Luận án tiến sĩ ngành sinh học nghiên cứu ứng dụng bức xạ gamma co 60 để chế tạo β glucan khối lượng phân tử thấp tan trong nước có hoạt tính sinh học từ bã men bia

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Nguyễn Thành Long NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG BỨC XẠ GAMMA Co-60 ĐỂ CHẾ TẠO β-GLUCAN KHỐI LƢỢNG PHÂN TỬ THẤP TAN TRONG NƢỚC CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ BÃ MEN BIA LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Nguyễn Thành Long NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG BỨC XẠ GAMMA Co-60 ĐỂ CHẾ TẠO β-GLUCAN KHỐI LƢỢNG PHÂN TỬ THẤP TAN TRONG NƢỚC CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ BÃ MEN BIA Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 42 02 01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Lê Quang Luân PGS.TS Hoàng Nghĩa Sơn Thành phố Hồ Chí Minh – 2020 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 15 tháng 05 năm 2020 Tác giả luận án Nguyễn Thành Long ii LỜI CẢM ƠN Trong trình thực hồn thành luận án, tơi xin chân thành bày tỏ lịng biết ơn kính trọng đến PGS.TS Lê Quang Luân PGS.TS Hoàng Nghĩa Sơn nhiệt tình giúp đỡ, hướng dẫn góp ý kiến cho luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn đến: - Quý Thầy, Cô Học viện Khoa học Công nghệ - Quý Thầy, Cô Hội đồng Khoa học, Viện Sinh học Nhiệt đới - Quý Thầy, Cô Viện CNSH Môi trường, Trường ĐH Nha Trang - Các cán Phịng Cơng nghệ Sinh học Vật liệu Nano, Trung tâm Cơng nghệ Sinh học Thành phố Hồ Chí Minh - Bộ Khoa học Công nghệ hỗ trợ kinh phí, Trung tâm Cơng nghệ Sinh học Thành phố Hồ Chí Minh hỗ trợ kinh phí sở vật chất thí nghiệm, Viện Sinh học Nhiệt đới tạo điều kiện để tơi hồn thành nghiên cứu - Trân trọng cảm ơn gia đình, đồng nghiệp bạn bè, người hỗ trợ, giúp đỡ động viên suốt thời gian thực nghiên cứu hoàn thành luận án Tác giả luận án Nguyễn Thành Long iii MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN II LỜI CẢM ƠN III MỤC LỤC IV DANH MỤC BẢNG VII DANH MỤC HÌNH IX DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT XII TÓM TẮT XIII SUMMAY XVI MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN .6 1.1 Giới thiệu tổng quan β-glucan .6 1.1.1 Nguồn thu nhận β-glucan 1.1.2 Cấu trúc β-glucan .7 1.2 Sơ lược nấm men Saccharomyces 1.3 Phương pháp thu nhận thành tế bào từ nấm men bia Saccharomyces 1.3.1 Phương pháp vật lý 10 1.3.2 Phương pháp hóa học .11 1.3.3 Phương pháp sinh học 11 1.4 Phương pháp tách chiết β-glucan từ thành tế bào nấm men bia Saccharomyces 12 1.5 Các phương pháp cắt mạch β-glucan 13 1.5.1 Phương pháp hóa học 14 1.5.2 Phương pháp sinh học 14 1.5.3 Phương pháp chiếu xạ 14 1.6 Hoạt tính sinh học β-glucan .19 1.6.1 Tăng cường khả miễn dịch .19 1.6.2 Chống ung thư 20 1.6.3 Hạ mỡ máu đường huyết 21 1.6.4 Chống oxi hóa bảo vệ gan 23 1.7 Ứng dụng β-glucan……………………………………………………… 25 1.8 Ứng dụng β-glucan Mw thấp…………………………………………… 28 iv CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .31 2.1 Nguyên vật liệu thiết bị nghiên cứu……………………………………….31 2.1.1 Nguyên vật liệu 31 2.1.2 Thiết bị 32 2.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu .33 2.2.1 Tách chiết β-glucan từ bã tế bào nấm men bia .33 2.2.2 Cắt mạch β-glucan phương pháp chiếu xạ tia gamma Co-60 .37 2.2.3 Xác định hoạt tính sinh học β-glucan cắt mạch phương pháp chiếu xạ .39 2.2.4 Thiết lập qui trình chế tạo -glucan có Mw thấp tan nước trongkhoảng liều xạ thấp 100 kGy 47 2.2.5 Phương pháp xử lý số liệu .49 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 50 3.1 Tách chiết β-glucan từ tế bào nấm men bã men bia 50 3.1.1 Thu nhận nấm men từ bã nấm men bia từ nhà máy sản xuất bia 50 3.1.2 Tách thu nhận thành tế bào nấm men 51 3.1.3 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất tách chiết β-glucan từ thành tế bào nấm men Saccharomyces .52 3.2 Cắt mạch β-glucan phương pháp chiếu xạ 62 3.2.1 Xác định hiệu suất thu nhận β-glucan tan phương pháp chiếu xạ β-glucan 62 3.2.2 Sự suy giảm