Nghiên cứu hoá học và hoạt tính sinh học của một số cây thuốc dân tộc việt nam nhằm tạo sản phẩm thuốc có giá trị cao phục vụ cuộc sống

VHHCHCTN BKH&CN BKH&CN VHHCHCTN BKH&CN VHHCHCTN Bé khoa häc vµ công nghệ Báo cáo tổng kết nhiệm vụ Hợp tác quốc tế theo nghị định th việt nam-italia (2006-2008) Nghiên cứu hoá học hoạt tính sinh học số thuốc dân tộc Việt Nam nhằm tạo sản phẩm thuốc có giá trị cao phục vụ sống Cơ quan chủ trì: Viện Hoá học Hợp chất thiên nhiên Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Chủ nhiệm: TS Phan Văn Kiệm 7300 16/4/2009 Hà Nội - 2009 Mục lục Thông tin tóm tắt đề tài Danh sách cán tham gia Phần I Tổng quan tài liệu Phần II Phơng pháp nghiên cứu Phần III Thực nghiệm kết 3.1 Thu mẫu 3.2 Đánh giá sàng lọc hoạt tính sinh học 3.3 Phân lập hoạt chất 3.3.1 Các hoạt chất từ chổi (Baeckea frutescens) 3.3.2 Các hoạt chất từ mỡ Phú Thọ (Manglietia phuthoensis) 3.3.3 Các hoạt chất từ cúc gai Silybum marianum (L.) Gaertn 3.3.4 Các hoạt chất từ bạch thợc Paeonia lactiflora Pall (Paeoniaceae) 3.3.5 Các hoạt chất từ bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) 3.3.6 Các hoạt chất từ Ôrô nớc (Acanthus ilicifolius L.) 3.3.7 Các hoạt chất từ Hoàng liên ô rô Mahonia nepalensis DC (M Annamica Gagnep.) 3.3.8 Các hoạt chất từ mâm xôi (Rubus alceaefolius Poir.,) 3.3.9 Các hoạt chất từ bồ kết (Gleditschia australis Hemsl) Phần IV thảo luận kết 4.1 Thu mẫu đánh giá sàng lọc hoạt tính sinh học 4.2 Xác định cấu trúc hóa học đánh giá htsh hợp chất 4.2.1 Các hợp chất tách chiết từ chổi 4.2.2 Các hợp chất tách chiết từ mỡ phú thọ 4.2.3 Các hợp chất tách chiết từ cúc gai 4.2.4 Các hợp chất tách chiết từ bạch thợc 4.2.5 Các hợp chất tách chiết từ bách bệnh 4.2.6 Các hợp chất tách chiết từ ôrô nớc 4.2.7 Các hợp chất tách chiết từ hoàng liên ôrô 4.2.8 hợp chất tách chiết từ mâm xôi 4.2.9 Các hợp chất tách chiết từ bồ kết 4.3 Đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất Bảng tổng hợp hợp chất đ chiết tách 4.4 nghiên cứu tạo chế phẩm PG1 thử nghiệm 4.5 Nghiên cứu an toàn tác dụng chống viêm loét dày chế phẩm PG1 4.6 Nghiên quy trình sản xuất viên nang pg1 4.7 kết khác 4.8 Danh mục sản phẩm đề tài PHần V Kết luận Tài liƯu tham kh¶o Trang 27 35 35 51 57 57 62 69 75 78 83 86 88 93 96 96 97 97 139 178 212 248 273 290 306 339 361 372 381 388 402 411 415 416 420 Thông tin tóm tắt nhiệm vụ Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu hoá học hoạt tính sinh häc cđa mét sè c©y thc d©n téc ViƯt Nam nhằm tạo sản phẩm thuốc có giá trị cao phôc vô cuéc sèng Phytochemical and Biological studies of Vietnamese plants for the development of highvalue healthcare products M· sè: 18MH2 Thêi gian thùc hiƯn: Tõ th¸ng 4/2006 đến tháng 11/2008) Cơ quan thực hiện: Phía Việt Nam: Viện Hoá học Hợp chất thiên nhiên Địa chỉ: 18 Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội Điện thoại: 84-4-8363375 Fax: 84-4-7564390 Email: daoco@hn.vnn.vn Phía Italia: Trờng Đại học tổng hợp Pisa, Italia Địa chỉ: Khoa Sinh hoá Hữu Hoá Dợc, Trờng Đại học Pisa Via Bonanno, 