -+-( -* ) ( -* -) -+ -+ -+ -+ 15 15 30 yếu tố nhiệt độ = CL 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CL t°phong Lower -25,975 Center -11,440 Upper 3,095 -+ -+ -+ -+-( * -) -+ -+ -+ -+ 15 15 30 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố nhiệt độ chất mang pigbone Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 0,8233 DF SS 335,829 2,034 337,863 R-Sq = 99,40% Level PB 37°C PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng Level PB 37°C PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng N 2 Mean 31,715 47,760 32,070 MS 167,915 0,678 F 247,70 P 0,000 R-Sq(adj) = 99,00% StDev 1,294 0,566 0,198 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * -) ( -* ) ( -* -) + -+ -+ -+ 30,0 35,0 40,0 45,0 Pooled StDev = 0,823 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố nhiệt độ PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng PB 37°C N 2 Mean 47,760 32,070 31,715 Grouping A B B Means that not share a letter are significantly different 38 Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = PB 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng Lower 12,604 -3,086 Center 16,045 0,355 Upper 19,486 3,796 yếu tố nhiệt độ PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng -+ -+ -+ -+ ( * ) ( * -) -+ -+ -+ -+ -10 10 20 yếu tố nhiệt độ = PB 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ PB nhiệt độ ph?ng Lower -19,131 Center -15,690 Upper -12,249 yếu tố nhiệt độ PB nhiệt độ ph?ng -+ -+ -+ -+ ( * -) -+ -+ -+ -+ -10 10 20 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố nhiệt độ chất mang pigbone Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 1,518 DF SS 194,89 6,92 201,81 R-Sq = 96,57% Level PB 37°C PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng N 2 MS 97,45 2,31 F 42,26 P 0,006 R-Sq(adj) = 94,29% Mean 36,540 45,160 31,340 StDev 1,966 1,117 1,344 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( -* -) ( * -) ( * -) -+ -+ -+ -+ -30,0 36,0 42,0 48,0 Pooled StDev = 1,518 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố nhiệt độ PB 4°C PB 37°C PB nhiệt độ ph?ng N 2 Mean 45,160 36,540 31,340 Grouping A B B Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = PB 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng Lower 2,274 -11,546 Center 8,620 -5,200 Upper 14,966 1,146 yếu tố nhiệt độ PB 4°C PB nhiệt độ ph?ng -+ -+ -+ -+-( * ) ( -* ) 39 -+ -+ -+ -+ 12 12 24 yếu tố nhiệt độ = PB 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ PB nhiệt độ ph?ng Lower -20,166 Center -13,820 Upper -7,474 yếu tố nhiệt độ PB nhiệt độ ph?ng -+ -+ -+ -+-( * -) -+ -+ -+ -+ 12 12 24 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố nhiệt độ chất mang chitosan flakes Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 1,889 DF SS 44,66 10,70 55,36 R-Sq = 80,67% Level CTS 37°C CTS 4°C CTS nhiệt độ ph?ng N 2 MS 22,33 3,57 F 6,26 P 0,085 R-Sq(adj) = 67,78% Mean 27,700 31,830 25,215 StDev 2,814 1,103 1,252 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+( -* ) ( * -) ( * ) + -+ -+ -+24,0 28,0 32,0 36,0 Pooled StDev = 1,889 Grouping Information Using Tukey Method CTS CTS CTS yếu tố nhiệt độ 4°C 37°C nhiệt độ ph?ng N 2 Mean 31,830 27,700 25,215 Grouping A A B Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = CTS 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CTS 4°C CTS nhiệt độ ph?ng Lower -3,764 -10,379 Center 4,130 -2,485 