Khảo sát độc tính cấp và nghiên cứu tác dụng giảm béo, giảm lipid máu của cao khô cần tây (apium graveolens l ) trên chuột nhắt trắng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ VÕ LÊ MAI PHƯƠNG KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH CẤP VÀ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG GIẢM BÉO, GIẢM LIPID MÁU CỦA CAO KHÔ CẦN TÂY (Apium graveolens L.) TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Cần Thơ – 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ VÕ LÊ MAI PHƯƠNG KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH CẤP VÀ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG GIẢM BÉO, GIẢM LIPID MÁU CỦA CAO KHÔ CẦN TÂY (Apium graveolens L.) TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG Chuyên ngành: Dược lý Dược lâm sàng Mã số: 8720205 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Người hướng dẫn khoa học TS.DS MAI HUỲNH NHƯ Cần Thơ – 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực, khách quan chưa công bố nơi Tác giả luận văn Võ Lê Mai Phương LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cám ơn Ban Giám hiệu, phòng Đào tạo Sau đại học, khoa Dược, LBM.Dược lý-Dược lâm sàng Trường đại học Y Dược Cần Thơ Chân thành cảm ơn tất thầy cô dạy dỗ suốt trình học tập trường Cảm ơn quý thầy đóng góp cho tơi kinh nghiệm nghiên cứu q giá để tơi hồn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới người thầy TS.DS Mai Huỳnh Như, cảm ơn cô trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ, dạy cho nhiều kiến thức quý báu, tận tâm dìu dắt tơi bước hồn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Trung Kiên người thầy định hướng nghiên cứu phù hợp cho từ giai đoạn làm đề cương giúp tơi hồn thành trọn vẹn nghiên cứu Tơi chân thành cảm ơn TS.DS Nguyễn Thị Linh Tuyền LBM.Bào chếCông nghiệp dược hỗ trợ bào chế cao thuốc, cảm ơn cô động viên cổ vũ tơi vượt qua khó khăn q trình thực nghiệm Tơi xin cảm ơn Ban giám đốc, phịng Kế hoạch tổng hợp, phịng Cơng nghệ thơng tin, cảm ơn ThS.BS Trần Thị Thu Thảo ThS.BS Nguyễn Văn Luân tạo điều kiện tốt giúp đỡ tơi q trình lấy mẫu phân tích mẫu Bệnh viện Trường đại học Y Dược Cần Thơ Xin cảm ơn tập thể Phòng khám Thú y Trương Dung Pet, Bác sĩ thú y Trương Thị Thùy Dung hỗ trợ giai đoạn dịch Covid-19 diễn biến phức tạp Tôi xin cảm ơn cha mẹ, anh chị em, bạn bè lo lắng động viên Cuối xin dành tình cảm trân trọng cảm ơn chồng tơi người vất vả sớm hơm tơi, tơi có thành cơng ngày hơm Học viên Võ Lê Mai Phương MỤC LỤC Trang Lời cam đoan Lời cảm ơn Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục ảnh, hình vẽ, đồ thị MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương cao khô Cần tây (Apium graveolens L.) 1.2 Tổng quan chuột nhắt trắng 1.3 Phương pháp đánh giá độc tính cấp 1.4 Các mơ hình gây béo phì chuột thực nghiệm 13 1.5 Tình hình nghiên cứu dược liệu Cần tây 15 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 18 2.2 Phương pháp nghiên cứu 21 2.3 Đạo đức nghiên cứu 32 Chương 3: KẾT QUẢ 33 3.1 Kết khảo sát độc tính cấp cao khô Cần tây 33 3.2 Kết xây dựng mơ hình chuột béo phì đánh giá tác dụng giảm béo, giảm lipid máu cao khô Cần tây 37 Chương 4: BÀN LUẬN 49 4.1 Độc tính cấp cao khơ Cần tây chuột nhắt trắng 49 4.2 Kết xây dựng mơ hình chuột béo phì thực nghiệm đánh giá tác dụng giảm béo, giảm lipid máu cao khô Cần tây 55 KẾT LUẬN 65 KIẾN NGHỊ 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Từ nguyên Nghĩa tiếng Việt LBM.DL-DLS Liên môn Dược lý-Dược lâm sàng g Gam DIO Diet-induced obesity Chế độ ăn gây béo phì HE Hematoxylin-eosin Hematoxylin-eosin HFD High-fat diet Chế độ ăn giàu chất béo RD Regular diet Chế độ ăn bình thường HDL-c High density lipoprotein Lipoprotein cholesterol tỉ cholesterol trọng cao Low density lipoprotein Lipoprotein cholesterol tỉ cholesterol trọng thấp LDL-c DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Dung môi, hóa chất, thuốc thử sử dụng nghiên cứu 19 Bảng 2.2: Trang thiết bị sử dụng nghiên cứu 20 Bảng 2.3: Khối lượng cao khô Cần tây dùng nghiên cứu 21 Bảng 3.1: Trung bình trọng lượng chuột sau 72 33 Bảng 3.2: Số lần vận động theo chiều ngang môi trường mở chuột BBBBBthử nghiệm sau 72 34 Bảng 3.3: Thời gian giữ thăng chuột thử nghiệm Rota-rod sau BBBBB72 35 Bảng 3.4: Trung bình trọng lượng chuột 14 ngày 35 Bảng 3.5: Trọng lượng trung bình chuột (g) lô thử nghiệm sau BBBBB08 tuần 38 Bảng 3.6: Trung bình trọng lượng thể chuột qua tuần (g) 41 Bảng 3.7: Trọng lượng trung bình chuột lơ so với lơ chứng bệnh BBBBBthời điểm 40 ngày sau dùng thuốc 42 Bảng 3.8: Kết số lipid máu chuột lô sau 40 ngày 45 Bảng 3.9: Chỉ số LDL-cholesterol trung bình lơ so với lô chứng bệnh BBBBBtại thời điểm 40 ngày sau dùng thuốc 46 Bảng 3.10: Chỉ số cholesterol toàn phần trung bình lơ so với lơ chứng BBBBBbệnh thời điểm 40 ngày sau dùng thuốc 47 Bảng 3.11: Chỉ số triglycerid trung bình lơ so với lô chứng bệnh BBBBBthời điểm 40 ngày sau dùng thuốc 48 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Trang Hình 1.1: Cây Cần tây (Apium graveolens L.) Hình 1.2: Cấu trúc thể chuột nhắt trắng theo phần Hình 1.3: Tim chuột Hình 2.1: Cao khơ Cần tây (Apium graveolens L.) 18 Hình 3.1: Đại thể gan chuột 36 Hình 3.2: Vi thể gan chuột vật kính 10X 40X 37 Hình 3.3: Đại thể gan chuột thí nghiệm xây dựng mơ hình 39 Hình 3.4: Vi thể gan chuột thí nghiệm xây dựng mơ hình 40 Hình 3.5: Hình thái chuột sau 40 ngày thử nghiệm 43 Hình 3.6: Hình ảnh đại thể gan chuột 05 lô thử nghiệm 44 Hình 3.7: Vi thể gan chuột lơ sau 06 tuần 44 MỞ ĐẦU Nước ta có nguồn dược liệu phong phú, nhiều thuốc quý có tác dụng tốt lâm sàng chưa nghiên cứu sâu thành phần hóa học, tác dụng dược lý, độc tính, khả dung nạp chế tác dụng Từ ngàn xưa cha ông ta biết sử dụng thuốc để chữa bệnh nâng cao sức đề kháng người Dựa vào thành tựu y học đại, nhà khoa học Việt Nam bước nghiên cứu nhằm làm sáng tỏ chế tác dụng, dược động học, khả dung nạp thuốc để đạt tính an tồn, hiệu thuốc Ngày nay, thuốc từ dược liệu không cịn nằm danh sách thuốc điều trị chính; nhiên, tác dụng không mong muốn độc tính số loại thuốc tổng hợp, thuốc từ dược liệu lần lại đà phát triển Thuốc từ dược liệu chấp nhận dạng bổ sung kết hợp với thuốc Thuốc từ dược liệu cơng nhận Châu Âu Châu Mỹ Doanh thu sản phẩm từ dược liệu dạng thực phẩm ăn kiêng tăng mạnh Mỹ ước tính giá trị thị trường thảo dược 6,4 tỷ đô la, tăng trưởng liên tục qua hàng năm [24] Ở Châu Âu, ước tính có khoảng 18,8% dân số khảo sát sử dụng sản phẩm bổ sung có nguồn gốc thực vật [13] Do phổ biến thuốc thảo dược thị trường toàn cầu, đặc biệt loại thảo dược sử dụng cho mục đích y học, nhiều loại dược liệu ý có Cần tây [38] Cần tây dược liệu mà tồn có tác dụng dược lý [12], [31] Ngồi thân sắc nước uống có tác dụng lợi tiểu, hạ huyết áp [32] hạt Cần tây cịn có tác dụng giảm đau khớp, điều trị bệnh viêm khớp gút [5], [34] tác dụng