Báo cáo thực hành mô hình dược lý kháng viêm giảm đau men gan

4 ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA Y HỌC CỔ TRUYỀN BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔ HÌNH DƯỢC LÝ KHÁNG VIÊM GIẢM ĐAU MEN GAN HỌC VIÊN NGÔ KHẮC TRUNG LỚP BÁC SĨ CHUYÊN KHOA I YHCT 2021 2023 Tp Hồ Chí Minh[.]

ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA Y HỌC CỔ TRUYỀN  BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔ HÌNH DƯỢC LÝ KHÁNG VIÊM-GIẢM ĐAUMEN GAN HỌC VIÊN: NGƠ KHẮC TRUNG LỚP: BÁC SĨ CHUYÊN KHOA I YHCT 2021 -2023 Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA Y HỌC CỔ TRUYỀN  BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔ HÌNH DƯỢC LÝ KHÁNG VIÊM-GIẢM ĐAUMEN GAN HỌC VIÊN: NGƠ KHẮC TRUNG LỚP: BÁC SĨ CHUYÊN KHOA I YHCT 2021 -2023 Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Bộ môn Bào chế Đông dược, khoa Y học cổ truyền Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện giúp đỡ tơi thời gian thực hành môn Tôi xin chân thành cảm ơn bạn bè, đồng nghiệp lớp Chuyên khoa I Y học cổ truyền khóa 2021 – 2023 ln khuyến khích, chia sẻ kinh nghiệm, giúp tơi hồn thành báo cáo thu hoạch 4 MỤC LỤC 1.1.1 CHƯƠNG 1.TỔNG QUAN CHƯƠNG 2.PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nấu cao 2.2 Tiêu chuẩn cao 2.3 Giới thiệu mơ hình 2.4 Cách tiến hành CHƯƠNG 3.KẾT QUẢ Cao thuốc Tác dụng giảm đau Tác dụng kháng viêm Tác dụng men gan CHƯƠNG 4.BÀN LUẬN CHƯƠNG TÀI LIỆU THAM KHẢO CHƯƠNG 1.TỔNG QUAN ĐẶC ĐIỂM DƯỢC LIỆU Tên: HÀ THỦ Ô ĐỎ Tên gọi khác: Dạ giao đằng, má ỏn, mằn ón (Tày), khua lình (Thái), x ú sí (Dao) Tên khoa học:  Fallopia multiflora  (Thunb.) hoặc Polygonum multiflorum (Thunb.) Họ: Rau răm (Polygonaceae) BỘ PHẬN DÙNG Rễ củ phơi hay sấy khô Hà thủ ô đỏ [Fallopia multiflora (Thunb.) – Polygonaceae] Dược liệu dễ nhầm lẫn: Củ nâu: Phiến Hà thủ ô giả thường dày khoảng 1-3mm, màu nâu h ồng hay nâu tím, hình trịn hay bầu dục, thường cong queo, l ớp b ề h sần sùi hay có xơ gai nhỏ bị cắt ngang hay dọc, cứng, khó b ẻ, v ị r ất chát, se lưỡi.  Củ nâu có tác dụng nhiệt, sát trùng, c ầm máu, ho ạt huyết, cầm tiêu chảy Tuy nhiên, hoạt ch ất Tanin có nhi ều c ủ nâu gây táo bón, dùng lâu ngày gây tích t ụ ch ất độc c th ể h ại gan, thận, dân gian thường dùng nhuộm vải không làm thu ốc  Hà thủ trắng: là loại dây mọc bị leo, người ta l thân thái m ỏng dùng thay cho Hà thủ ô đỏ Hà thủ ô trắng th ơm nh ẹ, v ị đ ắng chát, nhi ều nhựa trắng thân lá, khơng có tác dụng bồi bổ thể nh Hà thủ ô đỏ  MÔ TẢ CÂY Dây leo thân quấn, sống lâu năm Thân m ềm, nh ẵn, m ọc xo ắn vào R ễ phình thành củ, màu nâu đỏ, củ ngun có hình gi ống c ủ khoai lang Lá mọc so le, hình mũi tên, gốc hình tim, đầu thn nh ọn Hoa họp thành