33, I-56126 Pisa, Italy Tel: 0039-050-44074 Fax: 0039-050-43321 Email: biorg@farm.unipi.it Chủ nhiệm Đề tài: Phía Việt Nam: TS Phan Văn Kiệm Viện Hoá học Hợp chất thiên nhiên Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam PhÝa Italia: Dr ALESSANDRA BRACa Department of Bio-Organic Chemistry and Bio-pharmaceutics, Pisa University Mục tiêu đề tài: - Đánh giá đợc tiềm số thuốc dân tộc Việt Nam theo hớng hoạt tính chống oxi hoá, gây độc tế bào kháng sinh thông qua sàng lọc hoạt tính sinh học - Tìm kiếm đợc số hợp chất có hoạt tính sinh học cao theo mô hình nghiên cứu hoá học theo định h−íng ho¹t tÝnh sinh häc nh»m t¹o chÕ phÈm thc chữa bệnh phục vụ sống - Đào tạo cán lĩnh vực hoá hợp chất thiên nhiên Danh sách cán tham gia Học hàm STT Họ tên học vị Cơ quan Chuyên môn Châu Văn Minh GS TS Viện HCTN Lê Mai Hơng TS Viện HCTN Phan Văn Kiệm TS Vũ Mạnh Hùng TS Nguyễn Hoài Nam NCS Viện HCTN Ngun Xu©n C−êng CN ViƯn HCTN Ngun Thị Hồng Vân NCS Viện HCTN Nguyễn Hải Đăng Th.S Viện HCTN Vơng Văn Trờng ThS ĐH KHTN 10 Trần Hồng Hà CN Viện HCTN 11 Mai Ngọc Toàn Th.S Viện HCTN 14 Trần Hồng Quang ThS Viện HCTN 15 TrÇn Anh Tn ThS ViƯn HCTN 17 Ngun Tiến Đạt TS Viện HCTN 18 Mai Đình Trị NCS Viện HCTN 19 Trịnh Thị Điệp TS Viện Dợc Liệu 20 Trần Huy Thái TS Viện STTNSV 21 Phạm Hải Ỹn ThS ViƯn HCTN 22 Ngun H÷u Tïng ThS ViƯn HCTN 23 Nguyễn Xuân Nhiệm ThS Viện HCTN 24 Phạm Minh DiÖp CN ViÖn HCTN ViÖn HCTN Häc viÖn Quân Y Phần I Tổng quan tài liệu Trải suốt lịch sử nhân loại, thực vật, động vật vi sinh vật đất liền nh dới biển đà trở thành nguồn thiếu sản phẩm tự nhiên sử dụng làm thuốc Một phần quan trọng sản phẩm bắt nguồn từ đờng trao đổi thứ cấp có vai trò nh tác nhân bảo vệ chống lại đờng gây bệnh (nh côn trùng, nấm hay vi khuẩn) hay phân tử điều tiết phát triển (các hợp chất dạng hoocmôn kích thích hay kìm hÃm phân chia tế bào phát triển hình thái) Tác dụng chữa bệnh cỏ hợp chất tự nhiên có chúng định Do đó, nói tới nguồn tài nguyên thực vật làm thuốc phong phú đất nớc ta nói tới khả sinh tổng hợp, chuyển hóa tích lũy hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học nguồn gen thực vật Đà có thời, sản phẩm hóa dợc chiếm u thị trờng Còn thuốc, thuốc dân tộc có lúc đợc quan tâm gần nh không đợc coi trọng Tuy nhiên, sau nhiều năm sử dụng, số sản phẩm thuốc có nguồn gốc tổng hợp đà bộc lộ nhợc điểm nh gây tai biến tác dụng phụ có hại lâu dài sức khỏe ngời mà phải sau hàng chục năm phát Ngày nay, hợp chất có nguồn gốc thiên nhiên đợc dùng làm thuốc chữa bệnh đà đợc nhà khoa học nớc quan tâm tính độc khả dung nạp tốt chúng với thể sống Các hợp chất thiên nhiên từ thùc vËt cịng nh− c¸c sinh vËt kh¸c rÊt phong phú mặt cấu trúc hóa học thể nhiều hoạt tính đáng quan tâm nh: kháng sinh, kháng viêm, chống ôxy hóa, chống ung th, kìm hÃm HIV, điều hòa miễn dịch, chống sốt rét Đây nguồn nguyên liệu lý tởng để nghiên cứu, phát triển dợc phẩm, thuốc chữa bệnh hiểm nghèo, chất bảo quản thực phẩm Theo đánh giá cđa Tỉ chøc Y tÕ thÕ giíi (WHO) th× cã tíi 80% d©n sè thÕ giíi sư dơng c©y thc cho