Bài viết Mối tương quan giữa tình trạng HER2 với đặc điểm mô bệnh học ở các trường hợp ung thư vú xâm lấn HER2 2+ nghiên cứu các đặc điểm giải phẫu bệnh và tình trạng biểu hiện thụ thể nội tiết, Ki-67 và HER2 của các trường hợp ung thư vú tại Trường Đại học Y Dược TP. Hồ Chí Minh.
TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 MỐI TƯƠNG QUAN GIỮA TÌNH TRẠNG HER2 VỚI ĐẶC ĐIỂM MƠ BỆNH HỌC Ở CÁC TRƯỜNG HỢP UNG THƯ VÚ XÂM LẤN HER2 2+ Đoàn Thị Phương Thảo1, Lê Hồng Phúc1, Lưu Thị Thu Thảo1, Đặng Hồng Minh1, Bùi Võ Minh Hồng1 TĨM TẮT 39 Đặt vấn đề: Ung thư vú ung thư thường gặp loại ung thư gây tử vong hàng đầu phụ nữ giới Tình trạng HER2 dương tính ghi nhận 20-30% trường hợp ung thư vú có tiên lượng xấu, nghiên cứu nước chưa có nhiều thơng tin nhóm ung thư vú xâm lấn HER2 2+ nên nhóm nghiên cứu tiến hành đánh tương đồng tình trạng HER2 với đặc điểm mô bệnh học khác ung thư vú Mục tiêu: : Chúng nghiên cứu đặc điểm giải phẫu bệnh tình trạng biểu thụ thể nội tiết, Ki-67 HER2 trường hợp ung thư vú Trường Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu cắt ngang mô tả 31 trường hợp ung thư vú xâm lấn HER2 2+ Kết quả: Các trường hợp ung thư vú xâm lấn HER2 2+ ghi nhận độ tuổi mắc bệnh đa số từ 40 đến 69 tuổi Nghiên cứu ghi nhận tương đồng trường hợp HER2 2+: ER với PR (p=0,004) Ki-67 với tình trạng HER2 dương tính (p=0,03); đồng thời ghi nhận trường hợp HER2 dương tính chiếm 19.35% trường hợp ung thư vú HER2 2+ Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Chịu trách nhiệm chính: Lê Hồng Phúc Email: phucle16@outlook.com Ngày nhận bài: 24.10.2022 Ngày phản biện: 20.10.2022 Ngày duyệt bài: 24.10.2022 Kết luận: Nghiên cứu bước đầu cung cấp số thông tin quan trọng đặc điểm trường hợp ung thư vú xâm lấn HER2 2+ Với 31 mẫu thu nhận được, ghi nhận tương đồng tình trạng HER2 dấu ấn Ki-67 Ngồi ra, ghi nhận tương đồng có nhiều báo cáo tình trạng hai thụ thể nội tiết ER PR Từ khóa: Ung thư vú, HER2, HER2 2+, FISH, Real-time PCR, Ki-67 SUMMARY CORRELATION BETWEEN HER2 STATUS AND CLINICOPATHOLOGICAL FEATURES OF HER2 2+ INVASIVE BREAST CANCERS Background: Breast cancer is one of the most common cancers which has high fatality HER2 status accounts for 20-30% of breast cancer cases, it has an unfavorable prognosis but adapts well to targeted therapy agents We analyze the concordance of HER2 status and some clinicopathological features to gain more insight into the HER2 2+ invasive breast cancer Objective: We analyze the clinicopathological features with HER2 status of breast cancer cases from University of Medicine and Pharmacy, HCMC Methods: Cross-sectional descriptive study on 31 HER2 2+ invasive breast cancer Results: The age of the first diagnosis is ranging from 40 to 69 years old Beside the correlation between ER and PR, the correlation 277 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 between HER2 status is significantly associated with Ki-67 cell proliferation index Conclusion: The majority of cases of HER2 2+ invasive breast cancer ranging from 40 to 69 years old With 31 FFPE samples collected, we note the correlation between HER2 status and Ki-67 Moreover, the correlation between ER and