Khóa luận tốt nghiệp nghiên cứu, đánh giá một số dòng lúa chọn lọc chất lượng cao kháng bệnh bạc lá

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU, ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ DÒNG LÚA CHỌN LỌC CHẤT LƯỢNG CAO KHÁNG BỆNH BẠC LÁ” Người thực : Trần Tiến Đạt Mã sinh viên : 620563 Khóa : 62 Ngành : Công nghệ sinh học Người hướng dẫn : GS TS Phan Hữu Tôn HÀ NỘI – 2021 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan tồn tất nghiệm đề tài tơi thực Toàn số liệu, kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu trước Tơi xin cam đoan tồn thơng tin trích dẫn sử dụng luận văn trích dẫn rõ nguồn gốc, theo quy định giúp đỡ cho luận văn cảm ơn Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên Trần Tiến Đạt ii LỜI CẢM ƠN Khóa luận hồn thành cách thành công, để đạt điều này, ngồi cố gắng nỗ lực cịn có đồng hành, quan tâm, bảo tận tình thầy giáo, cán bộ, bạn bè, anh chị trước phịng thí nghiệm mơn Sinh học phân tử Công nghệ sinh học ứng dụng – Khoa Công nghệ sinh học Trước hết, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ban quản lý Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện hết mức cho tơi thực khóa luận tốt nghiệp, cảm ơn tới ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học thầy cô môn hỗ trợ, hướng dẫn chia sẻ kiến thức vơ q báu suốt q trình làm khóa luận phịng thí nghiệm mơn Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lịng thành kính, biết ơn sâu sắc đến GS TS Phan Hữu Tôn trực tiếp hướng dẫn, dành thời gian kinh nghiệm quý báu chia sẻ cho từ ngày khóa luận hồn thiện Tơi xin gửi lời cảm ơn đến toàn thể phịng ban Khoa Cơng nghệ sinh học giúp đỡ nhiệt tình anh chị bạn phịng thí nghiệm, tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành khóa luận Và cuối cùng, với tất kính trọng, biết ơn sâu sắc, xin gửi lời biết ơn vơ hạn tới gia đình người thân bạn bè sát cánh, động viên để vượt qua giai đoạn khó khăn áp lực q trình thực đề tài Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày… tháng… năm 2021 Sinh viên thực Trần Tiến Đạt iii TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Sau tiến hành nghiên cứu đề tài: “NGHIÊN CỨU, ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ DÒNG LÚA CHỌN LỌC CHẤT LƯỢNG CAO KHÁNG BỆNH BẠC LÁ” Chúng tiến hành đánh giá số đặc điểm nông sinh học khả kháng bệnh bạc 25 giống lúa có mặt TT bảo tồn PTNGCT Kết thúc q trình nghiên cứu chúng tơi có kết chọn lọc mẫu giống là: T61-2; T61-1; T62-7; T62-17 Những mẫu giống đáp ứng tiêu suất tốt có khả kháng bệnh bạc iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN iii TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP iv MỤC LỤC v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC VIẾT TẮT viii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan lúa 2.1.1 Nguồn gốc xuất phát lúa 2.1.2 Đặc điểm nông sinh học giống lúa 2.2 Tổng quan bệnh bạc lúa 10 2.2.1 Lịch sử phát bệnh 10 2.2.2 Vi khuẩn gây bệnh bạc lúa 11 2.2.3 Các chủng sinh lý giới Việt Nam 12 2.2.4 Triệu chứng bệnh 15 2.2.5 Tác hại bệnh bạc lúa 16 PHẦN 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Vật liệu 18 3.