khối lượng phân tử 64 3.2.3 Phân tích phổ UV 65 3.2.4 Phân tích phổ FTIR 66 3.2.5 Phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H 13C 68 3.2.6 Phân tích hàm lượng β-glucan 69 3.3 Hoạt tính sinh học β-glucan tan nước chế tạo phương pháp chiếu xạ 70 3.3.1 Hoạt tính kháng oxi hóa β-glucan chiếu xạ điều kiện in vitro in vitro .70 3.3.2 Khả bảo vệ gan β-glucan chiếu xạ điều kiện in vivo .71 3.3.3 Ảnh hưởng β-glucan chiếu xạ đến số miễn dịch chuột .75 v 3.3.4 Khả hạ mỡ máu đường huyết β-glucan chiếu xạ điều kiện in vivo chuột .78 3.3.5 Hiệu ứng β-glucan chiếu xạ lên tăng trưởng miễn dịch gà Lương phượng .90 3.4 Thiết lập quy trình chế tạo β-glucan Mw thấp tan nước khoảng liều xạ thấp .94 3.4.1 Cắt mạch β-glucan phương pháp chiếu xạ điều kiện pH khác 94 3.4.2 Cắt mạch β-glucan phương pháp chiếu xạ điều kiện hiệu chỉnh pH có H2O2 99 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 106 4.1 Kết luận 106 4.2 Đề nghị 107 TÀI LIỆU THAM KHẢO 108 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 115 PHỤ LỤC 116 PHỤ LỤC 119 PHỤ LỤC 120 PHỤ LỤC 121 Hoạt tính kháng oxi hóa β-glucan chiếu xạ điều kiện in vitro theo phương pháp sử dụng gốc tự DPPH 121 Khả bảo vệ gan β-glucan chiếu xạ điều kiện in vivo 122 Ảnh hưởng β-glucan chiếu xạ đến số miễn dịch chuột .125 Khả hạ mỡ máu đường huyết β-glucan chiếu xạ điều kiện in vivo chuột .128 Hiệu ứng β-glucan chiếu xạ lên tăng trưởng miễn dịch gà Lương phượng ………………………………………………………………………….141 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Cấu trúc, nguồn thu nhận hoạt tính β-glucan Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng β-glucan chiếu xạ có Mw khác lên số AST, ALT máu chuột gây tổn thương gan 41 Bảng 2.2 Bố trí thí nghiệm khảo sát số sinh hóa, công thức máu miễn dịch chuột cho uống bổ sung β-glucan chiếu xạ theo liều khác 41 Bảng 2.3 Bố trí thí nghiệm khảo sát số sinh hóa mơ hình chuột béo phì thực nghiệm cho uống bổ sung β-glucan chiếu xạ có Mw khác ……………………………………………………………………43 Bảng 2.4 Bố trí thí nghiệm khảo sát hiệu ứng tăng trưởng kích kháng bệnh gà lương phượng cho ăn bổ sung β-glucan chiếu xạ liều khác .45 Bảng 3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ thủy phân đến hiệu suất thu nhận β-glucan 52 Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ NaOH đến hiệu suất thu nhận β-glucan 53 Bảng 3.3 Ảnh hưởng thời gian thủy phân đến hiệu suất thu nhận β-glucan .54 Bảng 3.4.Ảnh hưởng tỉ lệ mẫu/dung môi thủy phân đến hiệu suất thu nhận β-glucan .55 Bảng 3.5 Hiệu suất tách chiết sản phẩm β-glucan từ bã men bia quy mơ 500 lít/mẻ 56 Bảng 3.6 Hàm lượng loại glucan mẫu tách chiết .57 Bảng 3.7 Các đỉnh nhóm chức đặc trưng β-glucan 60 Bảng 3.8 Kết phân tính hàm lượng loại glucan mẫu β-glucan tan nước có Mw~25 kDa 69 Bảng 3.9 Số lượng hồng cầu, bạch cầu tổng số, lympho bào bạch cầu trung tính máu chuột cho uống bổ sung β-glucan có Mw khác 76 Bảng 3.10 Thể trọng nhóm chuột sau tuần ni theo chế độ dinh dưỡng khác 78 Bảng 3.11 Một số số sinh hóa chuột sau tuần nuôi 79 Bảng 3.12 Trọng lượng chuột trước sau 20 ngày cho uống β-glucan có Mw khác 80 Bảng 3.13 Các số lipid glucose máu chuột sau 20 ngày cho uống bổ sung β-glucan có Mw khác 81 vii Bảng 3.14 Các số lipid glucose máu chuột sau 40 ngày cho uống bổ sung β-glucan có Mw khác .82 Bảng 3.15 Các số lipid glucose máu chuột sau 60 ngày cho uống bổ sung β-glucan có Mw khác .83 Bảng 3.16 Ảnh hưởng Mw β-glucan có Mw khác lên tăng trọng chất lượng thịt gà sau tuần cho ăn bổ sung 90 Bảng 3.17 Ảnh hưởng Mw β-glucan có Mw khác lên số miễn dịch gà sau tuần cho ăn bổ sung 92 viii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc (1,3)/(1,4)- (1,3)/(1,6)-β-glucan theo Volman ctv Hình 1.2 Cấu trúc thành tế bào nấm men Saccharomyces Hình 2.1 Dịch bã men bia sử dụng nghiên cứu 31 Hình 2.2 Bộ KIT K-YBGL xác định hàm lượng β(1-3,1-6)-glucan Megazyme 31 Hình 2.3 Sơ đồ tách chiết từ nguyên liệu bã tế bào nấm men bia β-glucan 34 Hình 2.4 Thiết kế thí nghiệm mơ hình tổn