Nghiên cứu nhân chồi từ vảy củ in vitro cho hoa lan huệ ngoại cánh kép double king hippeastrum hybridum

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN CHUYÊN ĐỀ TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU NHÂN CHỒI TỪ VẢY CỦ IN VITRO CHO HOA LAN HUỆ NGOẠI CÁNH KÉP DOUBLE KING (Hippeastrum hybridum) NGUYỄN THỊ THẢO NGHI AN GIANG, THÁNG 05 NĂM 2021 ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN CHUYÊN ĐỀ TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU NHÂN CHỒI TỪ VẢY CỦ IN VITRO CHO HOA LAN HUỆ NGOẠI CÁNH KÉP DOUBLE KING (Hippeastrum hybridum) NGUYỄN THỊ THẢO NGHI DSH173261 Giảng viên hướng dẫn TS NGUYỄN THỊ MỸ DUYÊN AN GIANG, THÁNG 05 NĂM 2021 CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG Chuyên đề “Nghiên cứu nhân chồi từ vảy củ in vitro cho hoa Lan huệ ngoại cánh kép Double King (Hippeastrum hybridum)” sinh viên Nguyễn Thị Thảo Nghi thực hướng dẫn giảng viên Nguyễn Thị Mỹ Duyên Tác giả báo cáo kết nghiên cứu Hội đồng Khoa học Đào tạo thông qua Phản biện Phản biện Diệp Nhựt Thanh Hằng Trịnh Hoài Vũ Cán hướng dẫn Nguyễn Thị Mỹ Duyên i LỜI CẢM TẠ Sau thời gian học tập rèn luyện Trường Đại học An Giang, biết ơn kính trọng, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám hiệu nhà trường thầy cô Khoa Nông Nghiệp Tài nguyên thiên nhiên, Bộ mơn Cơng nghệ sinh học nhiệt tình hướng dẫn, giảng dạy tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ em suốt trình học tập, nghiên cứu hoàn thiện đề tài nghiên cứu khoa học Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Cô Nguyễn Thị Mỹ Duyên, người trực tiếp hướng dẫn, gợi ý, giúp đỡ, cho em lời khuyên cần thiết trình thực chuyên đề Em xin cám ơn chị Trịnh Thị Thu Hồng cán phịng ni cấy mơ hỗ trợ hướng dẫn nhiệt tình suốt q trình thực chun đề phịng ni cấy mơ Xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè động viên, cổ vũ, khích lệ giúp đỡ suốt thời gian qua Tuy nhiên điều kiện lực thân hạn chế, chuyên đề nghiên cứu khoa học chắn không tránh khỏi thiếu sót Kính mong nhận đóng góp ý kiến thầy cô để nghiên cứu em hoàn thiện Em xin trân trọng cảm ơn! An Giang, ngày 30 tháng 05 năm 2021 Sinh viên thực NGUYỄN THỊ THẢO NGHI ii MỤC LỤC CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG i LỜI CẢM TẠ ii MỤC LỤC iii DANH SÁCH BẢNG vi DANH SÁCH HÌNH vii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT viii CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 1.4 CÂU HỎI NGHIÊN CỨU CHƯƠNG 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 GIỚI THIỆU VỀ LAN HUỆ Hippeastrum hybridum 2.1.1 Nguồn gốc vị trí phân loại 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.2 TÌNH HÌNH SẢN XUẤT HOA LAN HUỆ TRÊN THẾ GIỚI VÀ VIỆT NAM5 2.2.1 Tình hình sản xuất hoa có củ giới 2.2.2 Tình hình sản xuất hoa lan huệ Việt Nam .5 2.3 TỔNG QUAN VỀ KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ 2.3.1 Khái niệm phương pháp nuôi cấy mô – tế bào thực vật 2.3.2 Ưu điểm nuôi cấy mô – tế bào thực vật 2.3.3 Cơ sở nuôi cấy mô – tế bào thực vật 2.3.4 Các giai đoạn nhân giống in vitro .7 iii 2.3.5 Môi trường nuôi cấy điều kiện nuôi cấy 2.4 TỔNG QUAN VỀ NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC 12 2.4.1 Các nghiên cứu nước 12 2.4.2 Các nghiên cứu nước .13 CHƯƠNG 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 14 3.2 PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 14 3.2.1 Vật liệu 14 3.2.2 Trang thiết bị phịng thí nghiệm 14 3.2.3 Dụng cụ thí nghiệm 14 3.2.4 Mơi trường ni cấy hóa chất 14 3.2.5 Điều kiện nuôi cấy 15 3.