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 18 3.3 Nội dung nghiên cứu 18 3.4 Phương pháp nghiên cứu 18 3.4.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm đồng ruộng 18 3.4.2 Phương pháp đánh giá đặc điểm nông sinh học 20 v 3.4.3 Sử dụng thị phân tử đánh giá khả mang gen kháng bạc Xa4 Xa7 Error! Bookmark not defined 3.4.4 Lây nhiễm nhân tạo 20 3.4.5 Phương pháp xử lí số liệu Error! Bookmark not defined Phần KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 27 4.1 Kết đánh giá số đặc điểm nông sinh học 27 4.1.1 Thời gian sinh trưởng 27 4.1.2 Số nhánh tối đa, số nhánh hữu hiệu 30 4.1.3 Số hữu hiệu 32 4.1.4 Chiều cao 33 4.1.5 Số hạt hạt lép 35 4.1.6 Chiều dài cổ 37 4.1.7 Khối lượng 1000 hạt suất lí thuyết 39 4.2 Kết PCR xác định gen kháng bệnh bạc Error! Bookmark not defined 4.3 Kết lây nhiễm nhân tạo 41 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 5.1 Kết luận 48 5.2 Kiến nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Thành phần dung dịch tách chiết DNA 21 Bảng 3.2: Thành phần dung dịch TE 21 Bảng 3.4: Thành phần cocktaik sử dụng cho phản ứng 23 Bảng 3.5: Chu kỳ nhiệt PCR gen Xa4 Xa7 23 Bảng 4.1: Thời gian sinh trưởng 28 Bảng 4.2: Số nhánh tối đa khóm 30 Bảng 4.3: Số nhánh hữu hiệu khóm 31 Bảng 4.4: Số hữu hiệu 32 Bảng 4.5: Chiều cao 33 Bảng 4.6: Số hạt 35 Bảng 4.7: Số hạt lép 35 Bảng 4.8: Chiều dài cổ 37 Bảng 4.9: Chiều dài 38 Bảng 4.10: Khối lượng 1000 hạt(gam) 39 Bảng 4.11: Năng suất lí thuyết 40 Bảng 4.12: Bảng kháng nhiễm Error! Bookmark not defined Bảng 4.13: Tổng hợp kết kiểm tra gen Xa7 25 giống lúa 42 Bảng 4.13: Tổng hợp kết kiểm tra gen Xa4 25 giống lúa 44 vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Nơi xuất xứ lúa trồng Hình 2.2 Lịch sử tiến hóa loài lúa trồng Hình 4.1 Điện di sản phẩm PCR gen Xa7 sử dụng cặp mồi P3 42 Hình 4.2 Điện di sản phẩm PCR gen Xa4 sử dụng cặp mồi Npb181 44 Hình 4.3 Một số hình ảnh lây nhiễm nhân tạo 47 viii DANH MỤC VIẾT TẮT   DNA: Deoxyribo Nucleic Acid IRRI: The International Rice Institute – Viện Nghiên cứu lúa quốc tế SDS: Sodium dodecyl sulphate PCR: Polymerase Chain Reaction – phản ứng khuếch đại gen TE: Tris – EDTA TAE: Tris-Acetic acid-EDTA TT Bảo tồn PTNGCT: Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng NST: Nhiễm sắc thể NIL: Near-isogenic lines BVTV: Bảo vệ thực vật EDTA: Ethylenediaminetetraacetic acid ix PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Lúa năm loại lương thực