Khoa công nghệ ứng dụng báo cáo thực hành sinh học đại cương

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VĂN LANG KHOA CÔNG NGHỆ ỨNG DỤNG BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG Giảng viên hướng dẫn: Th.S Trần Thị Minh Mã lớp: 222_71BTEC30071_01,02,03,04,05 Danh sách thành viên (Nhóm 4): Nguyễn Ngọc Thảo My – MSSV: 2274202010005 Nguyễn Huỳnh Anh Thư – MSSV: 2274202010009 Nguyễn Nhựt Trường – MSSV: 2274202070071 TP.Hồ Chí Minh, ngày 11 tháng 05 năm 2023 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH MỤC LỤC BÀI 1: HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG KÍNH HIỂN VI BÀI 2: HÌNH THỂ VÀ CẤU TRÚC TẾ BÀO BÀI 3: SỰ THẨM THẤU Ở TẾ BÀO 16 BÀI 4: SỰ HÔ HẤP Ở TẾ BÀO THỰC VẬT .24 BÀI 5: CÁC CHẤT CHUYỂN HOÁ DỰ TRỮ Ở THỰC VẬT 29 BÀI 6: SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO 38 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH BÀI 1: HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG KÍNH HIỂN VI I Yêu cầu - Nắm nguyên tắc cấu tạo kính hiển vi quang học - Học cách sử dụng kính hiển vi quang học - Học cách quan sát mẫu vật kính hiển vi quang học II Chuẩn bị - Kính hiển vi quang học loại mắt - Giấy lau vật kính, giấy vệ sinh, lam kính, lamen, kim mũi mác dao lam - Mẫu vật: Tiêu mẫu cố định phịng thí nghiệm III Thí nghiệm - Dùng giấy lau vật kính lau nhẹ thị kính, vật kính, đèn chiếu sáng - Đặt kính hiển vi lệch bên trái thuận tay phải ngược lại BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG - GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Ghim chui điện để dòng điện qua kính hiển vi, bật cơng tắc hệ quang cho đèn sáng - Kéo kẹp giữ tiêu cho tiêu vào điều chỉnh cho mẫu vật vào vị trí chiếu sáng - Đặt mắt vào thị kính sau vặn đinh ốc thứ cấp lên nhìn rõ ảnh (Chú ý vặn đinh ốc thứ cấp vật kính phải E4) - Để có ảnh rõ ta điều chỉnh đinh ốc vi cấp - Sau quan sát xong ta xoay vật kính E4 (khi xoay vật kính phải dùng mâm xoay), hạ đinh ốc thứ cấp xuống, mở kẹp lấy mẫu khỏi kính hiển vi, lau khơ bàn kính, tắt đèn đậy kính hiển vi lại IV Quan sát 1.1 Mô vân 4X 1.2 4X 10X 40X 10X 40X Mô trơn: BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG 1.3 Rận nước 4X 1.4 GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH 10X 40X Tế bào mũi ruồi 10X 40X BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG 1.5 Polianthes tuberosa anthen L 4X 1.6 4X GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH 10X 40X 10X 40X Zea mays L: BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH BÀI 2: HÌNH THỂ VÀ CẤU TRÚC TẾ BÀO I Yêu cầu - Nắm phương pháp nghiên cứu tế bào - Quan sát nhận diện hình dạng cấu trúc tế bào, nhân tế bào số tế bào người, động vật, thực vật - Tự làm số tiêu đơn giản để quan sát ình dạng tế bào nhân tế bào II Chuẩn bị - Kính hiển vi - Phiến kính sạch, lamen, pipet, ống nghiệm, nhuộm - Cồn 960, cồn tuyệt đối - Xanh methylen, NaCl 9%, dầu cede, Iodua - Máu gà, hành tím, lẻ bạn, thân hoa giấy, tế bào má miệng người III Thí nghiệm Tế bào biểu bì hành tím 1.1 Cách làm tiêu Củ hành tách bóc tách lớp vỏ, lột màng mỏng phía Dùng dao lam cắt mẫu mỏng (bề mặt phẳng) sau dùng kim lưỡi mác lấy mẫu đặt lên tiêu bản, dùng lamen cố định mẫu 1.2 Quan sát  Sinh viên thực hiện: Nguyễn Ngọc Thảo My Tiêu  10X Sinh viên thực hiện: Nguyễn Nhựt Trường 40X BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG Tiêu  10X GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH 40X Sinh viên thực hiện: Nguyễn Huỳnh Anh Thư Tiêu 10X 40X Tế bào khí khổng lẻ bạn 2.1 Cách làm tiêu Dùng dao lam cắt mẫu mỏng (bề mặt phẳng) lẻ bạn Sau dùng kim lưỡi mác lấy mẫu đặt lên tiêu bản, dùng lamen cố định mẫu 2.2 Quan sát  Sinh viên thực hiện: Nguyễn Ngọc Thảo My BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG Tiêu 10X GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH 40X  Sinh viên