Khóa luận tốt nghiệp nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố đến nuôi cấy mô lily (lilium poilanei)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN NUÔI CẤY MÔ LILY (LILIUM POILANEI)” Hà Nội - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN NUÔI CẤY MÔ LILY (LILIUM POILANEI)” Sinh viên thực : Nguyễn Thị Ngọc Huyền Lớp : K62CNSHB Mã SV : 620501 Khoa : Công nghệ sinh học Giảng viên hƣớng dẫn : TS Bùi Thị Thu Hƣơng Hà Nội - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan khóa luận hồn tồn đƣợc hồn thiện tìm tịi nghiên cứu khoa học thân dƣới hƣớng dẫn TS Bùi Thị Thu Hƣơng, khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông Nghiệp Việt Nam Tôi xin cam đoan số liệu, hình ảnh kết đƣợc trình bày luận văn trung thực Tôi xin cam đoan thông tin, tài liệu tham khảo luận văn đƣợc ghi rõ nguồn gốc Tôi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan trƣớc hội đồng nhà trƣờng Hà Nội, ngày 16 tháng năm 2021 Ngƣời thực Nguyễn Thị Ngọc Huyền i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, cố gắng nỗ lực thân, em nhận đƣợc quan tâm giúp đỡ nhiều cá nhân tập thể Lời em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến giảng viên TS Bùi Thị Thu Hƣơng – Bộ môn Sinh học – Khoa Công nghệ sinh học – Học Viện Nông nghiệp Việt Nam dành nhiều thời gian, tâm huyết, tận tình giúp đỡ trực tiếp hƣớng dẫn em suốt trình thực khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cám ơn quan tâm, hƣớng dẫn, bảo thầy cô môn Sinh học, thầy cô cán khoa Công nghệ sinh học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam giúp đỡ em nhiều để hồn thành khóa luận tốt nghiệp cách tốt Em xin chân thành cảm ơn thầy giáo, cô giáo trƣờng Học Viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình dạy bảo em suốt năm học qua Cuối em xin gửi tới gia đình, bạn bè lời cám ơn tình cảm chân thành động viên giúp đỡ quý báu mà ngƣời dành cho em suốt thời gian qua Em xin chân thành cám ơn! Hà Nội, ngày 16 tháng năm 2021 Nguyễn Thị Ngọc Huyền ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BIỂU ĐỒ vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii TÓM TẮT ix PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN II TỔNG QUAN T I LIỆU 2.1 Giới thiệu chung lily 2.1.1 Nguồn gốc, vị trí, phân loại thực vật hoa lily 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm thực vật học 2.2.4 Nhân giống hoa lily 2.2 Lily Sapa (Lilium poilanei Gapnep) 11 2.2.1 Cấu tạo 11 2.2.2 Một số nghiên cứu 12 2.3 Tình hình nghiên cứu hoa lily giới Việt Nam 13 2.3.1 Nghiên cứu lily giới 13 2.3.2 Nghiên cứu lily Việt Nam 14 2.3.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng mơi trƣờng dinh dƣỡng chất kích thích sinh trƣởng đến mơ ni cấy 16 PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG V PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 19 iii 3.1.1 Đối tƣợng 19 3.1.2 Thiết bị hóa chất 19 3.1.3 Điều kiện thí nghiệm 19 3.1.4 Địa điểm thời gian nghiên cứu 20 3.2 Nội dung nghiên cứu 20 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 20 3.3.1 Tạo nguồn vật liệu khởi đầu 20 3.3.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng số yếu tố đến nuôi cấy mẫu lily Lilium polanei…………………………………………………………………………… 22 a, Nghiên cứu ảnh hƣởng số yếu tố đến mẫu Lilium poilanei 22 b, Nghiên cứu ảnh hƣởng số chất đến mẫu hoa Lilium poilanei 23 c, Nghiên cứu ảnh hƣởng số chất đến mẫu vảy củ Lilium polanei 24 d, Nghiên cứu ảnh hƣởng số chất đến củ in vitro Lilium poilanei 26 3.4 Phƣơng pháp đánh giá kết xử lí số liệu 27 PHẦN IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Ảnh hƣởng HgCl2 0,1% đến vảy củ L poilanei giai đoạn khử trùng 28 4.2 Ảnh hƣởng HgCl2 0,1% đến L poilanei giai đoạn khử trùng 29 4.3 Ảnh hƣởng NaClO 1,5% đến mẫu hoa L poilanei giai đoạn khử trùng 31 4.4 Ảnh hƣởng 2,4D đến mẫu L poilanei 33 4.5 Ảnh hƣởng BA đến ảnh hƣởng đến mẫu bầu nhụy L poilanei 34 4.6 Ảnh hƣởng BA đến vảy củ L poilanei