Đánh giá về hiệu quả do nhiệm vụ mang lại: a. Hiệu quả về khoa học công nghệ: - Xác định được các đặc điểm cấu trúc và siêu cấu trúc ống sinh tinh của các bệnh nhân không có tinh trùng trong tinh dịch (azoospermia) bao gồm cảazoospermia do tắc và không do tắc. - Xác định được qui trình phân lập các tếbào gốc sinh tinh từ ống sinh tinh và các tếbào dòng tinh từmào tinh. - Xác định sự biến đổi của các tế bào dòng tinh trong môi trường nuôi cấy. - Xác định khảnăng thụtinh của tinh trùng và tinh tửtrưởng thành sau nuôi cấy và hiệu quả của việc nuôi cấy các tế bào dòng tinh trong điều trịvô sinh. - Trên cơsở đó đềxuất các biện pháp điều trị. Kết quảnuôi cấy các tếbào dòng tinh không chỉ được áp dụng trong điều trịcho các bệnh nhân azoospermia mà còn được áp dụng cho các bệnh nhân sau điều trịhóa chất, tia xạ, áp dụng trong quá trình bảo vệcác loài vật quí hiếm. b. Hiệu quảvềkinh tếxã hội: - Người được hưởng lợi trực tiếp là các cặp vợchồng vô sinh, đặc biệt là các bệnh nhân azoospermia không do tắc. Qua đó đềtài có đóng góp hết sức to lớn vềmặt nhân văn và kinh tếxã hội cho Việt Nam. - Mởra hướng điều trịmới cho các bệnh nhân không có tinh trùng, đặc biệt là các bệnh nhân a
BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BỘ QUỐC PHÒNG ĐỀ TÀI ĐỘC LẬP CẤP NHÀ NƯỚC BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU QUI TRÌNH NUÔI CẤY, BIỆT HÓA TẾ BÀO GỐC SINH TINH ĐỂ ĐIỀU TRỊ VÔ SINH NAM GIỚI MÃ SỐ: ĐTĐL2009T/27 Cơ quan chủ trì đề tài: Học viện Quân y - Bộ Quốc phòng Chủ nhiệm đề tài: PGS. TS. Nguyễn Đình Tảo 8999 HÀ NỘI - 2011 1 BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP NHÀ NƯỚC I. THÔNG TIN CHUNG 1. Tên và mã số đề tài: - Nghiên cứu qui trình nuôi cấy, biệt hoá tế bào gốc sinh tinh để điều trị vô sinh nam giới. - Mã số: ĐTĐL2009T/27 - Thời gian thực hiện: tháng 1/2009 đến tháng 12 /2011 2. Cơ quan chủ trì đề tài: Học viện Quân y - Bộ Quốc phòng 104 đường Phùng Hưng – Phúc La – Hà Đông – Hà Nội Điện thoại: 069.566100/069.566101 Cơ quan phối hợp: Trung tâm Y học sinh sản và Nam học - Đại học Munster – CHLB Đức, Bệnh việ n Phụ sản Trung ương. 3. Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS. Nguyễn Đình Tảo Địa chỉ : Trung tâm Công nghệ phôi – Học viện Quân y Điện thoại: 33 545 034 Nhà riêng: 3 8536029 Mobile: 0912217808 2 Fax: 33 545 034 E-mail: ndtao@yahoo.com 4. Thư ký khoa học: TS. Trịnh Thế Sơn Địa chỉ : Trung tâm Công nghệ phôi – Học viện Quân y Điện thoại : NR: 04.33541653 Di động: 0902150873 E-mail: hangsontrinhthe@yahoo.co.in II. TÌNH HÌNH THỰC HIỆN 1. Thời gian thực hiện nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng đã ký kết: 36 tháng từ tháng 1/2009 đến tháng 12 /2011 - Thực tế thực hiện từ: 1/2009 đến tháng 12 /2011 