giới, với bắp (Zea Mays L.), lúa mì (Triticum sp, tên khác: tiểu mạch), sắn (Manihot esculenta Crantz, tên khác khoai mì) khoai tây (Solanum tuberosum L.) Theo quan niệm xưa lúa sáu loại lương thực chủ yếu lục cốc Lúa lương thực chính, nguồn cung cấp lương thực cho hàng tỷ người giới Đời sống cao nhu cầu người tăng cao, đòi hỏi chọn tạo giống lúa tốt với nhiều đặc tính mong muốn Các nhà chọn tạo giống đặt câu hỏi hàng đầu là: Làm để chọn tạo giống lúa lí tưởng? Một giống lúa lí tưởng bao gồm nhiều tiêu chí tốt hình thái thân, lá, cấu trúc cây; tiêu sinh lí thời gian sinh trưởng, hiệu suất quang hợp thuần, độ tàn lá, sinh hoa hàm lượng diệp lục, hàm lượng đạm cây…; có khả chống chịu với điều kiện vơ sinh: hạn, mặn, úng, chống nóng lạnh; chống chịu tác nhân hữu sinh bệnh, sâu tuyến trùng, kháng số bệnh: bạc lá, đạo ơn, khơ vằn, Tất tính trạng đơn gen đa gen quy định Các tính trạng hầu hết xác định thị phân tử DNA liên kết Mỗi mẫu giống tập đồn nguồn gen nghiên cứu thường chưa có đủ tất đặc tính tốt mong muốn lúa lý tưởng có Vì chọn tạo giống lúa lí tưởng thành cơng cần phải nghiên cứu đánh giá để có kế hoạch lai tổ hợp nhiều mẫu giống vào giống Bạc gọi bệnh cháy bìa lúa (Bacterial leaf blight disease) bệnh lúa, vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo) gây ra, bệnh nhiệt đới điển hình gây hại nhiều vùng trồng lúa khắp giới Bệnh gây thiệt hại suất lúa đến 50% Tính kháng bạc khả làm giảm sinh trưởng phát triển ký sinh sau có tiếp xúc ký sinh với ký chủ khởi phát Đánh giá khả kháng bệnh bạc lá, sử dụng hai cách phổ biến là: 4.1.6 Chiều dài cổ Bông lúa yếu tố quan trọng định đến suất lúa Bông lúa định 74% suất ruộng lúa nghiên cứu bơng có ý nghĩa lớn chọn giống Các đặc trưng bao gồm: chiều dài bơng chính, chiều dài cổ bơng Chiều dài bơng đặc điểm di truyền giống, mẫu giống khác chiều dài khác Tuy nhiên chiều dài bơng cịn khác chế độ canh tác, chế độ chăm sóc, mật độ cấy Chiều dài tiêu liên quan đến suất, biểu khả chứa hạt Chiều dài bơng cao có số lượng hạt lớn, tiềm năng suất cao Chiều dài cổ lớn dễ bị gẫy cổ dễ bị đạo ôn cổ bông, dẫn đến làm giảm suất giống Bảng 4.8: Chiều dài cổ Độ lệch Lớn chuẩn -0.1 2.41 2.31 -2.51 T62-1 -0.7 1.48 0.78 -2.18 T62-2 0.3 1.48 1.78 -1.18 T62-3 0.2 1.92 2.12 -1.72 T62-4 3.1 2.63 5.73 0.47 T62-5 -1 2.24 1.24 -3.24 T62-6 0.8 2.41 3.21 -1.61 T62-7 1.5 1.97 3.47 -0.47 T62-8 -0.7 2.05 1.35 -2.75 10 T62-9 -1 3.50 2.50 -4.50 11 T62-10 4.9 1.82 6.72 3.08 12 T62-11 1.1 3.17 4.27 -2.07 13 T62-12 1.8 1.30 3.10 0.50 14 T62-13 2.6 2.70 5.30 -0.10 15 T62-14 1.22 2.22 -0.22 STT Tên giống Trung bình T62 37 Nhỏ 16 T62-15 2.92 5.92 0.08 17 T62-16 0.2 3.05 3.25 -2.85 18 T62-17 2.5 1.12 3.62 1.38 19 T62-18 2.8 1.60 4.40 1.20 20 T61 -0.4 0.55 0.15 -0.95 21 T61-1 4.2 2.93 7.13 1.27 22 T61-2 -0.4 