Bài viết Nghiên cứu biểu hiện p16 trong ung thư cổ tử cung trình bày khảo sát sự biểu hiện kiểu hình miễn dịch của dấu ấn p16 ở các tuýp mô bệnh học ung thư cổ tử cung và mối liên quan giữa mức độ biểu hiện p16 với các đặc điểm giải phẫu bệnh của loại ung thư này.
TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN P16 TRONG UNG THƯ CỔ TỬ CUNG Dương Thanh Tú1, Thái Anh Tú2, Trương Thị Ngọc Hân3 TÓM TẮT 16 Mục tiêu: Khảo sát biểu kiểu hình miễn dịch dấu ấn p16 tuýp mô bệnh học ung thư cổ tử cung mối liên quan mức độ biểu p16 với đặc điểm giải phẫu bệnh loại ung thư Đối tượng, phương pháp: Phương pháp nghiên cứu: Mô tả cắt ngang Đối tượng nghiên cứu gồm 107 trường hợp chẩn đoán ung thư cổ tử cung Bệnh viện Ung Bướu TP Hồ Chí Minh từ tháng 1/2021 đến tháng 12/2021 Kết quả: Trong 107 trường hợp khảo sát, độ tuổi mắc bệnh từ 24 đến 80 tuổi, tuổi trung bình 51,3 ± 11 tuổi Tỷ lệ carcinơm tế bào gai, carcinôm tuyến, carcinôm gai tuyến, carcinôm thần kinh nội tiết, loại khác 69,2%, 21,5%, 4,7%, 4,7%, 0% Tỷ lệ carcinôm tế bào gai, carcinôm tuyến, carcinôm gai tuyến, carcinôm thần kinh nội tiết biểu dương tính mạnh, lan tỏa với p16 91,9%, 82,6%, 100%, 60% Kiểu hình miễn dịch p16 khơng liên quan với độ tuổi, độ biệt hóa, tình trạng xâm nhập mạch máu, mạch bạch huyết di hạch Bộ môn Mô phôi-Giải Phẫu Bệnh, Trường Đại học Y Dược Hồ Chí Minh, Thành phố Hồ Chí Minh Khoa Giải Phẫu Bệnh, Bệnh viện Ung Bướu TP HCM, Thành phố HCM Khoa Giải Phẫu Bệnh, Bệnh viện Ung Bướu Đà Nẵng, Thành phố Đà Nẵng Chịu trách nhiệm chính: Trương Thị Ngọc Hân Email: ngochanqnybhue@gmail.com Ngày nhận bài: 28.08.2022 Ngày phản biện khoa học: 22.09.2022 Ngày duyệt 24.10.2022 Kết luận: p16 dương tính mạnh, lan tỏa chiếm tỷ lệ cao ung thư cổ tử cung p16 nên thực tất trường hợp carcinôm tế bào gai trường hợp cần thiết carcinôm tuyến cổ tử cung Carcinôm cổ tử cung nên phân loại liên quan HPV (p16 dương mạnh, lan tỏa) hay không liên quan HPV (p16 âm tính dương yếu, khu trú) theo WHO 2020 Từ khoá: Ung thư cổ tử cung, biểu p16 SUMMARY EXPRESSION OF P16 IN CERVICAL CANCER Objective: determine the expression of p16 protein in cervical carcinoma by immunohistochemistry and and to examine the correlation of p16 with clinicopathological features Methods: a cross- sectional study with 107 cases of cervical cancer diagnosed at Pathology Department of Oncology Hospital at Ho Chi Minh city from 01/2021 to 12/2021 Results: In 107 cases, the age range was 24 to 80 (mean 51.3 ± 11) years Histological examination was revealed 69,2% squamous cell carcinoma, 21,5% adenocarcinoma, 4,7% adenosquamous cell carcinoma, 4,7% neuroendocrine carcinoma, 0% others With p16, there were 91,9%, 82,6%, 100%, 60% squamous cell carcinoma, adenocarcinoma, adenosquamous cell carcinoma, neuroendocrine carcinoma of overexpression The immunophenotype of p16 was not related to the age range, differentiation and lymphovascular space invasion, metastasis to lympho node 117 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 Conclusions: p16 over expression is common in cervical cancer Examination of p16 should be performed in all SCCs and selected cases adenocarcinoma of the cervix Cervix carcinoma should be classified into HPV-positive (p16 block positive) and HPV-negative (p16 negative or ambiguity) according to WHO 2020 Keywords: Cervical