Upper 12,024 5,409 yếu tố nhiệt độ CTS 4°C CTS nhiệt độ ph?ng + -+ -+ -+( -* -) ( -* -) + -+ -+ -+-8,0 0,0 8,0 16,0 yếu tố nhiệt độ = CTS 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CTS nhiệt độ ph?ng Lower -14,509 Center -6,615 Upper 1,279 yếu tố nhiệt độ CTS nhiệt độ ph?ng + -+ -+ -+( -* -) + -+ -+ -+-8,0 0,0 8,0 16,0 40 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố nhiệt độ chất mang chitosan flakes Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 1,090 DF SS 60,82 3,57 64,38 R-Sq = 94,46% Level CTS 37°C CTS 4°C CTS nhiệt độ ph?ng Level CTS 37°C CTS 4°C CTS nhiệt độ ph?ng N 2 MS 30,41 1,19 F 25,59 P 0,013 R-Sq(adj) = 90,77% Mean 29,690 34,240 26,480 StDev 1,853 0,212 0,297 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * ) ( * ) ( * ) -+ -+ -+ -+ -24,5 28,0 31,5 35,0 Pooled StDev = 1,090 Grouping Information Using Tukey Method CTS CTS CTS yếu tố nhiệt độ 4°C 37°C nhiệt độ ph?ng N 2 Mean 34,240 29,690 26,480 Grouping A A B B Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = CTS 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CTS 4°C CTS nhiệt độ ph?ng Lower -0,006 -7,766 Center 4,550 -3,210 Upper 9,106 1,346 yếu tố nhiệt độ CTS 4°C CTS nhiệt độ ph?ng + -+ -+ -+( * -) ( -* ) + -+ -+ -+-7,0 0,0 7,0 14,0 yếu tố nhiệt độ = CTS 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ CTS nhiệt độ ph?ng Lower -12,316 Center -7,760 Upper -3,204 yếu tố nhiệt độ CTS nhiệt độ ph?ng + -+ -+ -+( * -) + -+ -+ -+-7,0 0,0 7,0 14,0 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố nhiệt độ chất mang eggshell Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 0,4304 DF SS 120,043 0,556 120,599 R-Sq = 99,54% MS 60,022 0,185 F 324,03 R-Sq(adj) = 99,23% 41 P 0,000 Level EG 37°C EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng N 2 Mean 11,370 21,375 12,505 StDev 0,679 0,163 0,262 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * ) ( * ) ( -* ) -+ -+ -+ -+ -12,0 15,0 18,0 21,0 Pooled StDev = 0,430 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố nhiệt độ EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng EG 37°C N 2 Mean 21,375 12,505 11,370 Grouping A B B Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = EG 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng Lower 8,206 -0,664 Center 10,005 1,135 Upper 11,804 2,934 yếu tố nhiệt độ EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng + -+ -+ -+( * ) ( * ) + -+ -+ -+-6,0 0,0 6,0 12,0 yếu tố nhiệt độ = EG 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ EG nhiệt độ ph?ng Lower -10,669 Center -8,870 Upper -7,071 yếu tố nhiệt độ EG nhiệt độ ph?ng + -+ -+ -+( * ) + -+ -+ -+-6,0 0,0 6,0 12,0 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố nhiệt độ chất mang eggshell Source yếu tố nhiệt độ Error Total S = 1,215 DF SS 141,73 4,43 146,16 R-Sq = 96,97% Level EG 37°C EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng N 2 MS 70,87 1,48 F 48,02 P 0,005 R-Sq(adj) = 94,95% Mean 8,385 18,950 8,915 StDev 0,460 2,051 0,106 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ ( -* ) ( -* ) ( -* ) -+ -+ -+ -+ 10,0 15,0 20,0 25,0 Pooled StDev = 1,215 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố nhiệt độ N Mean Grouping 42 EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng EG 37°C 2 18,950 8,915 8,385 A B B Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố nhiệt độ Individual confidence