1 Lời nói đầu Theo chương trình đào tạo của trường Đại học An Giang thì sinh viên năm thứ 4 ngành công nghệ sinh học, khoa Nông nghiệp – Tài nguyên thiên nhiên có chuyến thực tập cơ sở Nhằm mu[.]
Lời nói đầu Theo chương trình đào tạo trường Đại học An Giang thì sinh viên năm thứ ngành công nghệ sinh học, khoa Nông nghiệp – Tài nguyên thiên nhiên có chuyến thực tập sở Nhằm mục đích giúp sinh viên có thể hiểu rõ về những ứng dụng của công nghệ sinh học đời sống thực tiễn, nắm vững số kiến thức học Đồng thời giúp cho sinh viên làm quen với mơi trường làm việc, để thích nghi tốt với môi trường làm việc sau Tôi thực tập sở Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa Học Công Nghệ Thời gian thực tập từ 25/01/2010 – 28/02/2010 Được giúp đỡ dạy tận tình anh chị phịng phân tích thí nghiệm giúp tơi nắm vững thao tác kỹ thuật tạo meo giống nấm, hiểu rõ lý thuyết học, học hỏi nhiều kinh nghiệm từ anh chị nhiều kiến thức bổ ích khác Tơi xin chân thành cám ơn nhà trường, khoa, đặc biệt thầy cô môn, giáo viên hướng dẫn, anh chị trung tâm tạo đủ điều kiện giúp tơi hồn thành chuyến thực tập sở thời gian qua Chương Giới thiệu chung 1.1 Giới thiệu Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa Học Công Nghệ Địa chỉ: 17 Lê Lai, phường Mỹ Bình, thành phố Long Xuyên, An Giang Điện thoại: (076) 954306 – 954304 Fax: (076) 954305 Trung tâm Ứng dụng chuyển giao Khoa Học Công Nghệ tỉnh An Giang thành lập theo định số 5805/QĐ.UB.TC ngày 25/7/1997 Ủy ban nhân dân tỉnh An Giang Nay Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa học Công nghệ hoạt động với chức nhiệm vụ chủ yếu sau: - Nghiên cứu ứng dụng, chuyển giao sản xuất thử nghiệm lĩnh vực khoa học công nghệ - Thực dịch vụ khoa học công nghệ môi trường: + Lập báo cáo đánh giá tác động môi trường + Tư vấn giám sát môi trường; thiết kế, lắp đặc hệ thống xứ lý nước thải, khí thải, nước sinh hoạt + Phân tích mẫu tiêu mơi trường (nước, khơng khí) + Tư vấn lắp đặt hệ thống thu lôi chống sét + Tư vấn sở hữu công nghệ ISO 9000 + Đánh giá công nghệ chuyển giao công nghệ + Cung ứng loại giống kỹ thuật cấy mơ + Cung ứng hóa chất, vật tư, thiết bị phục vụ họat động khoa học công nghệ môi trường + Đào tạo nghiệp vụ quản lí khoa học cơng nghệ mơi trường + Sản xuất kinh doanh: sản phảm, thiết bị phục vụ nhu cầu sản xuất, sinh hoạt bảo vệ mơi trường từ nhựa Composite bình lọc nước uống (nến lọc làm từ nguyên liệu Diatomite), ngọc thạch thất sơn, gốm mỹ nghệ, gốm đen, gốm đỏ, chế phẩm sinh học EM, cung cấp meo giống, bịch phơi nấm mèo bào ngư, bột xử lí nước sinh hoạt Hình 1: Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa học Công nghệ 1.2 Đặt vấn đề Nấm ăn thực phẩm giàu chất dinh dưỡng, chứa nhiều protein, axit amin, khống, vitamin…Ngồi ra, nấm ăn dùng để chữa trị số bệnh như: giảm cholesterrol máu, điều hòa huyết áp, thiếu máu, ung thư…, khơng có độc tố.Vì nấm ăn xem loại rau cao cấp, “rau sạch”, sử dụng ngày rộng rãi phổ biến bữa ăn gia đình Ngồi đặc điểm ưu việt nấm ăn dinh dưỡng, việc trồng nấm mang lại hiệu cao kinh tế, hướng phát triển công nghệ sinh học Do vậy, nghề trồng nấm hình thành, phát triển lan rộng khắp tồn cầu từ lâu Nghề trồng nấm trở thành nghề với trình độ ngày cao sản xuất theo qui mô công nghiệp nhiều nước giới Ở Việt Nam, lợi nghề trồng nấm ăn