Nghiên cứu tạo chồi địa lan kiếm bạch ngọc cymbidium mastersii từ rễ bằng phương pháp in vitro

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ THANH HÒA Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU TẠO CHỒI ĐỊA LAN KIẾM BẠCH NGỌC (Cymbidium mastersii ) TỪ RỄ BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO” KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Ngành/chuyên ngành : Cơng nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2014 - 2018 Thái Nguyên - năm 2018 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ THANH HÒA Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU TẠO CHỒI ĐỊA LAN KIẾM BẠCH NGỌC (Cymbidium mastersii ) TỪ RỄ BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO” KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Ngành/chun ngành: Cơng nghệ Sinh học Lớp: K46 CNSH Khoa: CNSH - CNTP Khóa học: 2014 - 2018 Người hướng dẫn: ThS Nguyễn Thị Tình ThS Vi Đại Lâm Thái Nguyên - năm 2018 i LỜI CẢM ƠN Được đồng ý Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm, thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài: “Nghiên cứu tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc (Cymbidium mastersii ) từ rễ phương pháp in vitro” Trang khoá luận em xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm thầy cô giáo Khoa tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành đề tài nghiên cứu Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới cô giáo ThS Nguyễn Thị Tình thầy giáo ThS Vi Đại Lâm, giảng viên khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm tận tình bảo, giúp đỡ hướng dẫn em thời gian thực đề tài Đồng thời, em xin cảm ơn ThS Ma Thị Hoàn giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt trình thực tập tốt nghiệp Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình tạo điều kiện vật chất chỗ dựa tinh thần cho em suốt thời gian thực tập, cảm ơn bạn bè hết lịng động viên, giúp đỡ tơi suốt thời gian qua Trong trình thực tập, trình làm báo cáo thực tập thời gian có hạn, nên đề tài khơng thể tránh khỏi sai sót Em mong nhận ý kiến đóng góp thầy bạn để đề tài em hoàn thiện Lời cuối em xin kính chúc thầy, giáo nhà trường, khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ thực phẩm, bạn đồng nghiệp sức khoẻ, thành công sống Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng năm 2018 Sinh viên thực Nguyễn Thị Thanh Hòa ii DANH MỤC TỪ VÀ THUẬT NGỮ VIẾT TẮT Từ, thuật ngữ viết tắt Nghĩa đầy đủ từ, thuật ngữ BA Benzyladenine Cs Cộng CT Công thức CV Coeficient of Variation – Hệ số biến động CITES Convention on International Trade in Endangered Species of wild fauna and flora Công ước thương mại quốc tế loài động, thực vật hoang dã nguy cấp Đ/c Đối chứng IUCN International Union for Conservation of Nature and Natural Resources - Liên minh Bảo tồn Thiên nhiên Quốc tế Kinetin 6-Furfurylaminopurine LSD Least Singnificant Difference Test – Sai khác nhỏ có ý nghĩa MS Murashige & Skoog’s, 1962 MT Môi trường NAA α-Naphthalene acetic acid ND Nước dừa RE Robert Ernst THT Than hoạt tính TN Thí nghiệm IAA Indole-3-acetic acid IBA Indole-3-butyric acid iii DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả tái sinh chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 60 ngày nuôi cấy) 37 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ Địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 10 ngày nuôi cấy) 39 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ địa lan Kiếm Bạch Ngọc (sau 10 ngày nuôi cấy) 41 Bảng 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IAA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 20 ngày nuôi cấy) 44 Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IAA kết hợp với IBA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 20 ngày nuôi cấy) 46 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IAA kết hợp với IBA NAA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 20 ngày nuôi cấy) 48 Bảng 4.7 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinetin đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ (sau 20 ngày nuôi cấy) 50 Bảng 4.8 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ sau (20 ngày nuôi cấy) 52 Bảng 4.9 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA NAA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ (sau 20 ngày