Nghiên cứu hàm lượng mycotoxin (aflatoxin) trong bắp tồn trữ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ HĨA HỌC PHÂN TÍCH DƯ LƯỢNG ĐỘC TỐ ĐỀ TÀI : NGHIÊN CỨU HÀM LƯỢNG MYCOTOXIN (AFLATOXIN) TRONG BẮP TỒN TRỮ GVHD: ThS Phùng Võ Cẩm Hồng DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN NHÓM TỔNG QUAN Từ nhiều năm qua, khuynh hướng phát triển chăn nuôi nước ta theo kiểu công nghiệp với vật ni có suất cao thay phương pháp chăn ni cổ truyền, hiệu thấp Vì để nâng cao hiệu suất chăn nuôi, nhà chăn nuôi trọng nhiều đến chất lượng thức ăn CHẤT LƯỢNG THỨC ĂN MYCOTOXIN LÀ GÌ? Mycotoxin hay cịn gọi độc tố nấm mốc, chất độc chuyển hóa thứ cấp sinh vật thuộc giới nấm tạo có khả gây bệnh giết chết động vật Trên số thức ăn gia súc bắp nguồn thực liệu chiếm tỉ lệ lớn phần thức ăn vật nuôi đối tượng dễ bị nhiễm nấm sinh độc tố Theo dõi khả phát triển nấm sinh độc tố hàm lượng Mycotoxin (aflatoxin) sản sinh thời gian bảo quản định kho trữ để đảm bảo chất lượng thức ăn, góp phần bảo vệ sức khỏe vật nuôi nâng cao hiệu suất chăn nuôi Được giúp đỡ Viện Nghiên Cứu Phát Triển Công Nghệ Sinh Học Trường Đại học Cần Thơ, Trung tâm Kỹ thuật Đo lường Chất lượng Khu vực III Công ty Thức ăn gia súc Afiex An Giang, đề tài: ''Nghiên cứu Mycotoxin (aflatoxin) bắp tồn trữ'' tiến hành với mục tiêu:  2.1 Phương tiện thí nghiệm Phịng Thí nghiệm Vi sinh vật, Viện nghiên cứu phát triển Công nghệ sinh học, Trường Đại Học Cần Thơ Phịng thí nghiệm Hóa hữu cơ, Trung tâm Kỹ thuật Đo lường Chất lượng Khu vực III, Biên Hòa  2.1.1 Vật liệu thí nghiệm Thời gian lấy mẫu từ 12/1998 đến 2/1999 trữ đến tuần thứ 12 Mặc khác chuyển phịng thí nghiệm 10 kg bắp trữ bình hút ẩm độ ẩm tương đối khác 72%, 89%  2.1.2 Bố trí thí nghiệm  Bố trí theo thể thức hồn tồn ngẫu nhiên, lặp lại lần cho nghiệm thức  Phân lập định danh loại nấm (Aspergillus, Penicillium, Fusarium)  Cứ tuần lấy mẫu lần:   Xác định ẩm độ hạt mẫu bắp Đếm số lượng bào tử nấm (CFU/g) Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus gam bắp Đếm số lượng bào tử Chiết tách làm mẫu Phân tích hàm lượng aflatoxin  Phân lập định danh loại nấm môi trường thạch Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus (AFPA)  Quan sát cấu tạo sợi nấm, bào tử phân loại theo Samson, Frisvad (1995)  Xác định (X%) phương pháp sấy  Đếm số lượng bào tử môi trường chuyên biệt AFPA  Chiết tách làm mẫu dựa tiêu chuẩn AOAC 1984  Phân tích hàm lượng aflatoxin (B1, B2, G1, G2) phương pháp sắc ký lỏng cao áp Hình ảnh nấm môi trường thạch Kết thảo luậnt thảo luận thả thảo luậno luậnn 3.1 Phân lậnp định danh loại nấm bắpnh danh loại nấm bắpi nấm bắpm bắpp  Ni cấy mẫu bắp thí nghiệm môi trường đặc trưng, phân lập loại nấm môi trường DRYES, AFPA  Trên môi trường AFPA phân lập dịng A.flavus A.parasiticus  Trên mơi trường