Nghiên cứu nuôi cấy lỏng lắc thu sinh khối lan kim tuyến bản địa anoectochilus roxburghii(wall ) lindl in vitro nghiên cứu khoa học

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY LỎNG LẮC THU SINH KHỐI LAN KIM TUYẾN BẢN ĐỊA ANOECTOCHILUS ROXBURGHII(WALL.) LINDL IN VITRO Mã số đề tài:… Bình Dƣơng, 03/2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY LỎNG LẮC THU SINH KHỐI LAN KIM TUYẾN BẢN ĐỊA ANOECTOCHILUS ROXBURGHII(WALL.) LINDL IN VITRO Mã số đề tài:… Chủ nhiệm đề tài: Trần Văn Minh Khoa: Cơng nghệ sinh học Các thành viên: Đồn Thúy Vy Lữ Hồng Thơng Châu Ngọc Q Ngƣời hƣớng dẫn: Nguyễn Thanh Mai Bình Dƣơng, 03/2019 iii LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập giảng đƣờng Đại học hoàn thành đề tài thực tập tốt nghiệp này, em nhận đƣợc giúp đỡ, quan tâm hỗ trợ từ phía nhà trƣờng, Thầy Cơ, gia đình bạn bè Em xin gửi lời tri ân sâu sắc đến cô Nguyễn Thanh Mai, ngƣời nâng đỡ em từ kinh nghiệm chuyên môn nâng đỡ tinh thần bƣớc đầu thực đề tài thực tập đầy bỡ ngỡ Em xin cảm ơn thầy Mai Trƣờng, chị Thu Hiền anh Thê Viện Sinh học Nhiệt đới giúp đỡ, chia cho em kinh nghiệm chuyên môn tạo cho em điều kiện để thực đề tài thực tập Em xin cảm ơn ban giám hiệu nhà trƣờng, quý Thầy Cô khoa Công nghệ Sinh học trƣờng Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện học tập truyền đạt kiến thức quý báu cho em suốt trình học tập Em xin cảm ơn anh Thiên Hùng, chị Hoàng Quyên, chị Thu Ngân, chị Vy bạn khóa hỗ trợ em trình thực đề tài thực tập Cuối cùng, xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ba mẹ ngƣời thân gia đình u thƣơng, chăm sóc, động viên suốt trình học tập Em xin chân thành cảm ơn! Thành phố Hồ Chí Minh, ngày….tháng…năm 2018 Trần Văn Minh iv MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN iii DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii DANH MỤC VIẾT TẮT ix ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 11 1.TỔNG QUAN TÀI LIỆU 12 1.1 Sơ lƣợc lan kim tuyến 12 1.2 Nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 1.3 Những nghiên cứu ngồi nƣớc kỹ thuật ni cấy lỏng lắc 19 PHẦN II: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu: 22 2.2 Nguyên vật liệu: 22 2.3 Trang thiết bị hóa chất 22 2.3.1 Thiết bị 22 2.3.2 Hóa chất 23 2.4 Môi trƣờng nuôi cấy 23 2.5 Điều kiện nuôi cấy 24 2.6 Phƣơng pháp nghiên cứu: 24 PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ nƣớc dừa đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến 30 3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ casein đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến 36 3.3 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ dịch chiết nấm men đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến 51 v PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 414 4.1 Kết luận 45 4.2 Kiến nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 48 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.4: Thành phần dung dịch dinh dƣỡng MS 14 Bảng 2.6.2: Nghiệm thức khảo sát ảnh hƣởng nồng độ nƣớc dừa đƣờng đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến 17 Bảng 2.6.3: Nghiệm thức khảo sát ảnh hƣởng nồng độ casein đƣờng đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến 18 Bảng 3.1.1: Kết khối lƣợng lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy 21 Bảng 3.1.2: Kết chiều cao lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy 22 Bảng 3.1.3: Kết số lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy 22 Bảng 3.2.1: Kết khối lƣợng lan kim tuyến sau 45 ngày nuôi cấy 27 Bảng 3.2.2 Kết chiều cao lan kim tuyến sau 45 ngày nuôi cấy 28 Bảng 3.2.3: Kết số lan kim tuyến sau 45 ngày ni cấy………… ………28 vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Cây lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl Hình 2.2: Mẫu lan kim tuyến dùng thí nghiệm 14 Hình 3.1a: Mẫu ban đầu 24 Hình 3.1b: Mẫu nghiệm thức A1B3 25 Hình 3.1c: Mẫu nghiệm thức A1B1 25 Hình 3.1d: Mẫu nghiệm thức A2B1 25 Hình 3.1e: Mẫu nghiệm thức A1B1-A1B5 26 Hình 3.1f: Mẫu nghiệm thức A2B1-A2B5 26 Hình 3.1g: Mẫu thiết bị nuôi cấy lỏng lắc 26 Hình 3.2a: Mẫu ban đầu 30 Hình 3.2b: Mẫu nghiệm thức C1D4 30 Hình 3.2c: Mẫu nghiệm thức C1D1 30 Hình 3.2d: Mẫu nghiệm thức C2D1 30 Hình 3.2e: Mẫu thiết bị nuôi cấy lỏng lắc 31 viii DANH MỤC VIẾT TẮT cm Cen-ti-met g Gam MS Môi trƣờng Murashige-Skoog NT Nghiệm thức l Lít ix BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: - Tên đề tài: Nghiêu cứu nuôi cấy lỏng lắc thu sinh khối lan kim tuyến địa Anoectochilus roxburghii(Wall.) Lindl in vitro” - Sinh viên thực hiện: Trần Văn Minh - Lớp: DH17SH03 Khoa: CNSH Năm thứ: Số năm đào tạo: - Ngƣời hƣớng dẫn: Nguyễn Thanh Mai Mục tiêu đề tài: “Nghiêu cứu nuôi cấy lỏng lắc thu sinh khối lan kim tuyến địa Anoectochilus roxburghii(Wall.) Lindl in vitro” đƣợc thực Viện Sinh học nhiệt đới kết hợp với phịng thí nghiệm Cơng nghệ tế bào sở trƣờng đại học Mở thành phố Hồ Chí Minh Nhằm tìm phƣơng pháp để tăng trọng lƣợng sinh khối tƣơi lồi lan có dƣợc liệu quý đáp ứng nhu cầu thị trƣờng, tránh việc bị khai thác mức bên cạnh để bảo tồn lồi lan có dƣợc liệu q Tính sáng tạo: Nghiên cứu giảm lƣợng nitrat sinh khối lan kim tuyến Có thể sử dụng trực tiếp sinh khối Kết nghiên cứu: 4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng lƣợng đƣờng nồng độ nƣớc dừa đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Một yếu tố quan trọng tăng trƣởng phát sinh hình thái tế bào mơ thực vật nuôi cấy mô thành phần môi trƣờng Thành phần mơi trƣờng thay đổi tùy theo lồi phận nuôi cấy Nhằm hƣớng đến việc tạo nguồn sinh khối lớn, an toàn cho ngƣời sử dụng, nghiên cứu sử dụng mơi trƣờng MS giảm ½ đa lƣợng để giảm bớt nguồn nitrat (NO3-) Vì nitrat (NO3-) đƣợc phát nhƣ dạng độc chất tồn dƣ nông sản, gây hại cho sức khỏe ngƣời Mặc dù nitrat không độc với thực vật nhƣng sản phẩm nơng sản đƣợc ngƣời sử dụng có dƣ lƣợng nitrat cao đặc biệt phận gây hại cho sức khỏe ngƣời tiêu dùng Đồng thời khơng bổ sung chất điều hịa sinh trƣởng thực vật để tạo nguồn sinh khối an toàn Mẫu khúc cắt lan kim tuyến sau đƣợc nuôi cấy lỏng lắc dung dịch dinh dƣỡng với nồng độ nƣớc dừa hàm lƣợng đƣờng khác Qua kết ta khẳng định gia tăng khối lƣợng tƣơi, chiều cao số mẫu lan kim tuyến không phụ thuộc vào hàm lƣợng đƣờng mà phụ thuộc vào nồng độ nƣớc dừa Dựa vào kết quả, ta thấy có khác biệt nghiệm thức qua thống kê Nghiệm thức A1B3 cho kết