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 4.1 Thí nghiệm 1: Nhân tạo chồi từ vảy củ Lan huệ Double King (in vitro) 17 4.1.1 Số chồi .17 4.1.2 Chiều cao chồi 19 4.1.3 Số lá/chồi 20 4.2 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường loại mẫu vảy cấy củ Lan huệ Double King 24 4.2.1 Số chồi .24 4.2.2 Số chồi 25 4.2.3 Chiều dài 25 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 28 5.1 Kết luận 28 iv 5.2 Kiến nghị 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO 29 PHỤ LỤC .32 PHỤ LỤC .33 v DANH SÁCH BẢNG Bảng Bảng Bảng Bảng Bảng Bảng Bảng Bảng Bảng Bảng 10 Tên bảng Thành phần thành phần tự chọn mơi trường ni cấy Nghiệm thức thí nghiệm nhân tạo chồi từ vảy củ in vitro Nghiệm thức thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng mơi trường loại mẫu vảy cấy củ Lan huệ Double King Số chồi vảy củ Lan huệ Double King sau 2, 3, tuần cấy Chiều cao chồi vảy củ Lan huệ Double King sau 2, 3, tuần cấy Số lá/chồi vảy củ Lan huệ Double King sau 3, tuần cấy Hệ số nhân chồi Số chồi vảy củ Lan huệ Double King sau tuần cấy Số lá/chồi vảy củ Lan huệ Double King sau tuần cấy Chiều dài chồi vảy củ Lan huệ Double King sau tuần cấy vi Trang 17 18 18 19 21 22 24 25 26 DANH SÁCH HÌNH Tên hình Trang Hình Hoa Lan huệ ngoại cánh kép Double King Hình Sự phát triển chồi mẫu cấy Lan huệ Double King sau tuần Sự phát triển chồi vảy củ Lan huệ Double King sau tuần Sự phát triển chồi nghiệm thức C2 (2 vảy) vảy Lan huệ Double King sau tuần 23 Hình Hình vii 26 27 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT BA Benzyladenin NAA Alpha-naphthaleneacetic acid Kn Kinetin (6-furfurylaminopurine) GA Gibberellin IAA Indole-3-acetic acid IBA Indole-3-butyric acid MS Murashige Skoog Mg/l Milligram/lít W/v Trọng lượng/thể tích EDTA Ethylene diamine tetraacetic acid Cm Centimet Ctv Cộng tác viên Cs Cộng viii Hình 4: Sự phát triển chồi nghiệm thức C2 (2 vảy) vảy Lan huệ Double King sau tuần 27 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Sau gần tháng khảo sát qua việc thực hai thí nghiệm ni cấy vảy củ (in vitro) Lan huệ Double King có kết rút kết luận sau: Qua thí nghiệm 1, mơi trường MS có bổ sung nồng độ BA 2mg/l (B1) môi trường cho số chồi tốt loại mẫu cấy vảy (A2) đạt nhiều chồi 3,4 chồi Hệ số nhân chồi cao kiểu vảy cấy vảy (A1) đạt 179,2 chồi Qua thí nghiệm 2, kiểu vảy cấy (2 vảy) cấy hai hàm lượng khống có nồng độ BA 2mg/l, hàm lượng khoáng (MS) (C3) lại phát triển tốt số chồi 5,1 chồi, số 3,5 chiều dài 6,0cm so với hàm lượng khống giảm (½ MS) Như vậy, kiểu vảy củ vảy với hàm lượng khống (MS) thích hợp việc tạo chồi 5.2 Kiến nghị Nên sử dụng môi trường MS có bổ sung nồng độ BA 2mg/l kiểu vảy cấy (2 vảy) thích hợp để nhân tạo chồi cho vảy củ Lan huệ Double King Thử nghiệm thêm nhiều nồng độ khoáng để khảo sát phát triển chồi cho Lan huệ Double King 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bose, T.K., Jana, B.K and Mukhopadhyay, T.P., (1980) Effects of growth regulators on growth and flowering in Hippeastrum hybridum Hort Scientia Horticulturae, 12(2), pp.195-200 Boonekamp, P.M.,(1997) The role of external factors in growth and development of flower bulbs and bulb-flowers: an update since 1992 In VII International Symposium on Flowerbulbs 430 (pp 35-44) Bùi Bá Bổng (1995) Nhân giống trồng nuôi cấy mô An Giang: Khoa học công nghệ môi trường An Giang Chieh Li Huang, Kuo Cheng Chang & Hiroshi Okubo (2005) In vitro morphogenesis from ovaries of Hippeastrum x Hybridum J Fac Agr Kyushu Univ., 50(1): 19-25 Doorduin, J.C., (1989), July Growth and development of Hippeastrum grown in glasshouses In V International Symposium on Flower Bulbs 266 (pp 123132) De Bruyn, M.H., Ferreira, D.I., Slabbert, M.M and Pretorius, J., (1992) In vitro propagation of Amaryllis