điều kiện in vitro 36 4.7 Ảnh hƣởng BA kết hợp NAA đến vảy củ L poilanei 38 4.8 Ảnh hƣởng đƣờng saccarose đến phát sinh hình thái vảy củ L poilanei 40 4.9 Ảnh hƣởng BA kết hợp 2,4D đến vảy củ L poilanei 41 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 5.1 Kết luận 45 5.2 Kiến nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 53 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1: Ảnh hƣởng HgCl2 0,1% đến vảy củ lily sau 3, 5, ngày nuôi cấy 28 Bảng 4.2: Ảnh hƣởng HgCl2 0,1% đến lily sau 3, 5, ngày nuôi cấy 30 Bảng 4.3 a: Ảnh hƣởng NaClO 1,5% đến mẫu nhị sau 3, 5, ngày nuôi cấy 31 Bảng 4.3 b: Ảnh hƣởng NaClO 1,5% đến bầu nhụy sau 3, 5, ngày nuôi cấy 32 Bảng 4.4: Ảnh hƣởng 2,4 D đến mẫu lily sau 12 tuần nuôi cấy 34 Bảng 4.5: Ảnh hƣởng BA đến mẫu bầu nhụy lily sau 12 tuần nuôi cấy 35 Bảng 4.6: Ảnh hƣởng BA đến vảy củ lily sau 4, 8, 12 tuần nuôi cấy 36 Bảng 4.7: Ảnh hƣởng BA kết hợp α-NAA đến vảy củ lily in vitro sau 4, 8, 12 tuần theo dõi 38 Bảng 4.8: Ảnh hƣởng đƣờng saccarose đến vảy củ sau 4, 8, 12 tuần nuôi cấy 40 Bảng 4.9: Ảnh hƣởng BA kết hợp 2,4 D đến vảy củ sau 12 tuần nuôi cấy 42 Bảng 4.10: Ảnh hƣởng than hoạt tính đến củ lily in vitro 43 v DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 4.1:Tỷ lệ mẫu vảy củ lily sống sống sau tuần xử lý HgCl2 0,1% thời gian khác 29 Biểu đồ 4.2: Tỷ lệ mẫu sống sống sau tuần xử lý HgCl2 0,1% với thời gian khác 30 Biểu đồ 4.3: Tỷ lệ mẫu sống sống nhị (A) bầu nhụy (B) lily sau tuần xử lý NaClO 1,5% thời gian khác 33 Biểu đồ 4.6: Ảnh hƣởng BA đến phát sinh hình thái vảy củ sau 12 tuần nuôi cấy 37 Biểu đồ 4.7: Ảnh hƣởng BA kết hợp NAA đến vảy củ lily sau 12 tuần nuôi cấy 39 Biểu đồ 4.8: Ảnh hƣởng đƣờng saccarose đến vảy củ sau 12 tuần nuôi cấy 41 Biểu đồ 4.9: Ảnh hƣởng BA 2,4D đến vảy củ lily sau 12 tuần nuôi cấy 42 Biểu đồ 4.10: Ảnh hƣởng THT đến củ lily in vitro sau tuần nuôi cấy 44 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1: Lilium poilanei 12 Hình 3.1: Mẫu hoa, lily (A) củ (B) lily Sapa (Lilium poilanei Gapnep) 19 Hình 4.1: Vảy củ lily đƣợc xử lý HgCl2 0,1% sau ngày nuôi cấy 29 Hình 4.2: Mẫu lily đƣợc xử lí HgCl2 0,1% sau tuần ni cấy 31 Hình 4.3: Mẫu nhị (A) lát cắt bầu nhụy (B) lily sau khử trùng tuần 32 Hình 4.4: Mẫu môi trƣờng MS bổ sung 2,4 D 34 Hình 4.5: Mẫu bầu nhụy môi trƣờng MS bổ sung BA 35 Hình 4.6: Vảy củ lily ni cấy môi trƣờng MS bổ sung BA 37 Hình 4.7: Vảy củ lily ni cấy mơi trƣờng bổ sung BA NAA 39 Hình 4.8: Vảy củ lily mơi trƣờng MS bổ sung đƣờng saccarose 41 Hình 4.9: Vảy củ lily môi trƣờng MS bổ sung BA 2,4D 42 Hình 4.10: Bình củ in vitro (A) củ in vitro (B) mơi trƣờng MS bổ sung than hoạt tính 44 vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BA : Benzyl adenine GAP : Good Agriculture Production MS : Murashige and Skoog, 1962 Sac : Saccharose α-NAA : α-naphtyl acetic acid 2,4 D : Dichlorophenoxyacetic acid THT : Than hoạt tính CV % : Sai số thí nghiệm LSD0,05 : Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 5% NXB : Nhà xuất Cs : Cộng MS120 : Murashige-Skoog bổ sung 120g đƣờng saccharose/l MS90 : Murashige-Skoog bổ sung 90g đƣờng saccharose/l MS60 : Murashige-Skoog bổ sung 60g đƣờng saccharose/l MS30 : Murashige-Skoog bổ sung 30g đƣờng saccharose/l viii Baranova, M.V (1996) The lily species in the flora of the former soviet union and their classification within the genus Lilium Acta Hort (ISHS) 414:133-136 Barba-Gonzalez.R, Lim.K.B., Ramanna M.S and Van Tuyl.J.M.2005, “Use of 2n games for inducing intergenomic recombination in hybrids Acta Hort” 673 p.161-166 Beattie D.J, White.J.W 1993 Lilium hybrid and species In: “The flower bulds (De Hertogh A, Le Nard M, eds) Elsevier Amsterdam”, p 423-342 Bennett and Leitch (1995), “Nuclear DNA amounts in angiosperms”, Annals of Botany; 113-176 Bui Thi Thu Huong, Đong Huy Gioi, Bui Van Thang (2017) Optimisation of an in vitro propagation protocol for a valuable lily (Lilium