việc chăm sóc sức khỏe ban đầu Nhiều tài liệu đà cho rằng, 80-90% dân số vùng nông thôn nớc nghèo, nớc phát triển lấy cỏ nguồn thuốc chữa bệnh chủ yếu Theo dự đoán, dân số giới đạt 10 tỷ ng−êi vµo nưa ci thÕ kû 21 Víi sù gia tăng dân số khổng lồ, nhu cầu sử dụng hiệu phơng pháp chăm sóc sức khỏe cộng đồng ngày thách thức lớn nhân loại Cùng với cạn kiệt nhiên liệu tự nhiên nh than đá, dầu mỏ, việc sử dụng dợc phẩm tổng hợp gặp nhiều khó khăn Bên cạnh đó, việc phát sinh loại bệnh nh kháng thuốc nhân tố viêm nhiễm thách thức lớn cần giải Hớng phù hợp giải vấn đề có lẽ phát triển dợc phẩm míi cã ngn gèc thùc - ®éng vËt phơc vơ cho việc chăm sóc sức khỏe kéo dài tuổi thọ ngời Theo tài liệu thống kê nay, có tới 50% loại thuốc đà đợc sử dụng giới có nguồn gốc từ thực vật Rất nhiều biệt dợc nớc công nghiệp phải nhập nguyên liệu thực vật từ nớc nhiệt đới [5] Thảo dợc ngày đợc sử dụng chủ yếu dạng: Một hỗn hợp thành phần khác (hỗn hợp tinh dầu, dịch chiết, dịch cô, chng cất) hai hoạt chất đơn lẻ Các hoạt chất đơn lẻ đợc cho thành phần có hoạt tính thảo dợc, chúng thể hoạt tính cao, đặc hiệu, yêu cầu liều dùng cách sử dụng xác Ngợc lại, việc sử dụng dịch chiết, hỗn hợp thờng đợc áp dụng cho thảo dợc thể dợc tính thấp hoạt chất chủ yếu chúng cha đợc phát Nhiều hoạt chất từ cỏ đà đợc ứng dụng mặt hàng làm thuốc đợc quan tâm sản xuất nhiều nớc nh reserpin từ ba gạc (Rawolfia serpantina (L.) Benth ex Kurz.), vinblastin từ dừa cạn (Catharathus roseus (L.) D.Don.), quinidin, quinin tõ c©y canh ki na (Cinchona spp.), diosgenin từ củ mài (Dioscorea deltoidea Wall ex Kunth) Gần đây, nhiều hoạt chất sinh học có tác dụng chữa trị bệnh hiểm nghèo (chống ung th, chống HIV, tăng cờng hệ miễn dịch thể ) đà đợc phát từ cỏ nh taxol, 10-deacetyl baccatin từ loài thông đỏ (Taxus spp.), cepharanthin từ bình vôi hoa đầu (Stephania cepharantha Hayata), (+)-calanoid A (-)-calanoid B từ loài mù u (Calophyllum lanigerum Miq., C teysmanii Miq.), baicalin tõ c©y thuÉn baican (Scutellaria baicalensis Georgi), c¸c nhãm ent-labdan, diterpene glucoside, dehydroandrographolid succinic acid monoester dẫn xuất từ loài xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Wallich ex Nees), alternanthin, -spinasterol, βspinasterol tõ mét loµi chi rau rƯu (Alternanthera spp.), nhóm chất curcumin từ chi nghệ (Curcuma L.), hợp chất trichosanthin từ loài qua lâu (Trichosanthes kirilowii Maxim) nhiều hợp chất thiên nhiên khác có nhiều loµi thùc vËt [5] L·nh thỉ ViƯt Nam n»m vïng khÝ hËu nhiƯt ®íi giã mïa Cã tíi 3/4 diện tích nớc rừng núi trùng điệp, địa hình chia cắt nên điều kiện khí hậu đa dạng, có nhiều tiểu vùng khí hậu đặc trng Đất đai nớc thể tính chất nhiệt đới ẩm điển hình, phức tạp, đa dạng loại hình, phân bố chất lợng Những yếu tố tạo nên điều kiện sinh thái, thảm thực vật nhiệt đới rậm, ẩm, thờng xanh, tha, nửa rụng thảm thực vật mang tính cận nhiệt đới ë c¸c khu vùc nói cao Theo −íc tÝnh, Việt Nam có khoảng gần 13000 loài thực vật bậc cao có mạch (chiếm khoảng 5% tổng số loài thực vật bậc cao đà biết