Nghiên cứu sản xuất cây giống hương thảo (rosmarinus officinalist l ) bằng kỹ thuật nuôi cấy mô

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐINH THỊ MỸ NHUNG NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT CÂY GIỐNG HƯƠNG THẢO (Rosmarinus officinalist L.) BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THỰC NGHIỆM Đà Nẵng – 2022 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐINH THỊ MỸ NHUNG NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT CÂY GIỐNG HƯƠNG THẢO (Rosmarinus officinalist L.) BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ LUẬN VĂN THẠC SĨ Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 8420114 Người hướng dẫn khoa học: TS Võ Châu Tuấn Đà Nẵng – 2022 i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn này, tơi xin chân thành cảm ơn đến thầy TS Võ Châu Tuấn, hướng dẫn tơi suốt q trình làm luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn Thầy, Cô trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng giảng dạy cho nhiều kiến thức kinh nghiệm nghiên cứu quý báu Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè động viên tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành q trình học tập nghiên cứu Đà Nẵng, tháng năm 2022 Đinh Thị Mỹ Nhung 11 LOI CAM DOAN Toi cam doan day la cong trinh nghien cuu duqc chinh toi thl_rc hi�n duoi slJ huong d�n cua TS Vo Chau Tu�n Cac s6 li�u, kSt qua neu lu�n van la trung thvc va chua tung duqc cong b6 b�t ky cong trinh nao khac Da Nfmg, thcing nam 2022 H9c vien E>inh Thi My Nhung v MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Bố cục đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu hương thảo 1.1.1 Đặc điểm sinh học hương thảo 1.1.2 Giá trị sử dụng hương thảo 1.1.3 Thành phần hóa học có hoạt tính dược học hương thảo 1.2 Nghiên cứu nhân giống in vitro thực vật 1.2.1 Cở sở khoa học nhân giống in vitro 1.2.2 Các giai đoạn nhân giống in vitro 11 1.2.3 Ưu điểm hạn chế nhân giống in vitro 13 1.2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình nhân giống in vitro 14 1.3 Tình hình nghiên cứu hương thảo 18 1.3.1 Nghiên cứu Việt Nam 18 1.3.2 Nghiên cứu Thế Giới 19 Chương ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Đối tượng nghiên cứu 21 2.2 Phạm vi nghiên cứu 21 2.3 Nội dung nghiên cứu 22 2.4 Phương pháp nghiên cứu 22 2.4.1 Phương pháp nhân chồi in vitro hương thảo từ đoạn thân 23 vi 2.4.2 Phương pháp nhân chồi in vitro hương thảo từ protocorm 23 2.4.3 Phương pháp tạo rễ in vitro hương thảo 23 2.4.4 Phương pháp tạo giống hương thảo vườn ươm 24 2.4.5 Phương pháp xử lí số liệu 25 3.1 Ảnh hưởng chất ĐHST đến khả nhân chồi từ đoạn thân hương thảo in vitro 26 3.1.1 Ảnh hưởng BAP đến khả nhân chồi in vitro từ đoạn thân 26 3.1.2 Ảnh hưởng KIN đến khả nhân chồi in vitro từ đoạn thân 29 3.1.3 Ảnh hưởng BAP NAA đến khả nhân chồi in vitro từ đoạn thân 31 3.1.4 Ảnh hưởng TDZ đến khả nhân chồi in vitro từ đoạn thân 32 3.2 Ảnh hưởng chất ĐHST đến khả nhân chồi in vitro từ protocorm 35 3.2.1 Ảnh hưởng BA đến khả nhân chồi từ protocorm 35 3.2.2 Ảnh hưởng KIN đến khả nhân chồi in vtro từ protocorm37 3.3 Ảnh hưởng chất ĐHST đến khả tạo rễ in vitro hương thảo 38 3.3.1 Ảnh hưởng IBA đến tạo rễ in vitro hương thảo 39 3.3.2 Ảnh hưởng NAA đến tạo rễ in vitro 40 3.4 Ảnh hưởng yếu tố đến khả sống sót sinh trưởng in vitro điều kiện vườn ươm 41 3.4.1 Ảnh hưởng thời gian thích nghi đến khả sống sót in vitro 42 vii 3.4.2 Ảnh hưởng loại giá thể trồng đến khả sinh trưởng in vitro 43 3.4.3 Ảnh hưởng lượng nước tưới đến khả sinh trưởng in vitro 45 3.4.4 Ảnh hưởng che sáng đến khả sinh trưởng in vitro 47 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 viii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ĐHST : điều hòa sinh trưởng MS : Murashige Skoog (1962) TDZ : thidiazuron KIN : kinetin BAP : benzylaminopurine NAA : naphthalene axit axetic IBA : auxin Indole - - butyric acid PBLs: : protocorm like body 54 Dugo P., (1999) Rosmarinus officinalis L (Labiatae) essential oils from the South of Brazil and Uruguay Journal of Essential Oil Research 11(1): 27-30 [21] George E F., Hall M A., Klerk G J D (2008), Plant Propagation by Tissue Culture, (3): 115–173 [22] Gibson SI (2000), “Plant sugar response pathways, Part of a complex regulatory web”, Plant Physiol,, 124: 1532-1539 [23] Holmes, P, (1998), Rosemary oil The wisdom of the heart, International Journal of Aromatherapy, 9(2), 62-66 [24] Hussain, A, I,, Anwar, F,, Chatha, S, A, S,, Jabbar, A,, Mahboob, S,, & Nigam, P, S, antiproliferative, Journal of (2010), Rosmarinus officinalis essential oil: antioxidant and antibacterial activities, Brazilian Microbiology, 41(4), 1070-1078 [25] Karakurum