ssp) Journal of forestry science and technology Vol 5: 18-25 Bui Thi Thu Huong, Trinh Khac Quang (2013) The ability to create lily bulblets of some exotic lily in vitro Science and Technology Jounal of Agriculture & Rural Development, 3+4: 52-59 Comber HF., 1949 “A new classification of the genus Lilium.” Yearbook, Royal Hort Soc, 13: 86-105 10 D T Nhut (1998) “Micropropagation of lily (Lilium longiflorum) via in vitro stem node and pseudo-bulblet culture” Plant Cell Reports (17): 913–916 11 De Jong P.C., 1974 “Some notes on the evolution of lilies North American Yearbook” 27 p.23-28 12 Du, L J., Qi, Y Y., Liu, Y L., Tian, F F., Zhou, Q., & Wang, Y J (2014) Embryogenic cultures of lily (Liliumspp.): optimising callus initiation, maintenance, and plantlet regeneration The Journal of Horticultural Science and Biotechnology, 89(2), 159–166 13 Duong Tan Nhut, Bui Van Le, Michico Tanaa, K Tran Thanh Van (2000) Effects of activated charcoal, explantsize, explant position and sucrose concentration on plant and shoot regeneration of Lilium longiflorum via young stem culture Plant Growth Regulation, 33: 59-65 48 14 Geetika Gambhir, Surinder Kumar, Shweta Sen (2010) An Improved Regeneration System of Oriental Lily Hybrid from Ovary-Ovule Culture Using Plant Growth Regulator Floriculture and Ornamental Biotechnology, 4(1), 9295 15 George EF (1993) Plant Propagation by Tissue Culture, Part 1, Techonology, England: Exegetics: 121-145 16 Grassotti, A., Torrini, F., Mercuri, A and Schiva, T (1990) Genetic improvement of Lilium in Italy Acta Hort (ISHS) 266:339-348 17 Hideaki Miyoshi, Tohru Usami & Ichiro Tanaka (1994) “High level of GUS gene expression driven by pollen-specific promoters in electroporated lily pollen protoplasts” Sexual Plant Reproduction (8): 205–209 18 K Maesato, K Sharada, H Fukui, T Hara and K S Sarma (1994) “In vitro bulblet regeneration from bulbscale explants of Lilium japonicum Thunb Effect of plant growth regulators and culture environment” Journal of Horticultural Science (69): 289-297 19 Kim, Y (1996) lily industry and research, and native Lilium species in korea Acta Hort (ISHS) 414:69-80 20 Linsmaier and Skoog (1965) “Organic growth factor requirements of tobacco tissue cultures” Physiologia Plantarum (18): 100-127 21 Machakova Zazimalova E, George EF (2008) Plant Growth Regulators I: Introduction; Auxins, their Analogues and Inhibitors In: George EF, Hall MA, De Clerk GJ (Eds.), Plant propagation by tissue culture 3rd edition., Vol The background Springer, The Netherlands pp.175-204 22 Montezuma-de-Carvalho, J., & Guimarães, M L L (1974) Production of buds and plantlets from the stamen‟s filament of Lilium regale cultivatedin vitro Biologia Plantarum, 16(6), 472–473 23 Murashige T, 1974 Plant propagation through tissue culture Annu Rev Plant Physiol, 25:135-160 49 24 Murashige T, Skoog F (1962) “A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures” Physiol Plant 15:473–497 25 Nhut DT, Thuy DTT, Don NT, et al (2007) In vitro stem elongation of Paphiopedilum delenatii Guillaumin and shoot regeneration via stem node culture Propag Ornam Plants, 7, 29–36 26 Nhut, D T (1998) Micropropagation of lily (Lilium longiflorum) via in vitro stem node and pseudo-bulblet culture Plant Cell Reports 17(12), 913–916 27 Niimi Y, Nakano M, Isogai N (1999), “Effects of Temperature and Illurninating Conditions on Regeneration and Development of Bulblets in Scale Culture of Seven Lilium Spp.”, Journal of the Japanese Society for Horticultural Science, v.68(1) pp.28 28 Okubo.H (2014) “History of Lilium species in Asia”, Acta Horticulturae, 1027; 11-26 29 Pelkonen V P (2005) Biotechnology approaches in lily (Lilium) production University of Oulu OULU 65pp 30 Pirinc, V., Onay, A., Yıldırım, H., Adıyaman, F., Isıkalan, F., Basaran, D., 2003 Adventitious shoot organogenesis and plant regeneration from cotyledons of diploid Diyarbakır