cancer, p16 expression I ĐẶT VẤN ĐỀ Theo ước tính cơng bố GLOBOCAN, giới có khoảng 604.127 trường hợp ung thư cổ tử cung 341.831 trường hợp tử vong bệnh năm 2020 Hiện nhờ chương trình tiêm phịng vắc xin, sàng lọc ung thư, tỷ lệ ung thư cổ tử cung giảm đáng kể mức cao Hầu hết carcinôm tế bào gai cổ tử cung liên quan với HPV Carcinôm tế bào gai liên quan đến HPV không liên quan HPV phân biệt cách đáng tin cậy dựa sở hình thái học đơn Do đó, nhuộm miễn dịch p16 / xét nghiệm HPV coi tiêu chí thiết yếu, bắt buộc để phân loại Khác với carcinôm tế bào gai, carcinôm tuyến liên quan đến HPV không phụ thuộc vào HPV cổ tử cung phân biệt dựa hình thái đơn P16 / xét nghiệm HPV cần thực đặc điểm hình thái khơng cho phép phân biệt xác P16 khơng dấu ấn đại diện nhiễm HPV mà gen ức chế khối u, điều chỉnh chu kỳ tế bào cách ức chế đặc biệt hoạt động cyclin D/CDK4/6 Biểu P16 cho thấy nhiễm HPV nguy cao (HR-HPV) tích hợp gen virut với gen vật chủ Theo WHO đánh giá biểu p16 118 xem xét nghiệm đáng tin cậy để điểm đưa chiến lược điều trị phù hợp cho carcinôm cổ tử cung tương lai Carcinôm cổ tử cung liên quan HPV (có p16 dương tính mạnh, lan tỏa) tiên lượng tốt carcinôm cổ tử cung không liên quan HPV (p16 âm dương tính yếu khu trú) [3] Do chúng tơi chúng tơi tiến hành “Nghiên cứu biểu p16 ung thư cổ tử cung” phận dân số Việt Nam với mục tiêu: (1) Khảo sát biểu kiểu hình miễn dịch dấu ấn p16 tuýp mô bệnh học ung thư cổ tử cung (2) mối liên quan mức độ biểu p16 với đặc điểm giải phẫu bệnh loại ung thư II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 107 trường hợp chẩn đoán ung thư cổ tử cung bệnh viện Ung Bướu Hồ Chí Minh từ tháng 01/2021 đến 12/2021 Tiêu chuẩn chọn mẫu - U nguyên phát cổ tử cung - Chẩn đoán xác định ung thư cổ tử cung giải phẫu bệnh - Có bệnh phẩm, khối nến, tiêu đủ tiêu chuẩn chẩn đốn phân loại mơ bệnh học theo WHO năm 2020 xếp độ mô học, khối vùi nến cịn mơ u đủ để thực thêm hóa mơ miễn dịch (HMMD)/khảo sát thêm tiêu mô bệnh học Tiêu chuẩn loại trừ - Ca bệnh bị thất lạc thông tin lâm sàng - Bệnh nhân ung thư đa quan 2.2 Phương pháp nghiên cứu Thiết kế nghiên cứu: Mô tả cắt ngang Phương pháp chọn mẫu: Chọn mẫu thuận tiện TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 Các bước tiến hành: Thu thập thơng tin: Tuổi, vị trí tổn thương, kích thước tổn thương từ phiếu gửi mẫu xét nghiệm khoa Giải Phẫu Bệnh Chuẩn bị mẫu mô: Bệnh phẩm sinh thiết phẫu thuật cố định formol 10% đệm trung tính, sau xử lý mơ, vùi nến, nhuộm H&E đọc kính hiển vi quang học Tất mẫu nghiên cứu nhuộm hóa mơ miễn dịch p16 máy nhuộm tự động BenchMark Ventana Kháng thể sử dụng Kháng thể CIN tec® p16 Histology (clone E6H4 Roche) Mô chứng: mẫu mô carcinôm tế bào gai cổ tử cung Đánh giá biểu p16 ung thư biểu mô cổ tử cung theo tiêu chuẩn LAST (Lower Anogenital Squamous Terminology) Sano 1998: + Âm tính (khơng biểu hiện) + Dương tính yếu, rải rác (80% tế bào u dương tính) Tiêu chuẩn đánh giá dương tính liên quan đến HPV p16 phải bắt màu nhân, bào tương lan tỏa 80% tế bào khối u với cường độ bắt màu mạnh [1], [7] 2.3 Xử lý số liệu: Dữ liệu thô quản lý mã hóa phần mềm Microsoft Excel, phiên 16.52 Dữ liệu sau mã hóa xử lý phần mềm thống kê SPSS 26 2.4 Vấn đề y đức: Nghiên cứu Hội đồng Đạo đức Đại học Y Dược TP.HCM xét duyệt thông qua số 69/HĐĐĐ-ĐHYD ngày 19/01/2022 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Đặc