Goksel, B, K,, Coskun, O,, Ucler, S,, Karatas, M,, Ozge, A,,& Ozkan, S, (2014), Use of complementary and alternative medicine by a sample of Turkish primary headache patients, Agri Dergisi, 26, 1-7 [26] Kiuru P., Muriuki S.J.N., Wepukhulu S.B and Muriuki S.J.M.,(2015) Influence of growth media and regulators on vegetative propagation of rosemary (Rosmarinus officinalisL.) East African Agricultural and ForestryJournal 81: 105 - 111 [27] Martínez, A, L,, González-Trujano, M, E,, Chávez, M,, & Pellicer, F, (2012), Antinociceptive effectiveness of triterpenes from rosemary in visceral nociception, Journal of ethnopharmacology, 142(1), 28-34 [28] M.R al- Sereiti, K.M Abu-Amer, and P Sen, “ Pharmacology of rosemary (Rosemarinus officinalis Linn.) and its therapeutic potentials”, Indian Journal of Experimental Biology 37(2) (1999): 124 -130 55 [29] Mehrabani L.V., Kamran R.V., Hassanpouraghdam M.B., Kavousi E and Aazami M.A., (2016) Auxin concentration and sampling time affect rooting of Chrysanthemum morifolium L and Rosmarinus officinalis L Azarian Journal of Agriculture3 (1): 11 - 16 [30] Ouyang J,, Wang X,, Zhao B,, Wang Y,, 2003, Light intensity and spectral quality influencing the callus growth of Cistanche deserticola and biosythesis of phenylethanoid glycosides, Plant Science,165: 657661 [31] Rai, M, K,, Shekhawat, N, S,, Gupta, A, K,, Phulwaria, M,, Ram, K,, & Jaiswal, U, (2011), The role of abscisic acid in plant tissue culture: a review of recent progress, Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC), 106(2), 179-190 [32] Romano, C S., Abadi, K., Repetto, V., Vojnov, A A., & Moreno, S (2009) Synergistic antioxidant and antibacterial activity of rosemary plus butylated derivatives Food chemistry, 115(2), 456-461 [33] Sasikumar, B, (2012), Rosemary, In Handbook of herbs and spices (pp, 452 - 468), Woodhead Publishing [34] Stuart A Lipton, M.D., Ph.D and colleagues at Sanford-Burnham Medical Research Institute (Sanford-Burnham) (2012), Compound found in rosemary protects against macular degeneration in laboratory model [35] Saad A I M and Elshahed A M (2012), “Recent Advances in Plant in vitro Culture”, Plant Tissue Culture Media, (2): 29-40 [36] Shagufta N., Aamir A., Siddiqui F A., Iqbal J (2001), “in vitro propagation of gloxinia (Sinningia speciosa)”, Pak J Bot, 33 [37] Scaramuzzi F., Apollino G., Demerico S (1999),“Adventitious shoot from Sinningia speciosa leaf discs in vitro and stability of ploidy level in 56 subcultures”, In vitro cellular and developmental biology -plant, 35(3): 217- 221 [37] Smith H (1982), “Light quality, photoperception, and plant strategy”, Ann Rev Plant Physiol., 33: 481-581 [38] Tsavkelova E A., Klimova S Yu., Cherdyntseva T A., Netrusov A I (2006), “Microbial producers of plant growth stimulators and their practical use: A review”, Applied Biochemistry and Microbiology, 42(2): 117-126 [39] Vuylsteke D,, Swennen R,, De Langhe E,, 1990, Tissue culture technology for the improvement of African plantains, In Sigatoka Leaf Spot Diseases of Bananas: Proceedings of an International Workshop, 316-337 [40] Wildi E., W., Berger B K (1998), “In vitro propagation of Petasites hybridus (Asteraceae) from leaf and petiole explants and from inflorescencev buds”, Plant Cell Reports, 18(3-4): 336-340 [41] Yesil-Celiktas O., Nartop P., Gurel A., Bedir E., Vardar-Sukan F (2007), Determination of phenolic content and antioxidant activity of extracts obtained from Rosmarinus officinalis' calli, pp 1536–1542 [42] Yumei D., Renxiang W., Zhengnan L., Cheng Q., Baogang L., Rulan D., Yating L (2012), Callus Induction and Plant Regeneration from Rosemary Leaves, pp [43] Yin R., Li T., Tian J., Xi P., Liu RH (2016),Ursolic acid, a potential anticancer compound for breast cancer therapy [44] Zakharychev V.V (1999), “Fitogormony, ikh analogi i antagonisty v kachestve gerbitsidov i regulyatorov rosta rastenii Phytohormones, Their Analogues and Antagonists As Herbicides and Regulators of Plant Growth”, Moscow: RKhtu Im D.I Mendeleeva ... HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐINH THỊ MỸ NHUNG NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT CÂY GIỐNG HƯƠNG THẢO (Rosmarinus officinalist L.) BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ LUẬN VĂN THẠC SĨ Chuyên ngành: Sinh học thực... cầu hương thảo sử dụng dược liệu cảnh ngày cao, nhiên việc nghiên cứu để sản xuất giống chưa quan tâm mức Xuất phát từ sở đây, tiến hành thực đề tài: Nghiên cứu sản xuất giống hương thảo (Rosmarinus. .. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu hương thảo (Rosmarinus officinalis L.) thuộc họ Hoa mơi Hình 2.1 Cây hương thảo - Nguyên liệu nghiên cứu: Đoạn