giới khoảng 25% số loài thực vật bậc cao đà biết châu á) có khoảng 4000 loài đợc sử dụng làm thuốc Đất nớc ta đà có lịch sử lâu đời sử dụng cỏ tự nhiên để chữa bệnh cho ngời Từ thời Văn Lang dựng nớc, cha ông ta đà biết dùng trầu, gừng rợu Đến thời kỳ An Dơng Vơng, ngời ta đà biết dùng tên tẩm độc săn bắn chiến đấu Trải qua thời kỳ 1000 năm Bắc thuộc, việc sư dơng thc cỉ trun Trung Qc ch÷a bƯnh ®· trë nªn phỉ biÕn ë n−íc ta Danh y Tuệ Tĩnh, ngời viết Nam dợc thần diệu Thập tam phơng gia giảm, đà liệt kê 580 thuốc 3932 thuốc dân tộc ông ngời đà khơi gợi ý tởng Dùng thuốc Việt để chữa cho ngời Việt Đến thời kỳ 1720-1791, Hải Thợng LÃn ông đà biên soạn Bách khoa th Y học cổ truyền Việt Nam Hải Thợng Y Tông Tâm Lĩnh Công trình ông đúc rót kinh nghiƯm, tri thøc vỊ sư dơng c©y cá để chữa bệnh chăm sóc sức khoẻ từ xa xa dân tộc ta Trải qua thời kỳ dài không đợc sử dụng rộng rÃi du nhập Tây dợc, ngày y học dân tộc đà tìm lại vị trí điều trị chăm sóc sức khoẻ ngời dân Đặc biệt, với hỗ trợ phơng pháp nghiên cứu mới, tiên tiến xu Quay với tự nhiên, y học cổ truyền đà đợc áp dụng rộng rÃi bênh cạnh y học đại [3-6] Đến nay, theo thống kê ban đầu, đà có 39813 thuốc phơng thuốc cổ truyền nớc ta Đây kho tàng tri thức vô giá cần đợc bảo tồn, khai thác ứng dụng đời sống, phục vụ cho công tác bảo vệ, chăm sãc søc kháe céng ®ång.Víi trun thèng sư dơng thc dân tộc từ lâu năm, Việt Nam đà thực việc nghiên cứu áp dụng y học cổ truyền vào hệ thống y học hiên đại từ năm 1950 Toàn quốc có 03 Viện nghiên cứu y học cổ trun, 45 bƯnh viƯn y häc d©n téc, 242 bƯnh viện có sử dụng thuốc dân tộc điều trị bệnh khoảng 30.000 thầy thuốc hành nghề y học cổ truyền khắp nơi Những nghiên cứu gần cho thấy hầu hết công ty dợc phẩm sử dụng nguồn nguyên liệu tự nhiên để sản xuất thuốc có khoảng 60% ngời dân đợc hỏi cho biết họ lựa chọn thuốc dân tộc nh lựa chọn hàng đầu phòng chữa bệnh [36] Việt Nam, với lợi nguồn tài nguyên thực vật phong phú, với 4000 loài thực vật đợc sử dụng y học cổ truyền thu hút đợc quan tâm nhà khoa học nớc giới Do đó, việc điều tra nghiên cứu hoá học hoạt tính sinh học loài thuốc có giá trị cao nhằm đặt sở khoa học cho việc phát triển dợc phẩm sử dụng chúng cách hợp lý, có hiệu có tầm quan trọng đặc biệt Thông qua chơng trình Dự án này, đà sàng lọc hoạt tính sinh học theo hớng kháng sinh, chống ôxi hóa độc tế bào 102 loài thực vật Việt Nam Kết đà lựa chọn đợc loài có triển vọng hoạt tính sinh học nguồn dợc liệu để tiến hành nghiên cứu hóa học theo hoạt tính sinh học, chổi (Baeckea frutescens), mỡ Phú Thọ (Manglietia phuthoensis), cóc gai (Silybum marianum), « r« n−íc Acanthus ilicifolius, bạch thợc (Paeonia lactiflora), mẫu đơn (Paeonia suffruticosa), mâm xôi (Rubus alceaefolius) hoàng liên ô rô (Mahonia nepalensis) Dới số nghiên cứu tổng quan nghiên cứu đà đợc tiến hành giới thuốc đà đợc lựa chọn Cây chổi (Baeckea frutescens) Chỉi x (Baeckea frutescens L.) lµ mét loµi nhỏ thuộc họ Sim (Myrtaceae) Cây thờng mọc thành bụi, cao khoảng 0,5-2m, thân mềm, phân cành nhiều, phân nhánh từ gốc, có vỏ màu nâu, mùi thơm Lá mọc đối, hình sợi hẹp, cuống, nhẵn bóng, phiến có tuyến mờ nâu, có gân Hoa nhỏ, màu trắng, mọc riêng lẻ kẽ lá, bắc nhỏ, rụng sớm; nụ hoa hình chóp ngợc; ống đài chia 4-5 thuỳ hình tam giác nhọn đầu; cánh hoa tròn, rời nhau; nhị - 10 có nhị ngắn; bầu dới, ô, nhiều noÃn Quả nang, mở theo đờng nứt ngang, hạt có cạnh Mùa hoa vào tháng 4-6 [3],[6] Cây chổi - Baeckea frutescens L Phân bố sinh thái Các đại diện chi Baeckea L thấy phân bố vùng nhiệt đới châu châu Đại Dơng Cây chổi phân bố rải rác số nơi thuộc Campuchia, Thái Lan, ấn Độ, đảo Hải Nam Trung Quốc phân bố rộng rÃi vùng đồng bằng, trung du Bắc Trung Việt Nam Chổi loại a sáng, chịu hạn tốt, thờng mọc đồi đất khô cằn Nguồn chổi Việt Nam nhìn chung dồi [3],[6] Công dụng Lá cho vào chum đựng đậu xanh để trừ mối, mọt để vào tủ quần áo để trừ nhậy cắn Chổi có vị đắng, tính hàn, có tác dụng kh ứ, thống, thông lâm lợi tiểu sát khuẩn Chổi đợc dùng để chữa đau bụng, cảm sốt nhức đầu, sổ mũi, thấp khớp, vàng da, sởi Cũng đợc dùng để chữa chảy máu cam, lở ngứa máu Hoa chổi chữa kinh nguyệt không đều, ăn uống khó tiêu Phụ nữ sau đẻ uống nớc sắc chổi để ăn ngon cơm, chóng đói Nớc sắc đặc chổi dùng để ngâm rửa chữa nấm lở ngứa kẽ chân Tinh dầu đợc chế biến thành dầu xoa, rợu chổi dùng xoa bóp chữa tê thấp, cảm cúm Trung Quốc, chổi đợc ủ rợu để chữa sốt rét Tuy nhiên chổi không đợc sử dụng cho phụ nữ có thai [3],[6] Các nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học Các phận chổi chứa tinh dầu nhiều Theo Đỗ Tất Lợi, toàn chổi thu hái Quảng Bình, Bắc Cạn Thái Nguyên có hàm lợng tinh dầu tơi 0,5-0,7%, khô từ 1-3% Tinh dầu chổi có màu vàng nhạt, mùi thơm dễ chịu Thành phần tinh dầu chổi Đông Triều gồm 15% cineol, 35% +α-thuyen, vµ α-pinen, 4% linonen, 14% ylangen Ngoài tinh dầu chổi chứa -terpineol, linalool, humulen, fenchol, baeckeol, borneol, artranscarveol, myrtenal, d-carvone, α-copane, ocidentalol guaiazulence, blemol, nerol, thymol, calamenene -cardinol [3] Một số công trình nghiên cứu nớc đà thông báo thành phần hoá học chổi xuể, chủ yếu hợp chất thuộc lớp flavonoid O O O O O O O O O O O OH O BF 4, C30H32O6 [7] O OH O O OH BF [7] BF 5, C30H32O6 [7] OH O O OH O HO O O OH (−)-Clovanediol [8] 2,5-Dihydroxy-7-methoxy-2,6-dimethyl4-chromanone [10] BF [11] OH HO O O OH O O O OH O H3CO O O O OH O OH OH 2,3-Dihydro-5,7-dihydroxy-8-[1-(2-hydroxy-4methoxy-3,3,5-trimethyl-6-oxo-1,4cyclohexadien-1-yl)-2-methylpropyl]-6methyl-2-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one [9] O (+)-8,8a-Dihydro-8a-hydroxy-7methoxy-3,3,6,8,8-pentamethyl-1,2benzodioxin-5(3H)-one [9] O OH 2,5-Dihydroxy-7-methoxy-2,8-dimethyl4-chromanone [10] O H3CO OH O O OH O O O OH 2,5-Dihydroxy-2-isopropyl-7-methoxy-8methyl-4-chromanone [10] OH 2,5-Dihydroxy-2-isopropyl-7-methoxy6-methyl-4-chromanone [10] O OH O 5-Hydroxy-2-isopropyl-7-methoxy-4H1-benzopyran-4-one [10] Công thức phân tử: C13H14O4 O O O O O 5-Hydroxy-2-isopropyl-7-methoxy-6methylchromone [10] O 5-Hydroxy-2-isopropyl-7-methoxy-8methylchromone [10] 