PR (p=0,004) which is frequently reported in all HER2 immunochemistry groups of breast cancer has the same result in HER2 2+ invasive breast cancer (p=0.03) Keywords: Breast cancer, HER2, HER2 2+, FISH, Real-time PCR, Ki-67 I MỞ ĐẦU Ung thư vú loại ung thư thường gặp theo thống kể Tổ chức Y ế Thế giới năm 2018 loại ung thư có tần xuất mắc cao nữ giới Các trường hợp ung thư vú ngun phát tiến hành phân tích mơ bệnh học, đánh giá tình trạng thụ thể nội tiết, Ki-67 tình trạng HER2 nhằm thực phân thể bệnh học ung thư vú điều trị theo hướng dẫn Bộ Y tế ban hành vào năm 2020 [1] Bảng Các thể phân tử ung thư vú STT Thể bệnh học Đặc điểm phân định Điều trị đề nghị Thụ thể estrogen (ER) dương tính HER2 âm tính Điều trị nội tiết đơn Ki-67 thấp Lòng ống A phần lớn Thụ thể progesterone (PR) cao trường hợp Xét nghiệm phân tử (nếu có): nguy thấp ER dương tính HER2 âm tính Điều trị nội tiết + hóa Lịng ống B Ki-67 cao trị phần lớn trường - HER2 âm tính PR thấp hợp Xét nghiệm phân tử (nếu có): nguy cao ER dương tính Lịng ống B Hóa trị + kháng HER2 HER2 dương tính - HER2 dương + điều trị nội tiết gần Ki-67 tính tất bệnh nhân PR HER2 dương tính HER2 dương tính Hóa trị + kháng HER2 (khơng lịng ống) ER PR âm tính Bộ ba âm tính (thể ER, PR, HER2 âm tính Hóa trị ống-ductal) Trong dấu ấn trên, tình trạng HER2 hướng dẫn chẩn đốn theo Hiệp hội ung thư lâm sàng Hoa Kỳ Hiệp hội Giải phẫu bệnh Hoa Kỳ (ASCO/CAP) công bố năm 2018 dựa kết hai xét nghiệm hóa mơ miễn dịch (HMMD) lai huỳnh quang chỗ (FISH) [8] 278 TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 Bảng Các tiêu chuẩn kết luận HER2 dương tính theo ASCO/CAP 2018 Hóa mơ miễn dịch HER2 Lai huỳnh quang chỗ (FISH) cặp tín hiệu HER2/CEP17 3+ Bất kỳ HER2/CEP17 < 2+ Tín hiệu gen HER2/tế bào ≥ HER2/CEP17 ≥ Bất kỳ Tín hiệu gen HER2/tế bào ≥ Ung thư vú với HER2 dương tính yếu Các mẫu mô vùi nến (FFPE) tố tiên lượng xấu, tình trạng HER2 lại bệnh nhân ung thư vú chẩn đoán mới, dấu tích cực cho liệu pháp điều trị có kết mơ bệnh học, Bộ mơn Giải trúng đích Phương pháp xác định tình trạng phẫu bệnh, Trường Đại học Y Dược Thành HER2 phổ biến phịng xét phố Hồ Chí Minh từ năm 2016 đến 2021 nghiệm Giải phẫu bệnh hóa mô miễn dịch, Tiêu chuẩn chọn bệnh kỹ thuật thuận tiện, chi phí hợp lý 40 mẫu FFPE có kết hóa mơ miễn cần trang bị kính vi quang học dịch HER2 2+ thường quy Tuy nhiên, kết xét nghiệm Tiêu chuẩn loại trừ bị ảnh hướng nhiều yếu tố chủ Đối với mẫu có kết hóa mơ quan, nên theo ASCO/CAP năm 2018 cần miễn dịch: kết hợp thêm kỹ thuật FISH nhằm khảo sát • Kết chứng khơng đạt chất xác tình trạng HER2 ung thư vú lượng [8] • Có hình ảnh gây nhiễu Các phân nhóm hóa mơ miễn dịch HER2 • Chất nhuộm bắt màu đậm vùng 0-1+ HER2 3+ cho kết tương đồng ống tuyến vú bình thường nhiều với tình trạng khuếch đại gen HER2 Tiêu chuẩn loại trừ mẫu không phù hợp Thông tin đặc điểm mô bệnh học, tình cho FISH: trạng thụ thể nội tiết tình trạng HER2 • Khơng có vùng mơ ung thư lát cắt trường hợp HER2 2+ mơ tả cịn • Đoạn dị CEP17 lên tín hiệu hạn chế nghiên cứu trước • Người phân tích khơng đọc tín đề cập đến tình trạng khuếch đại gen HER2 hiệu hai vùng khối u di ghi nhận kỹ thuật FISH Real• > 25% tín