2. Kinh phí và sử dụng kinh phí: a. Tổng kinh phí thực hiện: 4.417,273 triệu đồng - Kinh phí hỗ trợ từ SNKH: 4.170 triệu đồng - Kinh phí từ nguồn tự có của tổ chức: 112 triệu đồng - Kinh phí từ nguồn khác: 135,273 triệu đồng b. Tình hình cấp và sử d ụng kinh phí từ nguồn NSKH Theo kế hoạch Thực tế đạt được Thời gian (Tháng, năm) Kinh phí (Triệu đồng) Thời gian (Tháng, năm Kinh phí (Triệu đồng) Ghi chú (Số đề nghị quyết toán) 2009-2011 4417,273 2009-2011 4417,273 4417,273 3 c. Kết quả sử dụng kinh phí theo các khoản chi: Theo kế hoạch Thực tế đạt được Số TT Nội dung khoản chi Tổng SNKH Nguồn khác Tổng SNKH Nguồn khác 1 Trả công lao động (khoa học, phổ thông) 1.507 1.455 52 1.508 1.455 53 2 Nguyên,vật liệu, năng lượng 1.560 1.500 60 1.562 1.500 62 3 Thiết bị, máy móc 750 750 0 744,920 744,920 0 4 Xây dựng, sửa chữa nhỏ 0 0 0 0 0 5 Chi khác 600,273 465 135,273 603,274 465 138,274 Tổng cộng 4417,273 4.170 247,273 4418,194 4.164,92 253,274 4 3. Các văn bản chính trong quá trình thực hiện đề tài: Số TT Số, thời gian ban hành văn bản Tên văn bản 1 QĐ số 1412/QĐ-BKH CN ngày 09 tháng 7 năm 2008 Quyết định về việc phê duyệt tổ chức và cá nhân chủ trì đề tài, dự án sản xuất thử nghiệm đốc lập cấp nhà nước thực hiện trong kế hoạch năm 2009 2 Hợp đồng số 12/2009/HĐ-ĐT ĐL ngày 17/2/2009 Hợp đồng nghiên cứu khoa học và phát triển công nghệ. 4. Tổ chức phối hợp thực hiện đề tài: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo thuyết minh Tên tổ chức đã tham gia thực hiện Nội dụng tham gia chủ yếu Sản phẩn chủ yếu đạt được Ghi chú 1 Bệnh viện Phụ sản Trung ương Điện thoại:+84- 4-8254638,+84- 4- 9346207 Fax:+84-4- 8254638,+84-4- 9346742 Địa chỉ: 43 Bệnh viện Phụ sản Trung ương Điện thoại:+84- 4-8254638,+84- 4- 9346207 Fax:+84-4- 8254638,+84-4- 9346742 Địa chỉ: 43 Tràng -Tư vấn về đề cương nghiên cứu - Viết báo cáo chuyên đề - Đề cương nghiên cứu được thông qua - Đạt và được nghiệm thu 5 Tràng Thi - Hà Nội - Việt Nam Thi - Hà Nội - Việt Nam 2 GS.TS. Stefan Schlatt, Đại học Munster, CHLB Đức. - Đào tạo cán bộ - Đánh giá một số chỉ tiêu tế bào gốc sinh tinh Đào tạo 01 cán bộ. Nắm được kỹ thuật chuyên môn về nuôi cấy tế bào gốc 5. Cá nhân tham gia thực hiện nhiệm vụ: a. Thành viên chính 1 PGS.TS. Nguyễn Đình Tảo Chủ nhiệm đề tài 2 TS. Trịnh Thế Sơn Thư ký đề tài 3 PGS.TS. Quản Hoàng Lâm Trung tâm CNP – Học viện Quân y 4 PGS.TS. Nguyễn Viết Tiến Bệnh viện Phụ sản TW 5 TS. Lê Thị Hường Cục Phòng chống HIV/AIDS, Bộ YT 6 TS. Nguyễn Viết Trung Khoa sản – BV 103 7 TS. Nguyễn Thanh Tùng Trung tâm CNP – Học viện Quân y 8 ThS. Trịnh Quốc Thành Trung tâm CNP – Học viện Quân y 9 ThS. Dương Đình Hiếu Trung tâm CNP – Học viện Quân y 10 TS. Trần Hồng Sơn Trung tâm CNP – Học viện Quân y 11 