nuôi cấy) 54 iv DANH MỤC HÌNH Hình 3.1 Sơ đồ nghiên cứu tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ phương pháp invitro 29 Hình 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả tái sinh chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 60 ngày nuôi cấy) 38 Hình 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ Địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 10 ngày nuôi cấy) 40 Hình 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ địa lan Kiếm Bạch Ngọc (sau 10 ngày ni cấy) 43 Hình 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IAA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 20 ngày ni cấy) 45 Hình 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IAA kết hợp với IBA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 20 ngày ni cấy) 47 Hình 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IAA kết hợp với IBA NAA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau 20 ngày nuôi cấy) 49 Hình 4.7 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinetin đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ (sau 20 ngày nuôi cấy) 51 Hình 4.8 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ (sau 20 ngày nuôi cấy) 53 Hình 4.9 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA NAA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ (sau 20 ngày nuôi cấy) 56 v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC TỪ VÀ THUẬT NGỮ VIẾT TẮT ii DANH MỤC BẢNG iii DANH MỤC HÌNH iv MỤC LỤC v Phần 1: MỞ ĐẦU 1.1.Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.2.1 Mục tiêu tổng quát 1.2.2 Mục tiêu cụ thể 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn 1.3.1 Ý nghĩa khoa học đề tài 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn đề tài Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan lan Kiếm 2.1.1 Nguồn gốc, phân loại đặc điểm lan Kiếm 2.1.1.1 Nguồn gốc 2.1.1.2 Phân loại phân bố 2.1.1.3 Đặc điểm hình thái Địa lan kiếm 2.1.2 Hiện trạng Địa lan kiếm Việt Nam 2.1.3 Tình hình sản xuất, tiêu thụ sản phẩm từ loài địa lan kiếm giới 12 2.1.4 Tình hình sản xuất, tiêu thụ địa lan kiếm Việt Nam 15 2.1.5 Tình hình nghiên cứu nhân giống địa lan kiếm giới Việt Nam 17 2.2 Giới thiệu giống địa lan kiếm Bạch Ngọc 20 2.2.1 Phân loại khoa học 20 2.2.2 Nguồn gốc phân bố 21 2.2.2.1 Nguồn gốc 21 vi 2.2.2.2 Sự phân bố 21 2.2.3 Hình thái 21 2.3 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào 22 2.3.1 Tính tồn tế bào thực vật 22 2.3.2 Sự phân hoá tế bào 22 2.3.3 Sự phản phân hoá tế bào 22 2.4 Một số yếu tố ảnh hưởng đến q trình ni cấy mơ tế bào thực vật 22 2.4.1 Vật liệu nuôi cấy 22 24.2 Điều kiện nuôi cấy 23 2.4.3 Môi trường dinh dưỡng 23 2.4.3.1 Nguồn Cacbon 24 2.4.3.2 Các nguyên tố khoáng đa lượng, vi lượng 24 2.4.3.3 Vitamin 24 2.4.3.4 Chất hữu tự nhiên 25 2.4.3.5 Các thành phần khác 25 2.4.3.6 pH môi trường 25 2.4.3.7 Các chất điều hoà sinh trưởng 25 2.5 Tình hình nghiên cứu ni cấy mô địa lan kiếm Bạch Ngọc giới nước 26 2.5.1 Trên giới 26 2.5.2 Trong nước 27 Phần 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 3.1 Đối tượng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu 28 3.2 Nội dung nghiên cứu 28 3.2.1 Nội dung 1: Xác định môi trường tái sinh chồi từ phôi địa lan kiếm Bạch Ngọc 28 3.2.2 Nội dung 2: Xác định môi trường rễ tạo hoàn chỉnh địa lan kiếm Bạch Ngọc 28 3.2.3 Nội dung 3: Nghiên cứu môi trường nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc in vitro 28 vii 3.2.4 Nội dung 4: Nghiên cứu mơi trường kích chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ in vitro 28 3.3 Phương pháp nghiên cứu 29 3.3.1 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy in vitro 29 3.3.2 Phương pháp nghiên cứu 29 3.3.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm 30 3.3.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả tái sinh chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc 30 3.3.3.2 Nội dung 2: Xác định môi trường rễ tạo hoàn chỉnh địa lan kiếm Bạch Ngọc 31 3.3.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu môi trường nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc in vitro 31 3.3.3.4 Nội dung 4: Nghiên cứu mơi trường kích chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ in vitro 33 3.4 Các phương pháp xử lý số liệu 35 Phần 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 37 4.1 Kết nghiên cứu: Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả tái sinh chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc 37 4.2.