level = 97,50% yếu tố nhiệt độ = EG 37°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng Lower 5,488 -4,547 Center 10,565 0,530 Upper 15,642 5,607 yếu tố nhiệt độ EG 4°C EG nhiệt độ ph?ng -+ -+ -+ -+ ( -* ) ( * -) -+ -+ -+ -+ -8,0 0,0 8,0 16,0 yếu tố nhiệt độ = EG 4°C subtracted from: yếu tố nhiệt độ EG nhiệt độ ph?ng Lower -15,112 Center -10,035 Upper -4,958 yếu tố nhiệt độ EG nhiệt độ ph?ng -+ -+ -+ -+ ( -* ) -+ -+ -+ -+ -8,0 0,0 8,0 16,0 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố thời gian chất mang celite Source yếu tố thời gian Error Total S = 0,4323 Level CL 0,5h CL 1,5h CL 1h CL 3h N 2 2 DF SS 285,386 0,748 286,134 R-Sq = 99,74% Mean 37,320 32,715 42,055 25,870 StDev 0,523 0,191 0,318 0,580 MS 95,129 0,187 F 508,91 P 0,000 R-Sq(adj) = 99,54% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ (-*) (*-) (-*-) (-*) + -+ -+ -+ 25,0 30,0 35,0 40,0 Pooled StDev = 0,432 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian CL 1h CL 0,5h CL 1,5h CL 3h N 2 2 Mean 42,055 37,320 32,715 25,870 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% 43 yếu tố thời gian = CL 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian CL 1,5h CL 1h CL 3h Lower -6,366 2,974 -13,211 Center -4,605 4,735 -11,450 Upper -2,844 6,496 -9,689 + -+ -+ -+(*-) (-*) (-*) + -+ -+ -+-10 10 20 yếu tố thời gian = CL 1,5h subtracted from: yếu tố thời gian CL 1h CL 3h Lower 7,579 -8,606 Center 9,340 -6,845 Upper 11,101 -5,084 + -+ -+ -+(*-) (-*-) + -+ -+ -+-10 10 20 yếu tố thời gian = CL 1h subtracted from: yếu tố thời gian CL 3h Lower -17,946 Center -16,185 Upper -14,424 + -+ -+ -+(-*-) + -+ -+ -+-10 10 20 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố thời gian chất mang celite Source yếu tố thời gian Error Total S = 0,6176 Level CL 0,5h CL 1,5h CL 1h CL 3h N 2 2 DF SS 296,258 1,526 297,783 R-Sq = 99,49% Mean 34,030 29,440 39,775 23,190 StDev 0,693 0,509 0,474 0,750 MS 98,753 0,381 F 258,91 P 0,000 R-Sq(adj) = 99,10% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ (-*-) ( *-) ( *-) (-* ) + -+ -+ -+ 25,0 30,0 35,0 40,0 Pooled StDev = 0,618 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian CL 1h CL 0,5h CL 1,5h CL 3h N 2 2 Mean 39,775 34,030 29,440 23,190 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% yếu tố thời gian = CL 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ 44 CL 1,5h CL 1h CL 3h -7,105 3,230 -13,355 -4,590 5,745 -10,840 -2,075 8,260 -8,325 (-* ) ( *-) (-* ) -+ -+ -+ -+ -10 10 20 yếu tố thời gian = CL 1,5h subtracted from: yếu tố thời gian CL 1h CL 3h Lower 7,820 -8,765 Center 10,335 -6,250 Upper 12,850 -3,735 -+ -+ -+ -+ (-* ) ( *-) -+ -+ -+ -+ -10 10 20 yếu tố thời gian = CL 1h subtracted from: yếu tố thời gian CL 3h Lower -19,100 Center -16,585 Upper -14,070 -+ -+ -+ -+ (-* ) -+ -+ -+ -+ -10 10 20 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố thời gian chất mang pigbone Source yếu tố thời gian Error Total S = 0,5911 Level PB 0,5h PB 1,5h PB 1h PB 3h N 2 2 DF SS 573,051 1,397 574,449 R-Sq = 99,76% Mean 39,135 45,785 51,740 28,940 StDev 0,233 1,054 0,481 0,042 MS 191,017 0,349 F 546,74 P 0,000 R-Sq(adj) = 99,57% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ (-*-) (*-) (-*-) (*-) + -+ -+ -+ 28,0 35,0 42,0 49,0 Pooled StDev = 0,591 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian PB 1h PB 1,5h PB 0,5h PB 3h N 2 2 Mean 51,740 45,785 39,135 28,940 