hiệu phát màu yếu time PCR [6] Do đó, nghiên cứu này, • > 10% tín hiệu nằm bào tương, ngồi chúng tơi tiến hành đánh giá mối tương quan nhân tình trạng HER2 đặc điểm mô Phương pháp nghiên cứu bệnh học tập trung vào trường hợp ung Nghiên cứu cắt ngang mô tả hàng loạt ca thư vú có kết hóa mơ miễn dịch HER2 Các bước tiến hành 2+, tình trạng khuếch đại gen HER2 Ghi nhận mô tả mơ bệnh học, tình nghiên cứu đánh giá hai kỹ thuật trạng thụ thể nội tiết, Ki-67 mẫu mô FISH Real-time PCR Kỹ thuật FISH sử dụng hóa chất “HER2 IQFISH pharmDx” ghi nhận số II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU lượng tín hiệu HER2 CEP17 Đối tượng nghiên cứu 20 nhân tế bào, từ tính hai số liệu 279 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 khuyến cáo theo ASCO/CAP 2018, kết sau đối chiếu với Bảng để kết luận tình trạng HER2: • Tỉ lệ HER2/CEP17 • Số lượng trung bình tín hiệu gen HER2 nhân tế bào Kỹ thuật Real-time PCR tiến hành phản ứng Real-time PCR gen mục tiêu HER2 GAST Cặp gen HER2/GAST chứng minh tương đồng với cặp kết HER2/CEP17 FISH [6] Phản ứng PCR chạy hệ thống LightCycler 480 II, sử dụng hóa chất FastStart PCR Master với chu trình nhiệt phản ứng Real-time PCR gồm 95oC – 10 phút, 45 chu kỳ (95oC – 10 giây, 60oC – 30 giây, đọc tín hiệu 60oC) Bảng Thơng tin đoạn mồi Gen Mồi Trình tự mồi (5’-3’) Kênh tín hiệu Mồi xi ATCTGCCTGACATCCACG HER2 Mồi ngược GCAATCTGCATACACCAGTTC FAM Probe AGCTTATGCCCTATGGCT Mồi xuôi TCTGAAGCTTCTTGGAAGCC GAST Mồi ngược CCAGCTGCCTTCGATGA HEX Probe AGATGCACCCTTAGGTACA Kết chu kỳ ngưỡng (Ct) Nghiên cứu Hội đồng đạo đức kênh tín hiệu phân tích tự động với chế nghiên cứu y sinh học Trường Đại độ “Abs Quant/2nd Derivative Max“, chúng học Y Dược TP.HCM xét duyệt thông qua sử dụng công thức 2-∆Ct (công thức số 06/HĐĐĐ-ĐHYD ngày 10/01/2022 Pfaffl) tính tỉ lệ số cặp gen HER2/GAST, kết RHER2/GAST = 2Ct gen III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU chứng GAST– Ct gen HER2 ≥ kết luận Tình trạng HER2 dương tính khuếch đại gen HER2 phân tích theo hướng dẫn ASCO/CAP Đánh giá kết 2018, sử dụng hai kỹ thuật hóa mơ miễn dịch Các biến số: kết hóa mơ miễn dịch, FISH Chúng đồng thời sử dụng kỹ kết FISH, kết Real-time PCR thuật Real-time PCR để so sánh tương Dữ liệu lưu trữ Excel xử lý đồng PCR so với số tiên lượng Stata 14 ung thư vú Y đức Bảng Phân bố nhóm tuổi mắc bệnh HER2 2+ Nhóm tuổi cm 9,68% 66,67% 33,33% Loại mô học: UTBM xâm 28 90,31% 21,43% 25% nhập dạng NST UTBM tiểu thùy 3,23% 0 xâm nhập UTBM thể nhầy 3,23% 0 UTBM thể mặt 3,23% 0 sàng Độ mô học: loại trừ trường hợp UTBM tiểu thùy xâm nhập trường hợp UTBM thể nhầy Độ I 6,9% 0 Độ II 22 75,86% Độ III 17,24% UTBM: Ung thư biểu mô, NST: no special type (không phải loại đặc biệt) Các trường hợp có kích thước khối u từ [7] Ở nhóm khối u có kích thước lớn 2-5 cm chiếm đa số, tương đồng với phân bố cm, tỉ lệ ghi nhận nghiên cứu chung trường hợp ung thư vú 9,68%, tương đồng với số báo cáo nghiên cứu tác giả Nguyễn Phương Thảo nước với tỉ lệ khoảng 10% Xét nhóm Tiên Tác giả đồng thời ghi nhận khác biệt bệnh ung thư vú nước, tỉ lệ phát dân số Ý, tỉ lệ khối u có kích thước nhỏ khối u lớn cm ghi nhận 5% cm chiếm gần 2/3 ca ung thư