DRYES, chúng tơi phân lập giống Penicillum dịng Aspergillus  Qua kết phân lập nhận thấy kết phù hợp với phân lập giống nấm bắp miền Nam Việt Nam Các giống chung Aspergillus Penicillum Riêng loại nấm Fusarium khơng phân lập thời gian thí nghiệm phù hợp loại Fusarium spp thường phát triển vùng ôn đới nhiệt đới 3.1 Phân lậnp định danh loại nấm bắpnh danh loại nấm bắpi nấm bắpm bắpp Hình 1,2: Mặt khuẩn Lạc A.flavus ngày môi trường AFPA Hình 3,4: Aspergillus flavus, cấu tạo cuống đính bào tử (x1000) Hình 5,6; mặt khuẩn lạc A.parasiticus ngày mơi trường AFPA Hình 7,8: Aspergillus parasiticus, cấu tạo cuống đính bào tử 3.2 Kết thảo luậnt thảo luận ẩm độ hạt bắp m độ hạt bắp hại nấm bắpt bắpp a nghiệm thức thời điểm khác nhaum thức thời điểm khác nhauc thời điểm khác thời điểm khác nhaui điểm khác nhaum khác  Aspergillus flavus có khả phát triển từ 6-54°C tối ưu 30-35°C Thời điểmi điểmm Nhiệt độ trung bình (⁰C)t độ trung bình (⁰C) trung bình (⁰C)C) Ẩm độ khơng khí trung m độ trung bình (⁰C) khơng khí trung bình tuầnn 27.5 79 tuầnn 27.9 78.1 tuầnn 26.5 80.4 tuầnn 27.5 80.2 12 tuầnn 27.2 78.8 Bảng 1: Nhiệt độ ấm độ khơng khí tương đối kho trữ bắp Thời điểmi điểmm NT1 NT2 NT3 tuầnn 11,799 a 11,799 b 11,799 a tuầnn 12,653 b 11,253 a 13,514 b tuầnn 13,454 c 11,576 ab 14,328 e tuầnn 14,349 d 11,280 a 16,207 e 12 tuầnn 13,457 e 11,167 a 15,182 d Bảng 2: Kết ẩm độ hạt bắp(%) nghiệm thức khác theo thời gian  Ẩm độ hạt nghiệm thức trữ hạt 72% 89% tăng dần theo thời gian trữ có khác biệt có ý nghĩa  Trong suốt trình trữ hạt theo thời gian vi độ ẩm có lúc tăng cao nên ảnh hưởng đến kết số lượng bảo từ nấm A.flavus hàm lượng sau  Riêng mẫu bắp trừ kho vi điều kiện nhiệt độ bên ngồi khả cao, có độ thoáng nên độ ẩm bắp suốt thời gian thi nghiệm khác biệt không ý nghĩa Các kết số lượng bào tử nấm A.flavus hàm lượng aflatoxin it biển động đột ngột, chúng có khuynh hướng tăng khơng nhanh thời điểm trữ bắp 3.3 Kết đếm số lượng bào tử nấm A.flavus A.parasiticus nghiệm thức thời điểm khác Để biết số lượng bào tử nấm sinh aflatoxin thay đổi theo thời điểm trữ bắp, tiến hành đếm số khuẩn Lạc bào tử nấm bắp mọc môi trường AFPA (CFU/g) sau ngày cấy mẫu ... học Cần Thơ, Trung tâm Kỹ thuật Đo lường Chất lượng Khu vực III Công ty Thức ăn gia súc Afiex An Giang, đề tài: '' ''Nghiên cứu Mycotoxin (aflatoxin) bắp tồn trữ'''' tiến hành với mục tiêu:  2.1 Phương... hạt mẫu bắp Đếm số lượng bào tử nấm (CFU/g) Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus gam bắp    Chiết tách làm mẫu, xác định hàm lượng aflatoxin (, , , ) mẫu Khảo sát thí nghiệm trữ bắp thời... số thức ăn gia súc bắp nguồn thực liệu chiếm tỉ lệ lớn phần thức ăn vật nuôi đối tượng dễ bị nhiễm nấm sinh độc tố Theo dõi khả phát triển nấm sinh độc tố hàm lượng Mycotoxin (aflatoxin) sản sinh