6,7-Epoxy-2,9-humuladiene [8] OH OH O OH O O HO OH O O OH OH OH O OH O HO O HO OH HO O OH O OH HO O OH 6-C-β-D-Glucopyranosyl-5,7-dihydroxy-2- OH 6-C-β-D-Glucopyranosyl-5,7-dihydroxy- OH OH isopropylchromone [12] 2-isopropylchromone; trihydroxybenzoyl) [12] OH HO OH OH HO O O OH 2'-O-(3,4,5O 8-C-β-D-Glucopyranosyl-5,7-dihydroxy2-isopropylchromone [12] H3CO O OH O O O HO O 6--D-Glucopyranosyl-5,7dihydroxy-2-methylchromone [12] Công thức phân tö: C16H18O9 O BF [11] 5-(2-Hydroxy-2methylpropylidene)-3methoxy-2,4,4-trimethyl-2cyclopenten-1-one [9] OH OH O 2,5-Dihydroxy-2-isopropyl-7methoxy-4-chromanone [10] Theo Hwang cộng sự, dịch chiết MeOH cđa chỉi x cã t¸c dơng kh¸ng vi khn Streptococcus mutans [13] C©y mì Phó Thä (Manglietia phuthoensis) [3, 4, 6] Mì Phó Thä (manglietia phuthoensis), thc hä Mộc Lan (Ngọc Lan, Dạ Hợp), đại mộc không lông, vỏ nâu xám, có cuống dài 2cm, phiến xoan thuôn ngợc, to 17x6 cm, đầu tà đáy nhọn, không lông, màu nâu; hai mặt gần nh màu hay mặt nâu đen, gân phụ 13-15 cặp, mịn Hoa to ë chãt nh¸nh, c¸nh hoa cao 4.5cm, tiĨu nhơy nhiỊu, nhơy c¸i cao 2cm Manh nang xoan cao 2cm, đơm thành khối cao 10cm, cứng Mùa hoa tháng 4-5, mùa tháng 7-9 Cây mỡ Phú Thọ -manglietia phuthoensis Phân bố, sinh thái Cây mỡ Phú Thọ (manglietia phuthoensis Dandy ex Gagnep) thuéc hä Méc Lan (Ngäc Lan, D¹ hợp) Magnoliaceae nh số loài khác thuộc chi Magnolia (Manglietia), loài có hoa lâu đời giới, sống suốt thời đại khủng long Phân bố nhiều nơi nh châu á, châu Âu, Bắc Mỹ Tại Việt Nam gồm khoảng loài, chủ yếu gỗ mọc dải dác rừng nguyên sinh thứ sinh, tâp trung Lào Cai, Yên Bái, Tuyên Quang, Phú Thọ, Hà Tây, Vĩnh Phúc Với nhiều tên gọi: Giổi, Vàng Tâm, Mỡ Theo Phạm Hoàng Hộ họ Mộc Lan có khoảng 13 chi, 218 loài, đa số có xanh quanh năm chủ yếu trồng ôn đới bán cầu Bắc, phổ biến Hoa Kỳ Manglietia cho hoa đẹp, thơm có màu sắc thay đổi tùy loài từ màu trắng đến hồng, đỏ, đỏ đậm từ vàng nhạt, vàng chanh đến vàng tơi Nhiều đợc trồng làm hoa cảnh tiếng nh M grandiflora hoa lớn, màu trắng thơm M coco loại bụi, cánh hoa lúc non xanh sau thành trắng, hoa thơm, nở quanh năm M sieboloii nguồn gốc từ Nhật, hoa màu trắng, mùi hơng ngào, đợc a chuộng tiểu bang Tây Bắc-Hoa Kỳ M denudata trồng sân chùa Trung Hoa, cánh hoa màu vàng xanh nở, sau nhạt dần chuyển sang màu trắng, biểu tợng cho tinh khiết M acuminata, M stellata đẹp, hoa thơm ngào, đợc a chuộng mỹ Mộc Lan đợc trồng để lấy bóng mát, gỗ đợc dùng để đóng canô lớn đồ đạc nội thất Hoa đợc cất lấy để chế tạo nớc hoa Nụ hoa đợc sắc lên, pha uống nh loại thuốc bổ Ngời Trung Quốc sử dụng hoa mộc Lan để trị viêm xoang làm thông mũi Dợc lý học ứng dụng y học cổ truyền Manglietia Các hoạt chất vỏ M officinalis tinh dầu alkaloid Thành phần tinh dầu (1%) (thuộc loại hợp chất phonoloc): Magnolol (0.03%), allylmagnolol, Machiolol, Tetrahydro-magnolol, isomagnolol Honokiol Còn Alkaloids: Magnocurarine (0.07%), Maghoflorine Tubocurarine Các hoạt chất nụ hoa M liliflora M biondii tinh dầu có Eugenol, Safrole.cineol, alpha-pinene, chavicol