watermelon (Citrullus lanatus cv „„Sürme‟‟) Turk J Biol 27, 101–105 31 Sarma, K., & Rogers, S M (2000) Plant regeneration from seedling explants of Juncus effusus Aquatic Botany 68(3), 239–247 32 SHEILA M ROBB (1957) “The Culture of Excised Tissue Lilium speciosum Thun” Journal of Experimental Botany, Volume 8, Issue 3, 1957, Pages 348– 352 33 Siljak-Yakovlev S., Peccenini, S., Muratovic, E et al (2003) “Chromosomal differentiation and genome size in three European mountain Lilium species” Plant Systematics and Evolution (236): 165–173 50 34 Simmonds, J A., & Cumming, B G (1976) Propagation of Lilium hybrids II Production of plantlets from bulb-scale callus cultures for increased propagation rates Scientia Horticulturae 5(2), 161–170 35 Smyth et al (1989) “A family of repeated sequences dispersed through the genome of Lilium henryi” Chromosoma 92: 149-155 36 Stanilova.M and Zagorska (1993) “Morphogenetic potential and in vitro micropropagation of endangered plant species Leucojum aestivum L and Lilium rhodopaeum Delip” Plant Cell Reports, 13(8):451-454 37 Stewart, J McD., (1981) “In vitro fertilization and embryo rescue” Env Exp Bot 21:301-315 38 Stimart DP, Ascher PD (1978) Tissue culture of bulb scale sections for asexual propagation of Lilium longiflorum Thunb Journal of the American Society for Horticultural Sciences 103, 182-184 39 Takayama & Misawa (1979) Differentiation in Lilium Bulbscales Grown in vitro Effect of Various Cultural Conditions Physiologia Plantarum, 46: 184– 190 40 Takayama and Takashige (1982) “Cultivation of in vitro-propagated Lilium bulbs in soil” J Amer Soc Hort Sci 107:830-834 41 Tang, Y P., Liu, X Q., Gituru, R W., & Chen, L Q (2010) Callus Induction and Plahảont Regeneration from In Vitro Cultured Leaves, Petioles and Scales of Lilium Leucanthum (Baker) Baker Biotechnology & Biotechnological Equipment, 24(4), 2071–2076 https://doi.org/10.2478/V10133-010-0077-4 42 Torres, K C (1989) In Vitro Propagation of Lilies Tissue Culture Techniques for Horticultural Crops, 85–91 43 Van Aartrijk, J., & Blom-Barnhoorn, G J (1981) Growth regulator requirements for adventitious regeneration from Lilium bulb-scale tissue in vitro, in relation to duration of bulb storage and cultivar Scientia Horticulturae, 14(3), 261–268 51 44 Van Meeteren, U and M de Proft (1982) “Inhibition of flower bud abscission and ethylene evolution by light and silver thiosulphate in Lilium” Physiol Plant 56:236-240 45 Van tuyl, Boon E 1997 “Variation in DNA-content in the genus Lilium”, Acta horticulturae, 430: p829-835 46 Verron, P., Le Nard, M., & Cohat, J (1995) In vitro organogenic competence of different organs and tissues of lily of the valley “Grandiflora of Nantes.” Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 40(3), 237–242 47 White, P.R.: The cultivation of animal and plant cells, 2nd cdn New York: Ronald Press 1963 48 Wickremesinhe, E R M., Holcomb, E J., & Arteca, R N (1994) A practical method for the production of flowering Easter lilies from callus cultures Scientia Horticulturae, 60(1-2), 143–152 49 William F Sheridan (1968) “Tissue Culture of the Monocot Lilium” Planta: 189-192 50 Yoshiji Niimi and Tsuyoshi Onozawa (1979) “In vitro bulblet formation from leaf segments of lilies, especially Lilium rubellum Baker” Scientia Horticulturae (11): 379-389 51 Zaghmont.O, Lorres.K.C (1985), “The effect of various carbohydrate sources and concentration on the growth of lilium in vitro” Hort science, v20(4), pp 660 52 Zhao, X., Chen, X., Li, D and Liu, K (1996) Resoure and research situation of the genus Lilium in China Acta Hort (ISHS) 414:59-68 52 PHỤ LỤC Kết chạy irristat TN6: Sau tuan BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN6 9/ 9/21 1: :PAGE Anh huong cua BA sau tuan VARIATE V003 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 3.33333 1.66667 0.14 0.873 CT 473.333 118.333 9.79 0.004 * RESIDUAL 