thương gan CCl4 .40 Hình 2.5 Mẫu β-glucan tan nước có Mw khác 41 Hình 2.6 Sơ đồ thí nghiệm theo dõi khả giảm mỡ máu chuột .44 Hình 2.7 Quy trình lấy máu chuột xét nghiệm số sinh hoá .45 Hình 2.8 Lấy máu gà để tiến hành xét nghiệm 46 Hình 3.1 Dịch bã men bia (A), ảnh SEM dịch chưa rửa (B), mấm men bia sau rửa (C) ảnh SEM tế bào nấm men sau rửa (D) .50 Hình 3.2 Sản phẩm thành tế bào nấm men trước (A) sau ly tâm (B) ảnh SEM (C) 51 Hình 3.3 Mẫu β-glucan sau tách chiết từ thành tế bào nấm men sau thu nhận (A), sau sấy khô 60oC (B) ảnh SEM (C) 57 Hình 3.4 Phổ FTIR mẫu β-glucan tách chiết tách từ thành tế bào nấm men bia mẫu β-glucan chuẩn hãng Sigma 59 Hình 3.5 Sơ đồ khối quy trình tách chiết β-glucan từ dịch bã men bia quy mơ 500 lít/mẻ .61 Hình 3.6 Hiệu suất thu nhận β-glucan tan nước chiếu xạ hỗn hợp β-glucan 10% liều xạ khác .63 Hình 3.7 Sự suy giảm Mw β-glucan tan theo liều xạ .64 Hình 3.8 β-glucan tan nước từ mẫu β-glucan 10% chiếu xạ liều xạ khác 65 Hình 3.9 Phổ UV-vis β-glucan chế tạo phương pháp chiếu xạ 66 Hình 3.10 Phổ IR β-glucan chiếu xạ nồng độ 10% liều xạ khác 67 Hình 3.11 Sự thay đổi tỷ lệ cường độ đỉnh C-O-C (1156 cm-1)/cường độ đỉnh C-C (1040 cm-1) phổ mẫu β-glucan theo liều xạ 67 ix Duncan NT N -47.4183 Subset for alpha = 0.05 25.0 48.0 -36.7867 11.0 -33.5093 64.0 ĐC1 ĐC2 -18.9417 16.4700 41.2950 Sig 1.000 306 1.000 1.000 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số cholesterol (mg/dL) sau 60 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 93.8317 212.9167 122.7933 99.7750 89.6667 103.9517 120.4892 18.6683 44.3650 -15.2917 -31.3017 -38.1317 -28.6184 -8.3850 ANOVA NT Between Groups SAU Within Groups Total Between Groups MTD Within Groups Total Duncan NT Sum of Squares 65468.19 4136.332 69604.53 32289.44 373.211 32662.65 Std Error 3.86748 7.71181 3.80376 3.53363 3.17749 5.13778 7.43248 1.13992 1.68372 1.68252 1.22149 83438 1.81298 5.09144 df Mean Square 13093.640 30 137.878 6457.889 30 12.440 35 25.0 ĐC1 93.8317 48.0 99.7750 11.0 103.9517 64.0 ĐC2 Duncan 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 83.8900 103.7733 79.87 107.10 193.0928 232.7405 188.34 239.94 113.0155 132.5712 111.67 133.78 90.6915 108.8585 92.24 112.34 81.4987 97.8347 80.67 100.57 90.7446 117.1588 90.45 125.76 105.4004 135.5779 79.87 239.94 15.7381 21.5986 15.43 23.50 40.0369 48.6931 39.20 51.73 -19.6167 -10.9666 -22.75 -11.71 -34.4416 -28.1617 -36.05 -28.09 -40.2765 -35.9868 -39.47 -34.32 -33.2788 -23.9580 -34.50 -23.85 -18.7212 1.9512 -39.47 51.73 122.7933 212.9167 062 1.000 F Sig 94.966 000 519.108 000 35 Subset for alpha = 0.05 89.6667 Sig N Std Deviation 9.47334 18.88999 9.31728 8.65559 7.78323 12.58495 44.59485 2.79223 4.12425 4.12132 2.99204 2.04379 4.44088 30.54863 1.000 131 NT N -38.1317 Subset for alpha = 0.05 25.0 48.0 -31.3017 11.0 -28.6184 64.0 ĐC1 ĐC2 -15.2917 18.6683 44.3650 Sig 1.000 198 1.000 1.000 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số triglyceride (mg/dL) sau 20 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA Mean 85.2667 164.8183 90.1600 79.6150 83.0967 88.6817 36 98.6064 18.6233 35.8383 -25.2683 -30.2217 -33.1400 -28.6217 36 -10.4650 Std Deviation 9.45182 15.47389 9.80519 11.01081 11.76254 10.77921 32.07213 2.70424 6.19398 4.21025 6.96605 2.89150 5.64706 27.99050 Std Error 3.85869 6.31719 4.00295 4.49514 4.80204 4.40059 5.34535 1.10400 2.52868 1.71883 2.84388 1.18045 2.30540 4.66508 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 31998.214 4003.532 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT N df 30 Mean Square 6399.643 133.451 F 47.955 Sig .000 36001.747 26660.487 760.902 35 30 5332.097 25.363 210.228 000 27421.389 35 Subset for alpha = 0.05 79.6150 48.0 25.0 83.0967 ĐC1 85.2667 11.0 88.6817 64.0 90.1600 ĐC2 Sig 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 75.3476 95.1857 70.34 96.85 148.5795 181.0572 142.35 185.08 79.8701 100.4499 82.85 109.45 68.0599 91.1701 68.09 95.56 70.7526 95.4407 65.65 