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ Địa lan kiếm Bạch Ngọc 39 4.2.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ địa lan Kiếm Bạch Ngọc 41 4.3 Kết nghiên cứu môi trường nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc in vitro 44 4.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IAA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc 44 4.3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng IAA kết hợp với IBA đến khả nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc 46 4.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng IAA kết hợp với IBA NAA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ 48 viii 4.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinitine đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ 50 4.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ 52 4.4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA NAA đến khả tạo chồi địa lan kiếm từ rễ 54 Phần 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 57 5.1 Kết luận 57 5.2 Kiến nghị 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 I Tiếng Việt 58 II Tiếng Anh 58 III Một số trang web 58 56 B A D C E Hình 4.9 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA NAA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ (sau 20 ngày nuôi cấy) A: CT1: tỉ lệ mẫu tạo chồi 54,44% chồi xanh đậm, mập; B: CT2: tỉ lệ mẫu tạo chồi 56,67% chồi xanh đậm, mập; C: CT3: tỉ lệ mẫu tạo chồi 65,56% chồi xanh đậm, mập; D: CT4: tỉ lệ mẫu tạo chồi 75,56% chồi xanh đậm, mập, dài; E: CT5: tỉ lệ mẫu tạo chồi 63,33% chồi xanh đậm, mập 57 Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Trong khn khổ thí nghiệm chúng tơi đưa số kết nghiên cứu sau: - Mơi trường thích hợp cho tái sinh chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc (Cymbidium mastersii) môi trường MS + Đường 30g/l + Agar 5,5g/l; pH = 5,65,8 cho tỷ lệ mẫu tái sinh đạt 71,10%; chất lượng chồi xanh đậm, mập - Mơi trường thích hợp kích thích chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc (Cymbidium mastersii) rễ là: MS + Đường 30g/l + Agar 5,5g/l; pH = 5,6-5,8 bổ sung thêm NAA nồng độ 0,5 mg/l; THT 1,0 g/l cho tỷ lệ mẫu rễ đạt 90,00%, chất lượng rễ dài, mập -Môi trường nhân nhanh rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc (Cymbidium mastersii) là: MS + Đường 30g/l + Agar 5,5g/l; inositol 100mg/l, than hoạt tính 1,0g/l, pepton 1,0g/l, nước dừa 150 ml/l, pH = 5,6-5,8 bổ sung hàm lượng 1,0 mg/l IAA; 1,0 mg/l IBA; 2,0 mg/l NAA cho hệ số nhân nhanh rễ đạt 4,56 lần; chất lượng rễ dài, mập - Môi trường tái sinh chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc (Cymbidium mastersii) từ rễ môi trường MS + Đường 30g/l + Agar 5,5g/l; inositol 100mg/l, than hoạt tính 1,0g/l, pepton 1,0g/l, nước dừa 150 ml/l, pH = 5,6-5,8 bổ sung hàm lượng 0,5 mg/l kinetin; 1,0 mg/l BA; 0,5 mg/l NAA cho tỉ lệ mẫu tạo chồi đạt 75,56%; chất lượng chồi xanh đậm, mập, dài 5.2 Kiến nghị - Tiếp tục nghiên cứu thêm ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng khác đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc - Ứng dụng mơi trường thích hợp vào nhân giống kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật để nhân nhanh địa lan kiếm Bạch Ngọc 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Bộ y tế (2017), Thực vật học, Nxb Y học, Hà Nội Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thị Muội (2002), Công nghệ sinh học thực vật cải tiến giống trồng, Nxb Khoa học Kỹ thuật Nguyễn Hữu Huy - Phan Ngọc Cấp (1995), “Mấy nét cội nguồn phong lanĐặc sản quý nước nhiệt đới”, Việt Nam hương sắc, (1), (15-16 ) Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật - Nghiên cứu ứng dụng, Nxb Nông nghiệp Ngô Thị Nguyệt cs (2013), Thu thập, lưu trữ nguồn gen ứng dụng công nghệ sinh học bảo tồn phát triển số loài lan quý Quảng Ninh, Báo cáo tổng hợp kết khoa học công nghệ đề tài, Trung tâm Khoa học Sản xuất Lâm Nông nghiệp Quảng Ninh Trương Thị Đẹp (2017), Thực vật dược, Nxb Y học, Hà Nội Trần Hợp (1998), Phong Lan Việt Nam, Nxb Nông nghiệp TP HCM Trần Thị Lệ, Trương Thị Bích Phượng, Trần Thị Triêu Hà (2008), Giáo trình Cơng nghệ sinh học thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội II Tiếng Anh David Du Puy and Phillip Cribb (2007), The Genus Cymbidium, Royal Botanic Gardens, Kew III Một số trang web 10 www.botanyvn.com 11 www.caykieng.farmvina.com 12 www.cites.org 13 www.hoasonla.com 14 www.ncbi.nlm.nih.gov 15 www.orchidculture.com 16 www.vuonhoalan.net PHỤ LỤC 1: MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY Bảng 1: Thành phần môi trường MS (Muashige & Skoog) Amount to Bottle Component Stock take Solution (g/l) preparation (ml) I II III V concentratic (mg/l) NH4NO3 82,5 KNO3 95,0 MgSO4.7H2O 37,0 MnSO4.4H2O 2,23 ZnSO4.7H2O 1,058 CuSO4.5H2O 0,0025 0,025 CaCl2.2H2O 44 440,0 20 1650,0 1900,0 370,0 10 10,6 0,083 CoCl2.6H2O 0,0025 0,025 17 170,0 H3BO4 0,62 Na2MoO4.2H2O 0,025 FeSO4.7H2O 2,784 Na2EDTA.2H2O 3,724 10 22,3 KI KH2PO4 IV Final 10 0,83 6,2 0,25 10 27,85 37,25 mg/100ml Vitamin Nicotinic acid 100 0,5 0,5 Glycine 100 2,0 2,0 Thiamine acid 100 0,1 0,1 Pyridocine HCl 100 0,5 0,5 Sucrose 300000,0 Agar 5500,0 pH 5,6-5,8 Bảng 2: Thành phần môi trường môi trường RE (Robert Ernst modified) (mg/l) - EDTA (Chelating agent): 37 - Ferrous sulphate (FeSO4 7H2O): 25 - Calcium nitrate (Ca(NO3)2 4H20): 150 - Ammonium sulphate ((NH4)2SO4): 150 - Ammonium nitrate (NH4NO3): 400 - Potassium nitrate (KNO3): 400 - Potassium phosphate (KH2PO4): 300 - Magnesium nitrate (Mg(NO3)2 6H2O): 100 - pH: 6-7 PHỤ LỤC KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE TL FILE TN1 28/ 4/** 8:29 PAGE VARIATE V003 TL LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 639.852 213.284 11.52 0.003 * RESIDUAL 148.141 18.5176 * TOTAL (CORRECTED) 11 787.993 71.6357 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1 28/ 4/** 8:29 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF TL 71.1133 56.6667 60.0000 51.1133 SE(N= 3) 2.48446 5%LSD 8DF 8.10157 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1 28/ 4/** 8:29 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TL GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 59.723 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.4638 4.3032 7.2 0.0031 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE TL FILE TN2 28/ 4/** 8:47 PAGE VARIATE V003 TL LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 6811.93 1702.98 135.24 0.000 * RESIDUAL 10 125.918 12.5918 * TOTAL (CORRECTED) 14 6937.85 495.561 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN2 28/ 4/** 8:47 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF TL 11.1100 74.4433 51.1100 37.7767 28.8867 SE(N= 3) 2.04873 5%LSD 10DF 6.45561 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN2 28/ 4/** 8:47 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TL GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 40.665 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 22.261 3.5485 8.7 0.0000 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE TL FILE TN3 28/ 4/** 9: PAGE VARIATE V003 TL LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 528.929 132.232 16.22 0.000 * RESIDUAL 10 81.5408 8.15408 * TOTAL (CORRECTED) 14 610.470 43.6050 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3 28/ 4/** 9: PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF TL 74.4433 76.6667 90.0000 84.4433 86.6667 SE(N= 3) 1.64864 5%LSD 10DF 5.19494 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3 28/ 4/** 9: PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TL GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 82.444 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 6.6034 2.8555 3.5 0.0003 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE HS FILE TN4 7/ 5/** 9:31 PAGE VARIATE V003 HS LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.25404 813510 351.66 0.000 * RESIDUAL 10 231337E-01 231337E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.27717 234084 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4 7/ 5/** 9:31 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF HS 0.413333 1.72333 1.47667 1.31333 0.866667 SE(N= 3) 0.277691E-01 5%LSD 10DF 0.875014E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4 7/ 5/** 9:31 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.1587 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.48382 0.48097E-01 4.2 0.0000 