thực hiện: Nguyễn Nhựt Trường Tiêu 10X 40X  Sinh viên thực hiện: Nguyễn Huỳnh Anh Thư Tiêu 10X 40X BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH 3.Tế bào thân hoa giấy cắt ngang 3.1.Cách làm tiêu Dùng dao lam cắt mẫu mỏng (bề mặt phẳng, cắt ngang) thân hoa giấy Sau dùng kim lưỡi mác lấy mẫu đặt lên tiêu bản, dùng lamen cố định mẫu 3.2.Quan sát  Sinh viên thực hiện: Nguyễn Ngọc Thảo My Tiêu 10X 40X  Sinh viên thực hiện: Nguyễn Nhựt Trường 10X 40X  Sinh viên thực hiện: Nguyễn Huỳnh Anh Thư BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH II.2 Thí nghiệm 2: - Hút 5ml dịch lọc khoai tây (nước đục) vào ống nghiệm, nhỏ vào giọt dung dịch I/KI Dịch lọc khoai tây trước (bên trái) sau (bên phải) cho dung dịch I/KI vào → Dịch lọc của củ khoai tây có chứa tinh bột tinh bột có phản ứng màu đặc trưng với th́c thử iodine Do dùng thuốc thử Lugol, thuốc thử này có thành phần là iodine và potassium iodine (KI) nên sẽ phản ứng với tinh bột làm dung dịch chuyển từ màu vàng sang màu xanh đen - Hút 5ml dịch lọc đậu xanh (nước đục) vào ống nghiệm, nhỏ vào giọt dung dịch I/KI BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Dịch lọc đậu xanh trước (bên trái) sau (bên phải) cho dung dịch I/KI vào → Dịch lọc của đậu xanh có chứa tinh bột tinh bột có phản ứng màu đặc trưng với th́c thử iodine Do dùng thuốc thử Lugol, thuốc thử này có thành phần là iodine và potassium iodine (KI) nên sẽ phản ứng với tinh bột làm dung dịch chuyển từ màu xanh sang màu xanh đục - Hút 5ml dịch lọc khoai tây (nước đục) vào ống nghiệm, nhỏ vào giọt dung dịch I/KI Dịch lọc gạo trước (bên trái) sau (bên phải) cho dung dịch I/KI vào BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH → Dịch lọc của gạo có chứa tinh bột tinh bột có phản ứng màu đặc trưng với th́c thử iodine Do dùng th́c thử Lugol, thuốc thử này có thành phần là iodine và potassium iodine (KI) nên sẽ phản ứng với tinh bột, tinh bột hấp thụ iodine làm dung dịch chuyển từ màu trắng sang màu xanh tím Kết luận: Khi nhỏ dung dịch I/KI vào dịch lọc khoai tây, đậu xanh gạo ta thấy dịch lọc chuyển sang màu đậm màu đậm chứng tỏ lượng tinh bột có nhiều Do chứng minh khoai tây, gạo đậu xanh có chứa tinh bột 3.Dầu 3.1 Thực Làm lát cắt mỏng đậu phộng sau ngâm dung dịch Sudan III Sau 15 phút rửa nhanh rượu 20% III.2.Kết Giọt dầu vật kính 40x → Quan sát nhỏ giọt glycerin vào chất dầu nhuộm màu đỏ sẫm trở nên rõ ràng Glycerin sử dụng để làm mịn bề mặt giọt dầu, giúp chúng dễ dàng quan sát Việc phát giọt dầu tế bào cho thấy mức độ chất béo tinh dầu có đậu phộng BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH 4.Protein 4.1 Thực Đặt lát cắt dày hạt đậu trắng (đã ngâm nước đến mềm đễ dễ cắt) kính mang vật Nhỏ lên vài giọt dung dịch CuSO 5% Đậy lamen lại, để nơi mát ẩm sau 30 phút, bỏ lamen ra, rửa lát cắt nhiều lần với nước lọc Dùng miếng giấy thấm nhỏ hút cho nước thêm vào giọt dung dịch KOH 50% 4.2 Kết → Ta quan thấy lát cắt thấy protein có màu hồng tím nối peptit Do protein có chứa hai liên kết peptit (-CO-NH-) cho phản ứng màu biure có màu hồng tím với Cu2+ môi trường kiềm Điều chứng tỏ hạt đậu trắng có chứa protein BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH BÀI 6: SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO I Yêu cầu - Quan sát, nhận diện kì nguyên phân giảm phân - Quan sát, nhận diện nhiễm sắc thể nam nữ - Thực phương pháp nhuộm PAP tinh trùng heo quan sát kính hiển vi II Chuẩn bị - Dụng cụ: Kính hiển vi, khăn lau kính, lame, lamen, ống hút nhỏ giọt, dụng cụ nhuộm tiêu - Hoá chất: Cồn, Hemavoxylin Harris, Orange G, EA 90 - Mẫu vật: Tiêu nguyên phân hành, tiêu giảm phân hẹ, tiêu nhiễm sắc thể nữ, tiêu nhiễm sắc thể nam, tinh trùng heo III Thí nghiệm Q trình phân bào nguyên nhiễm rễ hành Tiêu nguyên phân rễ hành 1.1 Kỳ đầu Các nhiễm sắc thể kép dần co xoắn, màng nhân nhân dần tiêu