lớn, khai thác hiệu tiềm dồi lao động nông nghiệp, rơm, rạ, nguyên vật liệu nông thơn cơng nghệ sinh học (Trần Đình Đằng, 2007) Tuy nhiên nghề trồng nấm nước ta quan niệm nghề phụ nên phát triển yếu so với nước khác giới Sản xuất chủ yếu loài nấm quen thuộc nấm rơm, nấm mèo, nấm bào ngư…, lồi nấm có giá trị kinh tế chưa trồng phổ biến như: nấm mỡ, nấm hầu thủ, nấm thái dương Vì cần ý đầu tư sở vật chất kỹ thuật, xây dựng qui trình sản xuất nấm nhằm thúc đẩy phát triển nghề trồng nấm nước Nấm rơm lụa bạc loại nấm mới, loài nấm dại, ăn ngon Người ta tìm thấy Trung Quốc số nơi khác giới có Việt Nam Hiện chưa có tài liệu nói rõ qui trình trồng nấm rơm lụa bạc Năm 2002, GS-TS Phạm Thành Hổ nghiên cứu số đặt tính sinh học hệ thống chọn dòng nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina phân lập Việt Nam, đồng thời nghiên cứu nuôi trồng dòng đơn bào tử nấm này, bước đầu ứng dụng vào chọn giống Nấm rơm lụa bạc sống từ vùng ôn đới đến cận nhiệt đới, nấm cho thể bơng gịn thải, mạt cưa, đặt biệt mạt cưa qua sử dụng (mạt cưa sử dụng trồng nấm mèo nấm bào ngư) Từ cho thấy nấm rơm lụa bạc hồn tồn có khả ni trồng nước ta Đề tài “Qui trình sản xuất meo nấm rơm lụa bạc mơi trường lúa” với mục đích khảo sát tốc độ điều kiện lan tơ nấm rơm lụa bạc mơi trường lúa Hồn thiện qui trình sản xuất meo hồn thiện bước đầu qui trình trồng nấm rơm lụa bạc Chương Lược khảo tài liệu 2.1 Sơ lược lịch sử trồng nấm Nấm ăn sử dụng loại thực phẩm ngon cách hai ngàn năm Loài người biết dùng nấm làm thức ăn làm thuốc từ thời hoàng đế La Mã Lúc đầu, nấm thu hái tự nhiên trở thành mối quan tâm người Từ kỉ thứ VI, người ta biết trồng loại nấm để ăn kĩ thuật cịn thơ sơ Người Trung Quốc biết trồng nấm hương cách hai ngàn năm Nhiều tài liệu tham khảo Chang Miles (1987) cho thấy nấm mèo trồng Trung Quốc, nấm kim châm trồng vào khoảng năm 800 - 900 dương lịch, nấm hương, nấm rơm, nấm bạch mộc nhĩ trồng theo thứ tự vào năm 1000, 1700, 1800 (Trần Thị Kim Dung, 2009) Sự đời nghề trồng nấm xem phát sinh Pháp cách ba kỷ Năm 1650, nhận thấy nấm trắng (Agaricus Bisporus) mọc luống bón phân ngựa, người trồng dưa bở Pháp lấy chổ có nấm mọc hịa vào nước, tưới cho luống khác, kết thu nhiều Đến cuối kỷ XVII, nấm trắng trồng để cung cấp cho bữa ăn tiệc vua Louis XIV Nghề trồng nấm phát triển mạnh thời Napoleon sau lan nhanh qua nước khác (Lê Duy Thắng, 2006) Với tiến vài thập kỷ qua, nghề trồng nấm lan nhanh khắp giới mang tính khoa học thật Bảng sau cho thấy người biết nuôi trồng nhiều loại nấm dùng làm thực phẩm dược liệu từ sớm Thời gian lần Loài nấm đầu ni Thời gian lần Lồi nấm cấy Auricularia auricula (nấm mèo) Flammulina velutipes (nấm kim châm) Lentinula edodes (nấm hương) Poria cocos (nấm phục linh) Agaricus bisporus (nấm mỡ) Ganoderma spp (linh chi) Volvariella volvacea (nấm rơm) Tremella fuciformis (nấm ngân nhĩ) Pleurotus ostreatus (bào ngư xám) 600 800 1000 1232 1600 1621 1700 1894 1900 Pleurotus ferulea, Pholiota nameko (trân đầu nuôi cấy Pleurotus eryngii Hericium erinaceus (hầu thủ) Agaricus blazei (thái dương) Trametes vesicolor (vân chi) Morchella spp Lyophyllum ulmarium Lentinus tigrius Giaesiereum incarnatum Tricholoma labayense 1977 1960 1970 1981 1986 1987 1988 1989 1990 Tricholoma 1958 châu) monolicum; 1991 Tricholoma gambosum Bảng 1: Lịch