chùy nách hay ngọn, có nhiều nhánh Quả góc nhẵn bóng nằm bao hoa mà m ảnh ngồi cịn l ại phát tri ển thành cánh rộng PHÂN BỐ Cây mọc hoang hầu hết tỉnh miền núi từ Nghệ An trở ra, có nhi ều Lai Châu, Sơn La, Lào Cai, Hà Giang, m ột s ố t ỉnh khác nh Cao B ằng, L ạng S ơn, Hồ Bình có số lượng Hiện nay, Hà thủ đ ược tr ồng nhi ều n vùng phía Bắc (Vĩnh Phúc) phía Nam, mọc tốt Lâm Đ ồng, Đ ắc L ắc, Phú Yên, Bình Định THU HOẠCH, SƠ CHẾ Rễ củ, thu hái vào mùa thu, đào rửa đất, b ỏ r ễ C ủ nh ỏ, đ ể nguyên, củ to bổ đôi bổ tư, phơi hay sấy khơ Hà thủ đỏ chế biến sau: Rễ củ rửa sạch, ngâm n ước vo gạo 24 giờ, rửa nước lại lần Cho dược li ệu vào n ồi, r ồi cho n ước Đ ậu đen đến ngập với tỷ lệ kg dược liệu 100g Đ ậu đen lít n ước N ấu đ ến gần cạn, đảo ln cho thuốc chín Khi rễ củ m ềm, l bỏ lõi N ếu cịn nước Đậu đen tẩm phơi cho hết Đồ phơi nh v ậy đ ược chín l ần t ốt (c ửu chưng, cửu sái) Khi dùng thái lát bào thành phi ến m ỏng 7 THÀNH PHẦN HĨA HỌC Hà thủ đỏ chứa 1,7% Antraglucosid có Crysophanol, Emodin, Rhein, 1,1% Protid, 42,2% tinh bột, 3,1% lipid, 4,5% ch ất vô c (K, Ca, Mn, Ni, Cr), 26,4% chất tan nước… TÁC DỤNG DƯỢC LÝ Lý luận của Y học cổ truyền cho thận tàng tinh, ch ủ v ề vi ệc sinh đ ẻ Nếu thận tinh sung túc sinh trưởng phát d ục c c th ể di ễn thu ận lợi, lực tính dục khôi phục nâng cao nên r ất d ễ sinh S ự già y ếu người qui trình suy giảm th ận tinh quy ết đ ịnh Vì v ậy vi ệc s dụng Hà thủ lâu dài để bổ ích thận tinh, b ền tinh khí có l ợi cho vi ệc sinh kéo dài tuổi thọ Bên cạnh đó, râu tóc có quan hệ mật thiết với tạng th ận, th ận tàng ch ứa tinh, tinh sinh huyết Tóc phần thừa huyết th ận h y ếu tóc khơng nuôi dưỡng đầy đủ nên sớm bạc d ễ r ụng Ng ược l ại n ếu th ận tinh sung túc râu tóc dày khỏe đen bóng Hà th ủ có tác d ụng b ồi b ổ can th ận, b ổ huyết giữ tinh, hồ khí huyết, sử dụng thường xun Hà th ủ làm râu tóc dày khỏe đen bóng Kết nghiên cứu dược lý đại chứng minh Hà th ủ có tác d ụng ều chỉnh rối loạn lipid máu, giúp ngăn ng ừa tình tr ạng x v ữa đ ộng m ạch, b ảo v ệ t ế bào gan, thúc đẩy trình sản sinh hồng cầu, nâng cao kh ả mi ễn d ịch, c ải thiện hoạt động hệ thống nội tiết, đặc biệt tuyến thượng thận giáp tr ạng Ngoài ra, Hà thủ cịn có tác dụng kháng khu ẩn, nâng cao kh ả ch ống rét thể, nhuận tràng giải độc CÔNG DỤNG Trong sống Chữa râu tóc bạc sớm, tóc khơ rụng: Dùng hà th ủ ô ch ế n ấu u ống h ằng ngày thay trà tán thành bột ngày dùng 10-20 gr Dùng dạng thuốc mỡ chữa số bệnh da 8 Hà thủ sống tươi khơ dùng ph ối h ợp v ới H khô th ảo, Kim ngân hoa, có tác dụng thơng tiểu, giải độc, tiêu ung thũng Hà thủ chế có tác dụng bổ gan thận, ích tinh huyết, dùng làm thu ốc an th ần, b ổ tăng lực Phối hợp với Sinh