2.61 2.21 -3.01 23 T61-3 0.2 2.02 2.22 -1.82 24 T61-4 2.1 2.68 4.78 -0.58 25 T61-5 -1 2.24 1.24 -3.24 Bảng 4.9: Chiều dài Độ lệch Tên giống Trung bình T62 28.92 1.58 30.50 27.34 T62-1 32.06 3.45 35.51 28.61 T62-2 32.44 3.50 35.94 28.94 T62-3 29.52 0.95 30.47 28.57 T62-4 28.62 1.08 29.70 27.54 T62-5 28.7 2.30 31.00 26.40 T62-6 30.06 0.94 31.00 29.12 T62-7 29.38 1.80 31.18 27.58 T62-8 29.96 1.85 31.81 28.11 10 T62-9 33.3 3.29 36.59 30.01 11 T62-10 28.7 3.05 31.75 25.65 12 T62-11 29.98 1.26 31.24 28.72 13 T62-12 29.32 1.37 30.69 27.95 14 T62-13 30.08 1.57 31.65 28.51 15 T62-14 30.8 1.82 32.62 28.98 chuẩn 38 Lớn Nhỏ STT 16 T62-15 30.66 1.80 32.46 28.86 17 T62-16 29.04 1.19 30.23 27.85 18 T62-17 29.8 1.35 31.15 28.45 19 T62-18 26.32 1.62 27.94 24.70 20 T61 30.1 1.54 31.64 28.56 21 T61-1 27.8 1.99 29.79 25.81 22 T61-2 28.98 3.74 32.72 25.24 23 T61-3 27.82 2.23 30.05 25.59 24 T61-4 30.24 1.34 31.58 28.90 25 T61-5 28.88 1.49 30.37 27.39 4.1.7 Khối lượng 1000 hạt suất lí thuyết Năng suất cao mục tiêu cuối nhà chọn giống Năng suất cấu thành từ yếu tố: Số khóm/m2 (mật độ cấy đơn vị diện tích), số bơng hữu hiệu khóm, tỷ lệ hạt khối lượng 1000 hạt Các yếu tố hình thành khoảng thời gian khác nhau, chịu tác động điều kiện khác chúng có mối quan hệ ảnh hưởng qua lại lẫn Qua q trình theo dõi, chúng tơi thu số liệu suất yếu tố cấu thành suất sau: Bảng 4.10: Khối lượng 1000 hạt(gam) STT Tên giống Trung bình 10 11 12 T62 T62-1 T62-2 T62-3 T62-4 T62-5 T62-6 T62-7 T62-8 T62-9 T62-10 T62-11 21.57 26.742 26.54 26.718 24.542 24.594 26.378 24.316 20.728 26.252 25.874 27.834 Độ lệch chuẩn 0.50 0.52 0.50 0.50 0.82 0.34 0.35 0.42 0.54 0.61 1.02 1.32 39 Lớn 22.07 27.26 27.04 27.21 25.37 24.93 26.72 24.74 21.27 26.86 26.90 29.16 Nhỏ 21.07 26.23 26.04 26.22 23.72 24.26 26.03 23.90 20.18 25.65 24.85 26.51 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 T62-12 T62-13 T62-14 T62-15 T62-16 T62-17 T62-18 T61 T61-1 T61-2 T61-3 T61-4 T61-5 26.48 25.616 25.168 24.328 24.656 29.906 27.256 24.086 26.828 27.944 24.404 27.288 26.728 1.25 0.82 1.16 0.66 0.47 0.83 1.05 1.14 1.02 0.66 0.67 0.89 0.92 27.73 26.43 26.33 24.99 25.12 30.74 28.30 25.23 27.85 28.60 25.07 28.17 27.65 25.23 24.80 24.01 23.67 24.19 29.08 26.21 22.95 25.81 27.28 23.74 26.40 25.81 Bảng 4.11: Năng suất lí thuyết STT Tên giống 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 T62 T62-1 T62-2 T62-3 T62-4 T62-5 T62-6 T62-7 T62-8 T62-9 T62-10 T62-11 T62-12 T62-13 T62-14 T62-15 T62-16 T62-17 T62-18 T61 T61-1 T61-2 T61-3 T61-4 T61-5 Số hữu Số hạt hiệu 7.6 8.8 8.4 8.6 8.4 7.6 8.8 8.4 8.2 8.4 7.4 7.4 8.4 8 8.8 8.2 7.8 8.8 7.2 8.8 7.6 188.2 140.8 174.6 209.4 206.8 195.8 193.4 210.4 162.4 222.6 180.8 124.4 185.4 139.6 310.8 235 183 212.2 228 205.6 205 202.6 195 206.8 178.8 40 Khối lượng 