Mô hình đánh giá hoạt tính tái tạo da

Mô hình đánh giá hoạt tínhtái tạo da Mô hình đánh giá hoạt tínhtái tạo da Mô hình đánh giá hoạt tínhtái tạo da Mô hình đánh giá hoạt tínhtái tạo da Mô hình đánh giá hoạt tínhtái tạo da Mô hình đánh giá hoạt tínhtái tạo da Mô hình đánh giá hoạt tínhtái tạo da

Môn học: Các phương pháp phát phát triển thuốc MƠ HÌNH ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH TÁI TẠO DA PGS.TS : Nguyễn Thị Thanh Mai Mục lục Tái tạo da gì? 01 02 Mục tiêu đề tài Giới thiệu 03 04 Thực nghiệm Serisin, chitosan, kén lụa 05 Kết đánh giá Tái tạo da gì? • Các q trình tự nhiên thể để phục hồi mô cũ bị hư tổn • Thúc đẩy tăng trưởng tế bào da tự nhiên, khỏe mạnh Cơ chế chữa lành vết thương Giai đoạn cầm máu - → Các tế bào tham gia q trình bao gồm:tiểu cầu,bạch cầu trung tính đại thực bào Bổ sung tế bào viêm, hình thành nguyên bào sợi tế bào nội mô Các tế bào viêm tiểu cầu tiết vết thương làm thực bào Giai đoạn tăng sinh tế bào - Giai đoạn tăng sinh gồm giai đoạn chính: Giai đoạn tái cấu trúc, lên mơ hạt, biểu mơ hóa - Giai đoạn lên mơ hạt: hình thành mạch máu nhờ tăng sinh tế bào nội mô kết hợp với nguyên bào sợi - Qúa trình tái tạo biểu mô: xếp ngoại gian bào nhằm liên kết vết thương Giai đoạn tái tạo - Các thành phần tham gia gồm đại thực bào nguyên bào sợi - Giai đoạn tái tạo hình thành suốt tình tổ chức ngoại gian bào nguyên bào sợi thực - Qúa trình sửa đổi phần trăm colagen I III.sau nguyên bào sợi đươc phân hủy, tổng hợp ngoại gianbaof khỏe khoắn Mục tiêu đề tài Giới thiệu (serisin, chitosan, kén lụa) SERICIN • Protein đại phân tử tự nhiên có nguồn gốc từ tằm • Bombyx mori chiếm 25-30% protein tơ • Thúc đẩy kích hoạt sản xuất collagen tạo phản ứng miễn dịch thấp Giới thiệu (serisin, chitosan, kén lụa) CHITOSAN • Một loại dẫn xuất deacetylated chitin, polymer tự nhiên, không độc hại, không phân hủy sinh học • Kháng khuẩn, có tiềm việc sửa chữa vết thương • Tăng cường di cư bạch cầu đa nhân Giới thiệu (serisin, chitosan, kén lụa) KÉN LỤA • Kén lụa antheraea mylitta có tự nhiên • Có đặc tính chống oxy hóa kháng khuẩn tốt Thực nghiệm 4.1 Cô lập sericin từ kén lụa Kén lụa Cắt nhỏ Rửa với nước 10g/100mL 45 phút – 121 oC Để nguội Lấy phần mặt dung dịch Lọc 0,45 µm Ly tâm 20000 vịng/phút Đơng khơ Bột sericin 4.3 in vitro Biểu gen RNA phân lập sau 21 ngày Các gen cho thành phần ECM nuôi cấy Sử dụng phân lập RNA tổng số (Nucleopore) phiên mã thành cDNA ại ch đ ế u h K Phản ứng chuỗi polymerase Định lượng Theo tiêu chuẩn Bộ tổng hợp cDNA sợi Thermo Scientific Sử dụng primers đặc hiệu Cách ước tính cường độ tương đối so với gen (actin) thơng qua phần mềm Image J 15 4.4 in vivo Được ni lồng theo chu kì sáng - tối 12h Chuột Wistar đực 120 – 135g Test - 2CS:1SS Test - CS Test – control 16 4.4 in vivo Phẫu thuật cấy hydrogels vào da 17 4.4 in vivo Các mô da thu Mẫu Đánh giá Lưu trữ Biểu gen Trong RNA Xử lý Phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược bán định lượng (RT-PCR) Phân lập RNA Phương pháp Trizol Chuẩn bị cDNA  sử dụng tổng hợp cDNA sợi (Thermo Scientific)  đánh giá để biểu cho gen viêm khác PCR  sử dụng gene-specific primers  Gen GAPDH sử dụng để bình thường hóa nghiên cứu biểu  Các mặt cắt ngang hydrogels (được thu thập sau 28 ngày cấy ghép) phân tích kính hiển vi điện tử quét để quan sát xâm nhập tế bào bên hydrogels  18 KẾT QUẢ & ĐÁNH GIÁ 19 ...Mục lục Tái tạo da gì? 01 02 Mục tiêu đề tài Giới thiệu 03 04 Thực nghiệm Serisin, chitosan, kén lụa 05 Kết đánh giá Tái tạo da gì? • Các q trình tự nhiên thể để phục hồi mô cũ bị hư tổn... đoạn lên mơ hạt: hình thành mạch máu nhờ tăng sinh tế bào nội mô kết hợp với nguyên bào sợi - Qúa trình tái tạo biểu mơ: xếp ngoại gian bào nhằm liên kết vết thương Giai đoạn tái tạo - Các thành... 2CS:1SS Test - CS Test – control 16 4.4 in vivo Phẫu thuật cấy hydrogels vào da 17 4.4 in vivo Các mô da thu Mẫu Đánh giá Lưu trữ Biểu gen Trong RNA Xử lý Phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược