Nghiên cứu sản xuất cây giống lan kim tuyến (anoectochilus roxburghii (wall ) lindl) nuôi cấy mô trong điều kiện vườn ươm tại bán đảo sơn trà, đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM ĐÀO THỊ THẢO NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT CÂY GIỐNG LAN KIM TUYẾN (Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl) NUÔI CẤY MÔ TRONG ĐIỀU KIỆN VƢỜN ƢƠM TẠI BÁN ĐẢO SƠN TRÀ, ĐÀ NẴNG LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THỰC NGHIỆM Đà Nẵng – 2023 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM ĐÀO THỊ THẢO NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT CÂY GIỐNG LAN KIM TUYẾN (Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl) NUÔI CẤY MÔ TRONG ĐIỀU KIỆN VƢỜN ƢƠM TẠI BÁN ĐẢO SƠN TRÀ, ĐÀ NẴNG LUẬN VĂN THẠC SĨ Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 8420114 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Võ Châu Tuấn Đà Nẵng – 2023 v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii TRANG THÔNG TIN LUẬN VĂN THẠC SĨ iii MỤC LỤC v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC HÌNH ẢNH viii DANH MỤC BẢNG ix MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Bố cục đề tài Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu lan kim tuyến 1.1.1 Nguồn gốc phân bố 1.1.2 Đặc điểm hình thái lan kim tuyến 1.1.3 Điều kiện sinh thái 1.1.4 Giá trị kinh tế dược liệu lan kim tuyến 1.2 Khái quát nuôi cấy mô thực vật nhân giống in vitro 1.2.1 Các giai đoạn quy trình nhân giống in vitro thực vật 1.2.2 Các yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến nhân giống vơ tính in vitro thực vật .10 1.3 Tình hình nghiên cứu lan kim tuyến 13 1.3.1 Nghiên cứu Thế giới 13 1.3.2 Nghiên cứu Việt Nam 14 1.4 Giới thiệu sơ lược điều kiên tự nhiên bán đảo Sơn Trà – Đà Nẵng .16 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG, PHẠM VI VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.2 Phạm vi nghiên cứu 18 2.3 Nội dung nghiên cứu 18 2.4 Phương pháp nghiên cứu 19 vi 2.4.1 Phương pháp tạo rễ từ chồi in vitro lan kim tuyến 20 2.4.2 Phương pháp tạo giống lan kim tuyến in vitro điều kiện vườn ươm 20 2.4.3 Phương pháp xử lí số liệu 21 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Ảnh hưởng thành phần môi trường nuôi cấy đến khả tạo rễ in vitro lan kim tuyến 22 3.1.1 Ảnh hưởng chất ĐHST đến khả rễ lan kim tuyến .22 3.1.2 Ảnh hưởng than hoạt tính đến khả tạo rễ in vitro lan kim tuyến 26 3.1.3 Ảnh hưởng hàm lượng mơi trường khống MS đến khả tạo rễ in vitro lan kim tuyến .28 3.2 Khảo sát ảnh hưởng điều kiện ươm trồng đến khả sống sót sinh trưởng lan kim tuyến in vitro điều kiện vườn ươm bán đảo Sơn Trà - Đà Nẵng 30 3.2.1 Ảnh hưởng thời gian thích nghi đến khả sống lan kim tuyến in vitro 31 3.2.2 Ảnh hưởng thời gian che phủ bầu ươm đến khả sống lan kim tuyến in vitro .32 3.2.3 Ảnh hưởng chất ươm trồng đến khả sống sinh trưởng lan kim tuyến in vitro 34 3.2.4 Ảnh hưởng chế độ tưới nước đến khả sinh trưởng lan kim tuyến in vitro vườn ươm 37 3.2.5 Ảnh hưởng che sáng đến khả sinh trưởng lan kim tuyến in vitro 39 KẾT LUẬN 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BA Benzyl Adenin BAP 6-Benzyl Amino Purine ĐHST Điều hòa sinh trưởng IAA 3-Indole acetic acid IBA 3-Indole butyric acid KIN Kinetin MS Murashige – Skoog NAA Napthalene Acetic Acid PBLs Protocorm like body TDZ Thidiazuron 2,4-D 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Cs Cộng viii DANH MỤC BẢNG Số hiệu Tên bảng Trang Bảng 3.1 Ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ in vitro lan kim tuyến 23 Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ IBA đến khả tạo rễ in vitro lan kim tuyến 25 Bảng 3.3 Ảnh hưởng than hoạt tính đến khả tạo rễ in vitro lan kim tuyến 27 Bảng 3.4 Ảnh hưởng mơi trường khống MS đến khả tạo rễ in vitro lan kim tuyến 29 Bảng 3.5 Ảnh hưởng thời gian làm thích nghi đến khả sống in vitro vườn ươm 31 Bảng 3.6 Ảnh hưởng thời gian phủ túi nilon lên bầu ươm đến khả sống in vitro vườn ươm 33 Bảng 3.7 Ảnh hưởng chất ươm trồng đến khả sống sót sinh trưởng lan kim tuyến in vitro 35 Bảng 3.8 Ảnh hưởng nước tưới đến khả sinh trưởng lan kim tuyến in vitro vườn ươm 37 Bảng 3.9 Ảnh hưởng che sáng đến khả sinh trưởng lan kim tuyến in vitro vườn ươm 39 [50] Sukamto L A., Rahayu E D and Sandra E (2011), "Characteristics between Anoectochilus setaceus and Anoectochilus formosanus by application of TDZ in vitro", International Conference of Science and Technology (AICST), 9(3) [51] Synková H, Haisel D and Semorádová S (2007), “Acclimation of plantlets to ex vitro conditions: Effects of air humidity, irradiance, CO concentration and abscisic acid (a Review)”, Acta Horticulturae, 748(748), 29-38 [52] Valle R O., Luciana, De Faria, Ricardo Tadeu (2005), “In vitro propagation of Brazilian orchids using traditional culture media and commercial fertilizers formulations”, Universidade Estadual de Maringá, Maringá, Brasil Acta Scientiarum Agronomy, 27(1), pp 1-4 [53] Yu L W., Lai Wan Nian (2005), The prospect of planting Anoectochilus in Hainan Island [54] Zeng B., Minghua Su, Qingxi Chen, Qiang Chang, Wei Wang Huihua Li (2020), “Anoectochilus roxburghii polysaccharide prevents carbon tetrachloride-induced liver injury in mice by metabolomic analysis”, Journal of Chromatography B, Volume 1152 – 122202 [55] Zhang A., Wang H., Qingsong Shao, Mengjie Xu,Wangshu Zhang, Mingyan Lic(2015), “Large scale in vitro propagation of Anoectochilus roxburghii forcommercial application: Pharmaceutically important andornamental plant”, Industrial Crops and Products, 70 (2015), 158–162 Tài liệu từ internet [56] https://khonggiansinhhoc.com/nuoi-cay-mo-thuc-vat-va-cac-chat-bo-sungvao-moi-truong-nuoi-cay-phan-ii/ truy cập ngày 2/11/2022 id6ng ch~rn lu~n van th~c SI cua hQc vien Dao Th! Thao, lap K40.SHTN, nganh Sinh hQc th\l'c nghi~m, v€ d€ tai Nghien cu'u san xu§t gi6ng Ian Kim Tuy~n (Anoectocbilus roxburghii (Wall.) Lindt) nuoi c§y rno miu ki~n vU'irn U'O'rnt~i ban dao So'n Tra, Da Ning, g6m cac vien co ten danh sach kern theo Diiu H(>id6ng co trach nhi~m danh gia lu~n van th~c SI thea dUng quy dinh cua B(>Giao d\lc va Bao t~o Sau hoan nhi~m V\l,H(>id6ng tlJ giai th~ Diiu Thli truo-ng cac dan vi lien quan; cac vien co ten danh sach H(>id6ng can Clr Quy€t dinh thi hanh.~ NO'i ""{ill: - Nhu Di~lI3 (dS tlwc hi~n); - BGH (d~ bi~t); - LUll: VT, DT.~ CQNG HoA xA HOI CHU NGHiA VJ:JtTNAM DQc I~p - T\l' - H~nh p hu c DAJ HOC DA NANG TRUONG D~I HQC SU PH~ DANH SACH THANH VrEN HOI DONG CHAM LU~N VAN TH~C (Theo Quyit dinh thanb l(lp H(Jiil6ng s6)3WQD-DHSP si l-':f- thimg)L ndm 1.{)l.L cua Hieu trutrng Truong Dai hoc Su pham- fJHfJN) - Hoc vien tlurc hien: Dao Th] Thao Ten d€ tai: Nghien ciru san xu§t giBng Ian Kim Tuyen (Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl) nuoi c§y rno di~u ki~n vmm urrm t~i ban Son Tra, Da Ning - Nguoi huang dfrn: TS Vo Chau Tu§n TRACHNIDtM HQ STT vA TEN, NO! CONG T Ac TRONGHOI DONG TS Nguyen Minh Ly Tnrong Dai hoc Sir pharn - D~i hoc Da Nang TS Tr!n Quang D!n Phan bien Vien Cong nghe sinh hoc - Dai hoc Hu€ TS Phim bien Truong Dai hoc Su pham - Dai hoc Da N~ng TS Nguy~n Duc Huy ThucyHD Truong Dai hoc Sir pham - Dai hoc Da N~g TS Bill Thi ThO' Chli tich HD H6 Thanh Tam Truang D~i hcDuy Tan HOi d6ng g6m co thfmh vien Uy vienHD (UO B~I HQC BA NANG TRUONG D~I HQC SU PH~M HO SO HOI BONG CHAM LU~N VAN TH~C st H(Jc vien: DilO Thi Thao ~ Bien ban H9i dbng Bang diem cua hoc vien cao hoc Ly lich khoa hoc cua hoc vien rn/ ni Bien ban kiern phieu Phieu ghi noi dung cau hoi va tra Uri cua h9C vien at" Nh~n xet if Phieu cham diem Gt HQvATEN STT Ly NH~NXET TRAeH NHI"E:M TRONG H(H Phiiu Ban DONG iliim nh{in xet cn« tich HD V t/ > V TS.Nguy~n Minh TS Trc1nQuang D§n TS.BuiThjTha Phim bien V TS Nguyen Dire Huy Phim bien V TS Hb Thanh Tam TS ve Chau Tuftn ThukfHD V Uy vien Nguoi huang ddn V V L,,)v / r oe N{mg, ngay! Sthcingcj,nam z (J 2. Thu ky H9i dbng n~I HOC nA NANG TRUONG n~I HOC str PH~M CONG HoA xA HOI cHiJ NGHiA VI~T NAM nQc I~p - TV - Hanh phtic BIEN BAN HOP HOI nONG CHAM LU~N VAN TH~C st Ten d€ Uti: Nghien ciru san xu~t giong Ian Kim Tuyen (Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl) nuoi dy mo di€u kien viron irorn tai ban dao San Tra, Da NfuIg Nganh: Sinh hoc thuc nghiem Lap: K40.SHTN Theo Quyet dinh l~p H9i d6ng cham Iu~n van thac S1 s615'fP IQD-DHSP thang 'l nam s» 2 Ngay h9P H9i d6ng: Ifthang {J1 ndm 2»2.J Danh sach cac vien H9i d6ng: STT HovATEN VI TRONG CUONG HOI nONG TS.Nguy€n Minh Ly TS Tr~n Quang D~n TS Bui Thj ThO' TS Nguyen Dtrc Huy TS ue Thanh a Thanh vien co mat: Chli tich Thtr ky Phan bien Phan bien Tam Uy vien or- ~~ - b Thanh vien vang mat: ~D _ Thu ky H9i d6ng bao cao qua trinh hoc t~p, nghien ciru cua hoc vien cao h9C va d9C Iy lich khoa hoc (co van ban kern theo) H9C vien cao h9C trinh bay luan van Cac phan bi~n d9C nh~n xct va neu cau hoi (co van ban kern theo) H9C vien cao h9c tni Uyicac cau hoi clla vien H9i d6ng 10 H9i d6ng h9P rieng d~ danh gia 11 TruOng ban ki~rn phiSu cong b6 kSt qua 12 KSt lu~n clla H9i d6ng a) KSt lu~n chung: vh ~ ~~ b) Yeu r '" J~LtJ ~ub ~ ~j ~v " Lf-:( ( • C ~ 2Da Nang, I THVKY HOI DONG r thang -4 nam cnu TrCH HOI DONG -1? i.> , - CQNG HOA xX HQI CHi] NGHiA VI.E:T NAM DQc I,p - Tl}'do - Hanh phuc -000 sf BAN NH~N xET LU~N VAN T~C (Dung cho phan bi~n) r A ~ , A ~ ~ Chuyen nganh: ~ 'A ~ ~ c' ~c,n (,\i" C) ~I.L I I , " b£rJ ~ 110m ~ • ~~ I / ff :n8.Lw:\.lUx.r:l¥ f.ill.!h •• rh~