1000 hạt 21.57 26.74 26.54 26.72 24.54 24.59 26.38 24.32 20.73 26.25 25.87 27.83 26.48 25.62 25.17 24.33 24.66 29.91 27.26 24.09 26.83 27.94 24.4 27.29 26.73 Năng suất lí thuyết 129.58 139.15 163.48 202.10 179.04 153.69 188.57 180.53 113.12 201.24 165.02 101.78 152.58 111.16 275.99 192.11 151.63 234.58 208.83 170.58 180.18 209.22 143.88 208.59 152.56 Công thức: Năng suất lí thuyết (NSLT) =B×C×D×10-4 Trong : - A : Số khóm/m2 (42 khóm/m2) - B : số bơng hữu hiệu/khóm - C : số hạt chắc/bơng - D: khối lượng 1000 hạt 4.2 Kết PCR xác định gen kháng bệnh bạc Theo Phan Hữu Tôn, 2005 hai gen Xa4 Xa7 gen kháng hiệu chủng vi khuẩn bạc miền Bắc nước ta Vì vậy, phạm vi nghiên cứu tiến hành xác định khả mang hai gen kháng nói với mẫu giống Để kiểm tra khả mang gen kháng bạc Xa4, Xa7 mẫu giống tiến hành PCR xác định gen kháng sử dụng cặp mồi có trình tự nêu phần phương pháp nghiên cứu Các gen kháng xác định cách so sánh kích cỡ vạch nhân lên mẫu với kích thước vạch giống đối chứng từ đưa kết luận giống có chứa gen hay không Cụ thể: Trong trường hợp gen Xa4 dùng thị Npb181, mẫu chứa gen Xa4 có kích thước vạch nhân lên có chiều dài 150bp, không chứa gen 130bp; trường hợp gen Xa7 sử dụng thị P3, mẫu chứa gen Xa7 có kích thước 297bp, khơng chứa gen Xa7 262bp 41 T62-14 T62-4 T62-13 T61 T62-6 T62-8 T62-12 T61-2 T62 T62-9 T61-1 T62-15 IRBB7 IRBB7 T62-5 Ladder IRBB24 Ladder IRBB7 T62-10 IRBB2 Ladder IRBB24 T62-11 T61-5 T62-16 T62-3 T62-1 T61-3 T62-17 T61-4 T62-18 Hình 4.1 Điện di sản phẩm PCR gen Xa7 sử dụng cặp mồi P3 42 T62-7 T62-2 Bảng 4.12 Tổng hợp kết kiểm tra gen Xa7 25 giống lúa Giống Kết kiểm Giống Kết kiểm Giống tra tra tra Kết kiểm T62 - T62-7 Mang gen T62-14 - T62-1 - T62-8 - T62-15 Mang gen T62-2 Mang gen T62-9 - T61-16 - T62-3 - T62-10 - T61-17 Mang gen T62-4 - T62-11 - T61-18 - T62-5 - T62-12 Mang gen T61 - T62-6 - T62-13 Mang gen T61-1 Mang gen T61-2 Mang gen T61-3 - T61-4 Mang gen T61-5 Tổng kết giống mang gen Xa7 43 T61-3 T61-4 T61-1 T61-2 T61-5 T62-3 T62-14 T61 T62-1 T62-17 T62-9 T62-13 T62-16 IRBB4 IRBB4 Ladder Ladder IRBB24 IRBB24 Ladder IRBB4 T62-7 T62-11 IRBB24 T62-2 T62-4 T62-6 T62 T62-5 T62-15 T62-18 T62-8 T62-12 Hình 4.2 Điện di sản phẩm PCR gen Xa4 sử dụng cặp mồi Npb181 44 T62-10 Bảng 4.13 Tổng hợp kết kiểm tra gen Xa4 25 giống lúa Giống Kết kiểm Giống Kết kiểm Giống tra tra tra Kết kiểm T62 Mang gen T62-7 Mang gen T62-14 Mang gen T62-1 Mang gen T62-8 - T62-15 - T62-2 - T62-9 - T62-16 Mang gen T62-3 - T62-10 - T62-17 Mang gen T62-4 - T62-11 - T61-18 - T62-5 - T62-12 - T61 Mang gen T62-6 - T62-13 - T61-1 Mang gen T61-2 Mang gen T61-3 Mang gen T61-4 - T61-5 Tổng kết 10 giống mang gen Xa4 4.3 Kết lây nhiễm nhân tạo Vết bệnh đo sau 21 ngày lây nhiễm Ta bảng kháng nhiễm sau: 45 Bảng 4.14 Bảng kháng nhiễm STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Tên giống T62 T62-1 T62-2 T62-3 T62-4 T62-5 T62-6 T62-7 T62-8 T62-9 T62-10 T62-11 T62-12 T62-13 T62-14 T62-15 T62-16 T62-17 T62-18 T61 T61-1 T61-2 T61-3 T61-4 T61-5 IRBB24 IRBB4 IRBB7 Lá S S S S S M S S S S M S S S S S M M M M M M M R S S R R Lá M S S S S M S S S S S S S S S S M M R S M S R M R S R R Lá S M S S S S S S S S S S M M M S S M M R M S S R R S R R Lá Lá Tổng kết R/M/S Kết luận M M S S S S S S S S S S M S S S M M M M R M M S M S R R M S S S S S S S S S S S M S S S M M R M R M M S M S R R 0R/3M/2S 0R/2M/3S 0R/0M/5S 0R/0M/5S 0R/0M/5S 0R/2M/5S 0R/0M/5S 0R/0M/5S 0R/0M/5S 0R/0M/5S 0R/1M/5S 0R/0M/5S 0R/3M/2S 0R/1M/4S 0R/1M/4S 0R/0M/5S 0R/4M/1S 0R/5M/0S 2R/3M/0S 1R/3M/1S 0R/3M/2S 0R/3M/2S 1R/3M/1S 2R/1M/2S 2R/2M/1S 0R/0M/5S 5R/0M/0S 5R/0M/0S M S S S S S S S S S S S M S S S M M M M M M M M M S R R Chiều dài vết bệnh - < 8cm: kháng bệnh (R) - - 12cm: nhiễm vừa (M) - >12cm: nhiễm (S) 46 Từ bảng kháng nhiễm ta có kết luận giống bị nhiễm bệnh, ngoại trừ hai đối chứng dương IRBB4 IRBB7 mang gen kháng bệnh bạc nên khơng bị nhiễm bệnh Một số hình ảnh lây nhiễm nhân tạo: Hình 4.3 Một số hình ảnh lây nhiễm nhân tạo 47 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết theo dõi đánh giá số đặc điểm nông sinh học; kiểm tra khả mang gen kháng bệnh bạc 25 giống lúa đưa kết luận đây: - Kết kiểm tra PCR cho thấy giống chứa gen kháng bệnh bạc bao gồm: mẫu giống mang gen kháng Xa7, 10 mẫu giống mang gen kháng Xa4, có mẫu giống mang hai gen kháng Xa4 Xa7 có 10 mẫu giống không mang gen kháng - Sau phân tích chọn lọc chúng tơi kết luận mẫu giống có tiềm cho suất có khả kháng tốt bệnh bạc lá, phù hợp cho giống lúa chất lượng cao mẫu giống là: T61-2; T61-1; T62-7; T62-17 Tuy nhiên, giống cần phải củng cố thêm vài tính trạng nơng sinh học để đạt hiệu tốt 5.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu sâu tính kháng bệnh bạc gen ứng viên Xa4, Xa7 gen ứng viên khác có giống địa Việt Nam Tiếp tục chọn lọc, đánh giá nguồn vật liệu dòng triển vọng để tạo giống lúa có suất cao, chất lượng tốt có khả kháng bền vững với bệnh bạc để phục vụ sản xuất tốt 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Bộ Nông nghiệp & PTNT (2011), QCVN 01-55:2011/BNN&PTNT-Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia khảo nghiệm giá trị canh tác giá trị sử dụng giống lúa Bùi Trọng Thuỷ Phan Hữu Tôn (2003), “Nghiên cứu khả kháng chủng bạc Việt Nam tập đoàn thị chứa gen chống bệnh khác nhau”, Tạp chí KHKT Nơng nghiệp, 1(4), tr 284-288 Bùi Trọng Thuỷ, Phan Hữu Tôn (2004), “Khả kháng bệnh bạc dòng lúa thị (tester) chứa đa gen kháng với số chủng vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae gây bệnh bạc lúa phổ biến Miền Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp, 2, tr.1-6 