belladonna Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 31(3), pp.179-184 De Hertogh, A.A., (1996) Technologies for forcing flower bulbs In VII International Symposium on Flowerbulbs 430 (pp 175-182) De Bruyn, M.H., (1997) Micropropagation of amaryllis (Hippeastrum hybridum) In High-Tech and Micropropagation VI (pp 3-13) Springer, Berlin, Heidelberg De Hertogh, A.A and Gallitano, L.,(2000), August Influence of photoperiod and day/night temperatures on flowering of Amaryllis (Hippeastrum) cv Apple Blossom In XXV International Horticultural Congress, Part 5: Culture Techniques with Special Emphasis on Environmental Implications 515 (pp 129-134) Dương Công Kiên (2002) Nuôi cấy mô thực vật Thành phố Hồ Chí Minh: NXB Đại học quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh Dương Cơng Kiên (2006) Ni cấy mơ (III) Kỹ thuật nhân giống – lai tạo trồng số giống lan (Orchid) thơng dụng có giá trị kinh tế Việt Nam Thành phố Hồ Chí Minh: NXB Đại học quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh Ephrath, J E., J Benasher, F Baruchin, C Alekperov, E Dayan and M Silberbush.(2001) Various cutting methods for the propagation of Hippeastrum bulbs Biotronics, 30: 75-83 Hussey G (1975) Totipotency in tissue explants and callus of some members of the Liliaceae, Iridaceae and Amaryllidaceae J Exp Rot 26: 253-262 Huyen, T.T.P., Nam, V.D., Thanh, N.T.T., Thu, H.T.P., Thuy, H.T.N and Hoa, H.N.,(2018) The influence of bulb storage regimes on the growth and flowering of Hippeastrum (Hippeastrum hybridum Hort.) Khoa hoc nong nghiep Viet Nam/Vietnam Journal of Agricultural Sciences, 1(2), pp.127-133 Kharrazi M., Tehranifar A., Sharifi A., Bagheri A.,(2019) Evaluation of regeneration potential of different layers of Amaryllis (Hjppeastrum x 29 Johnsonii) bulb under influence of growth regulators Agricultural Biotechnology Journal 11(4), pp.1-18 Lê Văn Hồng (2008) Giáo trình cơng nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật Hà Nội: Nhà xuất Khoa Học Kỹ Thuật Murashige T and F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassayn with tobacco tissue culture Physiol Plant 15: 473 – 497 Meerow, A.W., (1988) New Trends in Amaryllis (Hjppeastrum) Breeding In Proceedings of the Florida State Horticultural Society (Vol 101, pp 285287) Meerow, A.W., Broschat, T.K and Kane, M.E., (1992) Breeding of new Hippeastrum cultivars using diploid species In VI International Symposium on Flower Bulbs 325 (pp 583-590) Nguyễn Đức Lượng & Lê Thị Thủy Tiên (2002) Công nghệ tế bào Hồ Chí Minh: Nhà xuất Đại học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Đỏ (2007) Bộ Hoa Loa Kèn – Liliales Perleb, Thực vật chí Việt Nam (Flora of Viet Nam), NXB Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội Ninh Thị Thảo, Nguyễn Thị Cúc, Nguyễn Hạnh Hoa, Nguyễn Thị Phương Thảo (2009) “Bước đầu nghiên cứu quy trình nhân nhanh in vitro hoa Loa Kèn đỏ nhung (Hippeastrum equestre Herb)” Tạp chí Khoa học Phát triển, 7(4): 453-459 Nguyễn Hạnh Hoa cộng (2009), Thu thập, phân loại, đánh giá nguồn gen hoa cảnh họ Hành (Liliaceae) Bước đầu tạo vật liệu khởi đầu cho chọn nhân giống số lồi kĩ thuật ni cấy mơ gây đột biến, Báo cáo tổng kết đề tài cấp Bộ mã số B2008 - 11- 80 Nguyễn Bảo Toàn (2010) Giáo trình ni cấy mơ tế bào thực vật Khoa nơng nghiệp - Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Thị Thu Thủy.( 2014) Nghiên cứu nhân giống in vitro số dòng Lan huệ (Hippeastrum equestre) Luận án Thạc sĩ khoa học ngành Sinh học thực nghiệm Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quốc gia Hà Nội Nguyễn Thị Mỹ Duyên (2016) Bài giảng nuôi cấy mô tế bào thực vật An Giang, Đại học An Giang Paredes K., C Delaveau, P Carrasco, C Baeza, Freddy Mora and M E Uribe, (2014) In vitro bulbing for the propagation of Traubia modesta (Amaryllidaceae), a threatened plant endemic to Chile Cien Inv Agr 41(2):207-214 Phạm Đức Trọng, Nguyễn Hạnh Hoa Phí Thị Cẩm Miện.( 2014) Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân nhanh in vitro sáu dịng hoa Lan huệ Hispeastrum esquestre (Aition) Herb Tạp chí Khoa học Phát triển (2014), tập 12, số 3: 392-403 30 Seabrook J.E.A., Cumming B.G., Dionne L.A (1976), “The in-vitro induction of adventitious shoot and root apices on Narcissus (daffodil and narcissus) cultivar tissue”, Can J Bot, 54, pp 814 - 819.XX Seabrook, J.E and Cumming, B.G., (1977) The in vitro propagation of Amaryllis (Hippeastrum spp hybrids) In vitro, 13(12), pp.831-836 Smith, R.H., Burrows, J and Kurten, K., (1999) Challenges associated with micropropagation of Zephyranthes and Hippesatrum sp (Amaryllidaceae) In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant, 35(4), pp.281-282 Silberbush, M., J E Ephrath, C Alekperov and J B Asher (2003) Nitrogen and potassium fertilization interactions with carbon dioxide enrichment in Hippeastrum bulb growth Sci Hortic., 98: 85– 90 Sultana, J., Sutlana, N., Siddique, M.N.A., Islam, A.K.M.A., Hossain, M.M and Hossain, T., (2010) In vitro bulb production in Hippeastrum (Hippeastrum hybridum) Journal of Central European Agriculture Tombolato, A., Matthes, L.(1996) Collection of Hippeastrum spp., Alstroemeria spp and other Brazilian bulbous species In: III International Symposium on New Floricultural Crops 454 p 91-98 Theron, K.I and De Hertogh, A.A., (2001) Amaryllidaceae: Geophytic growth, development, and flowering Horticultural Reviews, 25, pp.1-70 The flower bulb sector within an international perspective (k.n) Truy cập từ http://uk.ibulb.org/275 Vũ Văn Vụ, Vũ Thanh Tâm & Hoàng Minh Tấn (2000) Sinh lí thực vật Nhà xuất giáo dục 252 trang Vũ Hoài Sâm, Bùi Đức Quỳnh, Nguyễn Thị Hương, Nguyễn Văn Khiêm (2016) Nghiên cứu nhân giống in vitro bách hợp (Lilium brownii Brown) Tạp chí Cơng nghệ Sinh học 14(1): 121-129.s 31 PHỤ LỤC Bảng: Thành phần mơi trường MS STT Nhóm Đa lượng MS1 Đa lượng MS2 Đa lượng MS3 Fe EDTA Vi lượng Hóa chất Thành phần mơi trường (mg/l) NH4NO3 KNO3 MgSO4.7H2O CaCl2 KH2PO4 FeSO4.7H2O Na2EDTA H3PO3 MnSO4 ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.2H2O KI CoCl2 Pyridoxine Niccotinic Thiamine HCl Glycine 1.650 1.900 370 330 170 27.8 37.3 6.2 22.3 11.5 0.25 0.025 0.83 0.025 0.5 0.5 0.4 0.2 100 Vitamine Chất hữu Myo-Inositol Chất điều hòa sinh trưởng NAA, BA Thành phần khác Thạch Đường Than hoạt tính Lấy từ dung dịch mẹ (ml) 100 100 100 10 1 1 9g/l 30g/l 0.5g/l (Murashire Skoog, 1962) 32 PHỤ LỤC Thí nghiệm 1: Nhân tạo chồi từ vảy củ Lan huệ Double King in vitro Bảng pt 1: Phân tích ANOVA số chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình Giá trị F P động phương phương Nghiệm 7.15625000 1.02232143 79.79 < 0001 thức Sai số 16 0.20500000 0.01281250 Tổng 23 7.36125000 Cv(%) 7.874248 Nguồn biến động Số vảy (A) Môi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 3.28125000 Trung bình bình phương 1.09375000 0.51041667 3.36458333 Giá trị F P 85.37 < 0001 0.51041667 39.84 < 0001 1.12152778 87.53 < 0001 Giá trị F P 1.38 0.2774 Bảng pt 2: Phân tích ANOVA số chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình động phương phương Nghiệm 2.57291667 0.36755952 thức Sai số 16 4.24666667 0.26541667 Tổng 23 6.81958333 Cv(%) 20.78061 33 Nguồn biến động Số vảy (A) Môi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 0.19791667 Trung bình bình phương 0.06597222 