vú tất trường hợp ung thư vú [7] 281 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 Bảng Mối tương quan đặc điểm mô bệnh học, dấu ấn miễn dịch tình trạng HER2 HER2 dương tính HER2 khuếch đại ER PR Ki-67 ASCO/CAP Real-time PCR 2 2 χ = 2,67 χ = 0,03 χ = 0,49 χ = 5,98 χ2 = 0,49 Kích thước p = 0,26 p = 0,99 p = 0,78 p = 0,05 p = 0,78 2 2 χ = 5,76 χ = 3,01 χ = 4,33 χ = 0,58 χ2 = 4,57 Độ mô học p = 0,06 p = 0,22 p = 0,12 p = 0,75 p = 0,10 Khảo sát tương đồng kích thước khối u độ mô học khối u chưa thấy tương đồng có ý nghĩa thống kê dấu ấn miễn dịch tình trạng HER2 Tác giả Đồn Thị Phương Thảo trước ghi nhận tương quan kich thước khối u với tình trạng HER2 Ki-67, cịn độ mơ học có tương quan với tình trạng HER2 Ki-67 [3] Bảng Đặc điểm dấu ấn miễn dịch kết HER2 HER2 dương tính HER2 khuếch đại STT Mẫu ER PR Ki-67 ASCO/CAP Real-time PCR BC11 + + 5% (-) BC12 + + 40% (+) BC14 + + 20% (+) + BC15 + + 5% (-) BC16 + + 10% (-) BC17 + + 10% (-) BC18 + 30% (+) BC20 + + 50% (+) + + BC21 + + 5% (-) 10 BC22 + + 40% (+) + 11 BC23 + + 10% (-) + 12 BC25 + + 40% (+) 13 BC26 + + 20% (+) + 14 BC27 + + 20% (+) 15 BC31 30% (+) 16 BC32 90% (+) 17 BC33 + + 70% (+) 18 BC34 + + 5% (-) 19 BC36 70% (+) + + 20 BC37 + + 10% (-) 21 BC38 + + 5% (-) 22 BC39 + + 20% (+) + 23 BC41 + + 30% (+) + + 24 BC42 + 5% (-) 25 BC44 + + 20% (+) 282 TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 26 BC45 + 30% (+) + 27 BC46 + 30% (+) + 28 BC47 + 15% (-) 29 BC48 + 20% (+) 30 BC50 + + 3% (-) 31 BC51 + + 30% (+) Tình trạng ER, PR xác định dương tính có kết > 0/8 điểm cắt (cut-off) Ki-67 20% theo khuyến cáo Bộ Y tế [1] Chúng tơi ghi nhận tỉ lệ HER2 dương tính nhóm ung thư vú HER2 2+ thực khảo sát theo tiêu chuẩn ASCO/CAP 2018 Real-time PCR 19,35% 22,58% tập trung bệnh nhân độ tuổi 30-59 Tỉ lệ trường hợp khuếch đại gen HER2 nhóm HER2 2+ trước ghi nhận tác giả Đoàn Thị Phương Thảo 39.8% [4] Bảng Mối tương quan dấu ấn miễn dịch tình trạng HER2 HER2 dương tính HER2 khuếch đại PR Ki-67 ASCO/CAP Real-time PCR 2 χ = 8,12 χ = 2,10 χ = 0,42 χ2 = 0,22 ER p = 0,004 p = 0,15 p = 0,52 p = 0,64 2 χ = 1,45 χ = 0,07 χ = 0,0009 PR p = 0,23 p = 0,80 p = 1,00 χ = 4,70 χ2 = 2,27 Ki-67 p = 0,03 p = 0,132 HER2 dương tính χ2 = 3,20 ASCO/CAP p = 0,07 Nghiên cứu ghi nhận hai tương đề cập nhiều nghiên cứu quan yếu tố mô bệnh học người nước số lượng mẫu HER2 trường hợp ung thư vú HER2 2+ Đầu tiên 2+ báo cáo hạn chế tác tương quan mạnh ER PR giả tập trung đánh giá dấu mô bệnh (p=0.004) ghi nhận thêm học cho tất phân nhóm hóa mơ tương quan dấu ấn Ki-67 tình trạng miễn dịch HER2 (bao gồm 0-1+, 2+ HER2 thực theo hướng dẫn 3+) Các cặp đặc điểm mô bệnh học khác ASCO/CAP 2018 (p = 0.03), nghiên cứu không ghi nhận thêm tương đồng bệnh nhân ung thư vú ngồi Đặc biệt, nhóm ung thư vú HER2 nước ghi nhận tương quan hai 2+, kỹ thuật Real-time PCR khảo sát khuếch cặp tương đồng [5, 7] Sự tương quan đại gen cặp gen HER2/GAST với cặp tình trạng HER2 Ki-67 chưa mồi chưa ghi nhận tương đồng IV BÀN LUẬN Ung thư biểu mô xâm nhập loại đặc biệt (NST) chiếm phần lớn trường hợp ung thư vú HER2 2+ Trong đó, ghi nhận khuếch đại gen HER2 nhóm u độ II độ III với tỉ lệ 75,86% 17,24% trường hợp ung