ThS. Đoàn Thị Hằng Trung tâm CNP – Học viện Quân y 6 b. Cán bộ tham gia 1 Nguyễn Thị Thục Anh Trung tâm CNP – Học viện Quân y 2 Lê Thị Thanh Huyền Trung tâm CNP – Học viện Quân y 3 Nguyễn Minh Lượng Trung tâm CNP – Học viện Quân y 4 Chu Thanh Tú Trung tâm CNP – Học viện Quân y 5 Nguyễn Thị Hà Trung tâm CNP – Học viện Quân y 6 Phạm Văn Đạt Trung tâm CNP – Học viện Quân y 7 Hà Thị Dung Trung tâm CNP – Học viện Quân y 8 Lê Hải Yến Trung tâm CNP – Học viện Quân y 9 Nguyễn Thị Thu Trang Trung tâm CNP – Học viện Quân y 10 Phùng Thị Thu Hiền Trung tâm CNP – Học viện Quân y 6. Tình hình hợp tác quốc tế: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia) Thực tế đạt được (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia) A Đoàn ra 1 Năm 2009 Nội dung: Nghiên cứu phân lập và nuôi cấy các TB gốc sinh tinh Năm 2009 Nội dung: Nghiên cứu phân lập và nuôi cấy các tế bào gốc sinh tinh 7 Thời gian: 02 tháng Kinh phí: theo thuyết minh Tên tổ chức tiếp nhận: Đại học Seoul, Hàn Quốc Tên cán bộ Việt Nam: ThS. Dương Đình Hiếu Thời gian: 02 tháng Kinh phí: theo thuyết minh Tên tổ chức tiếp nhận: Đại học Seoul, Hàn Quốc Tên cán bộ Việt Nam: ThS. Dương Đình Hiếu 2 Năm 2010 Nội dung: Nghiên cứu nuôi cấy, đánh giá và xác định các tế bào gốc sinh tinh và các phương pháp thu mẫu mô tinh hoàn. Thời gian: 02 tháng Kinh phí: theo thuyết minh Tên tổ chức tiếp nhận: GS.TS. Stefan Schlatt, Đại học Munster, CHLB Đức. Tên cán bộ Việt Nam: TS. Trịnh Thế Sơn. Năm 2010 Nội dung: Nghiên cứu nuôi cấy, đánh giá và xác định các tế bào gốc sinh tinh và các phương pháp thu mẫu mô tinh hoàn. Thời gian: 02 tháng Kinh phí: theo thuyết minh Tên tổ chứ c tiếp nhận: GS.TS. Stefan Schlatt, Đại học Munster, CHLB Đức. Tên cán bộ Việt Nam: TS. Trịnh Thế Sơn. 3. Năm 2010 Nội dung: Bảo quản mô tinh hoàn và các tế bào gốc sinh tinh. Thời gian: 8 ngày Năm 2010 Nội dung: Bảo quản mô tinh hoàn và các tế bào gốc sinh tinh. Thời gian: 8 ngày 8 Kinh phí: theo thuyết minh Tên tổ chức tiếp nhận: GS.TS. Stefan Schlatt, Đại học Munster, CHLB Đức. Tên cán bộ Việt Nam: PGS.TS. Vũ Huy Nùng, PGS.TS. Nguyễn Đình Tảo, TS. Nguyễn Viết Trung. Kinh phí: theo thuyết minh Tên tổ chức tiếp nhận: GS.TS. Stefan Schlatt, Đại học Munster, CHLB Đức. Tên cán bộ Việt Nam: PGS.TS. Vũ Huy Nùng, PGS.TS. Nguyễn Đình Tảo, TS. Nguyễn Viết Trung. B Đoàn vào Năm 2011 Nội dung: Chuyển giao kỹ thuật phân lập, nuôi cấy, bảo quản mô tinh hoàn và các tế bào gốc sinh tinh. Thời gian: 8 ngày Kinh phí: Nguồn khác Tên cán bộ nước ngoài: GS.TS. Stefan Schlatt, Đại học Munster, CHLB Đức. 9 7. Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Số TT Theo kế hoạch Thực tế Đạt được 1 Nội dung: Hội thảo khoa học tổng kết kết quả thực hiện nhiệm vụ Thời gian: 10/2011 Địa điểm: Trung tâm Công nghệ phôi – Học viện Quân y Thành viên: các cán bộ khoa học tham gia đề tài và những người quan tâm. Nội dung: Hội thảo khoa học tổng kết kết quả thực hiện nhiệm vụ Thời gian: 10/10/2011 Địa điểm: Phòng họp, Trung tâm Công nghệ phôi – Học viện Quân y Thành viên: Ch ủ trì hội thảo PGS.TS. Nguyễn Đình Tảo cùng các cán bộ khoa học tham gia đề tài và những người quan tâm. 8. Tóm tắt các nội dung, công việc chủ yếu: (Nêu tại mục 15 của thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát trong nước và ngoài nước) Thời gian Số TT Các nội dung, công việc chủ yếu cần được thực hiện (Các mốc đánh giá chủ yếu) Theo kế hoạch Thực tế đạt được Cá nhân, tổ chức thực hiện 1 Xây dựng đề cương nghiên cứu chi tiết 8/2008 - 10/2008 8/2008 - 10/2008 PGS.TS. Nguyễn Đình Tảo, PGS.TS Quản [...]... gom, phân lập tế bào gốc sinh tinh từ ống sinh tinh, 2 Qui trình thu gom, phân lập các tế bào dòng tinh từ mào tinh, 3 Qui trình nuôi cấy, biệt hóa tế bào gốc sinh tinh từ ống sinh tinh, 4 Qui trình nuôi cấy, biệt hóa các tế bào dòng tinh từ mào tinh, 5 Tiêu chuẩn đánh giá tế bào gốc sinh tinh và các tế bào dòng tinh sau nuôi cấy, 6 Qui trình bảo quản các tế bào gốc sinh tinh 30 CHƯƠNG II TỔNG QUAN TÀI... vô sinh do không có tinh trùng, 2 Xây dựng qui trình bảo quản, nuôi cấy và biệt hoá tế bào gốc sinh tinh từ ống sinh tinh và các tế bào dòng tinh từ mào tinh thành tinh trùng, 3 Xây dựng tiêu chuẩn đánh giá tế bào gốc sinh tinh và tinh trùng được biệt hoá từ tế bào gốc sinh tinh Mục tiêu cụ thể là xây dựng các qui trình và tiêu chí đánh giá tế bào như sau: 1 Qui trình thu gom, phân lập tế bào gốc sinh. .. ống sinh tinh 2 Qui trình: Thu gom, phân lập tế bào dòng tinh từ mào Đủ về số 01 01 lượng tinh 3 Đủ về số Qui trình: Nuôi cấy, biệt hóa tế bào gốc sinh tinh từ 01 01 lượng ống sinh tinh Qui trình: Nuôi cấy, biệt 4 hóa tế bào dòng tinh từ mào Đủ về số 01 01 lượng tinh 5 Tiêu chuẩn đánh giá tế bào gốc sinh tinh và tinh trùng Đủ về số 01 01 lượng sau nuôi cấy 6 Qui trình: Qui trình bảo quản các tế bào gốc. .. Quá trình sinh tinh Quá trình sinh tinh trải qua 3 giai đoạn sau: + Sinh tinh bào: là quá trình tinh nguyên bào phân chia, tạo ra tinh bào + Giảm phân: sản xuất ra các tế bào tiền tinh trùng hay còn gọi là tinh tử + Tạo tinh trùng: là quá trình biệt hoá tiền tinh trùng thành tinh trùng 2.1.4 Các tế bào gốc sinh tinh Tế bào gốc (stem cell) là quần thể các tế bào có khả năng tự phân chia và tự đổi mới vô. .. mào tinh 105 4.2 Nghiên cứu về phân lập tế bào gốc sinh tinh từ ống sinh tinh 107 4.3 Kết quả nghiên cứu nuôi cấy tế bào dòng tinh 111 4.3.1 Đặc điểm bệnh nhân 111 4.3.2 Đặc điểm cấu trúc ống sinh tinh của các bệnh nhân azoospermia 111 4.3.3 Biến