98.09 77.3696 99.9938 75.22 103.62 87.7547 109.4580 65.65 185.08 15.7854 21.4613 16.04 23.09 29.3381 42.3385 27.35 43.48 -29.6867 -20.8499 -29.62 -17.71 -37.5321 -22.9112 -38.96 -19.77 -36.1744 -30.1056 -37.76 -29.96 -34.5479 -22.6954 -38.28 -22.46 -19.9356 -.9944 -38.96 43.48 164.8183 168 1.000 132 Duncan NT N Subset for alpha = 0.05 25.0 -33.1400 48.0 -30.2217 -30.2217 11.0 -28.6217 -28.6217 64.0 ĐC1 ĐC2 -25.2683 18.6233 35.8383 Sig .152 117 1.000 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số triglyceride (mg/dL) sau 40 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 86.6683 190.4133 78.8500 69.5283 62.5750 77.7683 94.3006 25.8233 59.7400 -33.1517 -41.7550 -48.5050 -36.8133 -12.4436 Std Std Deviation Error 10.04264 4.09989 26.41789 10.78506 10.09565 4.12153 4.33679 1.77049 7.72746 3.15472 7.38271 3.01398 45.89967 7.64994 7.01845 2.86527 4.62923 1.88988 4.99207 2.03800 4.54942 1.85729 3.49950 1.42867 5.35379 2.18568 41.37935 6.89656 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 68568.749 5168.539 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT df 30 Mean Square 13713.750 172.285 F 79.599 Sig .000 73737.287 59142.704 786.080 35 30 11828.541 26.203 451.425 000 59928.784 35 25.0 Subset for alpha = 0.05 62.5750 48.0 69.5283 11.0 77.7683 77.7683 64.0 78.8500 78.8500 ĐC1 ĐC2 Sig N 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 76.1292 97.2074 72.80 99.45 162.6895 218.1372 159.54 227.42 68.2553 89.4447 70.07 91.65 64.9772 74.0795 62.56 74.67 54.4655 70.6845 55.25 72.67 70.0207 85.5160 70.21 87.10 78.7703 109.8308 55.25 227.42 18.4579 33.1887 16.92 35.20 54.8819 64.5981 54.61 67.14 -38.3905 -27.9128 -41.01 -28.43 -46.5293 -36.9807 -47.18 -35.18 -52.1775 -44.8325 -53.21 -43.62 -42.4318 -31.1949 -42.61 -28.56 -26.4444 1.5571 -53.21 67.14 86.6683 190.4133 057 277 1.000 133 Duncan NT N -48.5050 Subset for alpha = 0.05 25.0 48.0 -41.7550 11.0 -36.8133 64.0 ĐC1 ĐC2 -36.8133 -33.1517 25.8233 59.7400 Sig 1.000 105 225 1.000 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số triglyceride (mg/dL) sau 60 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 98.6100 195.4283 82.7900 77.7317 70.5850 79.5150 100.7767 26.6783 60.7500 -31.2717 -36.1467 -41.0450 -33.5800 -9.1025 Std Deviation 7.21366 21.21785 7.13371 9.16446 7.76069 9.68829 45.05455 4.34274 5.91158 5.56520 3.82646 4.71044 3.47507 39.52585 Std Error 2.94497 8.66215 2.91232 3.74138 3.16829 3.95523 7.50909 1.77292 2.41339 2.27198 1.56215 1.92303 1.41869 6.58764 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 67090.919 3956.012 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT df F Sig 13418.184 131.867 101.755 000 71046.931 54011.820 668.419 35 30 10802.364 22.281 484.832 000 54680.239 35 25.0 48.0 77.7317 11.0 79.5150 64.0 82.7900 ĐC1 ĐC2 98.6100 195.4283 102 Mean Square 30 Subset for alpha = 0.05 70.5850 Sig N 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 91.0397 106.1803 89.67 110.56 173.1616 217.6951 167.84 225.35 75.3036 90.2764 72.67 90.67 68.1142 87.3492 66.67 89.23 62.4407 78.7293 60.02 79.45 69.3478 89.6822 65.23 95.44 85.5324 116.0209 60.02 225.35 22.1209 31.2358 19.47 31.04 54.5462 66.9538 53.44 67.85 -37.1120 -25.4313 -38.24 -23.30 -40.1623 -32.1310 -41.46 -30.66 -45.9883 -36.1017 -49.42 -36.48 -37.2269 -29.9331 -38.71 -28.59 -22.4761 4.2711 -49.42 67.85 1.000 1.000 134 Duncan NT N Subset for alpha = 0.05 25.0 -41.0450 48.0 -36.1467 11.0 -33.5800 64.0 -31.2717 ĐC1 ĐC2 -36.1467 26.6783 60.7500 Sig .082 100 1.000 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số LDLc (mg/dL) sau 20 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 23.8533 38.5317 28.9017 20.6800 18.9033 26.3467 26.2028 17.8633 22.1183 -19.1850 -37.8767 -38.6683 -28.2867 -14.0058 Std Deviation 3.79755 6.86149 6.90118 5.04219 4.14082 7.90325 8.55645 6.39252 5.37118 1.44279 5.35256 5.19236 6.87282 25.77359 Std Error 1.55034 2.80119 2.81739 2.05846 1.69048 3.22649 1.42608 2.60974 