0.01041667 2.36458333 Giá trị F P 0.25 0.8612 0.01041667 0.04 0.8455 0.78819444 2.97 0.0632 Giá trị F P 22.11 < 0001 Giá trị F P 5.62 0.0079 Bảng pt 3: Phân tích ANOVA số chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình động phương phương Nghiệm 10.31666667 1.47380952 thức Sai số 16 1.06666667 0.06666667 Tổng 23 11.38333333 Cv(%) 8.442471 Nguồn biến động Số vảy (A) Môi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 1.12416667 Trung bình bình phương 0.37472222 1.65375000 1.65375000 24.81 0.0001 7.53875000 2.51291667 37.69 < 0001 Bảng pt 4: Phân tích ANOVA chiều cao chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình Giá trị F động phương phương Nghiệm 0.07000000 0.01000000 4.80 thức Sai số 16 0.03333333 0.00208333 Tổng 23 0.10333333 Cv(%) 23.81402 34 P 0.0045 Nguồn biến động Số vảy (A) Mơi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 0.00583333 Trung bình bình phương 0.00194444 0.00166667 0.06250000 Giá trị F P 0.93 0.4474 0.00166667 0.80 0.3844 0.02083333 10.00 0.0006 Bảng pt 5: Phân tích ANOVA chiều cao chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình Giá trị F động phương phương Nghiệm 1.80166667 0.25738095 9.77 thức Sai số 16 0.42166667 0.02635417 Tổng 23 2.22333333 Cv(%) 28.64818 Nguồn biến động Số vảy (A) Môi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 0.60583333 Trung bình bình phương 0.20194444 0.35041667 0.84541667 < 0001 Giá trị F P 7.66 0.0021 0.35041667 13.30 0.0022 0.28180556 10.69 0.0006 Bảng pt 6: Phân tích ANOVA chiều cao chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình Giá trị F động phương phương Nghiệm 8.38072917 1.19724702 44.90 thức Sai số 16 0.42666667 0.02666667 Tổng 23 8.80739583 Cv(%) 11.78702 35 P P < 0001 Nguồn biến động Số vảy (A) Môi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 0.79781250 Trung bình bình phương 0.26593750 2.70010417 4.88281250 Giá trị F P 9.97 0.0006 2.70010417 101.25 < 0001 1.62760417 61.04 < 0001 Giá trị F P 18.84 < 0001 Giá trị F P 33.81 < 0001 Bảng pt 7: Phân tích ANOVA số sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình động phương phương Nghiệm 4.73833333 0.67690476 thức Sai số 16 0.57500000 0.03593750 Tổng 23 5.31333333 Cv(%) 11.20622 Nguồn biến động Số vảy (A) Mơi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 3.64500000 Trung bình bình phương 1.21500000 0.00666667 0.00666667 0.19 0.6724 1.08666667 0.36222222 10.08 0.0006 Giá trị F P 15.15 < 0001 Bảng pt 8: Phân tích ANOVA số sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình động phương phương Nghiệm 4.73958333 0.67708333 thức Sai số 16 0.71500000 0.04468750 Tổng 23 5.45458333 Cv(%) 10.68097 36 Nguồn biến động Số vảy (A) Mơi trường (B) A*B Độ tự Tổng bình phương 2.61458333 Trung bình bình phương 0.87152778 0.09375000 2.03125000 Giá trị F P 19.50 < 0001 0.09375000 2.10 0.1668 0.67708333 15.15 < 0001 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường loại mẫu vảy cấy củ Lan huệ Double King Bảng pt 9: Phân tích ANOVA số chồi sau tuần cấy Nguồn biến Độ tự Tổng bình Trung bình Giá trị F P động phương bình phương Nghiệm 1.36551955 0.45517318 1.68 0.2235 thức Sai số 12 3.24681603 0.27056800 Tổng 15 4.61233558 Cv(%) 31.05523 Bảng pt 10: Phân tích ANOVA số chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình động phương phương Nghiệm 19.41000000 6.47000000 thức Sai số 12 1.80000000 0.15000000 Tổng 15 21.21000000 Cv(%) 13.24097 Bảng pt 11: Phân tích ANOVA số chồi sau tuần cấy Trung bình Nguồn biến Tổng bình Độ tự bình động phương phương Nghiệm 15.17187500 5.05729167 thức Sai số 12 3.39750000 0.28312500 Tổng 15 18.56937500 Cv(%) 15.62114 37 Giá trị F P 43.13