Dương Đức Huy Nguyễn Văn Hoan (2016), “Chuyển gen Xa7 kháng vi khuẩn bạc vào dòng phục hồi để phát triển lúa lai hai dịng”, Tạp chí KH Nơng nghiệp Việt Nam, 14(12), tr.1859-1867 Dương Xuân Tú, Nguyễn Văn Khởi, Lê Thị Thanh, Nguyễn Thị Hường, Nguyễn Thế Dương, Trần Thị Diệu, Phan Hữu Tôn (2014), “Sử dụng thị ADN xác định gen mùi thơm chọn tạo giống lúa”, Tạp chí Khoa học Phát triển, 12(4), pp.539-548 IRRI (1996), Hệ thống tiêu chuẩn đánh giá lúa, (Xuất lần thứ 4), Viện Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp Việt Nam dịch xuất Lã Vinh Hoa, Tống Văn Hải, Phan Hữu Tôn, Trần Minh Thu (2010), “Khảo sát nguồn gen lúa mang gen kháng bệnh bạc thị phân tử”, Tạp chí Khoa học phát triển, 8(1), tr.9-10 Lê Huy Hàm Trần Đăng Khánh (2015), Ứng dụng thị phân tử chọn tạo giống lúa Nhà xuất Nông nghiệp, 284tr Lưu Văn Quyết (1999), Nghiên cứu bệnh bạc vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv.oryzae hại số giống lúa Đồng sông Hồng, Luận văn Thạc sĩ, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 10 Nguyễn Đức Thành (2014), “Các kỹ thuật thị DNA nghiên cứu chọn lọc thực vật”, Tạp chí Sinh học, 36(3), tr.265-294 11 Nguyễn Thị Hồng Tươi (2015), Phát triển vật liệu lúa cẩm theo hướng tăng khả quang hợp kháng bệnh bạc lá, Luận án Tiến sĩ Nông nghiệp, Học viện Nông nghiệp Việt Nam 12 Nguyễn Thị Lan, Phạm Tiến Dũng (2006), Giáo trình phương pháp thí nghiệm, Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội 13 Nguyễn Văn Giang (2015), “Nghiên cứu chọn tạo giống lúa nếp kháng bệnh bạc thị phân tử cho tỉnh phía Bắc”, Đề tài nhiệm vụ KHCN, Báo cáo kết thực nhiệm vụ KHCN, Đề tài/dự án thuộc Chương trình trọng điểm cấp Nhà nước 14 Nguyễn Văn Hoan (2006), Cẩm nang lúa, Nhà xuất Lao động, tr.169-180 15 Phan Hữu Tôn (2004), “Nghiên cứu thị phân tử phục vụ chọn tạo giống lúa suất cao, chất lƣợng tốt, kháng bệnh bạc Đồng Bằng Bắc Bộ” Báo cáo hội thảo khoa học cơng nghệ quản lý nơng học phát triển Nông nghiệp bền vững Việt Nam 16 Võ Thị Minh Tuyển (2012), Phát triển nguồn vật liệu mang gen kháng vi khuẩn bạc 49 (Xanthomonas oryzae pv Oyzae) phục vụ công tác chọn tạo giống lúa cho tỉnh phía Bắc Việt Nam, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, 142tr 17 Vũ Hồng Quảng, Nguyễn Thị Phƣơng Thảo, Nguyễn Thị Thủy, Phạm Thị Thu Hằng, Nguyễn Văn Hoan (2011), “Phát gen kháng bệnh bạc Xa7, Xa21 dịng bố thị phân tử”, Tạp chí Khoa học Phát triển, 9(2), tr 204-210 Tài liệu tiếng Anh 18 Akhtar M.A., Abbasi F.M., Ahmad H., Shahzad M., Shah M.A., Shah A.H., (2011), “Evaluation of rice germplasm against Xanthomonas oryzae causing bacterial leaf blight”, Pak J Bot 43(6), pp.3021-3023 19 Ali S., Baratali F., Noroozi M and Moazami gudarz K (2014), “Leaf blight resistance in rice: a review of breeding and biotechnology”, International Journal of Farming and Allied Sciences, 3-8, pp.895-902 20 Antony G., Zhou J.H., Huang S., Li T., Liu B., White F., Yang B (2010), “Rice xa13 recessive resistance to bacterial blight is defeated by induction of the disease susceptibility gene Os-11N3”, Plant Cell, 22(11), pp.3864-3876 21 Arif M., Jaffar M., Babar M., Sheikh M.A., Kousar S., Arif A.,, Zafar Y (2008), “Identification of bacterial blight resistance genes Xa4 in Pakistani rice germplasm using PCR”, African Journal of Biotechnology, (5), pp.541-545 22 Busungu C., Taura S., Sakagami J.I., Ichitani K (2016), “Identification and linkage analysis of a new rice bacterial blight resistance gene from XM14, a mutant line from IR24”, Breeding Science, 66, pp.636–645 23 Bradbury L.M.T., Fitzgerald T.L., Henry R.J., Jin Q and Waters D.L.E (2005a), “The gene for fragrance in rice”, Plant Biotechnol J., 3, pp.363-370 24 Bradbury L.M.T., Fitzgerald T.L., Henry R.J., Jin Q and Waters D.L.E (2005b), “A perfect marker for fragrance genotyping in rice”, Molecular Breeding, 16, pp.279-283 25 Cao L.Y., Zhuang J.Y., Zhan X.D., Zheng K.L., Cheng S.H., (2003), “Hybrid rice resistant to bacterial blight developed by marker assisted selection”, Zhongguo Shuidao Kexue (Chinese Journal of Rice Science), 17(2), pp.184-186 26 Chen S., Lin X.H., Xu C.G., Zhang Q.F (2000), “Improvement of bacterial blight resistance of „Minghui 63‟, an elite restorer line of hybrid rice, bymolecularmarkerassisted selection”, Crop Sci, 40, pp.239-244 27 Chen S., Xu C.G., Lin X.H., Zhang Q.F (2001), “Improving bacterial blight resistance of „6078‟, an elite restorer line of hybrid rice, by molecular marker-assisted selection”, Plant Breed, 120, pp.133-137 28 Chen M., Bergman C., Pinson S and Fjellstrom R., (2008), “Waxy gene haplotypes: associations with apparent amylose content and the effect by the environment in an international rice germplasm collection”, Journal of Cereal Science, 47, pp.536-545 29 Chu Z.H., Fu B.H., Yang H., Xu C., Li Z., Sanchez A., Park Y.J., Bennetzen J.L., Zhang Q., Wang S.H., (2006), “Targeting xa13, a recessive gene for bacterial blight resistance in rice”, Theor Appl Genet, 112, pp.455-461 30 Chu Z., Ouyang Y., Zhang J., Yang H., Wang S (2004), “Genome-wide analysis of defense responsive genes in bacterial blight resistance of rice mediated by a recessive R gene, xa13”, Mol Gen Genomics, 271, pp.111-120 31 Cordeiro G.M., Christopher M.J., Henry R.J., Reinke R.F (2002), “Identification of 50 microsatellite markers for fragrance in rice by analysis of the rice genome sequence”, Molecular Breeding, 9, pp.245-50 32 David O.N., Pamela C.R., Adam J.B (2006), “Xanthomonas oryzaepathovars: model pathogens of a model crop”, Molecular Plant Pathalogy, 7(5), pp.303-324.s 51