chống oxy hóa [20], [27] Các thành phần hóa có Cần tây bao gồm bergapten, flavonoid, glycosid, furanocoumarins, urocoumarin, limonen, psoralen, xanthotoxin selinen [29] Đặc biệt thành phần hydro-alcoholic có dược liệu Cần tây cho thấy tác dụng điều hòa lipid máu đường huyết [17], [29] Cần tây dễ canh tác thu sản lượng lớn nước ta số lượng cơng trình nghiên cứu loại Việt Nam hạn chế, đặc biệt nghiên cứu tác dụng giảm béo, giảm lipid máu Theo báo cáo năm 2022 Tổ chức Y tế Thế giới, tỷ lệ tử vong bệnh không nguyên nhân nhiễm trùng ngày tăng cao liên quan chặt chẽ đến tình trạng xơ vữa mạch máu, thừa cân, béo phì [16] việc tìm loại thuốc giảm béo, giảm lipid máu có tính an tồn để sử dụng lâu dài thách thức với y học nước nhà Với mong muốn phát triển hiệu Cần tây góp phần ngăn ngừa bệnh thừa cân, béo phì nhóm nghiên cứu định tiến hành nghiên cứu đề tài: “Khảo sát độc tính cấp nghiên cứu tác dụng giảm béo, giảm lipid máu cao khô Cần tây (Apium graveolens L.) chuột nhắt trắng” với mục tiêu: Khảo sát độc tính cấp đường uống cao khô Cần tây chuột nhắt trắng Xây dựng mơ hình chuột béo phì đánh giá tác dụng giảm béo, giảm lipid máu cao khơ Cần tây chuột béo phì thực nghiệm Phụ lục BỆNH VIỆN TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ KHOA GIẢI PHẪU BỆNH PHIẾU XÉT NGHIỆM MƠ BỆNH HỌC NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Loại mơ Mã số Ngày cố định Quan sát đại thể Người gửi mẫu HÌNH ẢNH MƠ BỆNH HỌC Hoại tử quanh khoảng cửa Thối hóa nội bào & hoại tử khu trú Viêm quanh khoảng cửa Xơ MỨC ĐỘ Khơng có Hoại tử kiểu mối gặm Hoại tử kiểu mối gặm vừa Hoại tử kiểu mối gặm nặng Mối gặm vừa + hoại tử kiểu cầu nối Mối gặm nặng + hoại tử kiểu cầu nối Hoại tử nhiều tiểu thùy Không có Nhẹ Vừa Nặng Khơng có Nhẹ Vừa Nặng Khơng có Giãn rộng khoảng cửa Cầu xơ quanh khoảng cửa Xơ gan rõ ĐIỂM 10 4 TỔNG ĐIỂM KẾT LUẬN: Cần Thơ, ngày…… tháng… năm 2022 Người thực KẾT QUẢ Phụ lục MẪU PHIẾU THU THẬP SỐ LIỆU XÉT NGHIỆM SINH HÓA MÁU Ngày gửi mẫu: Người gửi mẫu: Điện thoại: Đề tài cần thực dịch vụ xét nghiệm sau STT Mã 27833 27819 27851 27799 27878 27879 Diễn giải Định lượng HDL-C (Máu) Định lượng LDL-C (Máu) Định lượng Triglycerid (Máu) Định lượng Cholesterol toàn phần (Máu) Đo hoạt độ ALT (GPT) (Máu) Đo hoạt độ AST (GOT) (Máu) Kết trả theo mẫu phiếu Kết xét nghiệm sinh hóa Bệnh viện trường Đại học Y Dược Cần Thơ Phụ lục MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG Q TRÌNH THỰC NGHIỆM Hình PL6.1: Ni chuột hộp nhựa riêng biệt a) b) Hình PL6.2: Mơ hình môi trường mở (a) trục quay Rota-rod (b) a) b) Hình PL6.3: Phẫu tích gan chuột a) Phẫu tích gan b) Lọ cố định mẫu a) b) Hình PL6.4: Phương pháp lấy máu tim chuột a) Cố định chuột b) Lấy máu từ thất trái ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ VÕ L? ? MAI PHƯƠNG KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH CẤP VÀ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG GIẢM BÉO, GIẢM LIPID MÁU CỦA CAO KHÔ CẦN TÂY (Apium graveolens L. ) TRÊN CHUỘT NHẮT... (Apium graveolens L. ) chuột nhắt trắng? ?? với mục tiêu: Khảo sát độc tính cấp đường uống cao khơ Cần tây chuột nhắt trắng Xây dựng mơ hình chuột béo phì đánh giá tác dụng giảm béo, giảm lipid máu cao. .. hiệu Cần tây góp phần ngăn ngừa bệnh thừa cân, béo phì nhóm nghiên cứu định tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Khảo sát độc tính cấp nghiên cứu tác dụng giảm béo, giảm lipid máu cao khô Cần tây (Apium