sử nuôi trồng số loại nấm (Huỳnh Kim Hà, 2002) Nhìn chung, cơng việc thăm dị nghiên cứu cách trồng nấm thực phát triển mạnh rộng khắp thập kỉ qua, 20 năm trở lại Lúc đầu, người ta trồng gỗ mục, rơm rạ dần dần, với tiến khoa học kĩ thuật, kĩ thuật vô trùng, người ta bắt đầu nghĩ đến việc sử dụng vật liệu phế thải mùn cưa, bã mía, bơng phế thải… để trồng nấm, đem lại hiệu kinh tế đáng kể 2.2 Tình hình sản xuất nấm giới, Việt Nam An Giang 2.2.1 Tình hình sản xuất nấm giới Vấn đề nghiên cứu sản xuất nấm ăn giới ngày phát triển mạnh mẽ, trở thành ngành công nghiệp thực phẩm thực thụ Các nước giới tập trung nghiên cứu sản xuất nấm mỡ, nấm hương, nấm sò, nấm rơm chủ yếu Khu vực Bắc Mỹ châu Âu trồng nấm theo phương pháp công nghiệp lớn giới hóa tồn nên suất sản lượng cao Từ khâu xử lý nguyên liệu đến thu hái chế biến máy móc thực Năng suất nấm trung bình đạt từ 40 – 60% so với nguyên liệu ban đầu (nấm mỡ) Năm 1983 Pháp sản xuất 200.000 nấm mỡ tươi, cần 6000 người (Đinh Xuân Linh ctv, 2008) Các nơi khu vực châu Á (Nhật Bản, vùng lãnh thổ Đài Loan, Hàn Quốc, Trung Quốc…) triển khai sản xuất nấm theo mơ hình trang trại vừa nhỏ, cịn mang tính chất thủ cơng, suất khơng cao sản xuất gia đình, trang trại với số đông nên tổng sản lượng lớn Một số loại nấm ăn trồng phổ biến nấm mỡ, nấm hương, nấm rơm, mộc nhĩ Sản xuất nấm mỡ, nấm hương Trung Quốc lớn giới Năm 1990, tổng sản lượng nấm ăn toàn giới 3763000 tấn, nấm mỡ 1424000 tấn, nấm hương 393000 Năm 1994, tổng sản lượng nấm giới lên 4909000 tấn, nấm mỡ 1846000 (37,6%), nấm hương 826200 (16,8%), nấm rơm 798800 (6,1%), nấm kim vàng 229800 (4,7%), mộc nhĩ trắng 156200 (3,2%), nấm chân 54800 (1,1%), nấm trơn 27000 (0,6%), nấm hoa xám 14200 (0,3%), loại nấm khác 238800 (4,8%) (Nguyễn Hữu Đống ctv, 2005) So sánh năm 1994 với 1990 nấm mỡ, nấm hương, nấm rơm, nấm kim vàng, nấm hoa xám tăng mạnh Các nước sản xuất nấm chủ yếu năm 1994 là: Trung Quốc 2850000 (trong vùng lãnh thổ Đài Loan 71800 tấn), chiếm 53,79% tổng sản lượng, Hoa Kỳ 393400 (7,61%), Nhật Bản 360100 (7,34%), Pháp 185000 tấn, Hà Lan 88500 tấn, Italia 71000 tấn, Canada 46000 tấn, Anh 28500 tấn, Idonesia 118800 tấn, Hàn Quốc 92000 Sản lượng nấm nước chủ yếu nấm mỡ, cịn nấm hương Trung Quốc, Nhật Bản Hàn Quốc sản xuất (Nguyễn Hữu Đống ctv, 2005) Đến năm 2005 tổng sản lượng nấm giới đạt khoảng 20 triệu Riêng Trung Quốc chiếm sản lượng 50% so với toàn giới Tốc độ tăng trưởng sản lượng nấm năm sau cao năm trước 5% (Nguyễn Hữu Đống ctv, 2005) Nhìn chung nghề trồng nấm phát triển đáng kể rộng khắp, 20 năm gần 2.2.2 Tình hình sản xuất nấm ăn Việt Nam Ở Việt Nam, nấm ăn biết từ lâu Tuy nhiên, 10 năm trở lại đây, trồng nấm xem nghề mang lại hiệu kinh tế Vấn đề nghiên cứu phát triển nấm ăn Việt Nam năm 70 Năm 1984 thành lập Trung Tâm Nghiên cứu Nấm ăn thuộc Đại học Tổng hợp Hà Nội Năm 1985 tổ chức FAO tài trợ Ủy ban nhân dân Thành phố Hà Nội định thành lập Trung tâm Sản xuất Giống nấm Tương Mai Hà Nội (sau đổi tên thành Công ty Sản xuất giống, chế biến xuất Nấm Hà Nội) Năm 1986 tổ chức FAO tài trợ thành lập Xí nghiệp Nấm Thành phố Hồ Chí Minh Các đơn vị tham gia sản xuất xuất nhập nấm như: Tổng Công ty Rau (Vegetexco), Tổng Công ty Xuất nhập máy (Technoimport), Unimex Hà Nội, Liên hiệp xí nghiệp thực phẩm vi sinh Hà Nội (Công ty Nấm