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% yếu tố thời gian = PB 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian PB 1,5h PB 1h PB 3h Lower 4,243 10,198 -12,602 Center 6,650 12,605 -10,195 Upper 9,057 15,012 -7,788 -+ -+ -+ -+-(*-) (*-) (*-) -+ -+ -+ -+ 15 15 30 45 yếu tố thời gian = PB 1,5h subtracted from: yếu tố thời gian PB 1h PB 3h Lower 3,548 -19,252 Center 5,955 -16,845 Upper 8,362 -14,438 -+ -+ -+ -+-(-*-) (-*) -+ -+ -+ -+ 15 15 30 yếu tố thời gian = PB 1h subtracted from: yếu tố thời gian PB 3h Lower -25,207 Center -22,800 Upper -20,393 -+ -+ -+ -+-(-*) -+ -+ -+ -+ 15 15 30 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố thời gian chất mang pigbone Source yếu tố thời gian Error Total S = 1,481 Level PB 0,5h PB 1,5h PB 1h PB 3h N 2 2 DF R-Sq = 98,92% Mean 34,955 42,525 50,625 23,470 StDev 0,021 0,403 0,191 2,927 SS 800,43 8,77 809,20 MS 266,81 2,19 F 121,70 P 0,000 R-Sq(adj) = 98,10% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ ( * ) ( *-) ( * ) (-* ) -+ -+ -+ -+ 30 40 50 60 Pooled StDev = 1,481 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian PB 1h PB 1,5h PB 0,5h PB 3h N 2 2 Mean 50,625 42,525 34,955 23,470 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% yếu tố thời gian = PB 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian PB 1,5h PB 1h PB 3h Lower 1,539 9,639 -17,516 Center 7,570 15,670 -11,485 Upper 13,601 21,701 -5,454 -+ -+ -+ -+-( * ) ( * ) ( * ) -+ -+ -+ -+ 20 20 40 yếu tố thời gian = PB 1,5h subtracted from: 46 yếu tố thời gian PB 1h PB 3h Lower 2,069 -25,086 Center 8,100 -19,055 Upper 14,131 -13,024 -+ -+ -+ -+-( * ) ( * ) -+ -+ -+ -+ 20 20 40 yếu tố thời gian = PB 1h subtracted from: yếu tố thời gian PB 3h Lower -33,186 Center -27,155 Upper -21,124 -+ -+ -+ -+-( * ) -+ -+ -+ -+ 20 20 40 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố thời gian chất mang chitosan flakes Source yếu tố thời gian Error Total S = 0,8911 Level CTS 0,5h CTS 1,5h CTS 1h CTS 3h N 2 2 DF SS 345,877 3,177 349,054 R-Sq = 99,09% Mean 15,210 27,935 32,690 21,705 StDev 0,311 0,021 0,170 1,747 MS 115,292 0,794 F 145,18 P 0,000 R-Sq(adj) = 98,41% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+( * ) ( *-) (-* ) ( * ) + -+ -+ -+18,0 24,0 30,0 36,0 Pooled StDev = 0,891 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian CTS 1h CTS 1,5h CTS 3h CTS 0,5h N 2 2 Mean 32,690 27,935 21,705 15,210 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% yếu tố thời gian = CTS 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian CTS 1,5h CTS 1h CTS 3h Lower 9,095 13,850 2,865 Center 12,725 17,480 6,495 Upper 16,355 21,110 10,125 -+ -+ -+ -+ -( -* ) ( * -) ( * -) -+ -+ -+ -+ 10 10 20 yếu tố thời gian = CTS 1,5h subtracted from: yếu tố thời gian CTS 1h CTS 3h Lower 1,125 -9,860 Center 4,755 -6,230 Upper 8,385 -2,600 -+ -+ -+ -+ -( -* ) ( -* ) 47 -+ -+ -+ -+ 10 10 20 yếu tố thời gian = CTS 1h subtracted from: yếu tố thời gian CTS 3h Lower -14,615 Center -10,985 Upper -7,355 -+ -+ -+ -+ -( -* -) -+ -+ -+ -+ 10 10 20 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố thời gian chất mang chitosan flakes Source yếu tố thời gian Error Total S = 0,9548 Level CTS 0,5h CTS 1,5h CTS 1h CTS 3h N 2 2 DF SS 387,297 3,646 390,943 R-Sq = 99,07% Mean 15,670 27,900 34,685 22,835 StDev 0,877 1,131 1,252 0,177 MS 129,099 0,912 F 141,61 P 0,000 R-Sq(adj) = 