methyl- pinoresnol dimethylether, citrol Anethol Riêng M Biondii có fargesin M liliflora có flavonoids glycosides Trong M grandiflora có sesquiterpenoid phức tạp nh magnograndiolide M.obavata có alkaloid loại apomorphine có hoạt tính kháng tiểu cầu nh− N-acetylanonaine, N-acetylxylopine, N-formyl anonaine, Liriodenine vµ Lanuginosine Theo Đỗ Tất Lợi giổi (M Talauma gioi Chev), thành phần hạt chứa chủ yếu safrol, metyl eugenol, camphor Còn tinh dầu trích từ vỏ chứa 15.7% camphor;14.3% safrol, 15.6% -caryophyllen 13.7% elemicin Các ứng dụng dợc học Manglietia tây y ã Tác dụng kháng sinh : Nghiên cứu Đại Học Y Khoa Kaohsung, Đài Loan ghi nhận hoạt tính kháng sinh Honokiol Magnolol, nồng độ tối thiểu ức chế (MIC = 25 àg /ml) chống lại vi khuÈn Actinobacillus actilomycetem conco- mitans, porphiromonas gingivanis, prevoter intermedia, micrococccus luteus Bacillus subtilis, nhng tác dụng kháng sinh (Mic 100 g/ml) sihgella flexneii, p.vulagaris, e.coli C¸c thÝ nghiƯm cho thÊy honokiol magnonol không mạnh tetra cycline, nhng tác dụng diệt trùng rõ rệt với vi khuẩn gây bệnh nhac hu ã Tác dụng bảo vệ bắp thịt tim honokiol: Honokiol đợc cho có tiềm lực mạnh -tocopheron đến 1000 lần việc ức chế lipid peroxidation nơi ty thể chuột Nghiên cứu khoa gây mê, bệnh viện taipei vetarans general hospital, taiwan chuột đà gây mê urethane, cho thÊy honokiol ë nhiỊu liỊu thư nghiƯm kh¸c cã khả bảo vệ bắp thịt tim chống lại tổn thơng nghẽn mạch loại trừ đợc rối loạn nhịp nơi tâm thất có nghẽn tim ã Hoạt tính chống nấm Magnolol Honokiol: Magnolol Honokiol hai hợp chất loại neolignan có hoạt tính chống số nấm gây bệnh n¬i ng−êi nh− Trichophiton mentagrophtes, Microsporiun gypseun, Epidermophiton phloccosum, Aspergillus niger, Criptococcus neoformans Candida alpicans nồng độ ức chế tối thiểu MIC khoảng 25-100 g/ml Tác dụng tạo apoptosis nơi trơn hệ tim mạch: Magnol đợc nghiên cứu tác dụng tiến trình tạo chơng trình cho tế bào tự huỷ nơi tế bào trơn hệ tim mạch (vascular smooth muscle cells = VSMCs) chuột: Magnonol làm gia tăng hoạt tính caspase-3 caspase-9 đồng thời giảm tiềm lực ti thể Nồng độ tế bào B-cell leukemia/lymphoma-2 (Bcl-2) sụt giảm tơng ứng với nồng độ Magnonol sử dụng Kết luận ghi nhận Magnonol tạo tiến trình apotosis nơi VSMs qua L« dïng PG1 møcliỊu ² (3) L« dïng PG1 møcliÒu ²I (4) 12 11 (11) (16) (9) 36 ↓ 60,44% 12 12 (12) (14) (6) 32 ↓ 64,84% p2-1< 0,05; p3-1< 0,05; p4-1< 0,05 p3-2>0,05; p4-2>0,05; p4-3>0,05 p 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 Chứng 36 PG1 (I) Biểu đồ 4.5.2.2.e Kết tổng điểm loét dày tính theo thang điểm Shay J.P (1954) *Nhận xét: - So với lô chứng, lô uèng cimetidin, PG1 møc liÒu I, PG1 møc liÒu II giảm tổng điểm loét dày có ý nghĩa thống kê với p0,05, p 42 >0,05) - Sự giảm tổng điểm loét dày tăng tăng liều PG1 nhng cỡ mẫu nhỏ nên khác biệt ý nghĩa thống kê (p4-3>0,05) 4.5.2.3 BàN LUậN a Bàn luận mô hình nghiên cứu Mô hình tác giả Shay J.P (1954) cộng mô hình kinh điển hàng đầu cần tiến hành nghiên cứu tác dụng bảo vệ dày, chống loét thuốc Đây