Hà Nội), Xí nghiệp Nấm Thành phố Hồ Chí Minh, Công ty liên doanh chế biến thực phẩm Meko (Cần Thơ)… Năm 1991 – 1993 Bộ Khoa học – Công nghệ môi trường triển khai dự án sản xuất nấm theo công nghệ Đài Loan (Nguyễn Hữu Đống ctv, 2005) Tổng sản lượng loại nấm ni trồng năm qua tỉnh phía Bắc chủ yếu tiêu thụ dạng tươi, sấy khô, muối Năm 1988 sản lượng nấm đạt khoảng 30 tấn, tới năm 1993 sản lượng nấm lên tới khoảng 250 Nhưng đến năm 1995 sản lượng nấm khoảng 50 tấn, việc tổ chức sản xuất nấm đơn vị chuyên doanh nấm nhiều yếu kém, thiết bị , công nghệ trồng nấm nhập nước ngồi khơng phù hợp với Việt Nam điều kiện tự nhiên, kinh tế, xã hội nhiều nguyên nhân khác Từ năm 1997 sản lượng nấm tăng lên lại khoảng 120 tấn, đến năm 2005 sản lượng nấm tăng lên tới khoảng 50000 (Nguyễn Hữu Đống ctv, 2005) Các loại nấm trồng nhiều tỉnh phía bắc là: nấm sò, nấm mỡ, nấm rơm, mộc nhĩ, linh chi, Trân châu nấm hương Ở tỉnh phía Nam đồng sông Cửu Long nghề trồng nấm phát triển nhanh Sản lượng tăng theo cấp số nhân: năm 1990 đạt vài tấn/năm đến đạt 100000 tấn/năm Trồng chủ yếu nấm rơm, nấm mèo 2.2.3 Tình hình sản xuất nấm An Giang Loại nấm trồng phổ biến tronh tỉnh An Giang nấm rơm, An Giang tỉnh có diện tích trồng lúa lớn nên nguồn nguyên liệu rơm rạ dồi Nấm rơm Việt Nam bắt đầu xuất từ cuối năm 80 kỷ trước, sản lượng ban đầu 2.500 tấn/năm Đến năm 2002 xuất tăng lên 40.000 tấn, đạt kim ngạch 40 triệu USD Hiện nhu cầu tiêu dùng giới cần 20 triệu nấm/năm, tốc độ tăng 3,5% Thị trường tiêu thụ cao Mỹ, Nhật, Đài Loan nước EU Dự kiến vào năm 2010 nước ta có sản lượng triệu nấm loại với mức tổng doanh thu 7.000 tỉ đồng, nấm chế biến XK chiếm 50% kim ngạch khoảng 200 triệu USD/năm (Theo báo nông nghiệp, 2009) Tỉnh An Giang xây dựng đề án “Phát triển nghề trồng nấm rơm phương án hỗ trợ tín dụng phát triển trồng nấm rơm giai đoạn 2006 – 2010 tỉnh An Giang” Năm 2006, Chi cục Hợp tác xã Phát triển nông thôn tỉnh doanh nghiệp đầu tư xây dựng 11 sở sơ chế tiêu thụ nấm Diện tích trồng nấm rơm tỉnh năm 2006 tăng nhanh, đạt 914 ha; tăng gấp lần so năm 2005, suất bình quân đạt 11,50 tấn/ha, sản lượng thu 10.509 Giá bán nấm tươi bình quân 8.000 đồng/kg, đạt giá trị sản xuất gần 84 tỷ đồng, lợi nhuận thu 50,4 tỷ đồng, giải việc làm thường xuyên cho gần 7.000 lao động 45.000 lao động theo thời vụ Năm 2007, An Giang có kế hoạch tiếp tục mở rộng diện tích sản xuất nấm rơm 4.500 ha, tăng lần so năm 2006 Tính đến cuối năm 2009, tồn tỉnh có 3.651 tăng 539 so với năm 2008 đạt 73,02% kế hoạch tỉnh, sản lượng thu 47.398 nấm tươi, đạt giá trị sản xuất gần 710 tỷ đồng, lợi nhuận thu bình quân 426 tỷ đồng (cao gần lần so với trồng lúa), theo chuyên ngành tính tốn việc trồng 1000 nấm tương đương 10.000 trồng lúa Mặt khác việc trồng nấm rơm giải việc làm thường xuyên cho 13.315 lao động 178.050 lao động theo thời vụ năm 2009 Để đạt kết trên, ngành nông nghiệp ngành có liên quan mở 72 lớp tập huấn kỹ thuật trồng nấm rơm, tổ chức 21 điểm trình diễn, tổ chức 53 buổi hội thảo với 2.700 lượt người tham dự; thực 14 lần thời phát động trồng nấm rơm, 04 phóng số việc cần lưu ý nuôi trồng chăm sóc nấm rơm; xây dựng 16 sở chế biến tiêu thụ nấm Thành lập 93 tổ sản xuất nấm rơm (tính đến năm 2009), cho tổ vay vốn gần tỷ đồng Bên cạnh nấm rơm, ngành Nông nghiệp tổ chức cho nông dân