98,37% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+-( * ) ( -* ) ( * ) ( * ) -+ -+ -+ -+-18,0 24,0 30,0 36,0 Pooled StDev = 0,955 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian CTS 1h CTS 1,5h CTS 3h CTS 0,5h N 2 2 Mean 34,685 27,900 22,835 15,670 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% yếu tố thời gian = CTS 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian CTS 1,5h CTS 1h CTS 3h Lower 8,341 15,126 3,276 Center 12,230 19,015 7,165 Upper 16,119 22,904 11,054 + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* -) ( -* -) + -+ -+ -+ -10 10 20 yếu tố thời gian = CTS 1,5h subtracted from: yếu tố thời gian CTS 1h CTS 3h Lower 2,896 -8,954 Center 6,785 -5,065 Upper 10,674 -1,176 + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* -) + -+ -+ -+ -10 10 20 yếu tố thời gian = CTS 1h subtracted from: 48 yếu tố thời gian CTS 3h Lower -15,739 Center -11,850 Upper -7,961 + -+ -+ -+ ( -* -) + -+ -+ -+ -10 10 20 One-way ANOVA: hiệu suất cố định versus yếu tố thời gian chất mang eggshell Source yếu tố thời gian Error Total S = 0,8736 Level EG 0,5h EG 1,5h EG 1h EG 3h N 2 2 DF SS 310,369 3,053 313,422 R-Sq = 99,03% Mean 15,225 9,805 21,255 4,500 StDev 0,134 0,092 0,021 1,739 MS 103,456 0,763 F 135,56 P 0,000 R-Sq(adj) = 98,30% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(-* ) ( * ) (-* ) ( *-) -+ -+ -+ -+ -6,0 12,0 18,0 24,0 Pooled StDev = 0,874 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian EG 1h EG 0,5h EG 1,5h EG 3h N 2 2 Mean 21,255 15,225 9,805 4,500 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% yếu tố thời gian = EG 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian EG 1,5h EG 1h EG 3h Lower -8,978 2,472 -14,283 Center -5,420 6,030 -10,725 Upper -1,862 9,588 -7,167 -+ -+ -+ -+-(-* ) ( * ) ( * ) -+ -+ -+ -+ 12 12 24 yếu tố thời gian = EG 1,5h subtracted from: yếu tố thời gian EG 1h EG 3h Lower 7,892 -8,863 Center 11,450 -5,305 Upper 15,008 -1,747 -+ -+ -+ -+-( * ) ( * ) -+ -+ -+ -+ 12 12 24 yếu tố thời gian = EG 1h subtracted from: yếu tố thời gian EG 3h Lower -20,313 Center -16,755 Upper -13,197 -+ -+ -+ -+-( * ) -+ -+ -+ -+ 49 -12 12 24 One-way ANOVA: khả phân giải sau 2h versus yếu tố thời gian chất mang eggshell Source yếu tố thời gian Error Total S = 1,026 Level EG 0,5h EG 1,5h EG 1h EG 3h N 2 2 DF SS 296,50 4,21 300,71 R-Sq = 98,60% Mean 16,625 10,400 21,265 5,215 StDev 0,205 0,509 0,134 1,973 MS 98,83 1,05 F 93,87 P 0,000 R-Sq(adj) = 97,55% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( -* ) ( * -) ( * -) ( -* ) -+ -+ -+ -+ -6,0 12,0 18,0 24,0 Pooled StDev = 1,026 Grouping Information Using Tukey Method yếu tố thời gian EG 1h EG 0,5h EG 1,5h EG 3h N 2 2 Mean 21,265 16,625 10,400 5,215 Grouping A B C D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of yếu tố thời gian Individual confidence level = 98,48% yếu tố thời gian = EG 0,5h subtracted from: yếu tố thời gian EG 1,5h EG 1h EG 3h Lower -10,404 0,461 -15,589 Center -6,225 4,640 -11,410 Upper -2,046 8,819 -7,231 -+ -+ -+ -+-( -* ) ( -* ) ( * -) -+ -+ -+ -+ 12 12 24 yếu tố thời gian = EG 1,5h subtracted from: yếu tố thời gian EG 1h EG 3h Lower 6,686 -9,364 Center 10,865 -5,185 Upper 15,044 -1,006 -+ -+ -+ -+-( * -) ( -* ) -+ -+ -+ -+ 12 12 24 yếu tố thời gian = EG 1h subtracted from: yếu tố thời gian EG 3h Lower -20,229 Center -16,050 Upper -11,871 -+ -+ -+ -+-( -* ) -+ -+ -+ -+ 12 12 24 50 51