2.19277 58901 2.18517 2.11977 2.80582 4.29560 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 1491.654 1070.795 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT df Mean Square Sig 298.331 35.693 8.358 000 2562.450 22376.525 873.208 35 30 4475.305 29.107 153.754 000 23249.733 35 25.0 48.0 20.6800 ĐC1 23.8533 23.8533 11.0 26.3467 26.3467 64.0 ĐC2 28.9017 38.5317 056 F 30 Subset for alpha = 0.05 18.9033 Sig N 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 19.8680 27.8386 19.34 28.77 31.3310 45.7324 28.65 46.73 21.6593 36.1440 21.43 38.56 15.3886 25.9714 16.22 29.31 14.5578 23.2489 16.04 26.96 18.0527 34.6406 18.08 39.04 23.3077 29.0979 16.04 46.73 11.1548 24.5719 10.53 26.90 16.4816 27.7550 15.75 31.93 -20.6991 -17.6709 -21.19 -17.87 -43.4938 -32.2595 -43.80 -30.59 -44.1174 -33.2193 -45.15 -32.03 -35.4992 -21.0741 -38.47 -19.09 -22.7264 -5.2853 -45.15 31.93 177 1.000 135 Duncan NT N 25.0 -38.6683 48.0 -37.8767 11.0 64.0 ĐC1 ĐC2 Subset for alpha = 0.05 -28.2867 -19.1850 17.8633 22.1183 Sig .801 1.000 1.000 182 One-way ANOVA: Chỉ số LDLc (mg/dL) sau 40 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 22.7633 38.4800 22.0600 19.0867 17.2500 21.3117 23.4919 19.1000 27.0550 -28.8467 -39.7617 -45.6483 -31.9050 -16.6678 Std Deviation 3.96675 2.80216 3.80975 3.00204 1.93222 3.98807 7.70126 4.81796 3.68194 4.52062 5.77568 5.33033 1.91590 29.41405 Std Error 1.61942 1.14398 1.55532 1.22558 78883 1.62812 1.28354 1.96692 1.50315 1.84553 2.35791 2.17610 78216 4.90234 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 1742.071 333.759 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT df Mean Square Sig 348.414 11.125 31.317 000 2075.830 29668.283 613.235 35 30 5933.657 20.441 290.280 000 30281.518 35 25.0 48.0 19.0867 19.0867 11.0 21.3117 21.3117 64.0 22.0600 ĐC1 22.7633 ĐC2 38.4800 054 F 30 Subset for alpha = 0.05 17.2500 Sig N 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 18.6005 26.9262 19.26 28.89 35.5393 41.4207 35.17 42.96 18.0619 26.0581 18.78 27.68 15.9362 22.2371 16.05 22.76 15.2223 19.2777 15.23 20.06 17.1264 25.4969 16.54 27.37 20.8862 26.0977 15.23 42.96 14.0439 24.1561 12.49 25.31 23.1910 30.9190 23.05 33.00 -33.5908 -24.1026 -35.31 -23.60 -45.8229 -33.7005 -44.84 -29.20 -51.2422 -40.0545 -53.82 -37.20 -33.9156 -29.8944 -34.44 -29.71 -26.6201 -6.7155 -53.82 33.00 090 1.000 136 Duncan NT N 25.0 48.0 11.0 64.0 ĐC1 ĐC2 Sig -45.6483 6 6 6 Subset for alpha = 0.05 -39.7617 -31.9050 -28.8467 19.1000 1.000 1.000 251 27.0550 1.000 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số LDLc (mg/dL) sau 60 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA N 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 24.5517 41.3800 24.0367 19.7567 18.8467 21.8200 25.0653 21.0650 31.3033 -21.7583 -37.9450 -39.7150 -28.2067 -12.5428 Std Deviation 6.10638 2.51317 6.40124 3.58469 2.26523 2.84339 8.65611 2.18116 3.65381 6.59420 7.10140 3.31381 3.84189 28.92548 Std Error 2.49292 1.02600 2.61330 1.46344 92478 1.16081 1.44268 89046 1.49166 2.69207 2.89913 1.35286 1.56845 4.82091 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 2069.258 553.229 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT N 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 18.1434 30.9599 18.44 32.32 38.7426 44.0174 38.67 45.25 17.3190 30.7544 18.44 34.56 15.9948 23.5186 16.90 26.62 16.4695 21.2239 15.89 20.95 18.8361 24.8039 18.78 26.66 22.1365 27.9941 15.89 45.25 18.7760 23.3540 18.27 24.15 27.4689 35.1378 27.06 35.40 -28.6785 -14.8381 -32.06 -14.18 -45.3975 -30.4925 -47.17 -26.48 -43.1926 -36.2374 -44.11 -36.30 -32.2385 -24.1748 -33.84 -24.41 -22.3298 -2.7558 -47.17 35.40 df 30 Mean Square 413.852 18.441 F 22.442 Sig .000 2622.487 28595.104 688.813 35 30 5719.021 22.960 249.082 000 29283.917 35 25.0 Subset for alpha = 0.05 18.8467 48.0 19.7567 19.7567 11.0 21.8200 21.8200 64.0 24.0367 24.0367 ĐC1 ĐC2 Sig Duncan NT 25.0 48.0 11.0 64.0 ĐC1 ĐC2 Sig 24.5517 41.3800 063 086 