Bảo quản tại 20oC CHỈ DÙNG CHO MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Bộ xét nghiệm nhanh thời gian thực PCR 2019 nCOV PowerChekTM Số cat R6900T (50 rxns) Mô tả Bộ xét nghiệm nhanh thời gian thực PCR 2019 nCOV PowerC.PCR 2019nCOV PowerChekTM PCR 2019nCOV PowerChekTM PCR 2019nCOV PowerChekTM PCR 2019nCOV PowerChekTM PCR 2019nCOV PowerChekTM
Bảo quản -20oC !! CHỈ DÙNG CHO MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Bộ xét nghiệm nhanh thời gian thực PCR 2019-nCOV PowerChekTM Số cat R6900T (50 rxns) Mô tả Bộ xét nghiệm nhanh thời gian thực PCR 2019-nCOV PowerChekTM cung cấp giải pháp xét nghiệm nhanh xác coronavirus Vũ Hán, đặc biệt nhắm đến gen E cho beta coravavirus gen RdRp cho 2019-nCoV dịch phế quản, đờm,dịch từ tăm bơng mũi họng tăm bơng vịm họng Thử nghiệm xét nghiệm nhanh PCR 2019-nCoV dựa phương pháp tham chiếu WHO & KCDC thực phân tích in-sillico cho tất sở liệu chuỗi 2019-nCoV đăng ký Bộ xét nghiệm phát sử dụng chuyên biệt cho beta coronavirus 2019nCoV hệ thống bước RT-PCR thời gian thực Chúng cung cấp giải pháp hoàn chỉnh bao gồm mồi lót đầu dị cụ thể, hỗn hợp RT-PCR bước, kiểm sốt khuếch đại dương tính kiểm sốt nội Thành phần xét nghiệm Thành phần Hỗn hợp RT-PCR Mồi lót/Đầu dị (gen E) Mồi lót/Đầu dị (gen RdRp) Kiểm sốt (gen E) Kiểm soát (gen RdRp) Nắp RP P1 P2 C1 C2 (Bảo quản -20oC) Thể tích (µl) 1100 µl 200 µl 200 µl 50 µl 50 µl Giao thức Chúng khuyên tất bước xét nghiệm phải đeo găng tay poly để tránh nguy nhiễm RNase Phân lập RNA Nhà sản xuất khác cung cấp dụng cụ phân lập RNA Dùng phân lập RNA theo hướng dẫn nhà sản xuất * Đề xuất: Bộ tách chiết DNA / RNA virus E0007 PowerPrep ™ Làm tan băng thành phần kit băng Nên sử dụng nước đá đá lạnh xét nghiệm để trì hoạt động enzyme Quay ống xuống trước sử dụng Chuẩn bị hỗn hợp PCR Tổng thể tích phản ứng 20 µl, thể tích mẫu RNA µl Chuẩn bị hỗn hợp phản ứng theo bảng * Kiểm sốt dương tính: Thêm µl dung dịch kiểm soát thay cho RNA mẫu * Kiểm soát âm tính: Thêm µl Nuclease khơng nước thay cho RNA mẫu Thành phần Hỗn hợp RT-PCR Mỗi mồi lót/ đầu dị Bản mẫu RNA Tổng Thể tích (µl) 11 X (kiểm sốt µl) 20 Bảo quản -20oC !! CHỈ DÙNG CHO MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Bộ xét nghiệm nhanh thời gian thực PCR 2019-nCOV PowerChekTM Số cat R6900T (50 rxns) Trộn chất ống phản ứng PCR cách gõ nhẹ tối thiểu lần Nhanh chóng ly tâm ống để loại bỏ bọt khí giọt rơi từ bên nắp Chạy PCR thời gian thực Lập trình dụng cụ theo hướng dẫn nhà sản xuất Tạo chương trình nhiệt độ dụng cụ bạn sau bảng Nhiệt độ (oC) Thời gian Chu kỳ o 50 C 30 phút 95oC 10 phút 95oC 60oC 15 giây phút 40 Phân tích liệu * Đồ thị đường cong huỳnh quang phân tích kênh phát huỳnh quang FAM bảng Fluorophore FAM JOE (VIC HEX) Mục tiêu Gen E – beta coronavirus IC (Kiểm soát nội bộ) Fluorophore FAM JOE (VIC HEX) Mục tiêu Gen RdRp – 2019-nCoV IC (Kiểm soát nội bộ) Diễn giải Tín hiệu coi dương tính, đồ thị đường cong tích lũy huỳnh quang tương ứng vượt ngưỡng Kết chấp nhận hai kiểm soát dương tính âm tính khuếch đại đạt Trường Kiểm sốt hợp dương tính + + + + - Kiểm sốt âm tính - FAM Gen E + + - JOE IC + + + + - +/+/+/- +/+/+/- FAM Gen E + + - JOE IC + + Trường Kiểm soát Kiểm sốt hợp dương tính âm tính + + + - Diễn giải Phát beta coronavirus Không phát beta coronavirus Kết không đúng/ xét nghiệm lại Diễn giải Phát 2019-nCoV Không phát Bảo quản -20oC !! CHỈ DÙNG CHO MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Bộ xét nghiệm nhanh thời gian thực PCR 2019-nCOV PowerChekTM Số cat R6900T (50 rxns) + + - + + - +/+/+/- +/+/+/- 2019-nCoV Kết không đúng/ xét nghiệm lại * Phát kiểm soát khuếch đại nội kênh phát JOE khơng cần thiết cho kết dương tính * Số lượng gen virut cúm cao dẫn đến giảm khơng có tín hiệu kiểm sốt khuếch đại nội ... gian thực PCR 2019-nCOV PowerChekTM Số cat R6900T (50 rxns) Trộn chất ống phản ứng PCR cách gõ nhẹ tối thiểu lần Nhanh chóng ly tâm ống để loại bỏ bọt khí giọt rơi từ bên nắp Chạy PCR thời gian... Phát 2019-nCoV Không phát Bảo quản -20oC !! CHỈ DÙNG CHO MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Bộ xét nghiệm nhanh thời gian thực PCR 2019-nCOV PowerChekTM Số cat R6900T (50 rxns) + + - + + - +/+/+/- +/+/+/- 2019-nCoV. .. Gen E – beta coronavirus IC (Kiểm soát nội bộ) Fluorophore FAM JOE (VIC HEX) Mục tiêu Gen RdRp – 2019-nCoV IC (Kiểm soát nội bộ) Diễn giải Tín hiệu coi dương tính, đồ thị đường cong tích lũy huỳnh