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE HS FILE TN5 7/ 5/** 9:59 PAGE VARIATE V003 HS LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.73927 934817 500.78 0.000 * RESIDUAL 10 186671E-01 186671E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.75793 268424 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 7/ 5/** 9:59 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF HS 1.72333 3.05667 2.91333 2.53333 2.09000 SE(N= 3) 0.249447E-01 5%LSD 10DF 0.786016E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 7/ 5/** 9:59 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.4633 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.51810 0.43205E-01 1.8 0.0000 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE HS FILE TN6 7/ 5/** 10:43 PAGE VARIATE V003 HS LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.82183 955457 357.40 0.000 * RESIDUAL 10 267336E-01 267336E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.84856 274897 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6 7/ 5/** 10:43 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF HS 3.05667 4.03333 4.55667 4.25667 3.86667 SE(N= 3) 0.298516E-01 5%LSD 10DF 0.940636E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6 7/ 5/** 10:43 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.9540 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.52431 0.51705E-01 1.3 0.0000 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE HS FILE TN7 30/ 4/** 22:49 PAGE VARIATE V003 HS LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1207.41 301.854 50.94 0.000 * RESIDUAL 10 59.2520 5.92520 * TOTAL (CORRECTED) 14 1266.67 90.4762 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7 30/ 4/** 22:49 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF HS 0.000000 7.78000 13.3333 25.5567 20.0000 SE(N= 3) 1.40537 5%LSD 10DF 4.42837 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7 30/ 4/** 22:49 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 13.334 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.5119 2.4342 18.3 0.0000 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE HS FILE TN8 30/ 4/** 22:52 PAGE VARIATE V003 HS LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1677.15 419.287 47.16 0.000 * RESIDUAL 10 88.9113 8.89113 * TOTAL (CORRECTED) 14 1766.06 126.147 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN8 30/ 4/** 22:52 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF HS 25.5567 30.0000 38.8900 46.6667 54.4467 SE(N= 3) 1.72154 5%LSD 10DF 5.42464 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN8 30/ 4/** 22:52 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 39.112 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 11.232 2.9818 7.6 0.0000 | | | | THÍ NGHIỆM BALANCED ANOVA FOR VARIATE TL FILE TN9 11/ 5/** 20:10 PAGE VARIATE V003 TL LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 832.576 208.144 15.60 0.000 * RESIDUAL 10 133.444 13.3444 * TOTAL (CORRECTED) 14 966.021 69.0015 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN9 11/ 5/** 20:10 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF TL 54.4467 56.6667 65.5567 75.5567 63.3333 SE(N= 3) 2.10906 5%LSD 10DF 6.64573 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN9 11/ 5/** 20:10 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TL GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 63.112 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.3067 3.6530 5.8 0.0003 | | | | XÁC NHẬN ĐÃ SỬA CHỮA THEO GÓP Ý CỦA HỘI ĐỒNG Thái Nguyên ngày… tháng….năm… Người hướng dẫn Người nhận xét phản biện (chữ ký ghi rõ họ tên) chữ ký ghi rõ họ tên) ... khả tạo rễ địa lan kiếm Bạch Ngọc 3.2.4 Nội dung 4: Nghiên cứu mơi trường kích chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ in vitro - Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng kinitine đến khả tạo chồi 29 địa lan. .. đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ 50 4.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng kinetin kết hợp với BA đến khả tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ 52 4.4.3 Nghiên cứu ảnh... Sơ đồ nghiên cứu tạo chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc từ rễ phương pháp invitro 29 Hình 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả tái sinh chồi địa lan kiếm Bạch Ngọc (sau