96.6666 12.0833 * TOTAL (CORRECTED) 14 573.333 40.9524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSTC FILE TN6 9/ 9/21 1: :PAGE Anh huong cua BA sau tuan VARIATE V004 HSTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 133333E-02 666666E-03 0.76 0.501 CT 750000E-01 187500E-01 21.43 0.000 * RESIDUAL 699999E-02 874999E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 833333E-01 595238E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6 9/ 9/21 1: :PAGE Anh huong cua BA sau tuan MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 TLTC 31.0000 31.0000 32.0000 HSTC 0.340000 0.320000 0.340000 SE(N= 5) 1.55456 0.132287E-01 5%LSD 8DF 5.06927 0.431376E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLTC 21.6667 30.0000 38.3333 35.0000 31.6667 HSTC 0.216667 0.316667 0.433333 0.366667 0.333333 SE(N= 3) 2.00693 0.170782E-01 5%LSD 8DF 6.54440 0.556904E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6 9/ 9/21 1: :PAGE Anh huong cua BA sau tuan 53 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTC HSTC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 31.333 15 0.33333 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 6.3994 3.4761 11.1 0.8730 0.77152E-010.29580E-01 8.9 0.5010 |CT | | | 0.0039 0.0004 | | | | Sau 12 tuan BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN6 9/ 9/21 0:39 :PAGE Anh huong cua BA sau 12 tuan VARIATE V003 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 3.33333 1.66667 0.14 0.873 CT 473.333 118.333 9.79 0.004 * RESIDUAL 96.6666 12.0833 * TOTAL (CORRECTED) 14 573.333 40.9524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSTC FILE TN6 9/ 9/21 0:39 :PAGE Anh huong cua BA sau 12 tuan VARIATE V004 HSTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 133333E-02 666667E-03 0.76 0.501 CT 750000E-01 187500E-01 21.43 0.000 * RESIDUAL 700000E-02 875000E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 833333E-01 595238E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTL FILE TN6 9/ 9/21 0:39 :PAGE Anh huong cua BA sau 12 tuan VARIATE V005 TLTL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 3.33333 1.66667 0.21 0.816 CT 376.667 94.1667 11.89 0.002 * RESIDUAL 63.3333 7.91666 * TOTAL (CORRECTED) 14 443.333 31.6667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6 9/ 9/21 0:39 :PAGE Anh huong cua BA sau 12 tuan MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 TLTC 36.0000 36.0000 37.0000 HSTC 0.390000 0.370000 0.390000 54 TLTL 32.0000 33.0000 32.0000 SE(N= 5) 1.55456 0.132288E-01 1.25831 5%LSD 8DF 5.06927 0.431376E-01 4.10321 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLTC 26.6667 35.0000 43.3333 40.0000 36.6667 HSTC 0.266667 0.366667 0.483333 0.416667 0.383333 TLTL 25.0000 28.3333 33.3333 36.6667 38.3333 SE(N= 3) 2.00693 0.170783E-01 1.62447 5%LSD 8DF 6.54440 0.556904E-01 5.29722 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6 9/ 9/21 0:39 :PAGE Anh huong cua BA sau 12 tuan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTC HSTC TLTL GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 36.333 15 0.38333 15 32.333 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 6.3994 3.4761 9.6 0.8730 0.77152E-010.29580E-01 7.7 0.5010 5.6273 2.8137 8.7 0.8156 |CT | | | 0.0039 0.0004 0.0022 | | | | TN7: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN7 10/ 9/21 0:31 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau tuan VARIATE V003 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 103.333 51.6667 2.82 0.118 CT 1883.33 470.833 25.68 0.000 * RESIDUAL 146.666 18.3333 * TOTAL (CORRECTED) 14 2133.33 152.381 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSTC FILE TN7 10/ 9/21 0:31 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau tuan VARIATE V004 HSTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 400000E-02 200000E-02 0.71 0.525 CT 1.16333 290833 102.65 0.000 * RESIDUAL 226667E-01 