sản xuất nấm bào ngư 610 ngàn bịch thu lợi nhuận 2,4 tỷ đồng; sản xuất 10 ngàn bịch nấm mèo thu lợi nhuận 30 triệu đồng Trong năm 2010, ngành Nông nghiệp có kế hoạch sản xuất nấm với diện tích 5.000 (tăng gần 1350 so với năm 2009), tổ chức 100 lớp tập huấn trồng nấm rơm có đầy khơng đậy rơm áo, xây dựng 48 điểm trình diễn tổ chức 37 hội thảo 2.3 Tổng quát qui trình sản xuất meo giống nấm Trong sản xuất nấm, meo giống giữ vai trò quan trọng hàng đầu Dù chế biến nguyên liệu tốt, chăm sóc kĩ giống nấm xấu suất khơng cao tệ khơng có nấm mọc Khoa học xác định nấm tai nấm phát triển từ hệ sợi tơ nấm Đống rơm rạ ẩm có nấm mọc có sẵn hệ sợi tơ nấm bào tử nảy mầm tạo hệ sợi tơ Chỗ khơng có hệ sợi tơ bào tử khơng có nấm mọc lên Meo giống nấm sản xuất để cung cấp cho người trồng thực chất hệ sợi tơ nấm chủng nuôi môi trường tự nhiên khử trùng (rơm rạ cắt ngắn, trấu trộn bột bắp, mùn cưa, hạt ngũ cốc…) Trong sản xuất qui mô lớn giống nấm yếu tố định thành bại Meo giống cần đạt yêu cầu sau (Lê Duy Thắng, 2006): - Thuần (không lẫn giống khác) - Không có mầm bệnh (do nhiễm tạp, sâu bệnh…) - Hiệu kinh tế ( suất, khả kháng bệnh, giá trị thương phẩm…) Giống nấm tốt giống nấm có mùi thơm dễ chịu, khơng có mùi chua; khơng già non Sử dụng giống nấm tốt giống ăn kín hết đáy chai (hoặc túi) sau – ngày Muốn để lâu phải bảo quản nhiệt độ lạnh, giống nấm sò, nấm mỡ, nấm hương, nấm Trân châu, linh chi bảo quản nhiệt độ từ – oC, kéo dài 30 – 45 ngày; giống nấm rơm, mộc nhĩ bảo quản nhiệt độ từ 15 – 20oC, kéo dài 15 – 30 ngày (Nguyễn Hữu Đống ctv, 2005) Các nguồn để tạo hệ sợi tơ nấm là: sưu tập giống, giống từ đơn đa bào tử, giống từ mô thịt nấm, giống từ giá thể nấm Mô thịt nấm dùng phổ biến nhất, thao tác dễ làm có đặc tính bị biến dị, hạn chế lẫn nhiễm tạp vi sinh khác Việc phân lập thành công môi trường nuôi cấy mọc loại tơ nấm định làm giống 10 Quy trình sản xuất giống tóm tắt sau: Quả thể Bộ sưu tập giống Giữ giống Bào tử Tơ nấm Giống gốc Môi trường thạch Giống sản xuất (giống thạch) Môi trường hạt: lúa… Giống hạt Môi trường cọng: rơm, khoai mì Giống cọng Mơi trường giá mơi: rơm, trấu, mạt cưa… Meo giống (meo giá mơi) Hình 2: Sơ đồ tóm tắt quy trình sản xuất giống nấm (Lê Duy Thắng, 2006) Môi trường nuôi cấy phải trùng nghiêm ngặt Trong khâu làm giống gồm loại môi trường như: môi trường thạch, hạt, cọng, giá mơi…có đặc điểm sau: - Cung cấp dinh dưỡng cần thiết cho nấm - Không ảnh hưởng đến sinh lý biến dưỡng nấm, pH môi trường, tích luỹ chất độc… - Khơng làm thay đổi đặc tính nấm như: mau già (lão hố), thối hoá… - Dễ thực tiện dụng như: + Giống thạch để quan sát chọn lựa + Meo hạt giúp phân bố nhanh nguồn giống + Meo cọng thao tác nhanh cấy chuyền phát triển tơ + Meo giá môi giúp nấm làm quen với nguyên liệu điều kiện nuôi tự nhiên Môi trường thạch, tùy loại nấm mà dùng môi trường nuôi cấy thích hợp, dùng mơi trường sau: - Môi trường thạch khoai tây (PDA): khoai tây 200g, dextrose 20g, agar 20g, nước cất vừa đủ 1000ml 11 - Môi trường gạo lức: gạo lức 1kg, nước cất vừa đủ Môi trường hạt môi trường xốp với nguyên liệu ngủ cốc - Mơi trường lúa: lúa 1kg, 2g thạch cao, nước cất vừa đủ - Môi trường trấu có bổ sung: 700g trấu, cám 200g, bắp 100g, nước vừa đủ - Môi trường gạo lức: gạo lức 1kg, nước cất vừa đủ Môi trường cọng dạng nhân giống