biến, thoi phân bào dần xuất BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Kỳ đầu nguyên phân tế bào rễ hành vật kính 40x 1.2 Kỳ Các nhiễm sắc thể kép co xoắn cực đại xếp thành hàng mặt phẳng xích đạo thoi phân bào Mỗi nhiễm sắc thể kép đính với thoi phân bào tâm động Kỳ nguyên phân tế bào rễ hành vật kính 40x 1.3 Kỳ sau Các nhiễm sắc thể tách di chuyển thoi phân bào hai cực tế bào BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Kỳ sau nguyên phân tế bào rễ hành vật kính 40x Khi kỳ sau hồn tất việc phân chia vật chất di truyền, tế bào bắt đầu phân chia tế bào chất để hình thành nên hai tế bào Đối với tế bào hành (đại diện cho tế bào thực vật) phân chia tế bào chất diễn cách hình thành vách ngăn xenlulozo trung tâm tế bào để dần ngăn cách tế bào mẹ thành tế bào 1.4 Kỳ cuối Các nhiễm sắc thể dãn xoắn, màng nhân nhân dần xuất hiện, thoi vô sắc tiêu biến Sau q trình phân chia tế bào chất tạo nên tế bào có số lượng nhiễm sắc thể giống y hệt tế bào mẹ BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Kỳ cuối nguyên phân tế bào rễ hành vật kính 40x Kết quả: Từ tế bào mẹ ban đầu sau nguyên phân tạo thành hai tế bào có nhiễm sắc thể giống giống tế bào mẹ Quá trình phân bào giảm nhiễm hoa hẹ Tiêu giảm phân hoa hẹ 2.1 Kỳ đầu I Nhiễm sắc thể bắt đầu co xoắn Các nhiễm sắc thể kép cặp xảy tiếp hợp trao đổi chéo Trung tử hai cực tế bào, thoi vơ sắc hình thành, màng nhân biến BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Kỳ đầu I giảm phân tế bào hoa hẹ vật kính 40x 2.2 Kỳ I Nhiễm sắc thể co xoắn cực đại xếp thành hai hàng mặt phẳng xích đạo thoi phân bào Kỳ I giảm phân tế bào hoa hẹ vật kính 40x 2.3 Kỳ sau I Các nhiễm sắc thể kép cặp tương đồng phân li độc lập với hai cực tế bào BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Kỳ sau I giảm phân tế bào hoa hẹ vật kính 40x 2.4 Kì cuối I Sau cực tế bào, nhiễm sắc thể giãn xoắn Màng nhân nhân xuất hiện, thoi vô sắc tiêu biến, tế bào tách thành hai tế bào Kỳ cuối I giảm phân tế bào hoa hẹ vật kính 40x 2.5 Kì đầu II BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Nhiễm sắc thể bắt đầu co xoắn, trung tử hai cực tế bào, thoi vô sắc hình thành, màng nhân biến Kỳ đầu II giảm phân tế bào hoa hẹ vật kính 40x 2.6 Kì II Nhiễm sắc thể co xoắn cực đại xếp thành hàng mặt phẳng xích đạo 2.7 Kì sau II Các cromatit tách tâm động thành nhiễm sắc thể đơn phân li hai cực tế bào BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Kỳ sau II giảm phân tế bào hoa hẹ vật kính 40x 2.8 Kỳ cuối II Thoi vơ sắc biến mất, màng nhân xuất Nhiễm sắc thể giãn xoắn, tế bào tách thành tế bào Kỳ cuối II giảm phân tế bào hoa hẹ vật kính 40x BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Kết quả: Sau trải quahai trình giảm phân I và giảm phân II, từ 1 tế bào mẹ ban đầu (2n NST kép) tạo thành 4 tế bào con có số nhiễm sắc thể đơn nửa số nhiễm sắc thể kép của tế bào mẹ (n NST đơn).  Nhiễm sắc thể người Bộ nhiễm sắc thể người nữ bình thường vật kính 40x Bộ nhiễm sắc thể người nữ bình thường vật kính 100x BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH Bộ nhiễm sắc thể người nam bình thường vật kính 40x Bộ nhiễm sắc thể người nam bình thường vật kính 100x Tinh trùng heo (nhuộm PAP) 4.1 Thực - Bước 1: Trải mẫu tinh trùng heo lam kính, để khơ tầm đến phút - Bước 2: Cố định lại cồn 99, để khô tầm đến phút - Bước 3: Nhuộm Hemavoxylin Harris, sau phút rửa thuốc nhuộm nước cất, cố định lại cồn 99, để khô tầm đến phút BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG GVHD:TH.S TRẦN THỊ MINH - Bước 4: Nhuộm Orange G, sau phút rửa thuốc nhuộm nước cất, cố định lại cồn 99, để khô tầm đến phút - Bước 5: Nhuộm EA 90, sau phút rửa thuôc nhuộm nước cất, cố định lại cồn 99, tiếp tục để khô tầm đến phút soi mẫu vật kính hiển vi 4.2 Kết Tinh trùng heo sau nhuộm vật kính 40x Tinh trùng heo sau nhuộm vật kính 100x