đạt cao với khối lƣợng 0,996 (g), chiều cao 2,471 (cm), số 2,455 (lá) khác biệt hoàn toàn với nghiệm thức lại Nghiệm thức A2B1 A1B1 bảng có kết đạt thấp với khối lƣợng lần lƣợt 0,804 (g) 0,806 (g) chiều cao lần lƣợt 1,890 (cm) 1,925 (cm), số lần lƣợt 1,871 (lá) 1.923 (lá) Các nghiệm thức lại A1B2, A1B4, A1B5, A2B2, A2B3, A2B4, A2B5 có kết khác biệt thấp so với nghiệm thức A1B3 cao so với nghiệm thức A1B1, A2B1 Nghiệm thức A1B3 cho khối lƣợng, chiều cao số tốt Nƣớc dừa có khả kích thích tạo mơ sẹo thực vật kích thích có tác động tích cực tới q trình biệt hóa quan nhờ tác động lên trình phân chia sinh trƣởng tế bào thực vật Nƣớc dừa đƣợc sử dụng nhiều nuôi cấy mô tác động tốt lên sinh trƣởng q trình phơi hóa mơ sẹo phân hóa nhân nhanh chồi nhiều loài Qua bảng thấy rõ khả tăng sinh khối nghiệm thức, nghiệm thức thức A2B1 A1B1 có tăng sinh khối nhƣng ít, nguyên nhân nồng độ nƣớc dừa q thấp khơng thể kích thích phân chia tế bào Nghiệm thức A1B3 cho tăng sinh khối cao có khác biệt có ý nghĩa với nghiệm thức cịn lại Mẫu lan kim tuyến nghiệm thức cao, thân mập, xanh có mọc thêm số Ở nghiệm thức A1B2, A1B4, A1B5, A2B2, A2B3, A2B4, A2B5 tăng sinh khối thấp A1B3 nhƣng cao hai nghiệm thức A2B1 A1B1 Các nghiệm thức có gia tăng sinh khối tƣơng Trong thời gian theo dõi gia tăng sinh khối nghiệm thức, nghiệm thức A1B3 nghiệm thức cho thấy mẫu khúc cắt lan kim tuyến A.roxburghii (Wal l.) Lindl phát triển chiều cao, khối lƣợng, số sớm nghiệm thức sau 15 ngày ni cấy Sau nghiệm thức A1B2, A1B4, A1B5, A2B2, A2B3, A2B4, A2B5 khoảng 25 ngày 3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ dịch chiết nấm men đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Bảng 3.3.1 Kết khối lƣợng lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy Nghiệm thức Khối lƣợng (g) E1F1 0,795e E1F2 0,990a E1F3 0,849d E1F4 0,887c E2F1 0,795e E2F2 0,870cd E2F3 0,953b E2F4 0,938b cv (%) 14,04% Các chữ (a, b, c) khác thể khác biệt có ý nghĩa thống kê P 0,05 Bảng 3.3.2 Kết chiều cao lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy Nghiệm thức E1F1 Chiều cao (cm) 1,944e E1F2 2,461a E1F3 2,129cd E1F4 2,077cd E2F1 1,924e E2F2 2,026de E2F3 2,271b E2F4 2,168bc cv (%) 14,49% Các chữ (a, b, c) khác thể khác biệt có ý nghĩa thống kê P 0,05 41 Bảng 3.3.3 Số lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy Nghiệm thức E1F1 Số (lá) 1,889c E1F2 2,510a E1F3 2,236b E1F4 2,257b E2F1 1,871c E2F2 2,229b E2F3 2,265b E2F4 2,198b cv (%) 37,44% Các chữ (a, b, c) khác thể khác biệt có ý nghĩa thống kê P 0,05 Trong cột số có mẫu tự khơng khác biệt mức ý nghĩa 0,05 qua phép thử Duncan Qua kết từ bảng 3.3.1, 3.3.2, 3.3.3 ta khẳng định gia tăng khối lƣợng tƣơi, chiều cao số mẫu lan kim tuyến không phụ thuộc vào hàm lƣợng đƣờng mà phụ thuộc vào nồng độ dịch chiết nấm men Dựa vào kết quả, ta thấy có khác biệt nghiệm thức qua thống kê Nghiệm thức E1F2 cho kết đạt cao với khối lƣợng 0,99 (g), chiều cao 2,461 (cm), số 2,51 (lá) khác biệt hồn tồn với nghiệm thức cịn lại Nghiệm thức E1F1 E2F1 bảng có kết đạt thấp với khối lƣợng lần lƣợt 0,796(g) 0,795 (g) chiều cao lần lƣợt 1,944 (cm) 1,924 (cm), số lần lƣợt 1,889 (lá) 1,871 (lá) Các nghiệm thức lại E1F2, E1F3, E1F5, E2F2, E2F3,E2F4, E2F5 có kết khác biệt thấp so với nghiệm thức D1D4 cao so với nghiệm thức E1F1, E2F1 Thành phần hóa học dịch nấm men đƣợc ý phân tích Chủ yếu chứa: đƣờng, nucleic acid, amino acid, vitamin, auxin, muối khoáng Dịch chiết nấm men chế phẩm thƣờng dùng nuôi cấy vi sinh vật, mơ tế bào động vật với nồng độ thích hợp 42 Trong nhân giống in vitro, dịch nấm men có vai trị quan trọng khơng với tác dụng kích thích sinh trƣởng phát triển mơ tế bào Qua thí nghiệm cho thấy, có mặt dịch nấm men tạo hiệu việc tăng sinh khối, nghiệm thức có chứa dịch nấm men cho sinh khối tốt so với nghiệm thức không chứa dịch nấm men Kết nghiệm thức E1F2 tốt gần giống với kết Trần Vũ Ngọc Thi (2014) Ảnh hƣởng dịch chiết nấm men lên khả tích lũy Curcumin tế bào nghệ đen CURCUMA ZEDOARIA ROSCOE Theo Trần Vũ Ngọc Thi cho thấy dịch chiết nấm men có ảnh hƣởng đến tích lũy curcumin tế bào ni cấy Khi bổ sung dịch chiết nấm men theo nồng độ g/L hàm lƣợng curcumin tế bào tăng đạt cực đại 31,69 µg/g (0,0032% khối lƣợng khô) cao 2,04% so với đối chứng Khi tiếp tục tăng nồng độ dịch chiết nấm men lên 3-4 g/L hàm lƣợng curcumin tế bào giảm dần, thấp 22,37 µg/g (0,0022% khối lƣợng khơ) thấp 6, 0% so với đối chứng Vì chọn mơi trƣờng MS giảm ½ đa lƣợng có bổ sung g/l dịch chiết nấm men 30g/l đƣờng điều kiện nuôi cấy lỏng lắc cần thiết cho tăng sinh khối cấy lan kim tuyến Hình 3.3b: Mẫu nghiệm thức E1F2 Hình 3.3c: Mẫu nghiệm thức E1F1 43 Hình 3.3d: Mẫu nghiệm thức E1F2 PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 44 4.1 Kết luận - Ở thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ nƣớc dừa đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Sinh khối lan kim tuyến đƣợc nuôi cấy môi trƣờng MS ½ đa lƣợng có bổ sung 30g/L đƣờng 10% nƣớc dừa cho hiệu cao - Ở thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ casein đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Sinh khối lan kim tuyến đƣợc nuôi cấy môi trƣờng MS ½ đa lƣợng có bổ sung 30g/L đƣờng 1,5g/l casein cho hiệu cao - Ở thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ dịch chiết nấm men đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Sinh khối lan kim tuyến đƣợc ni cấy mơi trƣờng MS ½ đa lƣợng có bổ sung 30g/L đƣờng 1g/l dịch chiết nấm men cho hiệu cao 4.2 Kiến nghị Nếu tiếp tục nghiên cứu, đề nghị đƣợc nghiên cứu: - Cần tiếp tục thí nghiệm với dịch chiết hữu khác, nhiều nồng độ khác để tìm đƣợc mơi trƣờng cho sinh khối lan kim tuyến tốt - Tăng thể tích bình thể tích dung dịch dinh dƣỡng để tạo nguồn sinh khối lớn 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Bộ Khoa học Công nghệ 2007 Sách Đỏ Việt Nam (phần thực vật) NXB Khoa học tự nhiên Công nghệ, Hà Nội, tr 404-405 Đỗ Đăng Giáp*, Đỗ Đức Thăng, Trần Trọng Tuấn, Nguyễn Thị Huyền Trang, Đỗ Thị Tuyến, Ảnh hƣởng môi trƣờng ni cấy khơng sử dụng chất điều hịa sinh trƣởng lên khả tăng sinh khối dƣ lƣợng nitrat, kim loại nặng có mẫu lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata), Viện Sinh học nhiệt đới, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Dƣơng Công Kiên (2002), Nuôi cấy mô thực vật, NXB Đại học Quốc gia, Tp Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Lài 