mô hình đợc hầu hết tác giả giới sử dụng để nghiên cứu thuốc chống loét dày Việt Nam nhiều công trình nghiên cứu thuốc đông y có tác dụng chống viêm loét dày đà thành công với mô hình nh: Lại Quang Long với nghiên cứu Cao cẩm, năm 2002-2003; Nguyễn Xuân Trờng với nghiên cứu nghệ vàng, năm 2003; Cao Tiến Hỷ với nghiên cứu Cốm đơn số 12, năm 2003 Khi bị thắt môn vị, tạo tình trạng ứ trệ việc vận chuyển thức ăn từ dày xuống ruột, đồng thời tạo tình trạng tăng tiết acid HCl dày Tình trạng tơng tự nh bệnh lý hẹp môn vị nhanh chóng tạo loét dày cách chăc chắn Vì vậy, mô hình đáp ứng tính chuẩn xác, khoa học để nghiên cứu sàng lọc thuốc chống loét dày Bên cạnh phơng pháp có số phơng pháp khác nh bơm cồn tuyệt đối, sử dụng thuốc hoá chất gây lt nh− Aspirin, Indomethacin, Histamin, Dglucosamin Nh−ng ®iỊu kiƯn thí nghiệm cấp tính việc sử dụng mô hình gây loét cách thắt môn vị chuột cống trắng cho ta đủ điều kiện thuận lợi để nghiên cứu tác dụng chống viêm loét dày sát với lâm sàng sau b Bàn luận hợp chất PG1 Qua nghiên cứu thấy hợp chất PG1 có tác dụng chống viêm loét dày tá tràng Mặt khác chất đợc chiết xuất tinh từ thảo dợc, đợc định lợng cách khoa học có hàm lợng cao, đạt TCCS nguyên liệu chế phẩm dới dạng uống theo dợc điển Vì hợp chất có triển vọng tạo chế phẩm có hiệu 128 chữa bệnh viêm loét dày tá tràng, gây tác dụng không mong muốn Kết nghiên cứu phù hợp với kết nghiên cứu số tác giả giới nghiên cứu hiệu -eudesmol điều trị bệnh viêm loét dày, nh nghiên cứu Naika Y (2003), Resch M (1998)[186], [187], Các nghiên cứu tác giả -eudesmol có tác dụng thúc đẩy trình sản sinh dịch nhầy niêm mạc dày Theo thông báo Nakai cộng sự, rễ Thơng truật có tác dụng trì hoÃn trình tạo cặn dày, polyaxetylen đóng góp chủ yếu cho hoạt động [186] Resch cộng (1998) nghiên cứu tác dụng chống viêm hợp chất Thơng truật cho thấy hợp chất phenol chiết xuất từ Thơng truật có hiệu kìm hÃm enzym 5-LOX (5-lipooxygenase) COX-1 (Cyclooxygenase-1) [187] Các kết cho thấy dịch chiết từ Thơng truật vừa làm tăng yếu tố bảo vệ dày, vừa làm giảm yếu tố công gây viêm loét dày Nghiên cứu cho thấy tác dụng bảo vệ dày PG1 làm tăng yếu tố bảo vệ, giảm yếu tố công Cụ thể kết nghiên cứu cho thấy hai lô chuột PG1 giảm nồng độ acid tự acid toàn phần, chứng tỏ hợp chất đà làm giảm yếu tố công gây viêm loét dày Mặt khác, trình làm thí nghiệm thấy rằng: mở dày chuột đà đợc uống PG1 trớc thắt môn vị có màng mỏng bao phủ niêm mạc da dày Đây chế làm tăng yếu tố bảo vệ chế cụ thể nh mong sau đợc nghiên cứu sâu hơn, cụ thể để đa kết luận xác 4.5.2.4 KếT LUậN Từ kết thực nghiệm thu đợc, sơ kết luận: Trong điều kiện thí nghiệm, đà kiểm chứng mô hình Shay gây đợc loét dày chuột cống trắng cách chắn, sử dụng mô hình để thử tác dụng chống viêm loét dày thuốc Sử dụng mô hình Shay J.P (1954) nghiên cứu tác dụng chống viêm loét dày PG1, kết cho thấy: a Trong điều kiện thí nghiệm, so với lô chứng hợp chất PG1 với hai mức liều 0,2mg/100g TLCT 0,4mg/100g TLCT đà có tác dụng: - Làm giảm thể tích dịch dày đợc lần lợt là: 31,01%, 34,49% (p