địa, Bạch thược, Cúc hoa đ ể h ồi ph ục s ức kh ỏe cho người già sau bị bệnh, phối hợp với Đương quy, Ngưu tất, Kỷ tử, Thỏ ty tử chữa đau mỏi chân tay, di tinh, hay có th ể ph ối h ợp v ới Nhân sâm, Đ ương quy, Trần bì để chữa sốt rét lâu ngày, khí huyết suy nhược Trong đơng y Tính vị, quy kinh: Rễ củ Hà thủ đỏ có vị đắng chát, ngọt, tính ấm Quy kinh Can thận Công năng: bổ gan, thận, bổ máu, ích tinh tủy, hịa khí huy ết, m ạnh gân x ương, nhuận tràng Chủ trị: Rễ Hà thủ có tác dụng bổ máu, chữa thận suy, gan yếu, th ần kinh suy nh ược, ngủ kém, sốt rét kinh niên, thiếu máu, đau l ưng m ỏi g ối, di m ộng tinh, khí h ư, đ ại tiểu tiện máu, khơ khát táo bón, da m ẩn ng ứa khơng có m ủ U ống lâu làm đen râu tóc người tóc bạc sớm, làm tóc đỡ khơ đỡ rụng Cách dùng, liều lượng:  Ngày dùng 10 – 20g Người có huyết áp th ấp đường huy ết th ấp khơng nên dùng Hà thủ đỏ Khi uống nên kiêng ăn hành, t ỏi, cải củ Các thuốc đơng y 1.Chữa tóc rụng bạc sớm, hồi hộp, chóng mặt, ù tai, hoa m ắt, đau m ỏi lưng khớp, táo bón: Hà thủ chế, sinh địa, huyền sâm, vị 20g S ắc uống 2.Thuốc bổ cho người già yếu, thần kinh suy nhược, tiêu hóa kém:  Hà thủ ô đỏ 10g, Đại táo 5g, Thanh bì 2g, Trần bì 3g, Sinh kh ương 3g, Cam th ảo 2g, nước 600ml Sắc 200ml, chia – lần uống ngày 3.Chữa xơ cứng mạch máu người già, tăng huyết áp, nam gi ới ch ậm có con: Hà thủ đỏ 20g, Tang ký sinh, Kỷ tử, Ngưu tất 16g Sắc u ống Trong y học đại Ở Ấn Độ, rễ Hà thủ ô đỏ dùng làm thuốc bổ, chống bệnh scorbut làm đen tóc Nó cịn có tác dụng bệnh tăng đường máu M ột chế ph ẩm c Hà th ủ ô đỏ dùng cho phụ nữ sau đẻ Rễ Hà thủ ô đỏ dùng y học cổ truyền Trung Qu ốc Nh ật B ản đ ể ều trị viêm da mủ, bệnh lậu, bệnh nấm favut chân, bệnh viêm tăng lipid máu Dựa công dụng quý Hà th ủ ô đ ỏ mang l ại, Công ty c ổ ph ần dược phẩm OPC tiến hành bào chế thành công ch ế ph ẩm Viên Hà th ủ ô EXTRACAP, dạng viên nang cứng đại tiện dụng mà cịn gi ữ an tồn hiệu dược liệu TIÊU CHUẨN Đạt tiêu chuẩn theo Dược điển Việt Nam IV Mơ tả Rễ củ trịn, hình thoi, khơng đều, củ nh ỏ để ngun, c ủ to b ổ đôi theo chi ều dọc, hay chặt thành miếng to Mặt ngồi có nh ững ch ỗ l ồi lõm n ếp nhăn ăn sâu tạo thành Mặt cắt ngang có lớp b ần mỏng màu nâu s ẫm, mô m ềm vỏ màu đỏ hồng, có nhiều bột, có lõi gỗ Vị chát Bột Mùi nhẹ, màu nâu hồng, vị chát Soi kính hi ển vi th ấy: Nhi ều h ạt tinh b ột đơn kép đôi, kép ba, nằm riêng lẻ k ết thành kh ối, đ ường kính mm đến 25 mm, rốn hình hay phân nhánh Rải rác có mảnh mạch điểm Tinh thể Calci oxalat hình c ầu gai, đ ường kính 20 mm đến 50 mm Mảnh bần gồm tế bào hình đa giác thành dày có màu đ ỏ nâu Mảnh mơ mềm có tế bào thành mỏng chứa tinh b ột S ợi nh ỏ dài có vách dày với nhiều ống trao đổi 10 Định