N 6 6 6 -39.7150 -37.9450 1.000 Subset for alpha = 0.05 -28.2067 -21.7583 21.0650 527 1.000 1.000 137 1.000 31.3033 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số glucose (mg/dL) sau 20 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 126.0133 212.3117 139.7433 124.7150 106.8017 127.6633 139.5414 24.8683 28.8667 -15.6250 -25.5183 -34.1217 -25.6850 -7.8692 Std Deviation 16.94498 15.76605 11.16120 17.61611 5.32628 16.23661 36.94829 14.31791 7.75938 4.19450 4.02653 3.82312 4.46396 26.43853 Std Error 6.91776 6.43646 4.55654 7.19175 2.17444 6.62857 6.15805 5.84526 3.16775 1.71240 1.64383 1.56078 1.82240 4.40642 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 41468.171 6312.985 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT N df 000 47781.156 22797.048 1667.802 35 30 4559.410 55.593 82.014 000 24464.849 35 124.7150 ĐC1 126.0133 11.0 127.6633 64.0 139.7433 ĐC2 N 212.3117 110 1.000 25.0 Subset for alpha = 0.05 -34.1217 11.0 -25.6850 48.0 -25.5183 64.0 ĐC1 24.8683 ĐC2 28.8667 Sig -15.6250 067 Sig 39.412 48.0 1.000 F 8293.634 210.433 25.0 Duncan NT Mean Square 30 Subset for alpha = 0.05 106.8017 Sig 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 108.2307 143.7960 100.86 145.45 195.7662 228.8571 190.36 236.67 128.0304 151.4563 123.22 156.44 106.2280 143.2020 108.54 157.09 101.2121 112.3913 100.35 115.38 110.6241 144.7026 102.67 149.56 127.0399 152.0429 100.35 236.67 9.8426 39.8941 12.79 51.21 20.7237 37.0096 14.86 37.75 -20.0269 -11.2231 -20.78 -10.21 -29.7439 -21.2927 -31.01 -20.83 -38.1338 -30.1096 -41.16 -30.05 -30.3696 -21.0003 -32.24 -19.95 -16.8147 1.0763 -41.16 51.21 1.000 360 138 One-way ANOVA: Chỉ số glucose (mg/dL) sau 40 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT N ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean 127.2833 239.7383 134.1117 97.9800 86.1333 114.2533 133.2500 26.0217 47.9017 -16.8954 -40.0017 -47.2583 -29.1910 -9.9039 Std Std Deviation Error 19.02274 7.76600 31.88544 13.01717 14.78037 6.03406 5.92899 2.42050 7.20092 2.93976 8.40811 3.43260 53.44668 8.90778 5.32634 2.17447 6.89303 2.81407 4.06114 1.65795 2.91337 1.18938 3.21613 1.31298 5.07565 2.07212 35.78118 5.96353 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 91205.611 8773.537 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT N 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound 107.3202 147.2465 99.38 145.35 206.2766 273.2000 189.19 269.36 118.6006 149.6227 119.67 159.37 91.7579 104.2021 87.44 103.19 78.5764 93.6902 78.32 97.37 105.4296 123.0771 104.81 124.81 115.1662 151.3338 78.32 269.36 20.4320 31.6113 17.78 31.89 40.6679 55.1355 41.52 58.07 -21.1573 -12.6335 -22.96 -11.38 -43.0591 -36.9443 -43.94 -37.36 -50.6335 -43.8832 -51.60 -43.55 -34.5176 -23.8644 -35.53 -21.21 -22.0105 2.2028 -51.60 58.07 df 62.373 000 99979.148 44125.400 684.850 35 30 8825.080 22.828 386.585 000 44810.250 35 Subset for alpha = 0.05 48.0 97.9800 11.0 ĐC1 127.2833 64.0 134.1117 ĐC2 6 11.0 64.0 ĐC1 ĐC2 Sig 114.2533 239.7383 110 N 48.0 97.9800 114.2533 240 Sig 18241.122 292.451 25.0 25.0 F 30 86.1333 Sig Duncan NT Mean Square -47.2583 066 1.000 Subset for alpha = 0.05 -40.0017 -29.1910 -16.8954 26.0217 47.9017 1.000 1.000 1.000 139 1.000 1.000 1.000 One-way ANOVA: Chỉ số glucose (mg/dL) sau 60 ngày điều trị, mức thay đổi (%) versus NT Descriptives NT ĐC1 ĐC2 64.0 SAU 48.0 25.0 11.0 Total ĐC1 ĐC2 64.0 MTD 48.0 25.0 11.0 Total ANOVA N 6 6 6 36 6 6 6 36 Mean Std Deviation Std Error 135.2400 245.3933 137.5383 110.8067 105.8983 117.0567 141.9889 34.1417 51.3683 -16.4667 -31.9700 -35.5800 -31.0571 -4.9273 7.44499 22.21793 9.00776 10.10081 6.63262 11.54849 49.70594 11.23968 5.01414 2.46635 2.76154 3.45068 11.68454 35.72214 3.03940 9.07043 3.67740 4.12364 2.70775 4.71465 8.28432 4.58858 2.04701 1.00689 1.12739 1.40873 4.77019 5.95369 SAU Between Groups Within Groups Sum of Squares 81925.854 4547.950 MTD Total Between Groups Within Groups Total Duncan NT df