đổi số lượng tế bào dòng tinh từ mào tinh trong quá trình nuôi cấy 112 4.3.4 Biến đổi số lượng các tế bào gốc sinh tinh từ ống sinh tinh. .. Về quá trình phân lập tế bào gốc sinh tinh 163 5.3 Nuôi cấy các tế bào dòng tinh thu được từ mào tinh 164 5.4 Nuôi cấy các tế bào gốc sinh tinh 165 5.5 Vai trò của tế bào Sertoli trong nuôi cấy 166 5.6 Phương pháp nuôi cấy 166 5.7 Ý nghĩa của phương pháp nuôi cấy 167 5.8 Đặc điểm bệnh nhân nghiên cứu bảo quản tế bào gốc sinh tinh 168 5.9 Thể tích tinh hoàn... chủ yếu 1 Tinh trùng được nuôi cấy, Đơn vị đo Số lượng Theo kế Thực tế hoạch đạt được Mẫu 50 50 50 Mẫu 50 50 50 biệt hoá từ tế bào gốc có nguồn gốc từ ống sinh tinh 2 Tinh trùng được nuôi cấy, biệt hoá từ tế bào dòng tinh có nguồn gốc từ mào tinh 13 b Sản phẩm dạng II: Yêu cầu khoa học cần đạt Số TT Tên sản phẩm Thực tế đạt hoạch 1 Theo kế được Qui trình: Thu gom, phân lập tế bào gốc sinh tinh từ Ghi... hóa tế bào gốc sinh tinh 41 2.3 Về tiêu chuẩn đánh giá tế bào gốc sinh tinh trong quá trình nuôi cấy 57 2.4 Về bảo quản tế bào dòng tinh 73 CHƯƠNG III ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 85 3.1 Đối tượng nghiên cứu: 85 3.2 Phương pháp nghiên cứu 86 3.3 Trang bị, hóa chất 102 CHƯƠNG IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 105 4.1 Nghiên cứu về phân lập tế bào dòng tinh. .. quá trình phân lập, nuôi cấy và bảo quản tế bào gốc sinh tinh, mở ra triển vọng cho những bệnh nhân không có tinh trùng trong tinh dịch có thể có cơ hội có 29 những đứa con của chính mình Xuất phát từ thực tế trên, chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu đề tài với 3 mục tiêu như sau: 1 Xây dựng qui trình phân lập tế bào gốc sinh tinh từ ống sinh tinh và các tế bào dòng tinh từ mào tinh ở bệnh nhân nam giới. .. nhu cầu điều trị vô sinh, trong số đó vô sinh nam chiếm một tỷ lệ rất lớn Có rất nhiều nguyên nhân dẫn đến vô sinh nam Trong đó, vô sinh do không có tinh trùng trong tinh dịch (azoospermia) là một nguyên nhân vô sinh nam trầm trọng và khó điều trị nhất Theo các thống kê cho thấy gần 20% các cặp vợ chồng ở Mỹ vô sinh, gần 25% các cặp vô sinh bị thiểu năng tinh trùng Khoảng 2% các cặp vợ chồng vô sinh có . Thực tế đạt được 1 Tinh trùng được nuôi cấy, biệt hoá từ tế bào gốc có nguồn gốc từ ống sinh tinh. Mẫu 50 50 50 2 Tinh trùng được nuôi cấy, biệt hoá từ tế bào dòng tinh có nguồn gốc từ. TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU QUI TRÌNH NUÔI CẤY, BIỆT HÓA TẾ BÀO GỐC SINH TINH ĐỂ ĐIỀU TRỊ VÔ SINH NAM GIỚI MÃ SỐ: ĐTĐL2009T/27 Cơ quan chủ trì đề. THÔNG TIN CHUNG 1. Tên và mã số đề tài: - Nghiên cứu qui trình nuôi cấy, biệt hoá tế bào gốc sinh tinh để điều trị vô sinh nam giới. - Mã số: ĐTĐL2009T/27 - Thời gian thực hiện: tháng 1/2009