283334E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.19000 850000E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7 10/ 9/21 0:31 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau tuan MEANS FOR EFFECT NL - 55 NL NOS 5 TLTC 43.0000 49.0000 48.0000 HSTC 0.880000 0.920000 0.900000 SE(N= 5) 1.91485 0.238048E-01 5%LSD 8DF 6.24413 0.776250E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLTC 33.3333 40.0000 66.6667 48.3333 45.0000 HSTC 0.383333 1.03333 1.21667 0.950000 0.916667 SE(N= 3) 2.47206 0.307318E-01 5%LSD 8DF 8.06114 0.100213 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7 10/ 9/21 0:31 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau tuan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTC HSTC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 46.667 15 0.90000 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 12.344 4.2817 9.2 0.1176 0.29155 0.53229E-01 5.9 0.5254 |CT | | | 0.0002 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN7 9/ 9/21 11:20 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau 12 tuan | | | | VARIATE V003 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 23.3333 11.6667 2.15 0.178 CT 2026.67 506.667 93.54 0.000 * RESIDUAL 43.3334 5.41667 * TOTAL (CORRECTED) 14 2093.33 149.524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSTC FILE TN7 9/ 9/21 11:20 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau 12 tuan VARIATE V004 HSTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 633333E-02 316667E-02 3.62 0.075 CT 1.70900 427250 488.29 0.000 * RESIDUAL 699995E-02 874993E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.72233 123024 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTL FILE TN7 9/ 9/21 11:20 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau 12 tuan 56 VARIATE V005 TLTL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 10.0000 5.00000 0.71 0.525 CT 373.333 93.3333 13.18 0.002 * RESIDUAL 56.6667 7.08333 * TOTAL (CORRECTED) 14 440.000 31.4286 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE TN7 9/ 9/21 11:20 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau 12 tuan VARIATE V006 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 23.3333 11.6667 1.56 0.269 CT 1290.00 322.500 43.00 0.000 * RESIDUAL 60.0002 7.50002 * TOTAL (CORRECTED) 14 1373.33 98.0952 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7 9/ 9/21 11:20 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau 12 tuan MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 TLTC 57.0000 56.0000 54.0000 HSTC 1.03000 1.05000 1.08000 TLTL 41.0000 43.0000 42.0000 TLRR 30.0000 33.0000 31.0000 SE(N= 5) 1.04083 0.132287E-01 1.19024 1.22475 5%LSD 8DF 3.39405 0.431375E-01 3.88125 3.99377 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLTC 41.6667 48.3333 75.0000 61.6667 51.6667 HSTC 0.466667 1.21667 1.48333 1.13333 0.966667 TLTL 35.0000 38.3333 41.6667 48.3333 46.6667 TLRR 16.6667 26.6667 31.6667 38.3333 43.3333 SE(N= 3) 1.34371 0.170782E-01 1.53659 1.58114 5%LSD 8DF 4.38170 0.556902E-01 5.01067 5.15594 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7 9/ 9/21 11:20 :PAGE Anh huong cua BA ket hop NAA sau 12 tuan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTC HSTC TLTL TLRR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 55.667 15 1.0533 15 42.000 15 31.333 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 12.228 2.3274 4.2 0.1777 0.35075 0.29580E-01 2.8 0.0754 5.6061 2.6615 6.3 0.5254 9.9043 2.7386 8.7 0.2687 57 |CT | | | 0.0000 0.0000 0.0016 0.0000 | | | | TN8: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN8 10/ 9/21 1:37 :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau tuan VARIATE V003 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 4.16667 2.08333 0.16 0.857 CT 89.5833 29.8611 2.26 0.181 * RESIDUAL 79.1667 13.1944 * TOTAL (CORRECTED) 11 172.917 15.7197 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSTC FILE TN8 10/ 9/21 1:37 :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau tuan VARIATE V004 HSTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 416664E-03 208332E-03 0.20 0.825 CT 165000 550000E-01 52.80 0.000 * RESIDUAL 625000E-02 104167E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 171667 156061E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN8 10/ 9/21 1:37 :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau tuan MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 4 TLTC 60.0000 60.0000 61.2500 HSTC 1.32500 1.31250 1.31250 SE(N= 4) 1.81621 0.161374E-01 5%LSD 6DF 6.28255 0.558219E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLTC 56.6667 60.0000 65.0000 58.3333 HSTC 1.18333 1.36667 1.48333 1.23333 SE(N= 3) 2.09718 0.186339E-01 5%LSD 6DF 7.25447 0.644576E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN8 10/ 9/21 1:37 :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau tuan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 60.417 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.9648 3.6324 6.0 0.8573 58 |CT | | | 0.1811 | | | | HSTC 12 1.3167 0.12492 0.32275E-01 2.5 0.8245 0.0002 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN8 9/ 9/21 12: :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau 12 tuan VARIATE V003 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 16.6667 8.33333 0.60 0.582 CT 116.667 38.8889 2.80 0.131 * RESIDUAL 83.3333 13.8889 * TOTAL (CORRECTED) 11 216.667 19.6970 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSTC FILE TN8 9/ 9/21 12: :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau 12 tuan VARIATE V004 HSTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 125000E-02 625000E-03 0.53 0.617 CT 261667 872222E-01 73.88 0.000 * RESIDUAL 708329E-02 118055E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 270000 245455E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLPSHT FILE TN8 9/ 9/21 12: :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau 12 tuan VARIATE V005 TLPSHT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 4.16667 2.08333 0.13 0.880 CT 72.9167 24.3056 1.52 0.302 * RESIDUAL 95.8333 15.9722 * TOTAL (CORRECTED) 11 172.917 15.7197 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRL FILE TN8 9/ 9/21 12: :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau 12 tuan VARIATE V006 TLRL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 4.16667 2.08333 0.20 0.825 CT 250.000 83.3333 8.00 0.017 * RESIDUAL 62.5000 10.4167 * TOTAL (CORRECTED) 11 316.667 28.7879 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN8 9/ 9/21 12: :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau 12 tuan MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 4 TLTC 77.5000 77.5000 HSTC 1.61250 1.58750 59 TLPSHT 83.7500 85.0000 TLRL 36.2500 37.5000 75.0000 1.60000 85.0000 36.2500 SE(N= 4) 1.86339 0.171796E-01 1.99826 1.61374 5%LSD 6DF 6.44576 0.594268E-01 6.91231 5.58219 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLTC 73.3333 76.6667 81.6667 75.0000 HSTC 1.46667 1.55000 1.85000 1.53333 TLPSHT 81.6667 85.0000 88.3333 83.3333 TLRL 43.3333 38.3333 33.3333 31.6667 SE(N= 3) 2.15166 0.198372E-01 2.30740 1.86339 5%LSD 6DF 7.44293 0.686202E-01 7.98165 6.44576 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN8 9/ 9/21 12: :PAGE Anh huong cua duong saccarose sau 12 tuan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTC HSTC TLPSHT TLRL GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 76.667 12 1.6000 12 84.583 12 36.667 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.4381 3.7268 4.9 0.5819 0.15667 0.34359E-01 2.1 0.6174 3.9648 3.9965 4.7 0.8797 5.3654 3.2275 8.8 0.8245 |CT | | | 0.1308 0.0001 0.3023 0.0169 | | | | TN9: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTC FILE TN9 9/ 9/21 12:51 :PAGE Anh huong cua BA ket hop 2,4D sau 12 tuan VARIATE V003 TLTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 