Sig .000 86473.803 43094.411 1568.082 35 30 8618.882 52.269 164.893 000 44662.494 35 48.0 110.8067 11.0 117.0567 ĐC1 135.2400 64.0 137.5383 ĐC2 245.3933 25.0 -35.5800 48.0 -31.9700 11.0 -31.0571 64.0 ĐC1 ĐC2 Sig .749 1.000 Subset for alpha = 0.05 -16.4667 34.1417 51.3683 315 145.58 268.69 147.68 124.15 115.57 132.43 268.69 56.66 57.36 -13.19 -27.43 -31.69 -22.56 57.36 F 108.083 N 126.34 213.81 123.19 98.87 98.93 98.19 98.19 26.05 44.49 -20.56 -35.01 -41.40 -54.15 -54.15 Mean Square 16385.171 151.598 25.0 148 Minim Maximum um 30 Subset for alpha = 0.05 105.8983 Sig Duncan NT N 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 127.4270 143.0530 222.0770 268.7096 128.0853 146.9914 100.2065 121.4068 98.9378 112.8588 104.9373 129.1761 125.1708 158.8070 22.3463 45.9370 46.1063 56.6304 -19.0549 -13.8784 -34.8681 -29.0719 -39.2013 -31.9587 -43.3193 -18.7949 -17.0139 7.1593 1.000 1.000 140 1.000 Hiệu ứng β-glucan chiếu xạ lên tăng trƣởng miễn dịch gà Lƣơng phƣợng One-way ANOVA: Tỷ lệ sống (%) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total ANOVA 3 3 15 61.1333 94.4333 94.4333 72.2333 66.7000 77.7867 Std Error Sum of Squares 2955.931 863.587 Between Groups Within Groups Total Duncan NT Std Deviation 5.55008 9.64175 9.64175 9.58401 11.10000 16.51734 3.20434 5.56667 5.56667 5.53333 6.40859 4.26476 df F 738.983 86.359 Minimum Maximum 55.60 83.30 83.30 66.70 55.60 55.60 66.70 100.00 100.00 83.30 77.80 100.00 Sig 8.557 003 14 Subset for alpha = 0.05 61.1333 ĐC 64 66.7000 49 72.2333 11 25 Sig Mean Square 10 3819.517 N 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 47.3462 74.9205 70.4819 118.3848 70.4819 118.3848 48.4253 96.0413 39.1261 94.2739 68.6397 86.9337 94.4333 94.4333 193 1.000 One-way ANOVA: Mức tăng trọng tuyệt đối (g/con/tuần) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total 3 3 15 16.2667 20.7000 20.5667 18.8000 17.7667 18.8200 Std Std Error Deviation 94516 54569 1.50997 87178 1.17189 67659 26458 15275 47258 27285 1.93324 49916 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 13.9188 18.6146 16.9490 24.4510 17.6555 23.4778 18.1428 19.4572 16.5927 18.9406 17.7494 19.8906 Minimum 15.20 19.10 19.70 18.60 17.40 15.20 ANOVA Sum of Squares 42.644 9.680 Between Groups Within Groups Total Duncan NT 52.324 N ĐC 16.2667 64 17.7667 49 25 11 Sig df Mean Square 10 10.661 968 F Sig 11.013 14 Subset for alpha = 0.05 17.7667 18.8000 18.8000 20.5667 20.5667 20.7000 091 227 053 141 871 001 Maximum 17.00 22.10 21.90 19.10 18.30 22.10 One-way ANOVA: Lượng thức ăn sử dụng (g/con/tuần) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total ANOVA 3 3 15 491.1333 479.0000 453.3000 480.4333 508.3333 482.4400 Std Error df Mean Square 10 7128.496 N 25 11 49 ĐC 3 3 64 Sig 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 467.7081 514.5585 411.5800 546.4200 434.3423 472.2577 440.7677 520.0990 500.8920 515.7747 469.9439 494.9361 5.44437 15.66940 4.40606 9.21888 1.72948 5.82625 Sum of Squares 4833.116 2295.380 Between Groups Within Groups Total Duncan NT Std Deviation 9.42992 27.14019 7.63151 15.96757 2.99555 22.56498 F 1208.279 229.538 Minimum 481.30 462.00 445.30 462.00 505.00 445.30 Maximum 500.10 510.30 460.50 490.00 510.80 510.80 Sig 5.264 015 14 Subset for alpha = 0.05 453.3000 479.0000 479.0000 480.4333 480.4333 491.1333 508.3333 062 051 One-way ANOVA: Hệ số tiêu tốn thức ăn (kg thức ăn/kg tăng trọng) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total 3 3 15 491.1333 479.0000 453.3000 480.4333 508.3333 482.4400 Std Deviation 9.42992 27.14019 7.63151 15.96757 2.99555 22.56498 Std Error 5.44437 15.66940 4.40606 9.21888 1.72948 5.82625 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 467.7081 514.5585 411.5800 546.4200 434.3423 472.2577 440.7677 520.0990 500.8920 515.7747 469.9439 494.9361 Minimum 481.30 462.00 445.30 462.00 505.00 445.30 ANOVA Sum of Squares 4833.116 2295.380 Between Groups Within Groups Total Duncan NT 7128.496 N 25 11 49 64 ĐC 