tính Thể phép thử định tính Hà thủ đỏ Độ ẩm Khơng q 13,0% Tro tồn phần Khơng q 9,0% Tro khơng tan acíd  Khơng q 2,0% 11 CHƯƠNG 2.PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nấu cao Cân 250g hà thủ ô chế ngâm với nước tỉ lệ 1/10 đun sôi 60 phút cao Tiếp tục lấy hà thủ ô pha với nước tỉ lệ 1/5 đun sôi 45 phút cao Lấy cao tổng gồm cao cao trực tiếp sau cách thủy (khi cạn nước) thu cao đặc X (có độ ẩm < 20%) Cân khối lượng cao đặc thu Tính hiệu suất chiết xuất HS = m cao đặc−độ ẩm cao x 100 % m dược liệu−độ ẩmdược liệu Trong đó: HS (%): Hiệu suất chiết xuất m (gam): Khối lượng 2.2 Tiêu chuẩn 2.2.1 Độ ẩm Dụng cụ, thiết bị: Cân sấy ẩm Mettler Toledo HB 43 Cách tiến hành Lấy mẫu cao cho vào đĩa cân đo độ ẩm theo quy trình hướng dẫn sử dụng cân sấy ẩm Ghi lại độ ẩm mẫu cao hình LCD máy Tiến hành với mẫu cao Độ ẩm cao X trung bình mẫu cao Độ ẩm trung bình: ω TB (%)= Trong đó: ω1 +ω 2+ ω3  (%): Độ ẩm mẫu cao 12 ω TB (%): Độ ẩm trung bình cao Ta có độ ẩm: Lần 1: 12.77% Lần 2: 10.49% Lần 3: 10.04% Vậy độ ẩm trung bình cao là: 11.1% 2.2.2.2 Định tính a) Định tính Flavonoid Cho 5g hà thủ vào cốc có mỏ, thêm 30ml cồn 96%, thu hỗn hợp A Đun cách thủy hỗn hợp A phút, lắc nhẹ Cho vào ống nghiệm ống 2ml hỗn hợp A Cho thuốc thử vào ống nghiệm theo thứ tự sau: Ống 1: 2ml dịch lọc + giọt FeCl3 Ống 2: 2ml dịch lọc + giọt PbCl2 Ống 3: 2ml dịch lọc + giọt NaOH 20% Quan sát ghi nhận kết 13 Kết luận: Xuất kết tủa xanh đen cho FeCl3 kết tủa trắng đục cho PbCl2, màu đỏ cam cho NaOH Chứng tỏ dịch lọc B có chứa Flavonoid cho phản ứng với muối kim loại nặng kiềm b) Định tính Saponin Cho 5g hà thủ vào cốc có mỏ, thêm 30ml cồn 70 độ hỗn hợp X Đun cách thủy phút hỗn hợp X Lọc qua giấy lọc thu dịch lọc Cô cắn dịch lọc 2ml Cho them 10ml nước cất vào ống nghiệm, lắc ống nghiệm tạo bọt Quan sát ghi nhận kết sau 15 phút Kết luận: Bọt tạo bền vững sau 10 phút quan sát, chứng tỏ có Saponin cao chiết nước Hà thủ c) Định tính Alkaloid Cho 5g cao hà thủ ơ(X) vào cốc có mỏ, thêm 30ml cồn có chứa 5% acid thu hỗn hợp X2 Đun cách thủy phút hỗn hợp lọc dịch dịch B Lấy dịch B cắn cộng 10ml nước nóng lọc dịch thu dịch C Cho vào ống nghiệm ống 2ml hỗn hợp dịch chiết C Cho thuốc thử vào ống nghiệm theo thứ tự sau: Ống 1: 2ml dịch lọc + giọt Bouchardat Ống 2: 2ml dịch lọc + giọt Volmayer Ống 3: 2ml dịch lọc + giọt Dragendorff 14 Quan sát ghi nhận kết Kết luận: Ống thêm Bouchardat vào làm đổi màu dịch lọc thành màu nâu đỏ; Ống thêm Valse-Mayer vào làm đổi màu dịch lọc thành cam; Ống thêm Dragendroff vào cho không kết tủa chứng tỏ Alkaloid cao d) Định tính Tanin Cho 5g dược liệu vào 20ml nước đun phút dịch lọc A(lọc qua giấy lọc) Cho vào ống nghiệm ống 2ml hỗn hợp dịch chiết A Cho