2012 Nghiên cứu nhân nhanh loài Lan kim tuyến (Anoectochilus Roxburghii (Wall.) Lindl.) Việt Nam phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam Hà Nội Tài liệu nƣớc Lin C.S., Kalpana K., Chang W.C and Lin N.S 2007 Improving multiple shoot proliferation in bamboo mosaic virus-free Bambusa oldhamii Munro propagation by liquid culture HortScience 42(5): 1243˗1246 Mbiyu M., Jane M., Jackson K., Christine M., Patrick P., Joseph N., John O and Susan O 2012 Comparing liquid and solid media on the growth of plantlets from three Kenyan Potato cultivars American Journal of Experimental Agriculture 2(1): 81˗89 Saranjeet K., Bhutani K K - Organic growth supplement stimulants for in vitro multiplication of Cymbidium pendulum, HortScince (1) (2012) 47-52 Thorpe TA, Stasolla C, Yeung EC, de Klerk G-J, Roberts, George EF 2008 The Components of Plant Tissue Culture Media II: Organic Additions, Osmotic and Ph Effects, and Support Systems In George EF Hall MA de Kelrk G-J, eds Plant 46 Propagation by Tissue Culture 3rd Edition Vol.1 The Background SpringerVerlag Dordrecht, pp.115-173 Tài liệu Enternet https://baigiang.violet.vn/present/show/entry_id/9992977 10 http://s1.downloadmienphi.net/file/downloadfile8/200/1372848.pdf 11 https://www.sbc-vietnam.com/san-pham/hoa-chat-dung-cu-nuoi-cay-mo-thucvat/anh-huong-cua-nuoc-cot-dua-casein-hydrolysate-va.aspx 12 https://www.sbc-vietnam.com/san-pham/hoa-chat-dung-cu-nuoi-cay-mo-thucvat/nhan-giong-invitro-ca-rot-daucus-carota-l.aspx 13 http://www.vjol.info/index.php/KHH/article/viewFile/17631/15650 47 PHỤ LỤC Phân tích thống kê ANOVA  Kết thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ nƣớc dừa đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Bảng anova khối lượng lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy 48 Bảng anova chiều cao lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy 49 Bảng anova số lan kim tuyến sau 30 ngày ni cấy 50  Kết thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ casein đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Bảng anova khối lượng lan kim tuyến sau 45 ngày nuôi cấy 51 Bảng anova chiều cao lan kim tuyến sau 45 ngày nuôi cấy 52 Bảng anova số lan kim tuyến sau 45 ngày ni cấy 53  Kết thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng nồng độ dịch chiết nấm men đến khả tạo sinh khối lan kim tuyến Bảng anova chiều cao lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy Bảng anova khối lượng lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy 54 Bảng anova số lan kim tuyến sau 30 ngày nuôi cấy 55 ... Nghiêu cứu nuôi cấy lỏng lắc thu sinh khối lan kim tuyến địa Anoectochilus roxburghii(Wall. ) Lindl in vitro? ?? cần thiết Mục tiêu ? ?Nghiên cứu nuôi cấy lỏng lắc thu sinh khối lan kim tuyến địa Anoectochilusroxburghii(Wall. )Lindl. .. ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY LỎNG LẮC THU SINH KHỐI LAN KIM TUYẾN BẢN ĐỊA ANOECTOCHILUS ROXBURGHII(WALL. ) LINDL IN VITRO. .. THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: - Tên đề tài: Nghiêu cứu nuôi cấy lỏng lắc thu sinh khối lan kim tuyến địa Anoectochilus roxburghii(Wall. ) Lindl in vitro? ?? - Sinh viên