điểm mẫu nghiên cứu Nghiên cứu chúng tơi gồm 107 trường hợp, 27 trường hợp mẫu bấm sinh thiết cổ tử cung, 80 mẫu bệnh phẩm phẫu thuật Chúng ghi nhận bệnh nhân nhỏ tuổi 24 tuổi, lớn 80 tuổi tuổi trung bình 51,3 ± 11 tuổi Nhóm tuổi chiếm tỷ lệ cao 40-59 tuổi (59,8%) Kích thước u trung bình 2,9 ± 1,1 cm, nhỏ 0,5cm, lớn 7cm Trong 107 trường hợp nghiên cứu chúng tôi, tỷ lệ nhóm carcinơm tế bào gai cao nhất, chiếm 69,2%, tiếp đến carcinôm tuyến chiếm 21,5%, carcinôm gai tuyến 4,7%, carcinôm thần kinh nội tiết chiếm 4,7%, loại khác 0% Mơ bệnh học u có trường hợp biệt hóa rõ, 63 trường hợp biệt hóa vừa 31 trường hợp biệt hóa Trong 80 mẫu bệnh phẩm phẫu thuật có 10 trường hợp có di hạch, 70 trường hợp khơng có di hạch 3.2 Biểu p16 nhóm mơ học Trong 107 trường hợp nghiên cứu, p16 âm tính trường hợp; dương tính yếu, khu trú trường hợp; dương tính mạnh lan tỏa 96 trường hợp 119 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 Hình Các kiểu hình miễn dịch p16 ung thư cổ tử cung (từ trái qua phải: âm tính; dương tính yếu, khu trú; dương tính mạnh, lan tỏa) Bảng Biểu p16 nhóm carcinơm tế bào gai Gai KSH Gai SH Tổng Loại mô học n % n % n % Âm Tính 0 1,4 1,4 Dương yếu, khu trú 5,4 1,4 6,8 p16 Dương mạnh, lan tỏa 52 70,3 16 21,6 68 91,9 Tổng 56 75,7 18 24,3 74 100 Phép kiểm Fisher p = 0,313 > 0,05 Trong nhóm carcinơm tế bào gai có hóa dương tính mạnh, lan tỏa 80% với trường hợp (1,4%) carcinôm tế bào gai sừng p16 hóa âm tính với p16; trường hợp (5,4%) Tỷ lệ carcinôm tế bào gai không sừng carcinơm tế bào gai khơng sừng hóa hóa (75,7%) gấp lần tỷ lệ carcinơm tế trường hợp (1,4%) carcinôm tế bào gai sừng bào gai sừng hóa (24,3%) Sự khác biệt hóa dương tính yếu, khu trú với p16 68 biểu p16 nhóm carcinơm khơng sừng trường hợp cịn lại (91,9%) gồm carcinơm tế hóa sừng hóa khơng có ý nghĩa thống bào gai sừng hóa tế bào gai không sừng kê (p = 0,313 > 0.05) Bảng Biểu p16 nhóm carcinơm tuyến Tuyến Tuyến chế Tuyến Tuyến Loại mô học Tuyến Tuyến tế thông nhầy đa dạng dạng nội Tổng ruột bào sáng thường tầng dày mạc Âm Tính n 0 0 Dương yếu, n 0 0 1 khu trú p16 Dương mạnh, n 17 1 0 20 lan tỏa Tổng n 17 1 1 23 Phép kiểm Fisher p = 0,011 < 0,05 Có 4,3% carcinơm tuyến âm tính với sáng có trường hợp (4,3%) âm tính p16; 8,7% dương tính yếu, khu trú; 87% trường hợp (4,3%) dương tính mạnh, lan tỏa dương tính mạnh, lan tỏa Carcinôm tế bào với p16 Các trường hợp carcinơm tuyến 120 TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 dạng dày (4,3%) tuyến dạng nội mạc (4,3%) dương tính yếu, khu trú với p16 100% carcinôm tuyến thông thường, carcinôm tuyến chế nhầy đa tầng, carcinơm tuyến dạng ruột dương tính mạnh, lan tỏa với p16 Biểu p16 phân nhóm mơ học carcinơm tuyến khác biệt có ý nghĩa thống kê (p = 0,011 < 0,05) Biểu p16 nhóm carcinơm gai tuyến 100% trường hợp carcinơm gai tuyến dương tính mạnh, lan tỏa với p16 Biểu p16 nhóm carcinôm thần kinh nội tiết 60% Carcinôm thần kinh nội tiết biểu dương tính mạnh, lan tỏa với p16, 20% biểu dương tính yếu, khu trú, 20% âm tính Bảng Phân bố kiểu hình miễn dịch p16 tuổi, độ biệt hóa, tình trạng xâm nhập mạch máu, mạch lympho, di hạch P16 dương tính P16 biểu Đặc điểm yếu, khu trú Giá trị p* mạnh, lan tỏa âm tính 21-40 17 Nhóm tuổi 41-60 62 0,267 > 60 16 < cm 90 Kích thước u 0,044 ≥ cm Độ mô học 59 0,369 28 Không 65 Xâm nhập mạch máu,