3 3 Sig df Mean Square 10 1208.279 229.538 14 Subset for alpha = 0.05 3.1333 3.4333 3.7000 3.8000 275 3.7000 3.8000 4.8000 079 142 F 5.264 Sig .015 Maximum 500.10 510.30 460.50 490.00 510.80 510.80 One-way ANOVA: Thể trọng (g/con) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total 15 ANOVA 1012.6667 1259.6667 1255.6667 1152.3333 1096.0000 1155.2667 Between Groups Within Groups Total Duncan NT Std Deviation 17.78576 36.47373 9.81495 29.56913 11.53256 100.00248 Std Error 10.26861 21.05812 5.66667 17.07174 6.65833 25.82053 Sum of Squares 134506.267 5500.667 df 10 140006.933 N ĐC 64 49 25 11 3 3 Sig 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 968.4844 1056.8489 1169.0609 1350.2724 1231.2850 1280.0484 1078.8795 1225.7871 1067.3515 1124.6485 1099.8871 1210.6462 1012.6667 Mean Square 33626.567 550.067 F 61.132 Minimum 1000.00 1229.00 1250.00 1120.00 1083.00 1000.00 Maximum 1033.00 1300.00 1267.00 1178.00 1105.00 1300.00 Sig .000 14 Subset for alpha = 0.05 1096.0000 1152.3333 1255.6667 1259.6667 1.000 1.000 1.000 839 One-way ANOVA: Tỷ lệ móc hàm (%) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total 3 3 15 70.4000 75.0000 76.1000 71.4000 70.8000 72.7400 Std Deviation 4.80729 1.30767 1.21655 2.15174 4.08534 3.56106 Std Error 2.77549 75498 70238 1.24231 2.35867 91946 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 58.4580 82.3420 71.7516 78.2484 73.0779 79.1221 66.0548 76.7452 60.6515 80.9485 70.7680 74.7120 Minimum 64.90 74.10 75.30 69.20 66.10 64.90 ANOVA Sum of Squares 82.296 95.240 Between Groups Within Groups Total Duncan NT ĐC 64 49 11 25 Sig 177.536 N 3 3 df Mean Square 10 20.574 9.524 14 Subset for alpha = 0.05 70.4000 70.8000 71.4000 75.0000 76.1000 064 143 F 2.160 Sig .147 Maximum 73.80 76.50 77.50 73.50 73.50 77.50 One-way ANOVA: Tỷ lệ quầy thịt (%) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total ANOVA 3 3 15 50.6000 58.7333 60.2000 54.0000 52.5333 55.2133 Std Error 40415 77960 66583 90738 48074 1.01230 Sum of Squares 201.584 13.613 Between Groups Within Groups Total Duncan NT Std Deviation 70000 1.35031 1.15326 1.57162 83267 3.92062 df Mean Square 10 215.197 N 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 48.8611 52.3389 55.3790 62.0877 57.3352 63.0648 50.0959 57.9041 50.4649 54.6018 53.0422 57.3845 50.396 1.361 Maximum 49.80 57.40 59.10 52.90 51.60 49.80 51.10 60.10 61.40 55.80 53.20 61.40 Minimum Maximum Sig 37.020 000 14 ĐC Subset for alpha = 0.05 50.6000 64 52.5333 49 11 25 Sig F Minimum 52.5333 54.0000 58.7333 60.2000 070 155 155 One-way ANOVA: Tỷ lệ đùi (%) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total ANOVA 3 3 15 20.6667 25.3667 26.3333 21.7000 22.7667 23.3667 Std Error Sum of Squares 69.687 12.347 Between Groups Within Groups Total Duncan NT Std Deviation 90738 1.34288 1.33167 1.05830 80829 2.42065 82.033 N df Mean Square 10 17.422 1.235 14 Subset for alpha = 0.05 20.6667 ĐC 49 21.7000 64 22.7667 11 25 Sig .52387 77531 76884 61101 46667 62501 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 18.4126 22.9207 22.0308 28.7026 23.0253 29.6414 19.0710 24.3290 20.7588 24.7746 22.0262 24.7072 25.3667 26.3333 051 312 144 F 14.110 19.70 24.40 25.20 20.50 21.90 19.70 Sig .000 21.50 26.90 27.80 22.50 23.50 27.80 One-way ANOVA: Tỷ lệ ức (%) versus NT Descriptives NT N Mean ĐC 11 25 49 64 Total ANOVA 3 3 15 29.6000 31.7667 32.6333 31.3333 29.7333 31.0133 Sum of Squares 20.791 6.167 Between Groups Within Groups Total Duncan NT Std Std Error Deviation 43589 25166 40415 23333 66583 38442 1.27410 73560 81445 47022 1.38763 35829 26.957 N 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 28.5172 30.6828 30.7627 32.7706 30.9793 34.2874 28.1683 34.4984 27.7101 31.7565 30.2449 31.7818 df Mean Square 10 5.198 617 14 Subset for alpha = 0.05 29.6000 ĐC 64 49 31.3333 11 31.7667 25 Sig 29.7333 32.6333 839 081 145 F 8.429 Minimum 29.10 31.40 31.90 30.50 28.80 28.80 Sig .003 Maximum 29.90 32.20 33.20 32.80 30.30 33.20