trung gian Môi trường cọng dùng thân khoai mì, thân so đũa, hay thân điên điển - Môi trường điên điển: điên điển chẻ nhỏ, vôi bột vừa đủ, nước vừa đủ - Mơi trường khoai mì: khoai mì chẻ nhỏ, vơi bột vừa đủ, nước vừa đủ Môi trường giá môi dùng rơm, trấu, mạt cưa hay nguyên liệu hỗn hợp dùng để trồng nấm thương phẩm, với mục đích làm cho tơ nấm phát triển quen với nguyên liệu đem trồng tự nhiên Quá trình sản xuất meo giống qua nhiều khâu Từ sưu tập giống đến meo giá môi đưa đến người trồng phải thực nhiều lần cấy chuyền Mỗi lần cấy chuyền số lượng lại tăng lên nên gọi trình nhân giống Trong thao tác trình thực phải đặc biệt ý đền vấn đề vô trùng Đồng thời giai đoạn, thường xuyên kiểm tra giống mọc không bị nhiễm tạp 2.4 Tổng quan nấm rơm lụa bạc 2.4.1 Vị trí phân loại nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina phân loại sau : - Giới tản thực vật : Thallophyta - Ngành nấm : Mycota - Ngành phụ nấm thật : Eumycophyta (Eumycotine) - Lớp đảm khuẩn : Bacidiomycetes - Lớp phụ đồng đảm khuẩn : Homobasidiomycetes (Holobasidiomycetidae) - Bộ nấm tán : Agaricales - Họ : Pluteaceae - Tên khoa học : Volvariella bombicina 12 Hình 3: Nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina (Trần Thị Kim Dung, 2009) 2.4.2 Hình thái nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina loại nấm đa bào, có mũ nấm Mũ nấm màu trắng đơi màu vàng nhạt, đặc biệt trung tâm có vảy sợi nhỏ đẹp, khắp Tai nấm hình dù Khi nấm cịn nhỏ, nấm có hình trứng cụt đầu, sau dần hình chng, nấm già, mũ nấm x thành dạng bán cầu Ở thường có gị phẳng kích thước - 15 cm chiều rộng, chặt thịt dày, mặt mũ dạng sợi thô dường vảy mảnh, chạm vào trở nên nhẵn khô Phiến nấm lúc đầu màu trắng, sau màu hồng thịt, xếp xít nhau, khoảng 1cm chiều rộng (Trần Thị Kim Dung, 2009) Nấm có nón với cuống dễ tách khỏi mũ, phiến rời, bào tử màu hồng Cuống nấm màu trắng, nhẵn, trơ trụi, khỏe, đặc, thót dần phía trên, kích thước 8-15cm x 1-1,5cm, gốc bao bao gốc màu trắng hay vàng, thịt màu trắng mềm dịu thơm ngon, mùi vị mùi củ cải (Trần Thị Kim Dung, 2009) Nấm có bao gốc, thể non, bao chung nấm bao phủ toàn nấm Lúc nấm trưởng thành để lại gốc cuống túi nhỏ gọi bao gốc Trên cuống vịng mũ Nấm sinh sản đảm bào tử Bào tử màu hồng, kính hiển vi có màu hồng vàng sáng, hình êlip rộng 8-10 x µm Bụi bào tử màu hồng đỏ Hậu bào tử lớn khoảng 40 - 70 x 15 - 25 µm (Trần Thị Kim Dung, 2009) 13 Hình 4: Bào tử nấm Volvariella bombicina nhìn kính hiển vi (Trần Thị Kim Dung, 2009) Đặc điểm phân bố tự nhiên: volvariella bombicina sống từ vùng ôn đới đến cận nhiệt đới, có quan hệ với nấm rơm thường Nó mọc gỗ rộng chặt hạ, mùn cưa, đặc biệt sồi giẻ Hình 5: Hệ sợi nấm Volvariella bombicina nhìn kính hiển vi (Trần Thị Kim Dung, 2009) 2.4.3 Nhu cầu dinh dưỡng nấm rơm lụa bạc Nấm nuôi trồng loại dị dưỡng lấy thức ăn từ nguồn hữu Nhiều lồi nấm có hệ enzim phân giải tương đối mạnh giúp chúng sử dụng dạng thức ăn phức tạp xellulôzơ, protein, polysaccharit, lignin…Với cấu trúc sợi, tơ nấm len lỏi sâu vào chất (rơm rạ, mạt cưa, gỗ…) rút lấy thức ăn đem ni tồn thể nấm Nguồn cacbon chủ yếu hợp chất xellulôzơ sợi bông, rơm rạ, vải vụn, mạt cưa… Các loại đường glucôzơ, fructôzơ, manitol sucrose cung cấp nguồn cacbon tốt cho phát triển nấm Nhưng với đường ribose, arabinose, xylose, galactose, inulin