thuốc thử vào ống nghiệm theo thứ tự sau: Ống 1: 2ml dịch lọc + giọt FeCl3 Ống 2: 2ml dịch lọc + giọt PbCl2 Quan sát ghi nhận kết 15 Kết luận: Xuất kết tủa đen cho FeCl kết tủa trắng (lượng ít, khó quan sát hình) cho PbCl2 Chứng tỏ dịch lọc A có chứa Tanin cho phản ứng với muối kim loại nặng 2.3 Kết mơ hình giảm đau – chống viêm – men gan 2.3.1Tình trạng sức khỏe chuột thời gian thí nghiệm Tiến hành nuôi chuột nhắt trắng khỏe mạnh, chia làm lô, nuôi thức ăn chuyên dụng cho uống thuốc ngày 16 Sau ngày 1, lơ (chuột chuột 6) thí nghiệm cho uống paracetamol cao thuốc hà thủ ô chết Nguyên nhân tử vong trình thực thí nghiệm pha sai hàm lượng paracetamol cho lô uống Các lô 1,2,4 chuột sống khỏe suốt q trình thí nghiệm 2.3.2Đánh giá tác dụng giảm đau Bảng 1: Thời gian chịu đau chuột mâm nhiệt Chuột Thời gian chịu đau (giây) Trung bình (giây) 76.7 Lơ 59.1 41.5 42.4 Lô 49.2 56.0 26.7 Lô 29.8 Lô 32.9 5,6 Chết Nhận xét: thời gian chịu đau lô (lô hà thủ ô) ngắn nhất, với trung bình 29.8 giây, lô (lô chứng) 59.1 giây lô (lô paracaetamol) 49.2 giây Sự khác biệt lơ khơng có ý nghĩa thống kê cỡ mẫu nghiên cứu nhỏ ảnh hưởng khả chịu đau khác cá thể chuột 2.3.3Đánh giá tác dụng chống viêm Bảng 2: Kết đo thể tích chân chuột bình thường sau gây viêm Carrageenan 1% Lô V0 V2 V Trung bình 0.28 0.51 0.23 0.795 0.12 1.56 1.36 17 0.15 1.49 1.34 Lô 1.04 Lô 0.24 0.98 5,6 0.74 Chết 0.16 1.12 0.96 Lô 0.92 0.18 1.06 0.88 Nhận xét: Sau 2h tiêm Carrageenan 1%, thể tích chân chuột nhóm phù lên nhiều nhóm nhiều nhóm chứng Chứng minh tác dụng chống viêm Hà thủ ô paracetamol 2.3.4Đánh giá ảnh hưởng đến men gan Bảng 3: Kết men AST lô chuột AST (U/l) Lô 0.4099 Lô 3.4272 Lô 0.9890 Lô Chết Nhận xét: men AST nhóm tăng nhiều nhất, gấp gần lần nhóm gấp 8.36 lần nhóm chứng Điều chứng tỏ paracetamol ảnh hưởng đến men gan nhiều cao thuốc hà thủ ô Tuy vậy, cao thuốc hà thủ ô làm tăng men gan gấp đôi so với nhóm chứng, chứng tỏ hà thủ gây độc tính gan 18 CHƯƠNG KẾT LUẬN Trong dược liệu khô hà thủ ô cao thuốc hà thủ ô chứa hoạt chất: saponin, tannin flavonoid, không chứa alkaloid Chiết xuất 250g dược liệu khô thu 28,26 g cao đặc hà thủ ô (độ ẩm cao 11,1%) Hiệu suất chiết suất cao 11% Chưa có kết rõ rệt cho tác dụng giảm đau cao thuốc Tác dụng chống viêm hà thủ paracetamol Hà thủ có độc tính nhẹ với gan, độc tính thấp nhiều lần so với paracetamol 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO Đỗ Huy Bích (2012), “ Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, NXB Khoa học kỹ thuật, Tp.HCM, pp 438- 439 Đỗ Trung Đàm (2014), “Phương pháp xác định độc tính thuốc”, NXB Y học, Hà Nội Đỗ Tất Lợi (2004), “ Những thuốc vị thuốc Việt Nam”, NXB Y học, pp 98 http://tracuuduoclieu.vn