8.33333 4.16667 0.71 0.516 CT 1445.83 289.167 49.57 0.000 * RESIDUAL 10 58.3334 5.83334 * TOTAL (CORRECTED) 17 1512.50 88.9706 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTMS FILE TN9 9/ 9/21 12:51 :PAGE Anh huong cua BA ket hop 2,4D sau 12 tuan VARIATE V004 TLTMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 19.4444 9.72222 1.21 0.340 CT 2777.78 555.556 68.97 0.000 * RESIDUAL 10 80.5557 8.05557 * TOTAL (CORRECTED) 17 2877.78 169.281 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN9 9/ 9/21 12:51 :PAGE Anh huong cua BA ket hop 2,4D sau 12 tuan MEANS FOR EFFECT NL - 60 NL NOS 6 TLTC 31.6667 30.0000 30.8333 TLTMS 27.5000 29.1667 30.0000 SE(N= 6) 0.986013 1.15870 5%LSD 10DF 3.10696 3.65112 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 TLTC 45.0000 36.6667 33.3333 28.3333 25.0000 16.6667 TLTMS 8.33333 18.3333 28.3333 33.3333 43.3333 41.6667 SE(N= 3) 1.39443 1.63866 5%LSD 10DF 4.39391 5.16346 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN9 9/ 9/21 12:51 :PAGE Anh huong cua BA ket hop 2,4D sau 12 tuan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTC TLTMS GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 30.833 18 28.889 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.4324 2.4152 7.8 0.5165 13.011 2.8382 9.8 0.3401 |CT | | | 0.0000 0.0000 | | | | TN10: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTL FILE TN10 15/ 9/21 14:24 :PAGE Anh huong cua than hoat tinh den cu in vitro VARIATE V003 TLTL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 124.542 62.2711 2.47 0.145 CT 1522.77 380.693 15.11 0.001 * RESIDUAL 201.532 25.1915 * TOTAL (CORRECTED) 14 1848.84 132.060 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE TN10 15/ 9/21 14:24 :PAGE Anh huong cua than hoat tinh den cu in vitro VARIATE V004 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 41.4430 20.7215 2.15 0.178 CT 2590.02 647.506 67.26 0.000 * RESIDUAL 77.0163 9.62704 * TOTAL (CORRECTED) 14 2708.48 193.463 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE TN10 15/ 9/21 14:24 :PAGE Anh huong cua than hoat tinh den cu in vitro 61 VARIATE V005 CDR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 369334E-02 184667E-02 0.27 0.774 CT 3.42771 856927 123.80 0.000 * RESIDUAL 553730E-01 692163E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.48677 249055 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE TN10 15/ 9/21 14:24 :PAGE Anh huong cua than hoat tinh den cu in vitro VARIATE V006 SR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 326933E-01 163467E-01 1.15 0.365 CT 8.63173 2.15793 151.83 0.000 * RESIDUAL 113705 142132E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 8.77813 627010 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN10 15/ 9/21 14:24 :PAGE Anh huong cua than hoat tinh den cu in vitro MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 TLTL 69.3340 74.6680 67.9980 TLRR 73.3340 74.6660 77.3320 CDR 1.43800 1.45200 1.47600 SR 2.21400 2.32600 2.25000 SE(N= 5) 2.24462 1.38759 0.372065E-01 0.533163E-01 5%LSD 8DF 7.31946 4.52479 0.121327 0.173859 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TLTL 55.5567 62.2233 82.2233 77.7767 75.5533 TLRR 51.1100 77.7767 88.8900 84.4467 73.3300 CDR 0.760000 1.15333 2.17333 1.67667 1.51333 SR 1.21667 1.52000 3.13333 2.88000 2.56667 SE(N= 3) 2.89779 1.79137 0.480334E-01 0.688311E-01 5%LSD 8DF 9.44938 5.84148 0.156632 0.224451 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN10 15/ 9/21 14:24 :PAGE Anh huong cua than hoat tinh den cu in vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTL TLRR CDR SR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 70.667 15 75.111 15 1.4553 15 2.2633 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 11.492 5.0191 7.1 0.1450 13.909 3.1027 4.1 0.1779 0.49905 0.83196E-01 5.7 0.7744 0.79184 0.11922 5.3 0.3651 62 |CT | | | 0.0011 0.0000 0.0000 0.0000 | | | |