hệ sợi khơng phát triển Với nấm rơm lụa bạc, xếp vào họ nấm rơm nay, nghiên cứu cho thấy khơng thể sử dụng chất rơm rạ (đây nguồn carbon tốt cho V.volvacea) làm 14 nguồn cacbon cho phát triển Nấm cho thể bơng gịn thải, mạt cưa, đặc biệt MCĐQD(đã sử dụng trồng nấm mèo nấm bào ngư) (Phạm Thành Hổ, 2002) Hệ sợi nấm phát triển môi trường thiếu nitrogen mơi trường đầy đủ nguồn cacbon, khống vitamin Nitrogen chứa hợp chất hữu phức tạp, xem nguồn dinh dưỡng cho phát triển tơ nấm hình thành thể Glutamat, acid aspartic valin giúp cho phát triển hình thành thể cao, cao urê, alanine, arginine Riêng với nấm rơm lụa bạc cần môi trường dinh dưỡng giàu đạm Môi trường agar-lúa mì-ngũ cốc xem mơi trường chất đặc trưng cho phát triển hệ sợi nấm V.bombicina Và sau nhiều nghiên cứu cho thấy môi trường raper thích hợp cho ni dưỡng hệ tơ (Trần Thị Kim Dung, 2009) Trong giai đoạn thể nhu cầu đạm cần thiết cho nấm rơm lụa bạc Các nghiên cứu cho thấy có bổ sung urê 2‰ thể hình thành sớm 2-3 ngày suất cao với lơ khơng bón (Phạm Thành Hổ, 2002) Một số vitamin có tác dụng phát triển nấm p-aminobenzonic acid, ascobic acid, biotin, pyridoxin, rivofolavin, thiamin,… Các chất khống đóng vai trị quan trọng phát triển nấm nói chung bao gồm nguyên tố đa lượng như: P; K; S; Ca; Mg … nguyên tố vi lượng Ma; Zn; Mo; Bo; … dù với hàm lượng nhỏ thiếu phát triển nấm Nhiều nghiên cứu cho thấy thiếu phospho dẫn đến kìm hãm hấp thụ glucogen q trình hơ hấp nấm, thiếu Kali đưa đến kìm hãm trao đổi chất hydratcarbon (Trịnh Tam Kiệt ctv, 1986) 2.4.4 Nhu cầu cho tăng trưởng tơ hình thành thể Nhiệt độ cần thiết cho phát triển tơ nấm từ 15 - 40oC nhiệt độ tối ưu cho giai đoạn ủ tơ 35±2oC Nhiệt độ cần cho hình thành thể 26 - 35 oC tối ưu 35 ± 2oC Sau để tai nấm phát triển tiếp tục, nhiệt độ nên dao động khoảng từ 28 - 35oC Trên khoảng nhiệt độ định cho ủ tơ kết thể Volvariella bombicina Người ta tìm thấy nấm mọc Đà Lạt nghiên cứu nhiệt độ nuôi trồng nấm vùng lạnh chưa biết (Trần Thị Kim Dung, 2009) Nấm tương tự thực vật, lấy thức ăn qua màng tế bào hệ sợi nấm Để vận chuyển thức ăn cần có nước nước chiếm 90 % trọng lượng thể nấm, ẩm độ ban đầu thêm vào nguyên liệu để nuôi tơ cần đạt 70±5 % 15 Khi thể hình thành phát triển ẩm độ khơng khí cần cao 80-95%, ẩm độ xung quanh mô nấm cần đạt 80-90% Đây ẩm độ thích hợp cho việc ni trồng nấm Volvariella volvacea (Trần Thị Kim Dung, 2009) Đối với nấm rơm lụa bạc giá trị ẩm độ thích hợp Đối với nấm rơm lụa bạc (Volvariella bombicina) nấm rơm nói chung ánh sáng quan trọng đến lan tơ hình thành thể Trong tối tơ nấm rơm lụa bạc tăng trưởng tốt ngồi ánh sáng Sự hình thành thể xảy điều kiện chiếu sáng 12/24 với độ sáng 200-300 lux Đây điều kiện ánh sáng tự nhiên ghi nhận phòng nấm Với nấm rơm lụa bạc khoảng pH thích hợp cho lan tơ hình thành thể từ 6,5- 16 Chương Vật liệu phương pháp nghiên cứu 3.