thư biểu mô xâm nhập dạng NST HER2 2+ 283 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 với tình trạng HER2 chẩn đốn theo hướng dẫn ASCO/CAP 2018 Nghiên cứu tác giả Gjerdrum không ghi nhận tương đồng nhóm ung thư vú HER2 2+ lại ghi nhận tương đồng Real-time PCR FISH tất nhóm hóa mơ miễn dịch [6] V KẾT LUẬN Nghiên cứu bước đầu cung cấp số thông tin quan trọng đặc điểm trường hợp ung thư vú xâm lấn HER2 2+ Với 31 mẫu thu nhận được, ghi nhận tương đồng tình trạng HER2 dấu ấn Ki-67 Ngoài ra, ghi nhận tương đồng có nhiều báo cáo tình trạng hai thụ thể nội tiết ER PR Khi ứng dụng kỹ thuật mới, Real-time PCR, vào chẩn đoán khuếch đại gen HER2, nhóm nghiên cứu chưa ghi nhận tương đồng PCR với đặc điểm mô bệnh học khối u nói chung tình trạng HER2 nói riêng nhóm ung thư vú HER2 2+ phân tích theo hướng dẫn ASCO/CAP 2018 Từ đó, cần thêm nhiều đánh giá cải tiến để áp dụng kỹ thuật Real-time PCR thành xét nghiệm thường quy chẩn đốn tình trạng HER2 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (2020) Hướng dẫn chẩn đoán điều trị ung thư vú Đặng Công Thuận, Lê Trọng Lân, Nguyễn Trần Bảo Song, Phan Thị Thu Thủy, Trần Nam Đông, Lê Thị Thu Thảo, Ngơ Cao Sách, Trần Thị Hồng Liên, Võ Thị Hồng Vân, (2018) Nghiên cứu tình trạng HER2 284 mối liên quan với số yếu tố tiên lượng ung thư biểu mô tuyến vú xâm nhập Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế, 8(4), 13-22 10.34071/jmp.2018.4.2 Đoàn Thị Phương Thảo (2012) Nghiên cứu gen HER2 phân nhóm phân tử ung thư vú Luận án tiến sĩ y học, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Đồn Thị Phương Thảo, Hứa Thị Ngọc Hà, Phan Đặng Anh Thư, Nguyễn Thị Hồng Nguyệt, Lý Thanh Thiện, Đặng Hoàng Minh, (2011) So sánh phương pháp hóa mơ miễm dịch lai chỗ huỳnh quang đánh giá HER2 ung thư vú Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 15(4), 174-181 Dang TC (2020) Correlation between HER2 Expression and Clinicopathological Features of Breast Cancer: A Cross- Sectional Study in Vietnam Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, 21(4), 1135-1142 10.31557/apjcp.2020.21.4.1135 Gjerdrum LM (2004) Real-time quantitative PCR of microdissected paraffinembedded breast carcinoma: an alternative method for HER-2/neu analysis J Mol Diagn., 6, 42-51 Nguyen TTP (2022) Comparative Study on Clinicopathological Characteristics of Breast Cancer in Vietnam and Italy 49(9), 204 10.31083/j.ceog4909204 Wolff AC (2018) Human Epidermal Growth Factor Receptor Testing in Breast Cancer Journal of Clinical Oncology and Archives of Pathology & Laboratory Medicine, 142, 1364-1382 ... 3+) Các cặp đặc điểm mô bệnh học khác ASCO/CAP 2018 (p = 0.03), nghiên cứu không ghi nhận thêm tương đồng bệnh nhân ung thư vú ngồi Đặc biệt, nhóm ung thư vú HER2 nước ghi nhận tương quan hai 2+, ... tương, ngồi chúng tơi tiến hành đánh giá mối tương quan nhân tình trạng HER2 đặc điểm mô Phương pháp nghiên cứu bệnh học tập trung vào trường hợp ung Nghiên cứu cắt ngang mô tả hàng loạt ca thư. .. lớn trường hợp ung thư vú HER2 2+ Trong đó, ghi nhận khuếch đại gen HER2 nhóm u độ II độ III với tỉ lệ 75,86% 17,24% trường hợp ung thư biểu mô xâm nhập dạng NST HER2 2+ 283 HỘI THẢO KHOA HỌC