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm - Thời gian: từ 25/01/2010 đến 8/02/2010 - Địa điểm: thí nghiệm tiến hành phịng phân tích thí nghiệm Trung tâm ứng dụng tiến Khoa học Công nghệ An Giang 3.2 Vật liệu nghiên cứu 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu Chủng nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina trường Đại học Khoa học Tự nhiên, thành phố Hồ Chí Minh cung cấp dạng tơ ống nghiệm 3.2.2 Dụng cụ, thiết bị Ống nghiệm Cốc 1000 Bình tam giác Nhiệt kế Cân điện Bịch nylon Tủ cấy Que cấy Bếp điện Phểu lọc Một số thiết bị dụng cụ khác cần thiết cho nghiên cứu 3.2.3 Hóa chất Glucose Agar Pepton KH2PO4 K2HPO4 MgSO4.7H2O Nước cất Cám lúa Lúa 17 Vơi bột Các hóa chất nguyên liệu khác 3.3 Phương pháp tiến hành thí nghiệm 3.3.1 Chuẩn bị môi trường dinh dưỡng 3.3.1.1 Môi trường thạch nghiêng (môi trường Chang) - Thành phần: Glucose: 20g Agar: 20g Pepton: 2g KH2PO4: 0,46g K2HPO4: 1g MgSO4.7H2O: 0,5g Nước cất thêm vào vừa đủ lít - Cách pha môi trường: Tất thành phần cho vào cốc lít, khuấy Sau nấu cho tan agar, vừa nấu vừa khuấy Điều chỉnh pH = 6,5 Dùng phễu thuỷ tinh, rót phần 5ml môi trường vào ống nghiệm để làm thạch nghiêng (khoảng 2/3 ống nghiệm), đậy nút đem hấp trùng Môi trường hấp trùng 1atm 30 phút Giữ môi trường ống nghiệm 24 xem có nhiễm hay khơng sử dụng 3.3.1.2 Môi trường lúa - Thành phần: Lúa Nước vôi Vôi bột Cám Nước cất vừa đủ - Cách làm môi trường Lúa ngâm với nước vôi 1% trước nấu Sau thêm nước vừa đủ, nấu lúa vừa nở vớt nước Trộn thêm vơi bột 1%, cám 2% Trộn đều, cho vào bình tam giác 250ml chai bịch PP, làm cổ, nút bơng Mỗi bịch lúa có trọng lượng khoảng 300g Sau đem hấp trùng atm, 30 phút Để mơi trường qua 24 xem có nhiễm hay không sử dụng 18 3.3.2 Tiến hành thí nghiệm Ống giống cấy chuyền qua mơi trường Chang để nhân giống Sau đó, cấy chuyền qua bình tam giác (môi trường lúa), quan sát tốc độ lan tơ tơ nấm bình tam giác Meo giống từ bình tam giác cấy chuyền qua 10 bịch lúa bịch ủ điều kiện tối, bịch ủ điều kiện ánh sáng khuếch tán Nơi ủ tơ phải sạch, thống mát, khơng có ánh sáng chiếu trực tiếp Theo dõi lan tơ, ghi nhận thời gian lan đầy bịch So sánh tốc độ lan tơ bịch tối ánh sáng khuếch tán Quy trình tạo meo nấm rơm lụa bạc: Lúa Ống giống (môi trường thạch) Ống thạch giữ giống Cấy chuyền Cấy chuyền Môi trường Chang Nấu, trộn vôi 1%, cám 2% Cho vào bình tam giác Hấp khử trùng 1atm, 30phút Cấy chuyền Mơi trường hạt (Bình tam giác) Cấy chuyền Đóng bịch PP Hấp khử trùng 1atm, 30phút Mơi trường hạt (Bịch PP) Hình 6: Sơ đồ qui trình tạo meo giống nấm rơm lụa bạc 19 Chương Kết thí nghiệm Giống nấm rơm lụa bạc từ ống giống cấy sang ống thạch (môi trường Chang) lan tơ tốt, thời gian tơ nấm lan đầy ống nghiệm ngày Hình 7: Tơ nấm lan đầy ống nghiệm Giống nấm cấy chuyền sang bình tam giác 250ml (môi trường lúa), ngày sau cấy tơ nấm bắt đầu lan tơ Thời gian tơ nấm lan đầy bình tam giác 10 ngày Hình 8: Bình tam giác cấy chuyền 10 ngày sau cấy Tơ nấm từ bình tam giác cấy chuyền sang bịch (môi trường lúa) sau ngày bắt đầu lan tơ Thời gian lan tơ đầy bịch 10 ngày Hình 9: Các bịch mơi trường lúa (trước cấy) 20 ... như: nấm mỡ, nấm hầu thủ, nấm thái dương Vì cần ý đầu tư sở vật chất kỹ thuật, xây dựng qui trình sản xuất nấm nhằm thúc đẩy phát triển nghề trồng nấm nước Nấm rơm lụa bạc loại nấm mới, loài nấm. .. mèo nấm bào ngư) Từ cho thấy nấm rơm lụa bạc hồn tồn có khả nuôi trồng nước ta Đề tài “Qui trình sản xuất meo nấm rơm lụa bạc mơi trường lúa” với mục đích khảo sát tốc độ điều kiện lan tơ nấm rơm. .. 100 lớp tập huấn trồng nấm rơm có đầy khơng đậy rơm áo, xây dựng 48 điểm trình diễn tổ chức 37 hội thảo 2.3 Tổng quát qui trình sản xuất meo giống nấm Trong sản xuất nấm, meo giống giữ vai trò